21.细胞培养的基本条件
现代生物技术试题及答案
现代生物技术试题及答案一、单项选择题（每题2分，共20分）1. 现代生物技术的核心是（）。
A. 基因工程B. 细胞工程C. 发酵工程D. 酶工程答案：A2. 基因克隆中常用的载体是（）。
A. 质粒B. 病毒C. 细菌D. 酵母菌答案：A3. PCR技术中，DNA聚合酶的作用是（）。
A. 提供引物B. 提供模板C. 合成新的DNA链D. 提供能量答案：C4. 基因治疗中，将正常基因导入患者体内的方法是（）。
A. 口服B. 注射C. 吸入D. 皮肤涂抹答案：B5. 植物组织培养技术中，脱分化是指（）。
A. 细胞分化B. 细胞去分化C. 细胞死亡D. 细胞分裂答案：B6. 以下不属于基因工程技术应用的是（）。
A. 转基因食品B. 基因诊断C. 基因治疗D. 杂交育种答案：D7. 以下哪个不是DNA重组技术的基本步骤（）。
A. 目的基因的获取B. 基因克隆C. 基因表达D. 基因突变答案：D8. 以下哪个是动物细胞工程技术（）。
A. 植物组织培养B. 动物细胞培养C. 植物体细胞杂交D. 动物核移植答案：D9. 以下哪个是现代生物技术在农业领域的应用（）。
A. 生产重组人胰岛素B. 生产重组乙肝疫苗C. 转基因作物D. 生产重组干扰素答案：C10. 以下哪个是现代生物技术在医学领域的应用（）。
A. 生物农药B. 基因诊断C. 基因治疗D. 生物肥料答案：C二、多项选择题（每题3分，共15分）11. 现代生物技术包括哪些领域？（）A. 基因工程B. 细胞工程C. 发酵工程D. 酶工程E. 蛋白质工程答案：ABCDE12. 基因工程中常用的工具酶包括（）。
A. 限制性核酸内切酶B. DNA连接酶C. 反转录酶D. 聚合酶链反应酶E. 转录酶答案：ABD13. 以下哪些是植物基因工程的应用？（）A. 抗虫转基因作物B. 抗病转基因作物C. 耐除草剂转基因作物D. 转基因动物E. 转基因食品答案：ABCE14. 以下哪些是动物细胞工程技术的应用？（）A. 单克隆抗体制备B. 动物细胞培养C. 动物克隆D. 植物组织培养E. 胚胎移植答案：ABCE15. 以下哪些是现代生物技术在环境领域的应用？（）A. 生物修复B. 生物能源C. 生物农药D. 生物肥料E. 基因诊断答案：ABD三、判断题（每题2分，共20分）16. 基因工程是一种在分子水平上进行设计的技术。
VERO细胞培养
对数生长期 细胞数随时间变化成倍增长，活力最佳，最适合进行实验研究
平台期
细胞长满瓶壁后，细胞虽有活力但不再分裂 机制：接触抑制、密度依赖性 相互接触后，如培养的是正常细胞，由于细胞的相互接触能抑制细胞的运动，这种现
象称接触抑制（Contact Inhibition）。 当细胞密度进一步增大，培养液中营养成分减少，代谢产物增多时，细胞因营养的枯
VERO细胞培养
细胞培养技术
从生物体内取出组织或细胞，在体外(in vitro)模拟体内生理环境，在无菌、适当温度 和一定营养条件下，对这些组织或细胞进行孵育培养，使之保持一定的结构和功能，以 便于我们观察研究，这种方法就是细胞培养（cell culture）。有时细胞培养也称为组 织培养（tissue culture)。
意大利I.A.Z. 欧洲细胞实验室列表（大全）
上海午立生物技术有限公司细胞株
意大利IZSLER细胞库
中国医学科学院基础医学研究所细胞中心保藏细 胞目录 上海华大天源生物科技有限公司提供高
细胞库
ATCC:American Type Culture Collection (美国标准培养物收集所) ECACC:European Collection of Cell Cultures(欧洲动物细胞库 ) JCRB:Japanese Collection of Research Bioresources(日本细胞库) CCTCC:China Center for Type Culture Collection (中国典型培养物保藏中心)
塑料制品特点：质软、易出现划痕；耐腐蚀能力强、但不耐热。
1、针式滤器帽不能泡酸液,用2％氢氧化钠泡6-12小时,或者煮沸20分钟,在包装之前要装好滤膜两 张，安装滤膜时注意光面朝上(凹向上)，然后将螺旋稍微拧松一些，放入铝盒中在高压锅内 15磅30分钟消毒，再烘干备用。
普通微生物学知到章节答案智慧树2023年湖南科技大学
普通微生物学知到章节测试答案智慧树2023年最新湖南科技大学绪论单元测试1.建立病原菌确认方法的学者是（）参考答案:柯赫2.纯种分离、培养、灭菌、接种、染色等微生物学实验操作技术的建立者是（）参考答案:柯赫3.微生物的特点除了个体微小以外，还有（）参考答案:结构简单，进化低等;适应性强，分布广;食谱广，营养代谢类型多;吸收多、转化快，代谢能力强;繁殖速度快，易变异4.巴斯德对微生物学的重要贡献有（）参考答案:首次发现并证实发酵是由微生物引起的;否定了自然发生学说;创立了巴斯德消毒法;发现蚕软化病是由微生物的传染造成的;首次提出利用隔离和预防接种法防治传染病，并提出用减毒病原菌制作疫苗，首次制成狂犬疫苗5.微生物学史上第一次“淘金热”是寻找微生物的有益代谢产物。
（）参考答案:错第一章测试1.立克次氏体(Rickettsia) 属于（）参考答案:介乎于细菌与病毒之间的微生物2.螺旋体(Spirochaeto) 属于（）参考答案:介乎于细菌与原生动物（原虫）之间的微生物。
3.目前能进行人工培养的最小微生物是（）参考答案:支原体 (枝原体)4.下列哪种微生物为细菌（）参考答案:Staphylococcus aureus;Bacillus subtilis5.所有微生物都是由原核细胞或真核细胞构成的。
（）参考答案:错第二章测试1.真菌中发现的惟一的几丁质物质存在于（）中参考答案:细胞壁；2.下列属于真菌的有性孢子的是（）参考答案:子囊孢子；;担孢子；;接合孢子；3.下列属于真菌的是（）参考答案:黏菌；;霉菌;酵母菌；4.下列属于单层膜结构细胞器的有（）参考答案:微体；;内质网；;溶酶体；;膜边体；;几丁质体；;液泡；;高尔基体；;氢化酶体5.毛霉和根霉通过产生孢囊孢子进行无性繁殖，产生子囊孢子进行有性繁殖。
（）参考答案:错第三章测试1.病毒衣壳体的组成成份是（）参考答案:蛋白质;2.病毒含有的核酸通常是（）参考答案:DNA或RNA;3.最先发现病毒的是（）参考答案:伊万诺夫斯基；4.最先提纯的结晶病毒是（）参考答案:烟草花叶病毒;5.病毒都是对人类有害的（）参考答案:错第四章测试1.大多数微生物属于自养型生物，少数微生物属于异养型生物。
细胞培养方法
细胞培养方法
细胞培养是生物学实验中常用的一种技术手段，它可以提供大量的细胞用于实验研究。
正确的细胞培养方法对于细胞的生长、增殖和实验结果的准确性都至关重要。
下面将介绍一些常用的细胞培养方法及注意事项。
首先，准备培养基。
培养基是细胞生长所必需的营养物质和生长因子的混合物。
常用的培养基有DMEM、RPMI-1640等，根据不同细胞类型的要求选择适当的培养基。
在制备培养基时，需要注意无菌操作，避免细菌和真菌的污染。
其次，处理细胞。
从细胞库中取出细胞后，需要进行细胞的处理和传代。
处理细胞时，要注意细胞的密度和活性，避免细胞凝集和死亡。
传代时，要根据细胞的生长状态和密度进行适当的稀释，以保证细胞的健康生长。
接着，进行细胞的接种和培养。
将处理好的细胞按照一定的比例接种到预先涂有培养基的培养皿中，然后将培养皿放入培养箱中进行培养。
在培养过程中，需要定期观察细胞的生长状态，及时更换培养基，避免细胞过度生长或死亡。
最后，进行实验。
当细胞达到所需的数量和状态后，就可以进行相关的实验。
在实验过程中，需要注意培养皿的无菌操作，避免细菌和真菌的污染。
同时，要注意细胞的处理和操作方法，避免对细胞造成损伤。
总之，正确的细胞培养方法对于细胞的生长和实验结果至关重要。
只有严格遵守操作规程，做好无菌操作，才能得到可靠的实验结果。
希望本文介绍的细胞培养方法能够对大家有所帮助。
兽医微生物学测试题(含参考答案)
兽医微生物学测试题（含参考答案）一、单选题（共57题，每题1分，共57分）1.关于“猪瘟病毒”说法错误的是（）A、黄病毒科瘟病毒属B、病毒主要通过采食侵入机体，最先定居于扁桃体C、属于DNA病毒D、病毒粒子呈球形正确答案：C2.用鸡胚增殖禽流感病毒的最适接种部位是（）A、胚脑B、羊膜腔C、尿囊腔D、卵黄囊E、绒毛尿囊膜正确答案：B3.下列哪种痘病毒对预防天花具有公共卫生意义（）。
A、牛痘病毒B、山羊痘病毒C、绵羊痘病毒D、鸡痘病毒正确答案：A4.下列不属于单股负链分节段RNA病毒的是A、副黏病毒科B、布尼亚病毒科C、正黏病毒科D、砂粒病毒科正确答案：A5.下列病毒中对呼吸道黏膜具有亲嗜性的是（）A、脊髓灰质炎病毒B、肝炎病毒C、脑炎病毒D、流感病毒正确答案：D6.细菌缺乏下列哪种结构在一定条件下仍可存活（）A、细胞壁B、细胞膜C、细胞质D、核质E、以上均可正确答案：A7.细菌细胞壁的主要功能是（）A、维持细菌外形B、抵抗低渗C、参与物质交换D、与抗原性、致病性、对药物的敏感性等有关E、以上都正确正确答案：E8.给动物注射免疫球蛋白（）A、非特异性主动免疫B、特异性被动免疫C、非特异性被动免疫D、特异性主动免疫正确答案：B9.病料量至少是检测量的（）倍A、3B、2C、4D、1正确答案：C10.下述方法不可能杀灭细菌芽胞的是（）A、高压蒸气灭菌法B、干热灭菌法C、煮沸法D、间歇灭菌法正确答案：C11.PRRSV感染的靶细胞是（）A、淋巴细胞B、单核巨噬细胞C、猪肺巨噬细胞D、猪肾细胞正确答案：C12.细菌摄取营养物质最主要的方式是（）A、主动运输B、促进扩散C、单纯扩散D、基团移位正确答案：A13.酒精消毒最适宜浓度是( )A、100%B、50%C、95%D、75%正确答案：D14.病毒血凝素的化学成分是（）A、脂质B、脂多糖C、多糖D、蛋白质正确答案：D15.常发生于烧伤、创伤、手术切口感染，表现为局部化脓性炎症的细菌是A、铜绿假单胞菌B、支气管败血波氏杆菌C、布氏杆菌D、鼻疽伯氏杆菌正确答案：A16.与细菌侵袭力无关的物质是（）A、芽胞B、血浆凝固酶C、菌毛D、荚膜正确答案：A17.下列哪种病毒可以采用HA-HI诊断（）。
生物技术制药试题(打印版)
生物技术制药试题1. 生物技术制药:生物技术制药是指运用微生物学、生物学、医学、生物化学等的研究成果，从生物体、生物组织、细胞、体液等，综合利用微生物学、化学、生物化学、生物技术、药学等科学的原理和方法进行药物制造的技术。
2. 基因表达:基因表达(gene expression)是指细胞在生命过程中,把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译,转变成具有生物活性的蛋白质分子.生物体内的各种功能蛋白质和酶都是同相应的结构基因编码的。
3. 质粒的分裂不稳定:通常将质粒不稳定性分为两类:一类是结构不稳定性,也就是质粒由于碱基突变、缺失、插入等引起的遗传信息变化;另一类是分离不稳定性,指在细胞分裂过程中质粒不能分配到子代细胞中,从而使部分子代细胞不带质粒(即P-细胞)。
在连续和分批培养过程中均能观察到此两类现象发生。
一般情况下具有质粒的细胞(即P＋细胞)需要合成较多的DNA、RNA和蛋白质,因此其比生长速率低于P-细胞,从而P-细胞一旦形成能较快速地生长繁殖并占据培养物中的大多数。
4. 补料分批培养:发酵培养基发酵培养基是供菌种生长、繁殖和合成产物之用。
它既要使种子接种后能迅速生长，达到一定的菌丝浓度，又要使长好的菌体能迅速合成需产物。
因此，发酵培养基的组成除有菌体生长所必需的元素和化合物外，还要有产物所需的特定元素、前体和促进剂等。
但若因生长和生物合成产物需要的总的碳源、氮源、磷源等的浓度太高，或生长和合成两阶段各需的最佳条件要求不同时，则可考虑培养基用分批补料来加以满足。
5. 人-鼠嵌合抗体:嵌合抗体（ chimeric atibody ）是最早制备成功的基因工程抗体。
它是由鼠源性抗体的 V 区基因与人抗体的 C 区基因拼接为嵌合基因，然后插入载体，转染骨髓瘤组织表达的抗体分子。
因其减少了鼠源成分，从而降低了鼠源性抗体引起的不良反应，并有助于提高疗效。
6. 悬浮培养:非贴壁依赖性细胞的一种培养方式。
细胞工程试题
细胞工程试题(黑色字体是重点)一、选择1、植物细胞表现出全能性的必要条件是：（C ）A、给予适宜的营养和外界条件B、导入其他植物细胞的基因C、脱离母体后，给予适宜的营养和外界条件D、将成熟的细胞核移植到去核的卵细胞中2、植物体细胞杂交可以解决不同生物之间的问题（B）A、亲缘关系远B、生殖隔离C、地理隔离D、组织分化3、动物细胞培养的正确过程是A原代培养传代培养细胞株细胞系B原代培养传代培养细胞系细胞株C传代培养原代培养细胞株细胞系D传代培养原代培养细胞株细胞系4、在植物组织培养中，培养基的pH值一般为（B ）A 低于5.0B 5.5—5.8C 6.0—7.0D 7.0以上5、对于花药培养和花粉培养，下列说法正确的是（A）A 花药培养属器官培养，花粉培养属细胞培养B 花药培养属细胞培养，花粉培养属器官培养C 两者都属于器官培养D 两者都属于细胞培养6、植物组织培养形成的愈伤组织进行培养，又可以分化形成根、芽等器官，这一过程称为（C）A、脱分化B、去分化C、再分化D、脱分化或去分化7、下列不能作为植物组织培养的材料是：（D）A、秋海棠的叶B、马铃薯的块茎C、成熟的花粉D、木质部中的导管细胞8、用植物组织培养技术可以培养或生产出（D）。
A、次生代谢产物B、无病毒植物C、人工种子D、A，B，C均可9、经高温灭菌后。
培养基的pH会（A ）A 降低B 升高C 不变D 不能确定10、生长素与细胞分裂素在植物组织培养中的作用是（B ）A 生长素促进芽的生长，细胞分裂素促进根的生长B 生长素促进根的生长，细胞分裂素促进芽的生长C生长素与细胞分裂素均促进根的生长D生长素与细胞分裂素均促进芽的生长11、培养室里的湿度一般保持在( C )A 30～40%；B 50～60%；C 70～80%；D 80～90%12、下列培养基中( C )无机盐的浓度最低。
A MS培养基；B B5培养基；C White培养基；N6培养基13、高温易被破坏分解的植物激素是( B )_。
细胞培养复习题含答案)
1.体外培养的细胞按生长方式可分为哪二种? 按细胞在体外生长的形态特征,可分为哪几种常见类型?⑴按生长方式分为二型：粘附型细胞:附着在某一固相支持物表面才能生长的细胞。
悬浮型细胞:不必附着于固相支持物表面，而在悬浮状态下即可生长的细胞。
（绝大多数有机体细胞属粘附型细胞。
）⑵可分四型：(1)上皮型细胞 (2)成纤维型细胞 (3)游走型细胞 (4)多形型细胞2.简述体外培养细胞的整个生命活动过程的分期及每代贴附生长细胞的生长过程⑴通常，体外培养细胞的全部生命期大致可被分为以下三个阶段：①原代培养期：也称初代培养，是指从机体中取出细胞接种培养到第一次传代之前的这一阶段。
此期的细胞呈现出活跃移动的特点，可见细胞分裂，但不旺盛。
处于原代培养阶段的细胞与体内原组织在形态结构和功能活动上有很大的相似性。
细胞群具有明显的异质性，细胞间的相互依存性强，在软琼脂培养基培养时细胞集落形成率很低。
②．传代期：通常是培养细胞全生命期中持续时间最长的时期，原代培养的细胞经传代后常被称做细胞系。
一般情况下，正常体细胞在传代10-50次左右后，细胞分裂的能力就会逐渐减弱，甚至完全丧失，细胞便进入衰退期。
③衰退期：处于衰退期的培养细胞，增殖速率已经变得很慢或不再增殖，直至最后衰退死亡。
以上特点，主要是针对体外培养的机体正常细胞，对于体外发生转化的细胞和肿瘤细胞而言，永生性或恶型性的获得使得这类细胞获得持久性的增殖能力，这样的细胞群体常被称为无限细胞系或连续细胞系。
⑵每代贴附生长细胞的生长过程：①游离期：细胞接种后在培养液中呈悬浮状态，也称悬浮期。
此时细胞质回缩，胞体呈圆球形。
时间：10分钟一4小时②贴壁期：细胞附着于底物上，游离期结束。
底物：玻璃、塑料、胶原、其它细胞等③潜伏期：此时细胞有生长活动，而无细胞分裂。
细胞株潜伏期一般为6～24小时。
④对数生长期：细胞数随时间变化成倍增长，活力最佳，最适合进行实验研究。
⑤停止期（平台期）：细胞长满瓶壁后，细胞虽有活力但不再分裂机制：接触抑制、密度限制3.简述体外培养细胞对生存环境的基本要求.⑴细胞的营养需要：①基本营养物质：氨基酸（１２种＋谷氨酰胺）、维生素、葡萄糖、核糖、脱氧核糖等无机离子。
细胞生物学考试题(含答案)
细胞生物学考试题（含答案）一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1.染色质的基本结构单位是A、袢环B、核小体C、串珠链D、30nm染色质纤维E、组蛋白核心正确答案：B2.以下描述不属于细胞基本特征的是A、细胞能对刺激产生反应B、细胞能够自行增殖C、细胞具有细胞核和线粒体D、细胞拥有一套遗传机制及应用规则E、细胞具有细胞膜和核糖体正确答案：C3.人眼的分辨极限是A、100μmB、2nmC、2μmD、0.2μmE、0.002nm正确答案：A4.2-巯基乙醇或DTT可以破坏蛋白的二硫键,成为线性分子A、显微结构B、超微结构C、细胞三维立体结构D、生物大分子空间构象E、蛋白质一级结构正确答案：E5.下列哪些因素不会导致细胞衰老A、代谢废物累积B、端粒缩短C、端粒酶活性增高D、活性氧自由基增多E、基因转录差错正确答案：C6.角蛋白主要分布于A、白细胞B、上皮细胞C、肌肉细胞D、神经胶质细胞E、神经细胞正确答案：B7.细胞骨架系统的出现是真核细胞的特征性结构之一。
细胞骨架主要由哪类物质组成A、糖类B、脂类C、蛋白质D、核酸E、以上都是正确答案：C8.关于组蛋白的错误叙述是A、是构成染色质的主要蛋白成分B、属于碱性蛋白C、均具有种属和组织特异性D、是一类进化上保守的蛋白质E、是真核细胞特有的蛋白质正确答案：C9.自由基可以使质膜上的( )氧化A、饱和脂肪酸B、葡萄糖C、水D、不饱和脂肪酸E、胆固醇正确答案：D10.直接参与细胞分化过程中基因选择性表达调控的细胞结构是A、微管B、中心粒C、核基质D、中间纤维E、端粒正确答案：C11.分选蛋白质的功能是由高尔基体的哪一区域完成的A、顺面扁囊B、中间扁囊C、反面扁囊D、反面高尔基网状结构E、顺面高尔基网状结构正确答案：D12.与ER膜连续A、内层核膜B、外层核膜C、核周间隙D、核纤层E、核孔复合体正确答案：B13.细胞内外物质运输中需要消耗代谢能量的运输方式是A、易化扩散和出(入)胞作用B、易化扩散和主动运输C、主动运输和出(入)胞作用D、主动运输和被动运输E、主动运输和帮助扩散正确答案：C14.细胞凋亡时其DNA断片大小的规律是A、100bp的整数倍B、200bp的整数倍C、300bp的整数倍D、400bp的整数倍E、500bp的整数倍正确答案：B15.细胞中的多糖主要与蛋白质、脂类结合,以复合糖的形式存在。
2021年高三生物小题专练2
年高三生物小题专练21．下列关于细胞的分子组成和基本结构的阐述，错误．．的是A. C、H、O、N、P是ATP、染色质、核苷酸共有的化学元素B. 线粒体、核糖体、染色体、叶绿体等结构中都含有DNAC. 糖蛋白、载体、受体、限制性核酸内切酶都是具有识别作用的物质D. 脂质中的磷脂是构成细胞膜的重要物质，所有细胞都含有磷脂2．结核杆菌是结核病的病原体，近年来因抗药菌株增多等原因，使人类结核病的发病率和死亡率上升，下列有关结核杆菌的叙述，正确的是A．结核杆菌的基本结构包括细胞壁、细胞膜、细胞质和细胞核B．结核杆菌抗药性的产生是应用抗生素诱导基因突变的结果C．接种卡介苗后，T细胞受刺激成为记忆细胞，产生相应的抗体D．感染结核杆菌后，机体主要通过特异性免疫的作用将其消灭3．下列有关造血干细胞中物质运输的途径，可能存在的是A．吸收的葡萄糖：细胞膜——细胞溶胶——线粒体B．合成的细胞膜蛋白：高尔基体——核糖体——细胞膜C．转录的mRNA：细胞核——细胞质基质——高尔基体D．合成的DNA聚合酶：核糖体——细胞溶胶——细胞核4．在人体的内环境中，可以发生的生理过程是A．血浆蛋白和血红蛋白的合成 B．丙酮酸氧化分解，产生二氧化碳和水C．抗体与相应的抗原发生特异性的结合 D．食物中的淀粉经消化，最终形成葡萄糖5．盐碱地中生活的某种植物，其细胞的液泡膜上有一种载体蛋白，能将细胞质中的Na+逆浓度梯度运入液泡，减轻Na+对细胞质中酶的伤害。
下列叙述错误．．的是A．Na+进入液泡的过程属于主动转运 B．Na+ 进入液泡的过程体现了液泡膜的选择透性C．该载体蛋白作用的结果不利于增强细胞吸水能力D．该载体蛋白作用的结果有助于提高植物的耐盐性6．视网膜母细胞瘤为眼部恶性肿瘤，其发病与RB基因有关。
RB基因编码的蛋白质称为RB 蛋白，分布于核内，能抑制细胞增殖。
正常人体细胞中含有一对RB基因，当两个RB基因同时突变时，会发生视网膜母细胞瘤。
细胞培养与病毒培养实验步骤
实验二传代细胞培养与病毒在传代细胞中的培养一、实验目的了解倒置显微镜的构造与使用，了解不同传代细胞的形态及接毒后的病变特征，掌握细胞的传代培养方法、病毒接种方法及收毒方法。
二、常用细胞的种类BHK-21：仓鼠肾传代细胞PK-15：猪肾传代细胞IBRS-2：猪肾传代细胞Hela：人的子宫瘤细胞Vero：非洲绿猴肾细胞Marc-145：来源于Vero细胞TK-143：人的胸苷激酶阴性细胞Sf9：昆虫细胞三、材料1、100ml细胞瓶、吸管、吸球、96孔细胞培养板、加样器、枪头2、BHK-21（baby hamster kidney）细胞3、0.25%胰酶4、生长液：含10%犊牛血清、200U/ml青、链霉素的DMEM维持液：含2-5%犊牛血清、200U/ml青、链霉素的DMEM5、伪狂犬病病毒液（PRV）四、传代细胞培养的条件要求1）细胞密度：2-3×105个/ml2）pH范围最适pH7.0-7.4，耐受pH6.6-7.83）培养温度哺乳动物细胞一般为37℃昆虫细胞28-30℃五、常用细胞分散剂与作用原理1、胰酶使精氨酸或赖氨酸的羧基和其他氨基酸的氨基之间的多肽链发生水解，导致细胞间质水解而使细胞或组织块消化为分散的单个细胞。
2、乙二胺四乙酸二钠（EDTA）：与二价钙、镁离子结合，从而使细胞分散。
3、灰色链丝菌酶：由灰色链丝菌提取的一种酶制剂，是蛋白酶、氨肽酶和羧肽酶的混合物。
六、营养液1、人工综合营养液氨基酸、糖类、无机盐类、维生素、辅酶、嘌呤、嘧啶、辅助生长因子。
2、血清1）血清的种类胎牛血清、新生犊牛血清、成年牛血清、马血清、鸡血清、兔血清、羊血清、人血清，其中以新生犊牛血清使用最为广泛。
2）血清的处理无菌采集，过滤除菌。
用前56℃灭活30min。
3）血清的作用A、能提供细胞生存、生长和增生所必须的生长调节因子。
B、能补充基础培养液中没有或量不足的营养成分。
C、含有一些可供贴壁依赖型细胞在培养器皿表面贴附和铺展的生长基质成分。
植物组织培养(东北林业大学)智慧树知到答案章节测试2023年
第一章测试1.细胞培养属于植物组织培养。
A:对B:错答案:A2.植物组织培养不需要在无菌的条件下进行。
A:对B:错答案:B3.学习植物组织培养不需要重视实验技能培训。
A:错B:对答案:A4.植物组织培养对电能的消耗不大。
A:错B:对答案:A5.植物组织培养可以代替田间试验。
A:错B:对答案:A第二章测试1.植物组织培养实验室由（）组成。
A:细胞学观察室B:移栽驯化室C:化学实验室D:无菌操作室E:培养室答案:ABCDE2.植物组织培养实验室基本仪器和设备有（）。
A:玻璃器皿B:灭菌设备C:器械用具D:超净工作台E:天平答案:ABCDE3.植物组织培养需要的环境条件包括（）。
A:光照B:培养基pH值C:培养基渗透压D:温度E:气体答案:ABCDE4.无菌操作是植物组织培养的关键技术。
A:错B:对答案:B5.组织培养材料不需要氧气。
A:错B:对答案:A第三章测试1.按照国际植物生理协会的建议，所需要的浓度大于（）的元素为大量元素。
A:0.5mmol/LB:0.1mmol/LC:0.2mmol/LD:0.7mmol/L答案:A2.无机营养包括（）和各种无机盐类。
A:糖B:水C:氨基酸D:维生素答案:B3.在培养基中加入（），主要是为了吸附培养基及培养物泌出物中的抑制物质。
A:水B:活性炭C:蛋白质D:糖答案:B4.（）主要作用是抑制外植体的褐变。
A:糖B:无机盐C:有机物D:抗氧化物答案:D5.蔗糖使用浓度一般在（）。
A:6%-7%B:0.5%-1%C:2%-5%D:10%-20%答案:C第四章测试1.植物在其生长发育过程中都要经过幼年期和成年期两个阶段。
A:错B:对答案:B2.使用适当的栽培技术措施可以提高植物材料的复壮程度。
A:错B:对答案:B3.胚不可以做为组织培养的材料。
A:错B:对答案:A4.花粉不是复壮的细胞。
A:对B:错答案:B5.成熟的植物材料做组织培养容易成功。
A:错B:对答案:A第五章测试1.植物离体快繁不一定要形成完整的新植株。
GIBCO细胞培养基本知识手册(中文版)
细胞培养与病毒培养实验步骤
实验二传代细胞培养与病毒在传代细胞中的培养一、实验目的了解倒置显微镜的构造与使用，了解不同传代细胞的形态及接毒后的病变特征，掌握细胞的传代培养方法、病毒接种方法及收毒方法。
二、常用细胞的种类BHK-21：仓鼠肾传代细胞PK-15：猪肾传代细胞IBRS-2：猪肾传代细胞Hela：人的子宫瘤细胞Vero：非洲绿猴肾细胞Marc-145：来源于Vero细胞TK-143：人的胸苷激酶阴性细胞Sf9：昆虫细胞三、材料1、100ml细胞瓶、吸管、吸球、96孔细胞培养板、加样器、枪头2、BHK-21（baby hamster kidney）细胞3、0.25%胰酶4、生长液：含10%犊牛血清、200U/ml青、链霉素的DMEM维持液：含2-5%犊牛血清、200U/ml青、链霉素的DMEM5、伪狂犬病病毒液（PRV）四、传代细胞培养的条件要求1）细胞密度：2-3×105个/ml2）pH范围最适pH7.0-7.4，耐受pH6.6-7.83）培养温度哺乳动物细胞一般为37℃昆虫细胞28-30℃五、常用细胞分散剂与作用原理1、胰酶使精氨酸或赖氨酸的羧基和其他氨基酸的氨基之间的多肽链发生水解，导致细胞间质水解而使细胞或组织块消化为分散的单个细胞。
2、乙二胺四乙酸二钠（EDTA）：与二价钙、镁离子结合，从而使细胞分散。
3、灰色链丝菌酶：由灰色链丝菌提取的一种酶制剂，是蛋白酶、氨肽酶和羧肽酶的混合物。
六、营养液1、人工综合营养液氨基酸、糖类、无机盐类、维生素、辅酶、嘌呤、嘧啶、辅助生长因子。
2、血清1）血清的种类胎牛血清、新生犊牛血清、成年牛血清、马血清、鸡血清、兔血清、羊血清、人血清，其中以新生犊牛血清使用最为广泛。
2）血清的处理无菌采集，过滤除菌。
用前56℃灭活30min。
3）血清的作用A、能提供细胞生存、生长和增生所必须的生长调节因子。
B、能补充基础培养液中没有或量不足的营养成分。
C、含有一些可供贴壁依赖型细胞在培养器皿表面贴附和铺展的生长基质成分。
细胞培养基础知识
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新的玻璃器皿的清洗灭菌
自来水刷洗，除去灰尘。 烘干、泡盐酸：烤箱中烘干，然后再浸入5%稀盐酸中12小时以除去脏物、铅
、砷等物。 刷洗、烘干：泡酸12小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲
洗干净后用烤箱烘干。 泡酸、清洗：用酸浸泡12小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗10次，
我们进行体外细胞培养，实际是在细胞群体和个体的情况下考查细胞行为的。大部分细胞群体都由
分裂和不分裂两部细胞混合组成。而不分裂细胞又可分为两类：即保持再进入细胞周期能力的G0期
细胞（或叫静置细胞或休止细胞）及不分裂最终注定要死亡的终止分化细胞（或称之终端分化细胞
），他们不能再进入周期。进入周期内的细胞可以分为两个期：间期（G1+S+G2），M期（有丝分裂
单抗基本知识 细胞基本知识 设备与器材准备、溶液配制 无菌技术 细胞培养 细胞计数 冻存、复苏
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设备与器材准备、溶液配制
一、细胞常用设备和器材
超净工作台
二氧化塔摇床
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高中生物 第十单元 第59课时 动物细胞工程
第59课时动物细胞工程课标要求1.阐明动物细胞培养的条件和过程。
2.阐明动物细胞核移植的原理和过程。
3.阐明动物细胞融合的概念。
4.概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术。
5.简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。
考情分析1.动物细胞培养技术2022·福建·T32022·江苏·T142022·湖北·T62.动物细胞融合和单克隆抗体的制备2023·北京·T122023·湖北·T222022·山东·T152022·福建·T132021·山东·T152021·江苏·T112020·全国Ⅰ·T383.动物细胞核移植技术2023·天津·T72021·辽宁·T132020·天津·T1考点一动物细胞培养1．动物细胞培养的概念从动物体中取出相关的组织，将它分散成______________________，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞__________________________的技术。
2．动物细胞培养的条件3．动物细胞培养的过程(1)细胞贴壁：体外培养的大多数动物细胞往往________在培养瓶的瓶壁上。
(2)接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面________________时，细胞通常会停止________________。
(3)原代培养：________之前的细胞培养，即动物组织经处理后的________________。
(4)传代培养：________后的细胞培养。
4.干细胞培养及其应用种类胚胎干细胞成体干细胞诱导多能干细胞来源骨髓、脐带血和外周血体细胞(如成纤维细胞等)特点能分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的组织和器官甚至______________________________________________________________分化成________________________________________________________能诱导分化成类似__________________的细胞应用分化成心肌细胞、神经元和造血干细胞等造血干细胞用于治疗白血病等；神经干细胞用于治疗帕金森病、阿尔茨海默病等治疗小鼠的镰状细胞贫血、阿尔茨海默病、心血管疾病等(1)在进行细胞培养时，通常采用培养皿或打开培养瓶盖的方式以获取新陈代谢所必需的O2()(2)将动物细胞置于含有95%O2和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养()(3)动物细胞在培养过程中都具有细胞贴壁的现象()(4)培养动物细胞的第一代(即第一次细胞增殖)被称为原代培养()(5)干细胞都能分化成多种类型的细胞()(6)胚胎干细胞是发现最早、研究最多、应用也最为成熟的一类成体干细胞()为研究长春新碱(VCR)对肝癌细胞凋亡的影响，科研人员进行了相关研究。
细胞生物学名词解释
细胞生物学名词解释1、细胞：由膜转围成的、能进行独立繁殖的最小原生质团，是生物体电基本的开矿结构和生理功能单位。
其基本结构包括：细胞膜、细胞质、细胞核（拟核）。
2、病毒（virus）：迄今发现的最小的、最简单的专性活细胞内寄生的非胞生物体，是仅由一种核酸（DNA或RNA）和蛋白质构成的核酸蛋白质复合体。
3、病毒颗粒：结构完整并具有感染性的病毒。
4、原核细胞：没有由膜围成的明确的细胞核、体积小、结构简单、进化地位原始的细胞。
5、原核（拟核、类核）：原核细胞中没有核膜包被的DNA区域，这种DNA不与蛋白质结合。
6、细菌染色体（或细菌基因组）：细菌内由双链DNA分子所组成的封闭环折叠而成的遗传物质，这样的染色体是裸露的，没有组蛋白和其他蛋白质结合也不形成核小体结构，易于接受带有相同或不同物种的基因的插入。
7、质粒：细菌细胞核外可进行自主复制的遗传因子，为裸露的环状DNA，可从细胞中失去而不影响细胞正常的生活，在基因工程中常作为基因重组和基因转移的载体。
8、芽孢：细菌细胞为抵抗外界不良环境而产生的休眠体。
9、细胞器：存在于细胞中，用光镜、电镜或其他工具能够分辨出的，具有一定开矿特点并执行特定机能的结构。
10、类病毒：寄生在高等生物（主要是植物）内的一类比任何已知病毒都小的致病因子。
没有蛋白质外壳，只有游离的RNA分子，但也存在DNA型。
11、细胞体积的守恒定律：器官的总体积与细胞的数量成正比，而与细胞的大小无关。
1、分辨率：区分开两个质点间的最小距离。
2、细胞培养：把机体内的组织取出后经过分散（机械方法或酶消化）为单个细胞，在人工培养的条件下，使其生存、生长、繁殖、传代，观察其生长、繁殖、接触抑制、衰老等生命现象的过程。
3、细胞系：在体外培养的条件下，有的细胞发生了遗传突变，而且带有癌细胞特点，失去接触抑制，有可能无限制地传下去的传代细胞。
4、细胞株：在体外一般可以顺利地传40—50代，并且仍能保持原来二倍体数量及接触抑制行为的传代细胞。
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移液器
顯微鏡
酶标仪
微孔板震荡器
高速离心机
液氮罐
实验室安全
层流净化细胞培养室管理规则 一级生物安全防护实验室 二级生物安全防护实验室 三级生物安全防护实验室 四级生物安全防护实验室ຫໍສະໝຸດ 层流净化细胞培养室管理规则
我院层流净化细胞培养室设计标准为万级，专供 细胞培养、冻存以及细胞治疗用。层流净化细胞培养 室的总体要求：经济、有序、高效、安全。初步制定 相关制度如下：
成无菌环境。
II级A型生物安全柜:
一种既能使操作造成无菌、 无尘的局部空气环境，保证检验、 检测不受污染，又能保证被研究 的对象（如病菌、细菌等）不外 溢，保护周围环境及操作人员的 安全隔离设备。
该设备可广泛应用于低、中 等危险度（病原体1--3，DNA重 组P1--P3）的临床细菌学，病毒 学、微生物学、组织培养、生物 学及生命科学的研究，加工、检 验部门。
高效过滤器:
高效过滤器是用超细玻璃纤维纸 作滤料，胶板纸作分隔板，可与铝合 金框、木框及镀锌钢板框组合而成。
特点：具有低阻高效、轻质、容尘 量大等特点，层高的要求，缩小净化 设备静压箱体积等优点。
适用于常温常压常湿条件下环境空 气的净化，尤其适用于需要高效空气 过滤器覆盖率高的净化厂房。
洁净层流罩:
1、准入制度：
1）必须取得实验室相关实验技能考试合格方可进入层流净化室； 2）在本室工作的实验人员应严格遵守本室工作守则，外来人员在进 入净化室工作之前，必须接受培训； 3）没有经过培训的人员不得单独进入净化室工作； 4）进入净化室后要保持安静，不得大声喧哗。
2、安全制度：
1）层流净化室内必须注意安全用电； 2）谨慎使用酒精灯，不能在有明火的情况下加、换酒精； 3）实验人员自觉维护室内设备的安全使用，对室内的仪器如CO2孵 箱等要经常注意机器运转情况，发现问题及时检修或报告请人检修； 4) 离开层流净化室必须断开必要的仪器电源； 5）对不符合层流净化室安全规定的行为主动报告主管老师。
3、卫生消毒制度：
1）一般情况下细胞间每日消毒一次（包括两个缓冲间），方法 为紫外线消毒（每次30分钟至1小时）一次，另外每周用10％乳酸在 紧闭门窗下熏蒸３０分钟；
2）实验完毕应及时清理所用物品，注意台面整洁； 3）及时清洗所用隔离衣，并高压灭菌后存放于指定位置（每日 一次）； 4）除实验必须的用品外，其它物品不得带入净化室； 5）层流净化室内所用仪器及附属设备均应在指定范围内使用， 不得随意转移地点，以便他人顺利使用； 6）层流净化室实施值日生负责制，值班人员负责检查室内是否 保持清洁整齐，督促违反规定者改正错误。
技术性能参数： (1)净化等级：100级(美国联邦标准209E) (2)平均风速：0.25～0.45m/s(可调)
(3)噪音：≤62dB(A) (4)电源：220V/50HZ 层流罩是可提供局部高洁净环境的空气净化设备。它主要由箱体、风机。初效空气过滤器、 高效空气过滤器、阻尼层、灯具等组成，外壳为不锈钢或彩钢板。该产品既可悬挂，又可地面 支撑，结构紧凑，使用方便。可以单个使用，也可多个联接组成带状洁净区域，形成洁净隧道。
细胞保存条件：液氮罐 实验室安全：生物实验室安全，P1,P2,P3实验室安全
净化工作室
------ 我国药品生产洁净室（区）空气洁净度标准 -------
洁净度级 别
尘粒最大允许数/立方米
尘粒最大允许数
≥0.5um
≥5um 浮游菌/立方 沉降菌/皿
100
3,500
0
5
1
10,000
350,000
2,000
紫外灯 ：紫外线消毒。 主要用于培养室空气、操作台、塑料培养
皿和培养板等表面消毒
电热干燥箱：干热消毒（160 ℃ ，2小时）。主要用干玻璃 器皿消毒
滤器
Zeiss滤器：过滤除菌：大多数培养用液， 如人工合成培养基、血清、酶液等均采用 滤过法除菌
大容量高压灭菌器
全自动手提式灭菌器
自动双重纯水蒸馏器
纯水仪
培养板
培养瓶
• 常用玻璃器皿清洗
• 浸泡（自来水）、刷洗（洗衣粉）、酸泡（24小时）、 • 流水冲洗、蒸溜水浸泡和冲洗、50℃烘干
清洁液的配制
CO2培养箱
CO2培养箱设定的条件为37 ℃ ，5％CO2 。 使用CO2培养箱培养细胞时应注意的问题： ①用螺旋口瓶培养细胞时，需将瓶盖 微松，以保证通气。 ②保持培养箱内空气干净。定期消毒 （90 ℃ ，14 h)。 ③箱内灭菌蒸馏水3000毫升蒸馏水槽中 以保持箱内湿度，避免培养液蒸发。
传递窗: 该装置是一种洁净室的辅助设
备，主要用于洁净区与洁净区，洁 净区与非洁净区之间小件物品的传 递，以减少洁净室的开门次数，把 对洁净区的污染降低到最低程度。
PB系列传递窗按用途分为标准 型和生物洁净型两种。（后者带空 气自净装置）按门互锁形式分为机 械互锁和电子互锁两种外壳按材料 分为彩钢板型、薄钢板喷塑型和全 不锈钢型三种通用型尺寸如下表所 列，特殊规格按用户要求制作。
100
3
100,000 3,500,000
20,000
500
10
300,000 10,500,000
60,000
NA
15
风淋室: 风淋室是生物洁净室的理想
配套设备，它不仅可以清除人体 和物品表面附着的尘埃，减少带 入洁净室的灰尘量，而且兼有气 闸室的功能，可防止非洁净空气 的侵入。风淋室的板壁采用轻质 隔热夹芯钢板，吹淋板采用进口 不锈钢制作，吹淋口方向可调， 风淋时间可在30-99秒间的调整。 风淋室可以配合加热器，冬天可 以加热，温度可调，一般控制温 度在30-35℃较为适宜。
洁净层流罩是将空气经风机以一定的风压通过高效空气过滤器后，由阻尼层均压，使洁净 空气呈垂直层流型气流送入工作区，从而保证了工作区内达到工艺所需的高洁净度。
超净工作台
•
超净工作台的工作 原理是利用鼓风机
驱动空气遁过高效
滤器除去空气中的
尘埃颗粒，使空气
得到净化。净化空
气徐徐通过工作台
面，使工作台内构
细胞培养的基本条件
无菌条件：净化工作室，风淋室，传递窗，高效过滤器， 洁净层流罩，生物安全柜，超净工作台，紫外 灯，电热干燥箱，滤器，高压灭菌器，抗生素
细胞生长条件：纯水蒸馏器，纯水仪，培养板，培养瓶， CO2培养箱，培养基，血清
细胞检测条件：倒置显微镜，酶标仪 ，微孔板震荡器，高 速离心机，移液器