蛋白质和多肽类药物的分析及检测方法
多肽与蛋白质类药物
B. 对蛋白质类药物进行结构修饰
多肽、蛋白质类药物分类
3.3.1 反相高效液相色谱
3.3.1 反相高效液相色谱
分离机理：
①用C4～C8烷基作配基，将配基键合在固定基质上作为固定相 ，以水溶性有机溶剂（如甲醇、乙腈、异丙醇）加强酸作流 动相（流动相极性大于固定相）。
②蛋白质分子中既有亲水性基团（-OH，-NH、-COOH、SH 等），也有疏水性基团（如苯环、-CH3、-CH2和-CH等）。
理论上，每公顷红花田可生产出1公斤人胰岛素原料药。
3.2 多肽和蛋白质药物的生产方法
加拿大渥太华大学生物技术研究中心的科研人员也利 用另两种高产作物——烟草和水稻植株生产出了一种 名为“胰岛素样生长因子”(ILGF)的新型降血糖药物 。
据称，ILGF的降糖效果甚至优于常规口服降糖药。 如果ILGF能通过临床试验并成功上市，或将成为前景
3.2 多肽和蛋白质药物的生产方法
加拿大SembioSys生物工程公司利用北美洲普遍栽培的高 产油料作物——红花作为转基因植物“平台”，成功生 产出“红花子来源人胰岛素”，
该胰岛素顺利通过动物实验与Ⅰ～Ⅱ期临床试验，其药 代动力学与药效学试验结果与美国礼来利用大肠杆菌表 述胰岛素基因生产的重组DNA人胰岛素基本一样。
多肽和蛋白质的物化性质
4. 变性 ➢ 天然蛋白质的严密结构在某些物理或化学因素作用下，
其特定的空间结构被破坏，从而导致理化性质改变和生 物学活性的丧失，如酶失去催化活力，激素丧失活性， 称之为蛋白质的变性作用(denaturation)。 ➢ 变性蛋白质和天然蛋白质最明显的区别是溶解度降低
如何认识蛋白质类药物纯度检测
如何认识蛋白质类药物纯度检测？
1 从蛋白质制剂中检测出少量的污染蛋白质是 很困难的。因为污染蛋白质的量可能低于很多 测定方法的检测下限。制剂中往往含有大量的 辅料。
2 当用一种方法测定蛋白质纯度时，可能有两 种或更多的蛋白质表现出相似的行为。这种类 似的行为可能会导致本来是混合物的样品也被 认为是均一物质的错误结论。
HPLC法应根据不同的纯化工艺选择不同的方法。 一般尽量采用与SDS- PAGE法原理不同的反相柱或其 他离子交换柱进行分析，而不主张用分子筛分析。在 质量标准中要说明采用的是什么性质的分析柱。如有 些产品不适合用反相柱，要说明原因。
1.3 毛细管电泳
毛细管电泳的方法简便、快速，灵敏度和 分辨率高，但价格昂贵，重现性差，尚未作为 常规检定。
与产品相关的杂质包括：
突变物、错误裂解的产品、二硫化物异构体、 二聚体和多聚体；化学修饰的形态：脱去酰氨 基的或氧化的形态、其他降解产物等。
4.1宿主细胞蛋白含量
概念: 宿主细胞蛋白质一般简称宿主蛋白，是指生产过
程中来自宿主或培养基的残留肽等杂质。基因工程 药物中的宿主蛋白含量，可用 ELISA法(enzymelinked immunosorbent assay)测定。
3 只用一种方法作为纯度试验的标准是很不 可靠的，必须选择多种测定纯度的方法。
最好的纯度标准是建立多种分析方法，从 等电点、相对分子质量、疏水性等不同的角度 来证明了蛋白质样品的均一性。
4 纯度最终取决于所用方法的类型和分辨力， 低分辨率方法检测合格的样品改用高分辨力方 法时就有可能证明它是不纯的。
3.3等电点测定 可以表征药物的理化性质和纯度 均一的重组蛋白质只有一个等电点，有时因加工 修饰等影响可出现多个等电点，但应有一定的范 围。所以等电点测定是控制重组产品生产工艺稳 定性的重要指标。
蛋白质、多肽类药物质量控制
原理 • 样品与特殊基质混合形成 结晶，激光作用于晶体使 之直接气化并离子化。
优点 • 分析速度快，灵敏度高， 能忍受高盐样品。
缺点 • 背景信号大，不适于质荷 比太小的样品。
2.3 有关物质
工艺杂质 • 缺失肽，插入肽，未脱保 护肽。
降解产物 • 多肽氧化、还原、水解、 脱酰胺、二硫键错配。 聚合物 • 二聚体，多聚体。
3.8 蛋白质印迹法
适用 1～5ng蛋白质，用于细 范围 胞中特异蛋白质的测定。
优点 灵敏度高，特异性强。
缺点 成本高，技术难度大。
3.9 高效液相色谱法
原理：酪氨酸，苯丙氨酸和色氨酸残基在280nm处 有紫外吸收，吸光度与蛋白质含量成正比。反相 HPLC可以分析多肽，更大分子量的多肽需要用凝 胶过滤色谱柱。
2.1 氨基酸分析
2.1.1 酸水解 6mol/L盐酸，110℃，真空，20-24小时。
优点：氨基酸不消旋。
2.1 氨基酸分析
2.1.2 碱水解 5mol/L氢氧化钠溶液，充氮封管，110℃，22小时。
优点：色氨酸稳定。
2.1 氨基酸分析
2.1.3 酶水解 一组蛋白酶
优点：条件温和，氨基 酸不消旋，不被破坏。
3.9 高效液相色谱法
适用 范围
10-9～10-12g蛋白质。
优点
高灵敏度，快速分 析。
缺点
多肽类药物
多肽类药物多肽和蛋白质类生物药物按药物的结构分类可分为：氨基酸及其衍生物类药物、多肽和蛋白质类药物、酶和辅酶类药物、核酸及其降解物和衍生物类药物、糖类药物、脂类药物、细胞生长因子和生物制品类药物。
结构分析多肽的定性至少应包括氨基酸分析、序列分析及质谱分析。
纯肽的氨基酸分析可提供该多肽的氨基酸组成和数量。
序列分析则提供氨基酸残基的精确排列顺序。
基于多种技术的质谱, 如快原子轰击、电喷雾、激光解吸, 经常用于提供多肽的相对分子量及其序列信息。
肽谱是蛋白质或多肽通过酶解得到的肽片段经分离和分析所得到的“指纹图谱”。
当多肽含有20 个以上的氨基酸残基时, 肽谱分析对多肽结构研究和特性鉴别具有重要意义。
2. 1 氨基酸分析用于氨基酸分析的水解方法主要是酸水解, 同时辅以碱水解。
酸水解中使用最广泛的是盐酸(一般浓度为6mo löL )。
多肽于110 ℃真空或充氮的安瓿瓶内水解10～24 h, 然后除去盐酸。
水解过程中氨基酸遭破坏的程度与保温时间有线性关系, 因此该氨基酸在多肽中的真实含量可通过以不同的保温时间对相应时间的样品中该氨基酸的含量作图, 用外推法求出。
高氨基酸分析仪的使用使氨基酸的分析越来越准确, 如W aters 公司的氨基酸分析系统的检出限已达100 fmo l。
2. 2 序列分析氨基酸测序主要为化学法, 酶法也有一定的意义。
化学法以Edman 降解法最为经典, 它对所有氨基酸残基具有普适性和近乎定量的高产率, 是近50年N 2端顺序分析技术的基础。
Edman机理的液相(旋转杯) 自动蛋白顺序分析仪在1967 年推出。
近年来不断对其改进, 其灵敏度已达到可以对0. 1pmo l 的样品进行常规分析。
2. 3 质谱(mass spect romet ry,M S)质谱以质量分析为基础, 可提供化合物的分子量以及一些结构信息。
1980 年代以后发展了许多新的“软电离”技术, 使其在蛋白质多肽分析中的应用越来越广。
多肽和蛋白质类药物
甲状腺激素 胰岛激素
胃肠道激素
胸腺激素
甲状旁腺激素（PTH）、降钙素（CT）
胰高血糖素、胰解痉多肽
胃泌素、胆囊收缩素－促胰酶素（CCK-PZ）、肠泌 素、肠血管活性肽（VIP）、抑胃素（GIP）、缓激 肽、P物质
胸腺素、胸腺肽、胸腺血清因子
4
多肽类药物分类
多肽类细胞生长调 表皮生长因子（EGF），转移因子（TF），心
意方法本身的回收率的高低。
12
纯化方法选择指南
13
END
谢谢大家！
粘蛋白
胃膜素、硫酸糖肽、内在因子等。
胶原蛋白 碱性蛋白质
明胶、阿胶等 硫酸鱼精蛋白
蛋白酶抑制剂
胰蛋白酶抑制剂
凝集素
PHA、ConA
7
多肽与蛋白质类药物的制造方法
重点
提取分离纯化法（重点） 化学合成法
微生物发酵法
蛋白质药物
重点
原料选择
发酵
沉淀
变性 复性
上清
生物 组织 破碎 提取
蛋白质纯化
纯度 活性鉴定
合格
不合格
精品9
原料选择 提取
重点
10
纯化 根据目的蛋白与杂质之间的差异进行纯化。
1.根据蛋白质的pI的不同进行纯化，其方法有：
1）pI沉淀法
2）pI沉淀法与盐析法相结合
3）等电聚焦法
2.蛋白质分子形状和大小的不同进行纯化，其方法有
1）凝胶过滤
2）超滤法
3） 离心法
4）透析法
3.蛋白质的溶解度不同进行纯化，其方法有：
a)盐溶与盐析法
b）结晶法
c）有机溶剂沉淀法
4.蛋白质电离性质不同进行分离：离子交换法 5.蛋白质功能专一性不同进行纯化：亲和层析法 6.蛋白质在溶剂系统中分配不同进行纯化：萃取法 7.蛋白质的选择性吸附的性质进行纯化：吸附法 8.蛋白质的其他特殊性质进行纯化
多肽蛋白质QE鉴定
百泰派克生物科技
多肽蛋白质QE鉴定
QE即Q Exactive，是美国赛默飞公司生产的一种具有快速扫描和多重检测能力的
质谱仪。
多肽蛋白质QE鉴定就是利用高分辨率QE质谱仪对多肽和蛋白质进行鉴定。
质谱分析法作为当前蛋白质组学研究以及生物大分子研究领域中强有力的分析技术，可以实现高通量的、高分辨率的、高要求的以及复杂的蛋白质以及多肽样品鉴定，包括定性定量分析、分子质量分析、氨基酸组成分析、一级结构鉴定以及翻译后修饰情况鉴定等。
质谱技术实现以上多种鉴定都是以其可以鉴定分子质量为基础而实现的，比如对于翻译后修饰的蛋白质/多肽来说，其发生修饰的氨基酸残基的分子
质量会增加相应修饰基团的分子量值，而质谱能检测到这种分子质量变化，因而可以用于验证或鉴定蛋白质或多肽是否含有翻译后修饰以及发生了何种修饰。
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF质谱平台，结合Nano-LC
纳升色谱，提供高效精准的多肽蛋白质QE鉴定服务技术包裹，可对各种多肽和蛋
白质样品如蛋白质/多肽提取物、SDS-PAGE蛋白条带、2D蛋白胶点、pull-down及Co-IP等样品中的蛋白质进行鉴定，包括分子量、含量、序列以及翻译后修饰等，
欢迎免费咨询。
蛋白质、多肽等大分子的质谱分析
蛋白质、多肽等大分子的质谱分析检测仪器:1、基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)2、基质辅助激光解吸附电离串联飞行时间质谱(Autoflex III MALDI-TOF/TOF)3、纳升液相电喷雾四级杆飞行时间串联质谱仪(micrOTOF-Q II™ ESI-Qq-TOF)主要应用:1、生物大分子的分子量检测2、蛋白质、多肽的纯度鉴定3、蛋白质的肽指纹图谱检测4、混合组分的分子量分布检测5、合成物质的分子量检测与纯度评价6、重组蛋白的分子量检测与纯度评价7、蛋白质的多肽谱检测8、血清多肽谱的检测9、PEG修饰的蛋白药物的研究样品要求:1、样品含量: 50-100Fmol (液体约5ul)2、样品形式: 液体；干粉；胶粒/条带3、非胶样品: 挥发性盐<20mM，无PBS、SDS和尿素等物质4、胶类样品: 银染过程中未使用戊二醛作为固定剂5、保存方式: 液体建议低温，胶类用去离子水防干蛋白质及多肽质谱鉴定简介博奥生物有限公司蛋白质实验室于2006年开始对外提供多肽和蛋白质测试服务，包括多肽和蛋白质的分子量和序列测定，蛋白种类鉴定。
博奥采用串联质谱法（Tandem Mass Spectrometry, MS/MS）鉴定蛋白，可靠性高。
蛋白经胰酶消化形成的肽段进入质谱，一级质谱检测多肽分子的大小，然后再将肽段打碎，形成一系列离子即N端离子系列（B系列）和C端碎片离子系列（Y系列）。
质谱再检测碎片离子的大小，即二级质谱。
将质谱数据与蛋白数据库进行比对，获得肽段的序列，特定的多肽序列对应着特定的蛋白，从而鉴定出待检测蛋白。
除了鉴定单个蛋白，我们的液相色谱和质谱联用平台（Liquid Chromatography- Tandem Mass Spectrometry, LC-MS/MS）还具有分析混合蛋白的能力。
MALDI-TOF MS（Matrix Assisted Laser Desorption Ionization Time of Flight Mass Spectrometry）是另一种常用的质谱平台，通过肽指纹图谱（Peptide Mass Fingerprinting, PMF）来鉴定蛋白质。
中药中多肽类药物研究新技术
中药中多肽类药物研究新技术目前，随着生物技术和生物医药领域的快速发展，中药中多肽类药物研究正处于革命性变革的时期。
多肽类药物因其具有较强的特异性、高效性和较低的毒副作用，逐渐成为中药研究的热点之一。
在这一背景下，各种新技术应运而生，推动了中药中多肽类药物研究领域的快速发展。
本文将就中药中多肽类药物研究中的新技术进行阐述，并探讨其在中药研究中的应用前景。
一、蛋白质组学技术的运用蛋白质组学技术是在分子生物学和生物化学领域的研究基础上发展起来的，它致力于对生物体细胞内所有蛋白质的研究。
在中药中多肽类药物研究中，蛋白质组学技术被广泛应用于筛选和鉴定具有药用价值的多肽类物质。
通过大规模蛋白质组学分析，可以快速高效地识别出有潜力的多肽类药物候选物，并进行进一步的研究和开发。
蛋白质组学技术还能够帮助研究者深入了解中药中多肽类药物的作用机制及其在人体内的代谢途径，为新药研发提供重要的参考依据。
二、分子生物学技术的创新随着分子生物学技术的不断创新，中药中多肽类药物研究得到了前所未有的发展机遇。
基因工程技术的应用使得研究人员能够通过改变中药植物中多肽类药物的基因序列，实现合成更为有效的药物分子。
内源性多肽类物质的寻找、提取和纯化也得到了分子生物学技术的大力支持。
通过这些创新技术的应用，中药中多肽类药物的研究和开发过程得到了大幅度的加速，为中药研究的现代化提供了技术和理论支持。
三、生物信息学技术在多肽类药物研究中的应用生物信息学技术是利用计算机和数学等工具对生物信息数据进行采集、储存、处理和分析的技术体系。
在中药中多肽类药物研究中，生物信息学技术的应用已经成为一种不可或缺的工具。
通过构建多肽类物质的结构与功能数据库，研究人员能够更好地掌握多肽类药物的结构特征和活性表现规律，为新药设计和开发提供重要的参考。
生物信息学技术还可以帮助研究人员对中药多肽类药物的相互作用网络进行系统分析，发现新的药效靶点，并加速新药研发的过程。
蛋白质、多肽类药物质量控制
可能导致产品质量存在差异，需要加强批次间一致性的控制。
03
稳定性差
蛋白质、多肽类药物容易受到温度、湿度、光照等因素的影响，导致其
稳定性较差，需要加强存储和使用过程中的保护措施。
未来发展方向
加强创新研究
加强国际合作与交流
通过加强创新研究，开发更加精准、 高效的质量控制技术和方法，提高蛋 白质、多肽类药物的质量控制水平。
可以揭示蛋白质的三维结构，对于理解蛋白质功能和药物设计具有重要意义。
纯度测定
总结词
纯度测定是评估蛋白质、多肽类药物质量的重要指标，主要通过色谱技术、电泳技术和质谱技术等方法进行。
详细描述
纯度测定是评估蛋白质、多肽类药物中目标成分的纯度和杂质的含量。色谱技术如凝胶电泳、高效液相色谱等可 以根据分子大小、电荷和疏水性等性质将目标成分与杂质分离。电泳技术则根据蛋白质、多肽的电荷和大小进行 分离。质谱技术可以用于鉴定和定量目标成分和杂质，具有高灵敏度和高分辨率的特点。
蛋白质、多肽类药物 质量控制
目录
CONTENTS
• 蛋白质、多肽类药物概述 • 蛋白质、多肽类药物质量控制标准 • 蛋白质、多肽类药物质量控制方法 • 蛋白质、多肽类药物质量控制现状与挑
战 • 新技术与新方法在蛋白质、多肽类药物概述
定义与分类
定义
蛋白质和多肽类药物是指通过基 因工程技术或化学合成方法制备 的，具有特定生物学活性的大分 子药物。
04 蛋白质、多肽类药物质量 控制现状与挑战
质量控制现状
蛋白质、多肽类药物质量控制标准不断完善
随着蛋白质、多肽类药物的广泛应用，各国药典和国际组织不断完善相关质量控制标准， 以确保药物的安全性和有效性。
质量控制技术不断进步
多肽定量--检测技术
百泰派克生物科技
多肽定量
多肽是由两个及两个以上的氨基酸脱水缩合形成的具有独特生物活性的化合物，生物体中含有多种内源性多肽，其作为激素、信号传导受体、转运蛋白或载体、催化生物反应的酶以及细胞、组织和器官的结构原件，在机体生殖、生长和代谢等各个生理活动中具有重要作用。
越来越多的多肽被研制开发为药物用于临床治疗，特定多肽的含量鉴定对药物开发、生产以及监测临床治疗效果来说非常重要，多肽的定量方法和原理与蛋白质类似，目前最常用的多肽/蛋白质定量技术是基于质谱的技术，通常需要将液相色谱与质谱技术串联，该量化过程最重要的方面是使用MS/MS
将肽的质子化分子离子（M+H）+与其一个或多个氨基酸序列决定片段离子连接起来。
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF质谱平台，结合Nano-LC
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验目的告诉我们并将您的样品寄给我们，我们会负责项目后续所有事宜，包括多肽提取、蛋白酶切、肽段分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析，欢迎免费咨询。
LC_MS分析生物样品中肽类及蛋白类药物的技术问题及其解决方案1
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氨基酸、多肽及蛋白质类药物分析方法 (2)
氨基酸、多肽及蛋白质类药物分析方法
氨基酸、多肽和蛋白质类药物的分析方法通常涵盖以下几
个方面：
1. 色谱分析方法：氨基酸、多肽和蛋白质类药物的分析常
常使用色谱技术，如高效液相色谱（HPLC）和气相色谱（GC）。
对于氨基酸和小肽的分析，常采用反相或离子交
换柱进行分离，并使用紫外或荧光检测器进行检测。
对于
大肽和蛋白质的分析，常采用尺寸排阻色谱（SEC）或离子交换色谱（IEC）进行分离，同时结合质谱进行定性与定量分析。
2. 质谱分析方法：质谱是氨基酸、多肽和蛋白质类药物研
究中常用的分析技术之一。
常用的质谱技术包括质谱成像（MSI）、质谱测定（MS）、质谱显微镜（MSM）等。
3. 免疫分析方法：免疫分析方法常用于蛋白质的定量分析，如酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫层析等。
免疫分析方
法依赖于特异性抗体与目标蛋白结合形成复合物，通过测定复合物的信号强度或荧光强度来定量。
4. 生化分析方法：利用酶促反应对氨基酸、多肽和蛋白质进行定量分析的方法，如酶标记法、比色法、发光法等。
5. 其他分析方法：还有一些特殊的分析方法，如核磁共振（NMR）、电泳等，也可以用于氨基酸、多肽和蛋白质类药物的分析研究。
需要根据具体的药物、样品和分析目的选择合适的分析方法，并结合这些方法的优势和特点进行分析。
第十三章 多肽与蛋白质类药物
除盐
（三）干扰素（Interferon，IFN）
1、结构和性质
1957年Isaacs和Lindenman在进行鸡胚细胞流感病毒感染 试验中首次发现一类能干扰和抑制病毒复制的可溶性细胞分泌 物，故取名为干扰素（interferon）
干扰素（IFN）系指由干扰素诱生剂诱导有关生物细胞所 产生的一类高活性、多功能的诱生蛋白质。在细胞上具有光谱 抗病毒活性。
这类诱生蛋白质从细胞中产生和释放之后，作用于相 应的其他同种生物细胞，并使其获得抗病毒和抗肿瘤等多 方面的“免疫力”。人干扰素按抗原性分为α、β、γ三型。 根据氨基酸序列的差异，又分为若干亚型。三种干扰素的 理化及生物学性质有明显差异，即使是IFN-α的各亚型之间， 生物学作用也不尽相同。
抑制病毒等细胞内微生物的增值 抗细胞增殖 通过作用于巨噬细胞、NK细 胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞而 进行免疫调节。 改变细胞表面的状态，使负电 荷增加，组织相溶性抗原表达增加
胸腺激素制剂总的说来都与调节免疫功能有关
（1）结构和性质 胸腺素组分5是由在80℃热稳定的40~50种多肽组 成的混合物，分子量在1000～15000之间，等电点 在3.5～9.5之间。 为了便于不同实验室对这些多肽的鉴别和比较，根 据它们的等电点以及在等电聚焦分离时的顺序而命名。 共分三个区域：α区包括等电点低于5.0的组分，β区 包括等电点在5.0～7.0之间的组分，γ区则指其等电 点在7.0以上者（此区内组分很少）。对分离的多肽进 行免疫活性测定，有活性的称为胸腺素。
易溶于水，等电点为6.6。在干燥和酸性溶液中较稳定，虽经 100℃加热，但活力不减；在碱性溶液中容易失活。能溶解于 70%的丙酮或70％的乙醇中。
多肽与蛋白质的提取与分离
关键词：多肽蛋白质提取分离摘要：多肽是由多个氨基酸缩合形成的，蛋白质是由几十到几千个氨基酸分子借助肽键和二硫键相互连接的多肽链，随肽数目，氨基酸组成及排列顺序不同，蛋白质分子呈现三维空间结构，并且有生物活性。
采取何种分离方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。
对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括：盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。
这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化。
㈠﹑多肽的提取与分离多肽类化合物广泛存在于自然界中，其中对具有一定生物学活性的多肽的研究，一直是药物开发的一个主要方向。
生物体内已知的活性多肽主要是从内分泌腺组织器官、分泌细胞和体液中产生或获得的，生命活动中的细胞分化、神经激素递质调节、肿瘤病变、免疫调节等均与活性多肽密切相关。
随着现代科技的飞速发展，从天然产物中获得肽类物质的手段也不断得到提高。
相1.高效液色谱（HPLC）HPLC的出现为肽类物质的分离提供了有利的方法手段，因为蛋白质、多肽的HPLC应用与其他化合物相比，在适宜的色谱条件下不仅可以在短时间内完成分离目的，更重要的是HPLC能在制备规模上生产具有生物活性的多肽。
因此在寻找多肽类物质分离制备的最佳条件上，不少学者做了大量的工作。
如赵骏①等以酪蛋白为原料，采用微生物蛋白酶A水解，其酶解产物为血管紧张素转化酶（ACE）。
2.反相高效液相色谱（RP-HPLC）.用反相色谱法分离多肽和蛋白质的原理是基于蛋白质的疏水性，在不同介质条件下，使不同的蛋白质得以分离，具有快速高效和高回收的特点，在分离和制备多肽及蛋白质上有独特的优越性。
吴亚丽②等利用反相高效液相色谱法分析降血压肽AHP的最佳工艺条件。
3.疏水作用色谱(Hydrophobicinteractionchromatography,HIC)HIC是利用多肽中含有疏水基团，可与固定相之间产生疏水作用而达到分离分析的目的，其比RP-HPLC具有较少使多肽变性的特点。
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蛋白质和多肽类药物的分析及检测方法
主要内容： 一、 蛋白质和多肽重要理化性质 二、 蛋白质和多肽类药物质量控制标准 三、 蛋白质和多肽类药物的活性及测定方法
一、主要理化性质
高分子特性；是其胶体性、变性和免疫学特性基础 两性解离与等电点：影响多肽、蛋白质分离、纯化和分析 颜色反应，菊三酮反应、双缩JR反应、酚试剂反应 紫外吸收：280nm处最大吸收，可定量蛋白质和多 肽