脂肪与脂肪油测定法

脂肪与脂肪油测定法

1 简述

1.1 本操作规程适用于药用或作制剂基质及赋形剂使用的酯类物质的检验。1.2 本法只记述检验脂肪与脂肪油特定的检查项目，各具体品种标准中涉及到的一般物理常数测定，照药典规定方法进行，在此不再详述。

2 仪器与试剂

2.1 仪器与用具离心机（3000r/min）、砂浴锅。

2.2 试药与试液均按《中国药典》2015年版四部通则8001、8002要求。

3 供试品的预处理

供试品有液体状态，也有固体状态的。固体供试品需经熔化后才能进行有关项目的测定；液体供试品也常因硬脂酸的析出而发生浑浊，因而供试品在测定前应先进行适当处理。

浑浊液体供试品的前处理估算测定所需用的供试品量，取略多于测定用量的供试品，置干燥烧杯中，于50℃水浴中加热使其完全熔化成澄清液体；加热后如仍显浑浊，可离心沉降或用干燥的保温滤器滤过使澄清。将得到的澄清液体搅匀，趁其尚未凝固，用附有滴管的称量瓶或附有玻勺的称量杯，分别称取下述各项检验所需的供试品。

固体供试品的前处理取略多于测定需用量的供试品，切碎，置干燥烧杯中，在不高于该品种熔点l0℃的温度下熔化后，离心沉降或滤过，再依法称取。

4 测定法

4.1 相对密度的测定取经过前处理的供试品，照相对密度测定法标准操作规范测定。

4.2 折光率的测定取经过前处理的供试品，照折光率测定法标准操作规范测定。

4.3 熔点的测定取经过前处理并重新凝固后的供试品，照熔点测定法标准操作规范第二法侧定。

4.4 脂肪酸凝点的测定测定脂肪酸的凝点，必须先将脂肪或脂肪油水解，除去多元醇，提取千燥的脂肪酸后方能进行测定。

4.4.1 脂肪酸的提取取经过前处理的供试品50g与20%(g/g)氢氧化钾的甘油溶液75g，同置于800ml烧杯中，加热至150℃并不断搅拌15分钟，使皂化，放冷至约100℃时，加入新沸的水500m1，充分搅拌成均匀溶液状，静置至泡沫大部分消失时，缓缓加大硫酸溶液（1→4）50ml，缓缓加热并轻轻搅动使均匀，静置至脂肪酸明显分离为一透明层。趁热将上层脂肪酸移人另一烧杯中，再以新沸的水充分搅拌洗涤数次，至洗涤液滴入甲基橙指示液显黄色时，趁热将上层澄清的脂肪酸转移到干燥小烧杯中，加入无水乙醇5ml，搅拌均匀，以小火加热至无小气泡逸出，即得干燥的脂肪酸，备测定凝点使用。

4.4.2 凝点的测定取上法提取的干燥脂肪酸，照凝点测定法标准操作规范测定。

4.5 酸值的测定酸值系指中和1g的脂肪、脂肪油或其他类似物质中含有的游离酸所需氢氧化钾的重量(mg)，测定时可用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）进行滴定。

4.5.1 供试品溶液的制备由于不同的脂肪或脂肪油中所含游离酸量的差别很大，酸值数相距悬殊。为便于掌握滴定液消耗量不致过多或过少，称取供试品时应按供试品酸值数大小的不同等级，照药典的取样量表，精密称取供试品，置于干燥的250m1锥形瓶中，加乙醇-乙醚（1:1）混合液[临用前加酚酞指示液1.0m1，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）调至微显粉红色]50ml，振摇使完全溶解。如不易溶解，可缓缓加热回流使溶解，放冷。

4.5.2 乙醇-乙醚（1:1）混合液的制备取乙醇与乙醚各25ml，置100m1具塞锥形瓶中，振摇混匀，临用前先加酚酞指示液1ml，摇匀，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）适量，调至微显粉红色。

4.5.3 滴定用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定至粉红色持续30s不退，读取消耗氢氧化钠滴定液的容积(ml)。

4.5.4 计算以消耗氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）的容积(ml)为A，供试品的取样量(g)为W，照下式计算，即得。

供试品的酸值=

5.61 A

W

在上式中，如所用氢氧化钠滴定液（0.1ml/L）的浓度不恰为0.1000mol/L时，

应乘以F值；5.61为每lml氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于氢氧化钾的毫克数。

4.5.5 附注测定酸值小于10的油脂时，溶解供试品所用的醇醚混合液中的乙醇宜改用无水乙醇，防止供试品溶液可能出现的析出问题。

4.6 皂化值的测定皂化值系指中和并皂化1g脂肪、脂肪油或其他类似物质中所含有的游离酸类酯类所需的氢氧化钾的重量(mg)。

4.6.1 供试品溶液的制备精密称取供试品适量[其重量(g)约相当于250/供试品的最大皂化值]，置干燥的250m1锥形瓶中，用移液管精密加入乙醇制氢氧比钾滴定液（0.5mol/L）25ml，连接回流冷凝管，于水浴上加热至微沸并回流30ml，然后用乙醇10m1冲洗冷凝管内壁及接口下部，加入酚酞指示液lml，摇匀。4.6.2 滴定立即用盐酸滴定液（0.5 mol/L）滴定皂化剩余的氢氧化钾，至溶液的粉红色刚消褪，加热至沸，如溶液又出现粉红色，再继续滴定至粉红色刚消褪，读取消耗的盐酸滴定液的容积(ml)。

4.6.3 空白试验用上述同一移液管精密量取乙醇制氢氧化钾滴定液（0.5mol/L）25ml，如以上操作，滴定至粉红色刚消退，读取消耗的盐酸滴定液的容积（ml）。

4.6.4 计算以供试品溶液消耗的盐酸滴定液（0.5mol/L）容积(ml)为A，空白试验所消耗的盐酸滴定液（0.5mol/L）的容积(ml)为B,供试品的重量(g)为W，照下式计算，即得。

供试品的皂化值= ()28.05 B A

W

-⨯

在上式中，如所用盐酸滴定液（0.5mol/L）的浓度不恰为0.5000mol/L时，（B-A）的数值应乘以F值。28.05为每lml盐酸滴定液(0.5mol/L)相当于氢氧化钾的毫克数。

4.7 羟值的测定羟值系指每1g脂肪或脂肪油中含有的羟基，经用下法酰化后所需氢氧化钾的重量(mg)。

4.7.1 酰化剂的配制称取对甲苯磺酸14.4g,置干燥的500ml具塞锥形瓶中，加醋酸乙酯360ml，振摇使溶解，缓缓加入醋酐120ml摇匀，密塞，放置3日后备用。

4.7.2 供试品的取样与酰化除另有规定外，照《中国药典》规定的取样量表，