基因工程习题及参考答案01

基因工程习题及参考答案01

绪论部分

一、填空题

1．基因工程是年代发展起来的遗传学的一个分支学科。基因工程技术的诞生，使人们从简单地利用现存的生物资源进行诸如发酵、酿酒、制醋和酱油等传统的生物技术时代，走向的时代。

2．随着基因工程技术的诞生和发展，人类可以通过、和等三种主要生产方式，大量取得过去只能从组织中提取的珍稀蛋白，用于研究或治病。3．Cohen 等在年构建了第一个有功能的重组DNA 分子。

4．基因工程的两个基本特点是：(1) ，(2) 。

5．基因克隆中三个基本要点是：；和。6．年，美国斯坦福大学等在上发表了题为：“将新的遗传信息插入SV40 病毒DNA 的生物化学方法：含有λ噬菌体基因和E．coli 半乳糖操纵子的环状SV40 DNA”的论文，标志着基因工程技术的诞生。这一工作具有划时代的意义，但是他们并没有。

7．克隆基因的主要目的有四：(1) ；(2)；

(3) ；(4) 。

二、选择题(单选或多选)

( )1．因研究重组DNA 技术而获得诺贝尔奖的科学家是

(a)A．Komberg (b)W．Gilbert (c) P．Berg (d)B．McClintock

( )2．第一个作为重组DNA 载体的质粒是( )

（a）pBR322 (b)ColEl (c)pSCl01 (d)pUCl8

( )3．第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是( )

(a)EcoRI (b)EcoB (c)EcoC (d)EcoRⅡ

( )4．P Berg 构建SV40 二聚体时用了几种不同的酶，其中( )的作用是制造隐蔽的5’端。

(a)末端转移酶(b)λ外切核酸酶(c)外切酶Ⅲ(d)DNA 连接酶

三、简答题

1．为什么说基因工程技术是60 年代末70 年代初发展起来的?

2．重组DNA 的含义是什么?

3．如何理解基因工程的两个特点?

4．在Cohen 构建有生物功能重组体的第一步实验中，用EcoRI 切割了R6-5 质粒，然后转化E．coli C600，在卡那霉素抗性子板上筛选到了pSCl02，它是由R6-5 的三个EcoRI 片段组成，请推测这个质粒具有什么遗传特性?

5．什么是动物乳腺生物反应器?

四、问答题

1．S．N Cohen 于1973 年构建了三个重组体，pSCl02，pSCl05，pSCl09 请说明这三个重组体是如何获得的?各说明了什么?

2．基因克隆是如何使含有单个基因的DNA 片段得到纯化的?

五、概念题

1．遗传工程2．生物技术3．基因工程4．细胞工程5．细胞分泌工程

6．酶工程7．蛋白质工程8．发酵工程9．移动基因10．断裂基因

11．重叠基因12．假基因

绪论部分(参考答案)

一、填空题

1．70；按人们的需要而定向地改造和创造具有新的遗传性品种

2．细菌发酵；真核细胞培养；乳腺生物反应器

3．1973

4．(1)分子水平上的操作；(2)细胞水平上的表达

5．克隆基因的类型；受体的选择；载体的选择

6．1972；P．Berg；Proc．Natl．Acad．Sci．USA；证明体外重组的DNA 分子具有生物学功能

7．(1)扩增DNA；(2)获得基因产物；(3)研究基因表达调控；(4)改良生物的遗传性

二、选择题(单选或多选)

1．C；2．C；3．a；4．b

三、简答题

1．答：这是因为：(1)1967 年发现了连接酶；(2)大肠杆菌的转化技术是1970 年获得突破；

(3)限制性内切核酸酶的分离始于1970 年；(4)Berg 在1972 年构建了第一个重组的

DNA 分子。

2．答：将一个生物的DNA 片段插入到一个载体中，并引入到另一生物体中进行繁殖。3．答：基因工程的两个基本特点是分子水平的操作和细胞水平的表达。分子水平的操作包括DNA 分离、切割和连接(还有其他一些DNA 的修饰等)。由于体外重组DNA 的最终目的是要改变生物的遗传性，所以分子水平的操作和细胞水平的表达是基因工程的两个最基本的特点。

4．答：至少可说明两点：(1)pSC 102 含有复制起点，是一个独立的复制子；(2)重组DNA 分子中的卡那霉素抗性基因得到了表达。

5．答：能够分泌乳汁的转基因动物生产其他来源的基因产品，并通过乳腺分泌出来。

四、问答题

1．答：

pSCl02：用EcoRI 切割R6-5，混合转化大肠杆菌，在卡那霉素抗性平板上选择了一个克隆，并从该克隆中分离了重组质粒DNA，命名为pSCl02。该质粒是由质粒R 6-5的EcoRI 酶切片段Ⅲ、V 和Ⅷ在体内连接的，说明可以利用体内连接构建重组体。

pSCl05：作者分别用EcoRI 切割质粒pSC 101、pSC 102,然后加入DNA 连接酶进行连接后转化大肠杆菌，在四环素和卡那霉素双抗性的平板上筛选到pSC 105。说明用质粒作为载体，体外连接可得到有功能的重组体。

pSCl09：pSC 101 与RSF 1010 的共整合，即用EcoRl 分别切割这两个质粒，然

后在体外进行重组。说明两个独立的复制子体外重组后仍具有生物功能。

2．答：

大分子量的DNA 会含有许多特殊限制性内切核酸酶的限制位点，因此用一种限制酶处理一完整染色体或整个基因组会产生许多不同的DNA 片段，每一个片段带有基因组的一个不同的基因或一个不同的小片段。当全部片段与用同种限制酶处理过的载体分子混合时(图A14.1)，每个片段将插入一个不同的载体分子(比如一个质粒)，同样地，当用这些质粒转化宿主细胞时，每个宿主细胞将只接收一个质粒DNA分子而筛选出的含重组质粒的每个菌落实际上会含有某一特异的供体DNA 片段的多个拷贝。一旦带有待研究的特定基因的克隆被确认了，此重组DNA 分子可从宿主细胞中提取出来进行纯化。