营养琼脂培养基配方及使用说明
营养琼脂配制标准操作规程
营养琼脂配制标准操作规程
1.目的
规范营养琼脂培养基配制的操作规程。
2.原理
培养基含有氮源、碳源和微量无机盐,适宜细菌生长繁殖。
3.用途
供细菌培养、菌株纯化及传种使用。
4.配方
营养琼脂干粉28g、蒸馏水1000ml
5.操作步骤
将28g营养琼脂干粉溶于1000 ml蒸馏水中,混匀至完全溶解,分装,经121℃灭菌15分钟,冷藏备用。
6.储存条件
2~8℃冰箱
7.有效期
实验室自行规定,确保培养基质量。
8.质量控制
8.1 质控频度每次新配制时做质控
8.2 质控方法及结果见表5-17。
表5-17 配制营养琼脂培养基质量控制方法及结果
试验方法结果
无菌试验<100块抽检5%,>100块
随机取10块,35℃培养24~
49h
无细菌生长
生长试验金黄色葡萄球菌
ATCC25923,35℃培养24~
49h
菌落浅黄色
铜绿假单胞菌ATCC27853 35℃培养24~48h 菌落无
色或浅绿色
直径>2.7mm
平行试验平行试验做质控时取新旧批号的
培养基同时做
9.注意事项
倾倒时温度不易过高,否则冷凝水过多易污染;若温度过低,琼脂易凝固。
参考文献
[1] 谢正旸主编。
现代微生物培养基和试剂手册。
福州:福建科学技术出版社,1994
[2] 王钦升,周正明,高屹主编。
实用医学培养基手册。
北京:人民军医出版社,1999
编写人:AAA、BBB 操作人:本室操作人员
批准人:。
营养琼脂培养基的配置
营养琼脂培养基的配置
营养琼脂培养基其实就是一种选择性较低的营养成分的固体培养基,主要用于细菌菌落计数,也可以用于细菌的传代和増菌,但是一般不用于细菌鉴定(除非该细菌菌落有比较特殊的形态)只适合营养要求不高的细菌生长。
营养琼脂
成分:
牛肉膏3g
氯化钠5g
蛋白胨10g
琼脂 15-20g
蒸馏水 1000ml
制备步骤:
检查所用物品级别和洁净程度合格.
戴上手套.
开启天平,放上一张称量纸,调零.
称取蛋白胨g,置一玻璃容器中.
称取牛肉浸出粉g,置同一玻璃容器中.
称取氯化钠g,置同一玻璃容器中.
称取琼脂g
关闭天平.
取1000ml蒸馏水倒入上述烧杯内,用玻璃棒搅拌.
放入水浴锅内微温溶解调节pH为弱碱性. 加入琼脂,调节pH值使灭菌后为7.2±0.2. 分装,121℃高压灭菌15min.。
几种培养基的配方
几种培养基的配方培养基是用于培养和繁殖微生物的营养物质的混合物。
根据微生物的特性和应用需求,可以设计出不同成分和配方的培养基。
以下是几种常见的培养基配方:1. 营养琼脂培养基(Nutrient Agar)的配方:-牛肉膏:5g-蛋白胨:5g-水解酵母膏:1.5g-纯化琼脂:15g-蒸馏水:1000mL将牛肉膏、蛋白胨和水解酵母膏溶解在蒸馏水中,添加纯化琼脂,混合并加热直至溶解,然后倒入培养皿中。
2. EMB(Eosin Methylene Blue)培养基的配方:-蛋白胨:17g-明胶胨:3g-乳糖:10g-酵母提取物:3g-果糖:1g- Eosin Y:0.4g-亚甲蓝:0.065g-纯化琼脂:15g-蒸馏水:1000mL将蛋白胨、明胶胨、乳糖、酵母提取物和果糖溶解在蒸馏水中,加热并搅拌至溶解,然后添加Eosin Y和亚甲蓝,最后加入纯化琼脂,混合并倒入培养皿中。
3. 铡锰培养基(Sabouraud Agar)的配方:-葡萄糖:40g-酵母膏粉:5g-水解麦粉:15g-纯化琼脂:15g-蒸馏水:1000mL将葡萄糖、酵母膏粉和水解麦粉溶解在蒸馏水中,加热并搅拌至溶解,然后添加纯化琼脂,混合并倒入培养皿中。
4.胰蛋白酶-大豆酪蛋白肉汤培养基(TRYPTICASE™SOYBROTH)的配方:-胰蛋白酶胨:15g-大豆酪蛋白胨:5g-食盐:5g-葡萄糖:20g-蒸馏水:1000mL将胰蛋白酶胨、大豆酪蛋白胨、食盐和葡萄糖溶解在蒸馏水中,混合并加热至溶解,然后冷却至室温。
5. M9盐碱培养基(M9 minimal medium)的配方:-磷酸一氢二钾:3g-硫酸镁:0.5g-氯化钠:0.5g- 氨氯化铁:7.5mg-葡萄糖:4g-去离子水:1000mL将磷酸一氢二钾、硫酸镁、氯化钠和氨氯化铁溶解在去离子水中,混合并加热至溶解,然后冷却至室温后添加葡萄糖。
这只是几种常见的培养基配方,实际上还有很多不同成分和配方的培养基。
普通肉汤琼脂培养基使用
中文名称:营养琼脂(普通肉汤琼脂培养基)英译名称:Nutrient Agar品种编号:022020营养琼脂规格:250g干粉培养基营养琼脂用途:用于细菌总数测定、保存菌种及纯培养,也可用于消毒效果测定。
营养琼脂使用原理:蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠能维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。
微生物图册:营养琼脂配方(每升):蛋白胨10g牛肉膏粉3g氯化钠 5g琼脂15g最终pH 7.3±0.2营养琼脂使用方法:1、称取本品33g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,备用。
2、(食品)以无菌操作称取检样25克(或25mL),放入含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的玻璃三角瓶中(瓶内预置适当数量的玻璃珠),充分振摇,即为1:10的均匀稀释液。
依次做1:100,1:1000……稀释液。
3、根据对样品污染情况的估计,选择2—3个合适的稀释度,分别在做10倍稀释的同时,吸取1mL稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做2个平皿。
4、稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃左右的培养基注入平皿约15mL,并转动平皿使混合均匀,同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。
待琼脂凝固后,倒置于36±1℃温箱中培养48±2h。
5、观察结果。
6、菌落计数方法:做平板菌落计数时,可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏,在计下各平板的菌落数后,求出同稀释度的各平板平均菌落总数。
7、菌落计数的报告:选取菌落数在30-300之间的平板作为菌落总数测定标准。
一个稀释度使用两个平板,应采用两个平板平均数,其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数,若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘以2以代表全皿菌落数。
平皿内如有我链状菌落生长时(菌落之间无明显界线),若仅有一条链,可视为一个菌落;如有不同来源的几条链,则应将每条链视为一个菌落计。
营养琼脂的成份和制作方法
营养琼脂的成份和制作方法营养琼脂培养基配方蛋白胨10g牛肉膏3g氯化钠5g琼脂15~20g蒸馏水1000mL营养琼脂培养基配制将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2mL,校正pH 至7.2~7.4。
加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化。
分装烧瓶,121℃高压灭菌15min。
注:此培养基可供一般细菌培养之用,可倾注平板或制成斜面。
如用于菌落计数,琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面,则应为2%。
琼脂粉Agar琼脂粉质量标准符合国标GB1975-80规定:干燥失重:≤15%烧灼残渣%(灰分):≤5 水不溶物%:≤1 砷(AS)%:≤0.0001 重金属(以Pb计)%:≤0.004 吸水力:75毫升(最高数)淀粉:合乎规定凝胶强度:>800g/cm2 产品优点凝胶强度:>800g/cm2琼脂粉Agar组培上的应用说明:培养基的配制,别名:Agar-agar;Gum agar 分子式:(C12H18O9)n 工作浓度: 3-4.5 g/L。
强度:1300g/ c㎡外观:类白色粉末储存条件:室温琼脂的用途琼脂又名卡拉胶系用一种稀有而珍贵的热带海洋红藻—麒麟菜为原料,经科学方法取制而成。
它属于关乳糖硫酸脂,含碳水化合物约75%,此外还含有人体不可缺少的无机物质—钙、碘、铁、钠等。
琼脂是一类从石花菜及其它红藻类植物提取出来的藻胶,在我国及日本已有三百多年的历史。
因其有特殊的凝胶性质,已被广泛使用于食品、医药、化工、纺织、国防、科研等领域,被国际上称为“新奇的东亚产品”。
琼脂卡拉胶不仅广泛应用于食品,具有清热凉肺、开胃健脾,增进食欲等功能,并可防治便秘和治疗高血压病。
由于琼脂、卡拉胶溶液的胶凝性的凝胶稳定性而使琼脂广泛应用在食品工业中,可作为食品食品的稳定剂。
琼脂、卡拉胶比其它胶类作出的食品味道好得多,口感更隹。
琼脂除了可作稳定剂外,还可以防止包装粘连。
琼脂的浓度达到0.5%至1.0%时,可作为油饼透明糖衣的稳定剂,同时提高了黏度和表面的黏着力,快速凝固并增加食品柔韧性,减少表面缺陷和裂纹。
营养琼脂培养基配方及使用说明
营养琼脂培养基配方及使用说明022020 营养琼脂(普通肉汤琼脂培养基)(Nutrient Agar)营养琼脂培养基用途:营养琼脂培养基NA用于细菌总数测定、保存菌种及纯培养,也可用于消毒效果测定(GB/T4789.28-2003 中4.7 ,GB/T4789.2-2003,GB15979-2002和GB15981-1995,ISO标准)。
营养琼脂培养基检测原理:蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠能维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。
营养琼脂培养基配方(每升):蛋白胨 10g牛肉膏粉 3g氯化钠 5g琼脂 15g最终pH 7.3±0.2培养基使用方法:1、称取营养琼脂培养基NA 33g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,备用。
2、(食品)以无菌操作称取检样25克(或25mL),放入含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的玻璃三角瓶中(瓶内预置适当数量的玻璃珠),充分振摇,即为1:10的均匀稀释液。
依次做1:100,1:1000……稀释液。
3、根据对样品污染情况的估计,选择2—3个合适的稀释度,分别在做10倍稀释的同时,吸取1mL稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做2个平皿。
4、稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃左右的培养基注入平皿约15mL,并转动平皿使混合均匀,同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。
待琼脂凝固后,倒置于36±1℃温箱中培养48±2h。
5、观察结果。
6、菌落计数方法:做平板菌落计数时,可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏,在计下各平板的菌落数后,求出同稀释度的各平板平均菌落总数。
硫酸锰营养琼脂培养基产品说明书
化学品安全技术说明书第一部分化学品及企业标识产品中文名称:硫酸锰营养琼脂培养基产品英文名称:Manganese Sulphate Nutrient Medium产品编号:022023企业名称:广东环凯微生物科技有限公司地址:广东省广州市黄埔区广州开发区科学城神舟路788号邮编:510663公司网址电子邮件地址:*********************传真号码:************销售热线:************-8602技术热线:************-8877/8876推荐用途和限制用途:生化研究/分析第二部分危险性概述GSH危害性类别非危险物质或混合物GSH标签要素非危险物质或混合物其它危害(健康危害、环境危害)未见报道第三部分成分/组成信息混合物化学品成分:参考培养基使用说明。
有害物质成分:无第四部分急救措施一般信息:无特殊的措施要求。
皮肤接触:立即用清水彻底清洗。
眼睛接触:立即提起眼睑,用大量流动清水冲洗15min。
如不适就医。
吸入:如果吸入,将人员移动到新鲜空气处,如果没有呼吸,进行人工呼吸操作,并联系医生。
食入:如误食,用水冲洗口腔,如不适就医。
就医信息:出示产品使用说明或者此MSDS。
第六部分 泄露应急处理个人防护:穿个人实验服,佩戴手套和口罩,避免吸入干粉。
环境保护措施:用湿布和地拖擦拭干净。
清洁/收集措施:保持干燥。
迅速清洗弄脏的区域。
第七部分 操作处置与储存安全操作注意事项:防止粉尘扬起,应提供通风设备。
储存注意事项:贮存于避光、干燥处,用后立即旋紧瓶盖。
第八部分 接触控制/个人防护职业接触限值没有已知的国家规定的暴露极限。
工程控制:提供安全淋浴和洗眼设备个人保护措施呼吸系统防护:在通风橱里称取产品,佩戴口罩。
眼睛防护:佩戴安全眼镜。
身体防护:穿实验室服。
手防护:戴防化学品手套。
其他防护:常规的工业卫生操作,工作后及时清洗双手。
第九部分 理化特性外观:粉末 pH 值: 7.2±0.2 颜色:淡黄色 气味: 特征性 熔点:无数据资料 沸点: 无数据资料 燃点:无数据资料 闪点: 无数据资料 爆炸限度下限:无数据资料 上限: 无数据资料 热分解: 无数据资料第五部分 消防措施危险特性:不助燃。
营养琼脂(普通琼脂)
营养琼脂(普通琼脂)成份:牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏汤)100毫升琼脂(视天气,琼脂质量而定)制法:将上物加热溶解,补足水,调ph至7.6,过滤分装121℃,高压灭菌15分钟。
用途:作普通琼脂平皿。
血琼脂平板(BA)制法:取营养琼脂(PH7.6),加热使其溶解待冷至45-50℃,以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀,立即倾注于平板或分装试管,制成斜面备用。
用途:1.一般棉拭子均接种此培养基。
2.尿液,脓液3.分离细菌标本用。
基础培养基(肉膏汤BB)成份:蛋白胨10克牛肉膏5克氯化钠5克水1000毫升制法:将以上各物称好,加水煮沸溶解,用1NNOH校正PH至7.6,过滤分瓶,121℃高压灭菌,20分钟备用。
用途:1 作耐药试验,增菌用分装小管。
2 作普通琼脂斜面。
血液培养基(大管肉汤培养基)成份:1 新鲜牛肉浸液1000毫升2 PABA(对氨基苯甲酸[相当于10mg/毫升])1g% 1毫升3 MgSO4 [相当于0.493/100毫升] 49.3% 1毫升4 枸椽酸钠0.3g制法:1 将1号,4号混合液,2号,3号液分装高压灭菌。
2 取灭菌1,4号混合液用无菌法加入PABA,MgSO4,再分管,行无菌试验三天方可使用。
用途:作血,骨髓培养用。
肠道杆菌培养基(伊红美兰琼脂)成份:蛋白胨10克乳糖10克氯化钠5克琼脂25(22)克水1000毫升2%伊红溶液20毫升0.5%美兰溶液20毫升制法:将蛋白胨,氯化钠琼脂称好,加水1000毫升使溶解,校正PH7.4过滤,补足失水,加入2%伊红溶液20毫升,0.5%美兰溶液20毫升,(115℃高压20分钟),冷却至50℃左右倾注平板,凝固后存冰箱备用。
(高压以后方可再加乳糖)用途:用作分离沙门氏,志贺氏菌属,也作菌群调查。
罗文斯坦培养基成份:磷酸二氢钾2.4克硫酸镁0.24克枸椽酸钠0.6克天门冬素3.6克纯甘油(丙三醇)12毫升水600毫升马铃薯粉30克鸡蛋1000毫升(约3公斤)2%孔雀绿水溶液20毫升制法:1 除鸡蛋外(还有孔雀绿)。
营养琼脂培养实验报告
实验名称:琼脂平板培养基制备及微生物分离实验一、实验目的1. 熟悉琼脂平板培养基的制备方法。
2. 掌握微生物分离和接种技术。
3. 了解微生物在不同培养基上的生长情况。
二、实验原理琼脂平板培养基是一种常用的微生物学实验室培养基,其主要成分为琼脂和营养物质。
琼脂是一种从海藻中提取出来的胶状物质,在高温下溶解,在冷却后形成固体。
通过制备琼脂平板培养基,可以为微生物提供适宜的生长环境,便于观察和分离微生物。
三、实验材料1. 培养基:蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、琼脂。
2. 蒸馏水。
3. 高压灭菌器。
4. 灭菌移液器。
5. 灭菌镊子。
6. 灭菌培养皿。
7. 灭菌接种环。
8. 待分离的微生物样品。
四、实验步骤1. 配制培养基:将蛋白胨、牛肉膏、氯化钠溶解于蒸馏水中,加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化。
分装烧瓶,121℃高压灭菌15min。
2. 制备平板:待培养基冷却至50℃左右,倒入灭菌培养皿中,待凝固后备用。
3. 分离微生物:用灭菌接种环取适量待分离的微生物样品,接种于平板上,用无菌涂布器均匀涂抹。
4. 培养观察:将接种好的平板置于37℃恒温培养箱中培养24h,观察菌落生长情况。
五、实验结果与分析1. 平板制备成功,凝固良好。
2. 微生物在平板上生长良好,形成了明显的菌落。
3. 根据菌落特征,可初步判断分离出的微生物种类。
六、实验总结通过本次实验,我们成功制备了琼脂平板培养基,并掌握了微生物分离和接种技术。
实验结果表明,琼脂平板培养基是微生物培养和分离的常用培养基,有助于我们观察和分离微生物。
在实验过程中,我们要注意无菌操作,避免污染。
营养琼脂配制
1、营养琼脂配制:(33g营养琼脂+1000ml水)
2、月桂基硫酸盐胰蛋白胨配制:(35.6g月桂基+1000ml水)
3、生理盐水配制:(8.5g氯化钠+1000ml水)
微生物操作:共9跟试管,第一个三根移取9ml双料月桂基,第二、三个三根移取9ml单料月桂基
第一步:称取25g样品于225ml生理盐水无菌质杯中摇匀制成1:10的样品匀液A
第二步:用1 mL 无菌吸管或微量移液器吸取1:10 样品匀液1 mL,沿管壁缓缓注入9 mL 生理盐水的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),振摇试管或换用1 支1 mL 无菌吸管反复吹打,使其混合均匀,制成1:100 的样品匀液B。
第三步:同第二步的方法制成1:1000的样品匀液C。
实验室常用培养基配方
实验室常用培养基配方1. 营养琼脂培养基(Nutrient Agar)营养琼脂培养基是最为常用的一种培养基,用于微生物的一般培养、分离和鉴定,其配方如下:-水:1000mL-肉浸膏或胨:三到五克-水解酪蛋白:五克-氯化钠:五克-琼脂:十五克2. 培养基ONE(BHI Agar)培养基ONE用于灭菌后的微生物收集、保存和复苏,配方如下:-砂糖:十五克-胨:二十克-水:1000mL-酵母膏:二十克-酵母蛋白胨:十克-溶血素:十克-十%NaCl:五百毫升-甘油:百毫升3. 霍乱弧菌选择性琼脂培养基(TCBS Agar)TCBS Agar用于霍乱弧菌的分离和检测,配方如下:-水:1000mL-TCBS粉:一百克4. MacConkey琼脂培养基(MacConkey Agar)MacConkey琼脂培养基是一种选择性琼脂培养基,用于大肠杆菌的分离和检测,配方如下:-水:1000mL-肉浸膏:十七克-水解酪蛋白:十五克-氯化钠:五克-紫蘑菇素:六十毫克-琼脂:十五克5. Sabouraud琼脂培养基(Sabouraud Agar)Sabouraud琼脂培养基用于真菌的分离和培养-水:1000mL-葡萄糖:四十克-琼脂:十五克-氯化钠:五克-氯已二维硫酸钾:二十克这些仅仅是一些常见的培养基配方,实验室常根据不同微生物的要求而有所调整。
此外,还有许多特殊的培养基用于特殊微生物的培养和分离,如MRS培养基用于乳酸菌、EC培养基用于大肠杆菌O157:H7等。
在使用培养基时,需要注意权威的文献和生产厂家的指导。
常用培养基配方范文
常用培养基配方范文培养基是为了满足微生物的生长和繁殖需要而制备的特定组分的物质。
不同的微生物对培养基的组分有不同的要求,因此有一系列常用的培养基配方。
下面介绍几种常用的培养基配方。
1.营养琼脂培养基营养琼脂培养基是最常用的培养基之一,可以满足大多数微生物的生长需求。
其基本配方如下:-蛋白胨:5g-酵母粉:2.5g-琼脂:15g-蒸馏水:1000mL将蛋白胨、酵母粉和琼脂加入蒸馏水中,加热溶解,然后加热熔化琼脂,混合均匀后倒入培养皿中,待凝固后即可使用。
2.大肠杆菌富集培养基大肠杆菌是一种常见的肠道细菌,在微生物学实验中经常使用。
它具有良好的生长能力,但在培养基中易受到其他菌群的竞争。
因此,需要使用富集培养基来选择性地培养大肠杆菌。
其基本配方如下:-脱水牛肉粉:10g-酵母提取物:5g-氯化钠:5g-蒸馏水:1000mL将脱水牛肉粉、酵母提取物、氯化钠加入蒸馏水中,加热溶解后加入琼脂,混合均匀后倒入培养皿中,待凝固后即可使用。
3.血平板培养基血平板培养基用于检测细菌对血液的溶血能力以及细菌的形态特征。
其基本配方如下:-马肉膏:6g-鸡蛋膏:5g-硫酸镁:0.5g-酚红指示剂:0.025g-蒸馏水:1000mL将马肉膏、鸡蛋膏、硫酸镁加入蒸馏水中,加热溶解后加入酚红指示剂,混合均匀后倒入培养皿中,待凝固后用刀或针在培养基上划线,然后点菌于线上即可使用。
4. Sabouraud葡萄糖琼脂培养基Sabouraud葡萄糖琼脂培养基是一种选择性培养基,常用于真菌的培养。
其基本配方如下:-葡萄糖:40g-氯化钠:10g-氯仿:0.1mL-青霉素:0.1g-琼脂:15g-蒸馏水:1000mL将葡萄糖、氯化钠、硫酸镁加入蒸馏水中,加热溶解后加入氯仿和青霉素,混合均匀后加热熔化琼脂,在冷却至40-45℃时倒入培养皿中,待凝固后即可使用。
以上是一些常用的培养基配方,不同微生物可能有不同的培养基要求,所以在实际应用中还需要根据具体情况进行调整和优化。
硫酸锰营养琼脂培养基产品说明书
产品说明书Product Manual产品中文名:硫酸锰营养琼脂培养基Product Name:Manganese Sulphate Nutrient Medium 【货号、规格、产品形态及包装形式】货号规格产品形态包装形式022023250g 干粉瓶装022023A 20套(φ9cm)平板盒装【产品用途】用于蜡样芽胞杆菌鉴定中蛋白质毒素结晶体试验(GB 4789.14-2014)。
【检验原理】蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠能维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。
【配方成分】【使用方法】脱水干粉培养基使用:称取本品34g,加入蒸馏水或去离子水1L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装试管或三角瓶,121℃高压灭菌15min。
平板凝胶培养基使用:划线接种菌株,在30℃±1℃培养24h±2h,并于室温放置3~4d 后,进行蛋白质毒素结晶体的染色。
【质量控制】1.外观方面配方(每升)含量胰蛋白胨5g 葡萄糖5g 酵母浸膏5g 磷酸氢二钾4g 硫酸锰0.0308琼脂15g 最终pH 7.2±0.2脱水干粉培养基:淡黄色粉末。
即用型平板培养基:淡黄色固体。
2.生物学方面下列质控菌株接种待测试培养基,30℃±1℃培养24h±2h,并于室温放置3~4d,结果如下:【储存条件及保质期】脱水干粉培养基:旋紧瓶盖,储存于干燥处,避免阳光直射;贮存期三年。
即用型平板:2~25℃避光保存,贮存期三个月。
【注意事项】1、称量时注意粉尘,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系统不适。
2、即用型成品平板在2-25℃保存时与存放容器冷凝管保持一定距离以避免冻损坏。
产品多次在低温与常温之间变更会引起琼脂的泌水,属于正常现象。
使用前应平衡至室温且尽量在无菌干燥箱中预干燥。
3、质检报告可以登录环凯网站,在主页中点击“质检报告”进入下载面,输入产品批号点击搜索后即可进行下载。
实验室36种微生物培养基配制方法
实验室36种微生物培养基配制方法实验室养菌基是为微生物的培养和研究提供合适营养和条件的培养基质。
不同微生物对培养基的要求各不相同,因此实验室通常需要配制多种不同的培养基。
下面是36种常用的微生物培养基的配制方法。
一、通用培养基1. 营养琼脂培养基(Nutrient Agar)营养琼脂培养基是一种通用的培养基,适用于大多数微生物的培养。
其配方为:蛋白胨10克、葡萄糖5克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2,加入琼脂,高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。
2. 营养肉膏培养基(Nutrient Broth)营养肉膏培养基是一种通用的液体培养基,适用于大多数微生物的培养。
其配方为:蛋白胨10克、牛肉提取物5克、葡萄糖5克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2,高压灭菌,分装,即可使用。
3. 大肠杆菌选择性培养基(MacConkey Agar)大肠杆菌选择性培养基是一种常用的培养基,用于选择和鉴定大肠杆菌。
其配方为:蛋白胨17克、葡萄糖1.5克、恶瓜胆汁5克、硼酸紫0.5克、亮矾0.09克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2,加入琼脂,高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。
4. Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基(Sabouraud Dextrose Agar)Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基是用于真菌的培养和鉴定。
其配方为:脱氧胆汁10克、蔗糖40克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至5.6-6.4,高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。
二、选择性培养基1. VC菌属选择性平皿培养基(Vogel-Johnson Agar)VC菌属选择性平皿培养基是用于选择和鉴定Voges-Proskauer菌属(如克雷伯菌)的培养基。
其配方为:葡萄糖1克、琼脂15克、盐酸75克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、加热煮沸,冷却至55-60°C,加入胆盐酯高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。
营养琼脂培养基的配方
营养琼脂培养基的配方1. 嘿,你想知道营养琼脂培养基的配方吗?这就像探秘美食的独家配方一样有趣呢!营养琼脂培养基啊,它的基础就是琼脂啦。
琼脂就像建筑中的水泥,把整个培养基结构给稳固住。
一般来说,每1000毫升的蒸馏水中,我们要加入15 - 20克的琼脂。
这琼脂可是个神奇的东西,就像魔法胶水一样,让培养基有了固体的形态。
2. 那除了琼脂,蛋白胨也是很重要的成分哦。
蛋白胨啊,就好比是培养基里的“营养小超人”。
大概每1000毫升的培养基里,我们得放5 - 10克的蛋白胨。
想象一下,蛋白胨就像快递小哥,把各种营养物质运送给微生物们。
“哇塞,这么多营养,微生物们肯定开心得不得了!”我的朋友小明看到这个配方时都忍不住感叹。
3. 还有牛肉膏呢,这可是个好东西。
牛肉膏就像给微生物们准备的豪华大餐中的高级食材。
通常每1000毫升培养基里加3 - 5克牛肉膏就够啦。
你想啊,微生物们在这个培养基里就像在五星级酒店享受美食一样。
我和实验室的小伙伴们每次配置的时候,都感觉像是在为微生物们精心打造一个超级舒服的家。
4. 氯化钠也不能少哦。
氯化钠就像是调味盐一样,在培养基里起到平衡的作用。
每1000毫升培养基大概需要5克氯化钠。
这就好比我们做菜的时候,盐放得合适,菜才好吃。
微生物们在这个合适的环境里,才能茁壮成长呢。
“这氯化钠就像天平上的小砝码,少了它可不行啊。
”我记得导师这么说过。
5. 酵母提取物也是这个配方里的一员大将。
酵母提取物呀,就像一个神秘的宝藏盒,里面装着各种对微生物有益的东西。
大概每1000毫升的培养基里,我们会加入2 - 3克的酵母提取物。
微生物们看到酵母提取物,就像我们看到了美味的糖果一样兴奋。
有一次我在教新同学配置的时候,他就好奇地问:“这酵母提取物为啥这么重要呢?”我就说:“这就像你玩游戏里的能量包,给微生物加能量的呀!”6. 水,那可是这个配方里的基础中的基础啦。
就像我们人离不开水一样,微生物在培养基里也需要水来生存。
营养琼脂平板说明书
营养琼脂平板说明书营养琼脂培养基使用说明书【产品名称】通用名称:营养琼脂培养基英文名称:Nutrient Agar Medium【包装规格】Φ90㎜和Φ70㎜,5块/包。
【预期用途】营养琼脂培养基是一次性微生物培养基,主要适用一般细菌总数测定,保存菌种及纯培养。
(【检验原理】培养基(Medium)是指由人工方法配制而成的,专供微生物培养、分离、鉴别、研究和保存用的混合营养制品。
培养基按用途分为基础培养基、增菌培养基、选择性培养基、鉴别培养基和厌氧培养基等,按原料来源分为天然培养基、半合成培养基和合成培养基。
按形态分为液体培养基、流体培养基、半固体培养基和固体培养基等。
本产品是以人工的方法配制而成的,针对不同种类的肠道微生物适宜生长的培养基不同,利用细菌的培养特性、生化特性等方法对肠道菌进行分离、培养。
【主要组成成份】营养琼脂培养基由蛋白胨、牛肉浸粉、氯化钠、葡萄糖和琼脂粉等培养基原料经配制、高压灭菌,定量灌入一次性塑料培养基内而成。
【贮存条件及有效期】2-8℃,避光保存,有效期3个月,用前复温。
【样本要求】标本可以是液体也可以是固体,液体标本可以直接使用,固体标本需用适量无菌生理盐水溶解后,取溶液使用。
根据浓度需要决定是否采用10倍稀释法进行稀释。
【检验方法】用接种环或棉签以无菌方法取标本直接画线接种于培养基中,或无菌吸取0.1ml适当浓度的标本溶液用玻璃涂布棒均匀涂布于培养基中,置35~37℃温箱中培养。
【检验结果的解释】大肠埃希氏菌生长良好,呈半透明;金黄色葡萄球菌生长良好,菌落呈白色或金黄色;铜绿假单胞菌生长良好,呈绿色。
【检验方法的局限性】正确的标本采集及良好的细菌划线分离技术是检出细菌的基础,所检出细菌要经镜检、生化鉴定来确认。
【注意事项】1.该培养基仅用于体外诊断。
2.使用前必须检查培养基,若培养基有污染迹象或超过有效期不得使用。
3.采集的标本必须尽快接种培养,以保证结果准确。
4.所用标本及其培养废弃物应视为有潜在传染性的物质,应按传染病实验室操作规范处理。
营养琼脂培养基配置使用操作规程
江门大诚医疗器械有限公司
标准操作规程文件编号版本号
标题:营养琼脂培养基配制使用操作规程页码1/1
目的:建立营养琼脂培养基配制使用操作规程。
范围:本操作规程适用于营养琼脂培养基的配制使用。
职责:质检室质检员负责本操作规程的执行,质保室质监员负责本操作规程的监督检查。
内容::
1.仪器与试剂:
1.1 JY2002电子天平、85_2数显恒温磁力搅拌器、LDZX-50FA立式压力蒸汽灭菌器、电冰箱、250ml三角瓶、500ml量筒、线绳、培养皿。
1.2. 纯化水、营养琼脂、75%酒精。
2.操作方法
2.1. 使用JY2002电子天平称取营养琼脂8克,于250ml三角瓶内,加入250ml纯化水,加热溶解,充分搅拌均匀后,包好扎紧瓶口。
2.2. 置LDZX-50FA立式压力蒸汽灭菌器内,于121℃高压灭菌15分钟,取出放置至室温后,放入冰箱,备用(冰箱温度控制在1-4℃)。
2.3. 使用时从冰箱取出,放置室温后,置85_2数显恒温磁力搅拌器中加热,使融,全部融化后取出,放置约45℃时使用。
2.4. 使用时,用75%乙醇擦瓶子外围,打开包扎外壳,左手拿培养皿,右手拿三角瓶,慢慢倾倒至培养皿中,每皿注入约15ml完毕后,立即包好瓶口,用线绳扎好,留下次使用。
(此瓶培养基只允许使用两次,且每次首先倾注一个空白平皿作为对照培养)。
3.参考文件:85_2数显恒温磁力搅拌器操作规程
LDZX-50FA立式压力蒸汽灭菌器操作规程
JY2002电子天平校准规程。
营养琼脂培养基配方及使用说明2页
营养琼脂培养基配方及使用说明2页
以下是一种常见的营养琼脂培养基的配方和使用说明:
营养琼脂培养基配方:
1. 蛋白胨:5克
2. 羊肉提取物:3克
3. 酵母提取物:3克
4. 胆盐:1.5克
5. 硫酸镁:0.2克
6. 琼脂:15克
7. 蒸馏水:1000毫升
使用说明:
1. 将蛋白胨、羊肉提取物、酵母提取物、胆盐和硫酸镁加入蒸馏水中,充分溶解。
2. 加热溶液至沸腾,然后煮沸2分钟。
3. 将琼脂添加到热溶液中,搅拌均匀。
4. 冷却至40-45°C,然后倒入培养皿中。
5. 等待琼脂凝固并变为固态后,即可用于细菌的培养。
营养琼脂培养基是一种常用的通用培养基,适用于各种细菌的生长。
制备过程中需要严格控制温度和时间,以确保培养基的质量稳定。
使用时要注意无菌操作,避免细菌的污染。
3分钟营养琼脂培养基说明书
3分钟营养琼脂培养基说明书
【规格】
3m211(100mL/瓶),3m221(200mL/瓶)
【用途】
用于一般细菌培养、转种、复壮和增菌等。
【使用方法】
1.拧盖:将瓶盖微微拧松。
注意:严禁不拧瓶盖直接微波炉加热!
2.熔化:拧松瓶盖后放入微波炉大火加热3分钟后取出,然后拧紧瓶盖;或不拧瓶盖放在沸水中加热20-30分钟至完全熔化。
3.冷却:冷却至50-55℃(感觉不烫手)。
4.倒板:在超净工作台中,倾斜瓶体,将冷却好的培养基逐一倒入无菌的培养皿中,转摇至均匀,做好标识,待凝固后备用。
【检验原理】
培养基中的蛋白胨、牛肉浸粉提供氮源和碳源,氯化钠维持均衡的渗透压,琼脂为凝固剂。
一般的细菌可利用培养基中的营养成分进行增殖,形成相应的菌落形态,便于肉眼观察和计数。
【组成成分】
蛋白胨10g/L、牛肉浸粉3g/L、氯化钠5g/L、琼脂15g/L,pH 7.3±0.2。
【储存条件及有效期】
常温避光保存,未开封的产品有效期1年。
【质量控制】
【注意事项】
1.检查本品是否污染,如长菌请勿使用。
2.请在无菌的环境下倒板,避免杂菌干扰。
3.微波炉加热时间不宜过长,否则会大量损失水分,并降低产品营养能力。
4.本品为一次性使用,需将瓶内全部培养基倒出,避免反复熔化、凝固。
5.因微波炉功率不同,如果3分钟内不能完全熔化,可在放微波炉前捏成不同的碎块再放微波炉大火加热,或者延长加热时间,直到完全熔化。
肉汤琼脂培养基使用说明
若所有稀释度均无菌落生长,则以小于1乘以最底稀释倍数报告之(见表中例6)。
若有稀释度的平均菌菌落数均不在30-300之间,其中一部分大于300或小于30时,则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例7)。
5 27 11 5 —— 270 270或2.7×102
6 0 0 0 —— <1×10 <10
7 多不可计 305 12 —— 30 500 31 000或3.1×104
质量控制:
本品接种下列菌株,置于36±1℃恒温箱中培养48±2h,结果如下:
菌 名 菌 号 生长状况 菌落特征
大肠埃希氏菌 ATCC25922 良好 白色—灰白色,圆形,边缘整齐,表面光滑,湿润。
菌落数的报告:
菌落数在100以内时,按其实有数报告,大于100时,采用二位有效数字,在二位数字后面的有效数值,以四舍五入法计算。为了缩短数字后面的零数,也可以用10的指数来表示(见表中“报告方式栏”)。
稀释度选择及菌落数报告方式
例次 稀释液及菌落数 两稀释液之比 菌落总数个/g或mL 报告方式个/g或mL
3、 根据对样品污染情况的估计,选择2—3个合适的稀释度,分别在做10倍稀释的同时,吸取1mL稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做2个平皿。
4、 稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃左右的培养基注入平皿约15mL,并转动平皿使混合均匀,同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。待琼脂凝固后,倒置于36±1℃温箱中培养48±2h。
A:稀释度的选择:
应选择平均菌落数在30-300之间的稀释度,乘以稀释倍数报告之(见附表)。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
营养琼脂培养基配方及使用说明
022020 营养琼脂(普通肉汤琼脂培养基)
(Nutrient Agar)
营养琼脂培养基用途:
营养琼脂培养基NA用于细菌总数测定、保存菌种及纯培养,也可用于消毒效果测定(GB/T4789.28-2003 中4.7 ,GB/T4789.2-2003,GB15979-2002和GB15981-1995,ISO标准)。
营养琼脂培养基检测原理:
蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠能维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。
营养琼脂培养基配方(每升):
蛋白胨 10g
牛肉膏粉 3g
氯化钠 5g
琼脂 15g
最终pH 7.3±0.2
培养基使用方法:
1、称取营养琼脂培养基NA 33g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,备用。
2、(食品)以无菌操作称取检样25克(或25mL),放入含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的玻璃三角瓶中(瓶内预置适当数量的玻璃珠),充分振摇,即为1:10的均匀稀释液。
依次做1:100,1:1000……稀释液。
3、根据对样品污染情况的估计,选择2—3个合适的稀释度,分别在做10倍稀释的同时,吸取1mL稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做2个平皿。
4、稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃左右的培养基注入平皿约15mL,并转动平皿使混合均匀,同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。
待琼脂凝固后,倒置于36±1℃温箱中培养48±2h。
5、观察结果。
6、菌落计数方法:
做平板菌落计数时,可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏,在计下各平板的菌落数后,求出同稀释度的各平板平均菌落总数。