大学化学0东莞理工学院-化学工程与能源技术学院
应用化学专业本科人才培养方案-东莞理工学院
应用化学专业本科人才培养方案(2015级)一、培养目标本专业培养德智体美全面发展的，掌握应用化学专业知识和实验技能，熟悉化工设计和产品研发过程，了解应用化学专业前沿动态，具有较强实践能力。
能在化工、炼油、材料、制药、能源、环保领等领域的科研机构、企事业单位从事科学研究、生产技术与管理、教学工作、教学教育工作的应用拓展型高素质人才。
通过本专业的学习，学生应获得以下方面的知识、能力和素质：（1）具有扎实的自然科学与工程技术基础、良好的人文艺术类相关知识，熟练的计算机和外语应用能力；（2）掌握应用化学学科的基础知识和相关的工程技术基础知识；（3）掌握精细化工产品开发、配方研究、性能分析、生产及经营管理等所需要的基本技能；（4）了解化学的理论前沿，应用前景、最新发展动态、以及化学相关产业发展状况；（5）具备独立获取知识并进行科技创新的能力；（6）具有国际视野和跨文化的交流、竞争与合作能力。
二、培养规格（一）素质结构要求1思想品德素质热爱祖国，拥护中国共产党的领导，有强烈的职业道德、事业心和责任感，具有爱岗敬业、遵纪守法、团结合作的品质；具有良好的思想品德、人生观、价值观、道德观、法制观、社会公德、行为规范和职业道德。
2文化素质了解自然科学和人文社会科学的基本知识，有科学的思维方式，具有分析问题、解决问题的能力；具备大学层次的文化素质和人文素质；有良好的文化修养、健康的心理素质、良好的人际交往能力和组织管理能力；具有竞争意识、合作精神、坚强毅力；有较宽的知识视野，具有创新意识、创新精神和创新能力。
3身心素质具有一定的体育和军事基本知识，掌握科学锻炼身体的基本技能，养成良好的体育锻炼和卫生习惯，受到必要的军事训练，达到国家规定的大学生体育和军事合格标准，形成健全的心理和健康的体魄，能够履行建设祖国和保卫祖国的神圣义务。
身心素质是应用型本科示范专业人才素质教育的心理保障。
4专业素质具有扎实的专业基础知识、基本理论和基本技能；了解本专业的发展方向和最新研究成果；经过专业职业技能训练，具有从事专业岗位工作的能力；具有对化工和应用化学新产品、新工艺和新技术进行研究、开发和设计的初步能力。
天然活性成分改善睡眠的效果、作用机制及其生物评价模型
天然活性成分改善睡眠的效果、作用机制及其生物评价模型徐文龙;梁钰;李丽华;李琳;许秋莉;兰梅娟;黄敏;李冰
【期刊名称】《中国食品添加剂》
【年(卷),期】2024(35)2
【摘要】睡眠作为一项人体必需的生理活动,在人类健康中起着重要作用。
但是随着现代生活节奏的加快和精神压力的增加,我国失眠的人数逐年升高。
与治疗失眠的精神类化学药物相比,食品中具有改善睡眠功效的天然活性成分安全性较高,且不易出现耐药性和药物依赖性,同时也符合人们日常饮食需求。
本文主要介绍具有改善睡眠功效的天然活性成分,如活性肽类、氨基酸类、皂苷类、黄酮类、益生元等,阐述其改善睡眠的效果及其作用机理,并进一步综述评价天然活性成改善睡眠效果的生物评价模型,以及其在食品中应用的研究进展,以期为这些天然活性成分的高值化利用及食品开发提供参考。
【总页数】10页(P16-25)
【作者】徐文龙;梁钰;李丽华;李琳;许秋莉;兰梅娟;黄敏;李冰
【作者单位】深圳市晨光乳业有限公司;华南理工大学食品科学与工程学院;东莞理工学院化学工程与能源技术学院;广东省天然产物绿色加工与产品安全重点实验室【正文语种】中文
【中图分类】TS202.1
【相关文献】
1.基于网络药理学及分子对接探讨百合知母汤治疗睡眠障碍的活性成分及作用机制
2.基于天然产物的药理活性成分发现与作用机制研究
3.天然药物活性成分对溃疡性结肠炎作用机制研究进展
4.生物活性导向分离山楂炭中止血活性成分及其作用机制研究
5.天然药物抗肿瘤活性成分及其作用机制研究进展
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
大学化学课程线上线下混合式教学的实践与思考
第5期尹辉斌，等:大学化学课程线上线下混合式教学的实践与思考-237-大学化学课程线上线下混合式教学的实践与思考尹辉斌，刘鉴，许书瑞(东莞理工学院化学工程与能源技术学院，广东东莞523808)摘要:线上线下混合式教学是新时代教育发展的必然产物，也是未来教学改革的重要方向°从化学知识与专业应用结合的角度出发，进行教学理念的重塑、教学元素的重构、教学过程的重排，开展《大学化学》课程线上线下混合式教学模式的探索与实践，有效提高课程教学质量’关键词:大学化学#混合式教学;教学改革中图分类号:G410文献标识码:A文章编号:1008-011X(1011)05-0137-01Practicc and Thinking of Hybrin Online and Offline TeachingofUnnv rtnry Ch mntrryYin Hutbin,Liu Jian,Xu Shurui(SchooeotChemicaeEngineeoingand EneogyTechnoeogy，Dongguan UnieeosityotTechnoeogy，Dongguan523808，China)Abtiraci:Hyboid oneineand o t eineteachingmodeistheineeitabeepooductottheeducationaedeeeeopmentin theneweoa，and aOe an impo—ant direction of teaching reform in the future.F—m the perspective of the combination of chemical knowledge and specialty application,the teaching concept,teaching elements and teaching process a—redesigned.The exploration and practice othyboid oneineand o t eineteachingotUnieeosityChemistoycouoseisca o i ed outtoe t ectieeeyimpooeeitsteachingquaeity.K y wordt:UnieeosityChemistoy#beended teaching#teachingoetoom化学是自然科学的基础学科之一,《大学化学》课程已成为许多高校面向工科非化工类专业本科生实施化学教育的一门基础课程,对完善学生的知识能力结构具有重要作用。
东莞理工学院什么专业最好
东莞理工学院什么专业最好
东莞理工学院什么专业最好
高考填报志愿时，东莞理工学院最好的专业是什么、哪些专业比较好是广大考生和家长朋友们十分关心的.问题，为了方便大家查询，小编已经为大家整理好了东莞理工学院最好的专业，包含特色专业、优势专业等，供大家参考。
1、东莞理工学院最好的专业名单
国家特色专业
教育部卓越工程师教育培养计划专业
作
省级一流本科专业建设点名单：应用化学、机械设计制造及其自动化、电子信息工程、计算机科学与技术、软件工程、环境工程、工商管理
2、东莞理工学院简介
东莞理工学院是广东东莞市的第一所普通本科院校，省市共建，以市为主，由诺贝尔物理学奖获得者杨振宁博士任名誉校长。
学校于1990年筹办。
1992年4月，经原国家教委批准成立。
2002年3月，经教育部批准变更为本科全日制普通高等院校。
2006年5月，获批成为学士学位授予单位。
2008年5月，提前参加教育部本科教学工作水平评估并以良好成绩通过。
2010年6月，与清华大学等61所高校一起被批准为教育部第一批“卓越工程师教育培养计划”实施高校。
2010年8月，获批成为广东省立项建设的新增硕士学位授
予单位。
2012年，获批为“广东省国际科技合作基地”。
2015年7月，化学工程与技术、计算机科学与技术、电子科学与技术3个一级学科被授予高等学校副教授评审权。
2015年9月被确定为第一批省市共建高水平理工科大学建设单位。
化学工程与技术学科带头人范洪波教授
化学工程与技术学科带头人范洪波教授
佚名
【期刊名称】《东莞理工学院学报》
【年(卷),期】2011(018)005
【摘要】范洪波，博士后、教授。
东莞理工学院化学与环境工程学院院长、书记，兼任东莞市清洁生产科技中心副主任。
1964年2月生，1983年7月毕业于河南
师范大学化学专业，1996年6月获华中理工大学应用化学专业硕士学位，
【总页数】3页(PF0002-F0002,I0001,I0002)
【正文语种】中文
【中图分类】TQ02
【相关文献】
1.站在化学工程和生物技术的至高点——专访德国德西码（DECHEMA）化学工程与生物技术协会会长吉尔哈特·克雷札博士教授 [J], 郭政
2.化学工程与技术学科学科带头人关晓辉 [J],
3.我国农业生物技术的拓荒者——中国工程院院士、农业基因工程学科带头人范云
六 [J],
4.本刊原主编、2017年度江苏省科学技术奖一等奖获得者朱洪波教授受到表彰[J],
5.瀋陽農業大學·学科带头人生物化学与分子生物学——范海延教授 [J], 瀋陽農
業大學学科建设处·学报编辑部
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
基于ThT荧光寿命检测蛋清溶菌酶蛋白寡聚体
Ｖｏｌ．４０高等学校化学学报Ｎｏ．１２０１９年１月㊀㊀㊀㊀㊀㊀ＣＨＥＭＩＣＡＬＪＯＵＲＮＡＬＯＦＣＨＩＮＥＳＥＵＮＩＶＥＲＳＩＴＩＥＳ㊀㊀㊀㊀㊀㊀９０ ９５㊀㊀ｄｏｉ：１０．７５０３／ｃｊｃｕ２０１８０３９７基于ＴｈＴ荧光寿命检测蛋清溶菌酶蛋白寡聚体李㊀成１，宋吉雪１，刘婷婷１，李㊀妍１，刘冰南１，王㊀亮１，肖㊀珊１，李㊀琳２，耿旭辉３，王际辉１，２（１．大连工业大学生物工程学院，大连１１６０３４；２．东莞理工学院化学工程与能源技术学院，东莞５２３８０８；３．中国科学院分离分析化学重点实验室，大连１１６０２３）摘要㊀采用时间分辨荧光技术，检测了不同形态蛋白聚集体的荧光染料硫磺素Ｔ（ＴｈＴ）荧光寿命．利用蛋清溶菌酶体外制备了蛋白聚集体；采用透射电子显微镜（ＴＥＭ）及ＴｈＴ稳态荧光检测了结合蛋白纤维生长的动力学曲线，确定其形成寡聚体及纤维样聚集体的特征和时间．通过时间相关单光子计数（ＴＣＳＰＣ）技术测定了蛋清溶菌酶单体㊁寡聚体和淀粉样纤维的ＴｈＴ荧光寿命曲线，并拟合㊁计算其荧光寿命．根据圆二色谱（ＣＤ）分析结果推测聚集体的结构不同导致其与ＴｈＴ的结合状态不同，从而影响ＴｈＴ荧光寿命．结果表明，通过测定ＴｈＴ荧光寿命可以区分蛋白单体㊁寡聚体和纤维样聚集体，并监测蛋白寡聚体的形成，为后续病理蛋白聚集过程中形成寡聚体物质的监测提供了研究基础．关键词㊀寡聚体；硫磺素Ｔ；时间相关单光子计数；荧光寿命中图分类号㊀Ｏ６２９．７３㊀㊀㊀㊀文献标志码㊀Ａ㊀㊀㊀㊀收稿日期：２０１８⁃０５⁃３０．网络出版日期：２０１８⁃１２⁃１２．基金项目：国家重点研发计划项目（批准号：２０１６ＹＦＤ０４００２０３）㊁辽宁省自然科学基金重点项目（批准号：２０１７０５２００４３）和中国科学院分离分析化学重点实验室开放基金（批准号：ＫＬ⁃１７０４）资助．联系人简介：王际辉，男，博士，教授，博士生导师，主要从事天然活性物质的开发及活性方面的研究．Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｗａｎｇｊｈ＿ｄｌｐｕ＠１６３．ｃｏｍ耿旭辉，男，博士，副研究员，主要从事高灵敏光学传感器方面的研究．Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｘｕｈｕｉｇｅｎｇ＠１２６．ｃｏｍ许多神经退行性疾病（ＮＤｓ），如帕金森病（ＰＤ）㊁阿尔茨海默病（ＡＤ）和肌萎缩性脊髓侧索硬化症（ＡＬＳ）等，均与神经细胞内病理蛋白质的淀粉样纤维化（Ｆｉｂｒｉｌ）密切相关［１，２］．淀粉样纤维是指发生错误折叠的蛋白质形成的一类由β折叠片构成的丝状蛋白聚集体［３，４］．机体内淀粉样纤维形成的斑块沉积长期被认为是导致一系列神经退行性疾病的根本原因［３］．然而，研究发现，当将鸡溶菌酶蛋白的寡聚体注射到小鼠脑内时，小鼠会出现神经退行性疾病的表症；而注射了成熟的纤维后，小鼠几乎无相关的损害和毒性［５］．因此可认为，蛋白质错误折叠时，在聚集进程的前期形成的可溶性蛋白质 寡聚体 物质是导致神经退行性疾病发生的根本原因．寡聚体通常是指由几个到几十个蛋白质单体形成的聚集体物质，是淀粉样纤维聚集体的核体物质．对于寡聚体的检测，多集中于特异性抗体物质的制备或酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）等［６］．但这些检测手段对操作人员的技术及操作平台要求很高，难以大范围推广和应用．因此，探索及时检测蛋白质错误折叠的寡聚体的常规技术，对深入了解神经退行性疾病的病理机制非常重要，对相关疾病的早期诊断也具有重要价值．荧光物质的荧光寿命与自身的结构㊁所处微环境的极性及黏度等条件有关，因此利用荧光寿命可以直接了解研究如超分子体系中分子间的簇集㊁蛋白质高级结构等的体系变化．目前，常用荧光染料硫磺素Ｔ（ＴｈＴ）的稳态荧光光谱检测㊁鉴定蛋白质在体外形成的纤维聚集体以及原位㊁组织学标本中的纤维［７］．ＴｈＴ在不同溶液中的荧光寿命具有明显的差异［８］．因此，可利用时间分辨荧光技术检测不同形态蛋白聚集体的ＴｈＴ荧光寿命，以区分蛋白单体㊁寡聚体和纤维样聚集体，并监测蛋白在聚集过程中形成的寡聚体物质．淀粉样纤维化是许多疾病病变蛋白的共性．溶菌酶也是具有淀粉样纤维倾向的蛋白质之一，因此溶菌酶蛋白经常被作为体外蛋白质纤维化研究的模型［９］．本文选择蛋清溶菌酶作为研究对象，通过强变性体系制备了蛋清溶菌酶的纤维样聚集体．利用透射电子显微镜（ＴＥＭ）检测了蛋清溶菌酶在不同孵育时间形成聚集体的状态；结合ＴｈＴ稳态荧光蛋白聚集的生长情况，确定了蛋清溶菌酶在实验条件下形成寡聚体和纤维的时间段；利用时间分辨荧光测量技术，对蛋清溶菌酶单体㊁寡聚体和淀粉样纤维的ＴｈＴ荧光寿命进行了检测；通过三阶公式，计算得出与不同状态聚集体结合的ＴｈＴ的荧光寿命．结果表明，不同状态聚集体的ＴｈＴ荧光寿命具有明显差异．进一步利用圆二色谱（ＣＤ）对不同蛋白聚集体的二级结构进行了检测，推测ＴｈＴ与寡聚体及纤维均可结合，但由于其不同聚集体的结构不同，导致ＴｈＴ与聚集体结合的程度和方位不同，因此不同状态聚集体的ＴｈＴ荧光寿命明显不同．此结果为后续病理蛋白聚集过程中寡聚体物质的监测提供了相关的研究基础．１㊀实验部分１．１㊀试剂与仪器蛋清溶菌酶（Ｌｙｓｏｚｙｍｅ，ｅｇｇｗｈｉｔｅ，Ｍｗ＝１４３００）购于Ａｍｒｅｓｃｏ公司；荧光染料硫磺素Ｔ（ＴｈＴ）和醋酸双氧釉购于Ｓｉｇｍａ公司；４００目普通碳膜铜网购于中镜科仪公司；叠氮化钠㊁盐酸㊁磷酸氢二钠㊁磷酸二氢钠及Ｔｒｉｓ⁃盐酸缓冲液等均为分析纯，购于索莱宝（北京）公司．ＵＶ⁃２５５０Ｐｒｏｂｅ型紫外分光光度计（日本岛津公司）；ＬＳ⁃５５型荧光分光光度计（美国Ｐｅｒｋｉｎ⁃Ｅｌｍｅｒ公司）；ＬｉｆｅＳｐｅｃⅡ型荧光寿命光谱仪（英国ＥｄｉｎｂｕｒｇｈＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ公司）；ＪＥＭ⁃２１００（ＵＨＲ）型透射扫描电子显微镜（日本电子公司）；ＪａｓｃｏＭＯＳ４５０型圆二色光谱仪（ＣＤ，英国ＡｐｐｌｉｅｄＰｈｏｔｏｐｈｙｓｉｃｓ公司）；ＥＰＬ⁃４０５皮秒脉冲二极管激光器（英国ＥｄｉｎｂｕｒｇｈＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ公司），脉冲宽度８６ｐｓ，此波长下仪器响应函数４３４ ０ｐｓ；实验用水均由Ｍｉｌｌｉ⁃Ｑ系统制备．１．２㊀实验过程１．２．１㊀蛋清溶菌酶聚集体的制备㊀以１０ｍｍｏｌ／Ｌ盐酸（ｐＨ＝２ ０）为溶剂配制２０ｍｇ／ｍＬ的蛋清溶菌酶溶液．将蛋白样品置于６５ħ的水浴锅内孵育，参照文献［９，１０］方法制备蛋白聚集体．制备过程中，在蛋白液中加入质量分数为０ ０５％的叠氮化钠，以防止微生物污染．每隔一定时间取样，并于４ħ保存待测；剩余样品继续孵育制备聚集体．１．２．２㊀透射电子显微镜（ＴＥＭ）表征蛋清溶菌酶聚集体形态㊀将适量待测蛋清溶菌酶聚集体样品稀释至０ ５ｍｇ／ｍＬ，参照文献［１１］方法，利用透射电子显微镜，以８０ｋＶ电压，在放大８万倍的条件下，观察蛋清溶菌酶蛋白在不同孵育时间时产生的聚集体的形态．１．２．３㊀蛋清溶菌酶聚集的ＴｈＴ荧光光谱检测㊀用２０ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液（ｐＨ＝７ ４）配制终浓度为２ ５ｍｍｏｌ／Ｌ的ＴｈＴ荧光染料的储备液，用滤膜（０ ２２μｍ）过滤除去菌体及杂质后，于４ħ避光保存，待用．取５０μＬ蛋清溶菌酶聚集体待测样品，加入２ ９ｍＬＴｒｉｓ⁃ＨＣｌ缓冲液（１０ｍｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ＝８ ０）和３０μＬＴｈＴ母液，然后涡旋振荡３０ｓ，避光静置３０ｍｉｎ．首先，采用荧光分光光度计检测与蛋白聚集体结合的ＴｈＴ的荧光光谱，确定其最大激发与发射波长；进而检测不同蛋白聚集体的ＴｈＴ荧光发射情况［１２，１３］．实验中设置激发波长为４４０ｎｍ（狭缝为１０ｎｍ），发射波长为４８４ｎｍ（狭缝为５ｎｍ）．１．２．４㊀聚集体ＴｈＴ荧光寿命的时间分辨荧光技术检测㊀采用具有时间相关单光子计数（ＴＣＳＰＣ）技术的ＬｉｆｅＳｐｅｃⅡ型荧光光谱仪测定了蛋清溶菌酶单体㊁寡聚体和淀粉样纤维聚集体的荧光寿命［１４，１５］．设定激发波长为４０５ｎｍ，工作重复频率１０ＭＨｚ．通过Ｆ９００数据采集处理软件（ＥｄｉｎｂｕｒｇＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓＬｔｄ．）采集数据．对荧光寿命数据采用Ｏｒｉｇｉｎ９．０软件利用二阶指数方程进行拟合，并最终求得ＴｈＴ荧光寿命的均值．１．２．５㊀蛋清溶菌酶聚集体二级结构的圆二色光谱（ＣＤ）分析㊀将孵育不同时间的蛋清溶菌酶聚集体样品用Ｔｒｉｓ⁃ＨＣｌ缓冲液稀释，使其终浓度为０ １ｍｇ／ｍＬ．将样品加入ＣＤ谱的比色皿中（宽度为１ｍｍ），在室温及１９０ ２６０ｎｍ波长下扫描蛋白溶液的ＣＤ谱［１６］．１９㊀Ｎｏ．１㊀李㊀成等：基于ＴｈＴ荧光寿命检测蛋清溶菌酶蛋白寡聚体２９高等学校化学学报㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀Ｖｏｌ．４０㊀２㊀结果与讨论２．１㊀蛋清溶菌酶聚集的ＴＥＭ表征利用ＴＥＭ观察了蛋清溶菌酶孵育不同时间时产生的聚集体的形态．溶菌酶蛋白在变性去折叠的条件（如强酸㊁高温及还原环境等）下，能够形成淀粉样纤维化聚集体．在ｐＨ＝２ ０，６５ħ水浴条件下，制备了蛋清溶菌酶的聚集体，选取不同孵育时间的样品，检测了蛋白的聚集情况．由图１可见，与未经处理的空白对照组相比，实验条件下孵育１ｄ时，蛋清溶菌酶出现了较为规则的球状蛋白聚集体，平均直径为１８ ８０ｎｍ．每个蛋清溶菌酶蛋白单体的直径约为４ ５ｎｍ，由此推算，每个颗粒状聚集体由４ １８个蛋白单体构成，其相对分子质量为５８０００ ２６００００［图１（Ｂ）］．孵育２ｄ时，聚集体的体积增大，形态由初期的球形变成了不规则的聚集体，并初步具有类线性形态的聚集体［图１（Ｃ）］．孵育４ｄ时，聚集体逐渐增大，出现了部分类纤维的聚集结构［图１（Ｄ）］．孵育６ｄ时，蛋白寡聚体基本消失，出现了短小的典型纤维丝结构，其直径为８ １５ｎｍ，纤维丝长度为０ ３ １ ５ｎｍ［图１（Ｅ）］．孵育９ｄ时，蛋清溶菌酶蛋白已经形成了较长的纤维丝［图１（Ｆ）］．由于蛋白分子之间结合尚不紧密，所以此时纤维丝粗细不均，结构较松散，中空形态不够立体化．随着孵育时间的继续延长（１２ ２０ｄ），纤维聚集体的结构逐渐至成熟状态，其形态规则㊁均一㊁细长且无分支［图１（Ｇ） （Ｉ）］．Ｆｉｇ．１㊀ＴＥＭｉｍａｇｅｓｏｆｅｇｇｌｙｓｏｚｙｍｅａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎｓａｔｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉｎｃｕｂａｔｉｏｎｔｉｍｅ（Ａ）Ｔｈｅｅｇｇｌｙｓｏｚｙｍｅｗｉｔｈｏｕｔａｎｙｔｒｅａｔｍｅｎｔ；（Ｂ Ｉ）ｔｈｅａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎｓａｍｐｌｅｓｆｏｒｅｇｇｌｙｓｏｚｙｍｅａｔｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｉｍｅｐｏｉｎｔｓ（１，２，４，６，９，１２，１６ａｎｄ２０ｄ），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．上述结果表明，蛋清溶菌酶在实验条件下会形成典型的淀粉样纤维聚集体．在聚集过程中，蛋白由最初的寡聚体形成核体，逐渐聚集延伸后，形成纤维样的聚集体．２．２㊀与纤维结合的ＴｈＴ的吸收及发射光谱分析目前，常用ＴｈＴ检测蛋白的纤维聚集体．ＴｈＴ作为分子转子［１７，１８］，当稀溶液中游离的ＴｈＴ分子被激发时，由于中央碳键的旋转作用，其处于激发态的分子可以通过非辐射通道快速地弛豫回基态Ｆｉｇ．２㊀Ｃｈｅｍｉｃａｌｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｔｈｉｏｆｌａｖｉｎ⁃ＴＡｒｒｏｗｓｓｈｏｗｉｎｇｒｏｔａｔｉｏｎａｌｍｏｖｅｍｅｎｔａｒｏｕｎｄｔｈｅｃｅｎｔｒａｌｃａｒｂｏｎｂｏｎｄ．（见图２），因此不会发出荧光．但是，ＴｈＴ能与淀粉样纤维侧链之间的 沟渠 位置结合，由于结合部位的几何约束，限制了其中央碳键的快速旋转，导致其通过Ｃ Ｃ单键旋转的非辐射态回归过程被抑制，只能通过辐射荧光回到基态．因此，ＴｈＴ与淀粉样纤维结合后，会被激发产生明显的发射荧光．根据ＴＥＭ表征结果，测定了蛋清溶菌酶纤维样聚集体（孵育第１６ｄ的样品）的发射光谱．结果显示，在４４０ｎｍ波长的激发下，与蛋白纤维聚集体结合的ＴｈＴ在４８０ｎｍ处出现最大发射峰．因此，在后续的荧光实验中选取４４０ｎｍ波长激发，均以４８０ｎｍ波长发射的条件检测蛋白聚集体的ＴｈＴ的荧光情况．２．３㊀蛋清溶菌酶蛋白聚集体的ＴｈＴ稳态荧光光谱分析ＴｈＴ的稳态荧光光谱常用来表征蛋白淀粉样聚集体的产生［１２，１３，１９］．图３（Ａ）和（Ｂ）分别展示了不同蛋清溶菌酶聚集体的ＴｈＴ稳态荧光光谱及其纤维生长的动力学曲线．结果表明，在孵育０ ２ｄ时，在４８０ｎｍ处ＴｈＴ无发射峰，尽管此时蛋白已经形成了寡聚体［图１（Ｃ）］．孵育第４ｄ的样品在４８０ｎｍ处出现明显的ＴｈＴ荧光峰．随着孵育时间的延长，蛋白聚集体ＴｈＴ的荧光强度逐渐增强．孵育第９ｄ时，ＴｈＴ荧光达到并稳定在较高的水平（９ ２０ｄ），此时，蛋清溶菌酶蛋白聚集体为成熟的淀粉样聚集体［图１（Ｆ） （Ｉ）］．上述结果表明，利用ＴｈＴ的稳态荧光可以监测蛋白的淀粉样纤维聚集体，但不能监测蛋白在聚集前期形成的寡聚体．Ｆｉｇ．３㊀Ｓｔｅａｄｙｓｔａｔｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｅｍｉｓｓｉｏｎ（Ａ）ａｎｄｔｈｅｋｉｎｅｔｉｃｃｕｒｖｅｏｆａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ（Ｂ）ｆｏｒｔｈｅｈｅｎｌｙｓｏｚｙｍｅｓａｍｐｌｅｓｉｎｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎ２．４㊀蛋清溶菌酶蛋白聚集体形成的ＴｈＴ荧光寿命检测Ｆｉｇ．４㊀ＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｅｍｉｓｓｉｏｎｄｅｃａｙｃｕｒｖｅｓｏｆＴｈＴｉｎｃｕｂａｔｉｏｎｗｉｔｈｔｈｅｓａｍｐｌｅｓｏｆｔｈｅｅｇｇｌｙｓｏｚｙｍｅＩｎｃｕｂａｔｉｏｎｔｉｍｅ／ｄ：ａ．０；ｂ．２；ｃ．１６．ＴｈＴ的荧光寿命与其结构㊁所处微环境的极性及黏度等条件有关．因此，通过荧光寿命可以直接了解物质体系周围环境发生的微观变化［２０］．利用时间分辨荧光技术检测了蛋清溶菌酶不同形态聚集体的ＴｈＴ荧光寿命．利用高重复频率的皮秒脉冲激光器激发（激发波长４０５ｎｍ），同时选取发射谱中强度最大处作为荧光衰减过程的检测波长．此类荧光物质的荧光衰减过程往往呈现出多指数方程的衰减特性，图４展示了蛋清溶菌酶蛋白单体（孵育０ｄ）㊁寡聚体（孵育２ｄ）和纤维聚集体（孵育１６ｄ）的荧光寿命动力学曲线．利用二阶指数方程对不同孵育时间的蛋白聚集体的荧光寿命进行拟合［２１］，计算得出相应样品的ＴｈＴ荧光寿命（见表１）．结果表明，单体蛋白的荧光寿命时间很短（τ＝０ ５ｎｓ）．荧光光谱结果表明，ＴｈＴ不能与单体蛋白结合，被激发后也不会产生发射荧光，因此单体蛋白样品内的ＴｈＴ无荧光寿命（图４谱线ａ）．孵育２ｄ时蛋白寡聚体的ＴｈＴ具有明显的荧光寿命（图４谱线ｂ），其寿命为１ ０６ｎｓ，约为蛋白单体ＴｈＴ寿命的２ ０倍．这表明虽然利用３９㊀Ｎｏ．１㊀李㊀成等：基于ＴｈＴ荧光寿命检测蛋清溶菌酶蛋白寡聚体荧光光谱技术无法检测蛋白寡聚体，但利用ＴｈＴ的荧光寿命可以检测到寡聚体的形成，从而区分蛋白单体与寡聚体．纤维样蛋白聚集体的荧光寿命也明显长于寡聚体（图４谱线ｃ），计算其ＴｈＴ的荧光寿命约１ ５０ １ ６０ｎｓ，约为寡聚体寿命的１ ５倍．上述结果表明，利用时间分辨荧光技术检测ＴｈＴ的荧光寿命可以区分蛋白单体㊁寡聚体及纤维样聚集体．Ｔａｂｌｅ１㊀ＫｉｎｅｔｉｃａｎａｌｙｓｉｓｏｆｅｍｉｓｓｉｏｎｄｅｃａｙｆｏｒＴｈＴｉｎｔｈｅｐｒｅｓｅｎｃｅｏｆｅｇｇｌｙｓｏｚｙｍｅａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎｓａｍｐｌｅｓｆｏｒｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉｎｃｕｂａｔｉｏｎｔｉｍｅ∗Ｓａｍｐｌｅｔ／ｄａ１τ１／ｎｓａ２τ２／ｎｓ τ⓪／ｎｓＭｏｎｏｍｅｒ０６５５３．７９０．２２２０６０．４００．７６０．５０Ｏｌｉｇｏｍｅｒ１１４０５．８５０．４１８０６０．２９１．１３１．０９２５１３０．４００．９９５１３４．２０１．１３１．０６Ｆｉｂｒｉｌ４７８９３．８００．９６１６９９．００２．６２１．５７８７６５６．８２０．９２２１１１．０２２．４２１．５５１２７８６４．６３１．０２１７３５．９５２．７３１．６６１６８３２３．９５１．００１２８９．１７２．８８１．５８㊀㊀∗Ｔｈｅｖａｌｕｅｏｆｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｌｉｆｅｔｉｍｅτｗａｓｃａｌｃｕｌａｔｅｄｂｙｔｈｅｄｏｕｂｌｅ⁃ｅｘｐｏｎｅｎｔｉａｌｆｉｔｓ，Ｙ（τ）＝ａ１ｅτ／τ１＋ａ２ｅτ／τ２，ｗｈｉｃｈｇｅｎｅｒａｔｅｓｔｗｏｌｉｆｅｔｉｍｅｖａｌｕｅｓ（τ１ａｎｄτ２），ａｎｄｔｈｅｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｍｐｌｉｔｕｄｅｓ（ａ１ａｎｄａ２）．Ｔｈｅｉｎｔｅｎｓｉｔｙ⁃ａｖｅｒａｇｅｌｉｆｅｔｉｍｅ τ⓪，ｕｓｉｎｇｔｈｅｆｏｌｌｏｗｉｎｇｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ： τ⓪＝（ａ１τ２１＋ａ２τ２２）／（ａ１τ１＋ａ２τ２），ｗａｓｔｈｅｎｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ．２．５㊀蛋清溶菌酶聚集体结构的ＣＤ谱分析不同状态蛋白聚集体的ＴｈＴ荧光寿命不同，可能是由于蛋白寡聚体和纤维聚集体的二级结构不Ｆｉｇ．５㊀ＣＤｓｐｅｃｔｒａｏｆｔｈｅｅｇｇｌｙｓｏｚｙｍｅａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎＩｎｃｕｂａｔｉｏｎｔｉｍｅ／ｄ：ａ．０；ｂ．２；ｃ．１６．同，从而导致其与ＴｈＴ的结合状态不同．ＣＤ技术常用于检测蛋白大分子的二级结构［１６，２２］．由图５可知，天然溶菌酶在２１０ ２１５ｎｍ处有最低椭圆率，在１９６ｎｍ正峰处具有最高椭圆率，表明溶菌酶的天然结构主要以α螺旋为主．对于孵育２ｄ的寡聚体样品，负峰位置红移至２１５ｎｍ，表明溶菌酶淀粉样纤维的构象正在由主要的螺旋转变为β折叠．孵育１６ｄ的蛋白聚集体，负峰的位置主要处于２１６ｎｍ，即蛋白的纤维样聚集体以β折叠为主．ＣＤ谱结果说明，３种状态蛋白的二级结构明显不同，导致其与ＴｈＴ结合的位置及其结合部位的局部物理化学环境不同，进而对ＴｈＴ分子的中心自旋旋转影响不同，造成蛋白单体㊁寡聚体以及纤维的ＴｈＴ荧光衰变的寿命不同．３㊀结㊀㊀论利用时间分辨荧光技术检测了不同状态蛋白聚集体的ＴｈＴ荧光寿命．结果表明，基于ＴｈＴ的荧光寿命可区分具有不同聚集状态的寡聚体㊁淀粉样纤维和单体，从而监测蛋白寡聚体的形成．本文结果为后续病理蛋白聚集过程中寡聚体物质的监测提供了相关的研究基础．参㊀考㊀文㊀献［１］㊀ＬａｎｄｒｅｈＭ．，ＳａｗａｙａＭ．，ＨｉｐｐＭ．，ＥｉｓｅｎｂｅｒｇＤ．，ＷüｔｈｒｉｃｈＫ．，ＨａｒｔｌＦ．，Ｉｎｔｅｒｎ．Ｍｅｄ．，２０１６，２８０，１６４ １７６［２］㊀ＰｉｎｎｅｙＪ．Ｈ．，ＨａｗｋｉｎｓＰ．Ｎ．，Ａｎｎ．Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２０１２，４９（３），２２９ ２４１［３］㊀ＳｔｅｆａｎｉＭ．，ＦＥＢＳＪ．，２０１０，２７７（２２），４６０２ ４６１３［４］㊀ＳｏｎｇＳ．Ｍ．，ＭａＸ．Ｗ．，ＺｈｏｕＹ．Ｈ．，ＸｕＭ．Ｔ．，ＳｈｕａｎｇＳ．Ｍ．，ＤｏｎｇＣ．，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．ＣｈｉｎｅｓｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｉｅｓ，２０１６，３２（２），１７２ １７７［５］㊀ＧｈａｒｉｂｙａｎＡ．Ｌ．，ＺａｍｏｔｉｎＶ．，ＹａｎａｍａｎｄｒａＫ．，ＭｏｓｋａｌｅｖａＯ．Ｓ．，ＭａｒｇｕｌｉｓＢ．Ａ．，ＫｏｓｔａｎｙａｎＩ．Ａ．，Ｍｏｒｏｚｏｖａ⁃ＲｏｃｈｅＬ．Ａ．，Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．Ｊ．，２００７，３６５，１３３７ １３４９［６］㊀ＳａｒｒｏｕｋｈＲ．，ＧｏｏｒｍａｇｈｔｉｇｈＥ．，ＲｕｙｓｓｃｈａｅｒｔＪ．Ｍ．，ＲａｕｓｓｅｎｓＶ．，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ，２０１３，１８２８，２３２８ ２３３８［７］㊀ＢｉａｎｃａｌａｎａＭ．，ＭａｋａｂｅＫ．，ＫｏｉｄｅＡ．，ＭｏｌｅｃｕｌａｒＳ．，ＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，２００９，３８５（４），１０５２ １０６３［８］㊀ＶｅｒｍａＭ．，ＶａｔｓＡ．，ＴａｎｅｊａＶ．，ＡｎｎａｌｓｏｆｔｈｅＩｎｄｉａｎＡｃａｄｅｍｙｏｆＮｅｕｒｏｌｏｇｙ，２０１５，１８，１３８ １４５４９高等学校化学学报㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀Ｖｏｌ．４０㊀［９］㊀ＡｋｉｈｉｔｏＨ．，ＨｉｒｏｙｕｋｉＡ．，ＡｋｉｏＫ．，Ｂｉｏｓｃｉ．Ｂｉｏｔｅｃｈｏｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２００８，７２（６），１５２３ １５３０［１０］㊀ＦｒａｒｅＥ．，ＭｏｓｓｕｔｏＭ．Ｆ．，ｄｅＬａｕｒｅｔｏＰ．Ｐ．，ＴｏｌｉｎＳ．，ＭｅｎｚｅｒＬ．，ＤｕｍｏｕｌｉｎＭ．，ＤｏｂｓｏｎＣ．Ｍ．，ＦｏｎｔａｎａＡ．，Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．Ｊ．，２００９，３８７，１７ ２７［１１］㊀ＯｒｔｅＡ．，ＢｉｒｋｅｔｔＮ．Ｒ．，ＣｌａｒｋｅＲ．Ｗ．，ＤｅｖｌｉｎＧ．Ｌ．，ＤｏｂｓｏｎＣ．Ｍ．，ＫｌｅｎｅｒｍａｎＤ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．ＡｃａｄＳｃｉ．ＵＳＡ，２００８，１０５，１４４２４ １４４２９［１２］㊀ＬａｎｄａｕＭ．，ＳａｗａｙａＭ．Ｒ．，ＦａｕｌｌＫ．Ｆ．，ＬａｇａｎｏｗｓｋｙＡ．，ＪｉａｎｇＬ．，ＳｉｅｖｅｒｓＳ．Ａ．，ＬｉｕＪ．，ＢａｒｒｉｏＪ．Ｒ．，ＥｉｓｅｎｂｅｒｇＤ．，ＰＬｏＳＢｉｏｌ．，２０１１，９（６），ｅ１００１０８０［１３］㊀ＳｏｎｇＳ．，ＷａｎｇＹ．，ＸｉｏｎｇＬ．，ＱｕＬ．，ＸｕＭ．，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．ＣｈｉｎｅｓｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｉｅｓ，２０１３，２９（１），２０ ２５［１４］㊀ＤａｖｉｄＪ．Ｌ．，ＭｏａＳ．Ｗ．，ＭｅｌｉｎａＧ．Ｇ．，ＦｒｅｄｒｉｋＷ．，ＥｌｉｎＫ．Ｅ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，２０１５，４５８，４１８ ４２３［１５］㊀ＨａｎｃｚｙｃＰ．，ＳｚｎｉｔｋｏＬ．，ＺｈｏｎｇＣ．，ＨｅｅｇｅｒＡ．，ＡＣＳＰｈｏｔｏｎｉｃｓ．Ｊ．，２０１５，２，１７５５ １７６２［１６］㊀ＤｕｍｏｕｌｉｎＭ．，ＫｕｍｉｔａＪ．Ｒ．，ＤｏｂｓｏｎＣ．Ｍ．，Ａｃｃ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．，２００６，３９，６０３ ６１０［１７］㊀ＢｉａｎｃａｌａｎａＭ．，ＫｏｉｄｅＳ．，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ，２０１０，１８０４，１４０５ １４１２［１８］㊀ＡｍｄｕｒｓｋｙＮ．，ＥｒｅｚＹ．，ＨｕｐｐｅｒｔＤ．，Ａｃｃ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．，２０１２，４５（９），１５４８ １５５７［１９］㊀ＳｉｎｇｈＰ．Ｋ．，ＭｏｒａＡ．Ｋ．，ＮａｔｈＳ．，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．，２０１５，５１，１４０４２ １４０４５［２０］㊀ＸｕｅＷ．Ｆ．，ＨｅｌｌｅｗｅｌｌＡ．Ｌ．，ＧｏｓａｌＷ．Ｓ．，Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．Ｊ．，２００９，２８４，３４２７２ ３４２８２［２１］㊀ＣｈｅｎＹ．Ｃ．，ＰｕＹ．Ｃ．，ＨｓｕＹ．Ｊ．，Ｊ．Ｐｈｙｓ．Ｃｈｅｍ．Ｃ，２０１２，１１６，２９６７ ２９７５［２２］㊀ＳｚｎｉｔｋｏＬ．，ＨａｎｃｚｙｃＰ．，ＭｙｓｌｉｗｉｅｃＪ．，ＳａｍｏｃＭ．，Ａｐｐｌ．Ｐｈｙｓ．Ｌｅｔｔ．，２０１５，１０６，０２３７０２ＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＥｇｇＷｈｉｔｅＬｙｓｏｚｙｍｅＯｌｉｇｏｍｅｒｓＢａｓｅｄｏｎＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅＬｉｆｅｔｉｍｅｏｆＴｈＴ†ＬＩＣｈｅｎｇ１，ＳＯＮＧＪｉｘｕｅ１，ＬＩＵＴｉｎｇｔｉｎｇ１，ＬＩＹａｎ１，ＬＩＵＢｉｎｇｎａｎ１，ＷＡＮＧＬｉａｎｇ１，ＸＩＡＯＳｈａｎ１，ＬＩＬｉｎ２，ＧＥＮＧＸｕｈｕｉ３∗，ＷＡＮＧＪｉｈｕｉ１，２∗（１．ＳｃｈｏｏｌｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＤａｌｉａｎＰｏｌｙｔｅｃｈｎｉｃＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｄａｌｉａｎ１１６０３４，Ｃｈｉｎａ；２．ＳｃｈｏｏｌｏｆＣｈｅｍｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ＆ＥｎｅｒｇｙＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＤｏｎｇｇｕａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｄｏｎｇｇｕａｎ５２３８０８，Ｃｈｉｎａ；３．ＣＡＳＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＳｅｐａｒａｔｉｏｎＳｃｉｅｎｃｅｆｏｒＡｎａｌｙｔｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｄａｌｉａｎ１１６０３２，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ㊀ＴｈｉｏｆｌａｖｉｎＴ（ＴｈＴ）ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｌｉｆｅｔｉｍｅｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔａｇｇｒｅｇａｔｅｓｓｔａｔｅｓｂｙｔｉｍｅ⁃ｒｅｓｏｌｖｅｄｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ．Ｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎｗａｓｍａｄｅｂｙｔｈｅｅｇｇｗｈｉｔｅｌｙｓｏｚｙｍｅｉｎｖｉｔｒｏ．Ｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｔｈｅｏｌｉｇｏｍｅｒａｎｄｆｉｂｒｉｌｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｍｅａｎｓｏｆｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎｅｌｅｃｔｒｏｎｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ，ＴｈＴｓｔｅａｄｙ⁃ｓｔａｔｅｆｌｕｏｒｅｓ⁃ｃｅｎｃｅａｎｄｔｈｅｇｒｏｗｔｈｋｉｎｅｔｉｃｃｕｒｖｅｏｆａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ．Ｔｈｅｔｉｍｅ⁃ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｓｉｎｇｌｅ⁃ｐｈｏｔｏｎｃｏｕｎｔｉｎｇｔｅｃｈｎｉｑｕｅｗａｓｕｓｅｄｔｏｍｅａｓｕｒｅｔｈｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｌｉｆｅｔｉｍｅｏｆＴｈＴｉｎｃｕｂａｔｉｏｎｗｉｔｈｔｈｅａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎｓ．Ｉｔｃａｌｃｕｌａｔｅｄｔｈｅｆｌｕｏｒｅｓ⁃ｃｅｎｃｅｌｉｆｅｔｉｍｅｂｙｆｉｔｔｉｎｇｔｏｔｈｅｄｏｕｂｌｅｅｘｐｏｎｅｎｔｉａｌｅｑｕａｔｉｏｎ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｃｉｒｃｕｌａｒｄｉｃｈｒｏｉｓｍｓｐｅｃｕｌａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｇｇｒｅｇａｔｅｓｗａｓｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｎｄａｆｆｅｃｔｅｄｔｈｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｌｉｆｅｔｉｍｅｏｆＴｈＴ．ＩｔｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄｔｈａｔＴｈＴｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｌｉｆｅｔｉｍｅｃａｎｄｉｓｔｉｎｇｕｉｓｈｐｒｏｔｅｉｎｍｏｎｏｍｅｒｓ，ｏｌｉｇｏｍｅｒｓａｎｄｆｉｂｒｉｌｓ，ａｎｄｍｏｎｉｔｏｒｔｈｅｆｏｒｍａ⁃ｔｉｏｎｏｆｐｒｏｔｅｉｎｏｌｉｇｏｍｅｒｓ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｐｒｏｖｉｄｅａｂａｓｉｓｆｏｒｔｈｅｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇｏｆｏｌｉｇｏｍｅｒｓｕｂｓｔａｎｃｅｓｉｎｔｈｅｐｒｏｅｓｓｏｆｓｕｂ⁃ｓｅｑｕｅｎｔｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｐｒｏｔｅｉｎａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ㊀Ｏｌｉｇｏｍｅｒ；ＴｈｉｏｆｌａｖｉｎＴ；Ｔｉｍｅｄｅｐｅｎｄｅｎｔｓｉｎｇｌｅｐｈｏｔｏｎｃｏｕｎｔｉｎｇ；Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｌｉｆｅｔｉｍｅ（Ｅｄ．：Ｐ，Ｈ，Ｄ，Ｋ）†ＳｕｐｐｏｒｔｅｄｂｙｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＫｅｙＲｅｓｅａｒｃｈＰｒｏｇｒａｍｏｆＣｈｉｎａ（Ｎｏ．２０１６ＹＦＤ０４００２０３），ｔｈｅＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＬｉａｏｎｉｎｇＰｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ（Ｎｏ．２０１７０５２００４３）ａｎｄｔｈｅＯｐｅｎＬａｂｏｒａｔｏｒｙＦｕｎｄｏｆＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＳｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄＡｎａｌｙｔｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｃｈｉｎａ（Ｎｏ．ＫＬ⁃１７０４）．５９㊀Ｎｏ．１㊀李㊀成等：基于ＴｈＴ荧光寿命检测蛋清溶菌酶蛋白寡聚体。
甾醇分子差异对脂质体结构稳定性的影响
㊀㊀2023年4月第38卷第2期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀JOURNAL OF LIGHT INDUSTRY㊀Vol.38No.2Apr.2023㊀收稿日期:2022-02-27基金项目:国家自然科学基金青年基金项目(31901682);广东省普通高校青年创新人才类项目(2018KQNCX259);广东省创新强校工程创新团队项目(2021KCXTD035)作者简介:邓莉梅(1996 ),女,四川省资阳市人,广东工业大学硕士研究生,主要研究方向为食品递送系统㊂E-mail :1176993285@通信作者:于泓鹏(1979 ),男,河南省商丘市人,广东工业大学副教授,博士,主要研究方向为油脂制备及安全㊂E-mail :yuh-peng@邓莉梅,刘宇佳,朱杰,等.甾醇分子差异对脂质体结构稳定性的影响[J].轻工学报,2023,38(2):33-40.DENG L M,LIU Y J,ZHU J,et al.Effect of sterol molecular difference on the structural stability of liposomes[J].Journal of Light Industry,2023,38(2):33-40.DOI:10.12187/2023.02.004甾醇分子差异对脂质体结构稳定性的影响邓莉梅1,2,刘宇佳2,朱杰2,于泓鹏11.广东工业大学轻工化工学院,广东广州510006;2.东莞理工学院化学工程与能源技术学院/中国轻工业健康食品开发与营养调控重点实验室,广东东莞523808摘要:通过添加胆固醇㊁β-谷甾醇和豆甾醇,采用乙醇注入法结合动态高压微流射技术制备甾醇脂质体,研究不同甾醇对脂质体膜结构稳定性的影响㊂结果表明:β-谷甾醇和豆甾醇的加入,使甾醇脂质体粒径从(48.35ʃ0.41)nm 分别增至(106.27ʃ0.90)nm 和(107.27ʃ0.59)nm ,Zeta 电位保持不变,均在-30mV 左右;电子显微镜观察发现,添加甾醇的脂质体形成了稳定的磷脂双分子层结构;甾醇可以使脂质体的盐稳定性和pH 稳定性增强,但对温度稳定性无显著影响;β-谷甾醇和豆甾醇的加入使脂质体膜的流动性㊁疏水性和微极性都显著减小,这表明脂质体磷脂双分子膜的结构变得更加致密㊂关键词:胆固醇;β-谷甾醇;豆甾醇;脂质体;结构稳定性中图分类号:TS201.1㊀㊀文献标识码:A㊀㊀文章编号:2096-1553(2023)02-0033-080 引言脂质体(Liposome)是由磷脂自组装形成的具有双分子层结构的闭合囊泡,尺寸分布可以在10nm到几μm 之间,是食品营养与健康领域一种非常重要的递送介质[1]㊂脂质体具有与生物膜类似的空间分子结构,因而具有良好的生物相容性㊁安全性㊁非免疫原性及缓释效果,在食品㊁医药㊁化妆品等领域都倍受关注[2-3]㊂目前,脂质体在乳制品[4]㊁饮料[5]㊁肉制品[6]㊁巧克力[7]等食品中的应用与研究较为广泛㊂脂质体是一种热力学不稳定体系,易受温度㊁pH 值㊁离子强度等因素影响而引发膜结构破裂㊁磷脂层降解㊁包封物泄露等问题,限制了其在复杂食品体系中的推广与应用㊂为了改善脂质体结构的稳定性,通常采用的物理处理方法包括超声[8]㊁均质[9]㊁动态高压微射流[10]等,也可以通过化学方法对脂质体膜进行修饰,其中,甾醇[11]㊁多糖[12]㊁人工高聚物[13]㊁聚乙二醇[14]㊁蛋白质[15]等作为脂质体双层磷脂膜的修饰成分得到了广泛关注㊂甾醇的分子结构属于类异戊二烯衍生物,是细胞膜的主要构成成分,对细胞膜的结构和功能起着㊃33㊃㊀2023年4月第38卷第2期㊀重要作用㊂但在脂质体形成过程中,甾醇本身无法形成囊泡,通常需要以相对较高的浓度将其结合到磷脂的双分子层膜中,以调节磷脂膜的流动性和通透性[16]㊂与其他脂质体相比,甾醇脂质体制备工艺简单,容易实现规模化生产,并已应用于医药行业㊂目前,胆固醇(Cholesterol)在脂质体的制备过程中是最常使用的甾醇之一,然而胆固醇摄入过多会增加人体患心脑血管疾病和动脉粥样硬化的风险[17]㊂随着人们对食品品质和健康需求的提高,以及对功能性食品的逐渐重视,对人体健康更加有益的植物甾醇逐渐受到业界青睐㊂植物甾醇具有与胆固醇类似的分子结构,其中,β-谷甾醇(β-sitosterol)和豆甾醇(Stigmasterol)具有降低心脑血管疾病风险㊁抗癌㊁抗炎镇痛等功效[18]㊂此外,β-谷甾醇和豆甾醇分子结构不同于胆固醇,两者在C24上的侧链均为乙基基团,而豆甾醇在C22上还具有双键结构[11]㊂但这种结构上的差异对脂质体制备与贮藏过程中磷脂双分子层结构稳定性的影响尚不明确㊂基于此,本研究拟制备包含胆固醇㊁β-谷甾醇及豆甾醇的3种甾醇脂质体,通过测定甾醇脂质体的平均粒径和Zeta电位,结合电镜图像分析,对比不同甾醇对所制备甾醇脂质体微观结构的影响;采用荧光法测定甾醇脂质体磷脂膜的流动性㊁疏水性及微极性,并通过红外光谱探讨甾醇与磷脂的相互作用关系;最后测定不同甾醇脂质体在盐溶液㊁温度㊁pH值等环境因素胁迫下的稳定性,旨在为制备能够替代胆固醇的植物甾醇脂质体用于构建新型健康食品脂质递送体系提供理论支持和数据参考㊂1㊀材料与方法1.1㊀材料与试剂大豆卵磷脂(SPC,纯度90%)㊁二甲基亚砜(DMSO,纯度99%),上海阿拉丁生化科技股份有限公司产;胆固醇(纯度98%)㊁β-谷甾醇(纯度98%),上海源叶生物科技有限公司产;豆甾醇(纯度90%)㊁1,6-二苯基-1,3,5-己三烯(DPH,纯度98%)㊁芘(纯度97%)㊁8-苯氨基-1-萘磺酸(ANS,纯度97%),上海麦克林生化科技有限公司产;无水乙醇㊁吐温-80㊁丙酮㊁HCl㊁NaOH㊁NaCl,均为分析纯,国药集团化学试剂有限公司产㊂1.2㊀主要仪器与设备M-110EH30型高压微射流均质机,美国Mic-fofluidics公司产;Nicolet IS50型红外光谱仪,美国赛默飞公司产;F-7100型荧光光谱仪,日本日立高新技术公司产;Zetasizer Nano-ZS90型激光粒度分析仪,英国Malvern公司产;Spark型多功能微孔板检测仪,瑞士TECAN公司产;Sigma-500型场发射扫描电镜,德国蔡司公司产㊂1.3㊀实验方法1.3.1㊀甾醇脂质体的制备㊀采用乙醇注入法结合动态高压微射流技术,制备胆固醇脂质体(Choles-terol Liposome,Chol-LP)㊁β-谷甾醇脂质体(β-sitos-terol Liposome,Sit-LP)和豆甾醇脂质体(Stigmasterol Liposome,Sti-LP),以空白脂质体(Liposome,LP)为对照㊂方法如下:将磷脂和甾醇以物质的量比3ʒ1溶于无水乙醇中,用注射器匀速缓慢地注入含有吐温-80(质量分数为0.2%)的去离子水中,乙醇和水的体积比为1ʒ8;以750r/min的转速在室温下搅拌60min,使磷脂充分水化,将混合溶液转移至茄形瓶中,40ħ旋转蒸发20min,至乙醇全部除去;将粗脂质体溶液经动态高压微射流18000psi循环1次,得到磷脂质量浓度为10mg/mL的脂质体溶液㊂1.3.2㊀脂质体微观结构表征㊀使用激光粒度分析仪测定脂质体的粒径和Zeta电位㊂为避免多次散射引起测量误差,将待测样品用去离子水稀释10倍后加入聚苯乙烯比色皿中,在25ħ下平衡120s,折光系数为1.490,检测器角度为90ʎ,每个样品至少平行测量3次,结果取平均值㊂将样品滴在硅片上自然晾干并喷金处理30s,将喷金后的样品放入电镜仓中,以3kV的加速电压在场发射扫描电镜下观察脂质体的微观形貌㊂1.3.3㊀脂质体膜的流动性测定㊀采用DPH荧光探针法研究脂质体膜的流动性[19]㊂用去离子水将脂质体稀释10倍后与DPH-DMSO(2μmol/L)溶液以5ʒ1的体积比混合,避光孵育60min㊂孵育后的样品在激发波长360nm㊁发射波长430nm的条件下记录荧光强度,通过公式②计算荧光偏振度(P):G=I90,0/I90,90①㊃43㊃㊀邓莉梅,等:甾醇分子差异对脂质体结构稳定性的影响P=(I0,0-GˑI0,90)/((I0,0+GˑI0,90)②其中,I0,0和I0,90分别为平行的发射光偏振为激发光的荧光强度;I90,0和I90,90分别为垂直的激发光偏振为发射光的荧光强度;G为光栅校正系数㊂P与膜的流动性成反比,P越大,脂质体膜的流动性越小㊂1.3.4㊀脂质体膜的疏水性测定㊀脂质体膜的疏水性采用ANS荧光探针法测定[20]㊂将脂质体稀释10倍后与ANS(8mmol/L)水溶液混合,样品与ANS的体积比为50ʒ1,混合物在室温下避光孵育30min㊂荧光测量的激发波长为350nm,发射光谱采集范围为375~600nm,PTM电压为600V,狭缝宽度均为5nm㊂由于ANS对疏水腔具有较高的亲和力,同时在水环境中没有荧光信号,故荧光强度反映了ANS 的吸收量,用于表示分子的有序程度㊂1.3.5㊀脂质体膜的微极性测定㊀参考芘荧光探针法研究脂质体膜的微极性[20]㊂将脂质体稀释10倍后与芘-丙酮(2mmol/L)溶液混合,样品与芘-丙酮溶液的体积比为50ʒ1,将混合物置于4ħ冰箱避光孵育12h㊂荧光测量的激发波长为338nm,发射光谱采集范围为350~450nm,电压为600V,狭缝宽度均为2.5nm㊂记录芘荧光光谱第1个峰(I1)和第3个峰(I3)的荧光强度,并计算I1/I3㊂1.3.6㊀傅里叶变换红外光谱(FTIR)测定㊀将冻干的样品放置在红外光谱仪样品台上,应用ATR模式研究不同甾醇与磷脂的分子间相互作用,每个样品扫描32次并计算平均值,扫描范围为400~ 4000cm-1,分辨率为4cm-1㊂1.3.7㊀脂质体稳定性测定㊀1)盐稳定性:参考K.D.Tai[19]的方法,将NaCl(100~1000mmol/L)溶液加入到脂质体悬浮液中,NaCl溶液与脂质体悬浮液的体积比为9ʒ1㊂混合液在室温下孵育1h,通过激光粒度分析仪测定脂质体的粒径㊂粒径大小变化程度用ΔS表示:ΔS=孵育后的粒径-初始粒径初始粒径ˑ100%③㊀㊀2)pH稳定性:配制pH值为2.0~12.0的缓冲液并加入到脂质体悬浮液中,缓冲液与脂质体悬浮液的体积比为9ʒ1㊂混合液在室温下孵育1h,通过激光粒度分析仪测定脂质体的粒径㊂粒径大小变化程度用ΔS表示㊂3)温度稳定性:使用激光粒度分析仪的trend 模式测量温度对脂质体粒径的影响㊂温度范围为25~65ħ,测量间隔温度为10ħ,平衡时间为2min㊂粒径大小变化程度用ΔS表示㊂1.4㊀统计分析所有实验至少完成3次平行实验,结果以(平均值ʃ标准差)表示㊂数据使用SPSS19.0软件进行统计分析,当P<0.05时,认为差异具有统计学意义㊂2㊀结果与分析2.1㊀甾醇对脂质体微观结构的影响分析甾醇对脂质体微观结构与粒径分布的影响如图1所示㊂由图1a)和1b)可知,甾醇的加入使脂质体粒径显著增大(P<0.05)㊂未添加甾醇时,脂质体粒径为(48.35ʃ0.41)nm,脂质体溶液呈无色透明状;添加甾醇后,Chol-LP㊁Sit-LP和Sti-LP的粒径分别增加至(98.24ʃ1.21)nm㊁(106.27ʃ0.90)nm和(107.27ʃ0.59)nm,脂质体溶液变为乳白色状㊂K.D.Tai等[21-23]在研究中也发现,甾醇的加入会使脂质体粒径显著增大(P<0.05)㊂这可能是由于甾醇的加入使磷脂排列更紧密,增强了膜的刚性,使脂质体在均质时不易被破碎,且易形成较大的囊泡结构㊂但甾醇对脂质体的Zeta电位没有显著影响,所有脂质体的Zeta电位值均在-30mV左右㊂这可能是由于甾醇不带电荷,且甾醇的加入未引起磷脂头部基团发生剧烈的变化[24]㊂甾醇的加入对脂质体的分散性具有明显的影响㊂由图1c) f)可知,未添加甾醇的脂质体粒径呈双峰分布,甾醇的加入使脂质体粒径呈明显的单峰分布,且单分散系数显著减小(P<0.05),这表明添加甾醇会使脂质体粒径分布更均一㊂未添加甾醇时,空白脂质体没有形成磷脂双分子层结构(见图1c)),只形成了均匀球形的单室脂质囊泡;添加甾醇后,所有脂质体样品都呈现出规则的磷脂双分子层结构,双分子层厚度约为100nm㊂这是由于在使用场发射扫描电镜制样过程中,脂质体从原来的球形结构变成扁平结构,增加了粒径观察尺寸㊂该结果表明,甾醇在脂质体制备过程中对脂质体的结构稳定性具有重要意义㊂㊃53㊃㊀2023年4月第38卷第2期㊀图1㊀甾醇对脂质体微观结构与粒径分布的影响Fig.1㊀Effects of sterols on the microstructure and particle size distribution of liposomes2.2㊀甾醇对脂质体磷脂膜结构稳定性的影响分析㊀㊀采用3种结合在磷脂膜不同部位的荧光探针研究甾醇对脂质体磷脂膜结构稳定性的影响㊂DPH是一种疏水性极强的荧光探针,易进入脂质体膜烃链中间的疏水核心区域,其长轴通常与脂肪酸酰基链平行排列,常被用于测量膜的流动性和微黏度[25]㊂当磷脂膜流动时,DPH会产生不同程度的倾斜,经荧光激发可产生水平和垂直方向不同的偏振分量,从而反映脂质体膜的流动性㊂甾醇对脂质体磷脂膜结构稳定性的影响如图2所示㊂由图2a)可知,添加甾醇后,脂质体的偏振度显著增加,即膜流动性显著降低(P<0.05)㊂这是由于甾醇的加入使磷脂形成了更有序更紧密的膜结构,使DPH的运动受到了限制㊂值得注意的是,3种甾醇脂质体磷脂膜的偏振度无显著性差异,表明胆固醇㊁β-谷甾醇和豆甾醇都使脂质体形成了致密的膜结构㊂杨贝贝等[22,26]研究表明,β-谷甾醇对磷脂膜排序程度大于豆甾醇,这可能与甾醇添加量有关㊂当甾醇添加量过多时,甾醇会在磷脂膜中聚集㊁析出,从而使磷脂膜的流动性增加㊂K.D.Tai等[20]研究发现,当β-谷甾醇的添加量大于33%时,脂质体的偏振度开始降低㊂ANS是一种对微环境极性变化高敏感度的荧光探针,常用来测量脂质双分子层中磷脂分子极性头基的迁移程度及磷脂膜的疏水性,其水相中没有荧光信号,与脂质体结合后荧光强度会显著增强[27]㊂图2b)显示了不同甾醇脂质体在484nm处的ANS荧光强度及其发射光谱,由此可知,甾醇的加入使脂质体的ANS荧光强度显著降低(P<0.05)㊂研究[27]表明,ANS结合发生在磷脂膜与水相的交界处,即磷酸基附近㊂脂质体的荧光强度降低,表明甾醇的加入使进入磷脂膜的ANS荧光探针减少了㊂这可能是因为磷脂头部基团与甾醇之间形成了分子间相互作用,阻碍了ANS与磷脂膜的结合㊂同时,3种甾醇脂质体的ANS荧光强度之间存在显著差异(P<0.05),表明不同甾醇分子结构与磷脂产生了不同强度的分子间作用力㊂芘的荧光发射光谱在370~430nm范围内具有5个特征振动峰,其绝对强度㊁相对强度㊁宽度和位置取决于微环境的极性[28]㊂I1与I3的比值常被用来研究脂质体磷脂膜的微极性,I1/I3越小,表明芘所处微环境的微极性越弱[29]㊂由图2c)可知,甾醇的加入显著降低了脂质体磷脂膜的微极性(P<㊃63㊃㊀邓莉梅,等:甾醇分子差异对脂质体结构稳定性的影响0.05),表明甾醇的加入使脂质体磷脂膜的结构更图2㊀甾醇对脂质体磷脂膜结构稳定性的影响Fig.2㊀Effects of sterols on stability ofliposome membrane structure加紧密,水分子较难进入磷脂双分子层中㊂Sit-LP和Sti-LP 的微极性显著低于Chol-LP,这可能是由于β-谷甾醇和豆甾醇的烷基链比胆固醇多一个乙基,这增加了磷脂分子与甾醇分子间的空间位阻,使芘不易进入磷脂膜的疏水区域㊂2.3㊀甾醇与磷脂的相互作用分析不同甾醇脂质体的FTIR 图如图3所示㊂由图3可知,甾醇的加入没有引起脂质体膜发生剧烈的变化㊂所有脂质体在3306~3319cm -1范围内都出现了宽而强的峰,这是O H 的伸缩振动峰㊂此外,CH 2的不对称拉伸振动峰(2923cm -1)㊁C O 的拉伸振动峰(1735cm -1)㊁PO 2-的不对称伸缩振动峰(1230cm -1)和C O C 的不对称拉伸振动峰(1140cm -1)在所有脂质体均有出现㊂Sit-LP 和Sti-LP 的CH 2对称拉伸振动峰(2853cm -1)向高频有微小的移动㊂Sit-LP 和Chol-LP 的PO 2-对称伸缩振动峰(1030cm -1)和N + CH 3的不对称拉伸振动峰(987cm -1)都向低波数迁移,O H 的弯曲振动峰(1652cm -1)也有较大的迁移,表明β-谷甾醇和胆固醇的OH -与磷脂的PO 2-形成了氢键㊂由此可知,甾醇的加入对磷脂的尾链影响较小,对磷脂的头部基团影响较大㊂图3㊀不同甾醇脂质体的FITR 图Fig.3㊀FITR spectroscopy of different sterol liposomes2.4㊀甾醇对脂质体环境稳定性的影响分析脂质体的环境稳定性研究对进一步考查脂质体在复杂食品体系中的应用情况至关重要㊂不同甾醇对脂质体环境稳定性的影响如图4所示㊂由图4a)可知,甾醇的加入对脂质体的盐稳定性有较大提升㊂当盐浓度超过200mmol /L 时,LP 的粒径增加明显,在800mmol /L 时粒径达到最大值㊂LP粒径增大可能是由于LP 的磷脂膜没有甾醇的支㊃73㊃㊀2023年4月第38卷第2期㊀撑,在高盐浓度下,磷脂的过度堆积使膜更易塌图4㊀不同甾醇对脂质体环境稳定性的影响Fig.4㊀Effects of different sterols onenvironmental stability of liposomes陷,随后聚集形成更大的囊泡[30]㊂而对于Chol-LP㊁Sit-LP和Sti-LP,盐的加入使脂质体的粒径明显减小,且粒径基本不随盐浓度的增加而增加,整体较为稳定㊂在盐溶液中,脂质体粒径变小可能是由于盐浓度增加可使脂质体外的渗透压增加,脂质体脱水,粒径减小㊂由图4b)可知,LP的粒径在低于65ħ时无明显变化,在65ħ时急剧增加,可能发生了膜的破裂和聚集㊂Sit-LP对温度变化较为敏感,其粒径随温度的上升逐渐增加㊂Sti-LP和Chol-LP的温度稳定性较好,在实验温度范围内,Sti-LP与Chol-LP的粒径无显著变化㊂由如4c)可知,甾醇的加入使脂质体的pH稳定性有一定程度的提高(P<0.05)㊂未添加甾醇的LP粒径受pH值的影响较大,在pH值<5及pH值>9时,粒径均有明显的增加,这可能是由于高浓度的H+㊁OH-引起了膜融合㊂在较低pH值下,磷脂易被质子化,从而破坏磷脂间的相互作用,脂质体稳定性降低[31]㊂在较高pH值下,OH-诱导磷脂头基取向发生改变,膜结构被破坏[24]㊂甾醇与磷脂形成的氢键抑制了头基的改变及质子化,因此,添加甾醇的脂质体其粒径基本不随pH值的改变而改变㊂但甾醇脂质体粒径整体较处理前都明显减小,可能是受离子强度改变的影响㊂综上所述,甾醇的加入使脂质体的环境稳定性有所增强,这对脂质体在复杂食品体系中的应用具有重要意义㊂3 结论本文研究了不同甾醇对脂质体结构稳定性的影响,通过对脂质体微观结构㊁磷脂膜结构稳定性及甾醇与磷脂分子间相互作用进行考查,发现,甾醇的加入使脂质体的粒径显著增大,但对脂质体的Zeta电位基本没有影响;胆固醇㊁β-谷甾醇和豆甾醇的加入对脂质体的盐稳定性和pH稳定性都有较显著的提升,但对温度稳定性基本没有改善㊂此外,通过脂质体膜微观结构研究发现,β-谷甾醇和豆甾醇均能使磷脂膜结构更加致密,且β-谷甾醇脂质体的膜稳定性明显优于胆固醇脂质体,具有可替代胆固醇制备脂质体的潜力㊂本研究深入探讨了不同甾醇对脂质体结构稳定性的影响,可为制备能够替代胆固醇的植物甾醇脂质体用于构建新型健康脂质递送体系提供新的研究思路㊂㊃83㊃㊀邓莉梅,等:甾醇分子差异对脂质体结构稳定性的影响参考文献:[1]㊀AKHAVAN S,ASSADPOUR E,KATOUZIAN I,et al.Lipid nano scale cargos for the protection and delivery offood bioactive ingredients and nutraceuticals[J].Trendsin Food Science&Technology,2018,74:132-146. [2]㊀SUBRAMANI T,GANAPATHYSWAMY H.An overviewof liposomal nano-encapsulation techniques and its applica-tions in food and nutraceutical[J].Journal of Food Scienceand Technology,2020,57(10):3545-3555. [3]㊀ISLAM SHISHIR M R,KARIM N,GOWD V,et al.Lipo-somal delivery of natural product:A promising approach inhealth research[J].Trends in Food Science&Technology,2019,85:177-200.[4]㊀AKGÜN D,GÜLTEKIN-ÖZGÜVEN M,YÜCETEPE A,et al.Stirred-type yoghurt incorporated with sour cherry extractin chitosan-coated liposomes[J].Food Hydrocolloids,2020,101:105532.[5]㊀KARIMI N,GHANBARZADEH B,HAJIBONABI F,et al.Turmeric extract loaded nanoliposome as a potentialantioxidant and antimicrobial nanocarrier for food applica-tions[J].Food Bioscience,2019,29:110-117. [6]㊀CUI H Y,YUAN L,LI W,et al.Antioxidant property ofSiO2-eugenol liposome loaded nanofibrous membranes onbeef[J].Food Packaging and Shelf Life,2017,11:49-57.[7]㊀DIDAR Z.Enrichment of dark chocolate with vitamin D3(free or liposome)and assessment quality parameters[J].Journal of Food Science and Technology,2021,58(8):3065-3072.[8]㊀GULZAR S,BENJAKUL S.Characteristics and storagestability of nanoliposomes loaded with shrimp oil as affectedby ultrasonication and microfluidization[J].FoodChemistry,2020,310:125916.[9]㊀BELTRÁN J D,RICAURTE L,ESTRADA K B,et al.Effect of homogenization methods on the physical stabilityof nutrition grade nanoliposomes used for encapsulatinghigh oleic palm oil[J].LWT-Food Science and Technology,2020,118:108801.[10]LI Z L,PENG S F,CHEN X,et al.Effect of dynamic highpressure microfluidization on structure and stability of plu-ronic F127modified liposomes[J].Journal of DispersionScience and Technology,2019,40(7):982-989. [11]ALEXANDER M,ACERO LOPEZ A,FANG Y,et al.Incorporation of phytosterols in soy phospholipids nanolipo-somes:Encapsulation efficiency and stability[J].LWT-Food Science and Technology,2012,47(2):427-436.[12]SARABANDI K,JAFARI S M.Effect of chitosan coating onthe properties of nanoliposomes loaded with flaxseed-pep-tide fractions:Stability during spray-drying[J].FoodChemistry,2020,310:125951.[13]LI Z L,PENG S F,CHEN X,et al.Pluronics modifiedliposomes for curcumin encapsulation:Sustained release,stability and bioaccessibility[J].Food Research Interna-tional,2018,108:246-253.[14]CADDEO C,PUCCI L,GABRIELE M,et al.Stability,biocompatibility and antioxidant activity of PEG-modifiedliposomes containing resveratrol[J].International Journalof Pharmaceutics,2018,538(1/2):40-47. [15]WANG Q,PAN M H,CHIOU Y S,et al.Mechanisticunderstanding of the effects of ovalbumin-nanoliposomeinteractions on ovalbumin emulsifying properties[J].LWT-Food Science and Technology,2022,157:113067.[16]LIU W L,HOU Y Y,JIN Y Y,et al.Research progress onliposomes:Application in food,digestion behavior andabsorption mechanism[J].Trends in Food Science&Technology,2020,104:177-189.[17]SUI W H,LI H S,YANG Y L,et al.Bladder drug mirabe-gron exacerbates atherosclerosis through activation ofbrown fat-mediated lipolysis[J].Proceedings of theNational Academy of Sciences,2019,116(22):10937-10942.[18]BABU S,JAYARAMAN S.An update onβ-sitosterol:Apotential herbal nutraceutical for diabetic management[J].Biomedicine&Pharmacotherapy,2020,131:110702. [19]TAI K D,RAPPOLT M,MAO L K,et al.Stability andrelease performance of curcumin-loaded liposomes withvarying content of hydrogenated phospholipids[J].FoodChemistry,2020,326:126973.[20]TAI K D,RAPPOLT M,HE X Y,et al.Effect ofβ-sitos-terol on the curcumin-loaded liposomes:Vesicle character-istics,physicochemical stability,in vitro release and bio-availability[J].Food Chemistry,2019,293:92-102.[21]TAI K D,LIU F G,HE X Y,et al.The effect of sterolderivatives on properties of soybean and egg yolk lecithinliposomes:Stability,structure and membrane characteris-tics[J].Food Research International,2018,109:24-34.[22]杨贝贝,曹栋,耿亚男,等.植物甾醇与胆固醇对脂质体膜性质的影响[J].食品工业科技,2013,34(7):77-81.[23]黎雨浩,李照莹,周伟,等.火龙果茎植物甾醇对姜黄素纳米脂质体稳定性以及释放性能的影响[J].食品科学,2020,41(16):68-76.[24]MORINI M A,SIERRA M B,PEDRONI V I,et al.Influ-ence of temperature,anions and size distribution on thezeta potential of DMPC,DPPC and DMPE lipid vesicles[J].Colloids and Surfaces B(Biointerfaces),2015,131:54-58.[25]HURJUI I,NEAMTU A,DOROHOI D O.The interactionof fluorescent DPH probes with unsaturated phospholipidmembranes:A molecular dynamics study[J].Journal ofMolecular Structure,2013,1044:134-139.㊃93㊃㊀2023年4月第38卷第2期㊀[26]SILVAC ,ARANDA F J ,ORTIZ A ,et al.Molecular aspects of the interaction between plants sterols and DPPC bilayers :An experimental and theoretical approach [J ].Journal of Colloid and Interface Science ,2011,358(1):192-201.[27]FAN R ,GAN L ,LIU M ,et al.An interaction of helicidwith liposome biomembrane [J ].Applied Surface Science ,2011,257(6):2102-2106.[28]MAZOR S ,VANOUNOU S ,FISHOV I.Pyrene as a mem-brane depth gauge :Wavelength selective fluorescence approach to monitor pyrene localizations in the membrane[J ].Chemistry and Physics of Lipids ,2012,165(1):125-131.[29]PAN L ,LI H ,HOU L F ,et al.Gastrointestinal digestivefate of whey protein isolate coated liposomes loadingastaxanthin :Lipolysis ,release ,and bioaccessibility [J ].Food Bioscience ,2022,45:101464.[30]MOURITSEN O G.Lipids ,curvature ,and nano-medicine[J ].European Journal of Lipid Science and Technology ,2011,113(10):1174-1187.[31]SMITH M C ,CRIST R M ,CLOGSTON J D ,et al.Zetapotential :A case study of cationic ,anionic ,and neutralliposomes [J ].Analytical and Bioanalytical Chemistry ,2017,409(24):5779-5787.Effect of sterol molecular difference on the structural stability of liposomesDENG Limei 1,2,LIU Yujia 2,ZHU Jie 2,YU Hongpeng 11.School of Chemical Engineering and Light Industry ,Guangdong University of Technology ,Guangzhou 510006,China ;2.Key Laboratory of Healthy Food Development and Nutrition Regulation of China National Light Industry /School ofChemical Engineering and Energy Technology ,Dongguan University of Technology ,Dongguan 523808,ChinaAbstract :Liposomes were prepared by ethanol injection combined with dynamic high-pressure microfluidic technol-ogy.The effects of different sterol molecular,including cholesterol,β-sitosterol and stigmasterol,on the membranestructural stability of liposome were compared.The results showed that the addition of β-sitosterol and stigmasterolincreased the particle size of liposomes from (48.35ʃ0.41)nm to (106.27ʃ0.90)nm and (107.27ʃ0.59)nm,respectively,and the Zeta potential remained unchanged at about -30mV.Electron microscopy showed that the lipid containing sterol formed stable bilayer structure of phospholipid.The salt stability and pH stability had beenenhanced,but temperature stability had no significant change.The addition of β-sitosterol and stigmasterol reducedthe micropolarity,hydrophobicity and fluidity of liposome membrane,resulting in a tighter phospholipid bimolecular membrane structure in liposomes.Key words :cholesterol;β-sitosterol;stigmasterol;liposomes;structural stability㊀(责任编辑:杨晓娟)㊃04㊃。
石墨微流体的有效导热系数
石墨微流体的有效导热系数崔国根;杨晓西;丁静;杨建平【摘要】Graphite-based microfluids were prepared via the one-step chemical method,and the effective thermal conductivity of the microfluids was measured by means of the transient hot wire method under the conditions of dif-ferent graphite contents,different ultrasonic time,different microwave time and base fluids.The results show that (1 )the addition of graphite in the base fluids greatly improves the effective thermal conductivity of the microfluids;(2)the effective thermal conductivity of microfluids increases with the increase of the graphite content;(3)the ef-fective thermal conductivities of graphite-based microfluids in three base fluids (DI water,ethylene glycol and dim-ethicone)respectively increase by 102.09%,93.17%and 225.69%at the graphite content of 1.0%;(4)at the same graphite content,the same ultrasonic time and microwavetime,dimethicone may result in the largest effective thermal conductivity increment while DI water may result in the smallest one;and (5 )with the prolonging of ultra-sonic time and microwave time,the increment of effective thermal conductivity of graphite-based microfluids signifi-cantly reduces.%采用一步化学法制备了石墨微流体，并采用瞬态热线法测试了石墨微流体的有效导热系数，研究了石墨含量、超声处理时间、微波处理时间及基液种类对石墨微流体有效导热系数的影响。
学校代码11819学校名称东莞理工学院
广东省申请新增学士学位授予专业简况表学科门类门类代码材料科学与工程工学08专业名称专业代码高分子材料与工程080204批准时间2011广东省学位委员会办公室年月日填学校代码：11819 学校名称：东莞理工学院填表说明一、表内各项目要求提供近四年的原始材料备查。
二、本科各专业的专业内涵参见1998 年教育部颁发的《普通高等学校本科专业介绍》。
三、师资结构中的师资指本学科专业在编的具有教师专业技术职务的人员。
专任教师是指具有教师资格、专门从事本专业教学工作的人员。
符合岗位资格是指：主讲教师具有讲师及以上职务或具有硕士及以上学位，通过岗前培训并取得合格证的教师。
四、近4 年生均四项经费包括本科业务费、教学差旅费、体育维持费、教学仪器设备维修费。
各项经费的具体内容为：本专科生业务费：包括专业建设、课程建设、教材建设等费用，进行实验、实习、毕业设计（论文）所需的各种原材料，低值易耗品及加工、运杂费，生产实习费，答辩费，资料讲义印刷费及学生讲义差价支出等。
教学差旅费：教师进行教学调查、资料搜集、教材编审调研等业务活动的市内交通费、误餐费、外地差旅费。
体育维持费：各种低值体育器械和运动服装的购置费、修理费，体育运动会费用，支付场地租金和参加校际以上运动会的教职工运动员的伙食补助费，以及公共体育教研室的业务性报刊、杂志、资料等零星费用。
教学仪器设备维修费：教学仪器设备的经常维护修理费。
五、设计性实验是指给定实验目的、要求和实验条件，由学生自行设计实验方案并加以实现的实验；综合性实验是指实验内容涉及本课程的综合知识或与本课程相关课程知识的实验。
六、本表填写的数据不得超过限报数额，不得随意增加内容。
文字原则上使用小四或五号宋体。
复制（复印）时，必须保持原格式不变，纸张限用A4,双面印刷，装订要整齐。
2－类另U在校生人数当年招生人数今年毕业人数已毕业人数本科19738380专科0000本专业学生情况n教师队伍n-1专业负责人出生年月专业技术职务定职时间是否兼职邱永福最高学位或最后学历（毕业专业、时间、学校、专业）工作单位（至系、所）有代表性的成果1979.7副教授2011.12 博士（纳米科学与技术、2008、香港科技大学）化学与环境工程学院高分子材料与工程在国内外重要学术刊物上发表论文共15篇；出版专者1 部。
牛油果油的营养成分和功效研究进展
牛油果油的营养成分和功效研究进展
陈宏著;邓新宇;黄达荣;刘晓珍;黎攀;杜冰
【期刊名称】《中国油脂》
【年(卷),期】2022(47)8
【摘要】牛油果是营养价值很高的水果,富含多种维生素以及钠、钾、镁、钙等多种矿物质元素,具有较好的保健作用。
牛油果油含有不饱和脂肪酸以及植物甾醇、生育酚、角鲨烯,具有抗氧化、降血脂、降血压、保肝、保护神经等作用,可应用于食品、化妆品和医药行业。
国内对牛油果油功效研究较少,国外相关研究较为活跃且深入,但国内外对于牛油果油的功效研究仍不完善。
综合国内外有关牛油果油的研究,对其营养成分和功效进行综述,展望了牛油果油未来的研究方向与应用前景,以期为牛油果油传统提取方法的创新、作用机制的深入研究及相关保健品和辅助治疗药物的开发利用提供参考。
【总页数】7页(P90-96)
【作者】陈宏著;邓新宇;黄达荣;刘晓珍;黎攀;杜冰
【作者单位】华南农业大学食品学院;东莞理工学院化学工程与能源技术学院【正文语种】中文
【中图分类】TS225.1;TQ645.1
【相关文献】
1.洋葱的营养成分及其保健功效研究进展
2.玛咖的营养成分及功效研究进展
3.红糖营养成分评估与健康功效研究进展
4.芒果营养成分及保健功效研究进展
5.鱼子酱的营养成分分析及生理功效研究进展
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
谷胱甘肽促进液体发酵体系中蛹虫草合成虫草素
Abstract: C o r d y c e p i n is the m a i n active ingredient of the medicinal f u n g u s C . m ilitoris, with a variety of physiological functions s u c h as anti-cancer, anti-tumor a n d anti-virus activity.Oxidative stress w a s s h o w n to b e involved in the regulation of s e c o n d a r y m e t a b o l i s m of fila m e n t o u s fungi, h o w e v e r ,the relationship b e t w e e n oxidative stress a n d the regulation of cordycepin m e t a b o l i s m in C . militaris has not yet reported so far. In this study, to investigate the influence of oxidative stress o n c o r d ycepin m e t a b o l i s m , glutathione (G S H ), as the antioxidant for regulating cellular red o x state, w a s s u p p l e m e n t e d during liquid s u b m e r g e d fermentation of C . m ilitaris. T h e experimental data s h o w e d that the yield of cordycepin could reach (439.69±12.43)m g / L in 20 days w h e n 3.0g/L G S H w a s a d d e d to the m e d i u m , 471.24% higher t h a n that of t h e control (without addition of G S H ). T h e activity of glutathione peroxidase (G P X ) increased b y 414.82% as c o m p a r e d with t h e control. T h e relative g e n e expression levels of C n s l a n d Cns2 indicated by q R T - P C R w e r e significantly up-regulated by s u p p l e m e n t a t i o n of G S H , increasing b y 540.67 times a n d 25.81 t i m e s as c o m p a r e d with the control in 15 d a y s , respectively.T h e e x p e r imental results
聚3-羟基丁酸酯降解技术研究进展
2018年第37卷第4期 CHEMICAL INDUSTRY AND ENGINEERING PROGRESS·1381·化 工 进展聚3-羟基丁酸酯降解技术研究进展陈辉淦1，2，郑育英1，康世民2，方岩雄1 ，徐勇军2（1广东工业大学轻工化工学院，广东 广州 510006； 2东莞理工学院化学工程与能源技术学院，广东 东莞523808）摘要：综述了目前聚3-羟基丁酸酯（poly-3-hydroxybutyrate ，PHB ）的几种主要降解技术，包括热裂解、水解、溶剂降解和酶解等。
重点介绍了各种降解技术的产物分布和反应机理，并对影响PHB 热稳定性的主要因素进行了总结和讨论。
各种技术的所需反应温度总体趋势为：热裂解＞水解≥溶剂降解>酶解。
PHB 热解工艺简单，通常情况下PHB 主要降解为巴豆酸和其低聚物，过高反应温度（＞500℃）则使PHB 分解为二氧化碳和丙烯。
水解和溶剂降解都是以针对性地断开PHB 酯键为出发点，以获得高产率的PHB 单体（3 -羟基丁酸、巴豆酸）或其酯类化合物（如巴豆酸甲酯）。
与热解、水解和溶剂降解技术相比，酶解法限制因素较多且工艺成本高，需要新的技术突破。
提出了两个需进一步重点研究的方向：①PHB 催化热解脱羧制备高品位液体燃料；②直接转化富含PHB 的微生物为高价值化学品。
关键词：聚合物加工；聚3-羟基丁酸酯；降解；热解；水解；催化中图分类号：TQ31；TQ225 文献标志码：A 文章编号：1000–6613（2018）04–1381–11 DOI ：10.16085/j.issn.1000-6613.2017-1218A review for poly(3-hydroxybutyrate) degradation technologysCHEN Huigan 1，2，ZHENG Yuying 1，KANG Shimin 2，F ANG Yanxiong 1，XU Yongjun 2（1College of Light Industry and Chemical Engineering ，Guangdong University of Technology ，Guangzhou 510006，Guangdong ，China ；2School of Chemical Engineering and Energy Technology ，Dongguan University of Technology ，Dongguan 523808，Guangdong ，China ）Abstract ：This paper reviewed the main technologies for PHB depolymerization ，including pyrolysis ，hydrolysis ，solvent treatment ，and enzymolysis. The effect of process parameters ，product distribution ， and reaction mechanism on PHB depolymerization were discussed. The main factors affecting the PHB thermal stability were summarized. The required temperatures for a routine reaction are in the following order of ：pyrolysis ＞hydrolysis ≥solvent treatment ＞enzymolysis. Crotonic acid and its oligomers are usually the main products of pyrolysis at mild temperatures. However ，a high pyrolysis temperature （e.g.，＞500℃）would lead to a high yield of CO 2 and propylene. Both hydrolysis and solvent treatment are mainly used to obtain targeted chemicals （e.g.，3-hydroxybutyric acid ，crotonic acid ，methyl crotonate ），by selectively opening the ester bond in PHB. Compared with the other three technologies ，new technical breakthrough is needed for enzymolysis due to its multiple limitations and high cost. Two potential research areas were proposed for further work ：①catalyzed reforming of PHB for high-quality oil production ，and ②direct conversion of PHB rich-in microbial biomass for valuable chemicals. Key words ：polymer processing ；poly(3-hydroxybutyrate)；degradation ；pyrolysis ；hydrolysis ；catalysis@ 。
东莞理工学院学生工作
东莞理工学院学生工作月事记Δ1日校学生自律委员会在松山湖校区学生活动中心A108课室举行律英班开班仪式及破冰之旅。
Δ1日化学工程与能源技术学院在机电楼12L103会议室召开新学期首次工作会议。
会议由院长徐勇军教授主持。
Δ1日教育学院（师范学院）在艺术楼会议室召开关于学院宣传工作的会议。
Δ4日校学生社团联合会全体干部在学生活动中心A103课室进行全体干部例会。
Δ4日机械工程学院团总支、学生会在实验楼12A101系办公室召开本学期首次部长例会。
Δ3日-4日校学生社团联合会举行学生社团骨干精英培训班。
Δ3日-4日校学生自律委员会与校学生会在松山湖校区进行联合培训。
Δ3日-4日教育学院（师范学院）进行团学培训。
Δ5日粤台产业科技学院团总支、学生会在莞城校区实验楼217课室组织第二届团总支、学生会全体会议。
Δ6日法律与社会工作学院在莞城校区学术报告厅举行学生代表大会暨学生组织换届大会。
院党总支书记潘荣新出席本次会议。
Δ7日教育学院（师范学院）在教学楼6E206课室召开“两学一做”学习专题讲座。
Δ7日教育学院（师范学院）在艺术楼会议室召开新生入学助班会议。
Δ8日校学生自律委员会在莞城校区4208会议室举行2016-2017学年度莞城校区第一学期第一次第二十四届自律会自律部交流会。
Δ6日-8日校志愿服务中心组织35名志愿者在东莞会议大厦开展2016莞商大会志愿活动。
Δ9日机械工程学院团总支、学生会在教学楼7B405课室进行迎新志愿者培训。
Δ9日教育学院（师范学院）进行教师节送花活动。
Δ10日校级组织、各学院团学组织参与迎接2016届新生活动。
Δ10日计算机与网络安全学院领导走访21、23栋2016级新生宿舍。
Δ10日经济与管理学院团总支、学生会在莞城校区进行“经管带你拥抱大学”主题迎新活动。
Δ10日经济与管理学院在莞城校区教学楼2栋和3栋课室举办新生班级见面会活动。
Δ11日校学生社团联合会全体干部在莞城校区进行全体干部例会。
喜树碱的全合成研究进展
Progress in Total Synthesis of Camptothecin 作者： 王建新[1];桂琳琳[2];王晓季[2,3];胡冲[2]
作者机构： [1]江西科技师范大学药学院,江西南昌330013;[2]江西科技师范大学生命科学学院,江西南昌330013;[3]东莞理工学院化学工程与能源技术学院,广东东莞523830
出版物刊名： 江西科技师范大学学报
页码： 104-108页
年卷期： 2020年 第6期
主题词： 喜树碱;抗肿瘤;全合成
摘要：自喜树碱被提取分离并发现其具有良好的抗肿瘤活性后,喜树碱的全合成研究引起了广泛关注。
而近十年来,喜树碱的全合成研究又有了突破性的进展。
本文总结了近十年来关于喜树碱的合成路线和方法,为后续喜树碱及其衍生物的结构修饰和新药研发提供借鉴。
东莞理工学院
截至2023年3月，学校有松山湖、莞城两个校区，总占地面积2130多亩；设有20个学院、开设59个本科专业； 有2个一级学科硕士点，9个专业学位硕士点；教职工1732人；普通全日制学生超2万人，继续教育学生近2万人。
东莞理工学院
中国广东省东莞市境内公办高校
01 历史沿革
03 学术研究
目录
02 办学条件 04 合作交流
基本信息
东莞理工学院，简称莞工，是经教育部批准、由东莞市人民政府举办的全日制普通高等学校，实行“省市共 建、以市为主”的管理体制，入选卓越工程师教育培养计划、广东省高水平理工科大学、广东省高水平大学建设 计划重点学科建设高校。
国家级特色专业：电子信息工程 国家级一流课程：工程力学、微机原理与单片机技术 通过IEET工程教育专业认证：自动化、电子信息工程、应用化学、软件工程、环境工程、通信工程 省级一流专业：工程管理、汉语言文学、人力资源管理、法学、小学教育、英语、广播电视学、材料成型及 控制工程、工业设计、高分子材料与工程、光电信息科学与工程、络工程、土木工程、化学工程与工艺 省级特色专业：机械设计制造及其自动化、应用化学、通信工程、软件工程、工程管理 、环境工程、工业 工程、工业设计 省战略新兴产业特色专业：电子信息工程、能源与动力工程
巴西科学院院士：袁锦昀 享国务院特殊津贴专家：袁华强 “千百十人才工程“国家级培养对象：袁华强 省级教学团队：计算机编程类课程优秀教学团队建设、大学数学教学团队、水污染控制教学团队、经济学教 学团队 备注：名单不全
论文一览表.doc-化学工程与能源技术学院-东莞理工学院
ADVANCED
TECHNOLOGIES
International Journal of Heat and Mass C 类重要期刊,EI 2015-09-01 科技类 Transfer
陈佰满,Kelvin Ho(外),Yousif Abdalla
Abakr(外),Andrew Chan(外)
能源与化工系 空心桨叶式干燥机干燥污泥的风险评估及经济性分析 11
8
around bends
9 Thermos Gravimetric Analysis of the Combustion of Coal,
能源与化工系 MSW, Rice Straw and Paper Sludge in N2/O2 and CO2/O2 Atmospheres
Fluid dynamics and heat transfer investigations of swirling 10
黄斯珉
能源与化工系 24
内燃机缸套水低温余热驱动除湿机组实验研究
清洁生产科技 碳排放现状及驱动因素分解实证分析研究——以东莞市为
25
中心
例
26 能源与化工系
高校科研实验室安全管理解析
能源与化工系
Experimental investigations of a quasi-counter flow
27
21 能源与化工系
高温熔融盐蓄热系统的若干工程问题
郭晓娟
Electrodeposition of Manganese Dioxide Film on Activated 化学与环境工
22
Carbon Paper and Application for Supercapacitor with High
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
4.1.1 可逆反应
在一定的条件下，一个反应既能由反应物变为生成物， 也能由生成物变为反应物，这样的反应称为可逆反应
原则上所有的化学反应都有可逆性，只是不同的化学 反应的可逆程度差别很大
习惯上，将按反应方程式从左向右的反应称为正 反应，从右向左的反应称为逆反应
东 莞 理 工 学 院
Dongguan University of Technology
在上述情况下使用化学反应等温式时， Q的表达式也应作相应的变化
东 莞 理 工 学 院
Dongguan University of Technology
广东省分布式能源系统重点实验室
实践中，常用到经验平衡常数：
东 莞 理 工 学 院
Dongguan University of Technology
Hale Waihona Puke 广东省分布式能源系统重点实验室
广东省分布式能源系统重点实验室
4.2.2 用等温式判断化学反应
的方向和限度
东 莞 理 工 学 院
Dongguan University of Technology
广东省分布式能源系统重点实验室
一般认为：
阅读例4.1
东 莞 理 工 学 院
Dongguan University of Technology
4.1.2 化学平衡
系统中各物质（反应物和产物）的浓度都不再随时 间而变化，称反应达到平衡——化学平衡 化学平衡是可逆反应在一定条件下所能达到的最终 状态，是反应进行的最大限度
东 莞 理 工 学 院
Dongguan University of Technology
广东省分布式能源系统重点实验室
广东省分布式能源系统重点实验室
改变反应条件，则正逆反应的趋势也可能不同
东 莞 理 工 学 院
Dongguan University of Technology
广东省分布式能源系统重点实验室
不可逆反应
例 如：
东 莞 理 工 学 院
Dongguan University of Technology
广东省分布式能源系统重点实验室
东 莞 理 工 学 院
Dongguan University of Technology
广东省分布式能源系统重点实验室
4.2.1 化学反应等温式 和标准平衡常数KӨ
化学反应的方向和限度与浓度、压力及温度等条件有关
东 莞 理 工 学 院
Dongguan University of Technology
Dongguan University of Technology
广东省分布式能源系统重点实验室
化 平
学 衡
研究对象——化学反应限度问 题，是研究各类平衡（如酸－碱 平衡、氧化－还原平衡、沉淀－ 溶解平衡和配位平衡等）的基础
研究目的——探索各类平衡的共同特点和基 本规律，并应用化学热力学基本原理讨论平衡 建立的条件、平衡移动的方向以及平衡组成的 计算等重要问题 研究意义——帮助人们找到适当的反应条件， 使化学反应朝着人们所需要的方向进行
大 学 化 学 -4
化 学 平 衡
东 莞 理 工 学 院
Dongguan University of Technology
广东省分布式能源系统重点实验室
第四章 化学平衡
可逆反应和化学平衡 标准平衡常数 ΔrGmӨ与KӨ的计算 有关化学平衡的计算 化学平衡的移动
东 莞 理 工 学 院
广东省分布式能源系统重点实验室
4.2.3 标准平衡常数的几种表示方法
东 莞 理 工 学 院
Dongguan University of Technology
广东省分布式能源系统重点实验室
若反应是在理想溶液中进行的，各物质的浓度用质量 摩尔浓度表示，则：
如果各物质的浓度用物质的量浓度表示，则：
若反应是在实际溶液中进行的，用活度来代替浓度， 即：
广东省分布式能源系统重点实验室
东 莞 理 工 学 院
Dongguan University of Technology
4.1 可逆反应
和化学平衡
4.1.1 可逆反应 4.1.2 化学平衡
东 莞 理 工 学 院
Dongguan University of Technology
广东省分布式能源系统重点实验室
标准平衡常数与经验平衡常数区别
东 莞 理 工 学 院
化学平衡的特征－1
化学平 衡是一种动 态平衡，是 正反应速率 与逆反应速 率相等时的 状态
东 莞 理 工 学 院
Dongguan University of Technology
广东省分布式能源系统重点实验室
化学平衡的特征－2 化学平衡是相对的，同时又是有条 件的，一旦维持平衡的条件发生了变 化（如温度、压力等的变化），原有
Dongguan University of Technology
广东省分布式能源系统重点实验室
令：
压力商
化学反应等温式
KӨ中各气体的分压力为反应达到平 衡时的分压力；而Q中各气体的分压
力是反应在任意时刻的分压力
东 莞 理 工 学 院
Dongguan University of Technology
东 莞 理 工 学 院
Dongguan University of Technology
广东省分布式能源系统重点实验室
4.2 标准平衡常数
4.2.1 化学反应等温式和标准平衡常数KӨ 4.2.2 用等温式判断化学反应的方向和限度 4.2.3 标准平衡常数的几种表示方法 4.2.4 标准平衡常数使用中的若干问题
广东省分布式能源系统重点实验室
东 莞 理 工 学 院
Dongguan University of Technology
广东省分布式能源系统重点实验室
令：
化学反应等温式
东 莞 理 工 学 院
Dongguan University of Technology
广东省分布式能源系统重点实验室
令：
东 莞 理 工 学 院
的平衡将被破坏，并在新的条件下达
到新的平衡
东 莞 理 工 学 院
Dongguan University of Technology
广东省分布式能源系统重点实验室
化学平衡的特征－3
可逆反应既可以从左向右达到平衡状 态，也可以从右向左达到平衡状态
如最初将一定量的N2O4放入密闭容器中，N2O4 将会发生分解并最终达到平衡，这也可以由系统中 NO2棕红色的深浅变化中观察到