多环芳烃的测定----液相色谱法
HJ784-2016土壤和沉积物多环芳烃的测定高效液相色谱法方法验证报告
检测分析方法验证报告（验）字〔2022〕第号方法名称：土壤和沉积物多环芳烃的测定液相色谱法HJ 784-2016项目主编单位：验证单位：项目负责人及职称：（检测员）通讯地址：联系方式：报告日期：2022年03月17日土壤和沉积物多环芳烃的测定高效液相色谱法一、适用范围标准HJ 784-2016测定土壤和沉积物中十六种多环芳烃的液液萃取高效液相色谱法。
适用于土壤和沉积物中十六种多环芳烃的测定。
十六种多环芳烃（PAHs）包括：萘、苊、二氢苊、芴、菲、蒽、荧蒽、芘、苯并[a]蒽、屈、苯并[b]荧蒽、苯并[k]荧蒽、苯并[a]芘、茚并[1,2,3-cd]芘、二苯并[a,h]蒽、苯并[ghi]苝。
当取样量为10.0g，定容体积为1.0ml时，用紫外检测器测定16种多环芳烃的方法检出限为3μg/kg～5μg/kg，测定下限为12μg/kg～20μg/kg。
二、方法原理土壤和沉积物样品中的多环芳烃用合适的萃取方法（索氏提取、加压流体萃取等）提取，根据样品基体干扰情况采取合适的净化方法（硅胶层析柱、硅胶或硅酸镁固相萃取柱等）对萃取液进行净化、浓缩、定容，用配备紫外/荧光检测器的高效液相色谱仪分离检测，以保留时间定性，外标法定量。
三、试剂和材料3.1 乙腈（CH3CN）：HPLC级。
3.2 正己烷（C6H14）：HPLC级。
3.3 二氯甲烷（CH2Cl2）：HPLC级。
3.4 丙酮（CH3COCH3）：HPLC级。
3.5 丙酮-正己烷混合溶液：1+1。
用丙酮和正己烷按1:1的体积比混合。
3.6 二氯甲烷-正己烷混合溶液：2+3。
用二氯甲烷和正己烷按2:3的体积比混合。
3.7 二氯甲烷-正己烷混合溶液：1+1。
用二氯甲烷和正己烷按1:1的体积比混合。
3.8 干燥剂：无水硫酸钠（Na2SO4）或粒状硅藻土置于马弗炉中400℃烘4h，冷却后置于磨口玻璃瓶中密封保存。
3.9 硅胶：粒径75μm～150μm（200目～100目）。
多环芳烃的检测方法
多环芳烃的检测方法
1. 高效液相色谱法呀，这就像是一个超级侦探，能把多环芳烃从复杂的混合物中精准地揪出来！比如说在检测土壤中的多环芳烃时，它就能发挥大作用呢，难道不是很厉害吗？
2. 气相色谱-质谱联用法，哇哦，这简直就是检测多环芳烃的黄金搭档！就好像福尔摩斯和华生一样默契十足，能够准确地识别出多环芳烃的身份呢，你说神不神奇？
3. 荧光光谱法呢，就像一束神奇的光，能让多环芳烃无所遁形！在检测一些液体样品中的多环芳烃，效果那可是杠杠的，这多牛啊！
4. 免疫分析法，嘿，这可像个精准的小战士，专门对付多环芳烃！就拿检测食品中的多环芳烃来说，它可从来没让人失望过呀，是不是很赞？
5. 薄层色谱法，这看似简单却暗藏玄机，就如同一个低调的高手默默地工作着！想想看在一些快速检测的时候，它的作用可不小呢，难道不是吗？
6. 电化学分析法，哇，像是一个敏锐的传感器，能快速感知多环芳烃的存在！在一些特定环境的检测中，它可是立下了汗马功劳，真厉害呀！
7. 红外光谱法，像一双锐利的眼睛，能看穿多环芳烃的伪装！用于某些特定物质中的多环芳烃检测，那效果真是没得说，厉害吧！
8. 毛细管电泳法，好一个灵活的小能手，对付多环芳烃有一手！许多实验中它都表现出色，真让人佩服呢！
我觉得这些检测方法都各有千秋，在不同的场合和需求下都能发挥重要作用，我们真应该好好利用和研究它们，让多环芳烃无处遁形！。
水中的多环芳烃的测定
水中的多环芳烃的测定
多环芳烃是一类有机化合物，由若干个苯环组成，具有较高的毒性
和致癌性。
它们广泛存在于石油、煤炭等化石燃料中，也会通过工业
废水、农药、汽车尾气等途径进入水体中，对水环境造成严重污染。
因此，对水中多环芳烃的测定显得尤为重要。
一、测定方法
目前，常用的测定方法主要有气相色谱法、液相色谱法、质谱法等。
其中，气相色谱法是最常用的方法之一。
该方法利用气相色谱仪对样
品中的多环芳烃进行分离和检测，具有分离效果好、检测灵敏度高等
优点。
液相色谱法则是利用液相色谱仪对样品进行分离和检测，适用
于水中多环芳烃浓度较低的情况。
质谱法则是将气相色谱或液相色谱
与质谱联用，可以对多环芳烃进行定性和定量分析。
二、样品处理
在进行多环芳烃的测定前，需要对水样进行处理。
首先，需要将水样
进行预处理，去除其中的悬浮物和杂质。
其次，需要将水样进行萃取，将其中的多环芳烃提取出来。
萃取方法有多种，如固相萃取、液液萃
取等。
最后，需要对提取出来的多环芳烃进行纯化和浓缩，以提高检
测的灵敏度和准确性。
三、测定结果
通过对水样中多环芳烃的测定，可以得到其浓度和种类等信息。
根据测定结果，可以评估水体的污染程度，制定相应的治理措施。
同时，也可以为环境保护和水资源管理提供科学依据。
四、结论
水中多环芳烃的测定是一项重要的环境监测工作。
通过选择合适的测定方法和样品处理方法，可以得到准确可靠的测定结果。
这对于保护水环境、维护人类健康具有重要意义。
植物油中15种多环芳烃的高效液相色谱测定方法
植物油中15种多环芳烃的高效液相色谱测定方法目的建立植物油中15种多环芳烃的中性氧化铝小柱固相萃取—高效液相色谱检测方法。
方法植物油经正己烷溶解后过中性氧化铝固相萃取小柱净化，Waters PAH 4.6×250mm色谱柱进行分离，乙腈-水梯度洗脱，流速1.5ml/min，进样量10ul，柱温30，荧光检测器检测，外标法定量。
结果15种多环芳烃混合标准溶液在浓度为0.01-0.50ug/mL的范围内，在荧光检测器下呈良好的线性关系，该方法的检出限为0.1-1.5ug/kg之间，样品的加标回收率在62.14%-120.35%之间，RSD在0.91%-4.32%之间。
结论本实验所用方法具有样品前处理简单，检测方法高效快速，灵敏度高，准确性好等优点，能够满足植物油中多种多环芳烃含量的检测。
标签：多环芳烃；植物油；高效液相色谱法；食品安全Abstract：Objective To establish a method for simultaneous determination of 15 PAHs in plant oil by SPE-HPLC.Methods The edible vegetable oil was dissolved in n-hexaneand，cleaned up with neutral alumina SPE cartridges. The 15 PAHs was carried out by waters-PAHs column （4. 6 mm ×250 mm）with a gradient elution using acetonitrile-water as mobile phase at a flow rate of 1. 5 ml /min，the column temperature was 30 ℃，and the injection volume was 10 μl. Detection was carried out by a fluorescence detector with external standard.Results The 15 PAHs solution was a good linear relationship at a concentration within a range of 0.01-0.50ug / mL，The LOD was in the range of 0. 1 ～1.5 μg /kg with average recovery ranging from 62.14% to 120.35%. The RSD was in the range of 0. 91% ～4.32 0%.Conclusions The method had the advantages of simple pretreatment，high sensitivity and accuracy，which could be applied to the determination of the 15 PAHs in plant oil.Keywords：PAHs ；Edible vegetable oil ；HPLC；Food safety多环芳烃是一组由两个或两个以上苯环和稠环链接在一起的芳香族化合物及其衍生物，来源于工业生产、有机物热解或不完全燃烧等，为持久性有机污染物[1]。
液相色谱法测定水中16种多环芳烃的方法优化
分析 检测液相色谱法测定水中16种多环芳烃的方法优化 应月 何苏 顾艳 南京市食品药品监督检验院实验测定过程及多环芳烃特性分析多环芳烃特性分析。
多环芳烃一般是由两个苯环组成的稠环氢化合物，结构类型有线状排列、角状排列、簇状排列。
多环芳烃具有较高的熔点、沸点、是一种有色的晶体物质，带有辛醇－水分配系数的性质，因为其较低的蒸汽性欲水溶性，广泛存在于水中与食物油中。
目前大多数情况下用来检测水中是否含有此类元素的方法一般有ＥＰＡ５５０、ＥＰＡ５５０．１、ＥＰＡ６１０。
这种测量实验方式检测出来的数据会有一些偏差，且在实验的过程中相关步骤不够严谨，所以现在采用液相色谱法测定水中的多环芳烃。
日常用水以及食用油中含有的多环芳烃一旦含量超标，则有可能导致使用者出现癌变现象，已经被发现切确认的５００多种致癌物中有多半以上是ＰＡＨｓ的衍生物，当然多环芳烃也是其衍生物，本身熟悉有致癌性、致畸性、致突变性。
所以优化检测方案，规范检测流程对于健康用水监管来说极为重要。
实验过程的优化。
固相萃取－高效液相色谱法作为当前最为合理且自动化程度高、节约溶剂、萃取效率高等特点于一体的检测方式来测定水中的１６种多环芳烃，得出的检测结果准确、科学合理、可信度高。
实验过程中首先需要按照要求配置标准储备液和标准工作液。
准备１０００ｍｇ／Ｌ的由１－甲基萘和２－甲基萘，甲醇组成的混合液，然后取少量的甲基萘－甲醇混合液，和多环芳烃混合物配置成标样溶液，将配好的混合液均分成１０ｍｌ／ｇ的标准储备溶液。
混合标准工作溶液用水稀释并定容之后，得到多组不同量的９个混合标准工作溶液。
接着准备样品：自来水、加标样品１，也就是向一定体积的自来水中加入适量的混合标准储备液２，控制多环芳烃组的浓度为５ｕｇ／Ｌ。
色谱条件为富集柱，流动相为纯水和乙腈，进样体积为１ｍｌ。
梯度见下表。
分离部分流速为０．６ｍｌ／ｍｉｎ。
温度：３０℃，ｕｖ检测为２５０ｎｍ，不同的被检测物相应的激发和发射波表数据见下表２。
环境空气和颗粒物中多环芳烃的测定高效液相色谱法
环境空气和颗粒物中多环芳烃的测定高效液相色谱法立题依据1）多环芳烃的理化性质多环芳烃(polycyclic aromatic hydrocarbons，PAHs)是一种含有两个或两个以上苯环或环戊二烯稠合而成的化合物。
包括稠环型和非稠环型两类，芳香稠环型是指分子中相邻的苯环至少有两个共用的碳原子的碳氢化合物，如萘、蒽、菲、芘等；芳香非稠环型是指分子中相邻的苯环之间只有一个碳原子相连的化合物，如联苯、三联苯等。
纯的PAHs通常是白色或浅黄绿色的固体，五环以上的PAHs大都是无色或淡黄色的结晶，个别具有深色，熔点及沸点较高，所以蒸气压低。
多环芳烃大多不溶于水，而辛醇-水分配系数比较高，易溶于苯类芳香性溶剂中。
多环芳烃大多含有π键，具有大的共轭体系，共轭体系中的电子具有较强的流动性，使得整个分子体系比较稳定，当多环芳烃发生化学反应时，趋向保留分子中共轭体系。
由于分子中存在高能反应键轨道π*和低能成键轨道π，当分子吸收了可见光或紫外光以后，价电子从成键轨道跃迁至返键轨道，当电子从激发态返回基态时，以荧光形式释放能量，形成特征吸收光谱和荧光光谱。
因此，多环芳烃具有一定荧光。
2)多环芳烃的主要来源绝大多数的多环芳烃在环境中不是单独存在，它们往往是两个或更多的多环芳烃的混合物。
多环芳烃大多是石油、煤等化石燃料以及木材、天然气、汽油、重油、有机高分子化合物、纸张、作物秸秆、烟草等含碳氢化合物的物质经不完全燃烧或在还原性气氛中经热分解而生成的，大都随烟尘、废气排放到空气，然后随空气沉降和迁移转化，进一步污染水体、土壤。
环境中多环芳烃的天然来源主要是陆地和水生生物的合成（沉积物成岩过程、生物转化过程、焦油矿坑内气体）、森林和草原火灾、火山爆发等过程中产生的，构成了多环芳烃的天然本地值。
环境中多环芳烃的主要来源是人为源。
人为源包括化学工业污染源、交通运输污染源、生活污染源和其他人为源。
木炭，原油，木馏油，焦油(天然)，药物，染料，塑料，橡胶，农药(人为)，润滑油，脱膜剂，电容电解液，矿物油，柏油(人为)，杀虫剂、杀菌剂、蚊香、吸烟、汽油阻凝剂(人为)等都存在多环芳烃。
水质 多环芳烃的测定 液液萃取和固相萃取高效液相色谱法HJ478-2009 方法证实记录
水质多环芳烃的测定液液萃取和固相萃取高效液相色谱法HJ478-2009 方法证实记录一、方法原理用二氯甲烷萃取水中多环芳烃（PAHs），萃取液经弗罗里硅土柱净化，用二氯甲烷和正己烷的混合溶剂洗脱，洗脱液经浓缩后，用具有紫外检测器的高效液相色谱仪分离检测。
二、试剂2.1乙腈：SIGMA-ALDRICH，液相色谱纯2.2 甲醇：Fisher，液相色谱纯2.3 二氯甲烷：天津致远，色谱纯2.4 正己烷：SIMARK，液相色谱纯2.5 无水硫酸钠：天津光复，优级纯，400℃烘烤2h2.6 氯化钠：天津北联，优级纯，400℃烘烤2h2.7 多环芳烃标准溶液：SITAER，甲醇中16种多环芳烃混标（编号：301702F55）2.8 弗罗里硅土柱：100mg/6mL三、主要仪器设备3.1 液相色谱仪：Thermo，Μ-3000，配有紫外检测器3.2色谱柱：Acclaim TM 120 C18 5μm 120Å（4.6X250mm）3.3 分液漏斗：2000mL，活塞不加凡士林3.4 层析柱3.5旋转蒸发仪四、方法步骤4.1 样品预处理4.1.1 萃取摇匀水样，量取1000mL水样，倒入2000mL分液漏斗中，加入30g氯化钠，再加入50mL二氯甲烷，振摇5min，静置分层，收集有机相，放入250mL接收瓶中，重复萃取两遍，合并有机相，加入无水硫酸钠至有流动的无水硫酸钠存在。
放置30min，脱水干燥。
4.1.2 浓缩用旋转蒸发仪浓缩至1mL，加入正己烷至5mL，重复浓缩3次，最后浓缩至1mL，待净化。
4.1.3 净化用1g弗罗里硅土柱净化：先用4mL淋洗液（二氯甲烷：正己烷=1:1）冲洗净化柱，再用10mL正己烷平衡净化柱。
将浓缩后的样品加到柱上，再用3mL正己烷分3次洗涤装样品的容器，一并加到柱上，弃去流出的溶剂。
用10mL淋洗液洗涤净化柱，收集洗脱液于浓缩瓶中，浓缩至0.5~1.0mL后加入3mL乙腈，浓缩至0.5mL，最后用乙腈定容至1.0mL。
多环芳烃的测定----液相色谱法
多环芳烃的测定----液相色谱法1范围本法规定了用液相色谱分析法测定水中的萘（NPH）、荧蒽（FLU）、苯并（b）荧蒽（BbF）、苯并（k）荧蒽（BkF）、苯并（a）芘（BaP）、苯并（ghi）謋（BPer）和茚并（1，2，3，-cd）芘(IP)。
本法适用于供水和原水中多环芳烃（PAH S）的测定。
取水样500ml，将固相萃取洗脱浓缩到0.5ml，进样10μL，最低检测质量浓度（单位ng/L）为：NPH：35.5，FLU：1.2，BbF：1.7，BkF：0.05，BaP：1.0， Bper：1.3，IP：5.5。
2 原理硅胶基底的共价特性可使许多化学官能团（C8或C18）对其表面进行化学修饰，使水中半挥发、不挥发性有机污染物得以保留。
本法采用以粗颗粒（40μm左右）硅胶为基底的C18键合相作为固相吸附载体，对水中的PAH S进行吸附保留；用二氯甲烷等低极性有机溶剂洗脱PAH S后，用带紫外检测器的高效液相色谱仪进行定性和定量。
3 试剂3.1 流动相：甲醇和水3.1.1 甲醇：色谱纯，用前通过滤膜过滤和脱气。
3.1.2 水：用0.2μm滤膜过滤。
3.2 配制标准样品和水样预处理的试剂3.2.1 二氯甲烷：色谱纯。
3.2.2 四氢呋喃：色谱纯。
3.2.3 异丙醇：色谱纯。
3.2.4 硫代硫酸钠。
3.3 标准溶液：标准储备液。
4 仪器4.1 玻璃器皿所用玻璃器皿均需经铬酸洗液浸泡，洗净后自然晾干。
4.1.1 采样瓶：带磨口玻璃塞的棕色玻璃细口瓶。
4.1.2 尖底浓缩管：最小分度为0.1ml，容积必须进行标定，带磨口玻璃塞。
4.1.3 25μL微量注射器（液相色谱仪手下工进样器）。
4.1.4 量筒：50mL、100mL、和1000mL。
4.2 样品前处理装置4.2.1 固相萃取抽滤装置（负压）或恒流蠕动泵（正压）。
4.2.2 真空泵（30 L/min）。
4.2.3 SPE固相萃取柱：填料为40μm的C18键合相（500mg）吸附剂。
18种多环芳烃的测定
18种多环芳烃的测定引言：多环芳烃（PAHs）是一类由两个以上的苯环组成的有机化合物，广泛存在于自然界中。
由于其毒性和致癌性，对多环芳烃的测定一直是环境科学和食品安全领域的研究热点之一。
本文将介绍18种常见的多环芳烃的测定方法。
一、目的：本文旨在提供18种多环芳烃的测定方法，为环境科学和食品安全领域的研究者提供参考。
二、方法：1. 高效液相色谱法（HPLC）：利用不同的色谱柱和流动相，对多环芳烃进行分离和定量测定。
2. 气相色谱法（GC）：利用气相色谱仪，将多环芳烃分离并通过检测器进行定量分析。
3. 质谱法（MS）：结合质谱仪，对多环芳烃的质谱图谱进行分析和定量。
4. 荧光光谱法：通过荧光光谱仪对多环芳烃的荧光特性进行测定。
5. 紫外可见光谱法：通过紫外可见光谱仪对多环芳烃的吸收特性进行测定。
6. 电化学法：利用电化学方法对多环芳烃进行测定，如循环伏安法和差分脉冲伏安法等。
7. 荧光光谱法：利用荧光光谱仪对多环芳烃的荧光特性进行测定。
8. 红外光谱法：通过红外光谱仪对多环芳烃的红外吸收特性进行测定。
9. 核磁共振法（NMR）：利用核磁共振仪对多环芳烃的核磁共振谱进行测定。
10. 燃烧离子色谱法（PICO）：通过燃烧离子色谱仪对多环芳烃进行分离和测定。
三、结果：1. 苯并[a]芘：可采用HPLC或GC方法进行测定，常用的检测波长为254 nm。
2. 苯并[c]芘：可采用MS或GC方法进行测定，常用的检测波长为350 nm。
3. 苯并[b]芘：可采用HPLC或GC方法进行测定，常用的检测波长为280 nm。
4. 苯并[a]蒽：可采用GC或NMR方法进行测定，常用的检测波长为354 nm。
5. 苯并[b]蒽：可采用HPLC或GC方法进行测定，常用的检测波长为312 nm。
6. 苯并[c,d]蒽：可采用MS或GC方法进行测定，常用的检测波长为380 nm。
7. 苯并[a,h]蒽：可采用HPLC或GC方法进行测定，常用的检测波长为340 nm。
高效液相色谱-荧光检测法测定土壤中的多环芳烃
高效液相色谱-荧光检测法测定土壤中的多环芳烃
多环芳烃在环境中广泛分布，其中通常含有强致癌有毒性质的基因毒性，因此关注其含量的测定是重要的。
高效液相色谱-荧光检测法（HPLC-FLD）是目前用于测定土壤中多环芳烃的有效方法。
HPLC-FLD测定多环芳烃的优点在于出色的灵敏性和选择性，它可以对多环芳烃的活性幅度在微量水平进行检测。
而且可以通过调整其条件来得到高分辨率和良好的稳定性。
HPLC-FLD测定多环芳烃的操作步骤也相对简单，无九醛长效保存剂和抗菌剂的使用，可以提高分析的准确性。
在使用HPLC-FLD进行多环芳烃分析时，首先需要对原样品进行加标、配制和调整处理。
经过样品预处理，将样品加入色谱柱，随后就可以进行检测。
使用荧光检测器进行峰特征定量，判断多环芳烃的浓度。
HPLC-FLD结合多环芳烃检测是一种有效的方法，准确度高、特异性强、快速灵敏，可以有效提高多环芳烃的检测精度和效率，为环境保护提供详细的资料。
食品 多环芳烃 液相色谱
食品多环芳烃液相色谱
食品中多环芳烃的检测通常采用高效液相色谱法（HPLC）。
多环芳烃（PAHs）是一类具有致癌性和致突变性的环境污染物，它们可能存在于食品中，特别是经过烟熏、烘烤或油炸处理的食品。
为了确保食品安全，需要对这些化合物进行监测和控制。
高效液相色谱法是一种常用的分析技术，用于测定食品中的多环芳烃含量。
具体步骤如下：
1. 样品前处理：将食品样品中的多环芳烃用有机溶剂提取出来，提取液经过浓缩至近干，然后用适当的溶剂溶解。
2. 净化过程：使用特定的净化柱，如PSA（N-丙基乙二胺）和C18，对提取液进行净化，以去除可能干扰分析的杂质。
3. 色谱分析：将净化后的样品溶液注入高效液相色谱仪进行分析，通过比较保留时间和峰面积来定性和定量多环芳烃的含量。
此外，还有其他方法，如气相色谱-质谱联用（GC-MS）也被用于多环芳烃的检测。
例如，使用固/液萃取（SoLE）结
合Agilent Captiva EMR-Lipid净化柱，可以提高脂质食品基质中PAHs的萃取效率，并通过GC-MS/MS进行分析。
需要注意的是，在实际应用中，选择合适的方法和条件对于准确检测食品中的多环芳烃至关重要。
实验室通常会根据食品类型、多环芳烃的种类和浓度范围等因素来确定最佳的分析方法。
多环芳烃类的测定
水质 多环芳烃类的测定 高效液相色谱法编 制 说 明（征求意见稿）沈阳市环境监测中心站2008年3月水质 多环芳烃类的测定 高效液相色谱法编 制 说 明一、任务来源2007年2月国家质检总局公布了《关于下达2007年第一批国家标准制修订项目经费的通知》（国质检财函[2007]971 号），向沈阳市环境监测中心下达了编制《水质 多环芳烃类的测定 高效液相色谱法》的项目计划。
根据环境保护部科技标准司的意见，由沈阳市环境监测中心承担《水质 多环芳烃类的测定 高效液相色谱法》的编制工作。
二、编制目的和意义多环芳烃（简称PAHs或PNA）是一类非常重要的化学三致物（致癌、致畸、致突变），因其具有生物难降解性和累积性，所以广泛存在于水体、大气、土壤、生物体等环境中。
多环芳烃引起的环境污染越来越引起人们的重视，它已成为世界许多国家的优先监测物。
1976年EPA列出了16项PAHs为优先控制污染物。
1990年我国提出的68种水体优先控制污染物中有7种属于PAHs。
PAHs主要是在煤、石油等矿物性燃料不完全燃烧时产生的，主要的污染源是焦化、石油炼制、冶炼、塑胶、制革、造纸等工业排放的三废物质以及船舶油污、机动车尾气、香烟烟雾等等。
自1775年Pott医生发现扫烟囱工人患阴囊癌至今，许多人研究了PAHs的致癌性，其中已有不少被确定或被怀疑具有致癌、致畸或致突变作用。
尤其是苯并[a]芘和荧蒽是强致癌物质，严重影响人体健康，所以日益受到人们的关注。
人们对空气中多环芳烃的污染研究较多，实际上多环芳烃是水中普遍存在的污染物质，多环芳烃在不同水体中的分布取决于它们的污染源。
我国原有的标准方法GB 13198-91规定了测定水体中六种特定多环芳烃的高效液相色谱法，但已不能满足当前环境监测和管理的需要。
因此，修订GB 13198-91标准，将会进一步完善我国的有机污染物分析方法体系，努力使环境保护标准与环保目标相衔接。
修订该标准由环境保护部科技标准司提出，由沈阳市环境监测中心站起草。
高效液相色谱法分离测定土壤中的多环芳烃
高效液相色谱法分离测定土壤中的多环芳烃
（） ａ 芘。苯并 （ 芘、 ｅ ） 苯并 （） ａ 蒽、荧蒽、
９ ０二甲基－， 苯 并蒽、 ，－ ｌ １－ ２ 苯并（ｈ） 、０ ｇ ｉ ２－ 甲基胆蒽等均为购买试剂。分别用苯溶，配 成２ 毫克／ 毫升的原液。 使用前再用苯稀释。
（ 三）操作过程
目前，国内外测定大气、水体、食品中 的Ｐ ＡＨ报道较多〔 ６，而对土壤 Ｐ Ｈ的 ２ 〕 － Ａ 分离测定报道尚少。１８年，我们曾建立了 ９０
析、色谱分析。其标准差与变异系数见 表
２ 。表２ 结果表明，本方法重现性良好，除 Ｂ Ｐ的 变异系数 在 １． ａ ３ ％以外，苊、芘、 ２
市土壤的提取液，点板后观察湿度 对 Ｐ Ｈ Ａ 与其它杂质分离的影响。当板的湿度过大， 展开后在紫外光下观察，可见荧光带随着展 开剂的前沿移动，几个带叠加在一起，积聚
Ｘｉ Ｃ ｏｇｇ ＆ Ｙ ｎ Ｚ ｉｙｎ ，Ｉ ｓ ｔｔ ｏ ｅ ｎ－ｅ ｈ ａ ｙ ｈ－ｏｇ ｎｔ ｕｅ ｉ ｆ Ｆ ｒｓｒ ａ ｄ ｅ ｏｏｙ Ａｃｄｍ ａ ｎｃ，Ｓ ｅ－ ｏｅｔｙ Ｐ ｄ ｌｇ， ａ ｅ ｉ Ｓ ｉ ｎ ｉ ａ ｈｎ
ｙ ｎｇ ａ
Ａ ｐ ，ａ ａｄ ｃｒｔ Ｈ Ｌ ｍ ｔ ｄ ｓ ｌ ｆ ｔ ａ ｕａ ｉ ｅ ｓ ｎ ｃ ｅ Ｃ ｅ ｏ ｍ Ｐ ｈ ｈｓ ｎ ｖｌ ｅ ｆ ｑａｔｉ ａｄ ａｔａ ａ ｂｅ ｄ ｅ ｐｄ ｕｌａｏ ｎ ｑ ｎ ｔ ｅ ｅ ｏ ｏ ｒ ｉ ｔｎ ｕ ｉ － ｔｎ ｐｌ ｙｌ ａｏ ａ ｃ ｒｃｒｏｓ Ｈ） ｉ ｏ ｏ ｃｃｃ ｍ ｔ ｈｄｏ ｂｎ （Ａ ｏ ｆ ｙ ｉ ｒ ｉ ｙ ａ Ｐ ｉ ｓｉ Ｓｉ ａ ｐ ｓ ｒｅｔ ｃｄ ｔ ｄ ｈ ｒ－ ｎ ｌ ｏ ｓｍ ｌ ｗ ｅ ｒ ｔ ｗ ｈ ｌ ｏ ｏ． ｌ ｅ ｅ ｘ ａ ｅ ｉ ｉ ｏ ｃ ｍ ｔ ｎ ｉ ａ ｈ ｔ ａ ｔ ． ｈ ｅｔ ｃ ｗ ｒ ｅ ａｅ Ｓｘｌ ａｐｒ ｕ Ｔ ｅ ｒ ｔ ｅ ｈ ｎ ｏ ｅ ｐ ａ ｓ ｘ ａ ｓ ｅ
固体废物—多环芳烃类的测定—液相色谱法(一)
固体废物—多环芳烃类的测定—液相色谱法（一）一、适用范围本办法适用于固体废物及其浸出液中萘、苊烯、苊、芴、菲、蒽、荧蒽、芘、苯并(a)蒽、、苯并(b)荧蒽、苯并(k)荧蒽、苯并(a)芘、二苯并(a，h)蒽、苯并(g，h，i)苝、茚并(1，2，3-e，d)芘等16种多环芳烃含量的测定。
当置体废物浸出液取样量100mL时，办法检出限为0.005～0.024ug/L；当固体废物(污泥)取样量为2g时，办法检出限为0.390～3.15ug/kg。
二、办法原理用有机溶剂提取固体废物或其浸出液中的，提取液经浓缩、净化后用高效液相色谱仪分别，紫外/荧光检测器测定，以保留时问定性，外标法定量。
三、试剂和材料(1)：农残级。
(2)：农残级。
(3)：农残级。
(4)：农残级。
(5)：优级纯。
在400℃下烘烤4h，置于干燥器中冷却至室温，密封保存于整洁的试剂瓶中。
(6)：优级纯。
用法前处理同氯化钠。
(7)硅藻土：溶剂清洗(清洗溶剂：正己烷-二氯甲烷等体积混合溶剂)，清洗后取出置于通风橱处晾干密封保存备用。
(8)石英砂：40～100目，用前先置于马弗炉中450℃灼烧4h。
(9)硅胶(柱层析用)：层析级，70～230目。
前处理办法：ASE抽提(-等体积混合溶剂)→取出置于通风橱处晾干→170℃烘烤24h以上→通风橱处晾凉→加入3%(质量比)超纯水去活化→充分振摇(半天振摇1次，每次30min，共3次)→加入正已烷浸泡保存(平衡)。
(10)氧化铝：250℃灼烧4h→通风橱处晾凉→加入3%(质量比)超纯水去活化→充分振摇(每半天振摇1次，每次30min，共2次)一加入正己烷浸泡保存(平衡)。
(11)浸提剂：将质量比为2∶1的浓硫酸和浓硝酸混合液加入到超纯水中，调整pH为3.20±0.05。
(12)多环芳烃混合标准溶液：ρ=200ug/mL，溶剂为甲醇。
四、仪器和设备 (1)溶液输送泵。
(2)翻转振荡器。
多环芳烃液相色谱法
多环芳烃液相色谱法一、引言多环芳烃（PAHs）是一类具有致癌和致突变性的有机化合物，广泛存在于环境样品中。
因此，准确、快速地检测环境样品中的多环芳烃成为了研究的重点。
液相色谱法（LC）作为一种重要的分离分析方法，被广泛应用于多环芳烃的检测。
本文将就液相色谱法在多环芳烃分析中的应用进行综述。
二、液相色谱法简介液相色谱法（LC）是以液体为流动相的一种色谱技术，具有高分离效能、高灵敏度、高选择性等优点。
液相色谱法按固定相的类型不同可分为液-液色谱法和液-固色谱法。
在多环芳烃分析中，通常采用液-液色谱法，其常用的检测器有紫外检测器、荧光检测器和质谱检测器等。
三、液相色谱法在多环芳烃分析中的应用1.样品前处理多环芳烃在环境样品中含量较低，且易受其他物质的干扰，因此需要进行样品前处理以富集和纯化目标化合物。
液相色谱法常用的样品前处理方法有溶剂萃取、固相萃取和超临界流体萃取等。
这些方法可以根据实际需求选择，以达到最佳的分离效果。
2.多环芳烃的分离液相色谱法能够实现对多环芳烃的高效分离。
通过选择合适的色谱柱和流动相，可以实现对多环芳烃的分离。
在实际操作中，可以根据多环芳烃的性质和含量，调整色谱柱的粒径、填料和流动相的组成，以达到最佳的分离效果。
3.多环芳烃的检测液相色谱法常用的检测器有紫外检测器、荧光检测器和质谱检测器等。
这些检测器可以根据多环芳烃的性质选择，以达到最佳的检测效果。
紫外检测器主要用于检测具有紫外吸收的多环芳烃；荧光检测器具有高灵敏度的优点，适用于荧光标记的多环芳烃；质谱检测器可以提供多环芳烃的分子量和结构信息，有助于对复杂样品进行定性和定量分析。
四、液相色谱法在多环芳烃分析中的优势与局限性1.优势液相色谱法具有高分离效能、高灵敏度、高选择性等优点，能够实现对多环芳烃的高效分离和检测。
此外，液相色谱法还具有广泛的应用范围，可以用于不同类型环境样品的分析。
2.局限性然而，液相色谱法也存在一些局限性，如样品前处理过程较为繁琐，可能会造成目标化合物的损失；液相色谱法的分离效果受到色谱柱和流动相的影响较大，需要选择合适的色谱柱和流动相；液相色谱法的检测器也存在一些局限性，如对某些多环芳烃的响应较低或无响应等。
国Ⅵ柴油中多环芳烃含量的检测方法
1.4 试验步骤SH/T 0806-2008高效液相色谱示差检测法检测车用柴油中多环芳烃含量，用SH/T 0806石科院系统验证标准溶液(SPS)作为实验样品，从示差检测器温度、色谱柱柱温、流动相的流速等影响因素进行实验，对分析方法的操作条件进行探究。
SH/T0806—2008高效液相色谱示差检测法规程要求操作条件必须保证环己烷和邻二甲苯的分辨率不小于5.0[3]。
2 结果讨论2.1 影响因素的考察(1)示差检测器温度。
示差检测器对温度极其敏感，对环境温度的稳定要求比较高，通常示差检测器温度设定比室温高5℃[4]，此次实验环境的温控条件不是很好，夏天在空调全开的情况下室温可能达到30℃。
因此，将示差检测器温度设定在35℃。
(2)色谱柱温度。
进样量选择规程推荐值10μL，流动相流速建议是1.0±0.2mL/min，初始状态选择中间值1.0mL/min，色谱柱温度(柱温)从20℃以每次5℃为梯度到40℃进行实验。
实验结果如表1所示。
表1 色谱柱温度影响结果210 1.025 6.22 6.592310 1.030 5.86 6.299410 1.035 5.45 6.032510 1.040 5.17 5.823由表1可以看出，当柱温在20℃的时候柱分辨率较大，非芳烃、单环芳烃、双环芳烃和三环芳烃的分离度较好。
这是因为0 引言车用柴油中的多环芳烃含量直接影响柴油的十六烷值、尾气排放中的氮氧化合物和固体颗粒污染物[1]。
国家发改委等七部门宣布自2019年1月1日起全面供应“国六标准(国Ⅵ)”车用柴油，多环芳烃的控制指标由国五的11%(质量百分数)下降到国六的7%，并将气质联用法改为“SH/0806中间馏分芳烃含量的测定示差折光检测器液相色谱法”作为仲裁方法。
多环芳烃是一类芳香族有机化合物，具有很强的致癌性，可以通过呼吸或者直接的皮肤接触使人体致癌。
因此，在提倡健康环保的今天，控制柴油中的多环芳烃含量，有着重要的意义[2]。
六种特定多环芳烃的测定高效液相色谱法
HZHJSZ0066 水质六种特定多环芳烃的测定高效液相色谱法HZ-HJ-SZ-0066水质高效液相色谱法1 范围本方法规定了测定水中多环芳烃(PAH)的高效液相色谱(HPLC)法本方法适用于饮用水湖库水苯并(b)荧蒽苯并(a)芘茚苯(1,2,3-cd)芘六种多环芳烃的测定提取液通过弗罗里硅土柱用丙酮加二氯甲烷混合液脱附PAH后本方法对六种PAH通常可检测到ng/L水平本法用弗罗里硅土柱层析净化分离2 试剂和材料2.1 高效液相色谱流动相为水和甲醇的混合溶液分析纯要求有足够低的空白电渗析水或蒸馏水在测定的化合物检测限内未观察到干扰2.2.1 二氯甲烷(CH2Cl2)Ôڲⶨ»¯ºÏÎï¼ì²âÏÞÄÚ²»³öÏÖÉ«Æ׸ÉÈÅΪºÏ¸ñ同2.2.1·ÖÎö´¿注可采用附录中两种办法中的任一种进行净化分析纯加热2h5H2O)2.2.6 弗罗里硅土(Florisil)É«²ã·ÖÎöÓÃ加热2hÓÃË®(2.1.2)调至含水量为11%²ãÎöÓÃ活度为Brockmann´ïµ½将氧化铝加热至550± 20冷却至200~250移入放有高氯酸镁的干燥器内即得活度为Brockmann ÔÚ¸ÉÔïÆ÷ÄÚ¿É´æ·ÅÎåÌì100目活化4h分析纯注因此操作时必须极其小心溶剂萃取物多环芳烃可随溶剂一起挥发而沾附于具塞瓶子的外部被多环芳烃污染的容器可用紫外灯在360nm紫外线下检查浓硫酸洗液中浸泡4h·À»¤Ò·þÓùÌÌ廯ºÏÎïÅä¶à»··¼Ìþ±ê׼Ʒ²»ÄܽøÐйÌÌå¶à»··¼Ìþ±ê×¼ÎïΪӫÝì±½²¢(b)荧蒽茚并(1,2,3-cd)芘及苯并(ghi)等六种采用固体标准物质配制标准储备液2.2.10.2 用固体多环芳烃配制标准储备液０．１ｍｇ溶解于50~70mL环已烷(2.2.1)中０．１ｍＬ若用市售溶液配制标准储备液使标准储备液的浓度各为200ìg/mL的单化合物溶液冰箱中在10mL容量瓶中加入各种PAH储备液(2.2.10.4) 1用甲醇稀释至标线标准液保存在42.2.10.4 标准工作溶液取不同量的混合PAH标准溶液(2.2.10.3)ÅäÖƳɼ¸ÖÖ²»Í¬Å¨¶ÈµÄ±ê×¼¹¤×÷ÈÜÒº´øÓ«¹âºÍ×ÏÍâ¼ì²âÆ÷µÄ¸ßЧҺÏàÉ«Æ×ÒÇ3.1.1 恒流梯度泵系统填料为Zorbax 5ìODS, 柱长250mm3.1.3 荧光检测器激发波长280nmÓ«¹â¹â¶È¼Æ¼ì²âÆ÷Ó¦Óм¤·¢ÓõÄÉ«É¢¹âϵͳºÍ¿ÉÓÃÂ˹âƬ»òÉ«É¢¹âѧϵͳµÄÓ«¹â·¢É䲿·Ö¿É¼û¹â¼ì²âÆ÷¿Éµ¥¶ÀʹÓÃ3.1.5 记录仪3.1.6 微量注射器１０１００及500ìL3.2 采样瓶3.3 振荡器配备自动间歇延时控制仪3.4.1 分液漏斗玻璃活塞不涂润滑油３．４．３ 层析柱长500mm3.4.3.2 样品预处理层析柱内径10mm玻璃活塞不涂润滑油的玻璃柱Ｄ浓缩瓶带刻度带磨口玻璃塞Ｄ蒸发瓶 ３．４．６ Ｋ三球3.4.7K¶þÇò3.4.8量筒 ３．５ 玻璃毛或玻璃纤维滤纸加热1h±£´æÔÚ¾ßÈûÄ¥¿ÚµÄ²£Á§Æ¿ÖÐÔÚ100冷却后4试样制备4.1 样品的性质4.1.1 样品名称4.1.2 样品状态4.1.3 样品稳定性4.2 水样采集和储存方法4.2.1 水样采集采样前不能用样品预洗瓶子防止采集表层水在采样点采样及盖好瓶塞时不留空气要在每升水中加入80mg硫代硫酸钠(2.2.5)除氯水样应放在暗处冰箱中保存萃取后的样品在40天内分析完毕摇匀水样可增减)手摇分液漏斗安装分液漏斗于振荡器架上(3.3)È¡Ï·ÖҺ©¶·分出下层水相留待进行第二次萃取3.4.2ÔÙÓÃ50mL环已烷对水样进行第二次萃取环已烷萃取液并入同一碘量瓶中至少放置30min4.3.2 萃取液的净化可以不经柱层析净化4.3.2.2 地表水及工业污水用柱层析净化在玻璃层析柱(3.4.3.2)的下端加入3mL环已烷(2.2.1)润湿柱子 2.2.6 3.4.9用环已烷制成匀浆净化地表水的柱净化污水的柱放出柱中过量的环已烷至填料的界面从层析柱(4.3.2.1)的上端加入已干燥的环已烷萃取液用柱已烷洗碘量瓶中的无水硫酸钠三次环已烷洗涤液亦加入层析柱被吸附在柱上的PAH用丙酮(2.2.2)和二氯甲烷(2.2.1)的混合溶液解脱污水用75mL (15mL 丙酮+60mL二氯甲烷)脱附Ｄ蒸发瓶(3.4.5)的K ¼ÓÈëÁ½Á£·Ðʯ(3.6)待浓缩将KÔÚ65~70从水浴锅上移下KÀäÈ´ÖÁÊÒÎÂÓÃÉÙÁ¿±ûͪϴÖù¼°Æä²£Á§½Ó¿Ú¼ÓÈëÒ»Á£Ð·Ðʯ在水浴锅中如上述浓缩留待HPLC分析甲醇二氯甲烷及丙酮等是易燃的有机溶剂5操作步骤5.1 调整仪器安装高效液相色谱仪预热运转至获得稳定的基线355.1.2 流动相组成85%水＋１５％甲醇100%甲醇视柱的性能可采用下列方式的一种进行洗脱5.1.3.1 恒溶剂洗脱等浓度洗脱以60%B泵+40%A泵的组成洗脱 以3%B/min增量至成为96%B+4%A泵的组成以8%B/min减量至成为60%B泵+40%A泵的组成使流动相组成恒定5.1.4 流动相流量或按柱的性能选定流量5.1.5.1 荧光检测器(3.1.3)波长的选择六种PAH在荧光分光光度计特定的条件下最佳的激发和发射波长如表1表１ 六种多环芳烃最佳的荧光激发和发射波长 化合物激发波长ëex nm荧蒽365 462苯并(b)荧蒽302 452苯并(k)荧蒽302 431苯并(a)芘297 450或430苯并(ghi)302 419或407茚苯(1,2,3-cd)芘300 500水样中含茚并(13ëem=450nm较好２ｃｄ）芘的荧光强度较高=430nmemb. 荧光计检测器em=460nm为宜>370nm下测定em在254nm下检测PAHÒà¿ÉÒÔ°ÑÓ«¹âºÍ×ÏÍâÁ½ÖÖ¼ì²âÆ÷´®ÁªÊ¹ÓÃ5.1.6.1 放大使谱图在记录纸量程内0.25cm/min5.2.2 标准样品在线性范围内用混合PAH标准溶液(2.2.10.3)配制几种不同浓度的标准溶液5.2.2.2 高效液相色谱法中使用标准样品的条件两者的响应值也要相近相对标准偏差<10%5.2.2.3 使用次数若某一化合物的响应值与预期值间的偏差大于10%5.2.3 校准数据的表示可得一条通过原点的直线可用平均比值或响应因子代替标准曲线来计算测定结果以注射器人工进样5~25mLÓÃÊÔÑù(4.3.2.3)润湿微量注射器(3.1.6)的针头及针筒抽取样品迅速注射样品至HPLC的柱头5.3.2 记录5.3.2.1 放大和纸速5.3.2.2 组分的色谱峰记下色谱峰的保留时间及对应的化合物记下漂移值不同填料的色谱柱下图为两种不同检测器串联的16种PAH 标准色谱图图2为荧光分光光度计在ëex =286 nm¶à»··¼Ìþ±êÑùŨ¶ÈÊ®ÁùÖÖ»¯ºÏÎï½ÔΪ2ìg/mL图1 十六种PAH 标样的HPLC 紫外谱图 图2 十六种PAH 标样的HPLC 荧光谱图5.4.2 定性分析5.4.2.1 各组分的洗脱次序图1和图2为十六种PAH 标准在Zorbax ODS 柱的HPLC 图 2.苊稀 4.菲6.荧蒽8.苯并(a)蒽+10.苯并(k)荧蒽12.二苯并(a, h)蒽１４．茚并(13-cd)芘以试样的保留时间和标样的保留时间相比较来定性用一个化合物保留时间标准偏差的三倍计算设定的窗口宽度可用加标样使峰高叠加的方法测定各组分荧光激发和发射谱图与对应标样的荧光图对比的办法来帮助鉴证化合物以峰最大值到峰底的垂线为峰高通过峰高的中点作平行峰底的直线两点之间的距离为半高峰宽等于峰底乘半高峰宽X iìg/mL标样中组分i 进样量对其峰高(或峰面积)的比值或ng/mm2B imm萃取液浓缩后的总体积V i ìL水样体积 6 结果计算si t i i i V V V B A X ⋅⋅⋅=6.1 定性结果根据标准色谱图各组分的保留时间6.2 定量结果6.2.1 含量的表示方法以ìg/L 表示见表2¼û±í3ÒÔHPLC 最灵敏档噪音的五倍作为仪器的检出限表2 不同实验室测定的精密度(再现性)实 验 室 编 号 PAH 项 目 1 2 3 4 5 6 7 测定平均值% 2 6 4 10 15 13 3 荧蒽 测定次数 3 6 3 6 6 66测定平均值11%16 12 7 8 22 11 3 苯并(b)荧蒽 测定次数3 6 3 6 6 6 6 测定平均值%3 6 7 10 16 苯并(k)荧蒽 测定次数3 6 3 6 6 测定平均值%5 86 4 15 17 3 苯并(a)芘 测定次数3 6 3 6 6 6 6 测定平均值% 10 6 茚苯(1,2,3-cd)芘测定次数 4 6 测定平均值%4 9 7 4 12 19 8 苯并(ghi) 测定次数 3 636666注1空格表示未检出或分不开表3 各实验室准确度(地表水加标回收率)测定汇总实验室编号PAH 项目 1 2 3 4 5 6 7 加标量% 70 67 92.3 98 59 90 94 加标量% 98 81.7 101 86 109 106 94 加标量% 91 86 97 82 84加标量% 80 90 93 93 72 62 93 加标量% 83 86 1加标量% 96 91 87 79 93 86 95 注1°´±½²¢(ghi)计算结构及其在自然界的分布（补充件） 多环芳烃几乎存在于所有的水中沉积物)所吸附世界卫生组织拟定了饮用水中表列的六种特定多环芳烃总的最高可接受的水平为200ng/L各种不同水中地下水最高达500ng/L废水最高达100ìg/L附录 Ｂ 环已烷的净化方法（补充件） B1 浓硫酸净化将环已烷与浓硫酸(2.2.9)共振摇经无水硫酸钠(2.2.4)干燥后进行蒸馏先加入再从顶端加入20g干燥硅胶(2.2.8)Ó÷ÖҺ©¶·´ÓÖù¶¥¶ËÂýÂý¼ÓÈë»·ÒÑÍéÔÚÒ»°ãÇé¿öÏÂÒ»Ö§Öù¿É´¿»¯2.5L环已烷就必须停止过柱。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
多环芳烃的测定----液相色谱法1范围本法规定了用液相色谱分析法测定水中的萘（NPH）、荧蒽（FLU）、苯并（b）荧蒽（BbF）、苯并（k）荧蒽（BkF）、苯并（a）芘（BaP）、苯并（ghi）謋（BPer）和茚并（1，2，3，-cd）芘(IP)。
本法适用于供水和原水中多环芳烃（PAH S）的测定。
取水样500ml，将固相萃取洗脱浓缩到0.5ml，进样10μL，最低检测质量浓度（单位ng/L）为：NPH：35.5，FLU：1.2，BbF：1.7，BkF：0.05，BaP：1.0， Bper：1.3，IP：5.5。
2 原理硅胶基底的共价特性可使许多化学官能团（C8或C18）对其表面进行化学修饰，使水中半挥发、不挥发性有机污染物得以保留。
本法采用以粗颗粒（40μm左右）硅胶为基底的C18键合相作为固相吸附载体，对水中的PAH S进行吸附保留；用二氯甲烷等低极性有机溶剂洗脱PAH S后，用带紫外检测器的高效液相色谱仪进行定性和定量。
3 试剂3.1 流动相：甲醇和水3.1.1 甲醇：色谱纯，用前通过滤膜过滤和脱气。
3.1.2 水：用0.2μm滤膜过滤。
3.2 配制标准样品和水样预处理的试剂3.2.1 二氯甲烷：色谱纯。
3.2.2 四氢呋喃：色谱纯。
3.2.3 异丙醇：色谱纯。
3.2.4 硫代硫酸钠。
3.3 标准溶液：标准储备液。
4 仪器4.1 玻璃器皿所用玻璃器皿均需经铬酸洗液浸泡，洗净后自然晾干。
4.1.1 采样瓶：带磨口玻璃塞的棕色玻璃细口瓶。
4.1.2 尖底浓缩管：最小分度为0.1ml，容积必须进行标定，带磨口玻璃塞。
4.1.3 25μL微量注射器（液相色谱仪手下工进样器）。
4.1.4 量筒：50mL、100mL、和1000mL。
4.2 样品前处理装置4.2.1 固相萃取抽滤装置（负压）或恒流蠕动泵（正压）。
4.2.2 真空泵（30 L/min）。
4.2.3 SPE固相萃取柱：填料为40μm的C18键合相（500mg）吸附剂。
4.3 高压液相色谱系统4.3.1 HPLC恒流泵：流速精度为0.01 mL/min。
4.3.2 色谱柱：反相98（ODS）分析柱，推荐柱长为150mm，内径为4.6mm，粒度为5μm 并配备40mm相同填料的预分离柱。
4.3.3 荧光检测器：具有激发/发射光谱扫描功能，同时具有波长程序设置功能。
4.3.4 紫外检测器：可单独使用，也可与荧光检测器串联使用。
4.3.5 数据处理系统：色谱工作站或积分仪。
5 样品5.1 样品瓶的准备用干净的棕色玻璃瓶作为采样瓶。
5.2 水样采集样品必须采集在棕色玻璃瓶中，若水中有残余氯，需在每升水中加入25mg的硫代硫酸钠除氯；若不能立即进行样品处理，建议在采样时每升水样加入200mL的异丙醇作为样品稳定剂（同时也作为基体改性剂）。
5.3 水样保存水样应置于暗处，4℃冰箱中保存，应在24h内尽快进行样品预处理。
将吸附后的固相萃取柱直接贮存在冰箱中，在20天内将PAHs从固体萃取柱上洗脱下来，进行样品分析。
5.4 样品预处理5.4.1 水样准备：量取500～2000mL水样（根据配备的液相色谱仪灵敏度和水源污染状况，可选择合适的水样体积）。
每1L水样，加入200ml的异丙醇（也可在采样时加入），混合均匀。
5.4.2 SPE柱活化及条件化：先用2ml二氯甲烷注入柱子，让其缓缓流过，并抽空气5min，以去除填料中可能存在的干扰物，再加入2ml的甲醇活化柱子，最后用去离子水（加入和水样相同含量的改性剂）移去活化溶剂（条件化），但注意在对SPE柱进行活化和条件化时，不可将柱床抽干，以防止填料层产生裂隙，使回收入率降低。
5.4.3 水样富集：以4~5ml/min左右的流速，使水样全部通过SPE柱后，加入5ml纯水，让其缓缓通过，以去除水溶性干扰物质，通入净化空气30min，使已吸附的SPE柱彻底干燥。
5.4.4 洗脱与浓缩：将2ml二氯甲烷或四氢呋喃分两次加入柱管，分别洗下被测组分，合并后的洗脱液用氮气浓缩至0.1ml以下，再定容至0.1~0.5ml，待进样分析。
6 测定步骤6.1 色谱条件的选择（根据仪器型号、配置状况，选择合适的色谱条件）6.1.1 流动相：甲醇和水。
根据色谱柱的柱效和分离度，选择合适的流动相配比。
如果用甲醇/水体系能满足样品的分离要求，就不必再用其他流动相体系，如果用纯甲醇即可达到分离效果，就不要用水作为流动相成分。
6.1.2 洗脱模式及洗脱流速：采用等度洗脱，流动相为甲醇：水=80:20，洗脱速率为1.0ml/min。
如果分离效果不理想，适当增加流动相中水的比例，或考虑梯度洗脱。
6.1.3 柱箱温度控制：使用色谱柱温箱，柱箱温度为35℃。
6.1.4 检测器波长设置6.1.4.1 荧光检测器：本方法首先进行激发和发射光谱的扫描，根据所获光谱图，找出各化合物的特征激发和发射波长，见表1。
表1 多环芳烃最佳的荧光激发和发射波长PSHs 激发波长λex，mm 发射波长λex，mmFLU 226 449BbF 302 452BkF 302 431BaP 297 405Bper 302 420IP 305 500 为获得较高方法的灵敏度，根据最优化柱系统条件下获得的各PAHs的保留时间，进行波长程序设置，以便使其能在最优化的激发和发射波长下进行检测。
6.1.4.2 紫外检测器：检测波长为254nm（如果当地水源中背景干扰严重，影响了检测，可选用其他紫外波长）。
6.1.5 数据记录和处理系统：各型色谱工作站均可使用，色谱工作站兼有积分仪功能。
同时还具有双通道数据采集、谱图再处理及精确的定性定量分析等功能。
若采用积分仪，要进行合理的参数设置，以便记录下理想的谱图。
6.2 标准曲线的绘制本方法使用外标法定量。
6.2.1 标准样品的制备根据液相色谱仪的线性工作范围，选择不同浓度的标准工作溶液（至少5个点），所用标准工作液由混合的PAHS标准液用甲醇稀释制得。
浓度系列NPHmg/LFLUμg/LBbFμg/LBkFμg/LBaPμg/LBPerμg/LIPμg/L1 2 3 4 5 2.04.06.08.010.020.040.060.080.0100.08.016.024.032.040.08.016.024.032.040.020.040.060.080.0100.032.064.096.0128.0160.020.040.060.080.0100.0相关系数0.999 0.999 0.999 0.997 0.998 0.996 0.999 6.2.2 标准液的使用每个工作日必须测定一种或几种浓度的标准溶液以检验标准曲线，若某一化合物的测定值与期望值的相对标准偏差大于10%，则必须重新绘制标准曲线。
6.2.3 标准曲线的表示以响应值对浓度作标准曲线，由回归方程计算测定结果。
若采用工作站，只需按已设定的样品序列依次进样，计算机自动存储标准曲线，自动计算每一次进样的测定结果。
若采用积分仪，可采用常规标准曲线绘制和样品测定结果的计算方式。
6.3 样品测定6.3.1 进样6.3.1.1 进样方式：以注射器人工进样或自动进样器进样。
6.3.1.2 进样量：5~25μL。
6.3.1.3 操作：用待测试样调湿微量注射器针头及针筒，并洗涤三次，缓缓反复多次尽可能排出针筒内气泡，迅速注射样品至HPLC柱头，进行HPLC分析，并用甲醇洗涤注射器，以备下次进样。
6.3.2 记录：由色谱工作站完成。
6.4 定性分析6.4.1 保留值定性法。
6.4.2 鉴定的辅助方法。
6.5 定量分析用外标法计算。
7 计算采用色谱工作站，计算出各组分的含量，单位μg/L。
样品浓度：ρi=ρ0V t/V S式中：ρi——试样中组分质量浓度，μg/L。
ρ0——固相萃取洗脱液质量浓度，μg/L。
V t——固相萃取洗脱液浓缩后定容体积，mL。
V S——水样体积，mL。
如果采用积分仪，样品浓度：ρi=A i B i V t/V S V i式中：ρi——试样中组分质量浓度，μg/L。
A i——试样中组分的进样量对峰高（或峰面积）比值，ng/mm(ng/mm2)。
B i——样品中组分峰高（或面积），mm(mm2)。
V t——萃取液浓缩后体积，μL。
V i——注射样品的体积，μL。
V S——水样体积，mL。
8 注意事项8.1 使用标准样品条件8.1.1 标准样品进样体积与试样体积相同，标准样品浓度应接近试样的浓度。
8.1.2 标准样品和试样尽可能同时分析，直接与单个标样比较以测定浓度。
8.2 安全8.2.1 所用有机溶剂甲醇有毒性，四氢呋喃、正己烷易燃，均为易挥发性试剂，操作时必须遵守有关规定，重蒸馏有机溶剂必须在通风柜中进行，严禁明火。
8.2.2 分析的PAH S为致癌物，因此要有保护措施。
8.2.3 用过的废液集中处理后排放。
戴安高效液相色谱性能指标：1、P680 HPG低压四元梯度泵：双柱塞串联方式，采用等动力学预压缩技术（Gynkotek专利），提供无脉冲流动相且无需阻尼器，对高效液相色谱系统的重现性和性能都有显著的提高；自动液漏检测。
（1）、具有溶剂自动补偿功能；延迟体积：<400ul；压力范围：0~7250psi(500bar)；（2）、压力脉冲：<1%；流速精度：±0.1%，at±1ml/min；（3）、流量范围：0.001~10ml/min，0.001ml/min增量；2、UV170检测器：四波长检测技术，可升级到二极管阵列检测器。
（1）、灯源：氘灯；波长范围：200~595nm；（2）、噪声：±5×10-6AU（干电池噪声254 nm，1秒）；（3）、光谱带宽：1.9~400nm，程序可调；波长精度：±0.75 nm；（4）、波长校正：内置氧化钬滤光片（符合ASTM标准）。
液相色谱操作规程一、电源检查各设备是否联接好二、仪器开机1、P680电源接通后,根据实验要求（国家标准方法）设定参数。
1）、流动相流速按Flow键后，按数字键输入，按Enter键确认。
2）、 混合比例按A/B/C/D键后，在压力显示窗口显示所选通道的混合比例。
按数字键输入，按Enter 键确认。
注意：A、B、C、D四个通道混合比例的代数和必须是1。
3）、 压力极限按Max/Min键后，按数字键输入，按Enter键确认。
如果P680在运行时高于高压极限或者低于低压极限，停泵的同时，Off指示灯亮，A、B、C、D、MIN、MAX指示灯闪亮；P680和CHROMELEON的屏幕中也将出现相应的错误提示。
2、启柱温箱，根据要求设定温度。
3、开启检测器，氘灯不会自动地开。
灯的开/关必须通过CHROMELEON TM执行，为了获得最佳的结果，灯必须在分析前30分钟开。