注射用香菇多糖类药物的研究

注射用香菇多糖类药物的研究
摘要：当今社会，治疗恶性肿瘤的辅助治疗类的药物不计其数，而天地欣（注射用香菇多糖）作为新型生物反应调节剂，因其是国内唯一可供静脉注射，并且各种各期肿瘤患者都可以使用（即适用性广），疗效显著，未发生任何明显毒副反应[1]等优点，成为肿瘤患者的优先选择。

本文将从香菇多糖的药理，药效，工艺合成及优化等方面，对香菇多糖类药品进行研究，并且对其市场前景和发展方向做出了相应的预测和建议。

关键词：香菇多糖药理药效提取优化市场发展
Abstract:Nowadays, Lentimanfor Injection is becoming more and more popular with its adventages.It Is the only medicine which can be used for intravenous injection and patients with various stages of tumor can be used . Because of this, it has become the preferred choice of tumor patients. This paper will let you know more about the Lentinan.
key words:LNT Pharmacy theory Extraction Optimization
1.简单介绍
天地欣是由南京绿叶思科公司生产的一种生物反应调节剂，其主要成分是从香菇的子实体中分离出来的一种葡聚糖 ,又称香菇糖、能难治、瘤能停、LC2 33。

香菇糖是上世纪 60年代首先由日本学者千原吴郎从香菇子实体中经热水提取,分离纯化的一种具有抗肿瘤活性的葡聚糖 , 70年代应用于临床[2]。

香菇多糖具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫和刺激干扰素形成等药理学活性的特点，经全国近五百家大、中型医院九年临床应用，疗效显著，未发生任何明显毒副反应，因此被广泛使用。

2.香菇多糖的药理及药效。

香菇(Lentinusedodes)属担子菌纲侧耳科(Pleurotaeeae)真菌,是世界著名食用兼药用菌之一。

它含有多种有效的药用成分,尤其是含有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能的香菇多糖(Lentinan简称LNT)而引起人们广泛的重视。

香菇多糖是从香菇的子实体中分离得到的具β -1,6支链和β-1,3支链的β-1,3葡聚糖,相对分子质量在40～80万之间。

LNT是一种良好的免疫增强剂,在中国已被广泛应用于治疗多种肿瘤。

其结构式为：
大量临床前体内外实验证明,香菇多糖无直接细胞毒作用, 其主要作用是调节宿主免疫机制,激活各种免疫细胞成熟，分化和增殖，使免疫状态由低下恢复到接近于正常能力，使肿瘤细胞受抑制,进而发挥其抗肿瘤活性[4]。

但在体内可通过刺激与分化机制激活巨噬细胞、T细胞和NK细胞的诱导和增强作用[3]，提高淋巴细胞转化率，促进抗体形成，从而提高免疫机制[5],与抗癌药物协同增强抗癌效果,产生抗癌作用。

具体细化，香菇多糖的机理从机制的本体来讲，分间接抑制和间接免疫调节两大药效。

2.1直接抑制
香菇多糖能够改变肿瘤细胞膜的某些成分,从而改变细胞膜的生化特性,影响细胞的新
陈代谢，抑制细胞的增殖，发挥它的细胞毒效应。

另外，它还可以直接破坏肿瘤细胞的结构,使细胞合成RNA受阻,代谢出现障碍，细胞发生退行性改变，最终导致细胞死亡。

此外，结构的破坏还可造成DNA分子损伤，DNA复制和转录功能出现障碍，也导致细胞的死亡。

2.2间接免疫调节作用
2．2.1细胞免疫机制：香菇多糖能激活巨噬细胞，增强巨噬细胞吞噬作用，并增加中性白细胞对肿瘤节的浸润，促使宿主因癌症及感染而引起的体内平衡失调的恢复。

活化后的巨噬细胞分泌近百种生物活性物质，其中许多与免疫应答及炎症有关。

NO由巨噬细胞分泌，能抑制和破坏肿瘤细胞，发挥细胞毒作用。

2.2.2体液免疫机制：香菇多糖对体液免疫有一定的促进作用。

它能提高淋巴细胞的转化率,升高白细胞数量，促进免疫球蛋白的形成。

该多糖可激活能分泌多种抗体的体液免疫细胞--B细胞。

激活的巨噬细胞与 B、T细胞，相互活化，从而使整个机体免疫系统共同协作来抑制肿瘤细胞增殖和破坏肿瘤细胞[6]。

3.工艺合成
3.1目前的香菇多糖多从子实体中提取[7]，提取的办法主要有：1、热水浸提法(通过热水，使香菇组织细胞膨胀破裂。

影响多糖得率的主要因素为多糖成分浸出浸提时的料液比、温度、时间、ｐＨ、醇析时的乙醇添加倍数及提取次数。

)；2、稀酸（碱）浸提法（其中，酸（碱）溶液的浓度，作用时间等是影响多糖得率主要因素。

）；3、酶解法（指在浸提的过程中加入相应的酶来水解纤维素、果胶，蛋白质分子等，以使多糖从细胞中分离出来）；4、微波法提取香菇多糖（微波射线辐射于溶剂并透过细胞壁内部时，细胞内部温度升高压力增大，当压力超过细胞的承受能力时，细胞壁破裂，位于细胞内部的多糖就从细胞中释放出来[8]，曾智平等[9]发现微波法的提取率高于传统热水法，并且缩短提取时间和减少能耗。

）；5、超声波提取法（利用超声波产生的空化作用及其机械振动，乳化，击碎效应来进行提取。

）如果单单只靠实体提取，香菇子实体生产周期长,产量及多糖提取率均较低，对生产来说，是不太有利的[10]。

3.2除了单纯从本体得到香菇多糖外，可以采用深层发酵技术培养香菇菌丝体[11]。

这种方法使得香菇多糖得以增生，不仅发酵液中含有与子实体相同且含量更高的营养成分，且可利用农副产品作原料，成本低，周期短，易于大规模生产，已得到广泛重视及应用。

在以上各种方法中，香菇多糖的不同温度提取因为其影响提取率的因素较多，所以，一般不采用不同温度的水或稀碱溶液提取。

而稀酸碱提取，酶解法，微波提取法，超声波提取法等方法，相对于传统方法更加省时、高效、成本低。

3.3关于纯化
香菇多糖的纯化常用的纯化方法有:沉淀法、柱层析法、制备性高效液相法、制备性区域电泳法、超滤法等。

目前多采用各种不同的凝胶层析柱色谱和离子交换柱色谱[12]法来进行纯化。

4.工艺的优化
4.1采用磷酸化香菇多糖提取，其最佳的工艺条件为8%磷酸化试剂(5%兰聚磷酸苦内和2%三偏磷酸铀的泪合试剂), pH 8.0。

在该工艺条件下，除去空白对照的磷酸根含和粘度，香菇多糖经磷酸化分子修饰后，磷根接枝量达到了7.77%，此时多糖分子几乎没有被降解[13]。

4.2如果条件限制，香菇多糖的提取采用热水抽提法,那么分离可选择采用革取法。

其最佳的条件为:PH~7.0、95℃左右,浸提3.5小时,原料:水(V:V)为1:20，醇析浓度为70%乙醇，香菇多糖分离(除去蛋白质)采用萃取法:样品一氯仿+正丁醇(V:V)为1:1;氯仿一正丁醇(V:V)为4:1,萃取时间30分钟。

4.3同时，也可以采取方积年[15]的方法，采用1mg香菇多糖,40mg甘露醇及约9mg柠檬酸钠的配方的方法。

该方法较目前报道的方法成本低，安全性高，适于工业生产用。

但是选择
该制法后，冻干粉赋形欠佳(即瓶中冻干粉表面不饱满)，对药品的外观有一定影响。

4.4如果选用超声波的方法来进行提纯，多采用正交试验法对香菇糖的提取工艺进行研究，最佳工艺为用1～2ｍｍ粒度药材，95%乙醇醇沉，超声80 min[16]。

4.5对于企业提取香菇多糖，首先看中的是收率的提高，从而增加经济效益；除此之外，设备简化，操作方便。

除了以上改变传统工艺之外，也可以从原材料入手，从经济价值上考虑，可以选择板菇来补充香菇进行提取。

5.关于香菇多糖使用的现状
上面机理部分，可以知道，香菇多糖抗肿瘤的作用并非直接作用于伤害肿瘤细胞，而是通过调节免疫状态从而达到目的，因此配合其他药物使用会使效果更好。

从林清等[17]岩舒注射液与LNT合用治疗晚期消化道癌的临床疗效的实验，刘俊莉[18]察LNT联合化疗综合治疗晚期胃癌的疗效和毒性的实验等一列实验，得到联合用药组有效率及生存质量高于对照组的结论，并且，常见的药物不良反应发生率较化疗组明显降低。

LNT的抗肿瘤作用与剂量有关[19]，但是也要注意不能过度使用。

陈建辉等[20]、王海燕等[21]的实验结果表明使用LNT静脉注射十多分钟后有的患者出现胸闷、呼吸困难、出冷汗、血压下降、发热、头痛、头晕等不良反应，有的患者出现变态反应和骨骼肌肉系统损害。

因此,临床医师，药师应了解香菇多糖注射剂所致的ADR/ADE的规律及特点，加强其应用的检测，以减少ADR/ADE的发生。

6.市场前景
LNT作为辅助药物能增强肿瘤患者免疫力，遏制肿瘤的发展，提高患者的生存质量，而且在参与治疗胃癌、大肠癌、结直肠癌、肝癌、肺癌等肿瘤及恶性血液病方面效果明显，有效率高，毒副作用小。

在者香菇多糖冻干粉针剂是香菇中分离出来的一种具有明显抗癌效果的活性物质，利用生物细胞工程最新技术其含量和纯度都达到了一定水平。

目前的香菇多糖培养发酵技术已达到生产规模，技术成熟，产出率高，分离提纯工艺过程短，成本低，可节约能源和大量有机溶媒，综上因此具有开发前景[22]。

虽然有些患者产生过敏现象，但均不影响治疗。

7.发展方向
7.1疗药物及患者个体是否有关多糖的结构包括一级、二级、三级和四级结构，研究证实，多糖的活性直接或间接地受其分子结构的影响，我们可以采取一定的方法对多糖分子结构进行修饰，可以提高或赋予多糖活性，降低其毒副作用[23]。

7.2另外,到目前为止,仍未见有人工合成LNT的报道，我们可以从人工合成LNT方向着手,人工合成LNT，那就可以任意改变其结构，拓展其功效领域。

如果真是这样，毫无疑问，LNT在临床上将会有进一步的推广价值。

7.3我们可以拓宽多糖在保健食品领域的应用。

香菇多糖是一种特殊的生物活性物质，是一种生物反应增强剂和调节剂，它能增强体液免疫和细胞免疫功能。

香菇多糖可提高感染细胞免疫力，增强细胞膜的稳定性，抑制细胞病变，促进细胞修复等功能。

同时，香菇多糖还具有抗逆转录病毒活性。

因此，香菇多糖是一种有待开发的抗流感的保健食品[15]。

8.结束语
随着时代的进步，天地欣（注射用香菇多糖）在其领域必将还会有更多更好的的发展。

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