成年大鼠脑透析液和血清中褪黑素含量的测定
高效液相色谱法测定人血清中褪黑素的浓度
高效液相色谱法测定人血清中褪黑素的浓度胡世莲;徐维平;王卫东;胡冰;魏伟;张琦;蒋磊【期刊名称】《中国临床保健杂志》【年(卷),期】2005(008)003【摘要】目的用反相高效液相色谱法测定血清中褪黑素的含量.方法采用荧光检测器检测20例自愿者血清中的褪黑素.结果血清中褪黑素最低检测浓度为0.5pg·ml-1,检测限0.2pg,褪黑素在1.0~500pg·ml-1之间呈线性关系,回归方程Y=65744.7x-220.6(r=0.9989,P<0.05),回收率>94.7%,日间、日内变异系数均在10%以下.结论用反相高效液相色谱法测定血清中褪黑素的含量灵敏、快速、准确,为褪黑素在体内代谢等研究提供方法,对临床合理补充外源性褪黑素具有指导性.【总页数】3页(P193-195)【作者】胡世莲;徐维平;王卫东;胡冰;魏伟;张琦;蒋磊【作者单位】安徽省立医院,合肥,230001;安徽省立医院,合肥,230001;安徽省立医院,合肥,230001;安徽省立医院,合肥,230001;安徽医科大学;安徽医科大学;安徽医科大学【正文语种】中文【中图分类】R446.112【相关文献】1.在线二维柱切换-高效液相色谱法测定人血清中多索茶碱浓度 [J], 郑玲利;袁明勇;蒋婷;王峰;张维;陈静2.高效液相色谱法测定人血清中拉莫三嗪血药浓度的方法及拉莫三嗪个体化用药分析 [J], 李萌; 庄星星; 倪受东; 何勇3.反相高效液相色谱法测定人血清中拉莫三嗪的浓度 [J], 王晓娟;袁君;黄庆;赵伍西4.反相高效液相色谱法测定人血清中泊沙康唑的浓度 [J], 计建军;张慧;查丽;费爱丽;王小琴;蔡继明;徐少毅;王长江5.高效液相色谱法测定人血清中替考拉宁的血药浓度及其应用 [J], 王石健;夏修远因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
褪黑素对大鼠肠缺血再灌注损伤保护作用的实验研究(一)
褪黑素对大鼠肠缺血/再灌注损伤保护作用的实验研究(一)【关键词】褪黑素〔摘要〕目的:观察褪黑素对大鼠肠缺血/再灌注损伤的保护作用。
方法:成年雄性SD大鼠60只分为假手术组(10只)、缺血/再灌注组(10只)、缺血/再灌注+褪黑素20 mg/kg组(15只)。
观察肠缺血30 min再灌注60 min后肠黏膜损伤程度,测定血中D乳酸和内毒素水平,并测定小肠组织中丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)水平和诱生型-氧化氮合酶(iNOS)活力。
结果:运用褪黑素组肠黏膜损伤程度轻,MDA、NO、iNOS和D乳酸、内毒素均低于缺血/再灌注组和溶媒组,并呈剂量依赖效应。
肠黏膜损伤程度与MDA、NO及D乳酸呈正相关。
结论:运用褪黑素对大鼠肠缺血/再灌注损伤有保护作用,效应呈剂量依赖性。
这种作用的部分原因可能是褪黑素抑制了NO的过度生成。
〔关键词〕褪黑素;缺血/再灌注;肠屏障;一氧化氮Experimental Study on the Protective Effects of Melatonin on Intestinal Ischemiareperfusion Injury in RatsAbstract:Objective The purpose of this study was to assess the protective effect of melatonin on intestinal ischemiareperfusion (IIR)injury in rats.Methods IIR injury was induced by clamping the superior mesenteric artery in rats for 30 min,follow by relase of the clamp(reperfusion),Melatonin(10 mg/kg,20 mg/kg)or vehicle(control 2% alcohol)was administered twice,5 min prilr to reperfusion and 30 min after the reperfusion period,At 60 min after reperfusion,rats were decapitated.Serum samples were decapitated.Serum samples were taken for hisological examination or the detdrmination ofmalondialdehyde(MDA),nitric oxide(NO),catalase(CAT)and inducible isoform of nitric oxide synthase(iNOS)activity Plasma Dlactate and endotoxin concentrations were measured for the eva lration of intestinal permeability.Results Compared with the shamoperation group,Dlactate,endotoxin and MDA,NO,iNOS were significantly increased,white CAT was decreased in ischemiareperfusionjpared with ischemiareperfusion group and vehicle administered group,these changes were reverted to some degree by treatment with melatonin in a dosedependent menner.Thehistopathologic results were consistent with the biochemical markers.Conclusion Melatotin protects effectively intestine from ischemiareperfusion injury,the reason may inhibit the production of nitric oxide,and this effect is exerted in a dosedep endent manner.Key words:Melatonin;Ischemiareperfusion;Intestine barrier;Nitric oxide肠缺血/再灌注损伤不仅导致肠道局部组织坏死、凋亡,还将引发全身炎性反应失控,对其他器官组织产生广泛影响,严重者会导致多器官功能障碍综合征〔1,2〕。
微透析_高效液相色谱法测定大鼠脑脊液中4种氨基酸的含量测定
本实验采用微透析技术 将透析 探针埋 入动物 的脑中, 透 析探针可除去分子量大 于 30 000 的 分子 [ 4, 5] , 对周围 组织损 伤 很小, 取 样 量少, 并 且 多位 点 多时 点采 样 进行 动态 监 测。 样品不经预处理, 灌流速度稳定在 31 0 L L /m in可使回收率提 高。
雄性 SD大鼠以水合氯醛 ( 400 m g/kg)腹 腔麻醉, 固定在 立体 定 位 仪 上, 将 透 析 套 管 定 位 于 右 侧 纹 状 体 (前 囟 前 01 2 mm, 旁开 315 mm, 皮层下 512 mm )并 用小螺钉 固定。开 启透析灌流系统, 调节恒 流泵控制液流速 310 LL# m in- 1, 透 析探针与人工脑脊液灌 流系统 直接相 接。灌流平 衡 120 m in 后, 每 15 m in收 集 1管, 每管 30 LL, 共收 集 8管透 析液。收 集的透析液立即放 入 - 20 e 冰箱保存。 6 OPA 柱前衍生
的含量。结果: 该体系可在 30 m in内对脑脊液 中 4种氨 基酸实现良 好的分离, 4种 氨基酸在 01625- 10 Lmol/L浓
度范围内与色谱峰面积线性关系良好, 保留时间分别是天门冬氨酸 41392 m in、谷氨酸 51592 m in、牛磺酸 131 625 m in、
C - 氨基丁酸 141833 m in。结论: 本方法准确、灵敏、方便、重复性好, 可用于微透析样品中氨基酸的含量测定。
液相分析采 用梯 度洗 脱, 缩短 分析 时间, 改 善峰 形 和提 高样品的检测灵敏 度。选用 KH 2 PO4 缓 冲液 配制流 动相, 其 浓度为 01 1 m ol/L, 如果浓度 过高会 破坏键 合相的 稳定性, 对 色谱柱的损 害较 大。另外, 缓 冲液 一 定要 用低 浓度 的, 临用 前现 配, 并 用 01 22 Lm 滤 膜 过 滤。水 用 超 纯 水 系 统 去 除 杂质。
褪黑素对糖尿病肾病大鼠肾脏的影响
褪黑素对糖尿病肾病大鼠肾脏的影响刘昌明;邓良超;孙玉锦【期刊名称】《西南军医》【年(卷),期】2018(020)003【摘要】目的探讨褪黑素对大鼠糖尿病肾病肾脏的影响.方法将24只大鼠只随机分为正常(NC)组、糖尿病肾病(DN)组和褪黑素(Mel)组.DN组、Mel组采用一次性腹腔注射STZ30mg/kg,给予高脂饮食;NC组注射等体积的柠檬酸缓冲液,给予普通饲料.禁食6小时后,Mel组、DN组给予褪黑素20mg/kg/d,NC组给予等量含有2%乙醇的生理盐水溶液灌胃,连续6周后,检测FBG;心脏采血检测血BUN、Scr、24hUP;Western blot法检测caspase-3蛋白;肾组织匀浆检测MDA、SOD、GSH-Px;组织切片观察大鼠肾组织形态学变化,TUNEL检测细胞凋亡指数(AI).结果与NC组比较,DN组FBG、BUN、Scr和24hUP显著升高(P<0.05),AI增高(P<0.05);形态学显示肾小管上皮细胞水肿,内皮细胞和系膜细胞增生显著,基底膜增厚,肾小球纤维化,间质纤维组织增生;与DN组比较,Mel组BUN、Scr、24hUP均明显降低(P<0.05),肾组织SOD、GSH-Px活性明显升高(P<0.05),MDA含量明显降低(P<0.05),AI显著降低(P<0.05);形态学显示肾小管水肿较明显减轻,纤维化有明显的改善.结论褪黑素可通过减轻氧化应激损伤和减少肾脏细胞凋亡,对大鼠DN 肾脏具有一定的保护作用.【总页数】4页(P360-363)【作者】刘昌明;邓良超;孙玉锦【作者单位】625000四川雅安,雅安职业技术学院基础医学部;625000四川雅安,雅安职业技术学院基础医学部;625000四川雅安,雅安职业技术学院基础医学部【正文语种】中文【中图分类】R587.1【相关文献】1.褪黑素对糖尿病大鼠肾脏抗氧化物酶的影响 [J], 涂晓文;陈英剑;张爱平;胡成进;王艳侠2.褪黑素和维生素E对早期糖尿病大鼠肾脏氧化应激的影响 [J], 舒毅;钟历勇;石立3.复方积雪草对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用及对血红素加氧酶-1、NADPH氧化酶4蛋白表达的影响 [J], 朱勤;陈洪宇;曾佳丽;李晓虹;王永钧;杨洪涛4.缬沙坦对糖尿病肾病大鼠MEK/ERK/Nrf2通路及肾脏纤维化的影响 [J], 谢飞;周美兰5.醋酸泼尼松对糖尿病肾病模型大鼠肾功能、肾脏炎性反应及AMPK/SIRT1信号通路的影响 [J], 邓九红;郑超;王声遥;王心怡因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
褪黑素抑制实验性老化大鼠海马注射Aβ_(1-40)毒性作用
褪黑素抑制实验性老化大鼠海马注射Aβ_(1-40)毒性作用谢桂琴;孙秀兰;田苏平;陈启盛【期刊名称】《中国神经科学杂志》【年(卷),期】2003(19)3【摘要】目的 :观察褪黑素 (melatonin ,MT)对实验性老年性痴呆大鼠的防治作用。
方法 :连续 6周腹腔内注射D 半乳糖 ,双侧海马内注射Aβ1 4 0 造成AD模型。
以Y 型迷宫、一次性被动回避实验检测大鼠的学习记忆行为 ,测定大脑皮层脂褐素含量以及海马线粒体膜流动性、SOD活性、MDA含量 ,电镜观察海马超微结构。
结果 :褪黑素可显著改善痴呆大鼠的学习记忆障碍 ,明显逆转海马SOD活性、MDA含量及皮层脂褐素含量相对其正常水平的增高 ,阻抑海马神经元的变性及凋亡。
结论 :褪黑素可能通过影响自由基水平对实验性老年性痴呆大鼠有一定的防治作用。
【总页数】4页(P167-170)【关键词】褪黑素;实验;大鼠;Aβ1-40;神经毒性;老年性痴呆;海马内注射;阿尔茨海默病【作者】谢桂琴;孙秀兰;田苏平;陈启盛【作者单位】南京医科大学生理系【正文语种】中文【中图分类】R746.16;R977.1【相关文献】1.凝聚态Aβ1-40海马内注射致AD大鼠在体神经毒性作用 [J], 姜礼红;张一娜;宋芳芳;郭达云2.Aβ1-40脑内注射对大鼠海马Na+-K+-ATP和Ca2+-ATP酶活性的影响及加减地黄饮子的干预作用 [J], 牛英才;谢宁3.红景天素、褪黑素抑制实验性老化大鼠海马注射Aβ1-40毒性作用 [J], 谢桂琴; 孙秀兰; 田苏平; 陈启盛4.Aβ_(1-40)脑内注射对大鼠海马超氧化物歧化酶丙二醛的影响及通络救脑口服液的干预作用 [J], 张晓杰;张春庆;胡南;宫国良;李澎涛5.天麻素对海马内Aβ_(1-40)注射阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆的改善作用 [J], 柳星;汪萌芽因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
电针对慢性应激模型大鼠血清褪黑素含量的影响
t h e c o n t e n t o f t h e me l a t o n i n i n r a t s e r u m.Re s u l t s :c o mp a r e d wi t h c o n t r o l g r o u p, t h e c r o s s i n g n u mb e r s o f mo d e l
d o i : 1 0 . 3 9 6 9 / j . i s s n . 1 0 0 4 - 7 4 5 X . 2 0 1 4 . 0 2 . 0 0 5
【 摘要 】目的 观 察电针针刺百会 、 印堂对慢性应激模型大 鼠血 清中褪黑素 ( MT ) 含量 的影 响 , 探究 电针 抗抑
郁 的作 用 机 制 。 方 法 将 2 4只 S D 雄 性 大 鼠随 机 分 为 空 白对 照 组 、 模 型 对 照 组 与 电针 治 疗 组 , 采 用 慢 性 轻 度 不 可 预 见 性 应 激 和 孤 养 方法 复制 抑 郁 症 模 型 , 通 过 开 野 实 验 观 察 大 鼠的 行 为 学 变 化 , 应 用 酶 联 免疫 吸 附 法 对
d e p r e s s i o n . Me t h o d s :2 4 S D r a t s w e r e r a n d o ml y d i v i d e d i n t o t h r e e g r o u p s : c o n t r o l g r o u p, mo d e l g r o u p, a n d e l e c — t r o a c u p u n c t o r e g r o u p .O p e n - i f l e d t e s t w a s u s e d t o d e t e c t t h e b e h a v i o r s o f r a t s . EL I S A me t h o d wa s u s e d t o d e t e c t
褪黑素对大鼠局灶性脑缺血后NO含量和NOS活性的影响及其机制
褪黑素对大鼠局灶性脑缺血后NO含量和NOS活性的影响及其机制汪丽华;陈金和;吴基良;李立中【期刊名称】《湖北科技学院学报(医学版)》【年(卷),期】2002(016)001【摘要】目的探讨褪黑素对大鼠局灶性脑缺血后NO含量和NOS活性变化的影响及机制.方法用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型.大鼠随机分为假手术组(阴性对照组),缺血组,褪黑素组(给药组)(4mg/kg)),尼莫地平组(阳性药物对照组)(0.2mg/kg),缺血前30分钟舌下静脉给药.持续性缺血30分钟,6小时,24小时后处死动物,测定NO含量和NOS活性(用分光光度法).结果 MCAO后,缺血30分钟NO含量及NOS活性升高,缺血6小时降低,24小时再度升高.与模型组比较,缺血30分钟,褪黑素使NO含量及NOS活性升高,6小时、24小时降低.结论褪黑素对大鼠局灶脑缺血有一定的保护作用,其机制可能与降低脑组织中NO含量和NOS 活性,减轻脑组织自由基的损伤有关.【总页数】3页(P11-13)【作者】汪丽华;陈金和;吴基良;李立中【作者单位】武汉大学医学院,武汉,430071;武汉大学医学院,药理学教研室,武汉,430071;咸宁医学院药理学教研室;咸宁医学院药理学教研室【正文语种】中文【中图分类】R961【相关文献】1.褪黑素对局灶性脑缺血大鼠扩散加权成像及脑组织中Fas、FasL、活性Caspase-3蛋白表达的影响 [J], 王海宇;陈岚芬;王晓莉;闫少珍;牟青杰;赵岩松2."手十二井穴"刺络放血对大鼠局灶性脑缺血后SOD活性和MDA含量的影响 [J], 黄碧兰;余良主;刘寿仙;王帮华3."手十二井穴"刺络放血对大鼠局灶性脑缺血后NO含量和NOS活性的影响 [J], 黄碧兰;程静4.银杏叶提取物(EGB)对大鼠局灶性脑缺血再灌注后SOD活性和MDA含量的影响 [J], 王淑英;王小江;金维哲;佟春玲;李尧5.腺苷预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注后线粒体活性氧含量及线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅲ活性和脑组织总抗氧化能力的影响 [J], 赵欣;裴科阳;谭军因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
褪黑素对大鼠下丘脑_垂体_甲状腺轴相关激素及组织超微结构的影响_宝轶
结果 : 药物干预后第 1、 2、 3 周, 中、 高剂量 M el 干预组血清 T 4 、 FT 3 、 FT 4 、 T SH 水平明显低于对照组及低剂量 M el 干预组 ( P <
0. 01) ; 中 、 高剂量 M el 干预组血清 T 4 水平逐周降低 ( P < 0. 01) ; M el 干预 2 周后 T SH 水平下降 , 第 3 周与前 2 周相比差异有统 计学意义 ( P < 0. 01) 。 M el 干预后第 1 、 2、 3 周 , 高剂量 M el 组 proT RH mRN A 表达 水平低于正 常对照组 ( P < 0. 01) , 并 随给药 时间的延长 , pro T RH mRN A 表达水平呈先降低后升高的趋势 ; 下丘脑 、 垂体 、 甲状腺组织超微结构无明显变化 。 结论: 中 、 高 剂量褪黑素抑制下丘脑 - 垂体 - 甲状腺轴相关激素分泌 , 但对各组织超微结构影响不大 。 [ 关键词 ] 褪黑素 ; 下丘脑 - 垂体 - 甲状腺轴 ; 激素 ; 超微结构 R 584 [ 文献标志码 ] A [ 文章编号 ] 0258- 879X( 2009) 09- 1009- 04 [ 中图分类号 ]
hy po thalamus- pituitary - t hy ro id ax is ( H PT A ) in r ats. Methods: A to tal of 60 male Sprag ue - Daw ley r ats w ere ev enly rando mized into fo ur g roups: contro l, lo w- dose M el( 0. 5 mg - do se M el( 50 mg
3 [ 7]
褪黑素对睡眠剥夺大鼠学习记忆和行为的影响
·学习与记忆·褪黑素对睡眠剥夺大鼠学习记忆和行为的影响吴琼刘芳娥张玉明刘利兵李静贾锋涛王斌作者单位:710032西安,第四军医大学口腔医学系11队(吴琼、张玉明、贾锋涛、王斌),基础部教学实验中心(刘芳娥、刘利兵),预防医学【摘要】目的研究褪黑素对睡眠剥夺(SD )大鼠记忆能力和行为的影响。
方法Sprague-Dawley 大鼠24只随机分为3组;实验1组:SD +褪黑素(5mg /kg ),实验2组:SD +褪黑素(15mg /kg ),对照组:SD +生理盐水。
持续给药15d 后开始睡眠剥夺,SD48h 和72h 后用水迷宫测试大鼠学习记忆能力,SD72h 后用旷场反应箱测试大鼠的行为。
结果SD48h 和72h 后,与对照组[(35.02±17.84)s ,(23.80±18.66)s ]相比,实验1组[(18.38±11.49)s ,(8.47±6.65)s ]与实验2组[(4.93±2.92)s ,(5.40±6.04)s ]大鼠水迷宫测试的逃避潜伏期均显著缩短(P <0.05,P <0.01)。
实验1组,实验2组大鼠在旷场反应箱中运动总距离分别为[(2793.6±893.3)cm ,(2016.5±753.9)cm ];离开边界总距离分别为[(392.3±257.7)cm ,(256.3±296.0)cm ],均明显小于对照组[(3755.0±551.1)cm ,(802.0±271.4)cm ](P <0.05、P <0.01)。
结论褪黑素对SD 所致的大鼠学习记忆障碍有改善作用,且对SD 大鼠中枢兴奋性的提高有抑制作用。
【关键词】睡眠剥夺;褪黑素;学习记忆;行为Effects of melatonin on learning and memory ability and behavior of rats in sleep deprivation WU Qiong ,LIU Fang-e ,ZHANG Yu-ming ,et al .Corp 11,Department of Stomatology ,Fourth Military Medical University ,Xi ’an 710032,China【Abstract 】ObjectiveTo explore the effects of melatonin (MT )on the memory ability and behavior ofrats in sleep deprivation.Methods24rats were randomly divided into 3groups.Experimental group 1:SD +MT (5mg /kg );experimental group 2:SD +MT (15mg /kg );control group :SD +normal saline.Rats were given sleep deprivation after 15days ’continue medication.learning and memory ability in rats were measured by water maze after 48h and 72h SD ,and behavior was measured by “open field test ”after 72h SD.ResultsAfter 48hand 72h SD ,compared with the control group [(35.02±17.84)s ,(23.80±18.66)s ],the escape delitescences in water maze test of experimental group1[(18.38±11.49)s ,(8.47±6.65)s ]and experimental group2[(4.93±2.92)s ,(5.40±6.04)s ]were both decreased (P <0.05,P <0.01).The Total Distances in the “open field ”of the control group ,experimental group1and experimental group2separately are (2793.6±893.3)cm ,(2016.5±753.9)cm ;and the Leave Border Distances separately are (392.3±257.7)cm ,(256.3±296.0)cm ,which were both decreased compared to the control group [(3755.0±551.1)cm ,(802.0±271.4)cm ].Conclusion Me-latonin can improve the learning and memory dysmnesia induced by sleep deprivation ,and the excitability in ratsof sleep deprivation can be inhibited.【Key words 】Sleep deprivation ;Melatonin ;Learning and memory ;Behavior睡眠剥夺(sleep deprivation ,SD )可导致动物学习记忆能力下降,兴奋性增强,并引起行为改变。
褪黑素RIA的建立及肝抑郁症大鼠血浆褪黑素含量的观察
褪黑素RIA的建立及肝抑郁症大鼠血浆褪黑素含量的观察荣扬;李建军;孙阿成;王光凯;马聪;赵忠;郭霞珍;桂宇宁【期刊名称】《放射免疫学杂志》【年(卷),期】2005(18)6【摘要】目的:建立褪黑素的放射免疫分析法,观察肝抑郁症小鼠模型血浆褪黑素含量的变化.方法:利用甲醛将褪黑素与牛甲状腺球蛋白连接后免疫新西兰白兔获得高品质褪黑素抗血清,125Ⅰ标记褪黑素获得标记物,非平衡竞争法建立褪黑素放射免疫分析方法.利用随机组合多项应激方法建立大鼠肝抑郁症模型,并测定其冬夏两季血浆及松果体褪黑素含量.结果:抗血清滴度1:1800,亲和常数1.7×109L/M;125Ⅰ-褪黑素,比放强度55μCi/μg,放化纯度93%,稳定期65d;方法灵敏度5pg/ml,批内CV 6.5%,批间CV 11%;无论冬季还是夏季,生理组与模型组相比大鼠血浆、松果体褪黑素含量均有非常显著性差异(P<0.01),无论生理组还是模型组,冬季和夏季相比大鼠血浆、松果体褪黑素含量均有极显著性差异(P<0.001).结论:褪黑素放免法灵敏度高(5pg/ml)稳定期长(65d),可满足褪黑素研究工作的需求,标记物免疫活性好稳定期长.动物模型测定的结果说明慢性应激肝抑郁症与褪黑素之间确实存在明确的相关性,但慢性应激肝抑郁症的严重程度与季节并无明确的关联.另外,冬夏不同季节内褪黑素含量的显著差异主要是因为光照强度和总量的不同.【总页数】4页(P414-417)【作者】荣扬;李建军;孙阿成;王光凯;马聪;赵忠;郭霞珍;桂宇宁【作者单位】海军总医院;中国中医药大学;海军总医院;中国中医药大学;海军总医院;海军总医院;中国中医药大学;海军总医院【正文语种】中文【中图分类】R74【相关文献】1.褪黑素对大鼠肝微粒体细胞色素P450含量及CYP1A2、CYP2C19活性的影响[J], 刘明远;杨光远;赵锦程;朱秋双;杨玉;李怀荆2.褪黑素UPLC-MS/MS检测方法优化及其对干旱和盐胁迫下葡萄幼苗褪黑素含量的分析 [J], 吴艳迪;焦健;姜建福;张颖;樊秀彩;孙海生;刘崇怀3.外源褪黑素对产蛋后期蛋鸡生产性能、血清指标及体内褪黑素含量的影响 [J], 郝二英; 黄晨轩; 孙浩政; 王德贺; 周荣艳; 黄仁录; 陈辉4.褪黑素测定方法及玉米、水稻种子中褪黑素含量的分析研究 [J], 王金英;江川;李书柯;郑金贵5.电针对创伤痛模型大鼠血浆褪黑素的影响 [J], 徐蕾;薛红;余曙光;唐勇;吴巧凤;徐世珍;王静;毛森因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
ELISA法测定番茄茎叶中的褪黑素含量
ELISA法测定番茄茎叶中的褪黑素含量胡永静;潘光军;龙慧;皮毅;张才鲜;明方艳;谷佳;陈阿敏;须文【摘要】为了研究植物内源褪黑素与植物抗性的关系,以4叶1心的番茄幼苗为试验材料,采用酶联免疫吸附测定(EUSA)法测定正常番茄、鱼腥草提取液和灰霉菌侵染后的番茄茎叶中的褪黑素含量.结果表明:番茄叶片和茎的褪黑素含量分别为14.53、2.80 ng/g,二者之间差异极显著,叶片的褪黑素含量是茎的5.19倍;经鱼腥草提取液预处理和灰霉菌侵染后,番茄叶片的褪黑素含量显著增加,鱼腥草提取液预处理有助于减轻番茄叶片上的灰霉病发病症状,但并不依赖于叶片内源褪黑素含量的增加.可以检出的番茄茎叶中的褪黑素含量高于2.60 ng/g,就灵敏度而言,ELISA 法完全可以用来检测番茄的组织器官的褪黑素含量.【期刊名称】《蔬菜》【年(卷),期】2019(000)002【总页数】5页(P20-24)【关键词】番茄;褪黑素;鱼腥草;灰霉病;ELISA【作者】胡永静;潘光军;龙慧;皮毅;张才鲜;明方艳;谷佳;陈阿敏;须文【作者单位】贵州大学农学院,贵州贵阳550025;贵州大学农学院,贵州贵阳550025;贵州大学农学院,贵州贵阳550025;贵州大学农学院,贵州贵阳550025;贵州大学农学院,贵州贵阳550025;贵州大学农学院,贵州贵阳550025;贵州大学农学院,贵州贵阳550025;贵州大学农学院,贵州贵阳550025;贵州大学农学院,贵州贵阳550025【正文语种】中文20世纪50年代后期,研究人员在牛的松果体中发现并鉴定了色氨酸的衍生物——N-乙酰-5-甲氧基色胺,即褪黑素[1-2]。
进入21世纪以来,研究者对褪黑素在动物体内的作用进行了深入研究。
它是一种非常有效的自由基清除剂[3],能清除包括活性氧、活性氮等在内的自由基过氧化物。
褪黑素一直被认为是动物特有的激素,直到1993年,人们在高等植物中也发现褪黑素的存在[4],随后研究发现其在植物中也是普遍存在的[5]。
老年大鼠松果体中褪黑素含量的测定
老年大鼠松果体中褪黑素含量的测定
朱俊德;龚明
【期刊名称】《贵阳医学院学报》
【年(卷),期】2006(31)6
【摘要】目的: 采用高效液相色谱法(HPLC)测定老年大鼠松果体中褪黑素(MT)含量.方法: ≥24月龄16只健康SD大鼠,雌雄各半,随机分为2组.采用Hypersil ODS2色谱柱,甲醇与水的混合液为流动相,应用HPLC法测定松果体上清液中MT 含量.结果: 松果体MT含量50~1 000 pg之间时,线性关系良好,MT的检测下限为10 pg,回归方程为Y=36.917X+838.36 (r=0.999 8,P<0.05).结论: HPLC法测定大鼠松果体MT含量简便、快速、灵敏度高,准确度与精密度较好,是一种理想的检测方法.
【总页数】3页(P527-529)
【作者】朱俊德;龚明
【作者单位】贵阳医学院,解剖学教研室,贵州,贵阳,550004;贵州益佰制药有限公司,药物研究所,贵州,贵阳,550002
【正文语种】中文
【中图分类】Q576;Q959.837
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定睡眠剥夺大鼠松果体内褪黑素含量 [J], 吴燕川;魏海峰;叶翠飞;何士大
2.老年大鼠松果体中褪黑素含量的测定 [J], 朱俊德;龚明
3.高效液相色谱法测定保健食品中褪黑素含量不确定度的评估 [J], 李珍妮;曾文祥
4.马齿苋中褪黑素的含量测定及其对小鼠睡眠的影响 [J], 瞿星洪;可燕
5.睡眠剥夺大鼠松果体中褪黑素含量测定 [J], 佘晓俊;韦京豫;李慧琴;陈良恩;吴铭权;郭长江
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
褪黑素干预对延缓大鼠运动疲劳发生的作用研究
褪黑素干预对延缓大鼠运动疲劳发生的作用研究赵梦迪;赵文革【期刊名称】《体育科技文献通报》【年(卷),期】2022(30)10【摘要】目的:探究褪黑素在大鼠运动疲劳发生过程中的作用,分析褪黑素抑制运动疲劳发生的机制。
方法:取30只成年雄性SD大鼠,随机分为两组,每组15只,实验组SD大鼠采用含200μg/mL褪黑素的去离子水饲喂21天,对照组采用去离子水饲喂,其余条件均相同。
处理结束后,通过一次性力竭运动模型记录大鼠最终力竭运动时间。
随后,利用高效液相色谱法测定血液样本中去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)和3,4-二羟苯乙酸(DOPAC)的含量。
结果:(1)实验组平均力竭时间为232.39±34.381 min,对照组平均力竭时间为187.17±21.08 min。
(2)实验组去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)含量显著性高于对照组(P<0.01),5-羟色胺(5-HT)含量显著性低于对照组(P<0.01),3,4-二羟苯乙酸(DOPAC)含量两组间变化不显著(P>0.05)。
结论:褪黑素可以延缓大鼠运动疲劳的发生,该过程可能通过褪黑素处理提高去甲肾上腺素、多巴胺的含量,降低5-羟色胺的含量来发挥作用。
【总页数】4页(P262-265)【作者】赵梦迪;赵文革【作者单位】中国传媒大学体育部;北京工商大学体育与艺术教学部【正文语种】中文【中图分类】G804【相关文献】1.不同干预手法作用于足三里穴对运动性疲劳大鼠脑内5-HT的影响2.仙鹤草醇提取物对运动性疲劳大鼠心肌氧化应激性损伤的干预作用3.运动性疲劳大鼠心肌胶原纤维形态结构重塑及大蒜素的干预作用研究4.茶氨酸延缓运动性疲劳的作用研究5.茶氨酸延缓运动性疲劳及其作用机制研究因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
褪黑素调节雄性大鼠脂肪代谢的研究
褪黑素调节雄性大鼠脂肪代谢的研究闫灵敏;杨改青;王林枫;陈宇;朱河水;高腾云;李明【期刊名称】《畜牧兽医学报》【年(卷),期】2017(048)009【摘要】旨在研究褪黑素(Melatonin,MT)对雄性大鼠脂肪代谢的影响及其对不同脂肪代谢酶/因子的作用,初步揭示其调节脂肪代谢的机理.选择20只日龄、体重接近的SD雄性大鼠随机平均分为2组,分别为对照组(ND)和褪黑素处理组(ND+ MT).ND+ MT组除饲喂正常的饲粮外,每天灌服10 mg· kg-1BW的MT溶液.试验60 d后采血,分析血液生化、激素及脂代谢相关指标;试验结束后处死大鼠,摘取肝组织,分离腹部各部位脂肪组织并称重,采集肝组织样品用于基因芯片检测和相关分子分析.结果表明:1)ND+ MT组大鼠肝重、肝指数、大网膜重、大网膜指数、附睾脂肪重显著降低(P<0.05).血清低密度脂蛋白显著降低(P<0.05),高密度脂蛋白、总胆固醇含量下降,极低密度脂蛋白含量升高;肝组织中长链脂肪酸含量显著降低(P <0.05).2)基因芯片和荧光定量PCR检测结果表明,肝组织中脂肪分解相关因子CPT1的mRNA表达显著上调(P<0.05),脂肪分解相关酶ALDH3a2的mRNA表达升高(0.05<P<0.1),脂肪合成相关酶ACSL3、FAS的mRNA表达显著下调(P<0.05).结果提示,MT可显著影响脂肪的代谢,减少内脏脂肪的含量,其机制与相关激素及肝脂肪代谢相关酶(因子)对MT的不同反应有关.%The present study aimed to investigate the effect of melatonin (MT) on lipid metabolism and its effect on lipid metabolism enzymes and factors,and to reveal the mechanism of lipid metabolism in male rats.Twenty SD male rats with similar age and body weight were randomly divided into 2 groups (10 ratsper group),which were control group (normal diet,ND) and MT treated group (normal diet with oral melatonin solution,ND+MT).The MT was administrated at 10 mg · kg-1 BW per day.The experiment lasted for 60 days.At the end of the experiment,blood sample were collected to extract plasma to detect biochemical,hormonal and lipid metabolism related indicators;The rats were sacrificed,the liver and the adipose mass in the abdomen,such as omentum,perirenal fat and epididymal fat was separated and weighed.In additon,liver tissue was sampled for Gene chip and related molecules analysis.The result showed that:1) The liver weight,liver index,omental weight,omental index and epididymal fat weight in ND + MT group were decreased significantly (P<0.05).Low density lipoprotein in serum was significantly decreased (P<0.05),high density lipoprotein and total cholesterol in serum were decreased,while very low density lipoprotein increased.The contents of hepatic long chain fatty acids (LCFA) was significantly decreased (P<0.05).2) Gene chip and fluorescent quantitative PCR result showed that the mRNA expression of lipolysis related factors and enzymes,such as CPT1 (P<0.05) and ALDH3a2 (0.05<P <0.1) in liver tissue were increased,while the mRNA expression of fat synthesis related enzyme,such as ACSL3 and FAS was decreased significantly (P<0.05).MT can greatly affect the lipid metabolism with the reduction of visceral fat,its mechanism is connected with the response of hormones and lipid metabolism related enzymes or factors to MT.【总页数】11页(P1694-1704)【作者】闫灵敏;杨改青;王林枫;陈宇;朱河水;高腾云;李明【作者单位】河南农业大学牧医工程学院,农业部动物生化与营养重点试验室,郑州450002;河南农业大学现代实验技术与管理中心,郑州450002;河南农业大学牧医工程学院,农业部动物生化与营养重点试验室,郑州450002;河南农业大学牧医工程学院,农业部动物生化与营养重点试验室,郑州450002;河南农业大学牧医工程学院,农业部动物生化与营养重点试验室,郑州450002;河南农业大学牧医工程学院,农业部动物生化与营养重点试验室,郑州450002;河南农业大学牧医工程学院,农业部动物生化与营养重点试验室,郑州450002【正文语种】中文【中图分类】S852.2【相关文献】1.脂肪代谢的调节因素及运动对脂肪代谢的影响 [J], 吕志伟;马云霞;孙泽2.褪黑素对大鼠生长及脂肪代谢、分配的影响 [J], 王林枫;柳如意;杨改青;朱河水;王月影;韩立强;贾少丹;杨国宇3.手机电磁辐射对雄性大鼠生殖激素、褪黑素及精液质量的影响 [J], 郭里;吴晓鸣;吴建惠;邬凌峰;何屹4.外源性褪黑素对尼古丁处理雄性大鼠生育能力的影响 [J], 胡皓睿;杨卫民;黄绘;廖明;周晓明5.褪黑素腹腔注射对小鼠胸腺及脑组织褪黑素受体的调节作用 [J], 赵瑛因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
外源性褪黑素对成年高血压大鼠神经发生的影响及其与学习记忆的关系
外源性褪黑素对成年高血压大鼠神经发生的影响及其与学习记忆的关系磨洁琳;郭灵;邓祥发;崔卫刚;蓝玲【期刊名称】《四川解剖学杂志》【年(卷),期】2009(017)004【摘要】目的探讨褪黑素(MT)对成年高血压大鼠脑神经干细胞的影响及其与学习记忆的关系.方法将30只成年健康雄性wistar大鼠随机分为假手术组、肾血管性高血压组及褪黑素治疗组,用Morris水迷宫测定大鼠的学习记忆能力,并用免疫组织化学方法观察侧脑室室管膜下区(SVZ)和齿状回颗粒下区(SGZ)的BrdU阳性细胞数变化.结果高血压大鼠SVZ和SGZ的BrdU细胞数及学习记忆能力均比假手术组明显下降(P<0.01),用MT治疗可使上述指标有所逆转至假手术组水平.结论褪黑素可能具有促进高血压大鼠神经干细胞增殖和提高大鼠学习记忆能力的作用.【总页数】4页(P13-16)【作者】磨洁琳;郭灵;邓祥发;崔卫刚;蓝玲【作者单位】广西医科大学人体解剖学教研室,广西,南宁,530021;广西医科大学人体解剖学教研室,广西,南宁,530021;广西医科大学人体解剖学教研室,广西,南宁,530021;新乡医学院人体解剖学教研室,河南新乡,453003;广西医科大学人体解剖学教研室,广西,南宁,530021【正文语种】中文【中图分类】R741【相关文献】1.母婴早期分离对成年大鼠学习记忆的影响及其神经生物学机制实验研究 [J], 朱永栋;张英博;王宁宁;葛晶;季亚成;戴坤鹏;鲍勇;李双成2.褪黑素对高血压模型大鼠基底前脑和海马细胞及学习记忆的影响 [J], 磨洁琳;郭灵;曾庆堂3.褪黑素对成年大鼠海马神经元络丝蛋白表达的影响 [J], 王澜;王淑莲4.褪黑素替代治疗对去松果体成年大鼠齿状回神经干细胞增殖及学习记忆的影响[J], 林丹;郭灵;曾庆堂;邓祥发;崔卫刚;韦力;磨洁琳;蓝玲5.胎次、性别对成年小鼠海马齿状回神经发生及学习记忆的影响 [J], 丁艳平;邵宝平;董辉;刘知东;赵倩楠因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
褪黑素对成年大鼠海马神经元络丝蛋白表达的影响
褪黑素对成年大鼠海马神经元络丝蛋白表达的影响
王澜;王淑莲
【期刊名称】《贵阳医学院学报》
【年(卷),期】2013(038)006
【摘要】目的:探讨褪黑素对络丝蛋白(reelin)表达的影响.方法:将SD大鼠分为生理盐水对照组和褪黑素组,两组大鼠腹腔分别给予生理盐水或褪黑素后,用Western blot、免疫组织化学以及实时定量PCR的方法检测海马组织中reelin表达.结果:褪黑素组大鼠海马神经细胞胞膜以及细胞外基质中reelin表达与对照组相比明显增加(P<0.05),reelin mRNA的表达量增加(P<0.05),Western blot结果显示给予褪黑素后,大鼠海马reelin蛋白表达增加(P<0.05).结论:褪黑素可能通过增加reelin mRNA的量促进reelin蛋白的表达.
【总页数】3页(P629-631)
【作者】王澜;王淑莲
【作者单位】娄底市中心医院,新生儿科,湖南,娄底,417000;娄底市中心医院,新生儿科,湖南,娄底,417000
【正文语种】中文
【中图分类】R338.24;R34-33
【相关文献】
1.褪黑素对癫痫大鼠海马氧化应激及神经元凋亡的影响 [J], 伍丽娜;甘彦峰;苏炳银
2.褪黑素对卡因酸介导大鼠海马神经元毒性的影响 [J], 韦道祥;陈俊抛;杨卫红
3.褪黑素对癫(癎)大鼠海马神经元凋亡及半胱氨酸蛋白酶-3表达的影响 [J], 张映琦;廖维宏;曾琳
4.抑制脊髓络丝蛋白表达对神经性疼痛成年大鼠疼痛行为的影响研究 [J], 胡洁; 旷昕; 张倩璐; 李欢颜; 阳巧云; 彭良玉
5.反复给予氯胺酮对大鼠海马神经元磷酸化丝切蛋白表达的影响 [J], 葛建岭;朋立超
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
褪黑素对海洛因依赖大鼠NO及SOD水平的影响
褪黑素对海洛因依赖大鼠NO及SOD水平的影响徐贵丽;刘泽源;苏国丽;赵晶【期刊名称】《华西药学杂志》【年(卷),期】1999(14)5【摘要】探讨了褪黑素(melatonin,MT)三个剂量[25、75、125mg/(kg·d)]、美沙酮两个剂量[2、4mg/(kg·d)]及MT长期保护用药等方法,对按剂量递增法形成的海洛因依赖性大鼠血液中的SOD及NO水平的影响。
用药7d组与自然戒断组比较(t检验),MT25、75mg/(kg·d)两组的NO水平明显高于对照组(P<0.05),MT125mg/(kg·d)组则有非常显著的差异(P<0.001),美沙酮组与对照组比较无统计学差异。
以上各组SOD水平与对照组比较均无统计学意义。
MT长期用药组与单用海洛因组比较,其NO、SOD水平均明显升高(P<0.001)。
【总页数】3页(P329-331)【关键词】褪黑素;海洛因依赖;一氧化氮;超氧化物歧化酶【作者】徐贵丽;刘泽源;苏国丽;赵晶【作者单位】成都军区昆明总医院【正文语种】中文【中图分类】R977.1;R595.505【相关文献】1.褪黑素对大鼠脊髓损伤早期MDA、SOD水平的影响 [J], 马玉斐;徐玉生;曹珺;陈香红2.褪黑素对海洛因依赖大鼠淋巴细胞增殖和IL-2产生的影响 [J], 刘泽源;魏伟;徐叔云;杨宇;徐贵丽3.嘌呤核苷酸补偿对海洛因依赖大鼠脑组织中DA和NE水平的影响及其机制 [J], 何海涛;李鸿梅;李昆;崔佳乐;刘剑凯;洪敏4.褪黑素对海洛因依赖大鼠的作用 [J], 刘泽源;徐贵丽;魏伟;徐叔云5.褪黑素对海洛因依赖大鼠催促戒断症状的治疗作用 [J], 徐贵丽;刘泽源;赵晶;李宁松;沙丽君因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
成年大鼠脑透析液和血清中褪黑素含量的测定孟涛;郑志竑;叶婧;林玲【摘要】目的:采用高效液相色谱(HPLC)‐荧光法和酶联免疫(ELISA)法测定成年大鼠脑微透析液及血清中的褪黑素(MLT)含量,比较2种检测方法的灵敏性、准确性及可靠性。
方法将微透析引导管置入正常成年大鼠纹状体内1周后,采用脑微透析技术动态收集2:00,6:00,10:00,14:00,18:00和22:00的透析液,并于次日22:00行尾静脉取血;用HPLC‐荧光法和ELISA法分别测定透析液及血清样本中的MLT水平。
结果HPLC‐荧光法测定MLT检出限为0.1 pg/mL ,在1.0~500 pg/mL之间呈线性关系,回归方程 y=10446 x +8603.5(r=0.9987,P< 0.001),日间、日内精密度均<6%;ELISA 法检出限为5.92 pg/mL ,检测线性范围为12.35~1000 pg/mL。
用HPLC‐荧光法测定2:00,6:00,10:00,14:00,18:00和22:00大鼠脑透析液中的MLT含量分别为(32.99 ± 2.22),(18.25 ± 2.27),(4.03 ± 1.70),(2.92 ± 1.08),(12.08 ± 1.77)和(21.83 ± 2.04)pg/m L ,具有明显的昼夜节律性,探针回收率为12%~13%;22:00血清中的MLT含量为(82.62 ± 8.09)pg/mL ,提取回收率>90%,且血清与透析液中的MLT水平呈高度正相关(r=0.987,P<0.001);用ELISA法测定血清中的MLT含量为(81.31±9.62)pg/mL ,且用2种方法测定血清中MLT差别无统计学意义(P=0.115)。
结论用HPLC‐荧光法测定大鼠脑微透析液和血清中的MLT 含量具有灵敏、快速、准确、重复性好等特点,且HPLC‐荧光法和ELISA法测定血清中的MLT具有较好的一致性。
%Objective To determine brain dialysate and serum melatonin (MLT ) levels in adult rats by high‐performance liquid chromatography (HPLC) with fluorescencedetection and enzyme‐linked immunosorbent a ssay (ELISA) ,and compare the sensitivity ,accuracy and reliability of the two detection methods . Methods The guide tube was implanted into the striatum of healthy adult rats . One week af‐ter implantation ,dialysate samples were collected at2 :00 ,6:00 ,10 :00 ,14:00 ,18 :00 ,22 :00 h in stria‐tum by brain microdialysis . Blood samples were collected from the rat tail vein at 22 :00 h on the follow‐ing day . HPLC with fluorescence detection and ELISA were applied to detect dialysate and serum MLT levels . Results The lowest concentration of MLT that can be detected by HPLC with fluorescence de‐tection was 0 .1 pg/mL . There was a regressive equation y=10 446 x+8 603 .5 (r=0 .998 7 ,P<0 .05) in linear range 1 .0~500 pg/mL of MLTlevels ,with an intra‐assay and inter‐assay of below 6% . The detection limit of MLT by ELISA was 5 .92 pg/mL ,and the detection range was 12 .35~1 000 pg/mL . The mean concentrations of dialysate MLT that showed a distinct fluctuation were (in pg/mL )(32.99±2.22),(18.25±2.27),(4.03±1.70),(2.92±1.08),(12.08±1.77),(21.83±2.04 )at2:00, 6 :00 ,10:00 ,14:00 ,18:00 and 22 :00 h by HPLC with fluorescence detection . The recovery of the probes was from 12% to 13% . Besides ,the mean concentration of serum MLT was (82 .62 ± 8 .09) pg/mL by t his method . The extraction recovery of serum MLT was more than 90% . There was a distinct positive correlation between serum MLT and dialysate MLT levels at 22:00 pm ,and pearson’s correlation coeffi‐cient between the two was 0 .987 at the 0 .001 level (t wo‐tailed) .In addition ,the mean concentration of serum MLT was (81 .31 ± 9 .62) pg/mL by ELISA . Therewas no significant difference in serum MLT levels between the two methods (P=0 .115) . Conclusion These data suggest that HPLC with fluores‐cence detec tion may be sensitive ,rapid ,accurate and reproducible in determination for M L T levels in dia‐lysate and serum samples ,and serum MLT levels by HPLC with fluorescence detection may be consistent with those by ELISA .【期刊名称】《福建医科大学学报》【年(卷),期】2015(000)002【总页数】5页(P67-71)【关键词】褪黑激素;色谱法;色谱法 ,高压液相;酶联免疫吸附测定;透析液;血清【作者】孟涛;郑志竑;叶婧;林玲【作者单位】福建医科大学神经生物学中心,福州 350108; 中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所化学污染与健康安全重点实验室,北京 100050;福建医科大学神经生物学中心,福州 350108;福建医科大学神经生物学中心,福州350108;福建医科大学神经生物学中心,福州 350108【正文语种】中文【中图分类】R-332;R347;R977.1褪黑素(melatonin,MLT)主要是由松果体分泌的一种吲哚类激素,具有明显的昼夜节律性,分泌高峰在夜间,白天分泌减少,且合成与分泌受光/暗周期信号、神经系统等因素的调节[1-2]。
松果体分泌MLT后立即释放入脑脊液和血液,并与广泛分布在中枢神经系统与外周组织器官靶细胞膜上的MLT受体相结合,参与机体的生长、发育、成熟和衰老等生命过程。
既往的研究主要针对MLT功能以及血清和松果体MLT含量变化;近年来,研究者开始关注脑脊液中MLT的动态变化、脑内MLT与血清MLT的相关性。
本研究以正常成年大鼠为研究对象,将引导管置入前脑纹状体内,采用脑微透析技术动态收集透析液样本,并采集大鼠尾静脉血;用高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)-荧光法测定大鼠体内的MLT,并分析脑透析液与血清中MLT之间的相关性;同时用酶联免疫法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定血清中MLT含量,比较2种检测方法的一致性,为进一步了解体内MLT的分泌模式、MLT含量的测定提供一种更为合理、有效的方法。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 动物 8只健康雄性SD大鼠,体质量为(200±20)g[上海斯莱克实验动物公司,许可证号:SCXK(沪)2007-0005]。
大鼠在(23±2)℃、30%~45%湿度下置于无菌层流架内饲养,光暗周期12h/12h,自由饮食饮水。
1.1.2 试剂 ELISA试剂盒(美国Uscnk公司);MLT标准品(美国Sigma公司);甲醇和三氯甲烷(德国Merck公司);实验用水为Millipore超纯水;其他均为国产试剂。
1.1.3 仪器大鼠脑立体定位仪(SR-5M,日本Narishige公司);微透析探针及脑微透析系统(CMA12,瑞士CMA 公司),探针外径0.5mm、膜长4mm;反相色谱柱(Smart RPC18,美国Grace公司);HPLC(Waters 600)及荧光检测系统(Waters 2475)(美国 Waters公司);酶标仪(FLx800,美国BioTek 公司)。
1.2 方法1.2.1 HPLC-荧光法 MLT 流动相成分为Na2HPO435.8g/L,EDTA·2Na 0.372g/L 和30%甲醇,pH 6.4,检测系统为Waters 2475荧光检测器和Smart RPC18反相色谱柱(150mm×4.6mm,粒径5μm),利用单泵恒流洗脱,柱温为30℃,流速为0.9mL/min。