《组织化学染色》PPT课件
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淋巴瘤内存在大量网状纤维 脑膜瘤和胶质瘤：脑膜瘤有网状纤维。胶质
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结缔组织染色——网状纤维染色
网状纤维的特性
网状纤维是构成组织的网状支架 广泛分布于实质器官内，其中最丰富的区域是肝脏、脾脏、
淋巴结、骨髓、基膜、血管等 形态学上为交织成网的纤细纤维 化学成分为网状蛋白，一种特殊的胶原蛋白，抗酸 病理状态下可转化为胶原纤维 具有嗜银性，又称嗜银纤维 HE染色着色淡，特殊染色可显示
• 必须掌握各种特殊染色的结果，避免导致错误的结论或严 重的误诊，如在网染时把胶元纤维误以为网状纤维。
• 应做阳性切片作对照，保证染色结果的可靠性。 • 染色所用的器皿都必须清洗。
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15
常用染色方法和应用
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16
结缔组织染色
结缔组织由细胞和细胞间的骨架成分构成， 分为无定形的间质（如硫酸盐和非硫酸盐黏多 糖）和定形或纤维型间质（如胶原纤维，弹力 纤维。网状纤维）。各种纤维成分的识别有助 于病理学的诊断和鉴别诊断。
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3
染料和染色的原理
一、染料的特点：
组织病理学染料是生物学染色剂
对所染组织成分具有亲和力
染色剂中同时具备发色团和助色团才具有染色功 能
发色团是使染料显色的化学团（色原），一种染 料由一个或多个发色团，染料颜色取决于发色团 多少和强弱。
助色团指使色原产生电离成为盐类，对被染物产
生亲和力的原子团 编辑ppt
肌组织染色，神经组织染色 按染色对象种类分类：切片染色法，组织块
染色法，大体标本染色法
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12
染色方法的命名
按发明者姓名命名：如Van. Gieson（VG） 染色
按所有染料分类：如苏丹IV染色，锇酸染色 按所染组织分类：如网状纤维染色 其他分类：
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13
染色中易出现的问题和对策
退行性染色：又称后退性染色，先使组织着色过度， 再用某些溶液脱去多余染液，达到合适染色强度
媒染剂：具有促进染色能力，对染料和组织都有亲 和力并与染料和组织结合在一起的试剂。如硫酸铝 钾等
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10
染色的常用术语
促染剂：促使染料着色，增强染色能力，但本身不 参与染色反应，如乙酸
异染性染色：组织经过盐基性染料染色后，出现与 染料不同的颜色
分化：指用某种溶液选择性脱去过深的着色，并使 不应着色的组织细胞成分脱色的过程，HE染色时的 盐酸酒精分化
蓝化作用（返蓝）：苏木素在酸性条件下呈红色， 碱性条件下呈蓝色，HE染色时在酸分化后，再用碱 性水使核变蓝，称蓝化
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11
染色方法的分类
按照染色方法分类 一般方法分类：常规染色，特殊染色等 按主要组织和细胞成分分类：结缔组织染色，
常用网状纤维的染色方法 Gomori染色法
结果：网状纤维呈黑色，胶原纤维呈黄色或黄 褐色，细胞核呈灰黑色。
特点：此法简单可靠，染色时间短，常用于活 检病理组织检查。
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结缔组织染色——网状纤维染色
网状纤维染色的应用 肿瘤的诊断和鉴别诊断： 癌和肉瘤的鉴别：癌巢周围存在网状纤维；
肉瘤中网状纤维围绕每个细胞 尤文氏瘤和淋巴瘤：尤文氏瘤无网状纤维，
选择适当的组织处理方法：包括固定液和切 片的选择，如脂肪和酶类染色需冰冻切片
染色液的有效期和保存方式 染色液的浓度和pH值 染色时间的控制 染色前切片的预处理：如脱甲醛色素，脱汞
盐固定液的汞结晶等
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染色中易出现的问题和对策
• 注意特染的应用范围，如某种病变应用什么方法染色才能 达到目的，一般根据HE切片所见，选择适当的特染方法 。
从而使脂质着色。
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7
染料和染色的原理
三、染料的原理
化学机制： 组织和细胞中含有碱性和酸性物质，分别与染料中的阳
离子和阴离子结合。 如HE染色：细胞核主要由核酸构成，与碱性染料-苏木素
结合，而胞浆主要由碱性物质构成，与酸性染料-伊红结 合。
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8
染色的常用术语
普通染色：又称常规染色，即指HE染色（haematoxylin and eosin HE）
特殊染色在临床病理学中的应用
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1
染色的意义和目的
用染料对组织切片进行处理，使组织中的不同 成分被染上相应的颜色，产生不同的折射率，以 利于光镜观察和分析。病理染色属于生物性染色 的范畴。
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2
特殊染色（special staining）
应用某些能与组织细胞化学成分特异性结合的显 色剂，显示组织或细胞的正常结构或病理过程中出现 的异常物质、病变及病原体等，称特殊染色（Special staining） 。
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18
结缔组织染色——网状纤维染色
网状纤维染色的原理
网状纤维染色方法很多，但基本原理相同，即经过 氧化剂的氧化使网状纤维对银离子具有选择性的亲和 能力（嗜银性），并在媒染剂的作用下网状纤维吸附 二氨合银离子，在经甲醛将其还原为黑色金属银而显 示出网状纤维。
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结缔组织染色——网状纤维染色
三、染料的原理
物理机制： 毛细管渗透作用：染色剂沿组织间微孔渗透到组织中。 吸收或溶解作用：组织吸收或溶解染料而着色，如脂肪染
色 吸附作用：染料的色素粒子浸润组织中，因分子引力，色
素粒子被吸附而染色
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6
• 例如脂肪染色:
苏丹类染色剂在脂质中的溶解度＞酒精中的溶 解度
溶解于酒精的苏丹类染色剂与组织中的脂质 接触时，染色剂就从溶液中“转移”到脂质中，
4
染料和染色的原理
二、染料的分类
染料的来源分类：天然和合成染料 化学反应分类：碱性染料、酸性染料、中性染料 用途分类：
细胞核染料：苏木素，核固红，结晶紫等 细胞质染料：伊红，酸性复红，苦味酸等 脂肪染料：油红O，苏丹III，苏丹IV 纤维结缔组织染料：苦味酸，亮绿等
来自百度文库
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5
染料和染色的原理
特殊染色：除HE以外的所有染色，显示特定的组织结构 和成分。
单一染色：用一种染料进行的染色，如甲苯胺蓝染幽门螺 杆菌
多色染色：用两种以上染液染色的方法，如三色染色 对比染色：又称复染或衬染，先将某一成分或结构染色后
，再用另一种染料染其他成分，如苏木素衬染细胞核
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9
染色的常用术语
进行性染色：渐进性染色，采用低浓度的染液，使 组织成分着色自浅入深，直到达到合适强度，
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结缔组织染色——网状纤维染色
网状纤维的特性
网状纤维是构成组织的网状支架 广泛分布于实质器官内，其中最丰富的区域是肝脏、脾脏、
淋巴结、骨髓、基膜、血管等 形态学上为交织成网的纤细纤维 化学成分为网状蛋白，一种特殊的胶原蛋白，抗酸 病理状态下可转化为胶原纤维 具有嗜银性，又称嗜银纤维 HE染色着色淡，特殊染色可显示
• 必须掌握各种特殊染色的结果，避免导致错误的结论或严 重的误诊，如在网染时把胶元纤维误以为网状纤维。
• 应做阳性切片作对照，保证染色结果的可靠性。 • 染色所用的器皿都必须清洗。
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常用染色方法和应用
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结缔组织染色
结缔组织由细胞和细胞间的骨架成分构成， 分为无定形的间质（如硫酸盐和非硫酸盐黏多 糖）和定形或纤维型间质（如胶原纤维，弹力 纤维。网状纤维）。各种纤维成分的识别有助 于病理学的诊断和鉴别诊断。
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染料和染色的原理
一、染料的特点：
组织病理学染料是生物学染色剂
对所染组织成分具有亲和力
染色剂中同时具备发色团和助色团才具有染色功 能
发色团是使染料显色的化学团（色原），一种染 料由一个或多个发色团，染料颜色取决于发色团 多少和强弱。
助色团指使色原产生电离成为盐类，对被染物产
生亲和力的原子团 编辑ppt
肌组织染色，神经组织染色 按染色对象种类分类：切片染色法，组织块
染色法，大体标本染色法
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染色方法的命名
按发明者姓名命名：如Van. Gieson（VG） 染色
按所有染料分类：如苏丹IV染色，锇酸染色 按所染组织分类：如网状纤维染色 其他分类：
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染色中易出现的问题和对策
退行性染色：又称后退性染色，先使组织着色过度， 再用某些溶液脱去多余染液，达到合适染色强度
媒染剂：具有促进染色能力，对染料和组织都有亲 和力并与染料和组织结合在一起的试剂。如硫酸铝 钾等
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染色的常用术语
促染剂：促使染料着色，增强染色能力，但本身不 参与染色反应，如乙酸
异染性染色：组织经过盐基性染料染色后，出现与 染料不同的颜色
分化：指用某种溶液选择性脱去过深的着色，并使 不应着色的组织细胞成分脱色的过程，HE染色时的 盐酸酒精分化
蓝化作用（返蓝）：苏木素在酸性条件下呈红色， 碱性条件下呈蓝色，HE染色时在酸分化后，再用碱 性水使核变蓝，称蓝化
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染色方法的分类
按照染色方法分类 一般方法分类：常规染色，特殊染色等 按主要组织和细胞成分分类：结缔组织染色，
常用网状纤维的染色方法 Gomori染色法
结果：网状纤维呈黑色，胶原纤维呈黄色或黄 褐色，细胞核呈灰黑色。
特点：此法简单可靠，染色时间短，常用于活 检病理组织检查。
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20
结缔组织染色——网状纤维染色
网状纤维染色的应用 肿瘤的诊断和鉴别诊断： 癌和肉瘤的鉴别：癌巢周围存在网状纤维；
肉瘤中网状纤维围绕每个细胞 尤文氏瘤和淋巴瘤：尤文氏瘤无网状纤维，
选择适当的组织处理方法：包括固定液和切 片的选择，如脂肪和酶类染色需冰冻切片
染色液的有效期和保存方式 染色液的浓度和pH值 染色时间的控制 染色前切片的预处理：如脱甲醛色素，脱汞
盐固定液的汞结晶等
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染色中易出现的问题和对策
• 注意特染的应用范围，如某种病变应用什么方法染色才能 达到目的，一般根据HE切片所见，选择适当的特染方法 。
从而使脂质着色。
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染料和染色的原理
三、染料的原理
化学机制： 组织和细胞中含有碱性和酸性物质，分别与染料中的阳
离子和阴离子结合。 如HE染色：细胞核主要由核酸构成，与碱性染料-苏木素
结合，而胞浆主要由碱性物质构成，与酸性染料-伊红结 合。
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染色的常用术语
普通染色：又称常规染色，即指HE染色（haematoxylin and eosin HE）
特殊染色在临床病理学中的应用
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染色的意义和目的
用染料对组织切片进行处理，使组织中的不同 成分被染上相应的颜色，产生不同的折射率，以 利于光镜观察和分析。病理染色属于生物性染色 的范畴。
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特殊染色（special staining）
应用某些能与组织细胞化学成分特异性结合的显 色剂，显示组织或细胞的正常结构或病理过程中出现 的异常物质、病变及病原体等，称特殊染色（Special staining） 。
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结缔组织染色——网状纤维染色
网状纤维染色的原理
网状纤维染色方法很多，但基本原理相同，即经过 氧化剂的氧化使网状纤维对银离子具有选择性的亲和 能力（嗜银性），并在媒染剂的作用下网状纤维吸附 二氨合银离子，在经甲醛将其还原为黑色金属银而显 示出网状纤维。
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结缔组织染色——网状纤维染色
三、染料的原理
物理机制： 毛细管渗透作用：染色剂沿组织间微孔渗透到组织中。 吸收或溶解作用：组织吸收或溶解染料而着色，如脂肪染
色 吸附作用：染料的色素粒子浸润组织中，因分子引力，色
素粒子被吸附而染色
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• 例如脂肪染色:
苏丹类染色剂在脂质中的溶解度＞酒精中的溶 解度
溶解于酒精的苏丹类染色剂与组织中的脂质 接触时，染色剂就从溶液中“转移”到脂质中，
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染料和染色的原理
二、染料的分类
染料的来源分类：天然和合成染料 化学反应分类：碱性染料、酸性染料、中性染料 用途分类：
细胞核染料：苏木素，核固红，结晶紫等 细胞质染料：伊红，酸性复红，苦味酸等 脂肪染料：油红O，苏丹III，苏丹IV 纤维结缔组织染料：苦味酸，亮绿等
来自百度文库
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染料和染色的原理
特殊染色：除HE以外的所有染色，显示特定的组织结构 和成分。
单一染色：用一种染料进行的染色，如甲苯胺蓝染幽门螺 杆菌
多色染色：用两种以上染液染色的方法，如三色染色 对比染色：又称复染或衬染，先将某一成分或结构染色后
，再用另一种染料染其他成分，如苏木素衬染细胞核
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染色的常用术语
进行性染色：渐进性染色，采用低浓度的染液，使 组织成分着色自浅入深，直到达到合适强度，