第五章 凝集反应
凝集反应和沉淀反应
自身红细胞凝集试验
RBC为未经致敏 的受检者新鲜红 细胞，试剂：抗 人O型红细胞的 单克隆抗体
临床应用： HIV检测 HBV检测
22
四、胶乳凝集试验
致 敏 于 胶 乳 颗 粒
23
24
五、明胶凝集试验
将病毒抗原或重组抗原吸附于粉红色明 胶颗粒上，当致敏颗粒与样品血清作用 时，若血清含有抗病毒抗体则可形成肉 眼可见的粉红色凝集
抗体球蛋白
带负电荷较少，籍 ＋
电渗作用向负极泳
动
43
对流免疫电泳
结果分析： ✓ 无沉淀线出现则表明无相
应的抗原。 ✓ 沉淀线位于抗原抗体孔中
间，说明两者比例较适合 。 ✓ 沉淀线偏向抗原孔一方， 表示抗体浓度＞抗原，反 之，则是抗体浓度＜抗原 浓度。
44
二、火箭免疫电泳
+
Ab
-
单向免疫扩散＋电泳,定量检测技术 注：只能测定ug/ml以上的含量
反应特点：
IgM 的作用比IgG大数百倍 IgG与抗原结合后，常不出现凝集反应，称不完全抗 体
5
可见反应形成
6
第二节 直接凝集反应和间接凝集反应
一、直接凝集反应(direct agglutination)： 颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用
下，出现肉眼可见的凝集现象
常用的凝集试验有玻片法和试管法
25
第三节 抗球蛋白参与的血凝试验
抗球蛋白试验是 抗球蛋白参与的 间接血凝试验， 又称Coombs试验
直接Coombs试验 间接Coombs试验
26
（一）直接Coombs试验
抗球蛋白抗体
全血操作
检测红细胞上不完全抗体
应用：检测新生儿溶血症、自身免疫性溶血症、特发性自
凝集反应试题
2016 第五章凝集反应一、A11、广泛用于HIV-1抗体和抗精子抗体检测的试验方法是A、明胶凝集试验B、胶乳凝集试验C、间接血凝试验D、反向间接血凝试验E、外斐试验2、颗粒性抗原在适当电解质参与下与相应抗体结合出现凝集称为A、正向间接凝集反应B、反向间接凝集反应C、直接凝集反应D、协同凝集法E、间接凝集抑制反应3、直接凝集反应是A、颗粒性抗原与相应抗体在适当电解质存在下形成肉眼不可见的凝集现象B、颗粒性抗原与相应抗体在适当电解质存在下形成肉眼可见的凝集现象C、可溶性抗原与相抗体在适当电解质存在下形成肉眼不可见的凝集现象D、可溶性抗原与相应抗体在适当电解质存在下形成肉眼可见的凝集现象E、以上均不对4、IgG抗体难以直接与红细IS发生凝集反应的原因是IgGA、抗体亲和力不够B、分子量太小C、不能同时连接两个红细胞D、抗体分子数量太少E、特异性不强5、临床中进行外斐试验最常采用的方法是A、正向间接凝集反应B、反向间接凝集反应C、玻片凝集法D、试管凝集法E、血凝抑制试验6、临床中进行交叉配血试验最常采用的方法是A、间接凝集反应B、玻片凝集法C、试管凝集法D、间接凝集抑制反应E、协同凝集反应7、间接血凝可检测的是A、直接抗ABO系统抗原B、不完全红细胞凝集素C、直接致敏红细胞上的抗原D、直接抗Rh抗原E、白细胞表面抗原8、SPA协同凝集试验中的抗体类别是A、IgMB、IgGC、IgAD、IgEE、IgD9、临床中AB0血型鉴定最常采用的方法为A、正向间接凝集反应B、反向间接凝集反应C、玻片凝集法D、间接凝集抑制反应E、试管凝集法10、小鼠骨髓瘤细胞与下列哪种细胞融合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生单克隆抗体A、经过免疫的B淋巴细胞B、经过免疫的T淋巴细胞C、未经过免疫的B淋巴细胞D、未经过免疫的T淋巴细胞E、以上均不对11、血清学试验用于急性传染病诊断最可靠的发现是A、高抗体滴度B、抗体滴度逐渐下降C、抗体滴度逐渐增高D、阳性补体结合试验E、没有相应抗体12、参与凝集反应的抗体俗称A、凝集原B、沉淀素C、血细胞凝集素D、凝集素E、凝集抗体13、Coombs试验是A、用于检测红细胞上结合的抗原B、用于检测白细胞上结合的抗原C、使用抗球蛋白作为第二抗体测血清中的游离抗原D、利用抗球蛋白抗体与红细胞结合的抗体作用E、使用特异性抗体作为诊断试剂14、在下列各项叙述中不正确的是A、Coombs试验是检测抗红细胞完全抗体的一种有效的方法B、直接Coombs试验常用于新生儿溶血症等的检测C、间接Coombs试验多用于检测母体Rh（D）抗体D、Coombs试验是一种抗人球蛋白参与的血细胞凝集试验E、直接Coombs试验常用于自身免疫溶血症等的检测二、B1、A.协同凝集试验B.正向间接血凝试验C.反向间接血凝试验D.正向间接血凝抑制试验E.反向间接血凝抑制试验<1> 、用红细胞包被抗原检测抗体的是A、B、C、D、E、<2> 、先将可溶性抗原与相应的抗体混合，然后再加入抗原致敏的红细胞，则能抑制原先的血凝现象，称为A、B、C、D、E、答案部分一、A11、【正确答案】 A【答案解析】明胶凝集试验也是一种间接凝集试验，将病毒抗原或重组抗原吸附于粉红色明胶颗粒上，当致敏颗粒与样品血清作用时，若血清含有抗病毒抗体则可形成肉眼可见的粉红色凝集。
第五章凝集反应
第五章凝集反应Agglutination Test第一部分目的要求和教学内容一、目的要求掌握：凝集反应的原理、类型及临床应用；熟悉：凝集反应的技术要点、实验影响因素、方法评价、间接凝集常用的载体；了解：凝集反应各阶段的特征。
二、教学内容1．凝集反应的特点与类型。
2．直接凝集反应：玻片凝集试验，试管凝集试验。
3．间接凝集反应：间接凝集反应的类型，间接血凝试验，胶乳凝集试验，间接凝集试验的临床应用。
4．自身红细胞凝集试验。
5．抗球蛋白试验。
第二部分测试题一、选择题(一)单项选择题(A型题)1_直接抗球蛋白实验用于检测A．血清中结合的抗体B．血清中游离的不完全抗体C．红细胞表面结合的不完全抗体D．红细胞表面结合的完全抗体E．血清中游离的完全抗体2．玻片凝集试验A．只能检测抗原，不能检测抗体B．既能检测抗原，又能检测抗体C．只能检测抗体，不能检测抗原D．为半定量实验E．不能用于ABO血型鉴定3．下列哪一项不属于玻片凝集试验A．菌种鉴定B．血清学分型C．人类ABO血型鉴定D．受检者未致敏红细胞E．受检者致敏红细胞4．试管凝集试验的效价判断标准是依据出现肉眼可见的如下凝集现象A．+ B． +或++C．++ D．+++E．++++5．间接抗球蛋白实验用于检测A．血清中结合的抗体B．血清中游离的不完全抗体C．红细胞表面结合的不完全抗体D．红细胞表面结合的完全抗体E．血清中游离的完全抗体6．协同凝集试验所用的载体是A．新鲜红细胞B．洗涤红细胞C．醛化红细胞D．聚苯乙烯颗粒E．金黄色葡萄球菌7．自身红细胞凝集试验红细胞是A．标准新鲜红细胞B．标准洗涤红细胞C．标准醛化红细胞D．受检者未致敏红细胞E．受检者致敏红细胞8．关于醛化红细胞，说法错误的是A．保存时间较长B．血凝反应效果较新鲜红细胞强C．可反复冻融不易破碎D．能耐60℃加热E．有较强的吸附蛋白质抗原或抗体的能力9．下列试验不属于凝集试验的是A．外斐试验B．肥达试验C．RPR D．TRUSTE．MHA-TA10．关于凝集反应，说法正确的是A．IgM 类抗体的作用比IgG 类抗体要强B．IgM 类抗体常出现不完全反应C．IgG 类抗体不易出现不完全反应D．反应的发生可分为四个阶段E．可进行定量检测11．在实验时为促使凝集现象的出现，下列措施无效的是A．离心B．增加电解质或蛋白质C．加入右旋糖苷或葡聚糖D．胰酶处理E．加入抗原12．关于正向间接凝集试验说法错误的是A．抗原致敏载体B．用于检测标本中抗体C．出现凝集为阴性D．敏感性高E．特异性强13．关于反向间接凝集试验说法错误的是A．抗体致敏载体B．用于检测标本中抗原C．现凝集为阴性D．感性高E．异性强14．关于正向间接凝集抑制试验说法错误的是A．检测标本中抗原B．出现凝集为阳性C．抗体为诊断试剂D．原致敏载体E．不出现凝集为阳性1５．关于反向间接凝集抑制试验说法错误的是A．抗体致敏载体B．抗原为诊断试剂C．检测抗体D．出现凝集为阳性E．不出现凝集为阳性16．关于SPA说法错误的是A．为金黄色葡萄球菌的细胞壁成分B．能与IgG的Fc 段结合C．能与IgG的F(abˊ)2 段结合D．不能与IgG3 结合E．与IgG 结合后不影响其活性17．关于间接血凝试验说法错误的是A．红细胞作为载体B．不能检测抗原C．可检测抗体D．可判断阳性反应的强弱E．应用广泛18．关于胶乳凝集试验，说法错误的是A．是一种间接凝集试验B．敏感性较血凝试验要高C．可进行定性检测D．可进行半定量检测E．可进行定量检测19．关于明胶凝集试验，说法错误的是A．抗原致敏载体检测抗体B．抗体致敏载体检测抗原C．是一种间接凝集试验D．凝集为阳性E．常常用于检测病毒20．间接凝集反应不能检测A．抗体B．AFP 抗原C．伤寒沙门菌菌体抗原D．类风湿因子E．HCG 抗原21．关于自身红细胞凝集试验，说法错误的是A．红细胞为致敏载体B．可检测抗体C．可检测抗原D．诊断试剂为抗O 型红细胞的单克隆抗体E．检测标本为全血22．关于直接Coombs试验，说法错误的是A．检测血清中游离的不完全抗体B．可定性检测C．可作半定量分析D．可用于新生儿溶血检测E．可用于自身免疫性溶血性贫血的检测23．关于间接Coombs试验，说法错误的是A．检测红细胞上的不完全抗体B．出现凝集为阳性C．抗原致敏红细胞D．用于检测母体Rh抗体E．可检测因红细胞不相容性输血而产生的血型24．抗球蛋白试验不能应用于A．配血试验B．立克次体的抗原检查C．诊断新生儿溶血性贫血性疾病D．细菌的不完全抗体的检测E．抗D 抗体25．关于协同凝集试验，说法错误的是A．致敏颗粒为金黄色葡萄球菌B．桥连物为SPAC．检测抗原D．是一种反向间接凝集试验E．抗体为IgM 类(二)多项选择题(x型题)1．实验中，促进凝集现象的措施有A．低温离心B．增加电解质或蛋白质C．加入右旋糖酐或葡聚糖D．用胰酶处理E．加入抗原2．利用试管凝集试验可辅助临床诊断的疾病A．痢疾B．伤寒和副伤寒C．恙虫病D．布鲁菌病E．霍乱弧菌3．间接凝集试验常用的载体A．人0型红细胞B．聚苯乙烯胶乳C．皂土D．明胶颗粒E．活性炭4．符合正向间接凝集试验的是A．抗原致敏载体B．用于检测标本中的抗体C．出现凝集为阴性D．敏感性很高E．特异性不强5．符合反向间接凝集试验的是A．抗体致敏载体B．用于检测标本中的抗原C．出现凝集为阴性D．敏感性很高E．特异性强6．符合正向间接凝集抑制试验的是A．检测标本中的抗原B．抗原致敏载体C．抗体为诊断试剂D．出现凝集为阳性E．不出现凝集为阳性7．符合反向问接凝集抑制试验的是A．抗体致敏载体B．抗原为诊断试剂C．检测标本中的抗体D．出现凝集为阳性E．不出现凝集为阳性8．关于SPA正确的是A．为金黄色葡萄球菌的细胞壁成分B．能与IgG的FC段结合C．能与IgG的F(ab’)：段结合D．不能与IgG3结合E．与IgG结合后不影响其活性9．符合间接血凝试验的是A．以红细胞为载体B．不能检测抗原C．可检测抗体D．可判断阳性反应的强弱E．应用广泛10．符合乳胶凝集试验的是A．是一种间接凝集试验B．敏感性较血凝试验高C．可进行定性检测D．可进行半定量检测E．可进行定量检测11．符合红细胞自身凝集试验的是A．红细胞为致敏载体B．可检测抗原C．可检测抗体D．诊断试剂为抗0型红细胞的单克隆抗体E．检测应为全血标本12．符合直接Coombs试验的是A．检测血清中游离的不完全抗体B．可用作定量分析C．可用于定性检测D．可用于新生儿溶血检测E．可用于自身免疫性溶血性贫血的检测13．符合间接Coombs试验的是A．检测红细胞膜上的不完全抗体B．出现凝集为阳性C．抗体致敏红细胞D．用于检测母体Rh抗体E．可检测因红细胞不相容性输血而产生的溶血14．抗球蛋白试验可用于A．配血试验B．抗D抗体检测C．诊断新生儿溶血性贫血疾病 D．检测伤寒0抗体E．检测立克次体抗原15．符合协同凝集试验的是A．致敏颗粒是金黄色葡萄球菌 B．连接物为SPAC．用于检测抗体．D．是一种反向间接凝集试验E．抗体为IgM类二、填空题1．凝集反应的类型分为( )和( )两种类型。
凝集反应
质偶联在红细胞上，常用的偶联剂有戊二醛、CrCL3
和双偶氮联苯胺。
临床免疫学及免疫检验
2.胶乳颗粒载体及致敏
聚苯乙烯胶乳颗粒是人工合成的载体，它是一种大小均
一，直径为0.8μm大小的圆形颗粒，带有负电荷，可用物 制备成带有化学活性基团的颗粒(如带有羧化聚苯乙烯胶 乳)，抗原或抗体能以共价键交联在胶乳表面(通过缩合剂 碳化二亚胺将胶乳颗粒表面的羧基与被交联物上的氨基
的反应。1945年Coombs等根据抗体球蛋白对异种动物亦 是抗原的原理，把产生“不完全抗体”的机体正常血清球 蛋白，注射到异种动物使之产生抗球蛋白，这种抗球蛋 白加入表面结合有不完全抗体的红细胞的复合物中，就
能出现可见的凝集现象，称抗球蛋白试验。因为此反应是
Coombs首先建立的，故又称Coombs试验。
(1) 取细菌或红细胞悬液1滴，在玻片上 和1滴诊断血清混匀。 (2) 置室温，数分钟后即可用肉眼或低 倍显微镜观察凝集结果，出现颗粒凝 集者为阳性。
临床免疫学及免疫检验
3．方法评价 本试验是一种特异性强、简
便、快速的定性试验方法。 4．临床意义 适用于大量普查，未知菌种 的鉴定或分型，或用标准血清作红细胞 ABO血型的鉴定。有时也可用于定量检测 前的筛选试验(如布氏菌、土拉弗氏菌等 抗原)，初步观察病人血清中有无相应的 抗体，然后再对阳性标本作试管凝集试验 测定其效价。
间接凝集试验又称被动凝集试验(passive agglutination test)。所用的与免疫无关颗 粒称为载体，将抗原(或抗体)吸附或偶联 于颗粒表面的过程称致敏。而吸附有已 知抗原或抗体的颗粒称致敏颗粒。
临床免疫学及免疫检验
一、间接凝集技术类型
根据致敏载体用的是抗原或抗体以及 凝集反应的方式，间接凝集反应可分为：
临床免疫学检验 课件 第5章 凝集反应
4.协同凝集试验 (coagglutination test )
载体 可溶性抗原
粒颗敏致
用特异性抗原致 敏载体，检测标 本中的相应抗体 的方法。
致敏
NS
待测抗体
结果判读：凝集，阳性(+)。 不凝集，阴性(-)。
粒颗集凝
粒颗集凝 粒颗敏致
载体
已知抗体
＋
致敏
用特异性抗体
致敏载体，检
NS
测标本中的相
? 结果判读： 已知Ab ＋ 未知Ag → 凝集，阳性 (+)。 不凝集，阴性 (-)。
? 方法评价： 特异性强; 简便、快速 ;敏感度低。 ? 应用：ABO 血型鉴定。
细菌的鉴别与分型 。
ABO血型的鉴定
1.已知抗体
抗A
抗B
2.未知抗原 (待检RBC)
3.结果：
凝集
不凝集
4.结论： 受检者血型为：A型
?致敏颗粒（sensitized particle) :吸附有已知抗 原或抗体的颗粒。
粒颗敏致
载体 可溶性抗原 致敏
NS
粒颗集凝
一、常用载体种类及其处理方法
?红细胞： 新鲜红细胞吸附蛋白质的能力差。一
般先醛化后应用。
?聚苯乙烯胶乳颗粒： 可物理吸附蛋白质；常制备带有化学
活性基团的颗粒。
?活性炭： ?SPA：
? 方法评价：
– 特异性易受影响； 敏感性不高。
? 应用：
– 多用以测定 抗体的含量 （效价、滴度 ）。 –肥达氏反应 、外斐氏反应 、交叉配血试验 。
0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 弃掉0.5
菌液 1
2 3 45 6 7
结 果
凝集反应的原理和应用
凝集反应的原理和应用一、凝集反应的原理凝集反应是指在溶液中，由于溶液中存在可溶性的物质，当这些物质遇到一定的凝结物或胶体粒子时，会发生凝集现象，形成一种沉降物。
凝集反应的发生是由于溶液中的物质与凝结物或胶体粒子表面的化学反应或物理过程导致的。
凝集反应的原理主要包括以下几个方面：1.电荷效应：溶液中的物质通常带有电离电荷，当这些物质接触到胶体粒子时，由于电离电荷的相互作用，会发生凝集反应。
2.凝聚效应：溶液中的物质在接触到胶体粒子时，由于各种吸附力的作用，会导致胶体粒子间的凝聚，从而形成凝集物。
3.密度差异效应：溶液中的物质在接触到胶体粒子时，由于其密度与胶体粒子的密度不同，会使溶液中的物质向胶体粒子聚集，从而促使凝集反应的发生。
4.溶解度效应：溶液中的物质在接触到胶体粒子时，由于胶体粒子表面的特殊环境，使得溶液中的物质的溶解度发生改变，从而导致凝集反应的发生。
二、凝集反应的应用凝集反应在许多领域都有广泛的应用，下面将介绍几个典型的应用。
1. 生物医学领域凝集反应在生物医学领域中被广泛应用于体外诊断。
例如，血型鉴定中的凝集反应是通过将待测血清与可能的抗体血清进行混合，观察是否发生凝集反应来判断患者的血型。
此外，在某些感染性疾病的诊断中，凝集反应也可以用于检测患者体内抗体的存在。
2. 环境与污染控制凝集反应在环境监测和污染控制中有重要应用。
例如，通过凝集反应可以测定水中悬浮颗粒物的浓度，从而判断水质的污染程度。
凝集反应还可以用于颗粒物的过滤和沉淀，达到去除污染物的目的。
3. 工业与制造业凝集反应在工业与制造业中也起到重要的作用。
例如，在乳化液中，通过凝集反应可以将乳化液中的微细颗粒聚集成大颗粒，从而实现乳化液的分离和回收。
此外，在某些纺织品的生产过程中，凝集反应也可以用于纤维的凝结和固定，提高纤维的质量和加工效率。
三、总结凝集反应是一种重要的化学反应，主要由电荷效应、凝聚效应、密度差异效应和溶解度效应等原理驱动。
免疫学检验-5-凝集反应
五、凝集反应的类型
• 直接凝集反应。 • 间接凝集反应。 • 其他凝集技术。
第二节 直接凝集反应
（direct agglutination t颗粒性抗原 + 相应抗体 → 肉眼可见凝集块
（细菌，RBC等）
NS
参与反应的抗原称为：凝集原（agglutinogen） ； 抗体称为：凝集素（agglutinin） 。
非特异性凝集可干扰结果的判断：若抗原与抗体并 不对应，但存在非特异性凝集－可导致假阳性结果。
凝集反应和沉淀反应的不同点
不同点
凝集反应
沉淀反应
抗原性质 颗粒性或可溶性抗 原致敏颗粒，呈颗 粒悬液
反应时间 几分钟至十几分钟
稀释对象 稀释抗体
观察现象 凝集块，液体变清
可溶性，大多呈 透明胶状溶液
数小时至数天 稀释抗原 沉淀物
二、发生机制
分两阶段进行。 特异性结合阶段
抗原与相应抗体发生特异性结合。 速度快，不可见。
可见反应阶段－出现肉眼可见特异性凝集。
抗原抗体复合物进一步交联聚集所致。 受到多种因素的影响。
二、发生机制
分两阶段进行。 特异性结合阶段
抗原与相应抗体发生特异性结合。 速度快，不可见。
可见反应阶段－出现肉眼可见特异性凝集。
环境因素：
电解质（生理盐水） 酸碱度：避免酸凝集。 温度：37℃。
抗原与抗体的适当比例
• 易出现抗体过量－前带抑制。
四、凝集反应的应用
抗原（ Ag）或抗体（ Ab ）的定性检测
– 未知Ag（或Ab）＋已知Ab（或Ag）→是否出现凝集 若出现凝集，则表明有相应Ag（或Ab）存在； 若不出现凝集，则表明无相应Ag（或Ab）存在。
• 方法评价：
医学免疫学：第五章(2) 凝集反应
第五章（2）凝集反应Chapter 15 Agglutination Test第一部分教学内容和要求一、目的要求·掌握：凝集反应的原理、类型及临床应用；熟悉：凝集反应的技术要点、实验影响因素、方法评价、间接凝集常用的载体；了解：凝集反应各阶段的特征。
二、教学内容1。
凝集反应的特点与类型。
2。
直接凝集反应：玻片凝集试验，试管凝集试验。
3。
间接凝集反应：间接凝集反应的类型，间接血凝试验，胶乳凝集试验，间接凝集试验的临床应用。
4．自身红细胞凝集试验。
5．抗球蛋白试验。
第二部分测试题一、选择题（一）单项选择题（A型题）1．直接抗球蛋白实验用于检测A．血清中结合的抗体B．血清中游离的不完全抗体C．红细胞表面结合的不完全抗体D．红细胞表面结合的完全抗体E．血清中游离的完全抗体2．玻片凝集实验A．只能检测抗原，不能检测抗体B．既能检测抗原，又能检测抗体C．只能检测抗体，不能检测抗原D．为半定量实验E．不能用于ABO血型鉴定3。
下列哪一项不属于玻片凝集试验A。
菌种鉴定 B。
血清学分型 C。
人类ABO血型鉴定D．定量检测前筛选试验 E。
血清抗体效价测定4.试管凝集试验的效价判断标准是依据出现肉眼可见的如下凝集现象A．“+”B．“+或++”C．“++”D．“+++”E．“++++”5．间接抗球蛋白实验用于检测A．血清中结合的抗体B．血清中游离的不完全抗体C．红细胞表面结合的不完全抗体D．红细胞表面结合的完全抗体E．血清中游离的完全抗体6．协同凝集试验所用的载体是A．新鲜红细胞B．洗涤红细胞C．醛化红细胞D．聚苯乙烯颗粒E．金黄色葡萄球菌7．自身红细胞凝集试验红细胞是A．标准新鲜红细胞B．标准洗涤红细胞C．标准醛化红细胞D．受检者未致敏红细胞E．受检者致敏红细胞（二）多项选择题（X型题）1．实验中,促进凝集现象的措施有A．低温离心 B．增加电解质或蛋白质 C．加入右旋糖酐或葡聚糖D．用胰酶处理 E．加入抗原2。
临床免疫学检验-第五章凝集反应和沉淀反应
Radial Immunodiffusion (RID)
Two methodologies of RID
Fahey method A linear relationship
exists between the log of the protein concentration and the diameter of the precipitin ring prior to equivalence (or completion)
FIGURE 6-5 Diagrammatic representation of radial & double immunodiffusion. : precipitation reactions in gels yield visible precipitin lines; no visible
Ability of a test to correctly identify individuals who HAVE a given disease/condition
How likely is the test to detect the presence of a characteristic in someone with the characteristic?
简单易行 特异性好 灵敏度低(10µg/ml) 时间长
免疫电泳技术
免疫电泳技术（immunoelectrophoresis technique）是可溶性抗原和抗体在直流电场 的作用下，在凝胶内加速定向运动，彼此相 遇结合，在比例合适处形成可见的沉淀物。
免疫电泳技术
凝集反应
凝集反应的定义
颗粒性抗原（如细胞、细菌）与相应抗体在 一定条件下（电解质、温度、酸碱度）出现肉 眼可见的凝集现象称为凝集反应。
凝集反应的特点
颗粒性抗原 致敏颗粒（可溶性抗原或抗体与载体颗
粒结合）
电解质的存在
肉眼可见的凝集现象
凝集反应的发生分两阶段：
①抗原抗体的特异结合
②出现可见的颗粒凝集
间接反应的常见类型
间接凝集试验
间接血凝试验 胶乳凝集试验 明胶凝集试验 间接凝集反应的应用
1、（正向）间接凝集试验
2、 反向间接凝集试验
间接凝集抑制反应
先使可溶性抗原与抗体作用一定时间后，再
加入致敏颗粒（吸附于与抗体相对应的可溶 性抗原的载体颗粒）。若可溶性抗原已与抗 体结合，则不出现凝集现象。用于妊娠早期 诊断的胶乳凝集抑制试验即为间接凝集抑制 反应在临床上的应用。
3、间接凝集抑制试验
协同凝集反应
金黄色葡萄球菌细胞壁成分中的A蛋白（SPA）
可非特异性的与IgG的Fc段结合，结合后的 IgG Fab段仍保持与相应抗原结合的能力。因 此，使金黄色葡萄球菌与IgG连接，再与相应 的抗原结合，在一定条件下可出现肉眼可见 的凝集反应，称为协同凝集反应。
协同凝集反应用途
可检测血液、脑脊液等组织液中存在的微量
可溶性抗原
常用与流脑、伤寒、布氏菌病等的早期诊断
协同凝集反应的优点
简便、快速，且敏感性强、特异性高。
谢谢观看~！！！
常用载体：
RBC
聚苯乙烯胶乳（polystyrene latex）
明胶颗粒
活性炭
皂土（bentonite）
《凝集反应》课件
抗原抗体反应具有特异性、可逆 性、比例性、阶段性等特点。
凝集反应的类型
直接凝集反应
间接凝集抑制反应
颗粒状抗原与相应抗体直接结合出现 的凝集现象。如玻片凝集试验、试管 凝集试验等。
在间接凝集反应的基础上，加入特异 性抗体，使原有的间接凝集现象受到 抑制。常用于测定激素、抗原等小分 子物质。
间接凝集反应
纳米技术
纳米技术与凝集反应的结合可以实现更精细的样本处理和检 测。纳米材料具有优异的物理化学性质，可以改善凝集反应 的条件和效果，为凝集反应的发展提供新的思路和方向。
THANKS
感谢您的观看
在最适pH值下，凝集反应的速 率和程度可能达到最大值。
pH值的改变可能影响分子的构 象和稳定性，从而影响凝集反 应的进行。
Part
04
凝集反应的实验操作与演示
实验前的准备
实验材料
试管、滴管、抗A血清、抗B血清、A型血、B型血、O型血等。
实验设备
显微镜、离心机、恒温水浴箱等。
实验试剂
生理盐水、洗涤液等。
细菌凝集试验可用于鉴定细菌种类、检测抗体水平以及诊断某些传染病 。
常见的细菌凝集试验包括伤寒沙门氏菌的肥达试验和副伤寒甲、乙的副 伤寒沙门氏菌的肥达试验等。
病毒凝集反应的实例
病毒凝集反应是指病毒颗粒与细胞表面 受体结合后，引起细胞聚集的现象。
病毒凝集反应可用于病毒的分离和鉴定 ，例如流感病毒的分离和鉴定。
准确性。
凝集反应的热力学
热力学研究反应的平衡常数、能 量变化和熵变等性质，对于理解 凝集反应的机理和性质非常重要
。
热力学参数如焓变、熵变和吉布 斯自由能变等可以描述反应的能
量变化和平衡状态。
【医学检验技术】重点笔记之凝集反应
【医学检验技术】重点笔记之凝集反应对医疗卫生事业单位考试医学检验学的部分知识做了汇总，今天我们来学习医学检验技术重点笔记-凝集反应，希望对大家的复习有所帮助。
1.概述(1)凝集反应：是指细菌、红细胞等颗粒抗原，或可溶性抗原(或抗体)与载体颗粒结合成致敏颗粒后，它们与相应抗体(或抗原)在适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集现象。
(2)特点：凝集试验是一个定性的检测方法，也可以进行半定量检测。
特点是灵敏度高、方法简便。
2.直接凝集反应：是指细菌、螺旋体和红细胞等颗粒性抗原，在适当的电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集。
①片法凝集：主要用于抗原的定性分析，短时间便能观察结果，一般用来鉴定菌种或分型;也用于人类ABO血型的测定。
②试管凝集反应：是用定量抗原悬液与一系列梯度倍比稀释的待检血清混合，保温静置后，根据每管内颗粒凝集的程度，以判断待检血清中有无相应抗体及其效价，可以用来协助临床诊断或流行病原调查研究。
3.间接凝集反应：是将可溶性抗原(或抗体)先吸附于适当大小的颗粒载体表面，然后与相应抗体(或抗原)作用，在适宜电解质存在的条件下，出现特异性凝集现象，称间接凝集反应。
又分为正向间接凝集反应、反向间接凝集反应、间接凝集抑制反应和协同凝集反应。
适用于各种抗体和可溶性抗原的检测。
(1)间接血凝试验：是将抗原抗体包被于红细胞表面对面，成为致敏载体，然后与相应的抗体结合，从而使红细胞被动地凝聚在一起，出现可见的凝集现象。
分为：①正向间接血凝反应(PHA);②反向间接血凝反应(RPHA);③正向(或反向)间接血凝抑制试验。
可用于检测抗体、自身抗体、变态反应性抗体，也可测定抗原。
(2)胶乳凝集试验：所用载体为聚苯乙烯胶乳，是一种直径约为0.8 m大小的圆形颗粒，带有负电荷，可物理性吸附蛋白分子，但这种结合牢固性差。
它分试管法和玻片法。
(3)明胶凝集试验：将全病毒抗原及重组抗原吸附在粉红色明胶颗粒上，来检测相应抗体。
免疫05 第五章 免疫凝集试验
本章小结
免疫凝集试验是指颗粒性抗原或覆盖了可溶性抗原（或 抗体）的致敏载体颗粒与相应抗体（或抗原）结合后，在适 宜的电解质条件下出现肉眼可见的凝集现象。包括直接免疫 凝集试验、间接免疫凝集试验等。
根据载体不同有多种试验类型，如协同免疫凝集试验、 间接免疫血凝试验、胶乳颗粒凝集试验、明胶颗粒凝集试验 、炭颗粒凝集试验、甲苯胺红颗粒凝集试验等。Coombs试验 也是临床常用的免疫凝集试验之一。
二、间接免疫凝集试验的临床应用
抗原的检测： 用于原体可溶性抗原的检测：如乙型肝炎病毒表面 抗原，细菌、腺病毒及流感病毒等的抗原鉴定和细菌可溶 性产物如外毒素等。 用于检测各种蛋白质成分：如尿液绒毛膜促性腺激素、纤 维蛋白原等血浆蛋白成分等。
间接免疫凝集试验的临床应用
抗体的检测： 用于检测细菌、病毒、螺旋体、寄生虫等感染后产生 的抗体：如抗人类免疫缺陷病毒抗体、抗溶血素O、梅毒螺 旋体抗体等。 用于检测自身免疫性疾病的抗体：如类风湿因子、抗 DNA抗体和抗甲状腺蛋白抗体等。 用于超敏反应患者的抗体测定：如青霉素抗体、某些 花粉抗体等。
（一）正向间接免疫凝集试验：测抗体
间接免疫凝集试验的类型
（二）反向间接免疫凝集试验：测抗原
间接免疫凝集试验的类型
（三）间接免疫凝集抑制试验：可测抗原，也可测抗体
间接免疫凝集试验的类型
（四）协同免疫凝集试验：测抗原，原理与反 向间接免疫凝集试验相似。
所用载体是细胞壁含有A蛋白（SPA）的金黄色 葡萄球菌，SPA具有与IgG（IgG3除外）的Fc段结合 的特性。
免疫凝集试验可作定性检测，也可进行半定量检测。 适当的室内质量控制措施可保证检测方法的有效性和检 测结果的可靠性。
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第五章凝集反应
凝集反应
第一节凝集反应的特点
第二节直接凝集反应
第三节间接凝集反应
第四节自身红细胞凝集试验
第五节抗球蛋白试验
[讲义编号NODE70103200050100000001：针对本讲义提问]
第一节凝集反应的特点
细菌、红细胞等颗粒抗原，或可溶性抗原（或抗体）与载体颗粒结合成致敏颗粒后，它们与相应抗体（或抗原）在适当电解集反应。
可以进行半定量检测，即将抗体作一系列稀释，与抗原结合产生凝集的最高稀释倍数作为其效价或滴度。
凝集试验是一个定性的检测方法，即根据凝集现象的出现与否判定结果阴性或阳性。
凝集反应分为两个阶段：①抗原抗体的特异性结合；②出现可见的颗粒凝聚。
[讲义编号NODE70103200050100000101：针对本讲义提问]
第二节直接凝集反应
直接凝集反应的原理是细菌、螺旋体和红细胞等颗粒性抗原，在适当的电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集。
参加凝集反应的抗原称凝集原，抗体则称为凝集素。
从方法上来讲，有玻片法和试管法两类。
（一）玻片凝集试验
主要用于抗原的定性分析，短时间便能观察结果，一般用来鉴定菌种或分型；也用于人类ABO血型的测定。
（二）试管凝集试验
用定量抗原悬液与一系列梯度倍比稀释的待检血清混合，保温静置后，根据每管内颗粒凝集的程度，以判断待检血清中有无流行病原调查研究。
例如肥达试验、外斐试验、输血时也常用于受体和供体两者间的交叉配血试验。
[讲义编号NODE70103200050100000102：针对本讲义提问]
第三节间接凝集反应
间接凝集反应是将可溶性抗原（或抗体）先吸附于适当大小的颗粒性载体表面，然后与相应抗体（或抗原）作用，在适宜电
一、间接凝集反应的类型
（一）正向间接凝集反应
红细胞包被抗原，用以检测抗体的血凝反应，称为正向间接血凝反应（PHA）。
（二）反向间接凝集反应
红细胞包被抗体，用以检测抗原的血凝反应，称为反向间接血凝反应（RPHA）。
[讲义编号NODE70103200050100000103：针对本讲义提问]
（三）间接凝集抑制反应
先将可溶性抗原（或抗体）与相应的抗体（或抗原）混合，然后再加入抗原（或抗体）致敏的红细胞，则能抑制原先的血凝间接血凝抑制试验可用于检测抗体、自身抗体、变态反应性抗体，也可测定抗原。
（四）协同凝集反应
协同凝集反应与间接凝集反应的原理相类似，但所用载体既非天然的红细胞，也非人工合成的聚合物颗粒，而是一种金黄色Fc段结合的特性，因此当这种葡萄球菌与IgG抗体连接时，就成为抗体致敏的颗粒载体。
如与相应抗原接触，即出现反向间接凝间接凝集反应适用于各种抗体和可溶性抗原的检测。
以载体来分，常用的为红细胞、胶乳颗粒及明胶颗粒等。
[讲义编号NODE70103200050100000104：针对本讲义提问]
二、间接血凝试验
间接血凝试验其原理是将抗原（或抗体）包被于红细胞表面，成为致敏载体，然后与相应的抗体（或抗原）结合，从而使红细（一）载体
红细胞是大小均一的载体颗粒，最常用的为绵羊、家兔、鸡的红细胞及O型人红细胞。
致敏的新鲜红细胞保存时间短，且易变脆、溶血和污染，只能使用2～3天。
为此一般在致敏前先将红细胞醛化，可长期保酮醛等。
红细胞经醛化后体积略有增大，两面突起呈圆盘状。
（二）致敏
致敏用的抗原或抗体要求纯度高，并保持良好的免疫活性。
用蛋白质致敏红细胞的方法有直接法和间接法。
[讲义编号NODE70103200050100000105：针对本讲义提问]
（三）血凝试验
血凝试验可在微量滴定板或试管中进行，将标本倍比稀释，一般为1:64，同时设不含标本的稀释液为对照孔。
凡红细胞沉积于孔底，集中呈一圆点的为不凝集（－）。
如红细胞凝集，则分布于孔底周围。
根据红细胞凝集的程度判断阳性反应的强弱，以＋＋凝集的孔为滴度终点。
[讲义编号NODE70103200050100000106：针对本讲义提问]
三、胶乳凝集试验
胶乳凝集试验也是一种间接凝集试验，所用载体为聚苯乙烯胶乳，是一种直径约为0.8μm大小的圆形颗粒，带有负电荷，可胶乳凝集试验分试管法和玻片法两种。
[讲义编号NODE70103200050100000107：针对本讲义提问]
四、明胶凝集试验
明胶凝集试验也是一种间接凝集试验，将病毒抗原或重组抗原吸附于粉红色明胶颗粒上，当致敏颗粒与样品血清作用时，若色凝集。
该方法具有高灵敏度、简便、快速等优点，广泛应用于HIV-1抗体和抗精子抗体检测等。
[讲义编号NODE70103200050100000108：针对本讲义提问]
五、间接凝集反应的应用
（一）抗原的检测
反向间接凝集试验用于检测病原体可溶性抗原，也可用于检测各种蛋白质成分。
（二）抗体的检测
可用于检测细菌、病毒和寄生虫等感染后产生的抗体，例如间接凝集试验或明胶颗粒凝集试验用于检测抗人类免疫缺陷病毒于检测抗溶血素O等。
[讲义编号NODE70103200050100000109：针对本讲义提问]
第四节自身红细胞凝集试验
其基本原理是抗人Ｏ型红细胞的单克隆抗体能与任何种血型的红细胞结合，但不引起凝集反应，这种抗体与另一特异性抗体原；如与特异性抗原连接，则可用于检测标本中的抗体。
[讲义编号NODE70103200050100000110：针对本讲义提问]
第五节抗球蛋白试验
抗球蛋白试验，又称Coombs试验，是检测抗红细胞不完全抗体的一种很有用的方法。
包括直接Coombs试验和间接Coombs 在血清中的不完全抗体。
Coombs试验除广泛应用于血液病的检测外，如自身免疫性溶血性贫血、药物诱导的溶血、新生儿溶血症等，还可采用专一特或抗IgM以及抗补体血清等，分析结合于红细胞上的不完全抗体的免疫球蛋白亚类。
[讲义编号NODE70103200050100000111：针对本讲义提问]。