植物细胞工程要点内容

植物细胞工程重点，老师上课时指点的。

题型为：名词解释，填空，单选，判断，简答。

0.绪论

1细胞工程（cell engineering）：应用细胞生物学和分子生物学方法，借助工程学的试验方法或技术，在细胞水平上改造生物遗传特性和生物学特性，已获得特定的细胞、细胞产品或新生物体的有关理论和技术方法的学科。

细胞工程的核心技术：细胞培养与繁殖。

目的：获得新形状，新个体，新物质。

2为什么细胞工程是现代生物技术的桥梁和纽扣？

细胞工程把蛋白质工程，基因工程，生物制药等学科和代谢工程，动植物改良，组织工程等学科联系在一起。

3细胞工程研究范畴：

细胞工程研究范畴涉及细胞，组织，器官，胚胎的培养，细胞融合和亚细胞操作技术。4细胞工程与相关学科的关系

（1）细胞工程的建立依赖于相关学科理论的发展；

（2）细胞工程为生物学研究提供了新的实验体系，从而又促进了生物科学的迅速发展；（3）细胞工程必须与其他的生物技术相结合才能更好的发挥作用。

5细胞工程的应用和意义：

（1）改善农业生产技术：动植物品种改良与繁殖；

（2）保护生态环境：生物工业避免化学工业污染；名贵药物的细胞生产保护自然资源；（3）生物医药、生物材料的开发与应用：以生物技术为依托的新型产业具有极大的商业潜力，也是本世纪各国几句竞争的领域之一。

6本章小结

现代生物技术是一个综合技术体系；

细胞工程在现代生物技术中起着桥梁和纽带作用；

细胞工程的产生和发展依赖于生物科学相关领域的理论和技术发展；

细胞工程技术在现代农业、医学以及工业生产中具有广泛的应用前景。

1.第一章

1基本实验室包括：准备室，无菌室，培养室。

2灭菌

（1）接种室灭菌：紫外灯照射(无菌室、超净台)；熏蒸灭菌(无菌室)；喷雾消毒(超净台;

无菌室)。

（2）接种工具、容器的灭菌：干热灭菌或湿热灭菌。在无菌操作时，把镊子、剪刀、解剖刀等浸入95%的酒精中，使用之前取出在酒精灯火焰上灼烧灭菌。冷却后，立即使用。（3）培养基：一般用高温蒸汽灭菌。

（4）不耐热类物质的灭菌。过滤除菌：某些激素（如天然生长素IAA、玉米素ZT、赤霉素GA等）、维生素、抗生素等不耐热或射线照射的物质。

3培养基基本成分：水，无机盐（大量元素和微量元素）；有机成分，激素和其他。

培养基其他成分：琼脂糖，活性炭，附加复合成分（碳水化合物，维生素，肌醇，天然复合物）。（注：加粗字体部分的答案不确定是否如此）

4常用的植物激素：生长素（Auxins）；细胞分裂素（Cytokinins）；赤霉素(GA)。

生长素/细胞分裂素。高：有利于根的形成和愈伤组织的形成；适中：有利于根芽的分化；低：有利于芽的形成

5常用培养基：MS培养基，White培养基，B5培养基，N6培养基。其中，N6培养基是中国人朱至靑发明的培养基。

6植物离体培养类型：组织培养，器官培养，细胞培养。

7外植体取材原则。

根据培养需求选择植物部位；

多年生植物注意树龄和季节；

在不影响培养目的的前提下尽可能选择自然繁殖器官作为外植体。

8外植体灭菌：外植体-清洗整理-杀菌剂灭菌-无菌水清洗。

外植体无菌处理：组织清洗-70%酒精浸10～30s-灭菌剂处理-无菌水涮洗。（此步骤应在超净台上完成）

（住：这两个知识点好像说的是同一个意思，大家自己看着办）

9本章小结。

细胞工程的核心是无菌操作和培养；

实验室建立在满足技术要求的同时要经济高效和实用；

设备配置应根据工作性质而定；

培养基是细胞生长的必需营养，根据细胞类型确定适宜配方；

适宜的外植体是培养的前提，光照、温度是植物离体培养的基本条件。

2.第二章

1细胞全能性：一个细胞所具有的产生完整生物个体的固有能力称之为细胞的全能性。

脱分化：培养条件下使已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程。

再分化：离体条件下，脱分化后具有分生能力的细胞，再经过细胞分化，重新形成各类组织和器官、形成新个体的过程。

愈伤组织：由外植体组织增生的细胞产生的一团不定型的疏散排列的薄壁细胞。

2离体培养条件下，细胞全能性的表达是通过细胞脱分化和再分化实现的。

3细胞的脱分化分为3个阶段：

启动阶段：液体蛋白体出现是脱分化的标志；

演变阶段：细胞核向中央移动，质体演变成原生质体；

终结阶段：细胞回复到分生细胞状态，细胞分裂即将开始。

4细胞脱分化调控的实质就是G0期细胞回复到分裂周期的调控过程。

5器官发生方式：先芽后根，先根后芽，芽根同时。

6器官发生过程。

经过愈伤组织的器官发生：愈伤组织的形成；生长中心的形成；器官原基及器官形成。

不经过愈伤组织的器官发生：细胞第一次平周分裂；生长中心形成；原初分生组织；芽

原基形成。

7本章小结。

细胞全能性是细胞工程的基本理论基础；

细胞全能性的表达能力与细胞分化程度有关；

离体培养下细胞全能性表达是通过细胞分化和再分化实现的；

器官发生和体细胞胚胎发生是植物细胞再生个体的基本途径；

植物细胞离体再生能力是受遗传调控和培养条件的双重调节。

3.第三章

1细胞工程技术的双重性：遗传稳定性，变异性。

2本章小结

细胞工程技术对培养细胞具有遗传稳定性和变异性的双重影响

体细胞变异在培养类型中具有普遍性，在变异形状上具有局限性