实验三 果蔬中维生素C的定量测定
果蔬维生素C含量测定
果蔬维生素C含量测定原理：还原型抗坏血酸能还原染料2，6-二氯靛酚，该染料在酸性中呈红色，被还原后红色消失。
还原型抗坏血酸还原2，6-二氯靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸，在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准2，6-二氯靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。
试剂配制：(1)2％草酸溶液：溶解20克草酸结晶于200毫升水中，然后稀释至1000ml(2)0.2 mg/ml抗坏血酸标准溶液：准确称取10 mg抗坏血酸，溶于2％草酸溶液中，定容到50 ml容量瓶中，置冰箱中保存。
(3)2，6-二氯靛酚溶液：称取50 mg2，6-二氯靛酚钠盐，溶于50 ml热水中，冷却后用蒸馏水定容至250 ml容量瓶中。
过滤后，置于棕色药瓶中保存在冰箱内。
步骤1.标准抗坏血酸溶液的标定吸取标准抗坏血酸溶液2 ml，加入5 ml20 g/L的草酸溶液，以2，6-二氯靛酚溶液滴定至桃红色且15 s内不褪色即为终点。
用同时刚配好的V C标准溶液标定，记录每ml 2，6-二氯靛酚溶液相当于V C的毫克数（mg/ml）。
2.样品的准备及滴定取样品匀浆10.0 g，加入90 ml 2％草酸溶液，定容至100 ml，过滤备用。
用标定过的2，6-二氯靛酚溶液滴定至桃红色且15 s内不褪色为止，记下染料的用量，重复三遍。
3.维生素C含量计算W=（V0-V1）A*100/MW为100g鲜样样品中含抗坏血酸的毫克数V0为滴定样品所用的染料的ml数。
V1为空白样品所用的染料的ml数。
A为1ml染料溶液相当于维生素C的毫克数（mg/ml）。
M为取样量即样品克数。
第三法2,6-二氯靛酚滴定法17 原理用蓝色的碱性染料2,6-二氯靛酚标准溶液对含L(+)-抗坏血酸的试样酸性浸出液进行氧化还原滴定,2,6-二氯靛酚被还原为无色,当到达滴定终点时,多余的2,6-二氯靛酚在酸性介质中显浅红色,由2,6-二氯靛酚的消耗量计算样品中L(+)-抗坏血酸的含量。
果蔬中维生素C的测定
果蔬中维生素C的测定
维生素C（抗坏血酸）是一种重要的水溶性维生素，可以在多种果蔬中找到。
以下是一种常见的方法来测定果蔬中的维生素
C含量：
1. 准备样品：将所需的果蔬样品洗净，去除外皮、种子和纤维，然后将其切碎成小块。
2. 提取维生素C：将切碎的果蔬样品加入足够的去离子水中，使用搅拌器将其搅拌均匀。
然后使用滤纸或离心机将提取液分离出来。
3. 准备标准曲线：制备一系列已知浓度的维生素C标准溶液，可以使用市售的维生素C标准品。
标准溶液的浓度应该涵盖
预期测定样品中的维生素C范围。
4. 进行反应：将提取液和维生素C标准溶液分别加入试剂中，常见的试剂是重铬酸钾溶液。
经过一段时间的反应，产生颜色变化。
5. 反应色彩测定：使用分光光度计或相关仪器，对样品和标准溶液中的颜色进行测定。
维生素C的浓度与测定的吸光度或
测得的颜色深浅有关。
6. 计算维生素C含量：使用标准曲线得出的吸光度与维生素
C标准溶液的浓度的关系，计算样品中的维生素C含量。
综合分析实验：实验3：果蔬中维生素C测定(实验报告)
实验果蔬中维生素C含量的测定
学院/专业/班级：______________________________ 姓名：
合作者：________________ 实验日期______年__月__日教师评定：______________ 【实验目的】
【实验原理】
【仪器及试剂】
【简单实验步骤】
【数据记录及处理】
Vc质量： g ；西红柿质量： g ；橙子质量： g
实验中你与合作者配制的公用试液有（详细记录称取量及配制过程）：
（1）分光光度法：标准曲线及待测样品吸光度的测定
表1. 标准系列及待测果蔬吸光度的测定
以Vc含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线：
图1. 标准曲线（图打印成适当大小，贴在此处）
计算原待测试样西红柿及橙子中Vc的含量（利用拟合方程求算，注意稀释倍数，以mg/100g表示）
（2）荧光法：标准曲线及待测样品荧光光度的测定
表2. 标准系列及待测果蔬荧光强度的测定
图2. 标准曲线（图打印成适当大小，贴在此处）
计算原待测试样西红柿及橙子中Vc的含量（利用拟合方程求算，注意稀释倍数，以mg/100g表示）
【实验评价及问题讨论】。
《水果蔬菜中维生素C含量的测定》
农夫山泉 艾兰德
假如你是医生，你建议他多吃哪种呢？
常见水果和蔬菜中维生素C含量的测定
滴定管
1、读数时，视线、刻度、液面的凹 面最低点在同一水平线上。
正确
2、量取或滴定液体的体积==第二次 的读数-第一次读数。
水果蔬菜中维生素C含量的测定
【实验原理】
VC是一项重要的营养指标，不同果蔬的VC 含量不同。维生素C是强还原性物质，在酸性 溶液中，能把碘（I2）还原成碘离子（I-）， 而当碘液过量时，又会使被测溶液里的淀粉显 蓝色，因此利用这一原理，可以用直接碘量法 测定水果蔬菜中维生素C的含量。
7……………………………….
【探究3】常见水果蔬菜中维生素C含量测定
【探究3】常见水果蔬菜中维生素C含量测定
（结果）
1 2 3 4
5
6 7 8
白菜 番茄
橙子 梨
青椒 红提
桔子 柚子
药剂师
分光光度仪
VA：夜盲症，角膜干燥、脱屑等
VB1：硫胺素，增食欲，维持神经活
动物肝脏、蛋、乳制品、蔬菜、水果
动，缺则脚气病，神经炎等。
米糠、蛋、葵花籽、大豆
VD：促进钙、磷吸收，缺乏得佝偻
症、 成年人骨质疏松
鱼肝油、蛋、乳制品、金枪鱼
VB2：口腔溃疡、皮炎、舌炎、唇裂
坚果、谷物、肝脏、牛乳
维生素
VE：生育酚，缺时男女不育、先兆 流产、肌肉性萎缩
谷物胚胎、肝脏、鸡蛋、鱼类、植物油
Vpp：VB3，烟酸，（癞）糙皮病
【实验原理解读】
1号 2号
淀粉溶液
淀粉+Vc混合液
Q1：锥形瓶1变成了什么颜色？说明了什么？ Q2：锥形瓶2变成了什么颜色？但是变色过程与1有
果蔬中维生素C含量的测定(“含量”相关文档)共8张
的含量。其反应式如下： 5 、对实验过程和结果的 • RCOOH + NaOH→ RCOONa +H2O 果蔬中维生素C含量的测定
2,指示剂显红色）时，根据消耗的标准碱液体积，计算出样品总酸的含量。 果蔬中维生素C含量的测定 用酚酞作指示剂，当滴定到终点（pH=8.
• 仪器：电位滴定器
范例
• 实验方案设计（框架）
用酚酞作指示剂，当滴定到终点（pH=8.
• 测定一些常见果蔬中维生素C含量实验结果 4、误差分析
2,指示剂显红色）时，根据消耗的标准碱液体积，计算出样品总酸的含量。 4、误差分析
记录卡 5 、对实验过程和结果的
用酚酞作指示剂，当滴定到终点（pH=8. 2,指示剂显红色）时，根据消耗的标准碱液体积，计算出样品总酸的含量。 2,指示剂显红色）时，根据消耗的标准碱液体积，计算出样品总酸的含量。 电位滴定法：样品中的有机酸（弱酸）用标准碱液滴定时，被中和生成盐类。 仪器: 4、误差分析 果蔬中维生素C含量的测定 用酚酞作指示剂，当滴定到终点（pH=8. 电位滴定法：样品中的有机酸（弱酸）用标准碱液滴定时，被中和生成盐类。 反思与建议 3、实验测定一些常见果蔬中
果蔬中维生素C 含量的测定
3、实验测定一些常见果蔬中
维生素Ｃ的含量。 4、误差分析 5 、对实验过程和结果的
反思与建议
测定果蔬中VC含量
• 荧光法:
• 样品中VC与邻苯二胺 反应生成有荧光的物 质,其荧光强度与VC浓 度成正比.
–仪器:
–荧光计
测定果蔬中VC含量
• 电位滴定法：样品中的有机酸（弱酸） 用标准碱液滴定时，被中和生成盐类。用酚酞作
水果和蔬菜中维生素C含量的测定
水果和蔬菜中维生素C含量的测定实验18 水果和蔬菜中维生素C含量的测定一、目的学会测定果蔬中Vitc含量的方法。
二、材料、用具及仪器药品1(材料，各种蔬菜或水果2(用具及仪器、研钵或捣碎机。
100ml锥形瓶、50ml容量瓶，10ml移液管，5ml移液管，100ml量筒，微量滴定管，漏斗、滤纸，电子天平3(试剂(1)2%草酸溶液:草酸2g，溶于100ml蒸馏水(2)1%草酸溶液:溶1g草酸于100ml蒸馏水。
(3)标准抗坏血酸溶液:准确称取50.mg纯抗坏血酸，溶于是1%草酸溶液，并稀释至500ml。
贮棕色瓶，冷藏，最好临用时配制。
(4)2.6-二氯酚靛酚钠溶液:溶31mg2.6-二氯酚靛酚在300ml热水中，冷却后加水稀释至500ml，滤去不溶物，贮在棕色瓶内，冷藏(大约可保存一星期)。
每次临用时，以标准抗坏血酸溶液标定。
三、原理果蔬中含有维生素C(又称抗坏血酸)，维生素C能还原染料2.6-二氯酚靛酚钠(蓝色)为还原型2.6-二氯酚靛酚钠(无色)。
因此，可用2.6-二氯酚靛酚钠滴定样品中的维生素C，根据滴定时所用去染料数，计算出样品中的维生素C含量。
滴定终点的判定是以被滴定溶液在一定时间范围内显现的粉红色不褪色为准，这是由于2 .6——二氯酚靛酚钠具有在酸性溶液中显粉红色，而在中性或碱性溶液中呈蓝色的特性。
四、方法步骤1、提取:用水洗净新鲜白菜叶柄，用纱面或吸水纸吸干表面水份，然后称取10.0g，加2%草酸20ml，置于组织搅碎机中打成浆状或用研钵研匀浆。
倒入100ml 容量瓶中以2%草酸溶液稀释至刻度，静置10分钟，过滤滤液备用。
2、滴定(1)(标准液滴定:准确吸取标准抗坏血酸溶液1.0ml(含0.1抗坏血酸)置100ml 锥形瓶中，加9ml%草酸，微量滴定管以2.6-二氯酚靛酚钠滴定至淡红色，并保持15秒即为终点。
由所用染料的体积计算出1ml染料相当于多少mg抗坏血酸。
(最好做两份)2(样液滴定:准确吸取滤液两份10.0ml分别放入100ml锥形瓶内，滴定方法同前。
实验三 维生素C的定量测定
实验三维生素C的定量测定一、研究背景维生素C的主要作用是提高免疫力，预防癌症、心脏病、中风，保护牙齿和牙龈等。
另外，坚持按时服用维生素C还可以使皮肤黑色素沉着减少，从而减少黑斑和雀斑，使皮肤白皙。
富含维生素C的食物有花菜、青辣椒、橙子、葡萄汁、西红柿等，可以说，在所有的蔬菜、水果中，维生素C含量都不少。
美国专家认为，每人每天维生素C的最佳用量应为200～300毫克，最低不少于60毫克，半杯（大约一百毫升）新鲜橙汁便可满足这个最低量。
而中国营养学会建议的膳食参考摄入量（RNI），成年人为100mg/日，可耐受最高摄入量（UL）为1000mg/日。
维生素C 在维持身体健康方面很重要，因此有必要建立合理的定量测量维生素C的方法，本实验所采用的2,6-二氯酚靛酚钠滴定法就是其中一种。
二、实验原理维生素C具有很强的还原性，在中性和微酸性环境中能将染料2,6-二氯酚靛酚还原为无色的还原型2,6-二氯酚靛酚，同时自身氧化为脱氢抗坏血酸。
由于氧化型2,6-二氯酚靛酚在酸性溶液中显红色，在中性或碱性溶液中成蓝色，所以用2,6-二氯酚靛酚滴定维生素C的酸性溶液，滴下的2,6-二氯酚靛酚与维生素C迅速反应呈无色，当维生素C全部反应，滴下的染料使溶液呈现粉红色，此时即为滴定终点。
于是可以依据标准2,6-二氯酚靛酚的消耗量求出维生素C的含量。
三、仪器与试剂1、仪器（1）离心机：上海安亭科学仪器厂飞鸽牌系列，Anke 7DL-40B（2）架盘天平：北京天平物华医疗器械有限公司（3）平衡天平2、试剂（1）2%草酸溶液（2）0.2mg/ml的标准抗坏血酸溶液（3）2,6-二氯酚靛酚钠溶液3、实验材料2g桔皮和10g桔肉四、实验步骤1.样品的处理和提取2.空白测定取2%草酸10ml ，放入50ml 三角瓶中，用2,6-二氯酚靛酚钠溶液滴定至三角瓶内溶液呈粉红色，15秒内不褪色为终点，记录所用滴定液体积，重复三次取平均值。
3.标定2,6-二氯酚靛酚钠溶液取2ml 标准抗坏血酸溶液加8ml2%草酸溶液，置于50ml 三角瓶内，用2,6-二氯酚靛酚钠溶液滴定至终点，记录所消耗2,6-二氯酚靛酚钠溶液的量，重复三次取平均值。
果蔬中维生素c含量的测定方法探究3
果蔬中维生素c含量的测定方法探究一、实验目的1.学习并掌握定量测定维生素C的原理和方法。
2.了解蔬菜、水果中维生素C含量情况。
二、实验原理维生素c又名抗坏血酸( ascorbic acid), 是一种含有6个碳原子的酸性多羟基化合物, 具有很强的还原性。
它影响胶元蛋白的形成，并且有解毒作用,它参与体内的氧化还原反应, 多种羟化反应, 有防止贫血的作用, 可改善变态反应, 刺激免疫系统, 是人体不可缺少的物质。
它广泛存在与水果和蔬菜中。
人体不能自身制造Vc，所以人体必须不断地从食物中摄入Vc，通常还需储藏能维持一个月左右的Vc。
缺乏时会产生坏血病，故又称抗坏血酸。
因此, 了解各种果蔬中维生素c含量是很有必要的。
维生素C属水溶性维生素，分子式C6H8O6。
分子中的烯二醇基具有还原性，能被I2定量地氧化成二酮基，因而可用I2标准溶液直接测定。
C6H8O6＋I2= C6H6O6＋2HI使用淀粉作为指示剂，用直接碘量法可测定药片、注射液、饮料、蔬菜、水果中维生素C的含量。
由于Vc的还原性很强，较容易被溶液和空气中的氧氧化，在碱性介质中这种氧化作用更强，因此滴定宜在酸性介质中进行，以减少副反应的发生。
考虑到I -在强酸性中也易被氧化，故一般选在pH为3~4的弱酸性溶液中进行滴定。
三、实验仪器及药品材料：新鲜苹果、西瓜、西红柿。
仪器：烧杯多个、量筒、玻璃棒、布氏漏斗、真空泵、台秤、滴管、容量瓶多个（250mL）、酸式滴定管、酒精灯研钵，离心机，滤纸，锥形瓶等药品：碘液滴定法溶液配制( 1) 0.02mol /L碘溶液: K I10g溶于蒸馏水中, 配成K I溶液, 取1.27 ~ 1.30g 碘, 加入到K I溶液中, 待碘完全溶解后, 加水定容到250m ,l 置于棕色瓶中。
( 2) V c溶液: V c片剂( 100mg /片) 研碎, 加水10~ 15m,l 置与锥形瓶中, 现配现用。
( 3) 2% 可溶性淀粉溶液: 可溶性淀粉2g 加水100m,l 煮沸, 冷却待用。
蔬菜水果中Vc含量的测定
实验名称：蔬菜水果中Vc含量的测定实验报告撰写人：Tang Chen注：本实验报告仅供参考，不得抄袭。
非作者允许禁止私自转载，违者将追究法律责任。
一、实验目的1、进一步学习样品的预处理方法2、学会碘量法测定物质含量的方法及其应用3、熟练掌握滴定基本操作技能和查阅资料的能力二、实验原理Vc具有很强还原性，能将碘还原成碘离子。
碘与淀粉变蓝色，而碘离子不能使淀粉溶液改变颜色；因此，在含有Vc的溶液中，加入淀粉溶液，就可以用碘溶液来滴定被检测样品中的维生素C。
记录滴定用去的碘溶液量，再根据已知的每毫升碘溶液可以与多少毫克的Vc发生反应，就可以计算出被检测样品的维生素C含量。
由于Vc的强还原性，在空气的易被氧化，特别是在碱性介质中更易被氧化，故测定时须加入少量稀HCl或稀CH3COOH使溶液呈弱酸性，以减少副反应的发生。
三、仪器与药品桔子、酸式滴定管（50mL）、锥形瓶、量筒、食物粉碎机、烧杯、0.02mol/L碘溶液、盐酸（质量分数2%）、可溶性淀粉溶液（质量分数2%）、蒸馏水、Vc药片（100mg/片）四、实验步骤1、制备果蔬提取液①制取50g水果，放入食物粉碎机中，再加入50mL蒸馏水，然后进行粉碎。
②向锥形瓶中加入2mL淀粉溶液，然后滴加盐酸，将pH调至32、滴定果蔬组织提取液①将一片维生素C药片溶解在25mL蒸馏水中②用碘溶液滴定维生素C药片溶液与果蔬组织提取液，滴定过程中，边滴定边晃动锥形瓶，直到提取液呈现蓝色，并在0.5min内不褪色。
重复滴定两次，记录每次滴定的初读数和末读数。
最后，计算出两次滴定所用去碘溶液的平均值五、实验结果数据处理果蔬组织中的维生素C含量计算公式：Vc含量=（V2/V）·aa=100mg1 2 3 平均值桔子/30g 2.90 3.40 3.35 3.22Vc片29.12 28.96 29.21 29.10Vc的含量mg/50g桔子/30g 18.45。
综合分析实验：实验3：果蔬中维生素C测定
果蔬中维生素C含量的测定维生素C 又名抗坏血酸, 是维持机体正常生理功能的重要维生素之一, 而人体不能自身合成, 只能从食物和药物中摄取, 因此, 食品、药物中维生素C的分析具有重要意义。
蔬菜水果中维生素C（抗坏血酸）含量的测定方法有很多，常用的方法有荧光比色法、光度比色法、电化学法、滴定法、酶法、色谱法等。
辣椒中的维生素C的含量较高，有些品种理论值可高达198mg/100g，橙子中维生素C的含量也达70 mg/100g，西红柿中维生素C的含量也约20 mg/100g，但品种不同差别较大。
本实验利用荧光法和固蓝盐B比色法分别测定西红柿和橙子中维生素C的含量。
固蓝盐B比色法是利用在乙酸溶液中，抗坏血酸与固蓝盐B反应生成黄色的草酰肼-2-羟基丁酰内酯衍生物，可在其最大吸收波长（420nm）处测定吸光度，与标准系列比较定量。
荧光比色法是基于维生素C 被氧化剂如活性炭或Cu2+氧化为脱氢抗坏血酸（DHAA），DHAA 进一步与苯甲酸及十六烷基三甲基溴化铵产生荧光协同增敏作用, 通过对体系荧光强度的测定进行维生素C的定量分析。
本实验选取Cu2+做氧化剂，该法样品处理简单、快速, 体系的稳定性好。
2% 乙酸的配制：量取20.0mL冰醋酸，加水稀释至1000mL。
西红柿样品处理：准确称取80g 左右西红柿，剪碎放入榨汁机中（榨汁机中预先加入50mL 2%乙酸），搅成匀浆，用布氏漏斗抽滤，滤液转移到250mL棕色容量瓶，用蒸馏水定容。
橙子样品处理：将橙子去皮和籽后，准确称取50g左右，剪碎放入榨汁机中（榨汁机中预先加入50mL 2%乙酸），搅成匀浆，匀浆液转移到250mL棕色容量瓶定容。
定容液用漏斗过滤，干滤法（漏斗、滤纸承接烧杯干燥）,注意每次过滤前摇匀容量瓶溶液再过滤，过滤滤液约60mL左右备用。
Vc储备液配制：准确称取0.2g左右维生素C溶解于蒸馏水中，并转移到100mL棕色容量瓶里，定容，放在暗处保存。
果蔬中维生素C含量的测定
果蔬中维生素C含量的测定一、设计目的1、了解维生素C，掌握测定维生素C含量的方法；2、进入实验室亲身体验此实验；3、加入CELL团队。
二、实验原理1、维生素C（Vitamin C）又名L-抗坏血酸，分子式C6H8O6，结构简式，相对分子质量176.12，具有较强还原性，水溶液呈酸性，加热或在碱性条件下易被氧化，但在酸性溶液中能稳定存在。
它是一种无色晶体，可溶于水。
其在医药上有非常广泛的应用，例如：抗坏血病、治疗感冒，对禽流感、SRAS、AIDS和癌症等多种顽疾也有一定的疗效。
2、利用VC的还原性，用标准碘溶液滴定。
化学方程式：C6H8O6+I2→C6H6O6+2HI强还原性且溶于酸的化合物含量少（≤0.4mg/100g）；④果肉为黄色，对颜色反应影响小。
三、仪器与材料锥形瓶（250ml*4）、移液管（20.00ml）、容量瓶（100ml）、烧杯（50ml*2）、酸式滴定管、量筒（50ml）、电子天平（0.01g）、数显恒温水浴锅、漏斗、研钵、玻璃棒、铁架台、洗耳球、脱脂棉、胶头滴管、小刀。
黄色柿子椒、0.02mol/L标准碘溶液、淀粉溶液、0.2mol/L乙酸溶液。
四、实验步骤（一）制备黄色柿子椒组织提取液取两只黄色柿子椒，洗净，称量约180g。
然后用小刀将其切碎置研钵中，加20ml0.2mol/L乙酸溶液（边加边洗小刀），充分研磨成匀浆（研磨不能过于剧烈），再加入40ml0.2mol/L乙酸溶液继续研磨。
在漏斗口垫一层脱脂棉，将匀浆倒入漏斗，过滤置容量瓶中。
用0.2mol/L乙酸溶液清洗研钵，将洗液也倒入漏斗，清洗三次（每次10ml），加水定容。
（二）滴定用移液管从容量瓶中取20.00ml提取液于锥形瓶中，加入3ml淀粉溶液，震荡。
将0.02mol/L的标准碘溶液倒入酸式滴定管中，进行滴定。
当溶液变蓝，且30s内不褪色，即为滴定终点，记下读数。
（三）平行滴定三次。
（四）空白对照再用移液管从容量瓶中取20.00ml提取液于锥形瓶中，将锥形放入70℃恒温水浴锅中加热3分钟。
实验三 维生素C的定量测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)
操作
1.提取:称取约10g样品，加1%草酸少许，用研钵磨碎（桌 面放置一块纸板），加20ml 1%草酸，静置5-10分钟，然后 把样品全部过滤(或离心）后转入50ml容量瓶中.加1%草酸 定容到50ml，即可进行滴定。
2.滴定 （1）标准液滴定：准确吸取标准抗坏血酸溶液1.0ml（含 0.1mg抗坏血酸），置50ml 锥形瓶中，加9ml 1%草酸，微 量滴定管以0.1% 2，6-二氯酚靛酚滴定至淡红色，并保持 15秒不消失即为终点。由所用染料的体积计算出1ml染料相 当于多少mg 抗坏血酸。
实验三 蔬菜水果中的维生素 C含量测定（2，6-二氯酚靛酚
滴定法）
基本原理
还原型抗坏血酸能还原染料2，6-二氯酚靛酚 钠盐，本身则氧化成脱氢抗坏血酸。在酸性溶液 中，2，6-二氯酚靛酚呈红色，被还原后呈无色。 且在酸性环境中，干扰物质与染料的反应非常慢， 而抗坏血酸与之反应的特异性有一定程度的提高。 当抗坏血酸全部被氧化后，稍多加一些染料，使 滴定液呈淡红色，即为终点。如无其它干扰物质 存在，样品提取液所还原的标准染料量与样品中 所含的还原型抗坏血酸量成正比。
V=滴定时所用去的染料ml数； T=1ml染料能氧化抗坏血酸mg数； W=10ml定：准确吸取滤液或上清液三份，每份10.0ml 分别放入三个50ml 锥形瓶中，同标准液进行滴定。
说明： １、滴定速度应迅速，一般不超过２分钟； ２、如样品中Vc含量过高，则取1ml样液加9ml草
酸然后进行滴定,最后计算时W为1ml样液中所含样品的 克数。
计算
V×T/W×100=100g样品中含抗坏血酸mg数；
实验三 碘量法测定维生素C含量
实验三碘量法测定维生素C含量一．实验目的1.学习滴定分析法的基本原理2.学习对蔬菜和食品中Vc含量进行测定的方法二．实验原理1.“滴定”(titration)是将已知准确浓度的溶液——标准溶液通过滴定管滴加到待测溶液中的过程。
待“滴定”进行到化学反应按计量关系完全作用为止，然后根据所用标准溶液的浓度和体积计算出待测物质含量的分析方法称为滴定分析法。
2.先使用铜盐与过量的KI进行反应生成CuI23.CuI2 不稳定随即分解为Cu2I2 和游离的碘4.生成的碘和维生素C反应,直到溶液里的VC被碘全部氧化为止。
剩余的微量碘与淀粉指示剂生成蓝色。
三．实验试剂（1）0.01 mol/L 硫酸铜（CuSO4 5H2O）（2）30% KI 溶液；（3）1%可溶性淀粉指示剂（m/V）（4）偏磷酸-醋酸溶液四．实验操作步骤1. 称取40g菜花（可分2-3次研磨），加少量石英砂及少量偏磷酸-醋酸研成匀浆，加偏磷酸-醋酸定容到100ml，颠倒混匀（两个组做一份）；2. 倒入4个10ml 离心管中，两两配平后，8000rpm离心5min（每组两个离心管）；3. 将上清倒入干净的三角瓶中，待用（此为样品液）；4. 吸取5ml偏磷酸-醋酸,加10mL30%KI溶液。
再加10滴淀粉指示剂溶液。
随即用标准硫酸铜溶液(0.01mol/L)进行滴定，边滴定边振摇，直至显示出蓝色（或红棕色），且稳定3sec不退，记录滴定量V0（此为空白对照，注意：会很快变色，要逐滴加入）；5. 精确吸取5mL样品溶液于100mL三角瓶中，加10mL30%KI溶液。
再加10滴淀粉指示剂溶液。
随即用标准硫酸铜溶液(0.01mol/L)进行滴定。
边滴定边振摇，直至显示出蓝色（或红棕色），且稳定3sec不退，记录滴定量V1（此为样品值）。
6 .计算：L-抗坏血酸含量(mg/每份)＝V×cV:（V1-V0）标准硫酸铜毫升数c：0.88,即1ml0.01mol/l标准硫酸铜溶液相当于0.88mg抗坏血酸。
果蔬维生素C含量测定及其分析
果蔬维生素C含量测定及其分析摘要本次实验我们测定了橘子中的维生素c含量;试验中;通过2;6-二氯酚靛酚对维生素C的滴定从而测定了橘子所含的维生素C含量;我们测得橘子的维C的含量是20.46mg/100g;相对较低..经查阅资料;讨论后发现维生素C在空气中易氧化;而且不同成熟程度、品种、新鲜程度、生长地、测定温度等客观因素也会对其有很大的影响..一、前言实验目的：测定橘子中的维生素c含量;从而进行分析..实验原理：维生素C是人类营养中最重要的维生素之一;缺少它时会产生坏血病;因此又称为抗坏血酸ascorbic acid..它对物质代谢的调节具有重要的作用..近年来;发现它还有增强机体对肿瘤的抵抗力;并具有化学致癌物的阻断作用..维生素C主要存在于新鲜水果及蔬菜中..水果中以猕猴桃含量最多;在柠檬、桔子和橙子中含量也非常丰富；蔬菜以辣椒中的含量最丰富;在番茄、甘蓝、萝卜、青菜中含量也十分丰富;野生植物以刺梨中的含量最丰富;每100克中含2800毫克;有“维生素C王”之称..维生素C为无色晶体;味酸;溶于水及乙醇;不耐热;在碱性溶液中极不稳定;日光照射后易被氧化破坏;有微量铜、铁等重金属离子存在时更易氧化分解;干燥条件下较为稳定..故维生素C制剂应放在干燥、低温和避光处保存；在烹调蔬菜时;不宜烧煮过度并应避免接触碱和铜器维生素C具有很强的还原性..它可分为还原性和脱氢型..还原型抗坏血酸能还原染料2;6-二氯酚靛酚DCPIP;本身则氧化为脱氢型..在酸性溶液中;2;6-二氯酚靛酚呈红色;还原后变为无色..因此;当用此染料滴定含有维生素C的酸性溶液时;维生素C尚未全部被氧化前;则滴下的染料立即被还原成无色..一旦溶液中的维生素C已全部被氧化时;则滴下的染料立即使溶液变成粉红色..所以;当溶液从无色变成微红色时即表示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化;此时即为滴定终点..如无其它杂质干扰;样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含还原型抗坏血酸量成正比..试剂和器材错误!试剂2%草酸溶液: 草酸2g溶于100mL蒸馏水中..1%草酸溶液: 草酸1g溶于100mL蒸馏水中..标准抗坏血酸溶液1mg/mL: 准确称取100mg纯抗坏血酸应为洁白色;如变为黄色则不能用溶于1%草酸溶液中;并稀释至100mL;贮于棕色瓶中;冷藏..最好临用前配制..0.1% 2;6-二氯酚靛酚溶液: 250mg 2;6-二氯酚靛酚溶于150mL含有的热水中;冷却后加水稀释至250mL;贮于棕色瓶中冷藏4℃约52mg NaHCO3可保存一周..每次临用时;以标准抗坏血酸溶液标定..错误!材料橘子1只错误!器材锥形瓶100mL2；移液管10mL2；容量瓶100mL1；250mL1；50mL5；微量滴定管5mL1；研钵；漏斗；纱布..操作方法错误!提取水洗干净整株新鲜蔬菜或整个新鲜水果;用纱布或吸水纸吸干表面水分..然后称取20g;加入20mL 2%草酸;根据实验设计需要处理样品;然后用研钵研磨;四层纱布过滤;滤液备用..纱布可用少量2%草酸洗几次;合并滤液;滤液总体积定容至50mL..错误!标准液滴定准确吸取标准抗坏血酸溶液1mL置100mL锥形瓶中;加9mL 1%草酸;用微量滴定管以0.1% 2;6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡红色;并保持15s不褪色;即达终点..由所用染料的体积计算出1mL染料相当于多少毫克抗坏血酸取10mL 1%草酸作空白对照;按以上方法滴定..错误!样品滴定准确吸取滤液两份;每份10mL; 分别放入2个锥形瓶内;滴定方法同前..另取10mL 1%草酸作空白对照滴定..数据记录与处理1、标准滴定结果用0.1%的2;6-二氯酚靛酚溶液滴定抗坏血酸溶液;得到以下数据表一：表一 0.1%2;6-二氯酚靛酚的标准滴定表二多种蔬果的维生素C含量测定数据处理：由结果得1ml 抗坏血酸需要的染料0.1%的2;6-二氯酚靛酚溶液的体积为V=5.30+5.45/2-0.10=5.275ml1ml 染料能氧化抗坏血酸质量为T=11/5.275=0.19mg2、多种水果蔬菜的维生素C 含量测定结果本组试验我们选取了橘子作为材料;并对其进行了维生素C 含量测定..同标准滴定操作相似;用0.1%的2;6-二氯酚靛酚溶液对样品进行滴定;得到以下数据表二;图一;并由公式得样品中维生素C 的含量100mg/100g 样品： 附公式：(-)100C mg/100g A B V V C T D W⨯⨯⨯⨯维生素含量（样品）＝ 式中：V A 为滴定样品所耗用的染料的平均毫升数；V A =4.41mLV B 为滴定空白对照所耗用的染料的平均毫升数；V B =0.10mL C 为样品提取液的总毫升数；C =50mLD 为滴定时所取的样品提取液毫升数；D=10mLT 为1mL 染料能氧化抗坏血酸毫克数由操作二计算出；T=0.19mg W 为待测样品的重量..W=20.012g注意事项1 某些水果、蔬菜如橘子、西红柿等浆状物泡沫太多;可加数滴丁醇或辛醇..2 整个操作过程要迅速;防止还原型抗坏血酸被氧化..滴定过程一般不超过2min..滴定所用的染料不应小于1mL或多于4mL;如果样品含维生素C太高或太低时;可酌情增减样液用量或改变提取液稀释度..3提取的浆状物如不易过滤;亦可离心;留取上清液进行滴定..五、讨论与误差分析通过查阅资料;我们了解到;我组测得的桔肉维生素C含量为20.46mg/100g;相对偏低;分析其原因为：1、研磨时;研磨的不完全;过滤使得纱布上有残余；2、滴定时;滴定管有微小漏液;导致结果数据有误差；3、可能受到橘子成熟程度、品种、新鲜程度、生长地、测定温度等客观因素；4、由于操作不熟练;整个操作不够迅速;滴定过程超过了2min;导致还原型抗坏血酸被氧化;从而测定的结果偏小..六、思考题1．为了测得准确的维生素C含量;实验过程中都应注意哪些操作步骤为什么(1)过滤后纱布尽量用少量2％草酸多洗几次以保证维生素c基本析出；若泡沫太多;可加数滴丁醇或辛醇..(2)为了防止还原型抗坏血酸被氧化;滴定过程一般不超过2min..(3)滴定所用的染料不应小于1mL或多于4mL;如果样品含维生素C太高或太低时;可酌情增减样液用量或改变提取液稀释度..2．试简述维生素C的生理意义..维生素C参与体内的众多氧化还原反应..可促进细胞间质的完整;保持细胞间质的完整;增加毛细血管壁致密度;降低其通透性及脆性；具有抗炎抗过敏作用；具有还原性;有保护酶系的巯基以避免被毒物破坏的作用;可用于铅、汞、砷、苯等的慢性中毒和放射线病；大量维生素C有中和细菌内毒素;促进抗体合成;增强白细胞吞噬功能；促进铁在肠内吸收;对血红蛋白的合成和红细胞的成熟有影响；维生素C对增强鱼的抗病力有重要作用..本品蛋白结合率低..少量贮藏于血浆和细胞;以腺体组织内的浓度为最高..肝内代谢..极少数以原形物或代谢物经肾排泄;可经血液透析清除..维生素C主要用于由维生素C缺乏引起的全身淤点;齿龈、肌肉、关节囊及浆膜腔等出血症状的坏血病..同时可增强机体对传染病的抵抗力;用于结核病、急性或慢性传染病、感染性休克的辅助治疗；缓解应激、解暑热；改善种公畜精液质量；防治代谢性酸中毒、高血钾症的治疗以及氨基甙类对第8对脑神经的损害..此外还可用于各种贫血、肝胆疾病的辅助治疗；促进创伤愈合；缓解砷、汞、铅、苯等慢性中毒..。
实验三果蔬中维生素C的定量测定
实验三果蔬中维生素C的定量测定实验三果蔬中维生素C的定量测定一、实验目的通过实验掌握果蔬中维生素C含量的测定方法，了解维生素C在果蔬中的分布情况，为合理膳食提供参考。
二、实验原理维生素C是一种水溶性维生素，具有还原性，可采用高效液相色谱法（HPLC）或2,6-二氯靛酚滴定法进行测定。
本实验采用2,6-二氯靛酚滴定法，该方法操作简便、快速，适用于各类果蔬样品的测定。
三、实验步骤1.样品处理：称取适量新鲜果蔬样品，用研钵捣碎，加入适量提取剂（如蒸馏水、酸性乙醇等），研磨成匀浆。
对于一些难以提取的样品（如胡萝卜等），可采用加热或超声波辅助提取。
2.样品过滤：将研磨好的匀浆通过纱布或滤纸过滤，收集滤液备用。
3.滴定：用移液管准确吸取滤液10.0mL，放入250mL三角瓶中，加入2,6-二氯靛酚溶液（浓度约为0.02g/L）约20mL，摇匀后迅速滴定至终点。
记录消耗的2,6-二氯靛酚溶液体积（V1）。
4.空白试验：用移液管准确吸取提取剂10.0mL，按步骤3进行滴定操作，记录消耗的2,6-二氯靛酚溶液体积（V2）。
5.数据记录与处理：根据滴定结果计算维生素C含量，并记录数据。
数据处理可采用表格或图表形式展示。
四、实验结果与数据分析1.实验数据记录：将实验过程中测定的数据记录在表格中，包括样品名称、提取剂用量、滴定消耗体积等。
2.数据分析：根据实验数据计算各类果蔬中维生素C的含量，并对其分布情况进行统计分析。
可以绘制柱状图或饼图来表示不同种类果蔬中维生素C的含量比例。
还可以对不同种类果蔬中的维生素C含量进行对比分析，探讨不同种类果蔬中维生素C含量的差异及其原因。
五、结论通过本实验，我们掌握了果蔬中维生素C含量的测定方法，了解了不同种类果蔬中维生素C的分布情况。
实验结果表明，柑橘类水果（如橙子、柠檬）和草莓等水果中维生素C含量较高，而根茎类蔬菜（如胡萝卜、土豆）中维生素C含量相对较低。
此外，我们还发现不同种类果蔬中维生素C含量的差异可能与品种、生长环境、储存条件等多种因素有关。
实验三 维生素C的定量测定(2,6-二氯靛酚滴定法)
实验三 维生素C 的定量测定（2，6-二氯靛酚滴定法）一、原理维生素c 又称为抗坏血酸，其还原型能还原染料2，6-二氯靛酚钠盐，本身则氧化成脱氢抗坏血酸。
在酸性溶液中，2，6-二氯靛酚成红色，被还原后变为无色。
因此可用2，6-二氯靛酚滴定样品中含有的维生素C ，当样品中的维生素C 被完全还原后，在滴加过量的2，6-二氯靛酚，溶液变为淡红色，即为终点。
如无其他杂质干扰，则样品液所还原的2，6-二氯靛酚的量与样品中所含有维生素C 的量成正比。
二、 实验仪器新鲜水果、吸管、容量瓶、滴定装置、锥形瓶、研钵、漏斗三、实验试剂1、标准抗坏血酸溶液：准确称取50毫克纯抗坏血酸，溶于1%的草酸溶液中，并稀释至500毫升，即浓度为0.1mg/ml ，贮棕色瓶，冷藏保存，最好临用时配制。
2、2%草酸溶液：草酸2克，溶于100毫升蒸馏水中。
3、1%草酸溶液：1克草酸溶于100毫升的蒸馏水中。
4、0.01% 2,6-二氯酚靛溶液：溶50毫克2,6-二氯酚靛于300毫升含有104毫克 NaHCO 3的热水中，冷却后加水稀释至500毫升，滤去不溶物，贮于棕色瓶内。
（4℃约可保存1周）每次临用时以标准抗坏血酸溶液标定。
四、实验步骤（一）提取水洗净新鲜的蔬菜（水果），用吸水纸吸干表面水分，然后称取5克剪碎加2%的草酸5毫升，置研钵中研成浆，倒入100毫升的容量瓶内，用2%草酸洗涤数次，最后定容至刻度，充分混匀后过滤。
（二）滴定1、标定2，6-二氯酚靛酚溶液的浓度：量取标准抗坏血酸溶液1ml 和9ml 1%草酸于50ml 锥形瓶1中，同时量取10ml 1%草酸加入另一个50ml 锥形瓶2中作空白对照V 2，用已标定的2，6-二氯酚靛酚滴定至粉红色出现，15秒不退色。
记录所用的毫升数，计算每毫升2，6-二氯酚靛酚所能氧化抗坏血酸的毫克数（K ）。
2、样品的测定：取50ml 锥形瓶2个，分别加入滤液10ml （V 3），用已标定的2，6-二氯酚靛酚溶液滴定至终点，以微红色能保持15秒不退色为止，整个滴定过程宜迅速，不宜超过2min ，记录两次滴定所得的结果，求平均值V 1。
果蔬中维生素C的提取和定量测定
果蔬中维生素C的提取和定量测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)【实验目的】1.学习并掌握定量测定维生素C的原理和方法.2.了解蔬菜,水果中维生素C含量情况.【实验原理】维生素C具有很强的还原性.还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚(DCIP),本身则氧化为脱氢型.在酸性溶液中,2,6-二氯酚靛酚呈红色,还原后变为无色.因此,当用此染料滴定含有维生素C的酸性溶液时,维生素C尚未全部被氧化前,则滴下的染料立即被还原成无色.一旦溶液中的维生素C已全部被氧化时,则滴下的染料立即使溶液变成粉红色.所以,当溶液从无色变成微红色时即表示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化,此时即为滴定终点.如无其它杂质干扰,样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含还原型抗坏血酸量成正比.【仪器和试剂】一,试剂2%草酸溶液，1%草酸溶液，0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液（每次临用时,以标准抗坏血酸溶液标定）.二,材料:水果,蔬菜三,仪器烧杯，玻棒，吸量管，长颈漏斗，漏斗架，白纱布，滤纸，容量瓶，滴定管, 锥形瓶.【操作方法】一、标准溶液标定1. 配制标准抗坏血酸溶液(1mg/mL) 准确称取100mg纯抗坏血酸(应为洁白色,如变为黄色则不能用)溶于1%草酸溶液中,并稀释至100mL,贮于棕色瓶中,冷藏.最好临用前配制。
2. 标准溶液标定准确吸取标准抗坏血酸溶液1mL置250mL锥形瓶中,加9mL 1%草酸,以0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡红色,并保持15秒不褪色,即达终点.由所用染料的体积计算出1mL染料相当于多少毫克抗坏血酸（以T表示）。
3. 取10mL 1%草酸作空白对照,按以上方法滴定。
二、样品测定1．果蔬中Vc的提取与测定：水洗干净待测的新鲜蔬菜或水果,吸干表面水分.称取20g,置于200mL烧杯中，加入30mL 2%草酸,研磨成浆状,以四层纱布过滤至100mL小烧杯中，再以快速滤纸过滤至锥形瓶中。
然后以0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至溶液呈淡红色,并保持15秒不褪色,即达终点。
实验三 果蔬中维生素C的定量测定
实验三果蔬中维生素C的定量测定（紫外法）（4学时）一、实验目的1. 学习用铜离子氧化法测定维生素C（Vc）（紫外法）；2. 了解Vc定量测定的其他方法，如：磷钼酸比色法、碘量法、2,6-二氯酚靛酚滴定法（近年来用全自动电位滴定仪进行电位滴定）、紫外法、2,4-二硝基苯肼测定总抗坏血酸量、高效液相色谱法、毛细管电泳法、荧光法、Flinb近红外分光光度法等。
二、实验原理抗坏血酸在波长243～267nm处有较高的吸收值，但在样品成分比较复杂时，因有强烈的背景吸收而不适宜用紫外法测定其Vc含量。
用碱加热法等处理法都存在试剂较贵、操作复杂、时问长等一系列问题而不能广泛应用。
利用铜离子消除背景误差，能直接测定一些水果蔬菜样品中的Vc含量而不需要进行前处理，操作简单干扰少。
附加说明：在测定Vc的国标方法中，荧光法为测定食物中Vc含量的第一标准方法，2,4-二硝基苯肼法作为第二法。
三、实验器材与试剂实验材料桔子实验器材紫外/可见分光光度计；涡旋混合仪；高速冷冻离心机；榨汁器；电热恒温水浴锅；试管与试管架；胶头器长滴管及移液管；250mL烧杯等。
实验试剂1. 120μg/mL Vc贮液：120mg Vc，加适量蒸馏水溶解，然后用1000毫升容量瓶定容。
存4℃备用。
2. 5μg/mL的铜离子溶液：①先配成1000μg/mL的硫酸铜溶液；②取上述硫酸铜溶液5mL，加入1mol/L的醋酸溶液7mL及1mol/L醋酸钠200mL，用蒸馏水定容。
③5×104mol/L的EDTA溶液：36.5mgEDTA溶于适量蒸馏水，250 mL 馏水定容。
④铜离子-EDTA混合液（6.2×105mol/L）：使用前将上述铜离子溶液和EDTA以4:1（v/v）混合而成（现用现配）。
四、实验步骤1. 标准曲线制作取12支试管（大试管）分成2组，按下表进行操作。
维生素C溶液浓度为120μg/mL。
2. 样品测试取一定量的桔子瓣记录克数。
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实验三果蔬中维生素C的定量测定（紫外法）
（4学时）
一、实验目的
1. 学习用铜离子氧化法测定维生素C（Vc）（紫外法）；
2. 了解Vc定量测定的其他方法，如：磷钼酸比色法、碘量法、2,6-二氯酚靛酚滴定法（近年来用全自动电位滴定仪进行电位滴定）、紫外法、2,4-二硝基苯肼测定总抗坏血酸量、高效液相色谱法、毛细管电泳法、荧光法、Flinb近红外分光光度法等。
二、实验原理
抗坏血酸在波长243～267nm处有较高的吸收值，但在样品成分比较复杂时，因有强烈的背景吸收而不适宜用紫外法测定其Vc含量。
用碱加热法等处理法都存在试剂较贵、操作复杂、时问长等一系列问题而不能广泛应用。
利用铜离子消除背景误差，能直接测定一些水果蔬菜样品中的Vc含量而不需要进行前处理，操作简单干扰少。
附加说明：在测定Vc的国标方法中，荧光法为测定食物中Vc含量的第一标准方法，2,4-二硝基苯肼法作为第二法。
三、实验器材与试剂
实验材料
桔子
实验器材
紫外/可见分光光度计；涡旋混合仪；高速冷冻离心机；榨汁器；电热恒温水浴锅；试管与试管架；胶头器长滴管及移液管；250mL烧杯等。
实验试剂
1. 120μg/mL Vc贮液：120mg Vc，加适量蒸馏水溶解，然后用1000毫升容量瓶定容。
存4℃备用。
2. 5μg/mL的铜离子溶液：①先配成1000μg/mL的硫酸铜溶液；②取上述
硫酸铜溶液5mL，加入1mol/L的醋酸溶液7mL及1mol/L醋酸钠200mL，用蒸馏水定容。
③5×104mol/L的EDTA溶液：36.5mgEDTA溶于适量蒸馏水，250 mL 馏水定容。
④铜离子-EDTA混合液（6.2×105mol/L）：使用前将上述铜离子溶液和EDTA以4:1（v/v）混合而成（现用现配）。
四、实验步骤
1. 标准曲线制作
取12支试管（大试管）分成2组，按下表进行操作。
维生素C溶液浓度为120μg/mL。
2. 样品测试
取一定量的桔子瓣记录克数。
挤压成汁，9000 rpm，4℃离心15min，取上清液量其体积并稀释20倍。
1 mL样品稀释液，加入5mL铜离子-EDTA混合液（pH6）于波长267nm处测定其吸收值，结果为J（I）。
取1mL样品稀释液加入4mL铜离子溶液（5μg/mL），50℃水浴中加热15min，以破坏所有Vc，然后加入1mL 5×104 mol/LEDTA溶液于波长267nm处测定其吸收值，结果为J（II）。
3. 计算
样品中Vc含量=
M
S V
J ⨯⨯
∆
⨯
6
其中：6——铜离子-EDTA溶液稀释倍数△J——J(I )-J(II)
V——材料总体积
S——标准曲线斜率
M——样品质量
五、注意事项
由于Vc已被氧化，同时不同植物体内不同程度地含有已被氧化成深色产物的鞣酸等成分，为尽量避免背景物质、有色物质的产生，准确测定Vc含量，实验过程中应尽量迅速操作。
六、实验报告
1. 内容与要求
实验目的与要求、实验原理、主要实验步骤与结果观察、结果与讨论。
2. 思考题
查阅、比较与讨论目前测定Vc的方法，谈谈自己的看法。