医学微生物学-第九章肠杆菌科

大肠埃希菌菌落特征（血平板）
大肠埃希菌菌落特征（MAC）
抗原结构
O抗原：菌体抗原，170多种 H抗原：鞭毛抗原，56种以上 K抗原：荚膜抗原，100种以上 O111：K58：H2 能产生大肠菌素，用来分型
大肠埃希菌抗原结构
血清型表示方式： O：K：H 例： O111：K58（B4）：H2
化脓性感染 机体抵抗力降低、外伤 如烧伤感染、腹膜炎、胆囊炎、 阑尾炎、新生儿脑膜炎及败血症(G-)等
2.胃肠炎：肠道致病性大肠埃希菌
菌株 致病物质及部位 所致疾病
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ETEC 肠毒素，小肠
婴儿、旅行者腹泻
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EPEC 黏附因子，小肠
发酵型
O-F试验
氧化型
产碱型
氧化酶试验 阳性：紫红色
阴性：无色
硝酸盐还原试验 阳性：红色 阴性：淡黄色
K 抗原或 Vi 抗原等 菌体抗原（O 抗原） 鞭毛抗原（H 抗原）
肠杆菌科细菌抗原模式图
二、临床意义
致病物质
菌毛或菌毛样结构 荚膜或微荚膜 外膜蛋白 内毒素 外毒素
所致疾病
肠道感染 腹泻、食物中毒、肠热症
观察指标：葡萄糖、乳糖发酵、H2S、动力
大肠杆菌在双糖铁培养基中表现：
记录：
葡萄糖 + 乳糖 + 动力 + H2S —
未接种管
大肠杆菌 生长管
大肠埃希菌IMViC试验（＋＋－－） 右侧为对照（－－＋＋）
③ 血清学鉴定
如疑为致病性大肠杆菌需作血清学鉴定。
已知分型Ab
+
分离菌
直接法玻片凝集试验
☆ 水、食品中大肠杆菌检查
埃希菌属 （Escherichia）
➢ 有6个菌种，以大肠埃希氏菌（E.coli）
最为重要 ➢ 出生后数小时就进入肠道，并终生伴随 ➢ 是人类和动物肠道中的正常菌群,某些条
件下成为条件致病菌 ➢ 在环境卫生和食品卫生学中，常被用作粪
便污染的检测指标 ➢ 基因工程研究的重要工程菌株
正常菌群，一般不致病，两大原因可以致病
防治原则
加强对水和食品的卫生检查 ；
防止尿道感染，尿道插管和膀胱镜检应严 格无菌操作；
疫苗免疫预防已在畜牧业领域中开展了广 泛研究
大肠埃希菌很多菌株都已获得耐一种或几 种抗生素的质粒，耐药性非常普遍。进行 药敏试验。
志贺菌属 （Shigella）
志贺菌属 是人类细菌性痢疾的病 原菌，俗称痢疾杆菌。当前细菌性 疾痢仍然在世界很多国家流行
婴儿腹泻
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ EIEC 侵袭和破坏大肠
痢疾性腹泻
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ EHEC 菌毛、Vero毒素，大肠
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出血性肠炎
三、微生物学检查
肠道菌分离鉴定步骤
① 细菌分离
标本
肠道鉴别选择培养基 （SS、中国兰）
注 肠道鉴别选择培养基成分 基础培养基 乳糖+指示剂
抑制杂菌生长、 有利于肠道致病菌生长的药物
发酵乳糖菌落
大肠杆菌
SS培养基
不发酵乳糖菌落
肠道致病菌
中国兰培养基
挑选可疑菌落进行下一步生化反应鉴定
② 生化反应
常用培养基---克氏双糖铁试管
上层固体斜面：乳糖+指示剂 下层半固体：葡萄糖+指示剂+FeSO4
条件致病 细菌居住部位改变引起的肠外感染：
尿路感染最常见 致病菌株
某些带有致病基因的血清型，引起肠 道感染,导致腹泻
（一）生物学性状
形态染色
0.4-0.7 µm 13µm
短杆菌 无芽胞 有鞭毛 有菌毛
大肠埃希菌电镜图
培养特性与生化反应
兼性厌氧 营养要求不高 生化反应活泼，发酵多种糖类 + 绝大多数发酵乳糖 + 吲哚、甲基红、VP、枸橼酸盐 （IMViC）试验结果为+ + - -
抵抗力
对理化因素抵抗力不强 对氯霉素、庆大霉素敏感 胆盐、煌绿染料等对其有明显的抑 菌作用
（二）致病性
致病物质
侵袭力 菌毛、K抗原 内毒素 肠毒素 耐热肠毒素（ST）
不耐热肠毒素（LT） 细胞毒素 Vero毒素
耐热肠毒素
（Heat stable enterotoxin ,ST）
对热稳定，100℃ 20分钟仍不被破坏 分子量小，免疫原性弱 ST与霍乱毒素无共同的抗原关系
A群--痢疾志贺菌 B群--福氏志贺菌 C群--鲍氏志贺菌 D群--宋内志贺菌
（一）生物学性状
形态、染色 G－杆菌、无鞭毛、无动力，有些菌体
周围有菌毛 培养及生化反应 在普通琼脂培养基上形成半透明光滑
型菌落， 分解葡萄糖，产酸不产气，仅 宋内志贺菌迟缓发酵(＞48h)乳糖
志贺菌菌落特征(MAC)
第九章 肠杆菌科
概述
一大群寄居在人或动物肠道中的G无芽胞杆菌 大多数参与正常菌群 其中有条件致病菌（如大肠杆菌) 少数致病（伤寒杆菌、痢疾杆菌）
肠杆菌科的共同特性
形态染色相似 革兰阴性杆菌 培养特性相同 普通培养基上生长良好 生化反应活泼 发酵葡萄糖，氧化酶阴性， 触酶阳性，还原硝酸盐为亚硝酸盐，O/F试 验为发酵型 抗原构造复杂 抵抗力弱 易变异
不耐热肠毒素
（Heat labile enterotoxin, LT）
对热不稳定，65℃经30分钟即失活 为蛋白质，有免疫原性 由A、B两个亚单位组成，A是毒素的活性 部分，B与细胞相结合 LT的免疫原性与霍乱弧菌肠毒素相似， 两者的抗血清交叉中和作用
所致疾病
1.肠道外感染
泌尿道感染最多见：年轻女性首次尿路 感染有90%由其感染引起。
肠道外感染 鼠疫（烈性传染病）、泌尿道感染、
肺炎、脑膜炎、伤口化脓、菌血症
三、鉴定原则
1. 科间鉴别 2. 将肠杆菌科分为三大类 3. 属、种、群、型的区分 4. 肠杆菌科细菌综合鉴定流程
肠杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别
苯丙氨酸脱氨酶试验 阳性：绿色 阴性：黄色
葡萄糖酸盐试验 阳性：黄绿色 阴性：蓝色
卫生学检查：
意义--- 用作饮用水、饮料、食品中是否有 粪便污染的检测指标
指标--- 大肠菌群指数 饮用水 < 3个/1000ml 瓶装汽水、果汁 < 5个/100ml
Biblioteka Baidu肠菌群 指数
每1000ml/g饮食 样本中大肠菌群数
细菌总数
每1ml/g样本中细菌
数
我国的卫生标准：
≤3个大肠菌群数/1L饮水 ＜5个大肠菌群数/100ml瓶 装汽水、果汁 ≤100个细菌总数/1ml饮水