液相色谱仪基础知识 PPT课件

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三、液相色谱基本构造
高压梯度:用两台高压输液泵将两种溶剂输入。 低压梯度:在常压下将两种溶剂(或多元溶剂)混合,然后用
高压输液泵将流动相输入到色谱柱中。(混合前高压与混合 后高压)
三、液相色谱基本构造
二元梯度---需2个泵-----高压梯度 四元梯度----需比例阀一个泵--低压梯度
三、液相色谱基本构造
进样前,进样,进样后3个过程示意图
三、液相色谱基本构造
三、液相色谱基本构造
2.输液系统 流路—单泵、双泵、三元泵、四元泵、
多泵 压力—低压、中压、高压、超高压 控制方式—恒流、恒压 流动相—等度、梯度 混合方式—低压、高压 流量—分析泵、半制备泵、制备泵 材质—金属泵、非金属泵(peek)
三、液相色谱基本构造
三、液相色谱基本构造
3、荧光检测器(FLD)
高灵敏度:10-12~10-13g/mL; 高选择性:对多环芳烃,维 生素B、黄曲霉素、卟啉类化合 物、农药、药物、氨基酸、甾 类化合物等有响应对温度和流 动相的流速变化不敏感 所需试样少,适合恒量分析
三、液相色谱基本构造
4、蒸发光散射检测器(ELSD) 流动相
是利用样品组分雾化和蒸发形成 固体微粒后对光的散射现象来 检测色谱流出组分的方法(可 检测任何挥发性低于流动相的 样品。碳水化合物,类脂化合 物,表面活性剂,聚合物,药 物,氨基酸和天然产物。)
雾化
载气 D0
蒸发
散射
D
光源
二、液相色谱概述
高效液相色谱 -HPLC (High Performance Liquid Chromatography ) -是一种区别于经典液相色谱,基于仪器方法的高效能
分离手段: ������ 高性能色谱柱,高精度输液泵,高灵敏度检测
器… -广泛应用于各个领域: ������ 医药,环保,石化,生命科学,食品工业,农业… -无论在技术上,理论上,还是在应用上仍有较大的发展
1ppm=1000ppb;1ppb=1000ppt
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三、液相色谱基本构造
1、紫外-可见光检测器(UV)
三、液相色谱基本构造
2、二极管阵列检测器(DAD)
用光电二极管取代了是传统 的光电倍增管,在一次色谱操作 中可同时获得多波长的吸光度, 并且可以采用现代微机技术将各 组份的保留时间、吸收波长和吸 光度汇合一起,绘制三维谱图, 提供既定量又定性的色谱信息。
液相色谱常规分析的柱温在20-60度。 不同温度对样品的保留时间有很大的影响。 柱温箱的优点: 分析结果重现性好 提高柱效 降低柱压 保证检测稳定性
三、液相色谱基本构造
4.检测系统 灵敏度分级 ppm级 per parts of million ppb级 per parts of billion ppt级 per parts of trillion 如:浓度及浓度换算单位 1ppm即:mg/L 1ppb即:ug/L 1ppt即:ng/L
流动相:携带样品流过整个系统的流体。 固定相:静止不动的一相,色谱柱。 色谱是一种分离技术。 色谱的主要目的是对混合物中的目标物分离 和定量。
一、色谱基础知识
按流动相的物态分: 气相色谱(Gas Chromatography, GC) 用气体作为流动相(又叫载气) 液相色谱(Liquid Chromatography, LC) 用液体作为流动相(又叫洗脱剂)
泵系统为输液系统中最为核心部分,也是 整个液相色谱系统中最为核心的部分。
关于泵系统中等度、梯度、高压、低压、 二元、四元将做主要介绍。
三、液相色谱基本构造
等度分析:针对单一样品、或者简单 样品采用等度分析。示意图如下
三、液相色谱基本构造
梯度分析:对于复杂样品,一般采用梯度分析,且 必须是二元以上的泵系统。示意图如下:
二、液相色谱概述
液相色谱:以液体作为流动相的色谱分离方法。
������
适用于高沸点、大分子、强极性和热稳
定性差的化合物的分析。������
流动相具有运载样品分子和选择性分离的双重 作用。
气相色谱:以气体作为流动相的色谱分离方法。
适用于沸点较低、热稳定性好的中小分子化合物 的分析。
流动相只起运载样品分子的能力。
液相色谱基础知识
内容提要
一、色谱基础知识 二、液相色谱概述 三、液相色谱基本构造 四、液相色谱基本工作原理 五、液相色谱的用途及应用领域
一、色谱基础知识
色谱法最早是由俄国植物学家 茨维特在1906年研究用碳酸钙 分离植物色素时发现的,色谱 法(Chromatography)因之得 名。
一、色谱基础知识
色谱法是利用混合物中各组份在不同的两 相中溶解,分配,吸附等化学作用性能的差异, 当两相作相对运动时,使各组分在两相中反复 多次受到上述各作用力而达到相互分离。
两相中有一相是固定的,叫作固定相,有一 相是流动的,称为流动相流动相又叫洗脱剂, 溶剂。
一、色谱基础知识
色谱法:利用组分在两相间分配系数不同而 进行分离的技术。
空间
二、液相色谱概述
超高效液相色谱 –UPLC (Ultra Performance Liquid Chromatography ) –是区别于HPLC的液相色谱新领域 –基于小颗粒填料和LC原理的一种创新技术 –实现超高分离度、灵敏度、分析速度
三、液相色谱基本构造
主要组成部分如下: 1. 进样系统 2. 输液系统 3. 分离系统 4. 检测系统 5. 数据处理系统
三、液相色谱基本构造
1.进样系统: 自动进样系统(是否带温控) 手动进样系统
核心部件: 六通阀
三、液相色谱基本构造
六通阀原理示意图
取样时,流动相 直接进柱,进样口与定 量管连接,样品充满定 量管后,多余样品从6 流出。
进样时,泵将流动 相压入定量管,将样品 全部进入色谱柱分析。
三、液相色谱基本构造
3.分离系统 3.1色谱柱 色谱柱是HPLC分离系统的关键! 色谱柱分类:可根据柱管、类型、规格大小、填料、分离类型进行分类。 色谱柱标签的识别:
三、液相色谱基本构造
3.2 柱温箱
柱温箱的作用: 控温系统大多数并不是HPLC的必须备件,凝胶系统一般是要求控温的,
采用示差检测最好配置控温箱,离子色谱也同样。有些仪器除了加热的 控温系统外,还自带低温冰箱。
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