达肝素钠对A549细胞生长状态及细胞周期的影响(一)
槐耳清膏对人肺腺癌A549细胞增殖及周期的影响
槐耳清膏对人肺腺癌A549细胞增殖及周期的影响鲁明骞;卢宏达;许新华;卢忠心;孔庆志;雷章;徐冰清;李颖琦【期刊名称】《中国老年学杂志》【年(卷),期】2016(036)024【摘要】目的：研究槐耳清膏对人肺腺癌A549细胞增殖及周期的影响。
方法制备浓度为0、3、6、9 mg／ml的槐耳清膏与人肺腺癌A549细胞作用后，采用流式细胞检测观察细胞凋亡率，并分析药物干预36 h对细胞周期和细胞凋亡率的影响。
结果流式细胞术检测结果显示，槐耳清膏各浓度组均可发生细胞凋亡，与对照组相比差异显著（P＜0.05）。
各浓度组可使人肺腺癌A549细胞G0／G1、S期细胞比例减少，G2／M期细胞比例增多。
结论槐耳清膏能诱导人肺腺癌A549细胞增殖，可能与细胞被阻滞于G2／M期有关。
【总页数】2页(P6099-6100)【作者】鲁明骞;卢宏达;许新华;卢忠心;孔庆志;雷章;徐冰清;李颖琦【作者单位】湖北中医药大学临床学院，湖北武汉 430061; 三峡大学第一临床医学院肿瘤研究所宜昌市中心人民医院肿瘤内科;武汉市中心医院武汉市肿瘤研究所;三峡大学第一临床医学院肿瘤研究所宜昌市中心人民医院肿瘤内科;武汉市中心医院武汉市肿瘤研究所;武汉市中心医院武汉市肿瘤研究所;武汉市中心医院武汉市肿瘤研究所;三峡大学第一临床医学院肿瘤研究所宜昌市中心人民医院肿瘤内科;沈阳医学院【正文语种】中文【中图分类】R287【相关文献】1.槐耳清膏对肺腺癌细胞增殖凋亡及相关基因表达的影响 [J], 王卉;吴唐维;刘水逸;李晓怡;陈卫群;卢宏达;孔庆志;卢忠心2.槐耳清膏对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响 [J], 鲁明骞;卢宏达;许新华;卢忠心;孔庆志;雷章;徐冰清;郭蓉3.槐耳清膏联合顺铂对人肺癌A549细胞和A549/DDP细胞Bax、Bcl-2及Survivin基因表达的影响 [J], 沈云飞;詹建伟4.槐耳清膏对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响及其机制 [J], 鲁明骞;周东奎;高嫣;冯雪松;陆海燕;李薇;孔庆志;卢宏达;李莉娥5.槐耳清膏对人乳腺癌MCF-7及MDA-MB-231细胞增殖的影响 [J], 鲁明骞;冯雪松;卢宏达;雷章;许新华;卢驰;李薇;孔庆志因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
益气化瘀养阴解毒方药物血清对人肺癌A549细胞增殖及周期的影响
Ｔ ＡＮ Ｇ Ｚ ｈ ｅ ｎ ｒ Ｊ ． Ｔ Ｃ Ｍ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ，Ｈ ｕ ｎ ａ ｎ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ｆ ｏ Ｔ Ｃ Ｍ， Ｃ ｈ ａ ｎ ｇ ｓ ｈ ａ ４ １ ０ ２ ０ ８ ，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ２ ． Ｋ ｅ ｙ Ｄｉ ｓ ｃ ｉ ｐ ｌ ｉ ｎ ｅ ｏ ｆ Ｓ ｔ ａ ｔ ｅ
・
３ ４・
Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ １ ｏ ｆ Ｉ ｎ ｆ ｏ ｒ ｍ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｎ Ｔ Ｃ Ｍ
Ｍ ａ ｒ ． ２ ０ １ ３ Ｖ ｏ １ ． ２ ０ Ｎ ｏ ． ３
・实 验 研 究
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益气化瘀养 阴解毒方药物 血清 对 人肺癌 Ａ ５ ４ ９细胞增殖及周期 的影 响
Ｄ ０ Ｉ ：１ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ Ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ５ — ５ ３ ０ ４ ． ２ ０ １ ３ ． ０ ３ ． ０ １ ４
益 气化瘀
中图分类号：Ｒ ２ ８ ５ ． ５
文献标 识码 ：Ａ
文章编号 ：１ ０ ０ ５ ． ５ ３ ０ ４ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ３ ． ０ ０ ３ ４ ． ０ ２
郜文辉 ， 曾普华 。 ， 滕久祥 ， 唐珍
１ ． 湖南中医药大学中医学院， 湖南 长沙 ４ １ ０ ２ ０ ８ ：
２ ． 国家中医药管理局重点学科， 湖南省 中医药研究院附属医院肿瘤科， 湖南 长沙 ４ １ ０ ０ ０ ６
缺氧对人非小细胞肺癌细胞系A549生物学行为的影响
浙江实用医学 ２ ０ １ ３ 年２ 月第 １ ８ 卷第 １ 期Ｚ ｈ ｅ ｊ ｉ ａ ｎ ｇ Ｐ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｃ ａ ｌ Ｍ ｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ Ｆ ｅ ｂ ｒ ｕ ａ ｒ ｙ ， ２ ０ １ ３ ＂ ． Ｖ ｏ １ ． １ ８ ， Ｎ ｏ ． １
・ ｌ ５ ・
【 关键词】 靠小细 胞肺癌 Ａ ５ ４ ９ 缺氧
生物学行 为中肿瘤微 环境的一个显著特点 就
是局 部低 氧 ， 恶性 肿瘤 在 生 长 过 程 中 由于 组 织增 生 过快 必然 会 造 成 局 部 缺 氧 和供 能 与 消 耗 之 间 的不
培养 ４ 小时， 弃上清液加 ２ ０ ０ ｔ ｔ Ｌ Ｄ Ｍ Ｓ Ｏ ， 振荡 １ ０ 分钟 ， 用酶标仪 测定 ４ ９ ０ ｎ ｍ处各孔 的吸光度值 。计算 生 存率 ： 生存率 ＝ 实验孔 Ａ值／ 对照孔 Ａ值 ×ｌ ｏ ｏ ％。 １ ． ３ 缺氧对 Ａ ５ ４ ９ 细胞系凋亡 的影响 取对数生 长期细胞进行缺氧和常氧培养 ２ ４ 小时 ， 干预结束
ｔ ｒ ｉ ｇ ｅ ｌ 胶 和上 室 内 的 细胞 ， 乙醇 固定 后 结 晶紫 染 色 ，
胞培养基为含 １ ５ ％胎牛血清的 Ｒ Ｐ Ｍ Ｉ １ ６ ４ ０ ， ３ ７ ｏ Ｃ、 ５ ％ ｃ Ｏ ２ 和９ ５ ％０ ２ 的培养箱 中传代培养。取对数生长 期细胞 ， 传代后 （ 未贴壁 ） 立 和９ ５ ％０ ２ 的培养箱 中培养 ， 缺氧培养
达肝素钠抑制人肺腺癌细胞增殖作用的实验观察
达肝素钠抑制人肺腺癌细胞增殖作用的实验观察芮艳;胡丹凤;黄礼年【期刊名称】《蚌埠医学院学报》【年(卷),期】2014(39)3【摘要】目的:探讨达肝素钠抑制人肺腺癌细胞增殖的作用机制.方法:采用流式细胞术检测达肝素钠处理后A549细胞的细胞周期变化.建立肺腺癌鼠模型后,将12只荷瘤鼠随机分为达肝素钠组和对照组,分别给予达肝素钠1 500 IU/kg(0.2 ml)皮下注射和0.9％氯化钠注射液0.2ml腹腔注射,1天1次,连续用药35 d.定期测量瘤体最大及最小直径,计算瘤体积、绘制肿瘤生长曲线.第35天用戊苯巴比妥钠全身麻醉处死裸鼠,剥取瘤体称重、计算抑瘤率,并用免疫组织化学方法测瘤组织中细胞周期蛋白E(Cyclin E)的表达.结果:肺腺癌细胞株A549处理48 h后,与对照组比较,达肝素钠组G0/G1期细胞比例升高,S期细胞比例降低(P＜0.01);与对照组比较,达肝素钠组瘤重明显减小(P＜0.05);达肝素钠组抑瘤率为0.000％和64.081％;对照组及达肝素钠组瘤组织中Cyclin E的表达阳性率为6/6、3/6,差异无统计学意义(P=0.182);达肝素钠组主要表现为低表达(5/6),对照组为高表达(5/6),差异无统计学意义(P=0.081).结论:达肝素钠可阻滞人肺腺癌A549细胞于G0/G1期,使进入S期和M期的细胞减少,减少DNA的合成,抑制细胞增殖,此作用可能与其抑制细胞周期调控因子Cyclin E的表达有关.【总页数】4页(P284-287)【作者】芮艳;胡丹凤;黄礼年【作者单位】蚌埠医学院第一附属医院呼吸病科,安徽蚌埠233004;安徽省蚌埠市第三人民医院呼吸内科,233300;蚌埠医学院第一附属医院呼吸病科,安徽蚌埠233004【正文语种】中文【中图分类】R734.2【相关文献】1.重楼皂苷Ⅶ对耐顺铂人肺腺癌A549/DDP细胞增殖的抑制作用 [J], 王震;李亚荣;郝杰;杨晶波;李孝男2.EGF及其受体在二甲双胍抑制人肺腺癌细胞增殖中的作用 [J], 李霞;王伟;孙希霞;李延海;王志强3.凋亡抑制基因c-FLIPs对人肺腺癌细胞增殖和凋亡的作用 [J], 卫萍;李雪萍;姜凤良;罗秀成;王爽;张典;李爱连4.DACH1对人肺腺癌细胞增殖、侵袭和凋亡的抑制作用 [J], 余俊杰;王建军;翟伟;赵亮;吴东5.DEAD盒多肽43小干扰RNA对司美替尼抑制人肺腺癌A549细胞增殖和诱导其凋亡作用的影响 [J], 崔黎;崔莹;赵娜;陈奎生因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
血管内皮抑制素的不同给药方法对肺癌A549细胞和脐静脉内皮细胞生长的影响
血管内皮抑制素的不同给药方法对肺癌A549细胞和脐静脉内皮细胞生长的影响赵强;王华贝;庞海林;马宁强;张贺龙【期刊名称】《现代肿瘤医学》【年(卷),期】2012(020)011【摘要】目的:探讨血管内皮抑制素的不同给药方法对A549肺癌细胞、脐静脉血管内皮细胞及BALB/c裸鼠移植瘤生长的影响.方法:用不同浓度的血管内皮抑制素作用于A549细胞及脐静脉血管内皮细胞,用MTT法检测其对细胞增殖的影响;构建BALB/c裸鼠A549移植瘤模型,观察不同给药方法下肿瘤体积、重量的变化;应用免疫组化法检测肿瘤组织中CD31和CD34分子的表达差异.结果:在各组不同浓度的血管内皮抑制素作用下,A549细胞增殖能力并未随抑制素浓度的增加而降低,仅在浓度为1μg/ml时与对照组有差异(P＜0.05);脐静脉血管内皮细胞增殖能力与对照组比较均无统计学意义(P＞0.05).在体内实验中,单独使用血管内皮抑制素及血管内皮抑制素联合顺铂治疗,各实验组肿瘤体积较对照组均有不同程度的缩小(P＜0.05),联合用药疗效优于单用血管内皮抑制素;单独使用血管内皮抑制素时隔日给药肿瘤抑制率最高(50.74％),联合用药3周(血管内皮抑制素1次/日+顺铂1次/周)抑瘤效果最好(96.41％);免疫组织化学结果显示各实验组肿瘤组织中CD31和CD34分子的表达均下降(P＜0.05).结论:血管内皮抑制素在体外浓度为1 μg/ml时对A549细胞生长有抑制作用,而对脐静脉内皮细胞生长没有明显抑制作用.血管内皮抑制素与顺铂联合使用较单独使用的抑瘤效果明显.血管内皮抑制素联合化疗时,每日连续给药抑瘤效果更好.%Objective:To observe the effect about different dilivery methods of endostatin on A549 cells,vascular endothelial cells andtransplanted tumor of BALB / c nude mice. Methods:To treat A549 cells and endothelial cells with different concentrations of endostatin,detected the cell proliferation by MIT assay, build BALB / c nude mice model inoculated A549 cells , observed changes of tumor volume, weight , detected differential expression of CD31 and CD34 molecules in the tumor tissue by immunohistochemical method. Results: Under the effect of different con-centrations of endostatin, value - added A549 cells were not reduced while the concentration of endostatin increased , the group of 1 μg/ml was different from the control group (P < 0. 05). The proliferation ability of endostatin was not statistically significant differenct compared with control group ( P > 0. 05 ) . In vivo experiments, the tumor volume of each experimental group reduced varying degrees compared with the control group in the treatment of separate en-dostatin and combination of endostatin and Cisplatin (P<0.05) ,the effect of combined therapy were more effective than the separate. Inhibition ratios of the tumor weight was highest(50.74% ) when endostatin was alone administra-ted every other day,the effect of antitumor was best (96.41% ) when combined therapy of three weeks (endostatin 1 times/day + cisplatin 1 times/week). The expression of CD31 and CD34 molecules in the tumor tissue decreased in each experimental group showed by the results of immunohistochemistry ( P < 0. 05 ) . Conclusion: The growth of solid tumor was related with angiogenesis of the tumor. In vitro, endostatin inhibites the growth ofA549 cells in the concen-tration of 1μg/ml,human umbilical vein endothelial cell growth was not significantly inhibites. Antitumor effect ofen-dostatin combined with cisplatin was better than the endostatin only. Antitumor effect of endostatin combined with chemotherapy may be better while endostatin daily continuous administration , these provids a reference for choice of the endostar scheme.【总页数】5页(P2223-2227)【作者】赵强;王华贝;庞海林;马宁强;张贺龙【作者单位】第四军医大学唐都医院肿瘤科,陕西西安710038;第四军医大学唐都医院肿瘤科,陕西西安710038;第四军医大学唐都医院肿瘤科,陕西西安710038;第四军医大学唐都医院肿瘤科,陕西西安710038;第四军医大学唐都医院肿瘤科,陕西西安710038【正文语种】中文【中图分类】R730.54【相关文献】1.重组人血管内皮抑制素结合放化疗对鼻咽癌临床疗效、预后及血清血管内皮生长因子的影响 [J], 曹淑琴;朱朝勇;张宽2.重组人血管内皮抑制素注射液佐治晚期胃癌的疗效及对血清中血管内皮生长因子、S100A4和癌胚抗原相关细胞黏附分子的影响 [J], 贾长河;王文玉;任颖;张昊;兰玲;刘博伟;于静3.胸腔内血管内皮抑制素注射液对老年恶性胸水患者胸腔积液血管内皮生长因子、表皮生长因子受体的影响 [J], 李燕;赵君慧;骆玉霜;李国元;李佳艺4.重组人血管内皮抑制素联合化疗对中晚期恶性肿瘤患者化疗效果及血管内皮生长因子水平的影响 [J], 张秦;陈华飞;朱有才5.重组人血管内皮抑制素注射液联合同步放化疗对不可切除Ⅲ期非小细胞肺癌患者血清血管内皮生长因子水平及预后的影响 [J], 文军;舒小镭因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
吉非替尼对A549细胞增殖及细胞周期、凋亡的作用
吉非替尼对A549细胞增殖及细胞周期、凋亡的作用周苏娜;张明鑫;王健生;莫非;张佳;王峥;王昌燕;黄辰【期刊名称】《现代肿瘤医学》【年(卷),期】2010(018)005【摘要】目的:观察吉非替尼对人非小细胞肺癌A549的生长增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响.方法:用5-40μmol/L浓度范围内的吉非替尼和A549细胞共培养24、48、72h,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测吉非替尼对细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测其对细胞凋亡及细胞周期分布的影响;利用抗Capspase-3 的ELISA(酶联免疫吸附)法检测是否发生细胞凋亡.结果:在5-40μmol/L浓度范围内,吉非替尼对A549细胞的增殖有明显的抑制作用,并呈时间和剂量依赖性,以40μmol/L作用72h时的抑制率最高.流式细胞仪检测显示10μmol/L-40μmol/L的吉非替尼作用可使细胞发生G0/G1期阻滞,但即使作用48h也未发现凋亡细胞.ELISA法显示48h内,吉非替尼组与正常细胞组的Capspase-3浓度无统计学差异,但作用72h时出现凋亡.结论:吉非替尼在5-40μmol/L浓度下作用时间小于48h时,其对A549细胞的增殖抑制可能是通过阻滞A549细胞于G0/G1期而非引起细胞凋亡实现的,但作用时间达到72h时,其可以诱导A549发生细胞凋亡.【总页数】4页(P841-844)【作者】周苏娜;张明鑫;王健生;莫非;张佳;王峥;王昌燕;黄辰【作者单位】西安交通大学医学院第一附属医院,陕西,西安,710061;西安交通大学医学院第一附属医院,陕西,西安,710061;西安交通大学医学院第一附属医院,陕西,西安,710061;齐齐哈尔市中医院,黑龙江,齐齐哈尔,161000;西安交通大学医学院第一附属医院,陕西,西安,710061;四川大学华西医院,四川,成都,610041;西安交通大学医学院第一附属医院,陕西,西安,710061;西安交通大学医学院,陕西,西安,710061【正文语种】中文【中图分类】R730【相关文献】1.表皮生长因子受体抑制剂吉非替尼对食管癌EC9706细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响 [J], 白玉;刘尚国;姚文健;赵宝生2.曲马多对肺腺癌A549细胞增殖与凋亡和细胞周期的影响 [J], 许彦劼;夏明3.白花蛇舌草对A549肺癌干细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响 [J], 曾珠;何成诗;孙剑峰;刘磊;杨秀丽;肖玮4.灯盏花素对肺癌A549细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响 [J], 缪慧; 朱伯金; 邵伯云5.细胞周期素D1反义脱氧寡核苷酸对A549细胞增殖及凋亡的调控作用 [J], 蒋力;闵家新;李学昌;姚珂因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
藤梨根提取物抗人肺腺癌A549细胞生长的实验研究
藤梨根提取物抗人肺腺癌A549细胞生长的实验研究
孙雪飞;杜贾军;孟龙;陈景寒
【期刊名称】《山东医药》
【年(卷),期】2006(46)9
【摘要】采用MTT检测法、集落形成试验、流式细胞术检测细胞凋亡及建立裸鼠移植瘤模型进行体内实验,观察藤梨根提取物对肺腺癌A549细胞的生长抑制作用.结果显示各浓度的藤梨根提取物对肺腺癌A549细胞均有较强的抑制效应,且呈现出明显的时相性和量-效依赖性;藤梨根提取物作用后G0～G1期细胞数增加,细胞出现凋亡,并随药物浓度增大作用增强;移植瘤体内试验显示藤梨根提取物高剂量组移植瘤生长缓慢,体积明显小于对照组及低剂量组.表明藤梨根提取物对人肺腺癌
A549细胞在体内外均有生长抑制作用,并可诱导其细胞凋亡.
【总页数】2页(P40-41)
【作者】孙雪飞;杜贾军;孟龙;陈景寒
【作者单位】武警山东省总队医院,山东,济南,250014;山东省立医院;山东省立医院;山东省立医院
【正文语种】中文
【中图分类】R734.2
【相关文献】
1.藤梨根提取物对肺癌A549细胞凋亡及细胞周期的影响 [J], 孙雪飞;裴艳涛;杨国涛;尹秋伟;吴铭生
2.双氢青蒿素抗人肺腺癌A549细胞生长的实验研究 [J], 陈卫强;戚好文;吴昌归;崔燕;刘斌;李焰;吴军正
3.藤梨根提取物抗肺癌作用的体内实验研究 [J], 孙雪飞;裴艳涛;杨国涛;尹秋伟;吴铭生
4.藤梨根提取物抑制肺癌A549细胞增殖作用机制研究 [J], 孙雪飞;尹秋伟;裴艳涛;杨国涛;李希波;王德江
5.太白山藤梨根提取物对人喉癌细胞HeP-2生长抑制作用分析 [J], 郭洁;张晓双;刘继平
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奥曲肽对人肺癌细胞株A549的增殖抑制作用
奥曲肽对人肺癌细胞株A549的增殖抑制作用田春桃;韩利艳;范慧娟【期刊名称】《郑州大学学报（医学版）》【年(卷),期】2008(043)001【摘要】目的:探讨奥曲肽对于人肺癌细胞株A549生长的抑制作用.方法:以体外培养的人肺癌细胞株A549为靶细胞,运用四氮唑盐法(MTT法)观察奥曲肽作用48 h 后对于人肺癌细胞株生长的影响.以流式细胞仪分析其对细胞周期的影响.结果:MTT 法结果显示奥曲肽作用48 h可抑制A549的生长, 并呈剂量依赖性, IC50=1.62 mg/L.流式细胞仪测定结果显示:G0/G1期细胞比例增加,G2/M期细胞比例减少,且奥曲肽质量浓度增高到1.60 mg/L以上时,G2/M期比例均降为0,细胞周期直接阻滞在G0/G1期,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:奥曲肽可抑制体外培养的人肺癌细胞株A549增殖,机制可能是将肺癌细胞阻滞于G0/G1期.【总页数】3页(P139-141)【作者】田春桃;韩利艳;范慧娟【作者单位】三门峡市中心医院肿瘤科,三门峡,472000;三门峡市中心医院肿瘤科,三门峡,472000;三门峡市中心医院肿瘤科,三门峡,472000【正文语种】中文【中图分类】R734.2【相关文献】1.索拉非尼联合吉非替尼对人肺癌细胞株A549的生长抑制作用 [J], 温莹浩;林小小;钱海华;彭济勇;汤娟;翟蓓蓓2.RASSF1A基因转染对人肺腺癌细胞株A549增殖的抑制作用 [J], 邓征浩;周建华;曹慧秋;沈明;文继舫3.人参皂苷CK对人肺腺癌A549细胞株的增殖抑制作用及其机制 [J], 王红;邓晶;刘珊;付凤莲;蒋永新4.奥曲肽对人肺癌细胞株A549化疗增效作用的体外研究 [J], 田春桃;韩利艳;范慧娟5.吲哚-3-原醇对人肺癌细胞株A549的促凋亡和增殖抑制作用 [J], 付娟;尹宜发;姚霞;杨欣因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
《达肝素钠对人肺腺癌A549细胞中VEGFR及HIF-1α作用的研究》
《达肝素钠对人肺腺癌A549细胞中VEGFR及HIF-1α作用的研究》一、引言肺腺癌是一种常见的肺癌类型，其发病率和死亡率均较高。
血管内皮生长因子受体（VEGFR）和缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在肿瘤生长和转移中发挥着重要作用。
达肝素钠是一种抗凝药物，具有多种生物活性，包括抗肿瘤作用。
本研究旨在探讨达肝素钠对人肺腺癌A549细胞中VEGFR及HIF-1α的作用，以期为肺腺癌的治疗提供新的思路。
二、材料与方法1. 材料人肺腺癌A549细胞株、达肝素钠、免疫荧光染色试剂盒、RT-PCR试剂盒、Western Blot试剂盒等。
2. 方法（1）细胞培养：A549细胞在适宜的培养条件下进行培养和传代。
（2）药物处理：将A549细胞分为对照组和达肝素钠处理组，处理时间分别为24h、48h和72h。
（3）免疫荧光染色：检测各组细胞中VEGFR和HIF-1α的表达情况。
（4）RT-PCR和Western Blot：分别从基因和蛋白水平上检测VEGFR和HIF-1α的表达变化。
三、结果1. 达肝素钠对A549细胞中VEGFR表达的影响免疫荧光染色结果显示，达肝素钠处理后，A549细胞中VEGFR的表达逐渐降低，且随着处理时间的延长，降低程度逐渐增加。
RT-PCR和Western Blot结果也显示，达肝素钠处理组VEGFR的基因和蛋白表达水平均低于对照组。
2. 达肝素钠对A549细胞中HIF-1α表达的影响与VEGFR类似，达肝素钠处理后，A549细胞中HIF-1α的表达也呈降低趋势。
免疫荧光染色结果显示，处理组细胞的HIF-1α荧光强度明显弱于对照组。
RT-PCR和Western Blot结果也显示，达肝素钠处理组HIF-1α的基因和蛋白表达水平均降低。
四、讨论本研究发现，达肝素钠能够抑制人肺腺癌A549细胞中VEGFR和HIF-1α的表达。
VEGFR是血管生成的关键因子，其表达降低可能抑制肿瘤的血管生成，从而抑制肿瘤的生长和转移。
腺苷对人肺腺癌细胞A549增殖和细胞周期的影响
ｗ ｒ ｒ ａｅ ｉｈ ｉ０ｍｏ／ ｏ ４ ｈ ｃｉ ｙ ｌ ａ ｎｌ ｚｄ ｂ ｌｗ ｃｔ ｍｔ ｙ ｎ —ａ Ｎ Ｖ Ｆ ｅｅｔｅ ｔｄｗ ｔ ０ ｌＬｆｒ ２ ，ｅ ｌｃｃ ｅｗ ｓａａ ｙｅ ｙｆｏ ｙ ｏｅｒ ．Ｏ ｅ ｙＡ０ ＡＯ ｗ
５％ ５ ；作 用 时间 ７ ，各 腺 苷 处 理 组 细胞 存 活 率 分别 为 ８ ％ ６ 、５ ％ ８ ，表 明 腺 苷对 Ａ ４ 细 胞 具 有 ２ｈ ６ 、５％ ２ 、３ ％ ５９ 生 长抑 制 效应 ，抑 制 率 随 着隙 苷浓 度 升 高 而增 强。 与对 照 组 相 比 ，１ ０￣ ｏ ／ 腺 苷 作 用 于 Ａ ４ ０ ｍｌＬ ５ ９细胞 ２ ４ｈ 后 ，能增 加 Ｇ 期 细 胞 比例 （ 照 组 ：５ ．７± ０ ７ ；１０ ｍ ｌ Ｌ ５ ０ １ 对 ９０ ．０ ０ ｏ／ ：６ ．５± ０ ６ ， ｔ ｌ ．４ ．２ — １０ 、Ｐ＜ ． １ ， Ｏ０）
的腺 苷 分别 作 用 Ａ ４ ５９细胞 ２ 、４ 和 ７ 后 ，采 用 Ｍ Ｔ方法检 测 细胞 光 密度 值 ，分 析 不 同 时 间 、不 同浓度 ４ ８ ２ｈ Ｔ 的腺 苷对 Ａ ４ 胞存 活 率 的 影响 。 以 ｌ ０ｐ ｏ／ ５ ９细 Ｏ ｍ ｌ Ｌ的 腺苷 作 用 Ａ ４ ５ ９细胞 ２ ， 采 用流 式 细胞 术检 测 其细 ４ｈ
ｃ ｌ ｓ ｗ ｒ ｅ ｅ ｔ ｄ ｂ Ｔ Ｃ ．Ａ ｔ ｒ Ａ ４ ｅ ｌ ｅ ｅ ｔ ｅ ｔ ｄ ｗ ｔ 、１ １ ，１ ０ ａ ｄ ｌ ０ ｍ ｌ Ｌ ｅ ｌ ｅ ｅ ｄ ｔ ｃ ｅ ｙ Ｒ — Ｒ ｆ ｅ ５ ９ ｃ ｌ ｓ ｗ ｒ ｒ ａ ｅ ｉ ｈ ０ ０ ０ ｎ ０ ｐ ｏ ／ Ｐ ０
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a549 细胞拷贝数
a549 细胞拷贝数A549细胞是一种人类肺腺癌细胞系，广泛应用于癌症研究和抗肿瘤药物筛选。
A549细胞的拷贝数是指在特定条件下，细胞的繁殖和分裂产生的细胞数量。
本文将从细胞的特性、繁殖机制、影响因素等方面探讨A549细胞的拷贝数。
一、A549细胞的特性A549细胞是一种人源性肺腺癌细胞系，最早由美国国立癌症研究所（NCI）于1972年从一名56岁的男性患者的胸腺癌组织中分离出来。
该细胞系具有肺腺癌的典型特征，包括一定程度的腺样分泌、高度侵袭性和转移能力。
二、A549细胞的繁殖机制A549细胞的繁殖主要通过细胞周期的重复进行。
细胞周期包括四个阶段：G1期（细胞增长期）、S期（DNA复制期）、G2期（前期）和M期（有丝分裂期）。
在G1期，细胞进行生长和准备DNA复制的准备工作。
在S期，细胞进行DNA复制，每一个染色体复制成两个具有相同基因信息的染色体。
在G2期，细胞继续生长并准备进入有丝分裂。
在M期，细胞进行有丝分裂，将复制的染色体均匀地分配给两个新的细胞。
三、影响A549细胞拷贝数的因素1. 培养基条件：A549细胞的培养基成分、温度、湿度、CO2浓度等条件会直接影响细胞的生长和繁殖速度。
适宜的培养基条件可以促进A549细胞的拷贝数增加。
2. 细胞密度：细胞密度是指在给定的培养器中存在的细胞数量。
较高的细胞密度会影响细胞间的营养供应和废物排出，从而影响细胞的繁殖速度。
3. 营养物质：适宜的营养物质供应对A549细胞的生长和繁殖至关重要。
细胞需要蛋白质、脂类、糖类等多种营养物质来维持其正常的代谢和生长。
4. 细胞分裂周期：A549细胞的分裂周期决定了细胞的繁殖速度。
细胞周期的长短受多种因素调控，如细胞外信号、内环境因子等。
5. 外界环境：外界环境的因素，如温度、湿度、氧浓度等，也会对A549细胞的繁殖速度产生影响。
不同的环境因素可能会对细胞的生长和分裂产生不同程度的影响。
四、如何控制A549细胞的拷贝数1. 优化培养条件：合理选择培养基的配方和培养条件，如温度、CO2浓度等，以达到促进A549细胞繁殖的目的。
回生口服液药物血清对人肺癌A549细胞增殖及周期的影响
回生口服液药物血清对人肺癌A549细胞增殖及周期的影响肖桦;孙雪英;赖莉;李罗翔【期刊名称】《医学信息》【年(卷),期】2014(000)013【摘要】目的观察回生口服液药物血清对人肺癌细胞A549增殖及周期的影响。
方法大鼠灌胃制备回生口服液药物血清,采用MTT法观察药物血清干预24、48、72 h后对细胞增殖的作用(分为空白组及药物血清高、中、低剂量组)；采用流式细胞检测分析药物血清干预24h对细胞周期的影响(分为空白组、空白组及药物血清高、中、低剂量组)。
结果各药物血清组与空白组之间的吸光度差异有统计学意义（P<0.05),随着作用时间的延长,其吸光度逐渐降低,抑制率逐渐增高（P<0.05)。
药物血清组细胞周期G1期增多,G2期及S期减少。
结论益气化瘀养阴解毒方对肺癌细胞具有抑制作用,可能与其抑制细胞分裂有关。
【总页数】2页(P214-215)【作者】肖桦;孙雪英;赖莉;李罗翔【作者单位】成都中医药大学，四川成都 610000;成都中医药大学，四川成都610000;成都中医药大学，四川成都 610000;成都中医药大学附属医院，四川成都 610000【正文语种】中文【相关文献】1.益气化瘀养阴解毒方药物血清对人肺癌A549细胞增殖及周期的影响 [J], 郜文辉;曾普华;滕久祥;唐珍2.连黛片药物血清对人胃癌细胞株MGC-803增殖周期的影响 [J], 周本杰;陈蔚文;王建华3.白露汤含药血清对人肺癌A549细胞活力、凋亡及周期的影响 [J], 朱紫薇;周忠光;韩玉生4.黄芪建中汤含药血清联合顺铂对人肺癌A549细胞增殖及E-cadherin、 Snai11表达的影响 [J], 王晓芳; 于丹; 刘春英5.芪玉三龙汤药物血清对肺癌A549细胞增殖及凋亡的影响 [J], 刘桐;王小乐;高雅婷;郑莉莉;童佳兵;李泽庚因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
MEIS2基因沉默致A549细胞凋亡、细胞周期阻滞及调控机制研究
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那可丁对人肺癌细胞A549生物学功能的影响
那可丁对人肺癌细胞A549生物学功能的影响李岩;张德巍;杨大业【摘要】目的探讨那可丁对人肺癌细胞系A549细胞生物学功能的影响及其作用机制.方法使用那可丁(10μmol/L和20μmol/L)作用于A549细胞,通过MTT观察那可丁对细胞增殖的影响;通过Western blotting和实时PCR检测那可丁作用于A549细胞后CyclinD1、 BCL-2、MMP2蛋白和mRNA的表达;Hoechst 33258染色检测那可丁对A549细胞凋亡的影响;Transwell检测那可丁对细胞转移的影响.结果 MTT检测发现10、20μmol/L那可丁分别作用于A549细胞24 h后对细胞增殖抑制率分别为(32.98±1.09)％和(49.56±3.98)％,差异有统计学意义(P ＜0.05).Hoechst 33258染色显示那可丁促进细胞凋亡,Transwell实验显示那可丁抑制A549细胞转移.Western blotting和实时PCR结果显示那可丁抑制A549细胞中Cyclin D1、BCL-2和MMP2的表达.结论那可丁能够抑制人肺癌细胞系A549细胞生长及转移、促进A549细胞凋亡,可以作为治疗肺癌的潜在药物.%Objective To explore the effect of noscapine on the biological function of A549 cells and its underlying mechanism. Methods Concentrations of 10 μmol/L and 20 μmol/L of noscapine were used on the A549 cells. The effect of noscapine on their proliferation was observed via the MTT assay. Western blotting and real time PCR were used to detect the effects on Cyclin D1, BCL-2, and MMP2. The Hoechst 33258 staining assay was used to observe the effects of noscapine on the apoptosis of A549 cells. The metastasis of A549 cells was detected by using the Transwell assay. Results The MTT assay showed that the rate of inhibition of cell proliferation after treatment with 10 μmol/L and 20 μmol/L noscapine were (32.98±1.09) ％ and(49.56±3.98) ％, with a significant difference between the values (P ＜ 0.05). Hoechst 33258 staining evinced that noscapine promoted apoptosis, while the Transwell assay displayed that noscapine inhibited A549 cell metastasis. Western blotting and real time PCR indicated that the expression of Cyclin D1, BCL-2, and MMP2 in A549 cells was inhibited by noscapine. Conclusion Noscapine can inhibit the growth and metastasis of the lung cancer cell line A549 and promote the apoptosis of A549 cells. In conclusion, noscapine can potentially be used as a chemotherapeutic drug for lung cancer.【期刊名称】《中国医科大学学报》【年(卷),期】2019(048)001【总页数】5页(P66-70)【关键词】那可丁;A549;增殖;凋亡;转移【作者】李岩;张德巍;杨大业【作者单位】中国医科大学附属第四医院第三普通外科,沈阳 110032;中国医科大学附属第四医院第三普通外科,沈阳 110032;中国医科大学附属第四医院第三普通外科,沈阳 110032【正文语种】中文【中图分类】R734.2肺癌是发病率和死亡率均高的恶性肿瘤，我国由于人口老龄化加剧、环境恶化以及人们不良生活习惯增加，肺癌发病率和死亡率呈明显上升趋势［1-2］。
重组人5型腺病毒在体外对A549细胞的影响
均购 自 Ｇｂｏ Ｂ Ｌ公 司 ；ｒｎｗ ｌ小 室 、 ｎ 试 剂盒 均 购 自美国 ｉ ＰＲ ｃ Ｔａ ｓｅ ｌ Ｍ
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Ｋ ｅ ｗｏｒ ｓ：ｅ ｏ ｙ ｄ ｒｃ ｍｂｉａ ｈ ｍ ａ ａ ｎｏ ｉ ｓ ｙ ｅ ：Ａ５４ ｃ ｌｓ ｐ ｐｏ ｉ； ｅｌ ｇ ａ ｉｎ ｎ ｔ ｕ ｎ ｄｅ ｖｍ ｔｐ ５ ９ ｅｌ；ａ ｏ ｔｓｓ ｃ ｌ ｍｉｒ ｔｏ ｓ
Ｍｏｅ ２０ Ｏ 型细胞孵育箱 （ ｄｌ ３ ０Ｃ ： 美国 Ｓ ｅａ ｈｌ ｂ公司 ）移液器 （ ｌ ； 德 国 Ｅ ｐｄｒ公 司） Ａ ４ ｐｅ ｏ ｆ 。 ５ ９细胞 （ 由第三军医大学西南 医院脑外科 夏 永智博士惠赠 ）重组人 ５型腺病毒 （ 品名安柯瑞＠， 海三维生 ； 商 上
ｓｍ ｉ ａ公 司 ；Ｕ Ｅ ｇ Ｔ Ｎ Ｌ试 剂盒 （ 海华 舜 生 物 工 程 有 限 公 司 ） 上 。
１ ２ 试 验 方 法 ．
１２１ Ａ ４ ． ． ５ ９细胞培养及传代 将复苏后的 Ａ ４ ５ ９细胞置含 １ ％胎牛血清的 Ｒ Ｍ ６ ０培养 ０ ＰＩ ４ １
液 中， ５ Ｃ ： ３ 于 ％ Ｏ 和 ７℃ 、 和 湿 度 的 孵 育 箱 中 培养 ， 胞 贴 壁 形 饱 细
牛血清 的培养液配成单个细胞悬液 ， 接种到 ９ ６孔板 ， 每孔 １ ０ — ０ ０
１ ０ ００ ０个细胞 ， 每孔体积 ２０ ， ０ 培养 ３ 后 ， ～５ｄ 每孔加 Ｍ Ｆ Ｔ 溶液 （ ／ ）０ ， ５ｇ Ｌ ２ 继续孵育 ４ｈ 终止培养 ， ， 小心吸弃孔 内培 养上清液 ， 每孔加 １０ ５
不同浓度哇巴因对A549细胞增殖及死亡的影响
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【 ｂｔ ｃ】 Ｏ ｊ ｔ ｅＴ ｖ ｕｔ ｔ ｆｃ ｏ ｓｅ ｉ ｓ ｉ ｕ ｐｉ ｉｔ ｕｂｉ ｏ ｅｐ ｌｅ ｔｎａｄ Ａ ｓ ａｔ ｒ ｂｅ ｉ ：ｏｅａ ａ ｅｅｅ ｃ ｃ ｏ ｕ ｐｍ ｈ ｉｒ ａａ ｎｔ ｒｉｒｉ ｎ ｃｖ ｌ ｅｈ ｔｆｐ ｉ ｄ ｍ ｆ ｎ ｂｏ ｏ ｎ ｈ ｏ ａｏ ｆ
士后 ， 博士生导师 ， 主要从事冠 心病 的诊 断与治 疗、 冠 心病的介 入治疗研究 。
凋 亡率 按试 剂 盒说 明进行 ， 同时 以不 加 Ａ ｎｘｎＶ—ＦＴ ｎｅｉ ＩＣ 及 Ｐ 的一管作为 阴性对 照 。实 验 三次 ， 各组 平均 值作 为 Ｉ 取
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互志红 ， 等
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不 同浓度 哇巴因对 Ａ ４ ５ ９细胞增殖及死亡 的影响
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凋亡率 。
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低氧对人肺腺癌A549细胞生长的影响
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胞化 学结果显 示随着低 氧 时间的延 长，ｃ ｂ１ ２表达减 少， ｃｓａｅ３表 达增加。Ｒ — Ｃ 而 ａｐ 一 ｓ Ｔ Ｐ Ｒ检 测 Ｈ Ｆ ｌ Ｎ Ｉ ＿ ｍＲ Ａ的结果 ｔ ｅ 显示 １ 、４ ４ 低 氧组 Ｈ Ｆ ｌ Ｎ ２ ２ 、 ８ｈ Ｉ—ｅｍＲ Ａ水平均较相应 的常氧组增加 （ ｔ Ｐ＜００ ） ． 。结论 ： 氧环境可抑制 Ａ ４ ５ 低 ５９细胞 增 殖， 细胞 周期 阻滞 于 Ｇ／ ０ ， 使 Ｇ 期 并促进 细胞 凋亡 ， 其作 用可能是 由于低 氧环境 影响 ＨＩ—ｅ ｍＲ Ａ水平及 通过 Ｆｌ Ｎ ｔ
《达肝素钠对人肺腺癌细胞荷瘤鼠的肿瘤生长转移抑制的实验研究》
《达肝素钠对人肺腺癌细胞荷瘤鼠的肿瘤生长转移抑制的实验研究》一、引言肺腺癌作为常见的肺癌类型之一，其发病率的持续上升对人类健康造成了严重威胁。
为了有效控制肿瘤的生长与转移，许多新型治疗手段不断被研究和应用。
达肝素钠作为一种常见的药物，近年来被关注于其在癌症治疗中的应用潜力。
本研究将重点关注达肝素钠对人肺腺癌细胞荷瘤鼠的肿瘤生长与转移的抑制效果。
二、材料与方法1. 实验材料本实验所使用的达肝素钠药物、肺腺癌细胞株、实验动物（荷瘤鼠）等均经过严格筛选与验证。
实验所用仪器包括显微镜、光学成像系统、超声成像设备等均为国内知名品牌，具有可靠的准确性和可靠性。
2. 实验方法本实验采用荷瘤鼠模型，通过给药前后的肿瘤生长情况、病理学检查、分子生物学检测等方法，对达肝素钠的抗肿瘤效果进行评估。
具体包括以下几个方面：（1）肿瘤细胞的种植与培养；（2）荷瘤鼠模型的建立；（3）实验分组与给药；（4）观察指标的确定（如肿瘤大小、转移情况等）；（5）病理学检查与分子生物学检测。
三、实验结果1. 肿瘤生长情况通过定期测量肿瘤大小，我们发现达肝素钠给药组荷瘤鼠的肿瘤生长速度明显低于对照组。
在给药后的第X周，实验组肿瘤大小显著小于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。
2. 肿瘤转移情况通过对荷瘤鼠的肺部进行病理学检查，我们发现实验组肺部的转移灶数量明显少于对照组，且转移程度也较轻。
此外，实验组小鼠的生存期较对照组有显著延长。
3. 分子生物学检测结果通过对达肝素钠作用的相关基因和蛋白进行检测，我们发现实验组中与肿瘤生长和转移相关的基因表达水平明显低于对照组。
这表明达肝素钠可能通过调节相关基因的表达来抑制肿瘤的生长和转移。
四、讨论本实验结果表明，达肝素钠对人肺腺癌细胞荷瘤鼠的肿瘤生长和转移具有明显的抑制作用。
这可能与达肝素钠调节相关基因表达、改善肿瘤微环境等机制有关。
然而，具体的抑制机制还需进一步研究。
此外，本研究仅在动物模型中验证了达肝素钠的抗肿瘤效果，其在实际临床应用中的效果还需进一步研究。
低分子肝素对肺腺癌A549裸鼠VEGF表达影响
低分子肝素对肺腺癌A549裸鼠VEGF表达影响发表时间：2020-05-20T08:52:28.016Z 来源：《医药前沿》2020年6期作者：陈小军[导读] 探讨低分子肝素对肺腺癌A549裸鼠血管内皮细胞生长因子（VEGF）表达的影响。
（甘肃省人民医院甘肃兰州 730000）【摘要】目的：探讨低分子肝素对肺腺癌A549裸鼠血管内皮细胞生长因子（VEGF）表达的影响。
方法：30只Balb/c裸鼠分为模型组与肝素组，每组15只，均采用注射肺腺癌A549细胞建立肺癌裸鼠模型。
模型组不给予任何药物治疗，肝素组饮水中加入肝素500IU/ml，持续观察4周，2次/周。
结果：所有裸鼠均建模成功，表现为精神差、毛发脱落、活动度减少、皮毛缺少光泽，饲料消耗量减少。
治疗4周后肝素组的抑瘤率显著高于模型组（P＜0.05），肝素组的瘤组织VEGF阳性表达率显著低于模型组（P＜0.05）。
结论：低分子肝素在肺腺癌A549裸鼠中的应用能抑制VEGF的表达，具有很好的抑瘤效果。
【关键词】肺腺癌；低分子肝素；血管内皮细胞生长因子；裸鼠【中图分类号】R735.9 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2020）06-0103-01肺癌是癌症最常见的恶性肿瘤之一，其生长和转移都需要新生血管的支持，多种信号分子共同参与并调控肿瘤新生血管生成，血管内皮细胞生长因子（VEGF）是目前已知活性最强的血管生成因子，可促进肿瘤血管生成，与肿瘤患者预后密切相关。
本研究利用低分子肝素治疗肺腺癌A549裸鼠模型，旨在明确低分子肝素对肿瘤生长的影响。
1.资料与方法1.1 一般资料研究时间为2019年3月—9月，肺腺癌A549细胞由本实验室保存，胎牛血清、DMEM培养基、RPMI1640培养基粉末购自美国Gibco公司，抗VEGF抗体购自美国Cell Signaling Techonlogy公司。
Balb/c裸鼠（雄性，体质量为18±2g）30只由本单位所在实验动物中心提供，动物许可号：SYXK2019-0002。
肝素对细胞增生及代谢影响的机制
肝素对细胞增生及代谢影响的机制
黄振飞;姚建
【期刊名称】《临床肾脏病杂志》
【年(卷),期】2002(002)001
【摘要】@@ 肝素是临床上常用的一种抗凝药物,应用于治疗和预防血栓、栓塞性疾病.近年来体外细胞培养及增殖性肾小球疾病、动脉硬化等的动物模型研究发现:
肝素除抗凝作用外,还能影响细胞的增生和代谢,其中研究较多的是对血管平滑细胞、肾小球系膜细胞、肿瘤细胞及腹膜间皮细胞等的影响[1～3].本文就肝素对这些细
胞可能的抗增殖及代谢机制作一综述.
【总页数】3页(P32-33,31)
【作者】黄振飞;姚建
【作者单位】200080,上海,上海市第一人民医院肾脏科;200080,上海,上海市第一
人民医院肾脏科
【正文语种】中文
【中图分类】R9
【相关文献】
1.低分子肝素与普通肝素应用于中心静脉导管封管对机体脂代谢影响的比较 [J],
刘旺兴;齐士君;龙馨;段建秀
2.乙酰肝素酶抑制剂对人脐静脉内皮细胞增生和乙酰肝素酶表达的影响 [J], 唐维强;李晓艳
3.乙酰肝素酶抑制剂对人脐静脉内皮细胞增生和乙酰肝素酶表达的影响 [J], 唐维
强;李晓艳
4.肝素对大鼠thy-1肾炎肾小球细胞增生和u-PA/PAI-1表达的影响 [J], 秦蓉;张农;刘琛;陈广平;张秀荣;郭慕依
5.低分子肝素抑制肾小球系膜细胞增生机制的研究 [J], 吴小川;易著文;肖建武;何小解
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达肝素钠对A549细胞生长状态及细胞周期的影响(一)
作者：陈克芳陈芳兰黄龙杰
【摘要】目的研究达肝素钠对体外生长的肺腺癌A549细胞活性及细胞周期的影响。
方法用6种不同浓度(0、2、10、50、100和500IU/ml)的达肝素钠干预A549细胞的生长，用MTT 方法在4个时间点(6、12、24和36h)检测细胞活性;将经过24h普通培养的A549细胞继续在含有50IU/ml达肝素钠的培养液中培育，以正常培育的细胞作为对照组，将两组细胞24h 后以PI染液染色，用流式细胞仪检测并分析细胞周期。
结果达肝素钠降低A549细胞活性，这种作用表现出时间依赖性和浓度依赖性;达肝素钠主要抑制细胞在G1期。
结论达肝素钠对A549细胞活性的降低与对细胞周期的抑制作用有关。
【关键词】低分子量肝素;达肝素钠;肺腺癌;细胞周期
肝素及其衍生物的抗细胞增殖作用，目前在平滑肌上进行的研究较多。
Guyton等〔1〕报道，不论在体内还是在体外，肝素都能降低平滑肌细胞(SMC)的有丝分裂。
其他部位的SMC，如气道及肠道、子宫肌层及子宫肌瘤的生长也能被肝素抑制〔2〕。
也有在内皮细胞上进行的关于肝素的抗增殖作用研究，如Khorana等〔3〕报道肝素抗微血管内皮细胞(MVECs)和奇静脉内皮细胞的作用。
关于未分级肝素(UFH)或低分子肝素(LMWH)对肺腺癌A549细胞的生长抑制作用，目前较少有文献报道。
该研究选用LMWH之一的达肝素钠进行相关研究。
1材料与方法
1.1主要试剂与仪器A549细胞(兰州大学医学院实验中心冻存)。
CO2细胞培养箱(Biorad公司);超净工作台(CleanBlench公司);全自动酶标仪(Biorad公司)。
RPMI1640培养基(Gibco);达肝素钠(Fragmin)。
1.2实验方法
1.2.1MTT法检测细胞活性将培养的A549细胞用胰酶消化，调整细胞浓度,培养24h。
弃去培养基，加入含有所需浓度达肝素钠的RPMI1640培养基，继续培养。
实验结束前4h,加入MTT，继续培养。
4h后弃去培养基，加入DMSO，避光振荡10min。
选择570nm波长，在酶联免疫检测仪上测定各孔的光吸收值(OD)。
1.2.2PI染色法检测细胞周期分布将培养的A549细胞用0.25%的胰酶消化，传代到6孔板的各孔中，培养24h。
弃去培养基，加入含有所需浓度达肝素钠的RPMI1640培养基，继续培养。
在设定的时间点按组收集细胞。
收集的细胞以预冷PBS洗涤2次。
离心5min，弃上清。
加入含0.5%PI和0.01%RNase染液，重悬细胞，室温避光反应30min。
1h内流式细胞仪检测，在488nm激发波长下测定DNA含量，分析细胞周期的分布情况。
1.3统计学分析数据以x±s表示，SPSS11.0统计软件分析,两组间比较用t检验。
2结果
2.1达肝素钠对A549细胞细胞活性的影响用6种不同浓度(0、2、10、50、100和500IU/ml)的达肝素钠干预A549细胞的生长，用MTT方法在4个时间点(6、12、24和36h)检测细胞活性。
达肝素钠能降低A549细胞活性，而且这种作用表现出时间和浓度依赖性。
在不含达肝素钠的培养基中培育的细胞，其12h和24h的细胞活性基本一致，但24h的细胞活性明显下降，这种下降是由培养基营养成分的耗竭所致，故24h以前的细胞活性值较能准确反应药物对细胞的影响。
该数据还显示，用高浓度的达肝素钠(100和500IU/ml)培养细胞24h后，A549细胞活性大部分被抑制，但这种抑制可能与药物的毒性作用有关。
50IU/ml达肝素钠在干预细胞生长24h后能抑制大约50%的细胞活性。
为避免培养基成分的变化和药物毒性作用对实验结果的干扰，在随后的试验中，选择50IU/ml达肝素钠为干预浓度，测定干预24h后的各项指标。
见图1。
图1达肝素钠对肺腺癌A549细胞细胞活性的影响
2.2达肝素钠对A549细胞细胞周期的影响为观察达肝素钠对A549细胞周期进展的影响，将经过24h普通培养的A549细胞继续在含有50IU/ml达肝素钠的培养液中培育，以正常培育
的细胞作为对照组，将两组细胞24h后以PI染液染色，用流式细胞仪检测并分析细胞周期的分布。
流式细胞分析显示达肝素钠抑制细胞周期的进展。
与对照组相比，实验组细胞在G1期比率显著增加〔(75.7±2.1)%、(54.8±1.9)%;P0.05〕，在S期比率明显降低〔(11.3±1.96)%、(32.1±1.5)%;P0.05〕。
处于G2/M期的细胞比率虽有增加，但这种差异与对照组比较没有统计学意义〔(9.2±1.1)%、(11.3±2.1)%;P>0.05〕。
3讨论
临床观察发现，以UFH和LMWH为主的抗凝治疗能改善小细胞肺癌(SCLC)的预后〔4〕。
在385例进展期的实体瘤患者上进行的FAMOUS(thefragminadvancedmalignancyoutcomestudy)表明，皮下注射LMWH1年后患者生存率增加5%;患者中位生存率由对照组24.3个月增加到试验组的43.5个月〔5〕。
Klerk等进行的MALT(malignancyandlow molecular weightheparintherapy)是在具有恶性肿瘤但没有静脉血栓栓塞的302例患者上进行的另外一项试验，其基本结果与FAMOUS类似〔6〕。
研究还发现，LMWH能增强化疗药物的作用〔7〕。
另外，LMWH在肿瘤治疗上表现出的良好作用不只与其抗凝作用有关〔8〕。
对于不同种类的细胞、不同状态的细胞，对不同种类的肝素可能表现不同的反应。
文献表明，脱离静止状态的血管SMC对肝素的敏感性是处于指数增长的细胞的50到100倍〔9〕;但Mason等研究发现指数增殖状态的人奇静脉SMC对肝素的反应比静止的更明显〔10〕。