呼吸道病毒多重核酸检测试剂
13种呼吸道病原体多重检测试剂的性能验证
ＤＯＩ：１０．１３６０２／ｊ．ｃｎｋｉ．ｊｃｌｓ．２０２０．０６．２０·质量管理研究·１３种呼吸道病原体多重检测试剂的性能验证吕园，邬兰，张秀梅，徐秋爽，张健，李萍，王海鹏，俞杨（南京市第一医院南京医科大学附属南京医院核医学科实验诊断部，南京２１０００６）摘要：目的 对１３种呼吸道病原体多重检测试剂盒（ＰＣＲ毛细管电泳片段分析法）进行性能验证。
方法 参照ＣＮＡＳ ＧＬ０３９：２０１９《分子诊断检验程序性能验证指南》和厂商性能确认方法，用包含１３种病原体（经参比方法测序法确认）的临床咽拭子样本进行方法符合率验证，用国家参考品、慢病毒载体和质粒混合样本（包含所有１３种病原体）进行检出限验证，用包含其他７种病原体的临床咽拭子样本进行交叉反应验证，用分别添加终浓度为５％的全血、１．２ｍｇ／ｍＬ的硫酸沙丁胺醇的临床咽拭子样本进行抗干扰能力验证，以试剂盒说明书的性能指标作为结果判断标准。
结果 包含１３种病原体的临床咽拭子样本经本试剂盒检测，各自出现所检测病原体的特征峰，满足方法符合率的验证要求；以国家参考品、慢病毒载体和质粒混合后的样品重复检测２０次，对应的１３种病原体均为阳性，满足检出限的验证要求；包含其他７种病原体的临床咽拭子样本均未出现本试剂盒所检测的病原体特征峰，满足交叉反应的验证要求；分别添加终浓度为５％的全血、１．２ｍｇ／ｍＬ的硫酸沙丁胺醇的临床咽拭子样本检测结果与未添加干扰物质的对照组检测结果相同，满足抗干扰能力的验证要求。
结论 １３种呼吸道病原体多重检测试剂盒各项性能验证参数与厂商声明的标准一致，可正式应用于临床检测。
关键词：十三种呼吸道病原体；聚合酶链反应；毛细管电泳；性能验证中图分类号：Ｒ４４６．５ 文献标志码：Ａ 性能验证指使用某特定检测试剂或系统的实验室按照所提供的试剂盒或检测系统说明书使用时，能复现生产厂家所宣称的检测性能。
中国合格评定国家认可委员会（ＣＮＡＳ）２０１９年２月１５日发布并实施ＣＮＡＳ ＧＬ０３９：２０１９《分子诊断检验程序性能验证指南》［１］。
七项呼吸道病毒检测试剂盒(鉴定)使用说明书
七项呼吸道病毒检测试剂盒（鉴定）使用说明书【产品名称】通用名称：七项呼吸道病毒检测试剂盒英文名称：D3 Ultra DFA Respiratory Virus Screen & ID Kit【包装规格】鉴定试剂：80人份/盒【预期用途】用于临床定性检测7种呼吸道病毒：甲型（A型）流感病毒，乙型（B型）流感病毒，呼吸道合胞病毒，腺病毒，副流感病毒1、2和3型。
【检验原理】荧光素（FITC）标记的单克隆抗体与病毒抗原结合，形成稳定的抗原-抗体复合物，在荧光显微镜下观察，呈现特异性绿色荧光。
【主要组成成份】组份名称规格主要成分1 DFA染色试剂鉴定试剂流感A试剂：2 mL每试剂瓶为一项与病毒抗原相对应的荧光单克隆抗体流感B试剂：2 mL腺病毒试剂：2 mL呼吸道合胞病毒试剂：2 mL副流感1试剂：2 mL副流感2试剂：2 mL副流感3试剂：2 mL2 40X浓缩洗液25 mL PBS3 固定液15 mL 甘油4 阳性质控板5块包被病毒抗原【储存条件及有效期】2ºC-8ºC避光保存18个月。
【适用仪器】荧光显微镜，激发波长490 nm，发射波长520 nm。
【样本要求】鼻咽部取样后保存于生理盐水中，应在24小时内送检。
【检验方法】1、取样：用鼻咽拭子从病人的鼻咽部取样或者使用鼻腔灌洗液，将鼻咽拭子放入储存管中（含有生理盐水）。
2、样本准备步骤：①将样本充分震荡混匀约10-15秒。
②在400-600xg转速下离心5-10分钟。
③弃上清。
④在沉淀中加2-3 mL PBS缓冲液（不能使用试剂盒中的浓缩洗液），充分震荡混匀约10-15秒。
⑤在400-600xg转速下离心5-10分钟。
⑥吸走上清和黏液层，小心不要吸到沉淀。
⑦重复步骤4到6，直至黏液层被完全去除。
⑧在沉淀中加0.5-1 mL的PBS缓冲液。
⑨用移液器反复吹吸来重悬细胞沉淀，形成一个略混浊的悬液。
3、直接样本测试步骤：①在8孔板上的孔内滴加25 µL的细胞悬浊液，每样本需滴加七孔。
呼吸道相关核酸检测的总结归纳
呼吸道相关核酸检测的总结归纳
呼吸道相关核酸检测是一种用于检测呼吸道疾病的常见方法。
这种检测通常用于检测呼吸道病原体，如病毒和细菌，以帮助诊断呼吸道感染和疾病。
总的来说，呼吸道相关核酸检测可以总结归纳如下：
1. 检测对象，呼吸道相关核酸检测主要针对呼吸道疾病相关的病原体，包括流感病毒、冠状病毒、腺病毒、鼻病毒、呼吸道合胞病毒等病毒，以及肺炎支原体、肺炎链球菌等细菌。
2. 核酸提取，该检测方法通常需要从呼吸道样本中提取病原体的核酸，常见的样本包括鼻咽拭子、咽拭子、痰液等。
3. PCR扩增，提取到的核酸样本经过聚合酶链式反应（PCR）扩增，以增加病原体核酸的数量，使其能够被检测出来。
4. 检测方法，常见的检测方法包括实时荧光定量PCR（RT-qPCR）、核酸杂交、基因芯片技术等，其中RT-qPCR是最常用的方法之一。
5. 临床应用，呼吸道相关核酸检测在临床上被广泛应用于诊断
呼吸道感染疾病，如流感、呼吸道合胞病毒感染、冠状病毒感染等。
此外，它还可以用于筛查潜在的呼吸道病原体，以制定针对性的治
疗方案。
总的来说，呼吸道相关核酸检测是一种快速、准确的诊断方法，对于呼吸道疾病的早期诊断和治疗具有重要意义。
随着技术的不断
进步，相信这一领域的检测方法和应用将会更加完善和广泛。
呼吸道病毒多重核酸检测试剂注册技术审查指导原则
呼吸道病毒多重核酸检测试剂注册技术审查指导原则本指导原则旨在指导注册申请人对呼吸道病毒多重核酸检测试剂注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门审评注册申报资料提供参考。
本指导原则是对呼吸道病毒多重核酸测定试剂的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。
如申请人认为有必要增加本指导原则未包含的研究内容，可自行补充。
如果申报产品检测项目包括的病毒有相应的指导原则，应首先满足指导原则要求的内容。
本指导原则是供申请人和审查人员使用的指导文件，不涉及注册审批等行政事项，亦不作为法规强制执行，如有能够满足法规要求的其他方法，也可以采用，但应提供详细的研究资料和验证资料。
应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。
本指导原则是在现行法规、标准体系及当前认知水平下制定的，随着法规、标准的不断完善和科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将适时进行调整。
一、适用范围呼吸道感染（Respiratory tract infection，RTI）是人类最常见的一类疾病，可以在任何性别、年龄和地域中发生，是全球范围内引起人群发病和死亡的最主要原因之一。
呼吸道感染引起的临床症状和体征都较为相似，其临床表现主要为鼻炎、咽炎、喉炎、扁桃体炎等症状，严重的可引起气管炎、支气管炎及肺炎等，但不同病原体引起的感染，其治疗方法、疗效和病程也不尽相同。
目前已证明，大部分呼吸道疾病是由细菌外的病原体引起，其中以呼吸道病毒最常见。
本指导原则适用于呼吸道病毒多重核酸检测试剂，适用样本类型为鼻咽拭子、鼻拭子、咽拭子、肺泡灌洗液、痰液或其他呼吸道分泌物样本等，可包括但不限于：甲型流感病毒（Influenza A，IFV A）、乙型流感病毒（Influenza B，IFV B）、呼吸道合胞病毒（Respiratory Syncytial Virus，RSV）、副流感病毒(Parainfluenza Virus，PIV)、人偏肺病毒（Human Metapneumovirus，hMPV）、腺病毒（Adenovirus，Adv）、呼吸道感染肠道病毒（肠道病毒/鼻病毒）（Enterovirus，EV/ Rhinovirus，RhV）、冠状病毒（Coronavirus，CoV）等。
金额(万)1呼吸道病毒核酸多重联检试剂盒100人份盒
第五章采购需求一、采购内容二、技术规格要求（一）呼吸道病毒核酸多重检测试剂盒（实时荧光PCR法）技术参数：1.△检测对象必须包含但不限于以下对象检测指标和标记评价标准：流感病毒甲型通用、流感病毒乙型通用、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ）、人偏肺病毒、冠状病毒（229E、NL63、OC43和HKU1，可不分出型别）、鼻病毒、博卡病毒、新型H1N1流感病毒、季节性H3N2流感病毒。
2.△试剂盒基于one-step实时荧光PCR技术，选用Taqman探针，实现呼吸道病毒的定性检测。
3.△试剂盒为每组至少4通道检测试剂（产品不超过4个组份），检测效率高，明确列出每个组分的检测指标和荧光标记基团类型。
每个反应组分中，应包含反应buffer、dNTPs、Mg2+、特异性引物和荧光探针等成分。
4.每个组分模板核酸加样量不多于3微升。
5.提供阴性质控品和阳性质控品，阳性质控为体外转录合成的RNA或无潜在生物安全危险灭活病毒，以便于对实时荧光PCR逆转录和扩增全过程的有效性进行监控。
6.可检测的标本类型必须包含但不限于咽拭子和痰液。
7.检测灵敏度、特异度较高。
与感染部位相同或感染症状相似的其他呼吸道病原体（如麻疹病毒、风疹病毒、腮腺炎病毒、水痘病毒、脑膜炎奈瑟氏菌、百日咳杆菌和副百日咳杆菌等）无交叉反应。
8.试剂盒中包含人类基因保守序列检测作为内标，监控标本采集质量。
9.△试剂盒适用于ABI 7500荧光PCR仪。
10.△呼吸道病毒与呼吸道细菌不在同一个产品之类，应分为两个产品。
11.在提交标书的现场，提供产品试用装1份，供现场校验。
12.产品试用装具体要求：（1）规格：50人份/盒；（2）包装：面纸350g灰底白卡纸，里纸为白牛皮，覆亚膜；（3）检测报告：无需提供。
13.检测试剂盒具有传染病检测实际应用经历。
(二）呼吸道细菌核酸多重检测试剂盒（实时荧光PCR法）技术参数：1.△呼吸道细菌检测试剂盒的检测指标必须包含但不限于以下指标：肺炎链球菌、鲍曼不动杆菌、肺炎支原体、铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌、化脓性链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、流感嗜血杆菌、嗜肺军团菌、大肠杆菌、肺炎衣原体、结核分枝杆菌、卡他莫拉菌和肺囊虫。
呼吸道病毒7项检测试剂
上海复星医学科技发展有限公司呼吸道病毒7项检测试剂2011-1-10呼吸道病毒7项检测试剂目录1．概述 (1)2．D3Ultra DFA试剂 (2)2.1 D3Ultra DFA试剂规格 (2)2.2 D3Ultra DFA试剂用途 (2)2.3 D3Ultra DFA试剂特点和优势 (2)2.4 D3Ultra DFA试剂实验操作步骤 (3)2.5 D3Ultra DFA试剂实验结果判读 (4)3．D3Ultra DFA试剂竞争优势 (5)3.1 检验的特异性和灵敏度 (5)3.2 市场竞争 (5)附录1 七种病毒检测的临床意义 (7)附录2 实验室所需设备清单（试剂盒中不含） (8)附录3 进口荧光显微镜参数 (9)1．概述日常生活中，几种常见的呼吸道病毒往往给人们的工作和生活带来极大的不便，有些甚至威胁到人们的健康和生命。
在医院和急诊室中，这些呼吸道病毒也常常是诊断和治疗的难题。
常见的呼吸道病毒包括：A型（甲型）流感病毒，B型（乙型）流感病毒，呼吸道合胞病毒（RSV），腺病毒，副流感病毒1型，副流感病毒2型和副流感病毒3型。
在病毒检测方法中，抗原检测有其无法比拟的优势：1. 可以用于病毒的早期诊断，这对治疗非常重要；2. 快速、简便的诊断方法，短时间内得出结果，节省实验室的劳动力和成本。
DHI公司的D3Ultra DFA试剂属于抗原检测中的直接免疫荧光法。
该试剂可以同时筛查和鉴定出常见的7种呼吸道病毒。
D3Ultra DFA试剂主要的测试对象为婴幼儿和儿童，所以目标客户群体为：儿童医院、妇幼保健院和有儿科的三甲医院。
2．D3Ultra DFA试剂2.1 D3Ultra DFA试剂规格D3Ultra DFA试剂分为7项呼吸道病毒筛查试剂和7项呼吸道病毒鉴定试剂。
检测病毒种类：A型（甲型）流感病毒，B型（乙型）流感病毒，呼吸道合胞病毒（RSV），腺病毒，1、2、3型副流感病毒。
具体规格如下：筛查试剂：10 mL，可用于400次测试鉴定试剂：每项鉴定试剂2 mL X 7，可用于80次测试另外，每盒试剂中含有40x浓缩洗液25 mL，固定液15 mL，正常鼠丙种球蛋白试剂10 mL（用于阴性质控），含有7种呼吸道病毒抗原的阳性质控板5块。
呼吸道病毒7项检测试剂
上海复星医学科技发展有限公司呼吸道病毒 7 项检测试剂2011-1-10呼吸道病毒 7 项检测试剂目录1．概述 (1)2．D3 Ultra DFA试剂 (2)2.1D 3Ultra DFA试剂规格 (2)2.23Ultra DFA试剂用途 (2)D2.3D 3Ultra DFA试剂特点和优势 (2)2.4D 3Ultra DFA试剂实验操作步骤 (3)2.53Ultra DFA试剂实验结果判读 (4)D3．D3 Ultra DFA试剂竞争优势 (5)3.1检验的特异性和灵敏度 (5)3.2市场竞争 (5)附录 1七种病毒检测的临床意义 (7)附录 2实验室所需设备清单（试剂盒中不含） (8)附录 3进口荧光显微镜参数 (9)1．概述日常生活中，几种常见的呼吸道病毒往往给人们的工作和生活带来极大的不便，有些甚至威胁到人们的健康和生命。
在医院和急诊室中， 这些呼吸道病毒也常常是诊断和治疗的难题。
常见的呼吸道病毒包括： A 型（甲型）流感病毒， B 型（乙型）流感病毒，呼吸道合胞病毒（ RSV ），腺病毒，副流感病毒 1 型，副流感病毒 2 型和副流感病毒 3 型。
在病毒检测方法中， 抗原检测 有其无法比拟的优势： 1. 可以用于病毒的早期诊断，这对治疗非常重要； 2. 快速、简便的诊断方法，短时间内得出结果，节省实验室的劳动力和成本。
DHI 公司的 D 3Ultra DFA 试剂属于抗原检测中的直接免疫荧光法 。
该试剂可以同时筛查和鉴定出常见的7 种呼吸道病毒。
D 3Ultra DFA 试剂主要的测试对象为婴幼儿和儿童，所以目标客户群体为：儿童医院、妇幼保健院和有儿科的三甲医院。
2．D3 Ultra DFA试剂2.1 D3 Ultra DFA试剂规格D3 Ultra DFA试剂分为 7 项呼吸道病毒筛查试剂和 7 项呼吸道病毒鉴定试剂。
检测病毒种类： A 型（甲型）流感病毒， B 型（乙型）流感病毒，呼吸道合胞病毒（ RSV），腺病毒， 1、2、3 型副流感病毒。
呼吸道病毒检测方法
呼吸道病毒检测方法呼吸道病毒是引起呼吸道感染的主要病原体之一，包括流感病毒、腺病毒、冠状病毒等。
及时准确地检测呼吸道病毒对于临床诊断和治疗至关重要。
本文将介绍几种常见的呼吸道病毒检测方法，希望能对相关人员有所帮助。
首先，常见的呼吸道病毒检测方法包括病毒培养、免疫荧光染色、PCR技术等。
病毒培养是一种传统的检测方法，通过将患者样本接种到细胞培养物中，观察是否出现细胞破坏现象来判断病毒是否存在。
免疫荧光染色则是利用特异性抗体与病毒抗原结合的原理，通过荧光显微镜观察样本中是否有病毒颗粒存在。
而PCR技术则是通过扩增病毒核酸序列来进行检测，具有高灵敏度和特异性。
其次，针对不同的呼吸道病毒，还可以采用特异性的检测方法。
例如，对于流感病毒，可以利用快速抗原检测、实时荧光定量PCR等方法进行检测。
快速抗原检测是一种简便快速的检测方法，通过检测病毒抗原与特定抗体结合产生的颜色变化来判断病毒是否存在。
实时荧光定量PCR则是一种高度敏感的检测方法，可以对病毒进行定量检测，有助于了解病毒载量和感染程度。
此外，近年来还出现了一些新的呼吸道病毒检测技术，如纳米孔测序技术、质谱技术等。
纳米孔测序技术是一种高通量测序技术，可以对病毒核酸进行快速测序，有助于了解病毒的基因组结构和变异情况。
质谱技术则是通过检测病毒蛋白质的质谱图谱来进行检测，具有高度特异性和灵敏度。
综上所述，针对呼吸道病毒的检测方法有多种选择，每种方法都有其特点和适用范围。
在临床实践中，应根据具体情况选择合适的检测方法，并结合临床症状和流行病学调查进行综合分析，以提高呼吸道病毒感染的诊断准确性和治疗效果。
希望本文所介绍的内容能够对相关医护人员和科研人员有所帮助，促进呼吸道病毒检测技术的进步和临床应用。
呼吸道病毒检测方法
呼吸道病毒检测方法呼吸道病毒是引起呼吸道感染的主要病原体之一，包括流感病毒、腺病毒、冠状病毒等。
及时准确地检测呼吸道病毒对于诊断和治疗呼吸道感染至关重要。
下面将介绍几种常见的呼吸道病毒检测方法。
1. 核酸扩增技术（PCR）。
PCR技术是目前最常用的呼吸道病毒检测方法之一。
该方法通过扩增病毒核酸，然后利用特异性探针或引物进行检测，能够快速、准确地确定病毒的存在。
PCR技术对呼吸道病毒的检测灵敏度高，特异性强，是临床上常用的检测方法之一。
2. 免疫层析法。
免疫层析法是一种简便、快速的呼吸道病毒检测方法。
该方法通过利用抗体与病毒抗原结合的原理，将样本中的病毒抗原检测出来。
免疫层析法操作简单，结果快速，适用于临床急诊室、门诊等场所的病毒检测。
3. 培养法。
培养法是一种传统的呼吸道病毒检测方法，通过将样本接种到细胞培养物中，观察病毒在细胞中的生长情况来进行检测。
虽然培养法能够检测到一些无法通过其他方法检测到的病毒，但是该方法耗时长，且操作复杂，目前在临床上的应用较少。
4. 全基因组测序。
全基因组测序是一种高通量的呼吸道病毒检测方法，通过对样本中的病毒进行全面测序，可以获得病毒的全基因组信息，包括基因型、亚型等。
全基因组测序技术对于呼吸道病毒的分型、溯源等研究具有重要意义，但是在临床上的应用较为有限。
综上所述，针对不同的临床需求和实验室条件，可以选择合适的呼吸道病毒检测方法。
在进行呼吸道病毒检测时，需要根据临床病情、样本类型等因素综合考虑，选择合适的检测方法，并严格按照操作规程进行操作，以确保检测结果的准确性和可靠性。
希望本文所介绍的呼吸道病毒检测方法能够对临床医生和实验室人员有所帮助。
呼吸道病毒7项检测试剂
上海复星医学科技发展有限公司呼吸道病毒7项检测试剂2011-1-10呼吸道病毒7项检测试剂目录1．概述.................................................................... 错误!未定义书签。
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2.2 D3Ultra DFA试剂用途.........................................................................错误!未定义书签。
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2.5 D3Ultra DFA试剂实验结果判读.........................................................错误!未定义书签。
3．D3Ultra DFA试剂竞争优势................................ 错误!未定义书签。
3.1 检验的特异性和灵敏度.....................................................................错误!未定义书签。
呼吸道病毒多重核酸检测试剂技术审查指导原则(征求意见稿
呼吸道病毒多重核酸检测试剂技术审查指导原则（征求意见稿呼吸道病毒多重核酸检测试剂技术审查指导原则（征求意见稿）指导原则的目的是为了规范呼吸道病毒多重核酸检测试剂的技术审查，确保其质量和可靠性，保护公众的健康安全。
以下是针对呼吸道病毒多重核酸检测试剂技术审查的一些建议：1.临床需求和重要性呼吸道病毒多重核酸检测试剂的研发应该根据公共卫生需求和重要性进行，以确保其在临床中的应用价值和实用性。
研发单位应该提供相关的临床证据和研究结果，证明该产品在诊断和监测呼吸道病毒感染中的准确性和敏感性。
2.核酸检测方法和标准呼吸道病毒多重核酸检测试剂应该基于可靠的核酸检测方法，并遵循相关的技术标准和质量控制要求。
研发单位应该提供详细的技术说明和验证结果，包括核酸提取方法、引物和探针设计、反应体系优化等。
3.多重检测目标和范围呼吸道病毒多重核酸检测试剂应该覆盖常见的呼吸道病毒，如流感病毒、腺病毒、冠状病毒等，并具备扩展的能力以应对未来新型病毒的检测需求。
研发单位应该提供相应的证据和数据，说明其产品的检测范围和灵敏度。
4.质量控制和验证呼吸道病毒多重核酸检测试剂应该具备完善的质量控制体系，包括阳性对照品、阴性对照品、内标等。
研发单位应该提供相关的质量控制验证结果，证明产品的稳定性和一致性。
5.临床验证和评估呼吸道病毒多重核酸检测试剂在临床使用前应该进行充分的验证和评估，包括临床样本的收集、使用中的表现和结果解读等。
研发单位应该提供临床验证和评估的数据和结果，证明其产品的临床准确性和可靠性。
6.技术文档和注册申请呼吸道病毒多重核酸检测试剂的注册申请应该提供完整的技术文档，包括产品说明书、使用说明、质量控制文件等。
研发单位应该确保技术文档的准确性和完整性，以便监管部门进行审查和批准。
7.监管审查和合规性呼吸道病毒多重核酸检测试剂的研发和上市应该符合监管部门的要求和规定。
研发单位应该积极配合监管部门的审查工作，并及时回应和解决审查过程中的问题和意见。
呼吸道病毒7项检测试剂
上海复星医学科技发展有限公司呼吸道病毒7项检测试剂2011-1-10呼吸道病毒7项检测试剂目录1．概述 (1)2．D3 Ultra DFA试剂 (2)2.1 D3 Ultra DFA试剂规格 (2)2.2 D3 Ultra DFA试剂用途 (2)2.3 D3 Ultra DFA试剂特点和优势 (2)2.4 D3 Ultra DFA试剂实验操作步骤 (3)2.5 D3 Ultra DFA试剂实验结果判读 (4)3．D3 Ultra DFA试剂竞争优势 (5)3.1 检验的特异性和灵敏度 (5)3.2 市场竞争 (5)附录1 七种病毒检测的临床意义 (7)附录2 实验室所需设备清单（试剂盒中不含） (8)附录3 进口荧光显微镜参数 (9)1．概述日常生活中，几种常见的呼吸道病毒往往给人们的工作和生活带来极大的不便，有些甚至威胁到人们的健康和生命。
在医院和急诊室中，这些呼吸道病毒也常常是诊断和治疗的难题。
常见的呼吸道病毒包括：A型（甲型）流感病毒，B型（乙型）流感病毒，呼吸道合胞病毒（RSV），腺病毒，副流感病毒1型，副流感病毒2型和副流感病毒3型。
在病毒检测方法中，抗原检测有其无法比拟的优势：1. 可以用于病毒的早期诊断，这对治疗非常重要；2. 快速、简便的诊断方法，短时间内得出结果，节省实验室的劳动力和成本。
DHI公司的D3Ultra DFA试剂属于抗原检测中的直接免疫荧光法。
该试剂可以同时筛查和鉴定出常见的7种呼吸道病毒。
D3Ultra DFA试剂主要的测试对象为婴幼儿和儿童，所以目标客户群体为：儿童医院、妇幼保健院和有儿科的三甲医院。
2．D3Ultra DFA试剂2.1 D3Ultra DFA试剂规格D3Ultra DFA试剂分为7项呼吸道病毒筛查试剂和7项呼吸道病毒鉴定试剂。
检测病毒种类：A型（甲型）流感病毒，B型（乙型）流感病毒，呼吸道合胞病毒（RSV），腺病毒，1、2、3型副流感病毒。
具体规格如下：筛查试剂：10 mL，可用于400次测试鉴定试剂：每项鉴定试剂2 mL X 7，可用于80次测试另外，每盒试剂中含有40x浓缩洗液25 mL，固定液15 mL，正常鼠丙种球蛋白试剂10 mL（用于阴性质控），含有7种呼吸道病毒抗原的阳性质控板5块。
呼吸道病毒多重核酸检测试剂-医疗器械技术审评中心
附件1呼吸道病毒多重核酸检测试剂技术审查指导原则（征求意见稿）本指导原则旨在指导注册申请人对呼吸道病毒多重核酸检测试剂注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门审评注册申报资料提供参考。
本指导原则是对呼吸道病毒核酸测定试剂的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。
如申请人认为有必要增加本指导原则未包含的研究内容，可自行补充。
本指导原则是供申请人和审查人员使用的指导文件，不涉及注册审批等行政事项，亦不作为法规强制执行，如有能够满足法规要求的其他方法，也可以采用，但应提供详细的研究资料和验证资料。
应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。
本指导原则是在现行法规、标准体系及当前认知水平下制定的，随着法规、标准的不断完善和科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将适时进行调整。
一、范围呼吸道感染（Respiratory tract infection，RTI）是人类最常见的一类疾病，可以在任何性别、年龄和地域中发生，是全球范围内引起人群发病和死亡的最主要原因之一。
呼吸道感染引起的临床症状和体征都较为相似，其临床表现主要为鼻炎、咽炎、喉炎、扁桃体炎等症状，严重的可引起气管炎、支气管炎及肺炎等，但不同病原体引起的感染，其治疗方法、疗效和病程也不尽相同。
目前已证明，大部分呼吸道疾病是由细菌外的病原体引起，其中以呼吸道病毒最常见。
本指导原则适用于呼吸道病毒多重核酸检测试剂，适用样本类型应为鼻咽拭子、咽拭子、肺泡灌洗液、痰液或其他呼吸道分泌物样本等。
检测对象应可引发相似的临床表现，可包括但不限于：甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒、人偏肺病毒、腺病毒、呼吸道感染肠道病毒（肠道病毒/鼻病毒）、冠状病毒、博卡病毒。
本指导原则适用于利用荧光探针聚合酶链式反应（Real-time PCR）或其他分子生物学方法，以特定的呼吸道病毒基因序列为检测目标，对来源于人体样本中的呼吸道病毒核酸进行体外定性检测，临床用于辅助诊断呼吸道病毒感染相关性疾病。
呼吸道病毒7项检测试剂
复星医学科技发展呼吸道病毒7项检测试剂2011-1-10呼吸道病毒7项检测试剂目录1．概述 (2)2．D3Ultra DFA试剂 (3)2.1 D3Ultra DFA试剂规格 (3)2.2 D3Ultra DFA试剂用途 (3)2.3 D3Ultra DFA试剂特点和优势 (3)2.4 D3Ultra DFA试剂实验操作步骤 (4)2.5 D3Ultra DFA试剂实验结果判读 (5)3．D3Ultra DFA试剂竞争优势 (6)3.1 检验的特异性和灵敏度 (6)3.2 市场竞争 (6)附录1 七种病毒检测的临床意义 (8)附录2 实验室所需设备清单（试剂盒中不含） (9)附录3 进口荧光显微镜参数 (10)1．概述日常生活中，几种常见的呼吸道病毒往往给人们的工作和生活带来极大的不便，有些甚至威胁到人们的健康和生命。
在医院和急诊室中，这些呼吸道病毒也常常是诊断和治疗的难题。
常见的呼吸道病毒包括：A型（甲型）流感病毒，B型（乙型）流感病毒，呼吸道合胞病毒（RSV），腺病毒，副流感病毒1型，副流感病毒2型和副流感病毒3型。
在病毒检测方法中，抗原检测有其无法比拟的优势：1. 可以用于病毒的早期诊断，这对治疗非常重要；2. 快速、简便的诊断方法，短时间得出结果，节省实验室的劳动力和成本。
DHI公司的D3Ultra DFA试剂属于抗原检测中的直接免疫荧光法。
该试剂可以同时筛查和鉴定出常见的7种呼吸道病毒。
D3Ultra DFA试剂主要的测试对象为婴幼儿和儿童，所以目标客户群体为：儿童医院、妇幼保健院和有儿科的三甲医院。
2．D3Ultra DFA试剂2.1 D3Ultra DFA试剂规格D3Ultra DFA试剂分为7项呼吸道病毒筛查试剂和7项呼吸道病毒鉴定试剂。
检测病毒种类：A型（甲型）流感病毒，B型（乙型）流感病毒，呼吸道合胞病毒（RSV），腺病毒，1、2、3型副流感病毒。
具体规格如下：筛查试剂：10 mL，可用于400次测试鉴定试剂：每项鉴定试剂2 mL X 7，可用于80次测试另外，每盒试剂中含有40x浓缩洗液25 mL，固定液15 mL，正常鼠丙种球蛋白试剂10 mL（用于阴性质控），含有7种呼吸道病毒抗原的阳性质控板5块。
三种犬呼吸道常见病毒多重PCR检测方法建立
三种犬呼吸道常见病毒多重PCR检测方法建立俞向前％闫洁新2文德亮％郭志波$陈琦1潘世友'刘广庆6朱建国2叶承荣％（1浦东新区动物疫病预防控制中心上海2012992上海交通大学农业与生物学院上海200240 3上海市浦东新区川沙新镇集体资产管理事务中心上海2012024上海市动物疫病预防控制中心上海2011035上海喜乐缘宠物用品有限公司上海2012996上海元和利宠宠物诊疗有限公司上海201210）［摘要*为建立犬呼吸道冠状病毒（Canine respiratory coronavirus,CRCoV）、犬细小病毒（Canine parvovirus,CPV）、犬瘟热病毒（Canine distemper virus,CDV）3种病毒的多重PCR方法#根据GenBank中CRCoV.CPV和CDV的基因序列，进行BLAST同源性分析，找出保守序列，并根据保守序列对每个病毒设计引物，建立扩增3种病毒的多重PCR方法，并通过已建立的方法对收集的呼吸道病犬病料进行检测。
结果表明，所建立的三重PCR体系组成为2X Taq Mix 12.5#L,3对上、下游引物各0.6#L，混合模板1#L,ddH z O7.9#L；扩增程序为94T5min；94T30s,54°C1min,72T24s，共35个循环；72T8min。
该方法具有较高的灵敏性和特异性。
临床验证实验表明，本实验所建立的多重PCR方法可用于临床诊断。
关键词：犬呼吸道冠状病毒&犬细小病毒&犬瘟热病毒&多重PCR方法随着我国工作犬（军犬、警犬、导盲犬等）、实验用犬和宠物犬饲养量的大幅增加，犬传染性呼吸道疫病的发生呈逐年上升趋势，已经引起临床及公共卫生领域高度重视-犬传染性呼吸道疫病又称犬窝咳，主要表现为传染性支气管炎，是世界各地犬类中常见的一种疾病。
该病是一种具有急性和高度传染性的呼吸系统疾病，主要影响犬的喉、气管和支气管,偶尔也会影响到鼻黏膜和下呼吸道。
呼吸道病毒核酸检测技术的新进展及其在临床中的应用
呼吸道病毒核酸检测技术的新进展及其在临床中的应用韦栋;张欣欣【摘要】Respiratory virus infections place a great burden on people all over the world ,because of the high morbidity and mortality .During the outbreaks of severe acute respiratory syndrome (SARS) and the more recent avian H5N1 and H7N9 influenza ,the patient care providers face an enormous challenge in detecting the pathogen .Molecular diagnostic techniques for respiratory viral infections have provided new options with improved sensitivity , specificity and turnaround time . The clinical gold standard has shifted away from classic diagnostic methods to molecular techniques in most clinical laboratories .%呼吸道病毒感染由于其高致病率及致死率，长期以来一直是世界各国的一大负担。
随着近几年来严重急性呼吸综合征（SARS）、H5N1、H7N9等病毒相继出现，快速诊断呼吸道病毒感染成为医务工作者面临的巨大挑战。
分子诊断技术在过去十几年发展迅速，凭借出色的灵敏度和特异度，成为快速诊断呼吸道感染的首选手段。
以核酸扩增为主的多种分子诊断技术，大大缩短了呼吸道病毒检测的时间，在许多临床实验室已逐步替代传统技术，成为病毒检测的新一代方法。
呼吸道感染性病原体的多重核酸检测
呼吸道感染性病原体的多重核酸检测呼吸道感染按照感染位置分为上/下呼吸道感染，引起的病原体包括细菌、病毒、支原体、衣原体、军团菌和真菌等。
由于一种病原体可引起多种临床症状，同一临床症状可有多种病原体引起，使得病原体检测面临挑战。
另外，90%以上急性呼吸道感染是由病毒引起的，若能及时明确感染病原，可避免抗生素的滥用并促进临床及时开展抗病毒治疗。
现有的检测方法包括病毒培养、免疫性检测和分子生物学检测等方法，各有其优缺点，其中分子生物学技术灵敏度和特异性最好，但传统核酸检测技术只能只对单一病原体,效率较低。
多重PCR技术将扩增和检测效率都提高了1个数量级。
通过单管内同时加入多达40个引物进行逆转录和基因扩增，随后根据片段长度判断病原体种类。
经过核酸抽提、扩增、电泳、判断4个步骤完成检测流程，最终将呼吸道常见的13种病原体清晰明确地表示在软件图谱上。
需要注意的是，核酸检测中，标本质量对于实验结果的影响重大，推荐使用可代表下气道的抽吸痰液送检，若无痰液仅能送检咽拭子，则应注意采集手法。
鉴于多重PCR技术的优秀表现，该技术已被写入各类指南及专家共识中，本科室使用该技术不但为临床提供了辅助诊断工具，还积累了部分科研成果分享给读者。
第一，各类病原体具有不同的季节流行趋势，小年龄儿童仍
是各类病毒感染的主要受累人群。
第二，配对研究表明,肺炎支原体抗体结果与核酸结果存在与年龄相关的不一致现象，年龄越小，不一致率越高。
第三，肺炎支原体的合并感染占比高达37%,最易合并的病原体为鼻病毒。
综上，临床常见呼吸道感染病原体以病毒为主，多重核酸检测已获多种专业机构的推荐，可为临床提供快速、准确的病原学诊断依据，并具有科研价值。
成人呼吸道感染病原诊断核酸检测技术临床应用专家共识() 解读
成人呼吸道感染病原诊断核酸检测技术临床应用专家共识() 解读汇报人：日期:contents •前言与背景•核酸检测技术原理与方法•临床应用与解读•问题与挑战•实施与建议•总结与展望目录前言与背景明确核酸检测技术在成人呼吸道感染病原诊断中的应用价值规范核酸检测技术的临床操作，提高诊断准确性和可靠性推动呼吸道感染病原诊断的标准化和高质量发展共识目的和意义核酸检测技术能够检测到极低浓度的病原核酸，提高诊断敏感性。
高灵敏度高特异性快速简便通过特异性引物和探针的设计，核酸检测技术能够准确识别目标病原，降低误诊率。
相较于传统培养方法，核酸检测技术具有更高的检测速度，有助于临床快速决策。
030201核酸检测技术在呼吸道感染病原诊断中的地位从最初的PCR技术到实时荧光定量PCR、数字PCR等，核酸检测技术不断迭代升级，提高检测性能和效率。
技术演进通过多重PCR等技术，实现对多种呼吸道感染病原的同时检测，提高诊断覆盖面。
多重检测核酸检测技术逐渐实现自动化样本处理、数据分析等，降低人工操作难度，提高检测通量和一致性。
自动化与智能化核酸检测技术发展与现状核酸检测技术原理与方法核酸检测技术是基于PCR（聚合酶链式反应）技术的一种检测方法。
PCR技术可以在体外扩增特定的DNA片段，通过特异性引物和荧光探针的结合，实现对目标DNA序列的定量检测。
核酸检测技术具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点，已经成为呼吸道感染病原诊断的重要手段之一。
核酸检测技术基本原理样本保存采集后的呼吸道样本应立即放入病毒保存液中，保存液的种类和保存时间应根据具体病原体的特性确定。
样本采集呼吸道样本可采用咽拭子、鼻咽拭子、痰液等方式进行采集。
采集时应避免污染，保证样本的质量和数量。
样本运输样本运输过程中应保持低温，避免反复冻融和剧烈震荡，确保样本的完整性和稳定性。
样本采集、保存与运核酸检测常用方法与技术实时荧光定量PCR技术01通过特异性引物和荧光探针的结合，实时监测PCR扩增过程中的荧光信号变化，实现对目标DNA序列的定量检测。
核酸检测呼吸道金标准
核酸检测呼吸道金标准
核酸检测是诊断呼吸道疾病的金标准之一。
通过核酸检测，可以检测到引起呼吸道感染的病毒及非典型病原体，例如甲型和乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、人副流感病毒、腺病毒的B/E属、肺炎支原体和肺炎衣原体等。
这些病原体可引起急性呼吸道感染和肺炎，严重时可导致死亡。
在采集核酸检测标本时，需要注意一些细节，如采集前2小时尽量避免进食，采样前30分钟不应吸烟、喝酒、咀嚼口香糖等。
采集的标本可以是深部痰液、鼻咽拭子或口咽拭子，其中口咽拭子和鼻咽拭子统称为咽拭子。
采集过程中需要注意个人防护措施，如正确佩戴口罩，检测前取下口罩，检测后立即戴好，可准备一个备用口罩，污染后方便随时更换。
总之，核酸检测是呼吸道疾病的金标准之一，通过核酸检测可以协助临床医生判断患者有无以上病原体引起的呼吸道感染，并采取相应的治疗措施。
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附件1呼吸道病毒多重核酸检测试剂技术审查指导原则（征求意见稿）本指导原则旨在指导注册申请人对呼吸道病毒多重核酸检测试剂注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门审评注册申报资料提供参考。
本指导原则是对呼吸道病毒核酸测定试剂的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。
如申请人认为有必要增加本指导原则未包含的研究内容，可自行补充。
本指导原则是供申请人和审查人员使用的指导文件，不涉及注册审批等行政事项，亦不作为法规强制执行，如有能够满足法规要求的其他方法，也可以采用，但应提供详细的研究资料和验证资料。
应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。
本指导原则是在现行法规、标准体系及当前认知水平下制定的，随着法规、标准的不断完善和科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将适时进行调整。
一、范围呼吸道感染（Respiratory tract infection，RTI）是人类最常见的一类疾病，可以在任何性别、年龄和地域中发生，是全球范围内引起人群发病和死亡的最主要原因之一。
呼吸道感染引起的临床症状和体征都较为相似，其临床表现主要为鼻炎、咽炎、喉炎、扁桃体炎等症状，严重的可引起气管炎、支气管炎及肺炎等，但不同病原体引起的感染，其治疗方法、疗效和病程也不尽相同。
目前已证明，大部分呼吸道疾病是由细菌外的病原体引起，其中以呼吸道病毒最常见。
本指导原则适用于呼吸道病毒多重核酸检测试剂，适用样本类型应为鼻咽拭子、咽拭子、肺泡灌洗液、痰液或其他呼吸道分泌物样本等。
检测对象应可引发相似的临床表现，可包括但不限于：甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒、人偏肺病毒、腺病毒、呼吸道感染肠道病毒（肠道病毒/鼻病毒）、冠状病毒、博卡病毒。
本指导原则适用于利用荧光探针聚合酶链式反应（Real-time PCR）或其他分子生物学方法，以特定的呼吸道病毒基因序列为检测目标，对来源于人体样本中的呼吸道病毒核酸进行体外定性检测，临床用于辅助诊断呼吸道病毒感染相关性疾病。
涉及其他临床用途的呼吸道病原体核酸检测试剂可参考本指导原则。
二、基本要求（一）综述资料综述资料主要包括产品预期用途、产品描述、有关生物安全性的说明、有关产品主要研究结果的总结和评价以及其他内容，其中其他包括同类产品在国内外批准上市的情况。
与预期用途相关的临床适应症应重点描述呼吸道病毒型别与临床适应症的相关性及相关病毒在我国的流行特征；产品描述应明确申报产品所有可检出的病毒型别、尚未验证的病毒型别，陈述应科学、客观且有依据；与国内外同类产品的比较内容应着重从方法学、病毒种类及基因型检出能力、检出限等方面进行比较。
应符合《体外诊断试剂注册管理办法》（国家食品药品监督管理总局令第5号）和《体外诊断试剂注册申报资料要求及说明》（国家食品药品监督管理总局公告2014年第44号）的相关要求。
（二）主要原材料的研究资料此类产品的主要原材料包括引物、探针、酶、dNTP、核酸分离/纯化组分（如有）、企业参考品、质控品等。
应提供主要原材料的选择与来源、制备过程、质量标准等的相关研究资料、质控品的定值、赋值试验资料等。
如主要原材料为企业自制，应提供其详细制备过程；如主要原材料源于外购，应提供的资料包括：选择该原材料的依据及对比试验资料、供货方提供的质量标准、出厂检定报告，以及该原材料到货后的质量检验资料。
1.引物和探针：应详述引物和探针的设计原则，提供引物、探针核酸序列、模板核酸序列及两者的对应情况。
建议每种病毒设计两套或多套引物、探针以供筛选，针对所有预期适用的病毒种类及基因型别进行检出能力和特异性（如交叉反应）的评价，选择最佳组合，并提交筛选的研究数据。
引物、探针的质量标准应至少包括序列准确性、纯度、浓度及功能性实验等。
如为外购，引物应提供合成机构出具的包括如上性能的质检证明，如聚丙烯酰胺凝胶电泳法（PAGE）结果或高效液相色谱法（HPLC）分析图谱。
探针应提供合成机构出具的合成产物的质检证明(HPLC分析图谱)；应对探针的核酸序列及标记的荧光素或化学发光物进行核实，并作HPLC分析。
2.脱氧三磷酸核苷（dNTP）：包括dATP、dUTP、dGTP、dCTP、dTTP，应提供对其纯度、浓度、功能性等的详细验证资料。
3.酶：需要的酶主要包括DNA聚合酶、逆转录酶、尿嘧啶糖基化酶等，应分别对其酶活性等进行评价和验证。
DNA 聚合酶，应具有DNA聚合酶活性，无核酸内切酶活性，具热稳定性；逆转录酶，具逆转录酶活性，无核酸内切酶活性，应提供有关保存稳定性、活性及功能实验等的验证资料；尿嘧啶糖基化酶（UNG），具有尿嘧啶糖基化活性，无核酸外切酶及核酸内切酶活性，应对酶活性有合理验证。
4.试剂盒内质控品试剂盒的质控体系通过设置各种试剂盒对照品（质控品）来实现，其参与样本核酸的平行提取，以对整个PCR反应过程、试剂/设备、交叉污染等环节进行合理质量控制。
质控品浓度及成分的设置应与待测样本相近。
申报资料应对试剂盒对照品有关原料选择、制备、定值过程、浓度范围等试验资料详细说明。
4.1阴性质控品应不含试剂盒所检测的靶序列，参与样本处理和检测的全过程。
以对可能存在的交叉污染产生的假阳性结果或扩增反应中背景值进行质量控制。
阴性质控品可来自非呼吸道病毒感染的患者样本、假病毒、含非靶向序列的生物样本（如非呼吸道病毒感染的细胞系）。
建议采用与实际检测样本具有相同或相似性状的基质溶液作为阴性对照（质控）品，不推荐采用水作为阴性对照（质控）品。
4.2阳性质控品4.2.1全过程阳性质控品应参与样本处理和检测的全过程，如核酸的平行提取等步骤。
全过程阳性质控品可用1～2个病毒株为代表，应含有天然的或人工合成的包含试剂盒可检测靶序列，可来自灭活病毒、假病毒、疫苗或原型疫苗株、低致病性病毒、病毒株感染的细胞系等。
企业应对质控品的检测结果（如Ct值）做出明确的范围要求。
4.2.2扩增/检测用阳性对照品可为浓度在最低检出限附近的纯化靶核酸，以对检测过程进行质量控制。
4.3内对照（内标）可以对管内抑制导致的假阴性结果进行质量控制，应与靶核酸一同提取及扩增，申请人应对内对照（内标）的引物、探针设计和模板浓度做精确验证，既要保证内标荧光通道呈明显的阳性曲线又要尽量降低对靶基因检测造成的抑制。
对内对照的检测结果（如Ct值）亦应做出明确的范围要求。
内标可设置为与待测病毒共提取的人核酸或人管家基因（如RNaseP、β-肌动蛋白）。
5.企业参考品：应详细说明有关企业参考品的原料选择、制备、阴阳性确认等试验资料。
企业参考品的核酸性质应与产品预期检测的靶物质一致。
建议企业参考品优先采用病毒培养物，如病毒难以培养，RNA病毒可采用假病毒、人工克隆或合成的呼吸道病毒基因组RNA，DNA病毒可采用克隆细菌等。
5.1阳性参考品和阴性参考品阳性参考品应覆盖申报产品声称可检出的所有呼吸道病毒亚型（详见表1）。
阴性参考品应考虑检测特异性的评价，应纳入不在试剂盒检测范围内的其他呼吸道病原体样品。
5.2检测限参考品申请人应明确检测限参考品中病毒核酸浓度的确定方法，明确检测限参考品中病毒核酸浓度的确定依据，检测限参考品中呼吸道病毒核酸浓度应为申报产品检测限浓度或略高于检测限浓度，检测限参考品应包含申报产品应检出的呼吸道病毒所有亚型。
5.3精密度参考品可不包含所有涉及的呼吸道病毒血清型，但应选择多个临床较常见的型别，针对所选型别应至少包含3个水平：阴性水平、临界阳性水平、（中或强）阳性水平。
（三）主要生产工艺及反应体系的研究资料1.介绍产品主要生产工艺，可以图表方式表示，并说明主要生产工艺的确定依据。
2.反应原理介绍。
3.详述样本采集、样本处理方式的选择和设置，提供相关的研究资料。
4.确定最佳反应体系的研究资料，包括样本用量、各种酶浓度、引物/探针浓度、dNTP浓度、阳离子浓度及反应各阶段温度、时间、循环数等。
5.不同适用机型的反应条件如果有差异应分别详述，并提交验证资料。
6.如申报产品包含核酸分离/纯化试剂，应提交对核酸分离/纯化过程进行工艺优化的研究资料。
（四）分析性能评估资料申请人应提交生产者在产品研制阶段对试剂盒进行的所有性能评价的研究资料，对于每项分析性能的评价都应包括具体研究目的、试验方法、可接受标准、试验数据、统计方法等详细资料。
有关分析性能验证的背景信息也应在申报资料中有所体现，包括实验地点、适用仪器、试剂规格、批号、临床样本来源等。
针对不同的样本类型，申请人应分别完成性能评估，包括阴阳性符合率、最低检测限、精密度、分析特异性等。
分析性能评价的试验方法可以参考国际或国内有关体外诊断试剂性能评估的指导原则进行。
对于此类产品，性能评估中所用样品（除非特别说明）可参考上述企业参考品的制备要求。
各项性能评价应符合以下要求。
1.核酸分离/纯化性能在进行靶核酸检测前，应有适当的核酸分离/纯化步骤。
该步骤的目的除最大量分离出目的核酸外，还应有相应的纯化作用，尽可能去除PCR抑制物。
无论检测试剂是否含有核酸分离/纯化的组分，企业都应结合检测试剂的特性，对配合使用的核酸分离/纯化试剂的提取效率、提取核酸纯度等做充分的验证，提供详细的验证资料。
2.阳性/阴性参考品符合率阳性参考品的检测旨在验证试剂盒检测范围内的各呼吸道病毒血清型、亚型均可以在适当的浓度被检测到，阳性参考品检测结果应为阳性。
阴性参考品旨在评价试剂特异性，阴性参考品检测结果应为阴性。
3.最低检出限申报产品最低检测限的性能评估资料应包含最低检测限的确定及验证过程。
3.1应针对申报产品所能检出的常见呼吸道病毒血清型、基因型分别进行确定，建议采用培养后病毒原液、以混合阴性样本基质作为稀释液进行梯度稀释，难以培养的病毒也可采用假病毒或其他适宜方法进行最低检出限的确定。
配制系列稀释的样品进行最低检测限的评价，每个稀释度上重复制备3～5份样本，系列稀释度应能够覆盖大部分检出概率区间（0～100%），可通过概率计算或其他适当方法进行测算选取适当检出率水平的浓度作为最低检测限确定的标准，如90-95%（n≥20）的阳性检出率水平。
病毒原液浓度测定建议采用空斑试验，浓度水平采用空斑形成单位（PFU）为计量单位（最低检出限建议病毒见表1）。
3.2申报试剂应在最低检出限或接近最低检出限的病毒浓度进行验证，总测试数不少于20次。
企业应能够提供用于最低检出限/定量限验证的病毒株的来源、型别确认及滴度确认试验等信息。
4.准确性验证建议申请人在病毒LoD水平上或附近对声称样本进行分析，证明试验能够检测代表时间和地理多样性的其他临床相关病毒株（推荐病毒亚型见表1）。
其中，申报试剂应在最低检测限或接近最低检测限的病毒浓度对每种常见待测流感病毒亚型具有时间和区域多样性的至少3个病毒株进行验证。