染色液配制方法

常用染色液的配制

1．骆氏美蓝染色液

甲液：美蓝0.3g 95％酒精溶液 30ml

乙液：0.01％氢氧化钠溶液 100ml

甲液与乙液相混合即成。

2．1％美蓝酒精溶液美蓝1g 95%酒精溶液 100ml，充分混合溶解即可。

3．革兰氏染色液

（1）草酸铵结晶紫染液

甲液：结晶紫2.0g 95％酒精20ml

乙液：草酸铵0.8g 蒸馏水80ml

用时先以蒸馏水将甲液稀释5倍，然后加20ml于80ml乙液中，混合即成。

（2）革兰氏碘溶液碘片 1g 碘化钾 2g

蒸馏水 300ml

先将碘化钾置于干净的乳钵中，加入蒸馏水少许（约5ml），待碘化钾完全溶解后，再加入碘片，略作研磨，使碘片完全溶解，然后徐徐加水，充分混合，直至足量。切忌将碘片与碘化钾一起直接加入瓶中，一次加水配制。否则，碘片往往不能完全溶解而影响碘的浓度。（3）95％酒精

（4）复染色液可用碱性复红或沙黄液及稀释的石炭酸复红液。

碱性复红液：碱性复红0.1g 蒸馏水100ml，混合即成。

沙黄液：3.41％沙黄酒精溶液10ml、蒸馏水90ml。

稀释石炭酸复红液：石炭酸复红液10ml、蒸馏水90ml，混合即成。4．抗酸染色液

（1）石炭酸复红液 3％碱性复红酒精溶液10ml、5％石炭酸水溶液90ml，二液混合即成。

（2）盐酸酒精溶液浓盐酸3ml、95％酒精溶液97ml，二液混合即成。

5．瑞氏染色液瑞氏染料粉0.1g、纯甘油1.0ml、中性甲醇60ml。置染料粉于乳钵中，加入甘油，充分研磨，再徐徐加入甲醇，边研磨边搅拌，促其溶解，然后盛于棕色瓶中，置暗处过夜，次日以滤纸滤过后，仍盛于棕色瓶中，保存于暗处备用。

磷酸盐缓冲液：

溶液一：Na2HPO4.12H2O（磷酸二氢钠）23.864g、蒸馏水1000ml。溶液二：KH2PO4（磷酸二氢钾）9.078g、蒸馏水1000ml。

用时以溶液一4份与溶液二1份混合即成。

6．姬姆萨氏染色液取姬姆萨氏染料粉0.6g，加入甘油50ml，置于55—60度温度中1.5—2h，再加入甲醇50ml，静置一日以上，滤过后即可作染料原液用。

或者取姬姆萨氏染料粉0.75g、纯甲醇65ml、纯甘油35ml，盛于有玻璃珠的玻璃瓶内，充分摇匀；滤过后，贮存于有色玻璃瓶中，盖紧，备作原液用。

7．乳酸石炭酸液石炭酸20g、乳酸20ml、甘油40ml、蒸馏水20ml。按量将上述各成分依次放入玻璃瓶内，于水浴中加热溶解。

8．乳酸石炭酸棉蓝染色液在乳酸石炭酸溶液中加入棉蓝0.05％混合即成。

9．纽曼氏染色液美蓝粉1.12g、乙醇54ml、四氯乙烷40ml、冰醋酸6ml。

将乙醇及四氯乙烷先混合于一大玻璃瓶内（注意温度不可高于70度），加入美蓝，并充分溶化，再徐徐加入冰醋酸，滤过，保存备用。10．方吞那氏染色液

（1）媒染料鞣酸5g 石炭酸1g

蒸馏水100ml。

（2）染色液浓硝酸盐5g于蒸馏水100ml中，取出3—5ml，徐徐滴入浓氨水，至其生成黑色沉淀摇匀后又消失为止，再徐徐滴入5％硝酸盐溶液，至液体略呈混浊振后仍不消失为度。