大学《现代分子生物学(第3版)考试重点

1、证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是什么？

Avery肺炎链球菌转化实验(R\S\小鼠-证明基因就是DNA 分子)、Hershey和Chase的噬菌体DNA侵染细菌实验

2、什么是DNA重组技术？

DNA重组技术又称基因工程，目的是将不同的DNA片段（如某个基因或基因的一部分）按照人们的设计定向连接起来，在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达，产生影响受体细胞的新的遗传性状。

DNA重组技术是核酸化学、蛋白质化学、酶工程及微生物学、遗传学、细胞学长期深入研究的结晶，而限制性内切酶、DNA连接酶及其他工具酶的发现与应用则是这一技术得以建立的关键。

3、比较原核生物和真核生物基因组DNA的特点。

原核生物基因组结构特点

（1）基因组小

（2）结构简练

（3）存在含多顺反子的转录单元

（4）有重叠基因（Sanger 发现）

真核生物基因组结构特点

（1）基因组结构庞大

（2）结构较复杂，含大量重复序列

（3）转录单元为单顺反子

（4）功能DNA序列大多被非功能DNA所隔开（外显子和内含子），即基因有不连续性（5）非编码区多

（6）存在C值矛盾

4、原核、真核生物DNA聚合酶的特性。

原核生物中的DNA聚合酶(大肠杆菌）

聚合酶Ⅰ：主要是对DNA损伤的修复；以及在DNA复制时切除RNA引物并填补其留下的空隙。

聚合酶Ⅱ：修复紫外光引起的DNA损伤

聚合酶Ⅲ：DNA 复制的主要聚合酶，还具有3’-5’外切酶的校对功能，提高DNA复制的保真性

真核生物中的DNA聚合酶

αβγδε

定位细胞核细胞核线粒体细胞核细胞核

3‘-5’外切酶活性- - + + +

功能引物合成修复作用线粒体DNA的复制核DNA的复制RNA引

物去掉后把缺口补全5、细胞通过哪几种修复系统对DNA损伤进行修复？简述DNA错配修复的过

程。

错配修复的过程：一：根据母链甲基化原则找出错配碱基①发现碱基错配②在水解A TP的作用下，MutS,MutL与碱基错配位点的DNA双链结合③MutS—MutL在DNA双链上移动，发现甲基化DNA后由MutH切开非甲基化的子链

二：碱基错配修复过程：当错配碱基位于切口3‘下游端时，在MutL—MutS、解链酶Ⅱ、DNA外切酶Ⅵ或RecJ核酸酶的作用下，从错配碱基3‘下游端开始切除单链DNA直到原切口，并在Pol Ⅲ和SSB的作用下合成新的子链片段。若错配碱基位于切口的5’上游端，则在DNA外切酶Ⅰ或Ⅹ的作用下，从错配碱基5‘上游端开始切除单链DNA 直到原切口，再合成新的子链片段（详见课本p53）

6、基因：启动子：增强子：全酶：核心酶：核酶：三元复合物：SD序列：

7、比较原核生物和真核生物mRNA的特点。

原核生物mRNA的特征：（1）半衰期短（2）多以多顺反子的形式存在

（3）5’端无“帽子”结构，3’端没有或只有较短的poly（A ）结构。

（4）原核生物常以AUG（有时GUG，甚至UUG）作为起始密码子

真核生物mRNA的特征：（1）5’端存在“帽子”结构

（2）多数mRNA 3’端具有poly（A ）尾巴（组蛋白除外）

（3）以单顺反子存在（4）而真核生物几乎永远以AUG作为起始密码子。

8、真核生物的原始转录产物需要经过哪些加工才能成为成熟的mRNA？

答：（1）、在5’端加帽，5’端的一个核苷酸总是7-甲基鸟核苷三磷酸（m7Gppp）。

（2）、3’端加尾，多聚腺苷酸尾巴。准确切割，加poly（A）

（3）、RNA的剪接，参与RNA剪接的物质：snRNA、snRNP

（4）、RNA的编辑，编辑（editing）是指转录后的RNA在编码区发生碱基的突变、加入或丢失等现象。

（5.）、RNA的再编码，mRNA有时可以改变原来的编码信息，以不同的方式进行翻译（6.）、RNA的化学修饰，人细胞内rRNA分子上就存在106种甲基化和95种假尿嘧啶产物。

9、原核启动子和真核启动子的构成

原核生物启动子结构：

TA TA区(-10区）:酶的紧密结合位点（富含AT碱基，利于双链打开）

TTGACA区（-35区）：提供了RNA聚合酶全酶识别的信号

●真核生物启动子

(1)核心启动子:定义：指保证RNA聚合酶Ⅱ转录正常起始所必需的、最少的DNA序列，包括转录起始位点及转录起始位点上游TATA区(TATA 常在-25bp左右，相当于原核的-10序列T85A97T93A85A63A83A50)

`作用：选择正确的转录起始位点，保证精确起始

(2)上游启动子元件:包括CAAT盒（CCAA T）和GC盒（GGGCGG）等(CAAT：-70 - -80bp GGGCGG：-80 - -110bp)

` 作用：控制转录起始频率。

10、遗传密码有哪些特性？理解掌握其摆动性

连续性、简并性、通用性与特殊性、摆动性

转运氨基酸的tRNA上的反密码子需要通过碱基互补与mRNA上的遗传密码子反向配对结合，在密码子与反密码子的配对中，前两对严格遵守碱基配对原则，第三对碱基有一定的自由度，可以“摆动”，这种现象称为密码子的摆动性。（在密码子中，是第三对碱基，在反密码子中，是第一对碱基）

11、tRNA中起作用的重要两个臂是什么臂？

tRNA有两个关键部位：

●3’端CCA：接受氨基酸，形成氨酰-tRNA。

●与mRNA结合部位—反密码子部位

12、.肽链延伸由许多循环组成，每加一个氨基酸就是一个循环，每个循环包括哪些步骤？

肽链延伸由许多循环组成，每加一个氨基酸就是一个循环，每个循环包括：AA-tRNA与核