实验三动物组织DNA的提取

研磨匀浆
匀浆转入离心管
离心后的匀浆
3. 5mol/L氯化钠：称取292.2gNaCl溶于800ml蒸馏水中，最后定容至 1000ml。
4. 5%SDS溶液：称取5gSDS，溶至100ml的45%乙醇中。
5. 氯仿-异戊醇溶液：按氯仿︓异戊醇=24︓1（V/V）配制。
6. 95%乙醇，75%乙醇。
7. 组织捣碎机（或玻璃匀浆器），移液管，离心机，锥形瓶，天平，容 量瓶，剪刀。
四、实验步骤
1.本实验以鸡或兔的肝脏为材料。实验前动物应饥饿12h以上。 2.称取肝脏4g，放在培养皿中，用剪刀剪碎，放入匀浆器研磨，
加入6ml，氯化钠-柠檬酸钠缓冲液，装在10ml离心管中。将匀 浆物在4000r/min下离心10min。 3.将上述沉淀转入50ml大试管中，加入6ml氯化钠-柠檬酸钠缓 冲溶液、3ml氯仿-异戊醇混合液，0.5mlSDS使其终浓度为0.41%， 手摇15min，然后缓慢加入氯化钠固体（有0.55g），使其终浓 度为1mol/L。慢摇5min是氯化钠充分溶解。 4.将上述混合液在4000r/min离心15min，取上清液于50ml烧杯 中加入等体积冷95%乙醇，边加边用玻璃棒慢慢搅动，将缠绕在 玻璃棒的凝胶状物用滤纸吸取多余的乙醇，即得DNA粗品。 5.显色反应：取上述反应物2ml加入二苯胺试剂2ml沸水浴加热， 观察颜色。
动物生物化学实验报告
——Байду номын сангаас物组 织DNA的提取
班级：动科1143 姓名：李胜浩 学号：201411331312
一．实验目的 掌握从动物组织中分离DNA的基本原理和方法。 二．基本原理 DNA与蛋白质结合成脱氧核糖蛋白，能溶解在纯水或1mol/L 的NaCl溶液中，而不溶于有机溶剂。2.在0.1mol/LNaCl溶液 中，DNA核蛋白的溶解度最小，仅为在纯水中的1%左右，而 RNA核蛋白的溶解度最大；但在1mol/LNaCl溶液中，DNA核蛋 白的溶解度却增大，至少是在纯水中的两倍，而RNA核蛋白 的溶解度却明显下降。3.分离得到DNA核蛋白后，应进一步 十二烷基硫酸钠使蛋白质变性，用含有异戊醇的氯仿除去变 性的蛋白质，以得到游离的DNA。4.DNA分子大而长，其水溶 液呈粘稠状，可用玻璃棒搅缠起来。为了获得大的DNA分子， 在试验中应尽量避免剧烈震荡、用力过猛。
三．实验器材与试剂
1. 0.15mol/LNaCl-0.015mol/L柠檬酸钠溶液（PH7.0）:称取8.77g氯化 钠、4.41g柠檬酸钠，用蒸馏水溶解，调节pH值至7.0稀释至100ml。
2. 0.15mol/LNaCl-0.1mol/LEDTA-Na2溶液（PH8.0）:称取8.77g氯化钠、 37.2g EDTA-Na2溶于800ml蒸馏水中，以0.1mol/L氢氧化钠调至PH8.0， 最后定容至1000ml。