常用实验试剂配制
生物实验室常用试剂的配制
3.鉴定蛋白质用的双缩脲试剂 分别配制10%氢氧化钠溶液和 1%硫酸铜溶液,待用。在3毫升待测液中加入1mL10%氢氧化 钠溶液和1滴1%硫酸铜溶液。如果有蛋白质,会出现紫色反应。
4.鉴定脂肪的试剂 苏丹IV溶液的配制:取0.2g苏丹IV,放入 无水乙醇中,加热,使它充分溶解,成为饱和乙醇溶液。过滤 后倒迸试剂瓶内密闭保存备用。苏丹Ⅲ溶液的配制:0.1g苏丹 Ⅲ粉末加入95%乙醇100mL待全部溶解后便可使用。
(2)硼酸-生理盐水溶液 在0.75%生埋盐水中加入硼酸,使成 为饱和溶液。可用来分离脊髓灰质或脑灰质部位的神经组织。
3.用于分离神经纤维的试剂 硝酸银溶液:取0.5G硝酸银,溶 解在100mL水中即成。
4.用于分离植物根尖细胞的试剂
(1)盐酸乙醇溶液 在1份95%乙醇中徐徐加入1份浓盐酸,即 成盐酸乙醇溶液。密闭保存。
生物实验室常用试剂的配制
一、检验酸碱性的试剂
1.酚酞试液 取0.1酚酞,溶解在100mL60~90%的乙醇溶液里, 装在试剂瓶内密闭保存。酚酞试液在碱性溶液中呈红色。
2.麝香草酚酞(百里酚酞)试液 把0.1g白色的麝香草酚酞溶解在 100mL90%乙醇里制得。当pH值由9.4~10.6时,颜色为无色至 蓝色。
1.甲醛也叫福尔马林液(Fomalin),固定材料常用5%甲醛溶 液,保存生物标本常用4一5%的,消毒常用3%的。市售的是 40%甲醛溶液,加7、9、12倍水分别稀释成5%、4%、3%甲醛
常用试剂配制方法
常用试剂配制方法试剂是科学实验和研究中不可或缺的工具,常用的试剂包括溶液、稀释液、缓冲液、媒体液等。
在实验室中,通常需要根据具体的实验要求来配制各种试剂,合理的试剂配制方法能够确保试剂的质量和稳定性,保证实验结果的准确性和可重复性。
接下来将介绍一些常用试剂的配制方法。
1. 溶液的配制方法溶液是实验室中最常用的试剂之一,常见的溶液包括盐酸溶液、硫酸溶液、碳酸溶液、氢氧化钠溶液等。
溶液的配制主要是根据溶质的重量或体积浓度和所需的溶液体积来计算所需的溶质量或体积,并将溶质溶解在适量的水中。
以盐酸为例,盐酸的浓度通常以摩尔浓度(M)或质量浓度(%)来表示,假设需要制备500ml 1M的盐酸溶液,则按照下面的步骤进行:- 根据盐酸的摩尔质量和摩尔浓度计算出所需的盐酸质量。
- 取适量的去离子水,加入容器中。
- 缓慢地加入计算好的盐酸质量,并充分溶解。
- 加入适量的去离子水至最终体积为500ml。
2. 稀释液的配制方法稀释液通常用于稀释浓度较高的溶液,以得到所需的浓度。
稀释液的浓度计算方法非常简单,只需要使用C1V1=C2V2的公式即可,其中C1为原液的浓度,V1为原液的体积,C2为稀释液的浓度,V2为稀释液的体积。
以盐酸溶液为例,如果需要从浓度为6M的盐酸溶液稀释出100ml 1M的盐酸溶液,则按照下面的步骤进行:- 根据C1V1=C2V2的公式,计算出需要的盐酸的体积。
- 取适量的去离子水,加入容器中。
- 缓慢地加入计算好的盐酸体积,并充分溶解。
- 加入适量的去离子水至最终体积为100ml。
3. 缓冲液的配制方法缓冲液是用来维持溶液的pH稳定性的溶液,常用的缓冲液包括Tris缓冲液、磷酸缓冲液、乙酸缓冲液等。
缓冲液的配制需要根据所需的pH值来选择相应的缓冲剂和其酸性或碱性分量,并按照一定的比例混合制备。
以Tris缓冲液为例,Tris缓冲液的pH值通常在7-9之间,如果需要制备1L pH 7.4的Tris缓冲液,则按照下面的步骤进行:- 根据Tris缓冲液的pKa值和所需的pH值计算出所需要的Tris和酸性成分的摩尔比。
常用试剂配制方法
1、裴林甲液:配制:称取五水合硫酸铜69.278g 加蒸馏水稀释到1000ml ,摇匀,即得。
标定:吸取甲液5.0ml 于250ml 碘量瓶中,加30%醋酸溶液2ml 和1.5g 碘化钾固体,充分混匀并溶解后,加盖避光放置5分钟,用装有蒸馏水的洗瓶将塞子和瓶内壁冲洗干净,之后,先用0.1mol/L 硫代硫酸钠标准溶液滴定至溶液呈淡黄色,加2ml0.5%淀粉指示剂,继续滴定至兰色消失出现乳白色沉淀即为终点,同时用5ml 蒸馏水做空白,裴林甲液的比值F 按下式计算:01748.05006357.0V ⨯⨯-=)(空白样品V F 0.5%淀粉指示剂配制:称取0.5000g 淀粉,放入烧杯中,先调成糊状,加入到热的沸水中,并沸腾几分钟,至溶液呈现透明,冷却至室温。
30%醋酸溶液:30ml 冰乙酸用蒸馏水稀释并定容至100ml 。
2、水中总磷的测定:钼酸铵溶液:称量6.0g 分析纯钼酸铵溶于500ml 水中,加入0.2g 酒石酸锑钾和83ml 分析纯浓硫酸,冷却后,稀释至1L 。
充分混匀后,存于棕色试剂瓶中,贮存期6个月。
硫酸溶液(C=0.5mol/L ):取30ml 分析纯浓硫酸缓缓加入适量蒸馏水中,冷却至室温,加蒸馏水稀释至1000ml ,摇匀。
24g/L 过硫酸铵溶液:称取24.0g 过硫酸铵固体,用蒸馏水溶解并稀释定容至1000ml ,充分混匀即可。
17.6g/L 抗坏血酸溶液:称取17.6g 抗坏血酸溶于适量蒸馏水中,加0.2g 乙二胺四乙酸二钠和8ml 甲酸,充分溶解和混匀后,用蒸馏水稀释并定容至1L ,混匀。
贮存于棕色瓶中,有效期为15天。
3、NaOH 标液(0.5mol/L ,0.1mol/L )配制:称取20.00g(4.00g)分析纯氢氧化钠固体,用蒸馏水溶解,并稀释定容至1000ml,混匀放置。
标定:取在105℃下烘干至恒重的邻苯二甲酸氢钾2g(0.4g),精密称定,加新沸过的冷水50ml,完全溶解,加2滴酚酞指示剂,用配好的该0.5mol/L(或0.1mol/L)NaOH标准溶液滴定至溶液显粉红色,其中每1ml的NaOH标液相当于102.1mg(或20.42mg)的邻苯二甲酸氢钾。
20几种常用试剂配置方法
20几种常用试剂配置方法一、常用试剂配置方法的介绍试剂配置是实验室中常见的一项工作,准确的试剂配置可以保证实验的准确性和可重复性。
本文将介绍20几种常用的试剂配置方法,帮助实验人员更好地进行实验。
二、体积分配法体积分配法是常见的试剂配置方法之一,通常使用量较小、浓度较高的试剂进行配置。
该方法可通过使用体积移液器、移液枪等实验设备,根据需要配置所需体积的试剂溶液。
三、质量分配法质量分配法适用于需要配置具有特定质量浓度的试剂溶液。
该方法通过称量固体试剂,并按照比例配制溶液浓度。
四、摩尔浓度计算法摩尔浓度计算法是根据化学反应的摩尔比例来计算试剂的浓度。
通过计算反应物的摩尔量和体积,然后以摩尔量除以体积得到摩尔浓度。
五、比例混合法比例混合法适用于需要按照特定比例混合两种试剂的情况。
通常将两种试剂按照比例称量,然后进行混合。
六、稀释法稀释法是指将浓度较高的试剂与溶剂按照一定比例混合来降低试剂的浓度。
通过稀释法可以得到不同浓度的试剂溶液。
七、溶液配制法溶液配制法是根据溶液的浓度公式,按照一定的配比计算所需试剂的质量、体积等,并通过称量和混合来配制出所需的试剂溶液。
八、体积比配制法体积比配制法是指按照特定的体积比例计算所需的试剂体积,并进行混合配制。
该方法常用于需要配制特定体积比例的溶液。
九、对数浓度计算法对数浓度计算法是一种根据试剂的对数浓度来计算所需试剂量的方法。
通过计算对数浓度和体积,然后反推得到所需试剂量。
十、酸碱溶液的配制方法酸碱溶液的配制方法通常是指根据酸碱中和反应的化学方程式,计算所需溶液的质量、体积,并进行配制。
十一、标准溶液配制方法标准溶液配制方法是指通过称量准确的标准溶液,并按照一定比例配制出所需的标准溶液。
十二、离子稀释法离子稀释法是通过稀释一定体积的离子试剂溶液来得到特定浓度的离子溶液。
十三、等效物浓度计算法等效物浓度计算法是根据试剂反应的化学方程和摩尔比例,计算所需试剂的质量或体积,并进行配制。
实验室常用试剂和缓冲液配方
实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液配方有很多种,下面将介绍一些常用的试剂和缓冲液的配方:一、试剂的配方1. Tris缓冲液:- 3 M Tris-Cl,pH 7.4(准备方法:将121.1 g Tris粉末溶解在800 mL去离子水中,使用HCl调节pH值至7.4,并将溶液体积加至1 L)2.NaCl溶液:-5MNaCl(准备方法:将287.7gNaCl溶解在800mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)3.验血试剂:-4%NaOH溶液(准备方法:将40gNaOH溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)-5%CuSO4溶液(准备方法:将50gCuSO4溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)-2%K4[Fe(CN)6]溶液(准备方法:将20gK4[Fe(CN)6]溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)4.PBS缓冲液(磷酸盐缓冲液):-10×PBS缓冲液(准备方法:将80gNaCl,2gKCl,11.5gNa2HPO4,2gKH2PO4溶解在800mL去离子水中,并将溶液体积加至1L。
pH值可以调节至7.4左右)5. Tris-EDTA缓冲液(TE缓冲液):- 10 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,pH 8.0(准备方法:将12.1 gTris溶解在800 mL去离子水中,然后加入0.37 g EDTA,使用HCl调节pH值至8.0,并将溶液体积加至1 L)二、缓冲液的配方1. Tris-HCl缓冲液:- 50 mM Tris-HCl,100 mM NaCl,1% Triton X-100,pH 7.4(准备方法:将6.05 g Tris,5.8 g NaCl,0.1 g Triton X-100溶解在800mL去离子水中,使用HCl调节pH值至7.4,并将溶液体积加至1 L)2. Tris-Borate缓冲液(TBE缓冲液):- 89 mM Tris,89 mM boric acid,2 mM EDTA,pH 8.3(准备方法:将10.81 g Tris,5.49 g boric acid,3.72 g EDTA溶解在800 mL去离子水中,使用NaOH或HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)3. Tris-Glycine缓冲液:- 25 mM Tris,192 mM glycine,0.1% SDS,pH 8.3(准备方法:将3.03 g Tris,14.35 g glycine溶解在800 mL去离子水中,使用HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)4. Tris-Acetate缓冲液(TAE缓冲液):- 40 mM Tris,20 mM acetic acid,1 mM EDTA,pH 8.3(准备方法:将4.84 g Tris,1.86 g acetic acid,0.37 g EDTA溶解在800 mL去离子水中,使用NaOH或HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)5. Phosphate缓冲液:- 100 mM sodium phosphate,pH 7.0(准备方法:根据目标pH值使用磷酸二氢钠和磷酸氢二钠调节溶液pH至7.0,并将溶液体积加至1 L)以上只是一些常用的试剂和缓冲液的配方,并不是全部。
常用试剂配制方法
常用试剂配制方法1、氨试液取浓氨水200ml,置1000ml量杯中,加水稀释至500ml。
2、碱性酒石酸铜试液:配600ml。
(1)取硫酸铜结晶20.8g,置500ml量杯中,加水使溶解成300ml,转移至500ml试剂瓶中备用。
(可长期保存)(2)取酒石酸钾钠结晶103.8g与氢氧化钠30g,置500ml量杯中,加水使溶解成300ml,转移至500ml试剂瓶中备用。
(需新鲜配制)临用前将两液等量混合,即得。
3、0.2%酚酞指示液:配500ml。
(可长期保存)粗称酚酞1g,置500ml量杯中,加95%乙醇500ml,使溶解,即得。
4、0.02mol/l氢氧化钠滴定液:配500ml。
(可长期保存)取氢氧化钠0.4g,置500ml量杯中,加水使溶解成500ml。
5、稀硝酸:配4000ml。
(可长期保存)取硝酸(16mol/L)210ml,置3000ml烧杯中,加水稀释至2000ml。
配2次。
6、标准氯化钠溶液(10ug/ml):配1000ml。
(可长期保存)精称氯化钠16.5mg,置100ml量瓶中,加水适量使溶解并稀释至刻度,摇匀,作为储备液。
(100μg/ml)临用前,精密量取储备液100.0mL,置1000ml 量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得。
7、硫酸铜液:称取硫酸铜85g,加水至1000ml。
8.硝酸银试液:配500ml。
(需新鲜配制)取硝酸银8.75g,置500ml量杯中,加水溶解至500ml。
9.稀盐酸:配3000ml。
(可长期保存)取盐酸(12.5mol/L)702ml,置5000ml烧杯中,加水稀释至3000ml。
10.标准硫酸钾溶液(100ug SO4-2/ml):配500ml。
(可长期保存)精称硫酸钾90.5mg,置100ml烧杯中,加水溶解后,转移至500ml量瓶中。
11.25%氯化钡:配3000ml。
(可长期保存,第二年如混浊,过滤)粗称BaCl2750g,置5000ml烧杯中,加水超声溶解并稀释至3000ml(澄清)。
实验室常用试剂配制方法
实验室常用试剂配制方法实验室中,常用试剂的配制方法非常重要,准确的配制方法可以确保实验的准确性和可重复性。
以下是几种常用实验室试剂的配制方法:1.缓冲溶液的配制:缓冲溶液常用于调节实验的酸碱度,常见的缓冲溶液有Tris缓冲液、PBS缓冲液等。
以Tris缓冲液为例,其配制方法如下:1) 称取所需量的Tris氯化物(Tris-HCl)。
2) 将Tris氯化物溶解于去离子水中,搅拌使其彻底溶解。
可以加热水浴促进其溶解。
3)调整溶液的pH值至所需的酸碱度。
可以使用酸(如盐酸)或碱(如氢氧化钠)来调节pH值,同时使用pH计监测溶液的pH值。
4)将溶液转移到容量瓶中,用去离子水稀释至最终体积。
2.浓度溶液的配制:浓度溶液的配制需要准确计算溶质的质量以及溶液的体积。
以下以NaCl浓度溶液的配制为例:1) 根据所需的NaCl浓度和溶液体积,计算所需的NaCl质量。
可以使用以下公式进行计算:质量(g)=浓度(mol/L)×体积(L)×摩尔质量(g/mol)。
2)称取所需质量的NaCl。
3)加入去离子水溶解NaCl,搅拌使其溶解。
4)如果需要,通过使用pH计校正溶液的pH值。
3.酶溶液的配制:酶溶液常用于生物学实验中。
以下以酶的配制为例:1)根据酶的活力或浓度,计算所需酶的质量或体积。
2)称取所需量的酶,可以在低温环境中操作以保持酶的活性。
3)加入合适的缓冲液溶解酶,并按需添加其他辅助试剂,如辅酶等。
4)将溶液通过滤器过滤以去除可能存在的杂质。
5)根据需要,将溶液分装至小容器中,如冰盒中保存。
4.染色剂的配制:染色剂常用于细胞培养、组织切片,或者蛋白质凝胶电泳等实验中。
以下以伯克氏液的配制为例:1) 称取所需质量的碱性苏丹黑(Fast Green FCF)和亚甲蓝(Methylene Blue)。
2)加入足够的去离子水,用搅拌棒搅拌使其均匀溶解。
3)使用滤纸或滤器将溶液过滤以去除杂质。
4)将溶液分装至小容器中,并用铝箔纸覆盖以避免溶液暴露于光线中。
实验室常用试剂的配制
5倍TBE储存液的配制配制1L的TBE缓冲液:Tris 54 g硼酸 27.5 g0.5 M EDTA (pH 8.0) 20 mldH2O to 1000 ml要用0.5倍的TBE缓冲液进行电泳,用5倍的TBE缓冲液进行储存常规实验所用溶液配方大全1.0.5mol/LEDTA 配制组分浓度:0.5mol/l EDTA,PH=8配制量:500ml配制方法(1)称取93.06克EDTA.Na2.2H2O,置于500 ml烧杯中(2)加入约400ml dd H2O.用热磁力搅拌器充分搅拌(3)用NaOH调节PH值到8,约用10克固体NaOH(4)在溶液冷却后,再用NaOH调节至PH=8(5)加dd H2O将溶液定容到500 ml(6)高温高压灭菌后,室温保存2.NaOH溶液的配制组分浓度:5 mol/l NaOH配制量:100 ml配制方法(1)称取固体NaOH20克于容器中(2)加入dd H2O定容到100 ml3.100 mmol/l Tris-HCl的配制组分浓度:mmol/l Tris-HCl,PH=6.4配制量:250 ml配制方法(1)称取3.025克Tris于250 ml烧杯中.(2)加入约200ml dd H2O充分搅拌溶解.(3)用浓盐酸调节PH值到6.4.所用浓盐酸约3 ml(4)将溶液定容至250ml(5)用棕色瓶分装于4度冰箱中(6)如使用,用水浴加热溶解.4.氯仿-异戊醇的配制:配制方法(1)简单的体积混合,既要求比例为24:1即可(2)储存于棕色玻璃瓶子中(3)置于4度冰箱以便日后使用5.去污剂:CTAB:可将细胞膜裂解,使DNA释放到提取液中,同时也使组织匀浆中的蛋白质变性.EDTA:能与DNase的辅助因子Mg2 结合,使DNase失去活性,不能降解从细胞中释放的DNA.6.还原剂巯基乙醇:它抑制从细胞中释放的多酚氧仿.防止植物组织发黄变褐.7.氯仿—异戊醇:它可把组织匀浆中变性的蛋白质除去,将DNA与细胞中的蛋白质、碳水化合物等分开除去.8.RNase:它可去除核酸中的RNA,只留下DNA.9.硅珠悬浮液的配制(1)称取1.2g硅珠粉,溶解于10ml无菌水中.(2)放入4℃冰箱备用.(3)使用时先涡旋使其混合均匀10. 10×TE,500ml配制如下:将100mM Tris-Hcl(PH=8.0)6.057g与10mM EDTA(PH=8.0)1.8612g溶于400ddH2O中,调PH=8.0,定容到500ml。
常用化学试剂的配制方法
常用试剂配制的具体操作1.HCL(1+1):在1000ml棕色瓶或白色瓶中,先倒入用500ml量杯量取的500ml纯净水,然后再缓慢加入盐酸,摇匀,密封备用。
(打开盐酸时,需要用纸,盖在瓶盖上再打开。
因为里面可能存在压力,若是直接打开,可能会因为压力过大,造成液体冲出,伤害到眼睛)也可以放置少量在白色滴瓶中待用。
2.抗坏血酸(5%):用一次性塑料杯,称取抗坏血酸1g,硫脲0.1g,加入20ml纯净水,在超声器中用玻璃棒搅匀,再倒入30ml小棕色瓶中保存。
(在实验前需要看颜色变化,如果颜色变深,则代表试剂过期)。
3.盐酸—硼酸混合酸:用一次性塑料杯称取硼酸25g,500ml量杯分2次量取900ml纯净水,清洗塑料杯,并倒入1000ml烧杯中,再加入HCL(1+1)70ml,放置在超声器中,用玻璃棒搅匀溶解,再倒入1000ml的棕色瓶中保存(也可以用500ml白色塑料瓶,插10ml刻度移液管)4.钼酸钠(6%):用一次性塑料杯称取钼酸钠30g,500ml量杯量取500ml纯净水,边清洗塑料杯边倒入500ml烧杯中,然后放置在超声器中,用玻璃棒搅匀,再倒入至500ml白色塑料瓶中,密封保存。
(插5ml刻度移液管)5.H₂O₂(1+20):全名为过氧化氢或者双氧水。
用1ml刻度移液管,吸取1ml过氧化氢至一次性塑料杯中,20ml量杯量取20ml纯净水,倒入塑料杯中,摇匀,再倒入至30ml的小棕色瓶中。
(容易失效,所以做溶液和检测时都需要速度快)6.三乙醇胺(TEA)(1+1):在1000ml棕色瓶中,先倒入用500ml量杯量取的500ml纯净水,然后再缓慢倒入500ml三乙醇胺,摇匀备用。
(也可以用白色塑料瓶,加黑色外袋保存,插5ml刻度移液管)7.H2SO4(1+1):带橡胶手套及口罩。
用500ml量杯先量取300ml纯净水,在1000ml烧杯内,先倒入300ml纯净水。
用脸盆装半脸盆自来水,将烧杯先放入脸盆中,再用500ml量杯量取300ml浓硫酸,缓缓倒入浓硫酸,并用玻璃棒不停搅拌。
常用试剂配制方法
常用试剂配制方法
1、酚酞指示液(10g/L)
称取1.0g 酚酞,溶于乙醇,用乙醇稀释至100 ml 。
2、溴甲酚绿指示液(1g/L)
称取0.1g 溴甲酚绿,溶于乙醇,用乙醇稀释至100 ml 。
3、百里香酚酞( 1g/L )
称取0.1g 百里香酚酞,溶于无水乙醇,用无水乙醇稀释至100ml 刻度线。
4、氢氧化钠标准溶液0.5N :准确称取20.01-20.02gNaOH固体置于
250ml 烧杯中,加入100ml 纯水溶解,并定容于1000ml 容量瓶中摇匀,保存在聚乙烯瓶容器中。
5、硝酸银溶液(17g/L)
称取1.7g 硝酸银,溶于水,稀释至100ml。
6、0.1N硝酸银试剂:
称取17.0 g 硝酸银试剂溶于1 000毫升纯水中,溶解后装入1000毫升的棕色试剂瓶中。
7、1:1 硝酸溶液:
用量筒量取500ml 浓硝酸于1000 毫升的棕色瓶中,加500 毫升纯水摇匀即可。
8、1:1 甲醛溶液
用量筒量取10ml甲醛溶液至试剂瓶中,加入10ml纯水摇匀即可,必须当天配当天用,不可过夜(此操作需在带有抽风设备内进行)。
实验室试剂配制
实验室试剂配制1、0.083M KOH:0.1M KOH稀释12倍(PH必须大于12)2、酸性半饱和硫酸铵:取硫酸铵((NH3)2SO4)400g加蒸馏水500mL.置于37℃水浴24h不时搅拌,使达饱和,再冷至25℃,搅拌一次,使过量的(NH3)2SO4析出,上清液为饱和液,取上清夜400mL加1M HCL20mL。
蒸馏水加至800mL,混匀室温保存(PH必须大于3)3、17%异丙醇溶液:17mL异丙醇加0.1mol/L Tris 缓冲液(7.4)至100mL。
PH〉7.2方可。
4、10g/L(1%)联苯胺:1.0g联苯胺溶于90mL 冰醋酸内,然后加蒸馏水至100mL,贮于棕色瓶,置冰箱内可使用数周。
5、1%H2O2:30%H2O2新鲜配制(稀释30倍)6、100g/L(10%)醋酸溶液:取10mL冰醋酸,加蒸馏水至100mL7、标准Hb溶液:取以生理盐水洗涤过三次的压积红细胞与等体积蒸馏水,0.5倍体积四氯化碳混合,剧烈振荡5min后,离心20min(2,500r/min),吸取上层Hb液,用氰化高铁Hb法准确测定其浓度,稀释成100g/L(10%)Hb浓度,于低温冰箱保存,用时取0.01mL,加生理盐水至10g/L。
即为100mg/L(10mg%)应用标准液。
8、12.5g/L亚硝酸钠—葡萄糖溶液:亚硝酸钠:1.25葡萄糖:5加蒸馏水至100mL,用棕色瓶,4℃保存一个月。
9、0.0004mol/L美蓝溶液:美蓝(次甲基蓝,亚甲基蓝)15mg,加蒸馏水100mL,室温1~2个月。
10、0.02mol/L磷酸盐缓冲液(PH7.4):Na2HPO4·12H2O:229.5mg(1.1475g)KH2PO4:52.2mg(0.261g)加蒸馏水100mL(500mL)11、PH8.5 TEB缓冲液:Tris:10.2g(5.1g)EDTA:0.6g(0.3g)硼酸:3.2g(2.6g)加蒸馏水至1000mL(500mL)12、PH8.5硼酸缓冲液:硼酸5.56g硼砂(四硼酸钠)6.87g加蒸馏水至1000mL13、0.09%丽春红:丽春红S或G:1.8g三氯醋酸:26.8g磺柳酸:26.8g加蒸馏水至100mL用前将上液以蒸馏水稀释20倍使用14、氨基黑:氨基黑10B: 0.5g甲醇50mL冰醋酸:10mL蒸馏水:40mL溶解而成贮棕色瓶内15、漂洗液:甲醇(乙醇)45mL冰醋酸:5mL蒸馏水:50mL溶解而成16、透明液:无水乙醇:70mL冰醋酸:30mL混合而成17、PH6.5磷酸盐缓冲液:KH2PO4:3.11g Na2HPO4: 1.49g(Na2HPO4·2H2O 1.87g)蒸馏水900mL校正PH后稀释至1,000mL18、0.4NaOH:1M →稀释19、0.1Tris缓冲液(PH7.4):Tris: 1.21g 0.1N HCL 40mL加蒸馏水至100mL20、1.0mol/L盐酸标准液:浓盐酸MW=36.465,比重1.18,含HCL 36%~38%。
常用试剂及标准溶液的配制
常用试剂的配制一、常用试剂的配制:1、100g/L钼酸铵溶液:称取100克钼酸铵于500毫升烧杯中加水溶液、移入1升,稀释至刻度,混匀。
(如溶液浑浊,应过滤)。
2、200g/L硫氰酸钾溶液:称取200克硫氰酸钾于500毫升烧杯中,溶解于水,移入1升容量瓶中,稀释至1升体积。
3、50g/L氯化钡溶液:称取50克二氯化钡于500毫升烧杯中,溶解于水,移入1升容量瓶中,稀释至1升体积。
4、100g/L酒石酸溶液:称取100克酒石酸溶于水中,移入1升容量瓶中,稀释至刻度。
5、150g/L氢氧化钾溶液:称取150克氢氧化钾溶于水中,移入1升容量瓶中,稀释至刻度。
6、20g/L二安替比林甲烷(DAM)溶液:称取出20克二安替比林甲烷于烧杯中加水约200毫升,再加1+1盐酸333毫升,搅拌溶解,继续加水稀至1升,混匀,此溶液酸度为2mol/L。
保存于棕色瓶中。
7、氨性缓冲液(PH=10):称取67.5克氯化铵溶于200毫升水中,加入570毫升浓氨水、稀释至1升。
8、醋酸——醋酸钠缓冲液(PH=5.2~5.9)。
O)溶解于水,称取无水乙酸钠79克(或称取150克结晶醋酸钠NaAC˙3H2加7.7毫升乙酸、稀至1升,用间隔为0.2的PH试纸检验其PH值。
9、硫酸——草酸——硫酸亚铁铵混合液:称取30克硫酸亚铁铵于1升烧杯中,加150毫升水,缓缓加入166毫升1+1的硫酸,搅拌使其溶解。
冷却后移入1升的容量瓶中,再称30克草酸于另一烧杯中,加热水溶解,冷却后移入上述容量瓶中,稀释至刻度、混匀。
10、邻菲啰啉—盐酸羟胺—醋酸—醋酸钠缓冲混合液。
称取100克无水醋酸钠(或150克结晶醋酸钠)和5克盐酸羟胺,分别溶于水,另称0.25克邻啡啰啉溶于15毫升醋酸中,将三溶液混合,用水稀释1升、混匀。
11、酒石酸钾钠—三乙醇胺混合液:称取200克酒石酸钾钠,溶解于水,加入100毫升三乙醇胺,稀释至1升。
12、硫酸铜—EDTA溶液:称取2.5克结晶硫酸铜和6.3克EDTA,加入10毫升1+1氢氧化铵,加水溶解后,稀释至1升。
常用化学试剂配制
常⽤化学试剂配制常⽤化学试剂的配制1、2,4-⼆硝基苯肼溶液I.在15mL浓硫酸中,溶解3克2,4-⼆硝基苯肼。
另在70mL95%⼄醇⾥加20mL⽔,然后把硫酸苯肼倒⼊稀⼄醇溶液中,搅动混合均匀即成橙红⾊溶液(若有沉淀应过滤)。
Ⅱ.将1.2克2,4⼀⼆硝基苯肼溶于50mL30%⾼氯酸中,配好后储于棕⾊瓶中,不易变质。
I法配制的试剂,2,4-⼆硝基苯肼浓度较⼤,反应时沉淀多便于观察。
Ⅱ法配制的试剂由于⾼氯酸盐在⽔中溶解度很⼤,因此便于检验⽔中醛且较稳定,长期贮存不易变质。
2、卢卡斯(Lucas)试剂将34克⽆⽔氯化锌在蒸发⽫中强热熔融,稍冷后放在⼲燥器中冷⾄室温。
取出捣碎,溶于23mL浓盐酸中(⽐重1.187)。
配制时须加以搅动,并把容器放在冰⽔浴中冷却,以防氯化氢逸出。
此试剂—般是临⽤时配制。
3、托伦(Tollens)试剂I.取0.5mL10%硝酸银溶液于试管⾥,滴加氨⽔,开始出现⿊⾊沉淀,再继续滴加氨⽔,边滴边摇动试管,滴到沉淀刚好溶解为⽌,得澄清的硝酸银氨⽔溶液,即托伦试剂。
Ⅱ.取⼀⽀⼲净试管.加⼊1mL5%硝酸银,滴加5%氢氧化钠2滴,产⽣沉淀,然后滴加5%氨⽔,边摇边滴加,直到沉淀消失为⽌,此为托伦试剂。
⽆论I法或Ⅱ法,氨的量不宜多,否则合影响试剂的灵敏度。
I法配制的Tollens试剂较Ⅱ法的碱性弱,在进⾏糖类实验时,⽤I法配制的试剂较好。
4、谢⾥⽡诺夫(Seliwanoff)试剂将0.05g间苯⼆酚溶于50mL浓盐酸中,再⽤蒸馏⽔稀释⾄100mL。
5、希夫(Schiff)试剂在100mL热⽔中溶解0.2g品红盐酸盐,放置冷却后,加⼊2g亚硫酸氢钠和2mL浓盐酸,再⽤蒸馏⽔稀释⾄200mL。
或先配制l0mL⼆氧化硫的饱和⽔溶液,冷却后加⼊0.2g品红盐酸盐,溶解后放置数⼩时使溶液变成⽆⾊或淡黄⾊,⽤蒸馏⽔稀释⾄200mL。
此外,也可将0.5g品红盐酸盐溶于l00mL热⽔中,冷却后⽤⼆氧化硫⽓体饱和⾄粉红⾊消失,加⼊0.5g活性炭,振荡过滤,再⽤蒸馏⽔稀释⾄500mL。
常用试剂配表
Nacl 146.1g
(4M)Imidazole (6.25mL)1.7g
加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。用浓盐酸调pH值至8.0,定)
(5mMImidazole)
1M NaPi100mL
10×Transfer Buffer
Glycin144g
Tris base30.3
(Methanol200mL)
先称量Tris base和甘氨酸,加入约600mL的去离子水,搅拌溶解后定容至1L,储存于4℃。使用时取100mL溶液稀释至800mL,加入200mL甲醇配置为工作液。
考马斯亮蓝R-250染色液
Tris30.2g
Glycine188g10%SDS(w/v)100mL
先称量Tris base和甘氨酸,加入约800mL的去离子水,搅拌溶解后加入100mL 10%SDS100mL并加去离子水定容至1L后,室温保存。
5×SDS-PAGELoading Buffer
1MTris-HCl12.5mL
10%SDS50mL
1M IPTG
IPTG5g/21 mL
置于50mL离心管中。加入10mL灭菌水,充分混合溶解后,定容至21mL。用0.22μm滤膜过滤除菌。分装(1mL/份)后,-20℃保存。
10%(W/V)过硫酸铵(AP)
Sodium persulfate1g/10mL
加入10mL的去离子水后搅拌溶解,贮存于-20℃。
Coomassie blueR-2501g
Ethanol250mL
Acetic acid100mL
称取R-250,置于烧杯。加入250mL的乙醇,搅拌溶解后加入100mL的乙酸(醋酸),混匀后加入650mL的去离子水,用滤纸出去颗粒物质后,室温保存。
实验室常用试剂配制
实验室常用溶液的配制1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):将77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于-20℃。
或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
8mol/L乙酸钾(potassium acetate):溶解78.5g乙酸钾于足量的水中,加水定容到100ml。
1mol/L氯化钾(KCl):溶解7.46g氯化钾于足量的水中,加水定容到100ml。
3mol/L乙酸钠(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中,用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。
1mol/L HCl:加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
1mol/LMgCl2:溶解20.3g MgCl2·6H2O于足量的水中,定容到100ml。
5mol/L氯化钠(NaCl):溶解29.2g氯化钠于足量的水中,定容至100ml。
10N氢氧化钠(NaOH):溶解400g氢氧化钠颗粒于约0.9L水的烧杯中(磁力搅拌器搅拌),氢氧化钠完全溶解后用水定容至1L。
10mg/mlRnase(无DNase)(DNase-free RNase):溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液中(pH 5.0)。
溶解后于水浴中煮沸15min,使DNA酶失活。
用1mol/L的Tris-HCl调pH至7.5,于-20℃贮存。
(配制过程中要戴手套)。
化学实验室常用试剂与溶液配制
化学实验室常用试剂与溶液配制化学实验室是进行实验研究的重要场所,各种试剂与溶液的合理配制对于实验结果的准确性和可重复性起着至关重要的作用。
本文将介绍化学实验室中常用的试剂和溶液,以及它们的配制方法。
一、酸碱溶液1. 稀盐酸(HCl)溶液稀盐酸溶液是化学实验室中最常用的酸性试剂之一,通常用于酸碱中和反应、金属的清洗和腐蚀性实验等。
配制稀盐酸溶液时,需要将浓盐酸以适量的去离子水稀释至所需浓度,通常为1mol/L。
配制时应注意慢慢加入盐酸到水中,并充分搅拌,避免溶液溅起并产生热量的释放。
2. 氢氧化钠(NaOH)溶液氢氧化钠溶液是一种常用的碱性试剂,用于酸碱中和反应、沉淀的生成以及一些溶解度实验等。
一般情况下,可根据实验需求配制不同浓度的氢氧化钠溶液。
配制方法为将一定质量的氢氧化钠固体溶解于去离子水中,并充分搅拌直至完全溶解,在不断搅拌的过程中逐渐加入较少量的水,以避免溶液过于稀释。
二、指示剂溶液1. 酚酞溶液酚酞溶液是一种常用的酸碱指示剂,常用于酸碱滴定和pH测试等实验中。
其配制方法为将一定质量的酚酞溶解于乙醇-水溶液中,通常浓度为0.1%左右。
在配制过程中应注意搅拌均匀,避免溶液中存在未溶解的固体。
2. 甲基橙溶液甲基橙是另一种常用的酸碱指示剂,常用于酸碱滴定和中和终点的判断等实验。
配制方法为将一定质量的甲基橙溶解于适量的去离子水或乙醇中,最终浓度一般为0.05%。
在配制过程中应充分溶解固体,并使用滤纸过滤以去除固体残留物。
三、溶液配制1. 盐溶液盐溶液常用于溶解度实验、沉淀反应等。
配制时,根据实验要求选择所需的盐和溶剂。
通常的方法是称取一定质量的盐溶解于适量的去离子水或其他溶剂中,充分搅拌均匀即可。
需要注意的是,配制过程中应根据溶解度曲线确定最佳溶液浓度。
2. 铵盐溶液铵盐溶液在化学实验中常用于制备气体、产生热力学效应等。
铵盐溶液的配制方法为称取适量的铵盐固体溶解于去离子水中,并充分搅拌。
由于铵盐的溶解会伴随着溶液的变冷,因此在配制过程中需要注意温度的变化。
实验室常用试剂配制方法
实验室常用试剂配制方法一、50×TAE:称242g Tris溶于800mL 双蒸水中,加入57.1mL 冰醋酸和18.6g(或100mL 0.5mol/L,pH=8.0)EDTA,再加水定容至1L,室温保存备用。
二、1×TAE:将50×TAE加双蒸水稀释至1×使用。
三、LB液体培养基:称取10g蛋白胨(bacto-typtone)、5g 酵母提取物(bacto-yeast extract)和10g NaCl,溶于950mL 双蒸水中,摇动至完全溶解,定容至1L,120℃湿热灭菌20min,冷却至室温后4℃保存备用。
四、100mg/mL氨苄青霉素(Amp):称取100mg粉末状氨苄青霉素(Amp)置于1.5mL 离心管中,加入800μL 无菌水使其完全溶解,定容至1mL,-20℃保存备用。
五、LA液体培养基:按照x mL培养基加入x μL的比例将100mg/mL的氨苄青霉素(Amp)加入LB液体培养基中,4℃保存备用。
六、LB固体培养基:称取10g蛋白胨(bacto-typtone)、5g 酵母提取物(bacto-yeast extract)、10g NaCl和15g琼脂粉,溶于950mL 双蒸水中,摇动至完全溶解,定容至1L,120℃湿热灭菌20min,稍冷却后按照x mL培养基加入x μL的比例加入100mg/mL的氨苄青霉素(Amp),充分混匀后倒入培养皿中制成琼脂平板,4℃保存备用。
(1L培养基大约可以倒40个平板)七、200mg/mL IPTG:称取2g 粉末状IPTG溶于8mL 双蒸水中,再定容至10mL,配成200mg/mL 溶液,(用0.22μm滤膜过滤除菌,)分装为每份1mL,-20℃保存备用。
八、20mg/mL X-gal:将X-gal溶于二甲基甲酰胺,配成20mg/mL,分装后于-20℃避光保存。
九、DEPC水:将水加入干净玻璃瓶中,加入DEPC至终浓度0.1%(v/v),放置过夜,高压湿热灭菌,4℃保存备用。
实验室化学试剂配置清单
实验室化学试剂配置清单
1. 引言
本文档旨在提供实验室化学试剂配置清单,以帮助实验室人员准确、安全地配置所需的化学试剂。
2. 配置清单
下面是常见化学试剂的配置清单,包括试剂名称、浓度、配制方法和注意事项:
2.1 氯化铁溶液
- 试剂名称:氯化铁(FeCl3)
- 浓度:10%(质量浓度)
- 配制方法:将20g的氯化铁溶解在200ml的去离子水中,搅拌至溶解完全。
- 注意事项:使用时需戴防护手套,避免接触皮肤和眼睛。
2.2 硫酸溶液
- 试剂名称:硫酸(H2SO4)
- 浓度:1M
- 配制方法:向800ml的去离子水中慢慢加入160ml的浓硫酸,搅拌均匀后,体积定容至1L。
- 注意事项:配制过程需小心操作,避免溅出。
2.3 碳酸氢钠溶液
- 试剂名称:碳酸氢钠(NaHCO3)
- 浓度:0.1M
- 配制方法:向800ml的去离子水中慢慢加入5.8g的碳酸氢钠,搅拌均匀后,体积定容至1L。
- 注意事项:可溶液产生二氧化碳气体,需在通风橱下操作。
2.4 硝酸银溶液
- 试剂名称:硝酸银(AgNO3)
- 浓度:0.01M(滴定用)
- 配制方法:将1.708g的硝酸银溶解在800ml的去离子水中,
搅拌均匀后,体积定容至1L。
- 注意事项:避免接触有机物及皮肤,避免光照。
3. 结论
本文档提供了实验室常见化学试剂的配置清单,方便实验室人员按照正确的方法配制所需的试剂。
在配置试剂时,请严格按照配制方法和注意事项操作,确保安全性和准确性。
实验室常规试剂的配制方法
实验室常规试剂的配制方法1.NaCl溶液的配制方法:a.准备所需的NaCl粉末和蒸馏水。
b.秤取适量的NaCl粉末,并加入容量瓶中。
c.用蒸馏水加至容量瓶刻度线,并摇匀,即可得到所需浓度的NaCl 溶液。
2.HCl溶液的配制方法:a.准备所需的浓盐酸和蒸馏水。
b.将适量的浓盐酸缓慢地加入容量瓶中。
c.用蒸馏水加至容量瓶刻度线,并摇匀,即可得到所需浓度的HCl溶液。
3.NaOH溶液的配制方法:a.准备所需的固体NaOH和蒸馏水。
b.将适量的固体NaOH加入容量瓶中。
c.用蒸馏水加至容量瓶刻度线,并摇匀,即可得到所需浓度的NaOH 溶液。
4.氯仿与甲醇混合溶液的配制方法:a.准备所需的氯仿和甲醇。
b.按照所需比例将氯仿和甲醇倒入容量瓶中。
c.盖上瓶盖并轻轻摇匀,即可得到所需混合溶液。
5. 缩醛试剂(Tollens试剂)的配制方法:a.准备所需的银氨溶液和碳酸钠溶液。
b.将适量的银氨溶液和碳酸钠溶液按照1:1的比例混合。
c.摇匀并储存在避光瓶中,使用时需小心避免暴露在阳光下。
6.高锰酸钾溶液的配制方法:a.准备所需的高锰酸钾和蒸馏水。
b.将适量的高锰酸钾溶解在蒸馏水中,直至完全溶解。
c.配制过程中要小心搅拌,以促进高锰酸钾的溶解。
以上是一些常规试剂的配制方法,需要根据实际需求按照比例配制和摇匀。
在操作过程中要注意安全,如佩戴适当的实验室防护设备,保持实验区域清洁整齐,避免试剂的交叉污染。
另外,也需要注意在配制过程中仔细阅读试剂使用说明书,并根据安全操作指南进行操作。
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1DEPC水(1‰) 1000ml 水1ml DEPC根据需要确定要配的体积,泡实验器具的DEPC水静止4小时后备用,泡24小时。
配液体的DEPC水37℃过夜,送至高压,然后配相关溶液。
20.1M tris(ph 7.5) 12.114g tris1000ml DEPC水用HCL调ph至7.5,高压备用。
3 4%PFA的配制(ph 7.0)40g PFA1000ml 0.1m tris(DEPC水配制高压)将溶液持续加热至60℃左右,搅拌之至完全溶解,注意温度不要超过65℃,否则PFA降解失效。
30.2% 甘油/0.1M tris20ml 甘油980ml 0.1Mtris4 20XSSC Nacl 175.3g(ph 7.0)柠檬酸钠88.2gDEPC水1000ml分别稀释至2XSSC和0.2XSSC备用5 HEPES 溶液HEPES 23.8g(ph6.8-8.0)DEPC H2O 100ml6 50X Denhaldt′s 液聚蔗糖(Ficoll 400)0.2g聚乙烯吡咯烷酮(polyvinypyrrolidone) 0.2g牛血清蛋白(BSA)0.2gDEPC 水20ml7 预杂交bufferDeinoized formanmid 5ml20X SSC 1.5ml1M HEPES 0.5ml50X Denhanldt′s液1ml龟精DNA 0.6ml(4ug/ul)DEPC水 1.4ml龟精DNA 要先95℃10-15min加热变性,随即冰浴。
杂交buffer分装后-20℃保存。
8Washing buffer(ph7.5) maleic acid 5.8gNACL 4.4gTween(吐温) 1.5ml定容至500ml溶质浓度最后分别为0.1M maleic acid 0.15M nacl 0.3% Tween9Maleic acid buffer(ph7.5) Maleic acid 5.8gNacl 4.4g定容至500ml 溶质的浓度最后分别为0.1M maleic acid 0.15M nacl10Detection buffer(ph 9.5)0.1M Tris-Hcl 7.9g (9.0g)0.1M Nacl 2.9g定容至500ml.使溶质的终浓度为0.1M Tris-Hcl ,0.1M nacl.11blocking reagent(封闭液)(2-8℃保存)(bottle 5) 5gmaleic acid buffer 50ml12blocking solution封闭液(新鲜配制)1mlMaleic acid buffer 10ml13抗体(AP)10000rpm离心5min,吸上清,1:5000稀释,考虑先稀释100倍,用时再稀释。
LB培养基胰化蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10gAmp(100ng/ml)1ml加去离子水950ml搅拌使之完全溶解,用5mol/L的NaOH调PH值至7.0,定容至1L,高压蒸汽灭菌(15磅,1.034×105Pa)30min,4℃保存。
LB琼脂固体培养基LB 500mL琼脂粉7.5g高压蒸汽灭菌(15磅,1.034×105 Pa) 30 min,冷却至60℃,加入500L 100mg/mL的氨苄青霉素(Amp),分铺20个平板。
100 mg/mL氨苄青霉素(Amp)Amp 100mgddH2O 1mL用0.2um滤器过滤,-20℃储存。
1M 30 mg/mL卡那霉素(kana)kana 30mgddH2O 1mL用0.2um滤器过滤,-20℃储存。
琼脂糖凝胶电泳所用试剂50×TAE(电泳缓冲液)Tris碱242g冰乙酸57.1 mL0.5M EDTA(pH 8.0)100 mL溶于终体积1000 mL去离子水中,使用时1:50稀释。
10×加样缓冲液0.25% 溴酚兰0.25% 二甲苯青30% 甘油保存于4℃。
10mg/mL EB 溶液取溴化乙锭(EB)0.2g溶解于20mL去离子水中,混匀。
4℃避光保存。
使用时终浓度为0.5μg/mL。
1%琼脂糖凝胶琼脂糖1g1×TAE 100 mL微波炉加热至完全溶解,摇匀,当温度降至60℃时,即可铺制平板。
?0.1mol CaCl2溶液:1.1g无水氯化钙,溶于90ml三蒸水中,定容至100ml,用0.22μm滤器过滤除菌置于灭菌试剂瓶中,4℃保?氨苄青霉素(Amp)选择性培养基LB培养基中加入 1.5%的琼脂(15g/L),高压灭菌20min,取出,在无菌条件下,冷却至50℃左右时(烧手但尚可忍受)加入抗生素或其他必需成分,如为氨苄青霉素(Amp)选择性培养基,则以50mg/ml的氨苄青霉素贮存液按50μg/ml的量加入,即每ml培养基加入1μl氨基苄。
?氨苄贮存液将氨苄青霉素钠溶于三蒸水,配成50mg/ml溶液,以0.22μm滤纸过滤,1ml一份分装,存于-20℃。
质粒的少量提取【试剂及配制】1.溶液Ⅰ葡萄糖(C6H12O6·H2O) 1.982g三蒸水160ml0.5mol EDTA pH8.0 4ml1mol Tris-Cl pH8.0 5ml以三蒸水定容至200ml,高压灭菌,4℃保存0.5 mol EDTA pH8.0 的配制:Na2EDTA·H2O 186.1g (如无水,则为175g)三蒸水700ml边磁力搅拌边加入固体NaOH,缓慢少量加入,待充分溶解,pH接近8.0,用酸度计调节pH8.0 (HCl/NaOH);1mol Tris-Cl pH8.0 的配制:Tris 碱121g三蒸水800ml充分搅拌,用浓盐酸将pH调节至8.0,酸度计测量;2.溶液Ⅱ配制50ml的量,现用现配。
10 mol NaOH 1ml三蒸水40ml10% SDS 5ml用三蒸水定容至50ml10mol NaOH 的配制:40g NaOH晶体加三蒸水至100ml;10% SDS 的配制:戴口罩,称10g SDS,溶于80ml三蒸水中,68℃助溶,加数滴1mol HCl,调pH7.2,定容至100ml;1mol HCl 的配制:于通风橱中,三蒸水91.4ml,浓盐酸8.6ml,混匀;3.溶液Ⅲ5mol 乙酸钾60ml冰乙酸11.5ml三蒸水28.5ml高压灭菌,4℃保存;5mol 乙酸钾配制:200ml乙酸钾98.14g三蒸水160ml搅拌溶解,定容至200ml;4.3ml 乙酸钠(NaAc)pH5.2配制:500ml乙酸钠(CH3COONa·H2O)201.1g三蒸水200ml用冰乙酸调节pH为5.2,三蒸水定容至500ml,高压灭菌,4℃保存。
5.平衡酚在粗酚中加入0.1% 8-巯基喹啉,然后倒入0.1mol Tris-Cl pH8.0,避光磁力搅拌4h,静置后移去水相,再加0.1mol Tris-Cl pH8.0,搅拌、去除水相,反复进行,直到水相pH>7.8时为止,装棕色瓶,4℃保存。
6.TE 缓冲液pH8.0配制最终使:10mmol Tris-Cl pH8.01mmol EDTA pH8.07.其它试剂:氯仿:乙戊醇(V/V=24:1)、无水乙醇、70%乙醇?2× SSC先配制20× SSC贮存液,用时稀释。
NaCl 175g 3mol枸椽酸三钠·2H2O 88g 0.3mol三蒸水加至1000ml,用1mol HCl 调pH7.0?4× SSC/50%去离子甲酰胺(V/V)去离子甲酰胺的配制:500ml 甲酰胺与25g Bio-Rad AG 501-X8(20~50目) 混合,室温避光搅拌4h,过滤,分装为50ml ,-20℃存放;?100× Denhardt液聚蔗糖10g聚乙烯吡咯烷酮10g牛血清白蛋白10g消毒三蒸水定容至100ml?预杂交液去离子甲酰胺5ml20× SSC 2.5ml加温至50℃,加入硫酸葡聚糖1g聚合物溶解后,加入100× Denhardt 500μl10%SDS 500μl10mg/ml变性鲱鱼精子DNA 100μl消毒三蒸水400μl充分混合;?杂交液将标记好的探针用沸水浴10min,立即冰酒精冷轧,用预杂交液将探针稀释至0.5~5ng/μl 。
原位杂交缓冲液的配制:3%柠檬酸:100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7.H2O)3g,PH2.0左右2×SSC---1000ml蒸馏水中加氯化钠17.6g,柠檬酸三钠(C6H5O7Na3.2H2O,分子量294)8.8g 0.5×SSC---300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可(1:3)0.2×SSC---270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可(1:9)20%甘油---20ml甘油加80ml蒸馏水即可0.5M TBS---1000ml蒸馏水加氯化钠30g,TRIS 1.2g 纯乙酸0.4-0.5ml,PH7.2-7.60.01M TBS(PH9.0-9.5)配法:1000ml蒸馏水中加NaCL9g, Tris 1.2g免疫组化缓冲液的配制:10.2M PB①0.2M NaH2PO4:NaH2PO4.2H2O 31.2g(或NaH2PO4.H2O 27.6g)加重蒸水1000ml②0.2M Na2HPO4:Na2HPO4.12H2O71.632g(或NaH2PO4.7H2O 53.6g或NaH2PO4.2H2O 35.6g)加重蒸水1000ml③0.2M PB:19ml①+81ml②混合即可,pH值约为7.4-7.520.01M PBSNaCl8.5-9g, 0.2M PB 50ml,加重蒸水1000ml混匀即可30.5M TBS①0.5M Tris-HCl缓冲液:Tris(三羟甲基氨基甲烷) 60.57g1N HCl 约420ml重蒸水至1000ml先用少量重蒸水300-500ml溶解Tris(三羟甲基氨基甲烷),加入HCl后,用1N NaOH 或HCl 将pH调至7.6,最后加重蒸水至1000ml,此液为储备液,于4℃冰箱中保存,免疫细胞化学中常用的Tris-HCl缓冲液浓度为0.05M,用时取储备液稀释10倍即可。
主要用于配制Tris缓冲生理盐水(TBS)、DAB显色液等4Tris缓冲生理盐水(TBS)0.5M Tris-HCl缓冲液100mlNaCl 3.5-9g(0.15M)重蒸水至1000ml先以重蒸水少许溶解NaCl,再加Tris-HCl缓冲液,最后加重蒸水1000ml,最终浓度为0.05M。
电泳缓冲液、染料和凝胶加样液的配置电泳缓冲液、染料和凝胶加样液的配置电泳缓冲液50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量2mol/L Tris碱1mol/L 乙酸100 mmol/L EDTA水242g57.1 ml的冰乙酸(17.4 mol/L)200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)补足1L5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量445 mmol/L Tris碱445 mmol/L 硼酸盐10 mmol/L EDTA水54g27.5g 硼酸20 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)补足1L染料1%溴酚蓝(bromophenol blue)加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中,搅拌或涡旋混合直到完全溶解。