植物全氮的检测测定

植株全氮的测定

（H2SO4—H2O2消煮，凯氏定氮法）

一、方法原理

植物样品在浓H2SO4溶液中，历经脱水碳化、氧化等一系列作用，而氧化剂H2O2在热浓H2SO4溶液中分解出的新生态氧具有强烈的氧化作用，分解H2SO4破坏的有机物和碳。使有机氮、磷等转化为无机铵盐和磷酸盐等，因此可以在同一消煮液中分别测定N、P、K 等元素。

二、主要仪器

消煮管；控温消煮炉；凯氏定氮仪；

三、试剂

（1）浓H2SO4（分析纯）；（2）30% H2O2（分析纯）；

（2）甲基红—溴甲酚绿混合指示剂。称取甲基红0.42g，溴甲酚绿0.84g，共同放入玛瑙研钵中，然后加入95%的乙醇边研磨边用滴定管吸取上清液转移至250ml容量瓶中，研磨完毕后用95%的乙醇润洗研钵将溶液转移至容量瓶中，最后用95%的乙醇定容、摇匀。将混合指示剂置于冰箱中长期冷藏储存。

（3）配制2%的硼酸溶液。用250ml体积烧杯称取硼酸（分析纯）40g，用2L体积容量瓶量取2升蒸馏水，将硼酸倒入2L的烧杯，用量好的蒸馏水将称硼酸的烧杯刷洗几遍，洗液倒入2L烧杯中，然后将剩余的蒸馏水全部倒入2L烧杯中，打开电炉，将2L烧杯放于电炉上加热，同时用玻璃棒搅拌，待硼酸全部溶解后取下烧杯，关闭电炉。

往烧杯加入甲基红—溴甲酚绿混合指示20ml，混合均匀，倒入硼酸桶里。

（4）35%的氢氧化钠。称取700g的氢氧化钠（分析纯）加水1300ml。具体操作如下：称取氢氧化钠200g加上一整瓶即为700g,取2000毫升烧杯于通风橱将全部700g氢氧化钠倒入烧杯，打开通风橱，用量筒量取1300毫升水倒入烧杯中，边倒边搅拌，全部溶解待冷却后备用。当然根据情况也可以配置2600毫升。

（5）0.01mol/L(1/2H2SO4)标准溶液。量取硫酸0.7ml，加水稀释至2500ml，然后用标准碱或硼砂标定。

四、操作步骤

（1）称烘干磨细的植株样品（过0.25～0.5mm筛）0.3000g（精确至0.0001），置于消煮管中，先用滴管滴加4滴蒸馏水湿润样品，让后加入浓H2SO4 5ml，轻轻摇匀，盖上小漏斗。（最好先放置过夜）。

（2）将消煮管置于控温消煮炉上，先低温缓缓加热，待浓硫酸分解冒白烟后逐渐升高温度。当溶液全部呈均匀的棕黑色呈油状时，从消煮炉上取下消煮管，稍冷，逐滴加入30%H2O28滴，并不断摇动消煮管，已利反应充分进行。

（3）重新置于消煮炉上继续消煮10min，再次取下稍冷后再滴加30%H2O2 6滴，继续消煮10min后，第三次取下稍冷后再滴加30%H2O2 4滴，继续消煮。当消煮液呈无色或清亮色后，再加热10min钟，以除尽过剩的双氧水。

（4）取下消煮管冷却，用蒸馏水先冲洗漏斗，然后将消煮液洗入100mL容量瓶中，定容，摇匀。

（5）使用定量滤纸将洗液干过滤至100ml三角瓶中。此滤液可用来测定全N、P、K。

（6）做空白实验，除未称量样品外其他操作完全一致。

（6）打开冷凝水开关，打开机器开关，按参数按钮至显示A的时候将数值调到3S，其他不变，按到显示自动测定为止。先放入一个空的消煮管进行空蒸，当空蒸值在0.6以下时再进行样品测定。（随时检查蒸馏水量，碱量，指示剂量及标准酸量）

吸取10mL滤液置于蒸馏管中（N含量高时吸5ml），在凯氏定氮仪上蒸馏、滴定。记录H2SO4滴定体积V1，记录下空白实验的H2SO4滴定体积V0。

五、结果计算

植株中全（N，g/kg）=（V1- V0）×c×14×100/（10×m）V1：样品测定所消耗标准酸体积（ml）；V0：空白实验所消耗标准酸体积（ml）；

C：标准酸的当量浓度（mol/L）；14：氮原子的摩尔质量（g/mol）；

100：第一次定容体积（mL）；10：吸取体积（mL）；m：植株样品质量（g）；

六、注意事项

（1）消煮时，双氧水应直接滴入消煮管底部，若滴在管壁上，双氧水会很快分解，失去氧化效果。

（2）消煮液中残余的双氧水需要继续加热分解除去，否则会影响P的比色测定。

（3）冷却后温度，以滴加双氧水时听到嗞嗞的声音为最适宜。温度太高容易造成双氧水过快被氧化分解，温度太低氧化效果不是很好。