体外诊断试剂分析性能评估-线性范围
体外诊断试剂分析性能评估-线性范围
线性范围是指检测方法测量待检测物质时，能够提供一段具有线性关系的测量范围。而 灵敏度则是指检测方法的最小检测物质的能力。
线性范围的重要性
质量控制
其它指标如准确性、精密度等都建立在线性关系的基础上，因此线性范围的确定对质量控制 至关重要。
可靠性
如果测试物质的浓度高于线性范围，分析结果可能会低于实际值；如果浓度低于线性范围， 则可能会高于实际值，影响结果可信度。
发展前景
未来，该技术将继续发展， 以更好地满足人们对生活质 量和健康的需求。
Im proving the m etho d
改进分析方法，增加线性 范围的可靠性和精度。
M etho d com parison
比较分析方法的不同，选 择最适合的实验方法，以 确定线性范围。
总结
方法的优点
确定分析方法的线性范围， 保证分析结果的可靠性和可 比性。
应用价值
该方法广泛应用于医疗、环 境保护、食品安全等领域。
确定线性范围，分析误差和 数据可靠性。
实验条件设置
1
参比物质的选择
根据待测分析物质，选择与目标物
样品组成的影响
2
分析范围相近的参比物质，评估分 析方法的线性范围。
研究待测样品中其他成分对分析结
果的影响，以找到影响线性范围的
因素。
3
实验条件的确定
根据分析物质的特点，选择合适的 实验条件，如适当的反应时间ห้องสมุดไป่ตู้温 度。
数据分析及结果解读
标准曲线的绘制
绘制样品浓度与测量结果的标准曲线，并计算回归方程。
测定未知样品浓度
使用标准曲线计算出未知样品的浓度。
结果的解读
体外诊断试剂分析性能评估线性范围课件
文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
实验样本的基本要求和制备方法：
确定样本类型：为避免基质效应对结果的影响，进行线性评价时所选用的样本应与临床 实验样本相似，但不可采用含有对测定方法具有明确干扰作用的样本，如溶血、脂血、 黄疸或含有某些特定药物的样本。理想样本为分析物浓度接近预期测定上限的病人混合 血清，可用其他病人样本将其稀释为预定浓度。 EP6-A中建议应尽可能按以下顺序进行样本种类的选择： ①病人混合血清； ②用适当稀释液稀释的病人血清； ③添加分析物的病人样本； ④用处理过的低浓度物质或处理过的血清物质稀释的病人血清； ⑤商业质控品/校准品/线性物质； ⑥使用生理盐水稀释的样本； ⑦稀释不足或过度稀释的商业质控品； ⑧水溶液； ⑨其他溶剂的溶液。
C
按照设计方法进行检测
(4.8)
选择Sy,x最小的最适 非线性模型(5.3.3)
找出问题并解 决
C
数据点在XY轴上并目测结果(5.1)
明显呈非 线性关系？ (5.1)
否
离群值？ （5.1，5.2）
是
找到问题并
纠正
两个或以 上
有
多少？
(5.1,5.2)
计算非线性和线性模 型在每个浓度处的差 值(5.3.3)
04
03
05
02
06
01
07
01 基本原则 02 样本要求 03 数据收集 04 数据检查 05 数据分析 06 数据修正 07 确定线性范围
文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
线性范围评估的基本原则
（1）实验操作人员应熟悉方法原理与操作，能对 样本进行正确处理，确保仪器工作状态正常，采 用适当的校准品对仪器进行校准。 （2）仪器的各项性能指标（如精密度）合格，不 存在明显的携带污染等。 （3）应使用同批号试剂及校准品。
体外诊断试剂分析性能评估系列指导原则(征求意见稿)
附件：《体外诊断试剂分析性能评估系列指导原则（征求意见稿）》目录1.体外诊断试剂分析性能评估指导原则――编制说明2.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——检测限3.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——线性范围4.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——可报告范围5.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——准确度（回收实验）6.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——准确度（方法学比对）7.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——精密度8.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——干扰实验9.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——稳定性10.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——参考值（参考区间）附件1：体外诊断试剂分析性能评估指导原则编制说明《体外诊断试剂注册管理办法（试行）》颁布后，体外诊断试剂产品的注册过程中要求提供申报产品的分析性能评估资料，产品性能评估是产品研发、制定产品标准等过程的重要技术支持研究过程，并可能对产品的质量造成一定的影响。
目前国际上对体外诊断试剂的性能评估通常是以美国临床实验室标准化组织（Clinical and Laboratory Standards Institude以下称为CLSI）的相关标准为依据，也是美国FDA推荐采用的评价标准，但我国还没有相关的标准及指导原则的要求。
为进一步明确体外诊断试剂分析性能评估的技术要求，我中心组织有关专家起草产品分析性能评估指导原则，以明确体外诊断试剂产品性能评估的技术要求。
体外诊断试剂产品性能评估包括检测限、线性范围、可报告范围、准确度（回收实验）、准确度（方法学比较）、精密度、干扰实验、稳定性、参考区间共九个项目。
起草的主要依据CLSI发布的以下标准:1. C28-A2: How to define and determine reference intervals in the clinical laboratory; ApprovedGuideline-Second Edition.2. EP5-A: Evaluation of precision performance of clinical chemistry devices; Approved Guideline.3. EP6-A: Evaluation of the linearity of quantitative measurement procedures; A Statistical Approach; Approved Guideline.4. EP7-A: Interference testing in clinical chemistry; Approved Guideline.5. EP9-A2: Method comparison and bias estimation using patient samples; Approved Guideline-Second Edition.每项性能的主要研究方法均采用以上标准和国内实际采用的评价方法相结合的方法。
体外诊断试剂分析性能评估系列指导原则
附件：《体外诊断试剂分析性能评估系列指导原则（征求意见稿）》目录1.体外诊断试剂分析性能评估指导原则――编制说明2.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——检测限3.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——线性范围4.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——可报告范围5.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——准确度（回收实验）6.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——准确度（方法学比对）7.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——精密度8.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——干扰实验9.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——稳定性10.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——参考值（参考区间）附件1：体外诊断试剂分析性能评估指导原则编制说明《体外诊断试剂注册管理办法（试行）》颁布后，体外诊断试剂产品的注册过程中要求提供申报产品的分析性能评估资料，产品性能评估是产品研发、制定产品标准等过程的重要技术支持研究过程，并可能对产品的质量造成一定的影响。
目前国际上对体外诊断试剂的性能评估通常是以美国临床实验室标准化组织（Clinical and Laboratory Standards Institude以下称为CLSI）的相关标准为依据，也是美国FDA推荐采用的评价标准，但我国还没有相关的标准及指导原则的要求。
为进一步明确体外诊断试剂分析性能评估的技术要求，我中心组织有关专家起草产品分析性能评估指导原则，以明确体外诊断试剂产品性能评估的技术要求。
体外诊断试剂产品性能评估包括检测限、线性范围、可报告范围、准确度（回收实验）、准确度（方法学比较）、精密度、干扰实验、稳定性、参考区间共九个项目。
起草的主要依据CLSI发布的以下标准:1. C28-A2: How to define and determine reference intervals in the clinical laboratory; Approved Guideline-Second Edition.2. EP5-A: Evaluation of precision performance of clinical chemistry devices; Approved Guideline.3. EP6-A: Evaluation of the linearity of quantitativemeasurement procedures; A Statistical Approach; Approved Guideline.4. EP7-A: Interference testing in clinical chemistry; Approved Guideline.5. EP9-A2: Method comparison and bias estimation using patient samples; Approved Guideline-Second Edition. 每项性能的主要研究方法均采用以上标准和国内实际采用的评价方法相结合的方法。
体外诊断试剂分析性能评估-线性范围 ppt
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7
1.1实验样本的基本要求
（1）样本基质应与临床实验样本相似， 但不可采用含有对测定方法具有明确干 扰作用物质的样本，如溶血、脂血、黄 疸或含有某些特定药物的样本。进行血 清学标志物检测时，理想的样本为分析 物浓度接近预期测定上限的混合人血清。
7、对数据组进行精密度检验
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12
4.结果报告
线性范围报告的具体格式不要求，但至 少应包括以下几方面：
（1）进行线性评价的实验室或生产厂家名 称。
（2）被评价的方法或试剂名称，批号。
（3）测定项目。
（4）线性范围（如为二阶线性应包括临床 允许误差）。
（5）如可能应标出测定项目的医学决定水
平及在此水平处的临床允许误差。
医学决定水平
指在诊断及治疗工作时，对疾病诊断或治疗起关键作用的某一被测成分的浓度，临床 上必须采取措施的检测水平。 例（仅供参考）：
白细胞计数
参考值（4～10）×109/L
决定水平临床意义及措施
0.5×109/L低于此值，病人有高度易感染性，应采取相应的预防性治疗及预防感染措施。
3×109/L低于此值为白细胞减少症，应再作其他试验，如白细胞分类计数、观察外周血涂 片等，并应询问用药史。`
11×109/L高于此值为白细胞增多，此时作白细胞分类计数有助于分析病因和分型，如果需 要应查找感染源。
30×109/L高于此值，提示可能为白血病，应进行白细胞分类，观察外周血涂片和进行骨髓 检查。
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9
1.2实验样本的制备方法
（1）不同浓度水平的样本可通过将高浓度 样本与低浓度样本进行倍比稀释得到，注意 在进行液体吸取时应选择精密度与准确性好 的移液装置。制备时应将样本完全混合并避 免蒸发或其他使样本变质的情况。每份样本 的浓度与体积单位应统一。
（整理）体外诊断试剂分析性能评估系列指导原则.
（整理）体外诊断试剂分析性能评估系列指导原则.附件：《体外诊断试剂分析性能评估系列指导原则（征求意见稿）》目录1.体外诊断试剂分析性能评估指导原则――编制说明2.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——检测限3.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——线性范围4.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——可报告范围5.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——准确度（回收实验）6.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——准确度（方法学比对）7.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——精密度8.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——干扰实验9.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——稳定性10.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——参考值（参考区间）附件1：体外诊断试剂分析性能评估指导原则编制说明《体外诊断试剂注册管理办法（试行）》颁布后，体外诊断试剂产品的注册过程中要求提供申报产品的分析性能评估资料，产品性能评估是产品研发、制定产品标准等过程的重要技术支持研究过程，并可能对产品的质量造成一定的影响。
目前国际上对体外诊断试剂的性能评估通常是以美国临床实验室标准化组织（Clinical and Laboratory Standards Institude以下称为CLSI）的相关标准为依据，也是美国FDA 推荐采用的评价标准，但我国还没有相关的标准及指导原则的要求。
为进一步明确体外诊断试剂分析性能评估的技术要求，我中心组织有关专家起草产品分析性能评估指导原则，以明确体外诊断试剂产品性能评估的技术要求。
体外诊断试剂产品性能评估包括检测限、线性范围、可报告范围、准确度（回收实验）、准确度（方法学比较）、精密度、干扰实验、稳定性、参考区间共九个项目。
起草的主要依据CLSI发布的以下标准:1. C28-A2: How to define and determine reference intervals in the clinical laboratory; Approved Guideline-Second Edition.2. EP5-A: Evaluation of precision performance of clinical chemistry devices; Approved Guideline.3. EP6-A: Evaluation of the linearity of quantitative measurement procedures; A Statistical Approach; Approved Guideline.4. EP7-A: Interference testing in clinical chemistry; Approved Guideline.5. EP9-A2: Method comparison and bias estimation using patient samples; Approved Guideline-Second Edition.每项性能的主要研究方法均采用以上标准和国内实际采用的评价方法相结合的方法。
体外诊断试剂分析性能评估(准确度-方法学比对)技术审查指导原则
附件5：体外诊断试剂分析性能评估（准确度-方法学比对）技术审查指导原则一、前言准确度评估资料是评价拟上市产品有效性的重要依据，也是产品注册所需的重要申报资料之一。
定量检测方法的方法学比对试验是评估准确度的方法之一，可以与参考方法或临床公认质量较好的已上市产品进行比对。
本指导原则基于国家食品药品监督管理局《体外诊断试剂注册管理方法（试行）》的有关要求，参考CLSI有关标准，对采用方法学比对进行准确度评估的实验方法和数据处理方法进行了原则性要求。
其目的是为生产企业采用方法学比对进行准确度评估并准备准确度评估资料提供原则性指导，也为注册管理部门审核该部分分析性能评估资料提供技术参考。
由于体外诊断试剂产品发展速度快、专业跨度大，国家食品药品监督管理局将根据体外诊断试剂发展的需要，适时对本指导原则进行修订。
二、适用围本指导原则适用于首次申请注册、申请许可事项变更的用于定量检测的体外诊断产品。
因体外诊断产品评价是将仪器、试剂、质控品、校准品等作为一个系统进行评价，因此方法学比对的评价采用系统的概念进行描述。
如特殊产品不适用于本指导原则，可进行详细说明并采用适当的方法进行准确度评价。
三、基本要求（一）方法学比对实验的基本要求1.操作者应熟悉待评价系统和比对系统的操作。
2.编写系统标准操作规程，其中包括校准程序和室质控程序，采用适宜的校准品、质控品并保持仪器处于正常状态。
3.比对系统的选择比对系统应具有以下条件：（1）具有比待评价系统更好的精密度；（2）同待评价系统检测结果具有相同的单位；（3）如有参考方法应具有与参考方法已知的偏差。
比对系统应该选择正确性经过验证的系统，根据实际条件，选择的顺序如下：参考方法、原装系统、配套系统、经过验证的非配套系统。
4.待评价系统的处理进行方法学对比实验前，应该对待评价系统进行初步评价，并且对待评价系统进行精密度与线性的评价（参考相关标准），只有在以上评价完成并且符合相关标准要求后，才可进行方法学对比实验。
体外诊断试剂分析报告性能评估系列指导原则
附件：《体外诊断试剂分析性能评估系列指导原则（征求意见稿）》目录1. 体外诊断试剂分析性能评估指导原则——编制说明2. 体外诊断试剂分析性能评估指导原则——检测限3. 体外诊断试剂分析性能评估指导原则——线性范围4. 体外诊断试剂分析性能评估指导原则一一可报告范围5. 体外诊断试剂分析性能评估指导原则——准确度（回收实验）6. 体外诊断试剂分析性能评估指导原则——准确度（方法学比对）7. 体外诊断试剂分析性能评估指导原则---- 精密度8. 体外诊断试剂分析性能评估指导原则——干扰实验9. 体外诊断试剂分析性能评估指导原则——稳定性10. 体外诊断试剂分析性能评估指导原则——参考值（参考区间）附件1 :体外诊断试剂分析性能评估指导原则编制说明《体外诊断试剂注册管理办法（试行）》颁布后，体外诊断试剂产品的注册过程中要求提供申报产品的分析性能评估资料，产品性能评估是产品研发、制定产品标准等过程的重要技术支持研究过程，并可能对产品的质量造成一定的影响。
目前国际上对体外诊断试剂的性能评估通常是以美国临床实验室标准化组织（Clinical and Laboratory Standards Institude 以下称为CLSI）的相关标准为依据，也是美国FDA推荐采用的评价标准，但我国还没有相关的标准及指导原则的要求。
为进一步明确体外诊断试剂分析性能评估的技术要求，我中心组织有关专家起草产品分析性能评估指导原则，以明确体外诊断试剂产品性能评估的技术要求。
体外诊断试剂产品性能评估包括检测限、线性范围、可报告范围、准确度（回收实验）、准确度（方法学比较）、精密度、干扰实验、稳定性、参考区间共九个项目。
起草的主要依据CLSI发布的以下标准：1. C28-A2: How to define and determine reference intervals in the clinical laboratory; Approved Guideline-Second Edition.2. EP5-A: Evaluation of precision performance of clinicalchemistry devices; Approved Guideline.3. EP6-A: Evaluation of the linearity of quantitative measurement procedures; A Statistical Approach; Approved Guideline.4. EP7-A: Interference testing in clinical chemistry; Approved Guideline.5. EP9-A2: Method comparison and bias estimation using patient samples; Approved Guideline-Second Edition.每项性能的主要研究方法均采用以上标准和国内实际采用的评价方法相结合的方法。
体外诊断试剂分析性能评估可报告范围
CYSC试剂盒性能评估（可报告范围）一 材料与方法1.1材料1.1.1试剂盒及校准品:待评试剂（颐康公司配制CYSC测定试剂盒（自带标准品与质控品））批号： 有效期：1.1.2 样本（1）低值样本：将待测样本（含被分析物）用5%牛血清白蛋白生理盐水溶液进行稀释，产生接近于方法线性范围低限浓度水平的样本，一般为5个浓度水平，浓度水平间隔应小于线性范围低限的10%。
（2）高值样本：选取含被测物的浓度为10.1mg/L样本，用5%牛血清白蛋白生理盐水溶液或测定方法要求的稀释液对高值待测样本进行稀释，并记录稀释倍数。
2.1实验方法在一次运行中将低值样本重复测定10次，高值稀释样本重复测定3次。
二数据记录可报告范围（低限）数据记录表浓度1 浓度2浓度3浓度4 浓度51 0.15 0.17 0.19 0.12 0.252 0.38 0.43 0.36 0.55 0.353 0.01 0.03 0.47 0.07 0.194 0.14 0.38 0.17 0.47 0.085 0.29 0.11 0.19 0.31 0.586 0 0.29 0.51 0.09 0.327 0.43 0.49 0.17 0.36 0.178 0.32 0.43 0.02 0.38 0.239 0.32 0 0 0.18 0.1110 0.06 0.12 0.39 0.19 0.23AVE 0.21 0.245 0.247 0.272 0.251 SD 0.157409586 0.18090.17730.1665 0.1426 CV 0.749569457 0.73830.71790.6122 0.5682可报告范围（高限）数据记录浓度1 浓度2 浓度31 5.38 2.31 1.012 5.56 2.07 0.963 4.89 1.86 0.94A VE 5.27667 2.08 0.97稀释倍数 2 4 8还原浓度10.54 8.32 7.76理论浓度10.1 8.89 9.4相对偏差（%） 4.48 6.41 17.44结论：本试剂盒可报告范围低限为0.251mg/L，可最大的稀释倍数为4倍，结合试剂盒的线性上限为8mg/L，可测定的最大范围为32mg/L。
体外诊断试剂性能分析评估
体外诊断试剂性能分析评估体外诊断试剂性能评估指标体外诊断试剂是疾病诊断与治疗的重要辅助手段。
一个新开发的试剂能否真正面市，除了进行反应模式和体系等优化外，合理的性能分析与评估，是必经的程序，也是质量保障的基础。
通常，体外诊断试剂产品性能评估包括检测限、线性范围、可报告范围，准确度，精密度，干扰实验，稳定性，参考区间。
1.检测限检测限是指检测方法可检测出的最低被检测量浓度，也称为分析灵敏度。
分析灵敏度：一般用95％可信限计算：重复测定空白样本20次，计算20次反应测得的均值（X）和标准差（SD），以X+2SD（夹心法）或X-2SD（竞争法）计算出相应的浓度，即为体外诊断试剂的分析灵敏度，也是注册资料所需提供的内容。
功能灵敏度：将低值样本倍比稀释后重复测定10次以上，计算每个低值样本检测信号的均值、标准差和变异系数（CV），选择CV大于20％时所对应的低值样本平均浓度，这就是体外诊断试剂的功能灵敏度。
2.线性范围线性范围是指检测系统最终输出值（浓度或活性）与被分析物的浓度成正比的范围。
建立一种定量测定方法的线性范围，需在预期测定范围内选择7-11个浓度水平。
准备足量的高值（H）样本和低值（L）样本，经不同比例混合配制成中间浓度样本，比例关系可按等间距或其他确定的比例。
其中，有几个重要的浓度水平需要考虑：1）最低分析浓度或线性范围下限；2）不同的医学决定水平值；3）最高分析浓度或线性范围上限。
3.可报告范围可报告范围是指对检测有意义的待测物浓度范围。
可报告范围低限：以方法性能指示的CV值为可接受界值，由数据中选取CV值等于或小于可接受界值的最低浓度水平作为可报告范围低限。
可报告范围高限：当测定值超出线性范围上限时，此测定值应视为不准确值，需要对标本进行稀释。
由于基质效应的影响，任何标本并非可以做无止境的稀释。
也就是说，每一个实验项目有其最大稀释倍数。
这个最大稀释倍数与线性范围上限的乘积即为可报告范围高限。
如何评估体外诊断试剂盒线性范围
如何评估体外诊断试剂盒线性范围线性范围评估资料是评价拟上市试剂盒有效性的重要依据，也是诊断试剂盒注册所需的重要申报资料之一。
目前我国定量体外诊断试剂盒注册检验包括线性范围、准确度、特异性、最低检出限、精密度等指标。
本文根据《体外诊断试剂分析性能评估系列指导原则》（征求意见稿）对体外诊断试剂盒线性范围评估进行分析。
要求：体外诊断试剂盒校准品的浓度应覆盖整个厂家声明的线性范围的系列浓度。
绘制散点图及离群值的发现和处理：散点图的绘制对于线性范围评价非常重要，其作用包括：①初步获得数据的线性关系（直线、抛物线或S型曲线等），以初步核实企业标准中声明的线性回归方程的正确性。
②观察数据的精密性，当与其他浓度相比某个浓度水平精密度较低时，特别是发生在声明的线性范围的两端，应注意线性范围是否过宽的情况；发现离群值，明显的离群值可以通过观察散点图被容易的发现。
若只有一个离群值，则可剔除，不必重复实验，但当离群值多于一个时，应仔细分析，找出问题所在并重复实验，然后使用新数据进行分析。
线性回归分析：使用企业声明的方程，通过适当的软件，对数据进行回归分析，置信水平一般为双侧0.05，计算方程的相关系数r或确定系数R2，应符合企业注册标准中的规定。
根据行业标准，相关系数r的绝对值一般应不小于0.98。
当散点图明显提示拟合的曲线可能过原点时，或数据计算是已扣除零点样本读数时，应注意检验回归方程中的截距项。
利用样本对体外诊断试剂盒线性范围评价要求：定量体外诊断试剂产品注册检验线性评价涉及的样本通常是临床样本、企业内部校准品、国家参考品或国际标准品等。
样本应不少于5个、能覆盖整个厂家声明的线性范围，每个浓度水平样本测定应不少于2次。
各样本可以是绝对浓度或相对值来标识。
理想的情况下，应使用高值和低值临床样本按比例混合得到系列浓度的样本，这主要考虑的是基质效应对检测结果的影响。
绘制散点图及离群值的发现和处理：同校准品的线性范围评价。
体外诊断试剂分析性能评估线性范围
C
符合要 求
该方法 呈线性
停顿
缩小范围？(5.3.3) 能够
不行
该方法是非线 性
舍去非线性显
著处低或高值
B
点(5.3.3)
停顿
第14页
举例: Ca检测: 试验室准备样本和对6个不一样浓度水平标本进行
重复测定，假定试验室设定Ca重复性和非线性误差均为
0.20mg/dL
标本
测量值1
测量值2
均值
1
4.7
如非线性系数b2.b3与0比较，经t检验（p>0.05）， 存在线性关系，不精密度满足条件时，则分析完 成。 如二次多项式模型非线性系数b2，或三次多项式 模型b2或b3中任一个与0比较，有显著差异 （p<0.05），则该组数据存在非线性。
体外诊断试剂分析性能评估线性范围
第13页
设计方法和确定误差目 标（非线性和重复性） (6.3)
138
138.5
3
269
273
271.0
4
337
343
340.0
5
409
404
406.5
从表中数据能够看出，没有显著离群值，但在低水平浓度处重复性很好，
而在高浓度水平处两次测量结果差异较大。重复性差异检测以下:
标本号 1 2 3 4 5
均值 26.35 138.5 271.0 341.0 406.5
体外诊断试剂分析性能评估线性范围
图C4: Ca线性评价差值点图—1-5稀释
第20页
举例
在试验室内准备五个等距浓度标本测定IgM，每标本重复测定两次。假定 试验室设定重复性和线性允许误差范围分别为2%和5%。随机次序测试结 果以下:
体外诊断试剂分析性能评价
即该试剂盒的检测限为0.13ug/ L
2020/11/20
做法二
依据美国临床实验室标准化委员会（NCCLS） EP17-A文件指导，进行检测下限评估。制备几份 不同浓度梯度的样品进行检测，建议倍比稀释， 每个浓度的标本作多个复管（n≥16），分析各标 本的检出率（即阳性率）。以标本浓度值gin的Sigmoidal Fit方法拟合成曲线，根据软 件给出的曲线公式计算出当检出率为95%时所对 应的浓度，此浓度即为试剂的检测下限。
2020/11/20
表1 甲状腺球蛋白分析灵敏度实验结果
2020/11/20
空白”0”组的均值为0.098,标准差为0.0137。这 里采用99.7%的可能性来计算检测低限。如上所 述：
LLD= 0.098+3×0.0137=0.139 实际上,若以空白吸光度均值为检测的零点,那
么有99.7%的可能性,每次只做一个空白时,出现最 高的空白吸光度较该空白吸光度均值高0.0137的 3倍,即0.041A。这个吸光度相当于样品具有的甲 状腺球蛋白的量即为本法的检测低限。
2020/11/20
甲状腺 蛋白
（ug/l)
0.25
Ā(A) 0.07625
0.5
0.1
1
0.1228
2
0.1776
4
0.26
8
0.385
左侧的实验结果的实验结果可以做 出该检测系统在低浓度范围的标准曲线。
0.25ug/L组减去空白后的吸光度均 值为0.07625A.假定这段范围内甲状腺 球蛋白量和吸光度间呈线性.因此 0.041A相当于0.25× 0.041 =0.13ug/ L
2020/11/20
资料通用要求
体外诊断试剂分析性能评价
由此可见，分析性能评价在IVD中的重要性， SFDA是参照FDA和欧盟的标准移植过来的， 并更接近于FDA的要求。 SFDA医疗器械管理与国际接轨非常快，体 外诊断试剂划归医疗器械管理后，一个明 显的变化就是规范性加强了，但医疗器械 行业发展水平远不如药品，这种矛盾在现 阶段无疑会造成一种冲击。 解决办法：逐渐引导，逐步接轨
体外诊断试剂 分析性能评价
产品注册和知识产权部 朱坤
2020/12/11
Байду номын сангаас
定义 分析灵敏度 线性范围 测定准确度 分析特异性 精密度 干扰试验 比对试验
2020/12/11
目录
定义
《体外诊断试剂注册管理办法》第二十条提及：产品性能 评估是指对体外诊断试剂分析性能和临床性能的评估。分 析性能主要包括分析灵敏度、分析特异性、测定范围、测 定准确性、批内不精密度、批间不精密度等。 美国FDA：对于一个新的IVD产品，上市前许可（510k)考 察是以分析性能评价作为基础的，因为临床性能评价不总 是被要求的，其包括新诊断产品的偏倚和不准确度、不精 密度、分析特异性、分析灵敏度等。 CE认证：分析性能的要求包括灵敏度、特异性、准确度、 可重复性、检测限度和测量范围等已知具有关联性有必要 控制的信息
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2020/12/11
相关指导性原则
美国国家临床实验室标准化委员会（NCCLS）的系列指 导性文件，是关于如何对体外诊断产品进行分析性能评估 的试验方法。建议大家了解、学习一下NCCLS的系列指 导性文件，逐渐采用文件中推荐的试验方法进行质量研究， 使对产品分析性能评估的试验过程严谨、规范，以提高产 品分析性能评估结果的可靠性。目前是审评中心的建议， 非强制性，是逐渐的趋势。 卫生部的部颁标准WS/T-1999临床化学体外诊断试剂盒质 量检验总则 国家标准的报批稿临床化学体外诊断试剂(盒) 通用技术要求 ，由SFDA组织制定
体外诊断试剂分析性能评估线性范围
4.结果报告
线性范围报告的具体格式不要求，但至少 应包括以下几方面： （1）进行线性评价的实验室或生产厂家名称。 （2）被评价的方法或试剂名称，批号。 （3）测定项目。 （4）线性范围（如为二阶线性应包括临床允 许误差）。 （5）如可能应标出测定项目的医学决定水平 及在此水平处的临床允许误差。
1.2实验样本的制备方法
（1）不同浓度水平的样本可通过将高浓度样本与低浓度样本进行 倍比稀释得到，注意在进行液体吸取时应选择精密度与准确性好 的移液装置。制备时应将样本完全混合并避免蒸发或其他使样本 变质的情况。每份样本的浓度与体积单位应统一。
（2）如果高/低浓度血清的值未知，可将每种血清编码，用编码 代表每个血清的相对浓度。对于等浓度间隔样本，可用连续整数 （如1、2、3、4、5）代表连续样本。进行数据处理时可用样本号 代替X值。
事业发展部-刘会娟
一、概述 二、定义 三、研究时间 四、线性范围评估的基本原则 五、线性范围的评估及数据处理方法
一、概述
线性范围评估资料是评价拟上市产品 有效性的重要依据，也是产品注册所需的重 要申报资料之一。
二、定义
线性范围：是某一方法的校准曲线的直线部 分所对应的待测物质的浓度（或量）的变化 范围。
三、研究时间
精密度评估完成后，确保试剂精密度 达到要求。
因为在进行线性判断的同时，须判断 精密度是否符合要求。要求测量数据具有较 高的测量精密度，否则会降低统计功效(低 功效的统计不能得出正确的线性判断Leabharlann 。四、线性范围评估的基本原则
线性范围
检测限
（1）实验操作人员应熟悉方法原 理与操作，能对样本进行正确 处理，确保仪器工作状态正常， 采用适当的校准品对仪器进行 校准。
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1.2实验样本的制备方法
（1）不同浓度水平的样本可通过将高浓度样本与低浓度样本进行倍 比稀释得到，注意在进行液体吸取时应选择精密度与准确性好的移液 装置。制备时应将样本完全混合并避免蒸发或其他使样本变质的情况。 每份样本的浓度与体积单位应统一。 （2）如果高/低浓度血清的值未知，可将每种血清编码，用编码代表 每个血清的相对浓度。对于等浓度间隔样本，可用连续整数（如1、2、 3、4、5）代表连续样本。进行数据处理时可用样本号代替X值。 （3）样本的特殊处理：在无法得到适用的人血清时，需对样本进行 一些特殊处理以满足实验要求。这些处理过程包括稀释、加入添加物 或透析、热处理等，无论进行何种处理均应以保持基质恒定为基本原 则。在评价报告中应对所使用的稀释液、添加物、溶剂等的材料来源 加以注明。 样本稀释液应选用由厂家推荐或经实验室证明可使用的产品，如 可采用5%牛血清白蛋白或人白蛋白溶液。 欲提高样本浓度时可在样本中添加分析物纯品。在添加物为溶液 状态时，应注意添加液体对样本的稀释作用（小于10%）并注明所用 溶剂。
事业发展部-刘会娟
一、概述 二、定义 三、研究时间 四、线性范围评估的基本原则 五、线性范围的评估及数据处理方法
一、概述
线性范围评估资料是评价拟上市产品 有效性的重要依据，也是产品注册所需的重 要申报资料之一。
二、定义
线性范围：是某一方法的校准曲线的直线部 分所对应的待测物质的浓度（或量）的变化 范围。
样本选择
EP6一A中建议应尽可能按以下顺序进行样本种类的选择：①病人混合血清；②用适当 稀释液稀释的病人血清；③添加分析物的病人样本；④用处理过的低浓度物质或处理过的 血清物质稀释的病人血清；⑤商业质控品，校准品／线性物质；⑥使用生理盐水稀释的样 本；⑦稀释不足或过度稀释的商业质控品；⑧水溶液；⑨其他溶剂的溶液。
医决定水平
指在诊断及治疗工作时，对疾病诊断或治疗起关键作用的某一被测成分的浓度，临床 上必须采取措施的检测水平。 例（仅供参考）： 白细胞计数
参考值（4～10）×109/L
决定水平临床意义及措施 0.5×109/L低于此值，病人有高度易感染性，应采取相应的预防性治疗及预防感染措施。 3×109/L低于此值为白细胞减少症，应再作其他试验，如白细胞分类计数、观察外周血涂 片等，并应询问用药史。` 11×109/L高于此值为白细胞增多，此时作白细胞分类计数有助于分析病因和分型，如果需 要应查找感染源。 30×109/L高于此值，提示可能为白血病，应进行白细胞分类，观察外周血涂片和进行骨髓 检查。
三、研究时间
精密度评估完成后，确保试剂精密度 达到要求。 因为在进行线性判断的同时，须判断 精密度是否符合要求。要求测量数据具有较 高的测量精密度，否则会降低统计功效(低 功效的统计不能得出正确的线性判断)。
四、线性范围评估的基本原则
线性范围
（1）实验操作人员应熟悉方法原 理与操作，能对样本进行正确 处理，确保仪器工作状态正常， 采用适当的校准品对仪器进行 校准。 （2）仪器的各项性能指标（如精 密度）应与标称值相符，不存 在明显的携带污染等。 （3）应使用同批号试剂及校准品。
2.实验过程
（1）建立线性范围：需测定9-11个浓度水 平，每个浓度水平重复测定3-4次。 （2）验证标称线性参数：需测定5-7个浓度 水平，每个浓度水平重复测定3-4次。 （3）所有样本应在一次运行中或几次间隔 很短的运行中随机测定，最好在一天之内完 成。
3.数据处理
1、数据记录（线性评价数据记录表） 2、数据可用性检查（散点图） 3 、剔除离群值（散点图、格拉布斯（GRUBBS）法） 4、进行多项回归分析 5、对回归方程进行线性检验（比较t值法检验方程的系 数与零的差异，若证明数据组具线性则跳至7，否则进 入6、7） 6、临床标准的线性与非线性检验（比较ADL值法，如 ADL小于所要求的临界判断值，则可认为数据组具有 临床可接受的线性，所拟合出的最适非线性多项式无 临床意义。） 7、对数据组进行精密度检验
4.结果报告
线性范围报告的具体格式不要求，但至少 应包括以下几方面： （1）进行线性评价的实验室或生产厂家名称。 （2）被评价的方法或试剂名称，批号。 （3）测定项目。 （4）线性范围（如为二阶线性应包括临床允 许误差）。 （5）如可能应标出测定项目的医学决定水平 及在此水平处的临床允许误差。
检测限
（1）实验人员应熟悉检测方法与 仪器操作； （2）采用合适的校准品、质控品 并保持仪器处于正常状态； （3）用 于实验的试剂应为同一批 号，且在有效期内。
五、线性范围的评估及数据处理方法
1.实验样本的基本要求和制备方法 2.实验过程 3.数据处理 4.结果报告
1.1实验样本的基本要求
（1）样本基质应与临床实验样本相似，但不可采用含有对 测定方法具有明确干扰作用物质的样本，如溶血、脂血、黄 疸或含有某些特定药物的样本。进行血清学标志物检测时， 理想的样本为分析物浓度接近预期测定上限的混合人血清。 （2）建立一种定量测定方法的线性范围时，需在预期测定 范围内选择7-11个浓度水平。如将预期测定范围加宽至 130%，在此范围内选择更多的浓度水平，然后依据实验结 果逐渐减少数据点直至表现出线性关系，可发现最宽的线性 范围。 （3）当对标称线性参数进行验证时，需在已知线性范围内 选择5-7个浓度水平。 （4）无论是建立或验证线性范围，所选用的浓度水平应可 覆盖整个预期测定范围并包括与临床有关的重要评价浓度， 如最小测定浓度或线性范围的最低限、不同的医学决定水平、 最大测定浓度或线性范围的高限等。