液相色谱仪基础知识 PPT课件
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高效液相色谱-HPLCppt课件.ppt
色谱法的分类
按固定相的形态分:
平面色谱 o 纸色谱
o 薄层色谱
柱色谱
▪篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
色谱法的分类示意图
▪篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
▪ 高压梯度洗脱（高压混合，高压进柱，2个 泵。）
▪篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
▪安捷伦泵：小视频 ▪色谱学堂：泵
▪篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
色谱法原理及分类
什么是色谱法 色谱法溯源 Tswett（茨维特)的实验 色谱法原理 色谱法的分类
▪篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
什么是色谱法
色谱法是一种现代的分离分析方法 1906年正式命名(见诸文献) 20世纪30年代开始广泛研究和应用 高效液相色谱法的广泛应用始于20世纪70年代
1. 紫外—可见光度检测器：
①固定波长：254nm ， 低压汞 灯。
② 可 调 波 长 ： 190 ～ 800mm ， 钨灯，氘灯。
UV
③光电二极管矩阵检测器： 190～700nm。
接色谱柱 石英窗 光电倍增管
废液
▪篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
《液相色谱技术》课件
通过液相色谱技术，可以检测环境中的有毒有害物质，如农药、酚类等，为环境治理和保护提供科学依据。
生态毒理学研究
液相色谱技术可以用于研究环境污染物对生物体的毒理学效应，有助于了解环境污染对生态系统的危害。
液相色谱技术的未来发展与挑战
高效液相色谱法（HPLC）
HPLC是液相色谱技术中的一种，具有高分离效能、高灵敏度、高选择性等优点，被广泛应用于生物医药、环境监测、食品安全等领域。随着技术的不断发展，HPLC的分离柱、检测器等关键部件也在不断改进，提高了分离效果和检测灵敏度。
智能化与自动化：随着机器人技术和自动化控制技术的发展，液相色谱技术的操作将更加智能化和自动化。未来的液相色谱仪将更加便捷、高效，能够实现自动化进样、自动优化分离条件等功能，大大提高分析效率。
感谢观看
THANKS
流动相的准备与更换
根据实验要求，准备好适量的流动相，并定期更换以保证实验结果的准确性。
定期清洗进样器、色谱柱和检测器，保持仪器表面清洁。
日常保养
定期校准
常见故障排除
对仪器进行定期校准，确保检测结果的准确性。
遇到问题时，应先检查电源、管线连接等基本情况，再根据仪器手册排查故障。
03
02
01
液相色谱技术的实验设计
色谱柱
检测色谱柱流出的组分，并将其转化为电信号，便于记录和检测。
检测器
用于采集、处理、分析和存储色谱数据。
数据处理系统
数据处理与分析
采集色谱数据，进行峰识别、定量和合适的流速、检测波长等参数，开始色谱分离。
进样
将样品注入进样器，设定进样量，启动进样程序。
准备工作
检查仪器是否正常，准备好流动相、色谱柱和样品。
样品前处理的挑战：液相色谱技术对于样品的要求较高，需要进行适当的前处理以去除杂质、提高分离效果。目前常用的样品前处理方法包括沉淀、萃取、吸附等，但这些方法操作繁琐、耗时长且效果不稳定。为解决这一问题，新型的样品前处理技术如固相萃取、免疫吸附等正在不断发展，以提高样品处理的效率和效果。
生态毒理学研究
液相色谱技术可以用于研究环境污染物对生物体的毒理学效应，有助于了解环境污染对生态系统的危害。
液相色谱技术的未来发展与挑战
高效液相色谱法（HPLC）
HPLC是液相色谱技术中的一种，具有高分离效能、高灵敏度、高选择性等优点，被广泛应用于生物医药、环境监测、食品安全等领域。随着技术的不断发展，HPLC的分离柱、检测器等关键部件也在不断改进，提高了分离效果和检测灵敏度。
智能化与自动化：随着机器人技术和自动化控制技术的发展，液相色谱技术的操作将更加智能化和自动化。未来的液相色谱仪将更加便捷、高效，能够实现自动化进样、自动优化分离条件等功能，大大提高分析效率。
感谢观看
THANKS
流动相的准备与更换
根据实验要求，准备好适量的流动相，并定期更换以保证实验结果的准确性。
定期清洗进样器、色谱柱和检测器，保持仪器表面清洁。
日常保养
定期校准
常见故障排除
对仪器进行定期校准，确保检测结果的准确性。
遇到问题时，应先检查电源、管线连接等基本情况，再根据仪器手册排查故障。
03
02
01
液相色谱技术的实验设计
色谱柱
检测色谱柱流出的组分，并将其转化为电信号，便于记录和检测。
检测器
用于采集、处理、分析和存储色谱数据。
数据处理系统
数据处理与分析
采集色谱数据，进行峰识别、定量和合适的流速、检测波长等参数，开始色谱分离。
进样
将样品注入进样器，设定进样量，启动进样程序。
准备工作
检查仪器是否正常，准备好流动相、色谱柱和样品。
样品前处理的挑战：液相色谱技术对于样品的要求较高，需要进行适当的前处理以去除杂质、提高分离效果。目前常用的样品前处理方法包括沉淀、萃取、吸附等，但这些方法操作繁琐、耗时长且效果不稳定。为解决这一问题，新型的样品前处理技术如固相萃取、免疫吸附等正在不断发展，以提高样品处理的效率和效果。
仪器分析科目学习PPT-液相色谱基础知识
液相色谱基础知识哈工大市政环境工程学院陈忠林色谱原理谱原Concentration in Phase A K=DConcentration in Phase B谱原色谱原理固定相流动相高效液相色谱是溶质在固定相和流动相之间进行的一种连续多次的交换过程，它借助溶质在两相之间的分配系数、亲和力、吸附能力、离子交换、分子大小引起的排分系数亲附能离子交换分子大引起排阻作用等差别使不同溶质进行分离（分离条件）。
分离过程受溶质在两相的扩散系数、固定相填料的颗粒大小、填充密度、流动相组成及流速等因素影响。
色谱原理--分离过程ISDC色谱参数--保留值保留时间t t R保留体积V R= t R ×,F, 死时间t M调整保留时间t`R= t R-t M调整`整保留体积V`R=`t`R ×F&提高选择性—改变色谱峰的间距&提高柱效—改变色谱峰的宽窄高峰窄液相色谱分析基本概念液相色谱(LC or HPLC)——以液相为流动相的色谱，或流动相为液体的色谱。
液液色谱——以一种液体作流动相，另种液体作固定相的色谱另一种液体作固定相的色谱。
——液固色谱以液体作流动相，以固体作固定相的色谱。
（俄国植物学家）液相色谱分析基本概念柱色谱——把固定相装在一根管把固定相装在根管子里（色谱柱），液体流动相流过色谱柱中的固定相过色谱柱中的固定相。
液相色谱分析基本概念平面色谱——纸色谱和薄层色谱(TLC:Thin Layer Chromatography)。
用滤纸或是涂在玻璃板（或铝箔）上的硅胶（或三氧化二铝等）作固定相利用滤三氧化二铝等）作固定相，利用滤纸或硅胶层的毛细管作用把流动相（溶剂或叫展开剂）从底端吸上来（溶剂或叫展开剂）从底端吸上来，使混合物得到分离。
液相色谱分析基本概念凝胶渗透色谱（GPC：Gel Permeation Chromatography）——是液相色谱的一Ch t h是液相色谱的个分支，以一定尺寸的多孔固体（凝胶）作固定相，以液体作流动相，按样品分作定液体作流动按样子尺寸大小进行分离的方法。
《液相色谱实验基础》PPT课件
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38
Typical Column Packing Supports
Chemically Modified Silica Gel
Pores
Si
Si
Si
OH
OH
OH
O Si
O
OH
Si
Si
Si
Si
O
O
O
O
Silica Gel Surface
CH3
Si - O - Si - (CH2)17CH3
1
2
3
4
5
6
7
8
9
Time (min)
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25
溶剂传输系统
往复活塞泵(单向阀)
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Gold Seal Sapphire
Insert Ruby Ball
Spring Insert
26
泵头 - 单元/四元泵
Pump head screws Lock Screw
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27
Agilent 1100系列四元泵－G1354A; 真空脱气机为标准配置!
• 高压输液泵及梯度洗脱装置 •进样装置 •色谱柱 •检测器 •色谱数据处理装置
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18
堆积配置
优化流路减小死体积 流路自上而下
溶剂柜 脱气机
泵
自动进样器 柱温箱
检测器
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手持控制器
19
连线
每个部分有独立的电源 1100各部件均由CAN线连接 检测器与化学工作站之间用 LAN线连接 (或用HP-IB连接) 脱气机与泵之间用遥控线连接 ( 错误信号输出) BCD板用于外设和读取样品瓶数 量
高效液相色谱的基础知识 PPT
高效液相色谱的基础知识
1 2 3
高效液相色谱法的特点 高效液相色谱法仪器工作原理 高效液相色谱仪的维护 高效液相色谱法仪的注意事项
4
5
高效液相色谱法的特点
高效液相色谱法（HPLC）是20世纪60年代末70 年代初发展起来的一种新型分离分析技术。它是 在经典液相色谱基础上，引入了气相色谱的理论， 在技术上采用了高压泵、高效固定相和高灵敏度 检测器，因而具备速度快、效率高、灵敏度高、 操作自动化的特点。为了更好地了解高效液相色 谱法优越性，现从两方面进行比较：
• 高压输液系统 • 进样系统 • 分离系统 • 检测系统
高效液相色谱仪工作原理
其工作过程如下：
高效液相色谱仪的维护 泵的使用和维护
1.防止任何固体微粒进入泵体，输液泵的滤器应经常清洗或更换。 2.流动相不应含有任何腐蚀性物质，含有缓冲液的流动相不应保留在泵内。泵工 作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完，否则空泵运转也会磨损柱塞、缸体或 密封环，最终产生漏液。 3.泵的工作压力决不要超过规定的最高压力，否则会使高压密封环变形，产生漏 液。 4.流动相应该先脱气，以免在泵内产生气泡，影响流量的稳定性，如果有大量气 泡，泵就无法正常工作
高效液相色谱法的特点
高效液相色谱法与经典液相色谱法
高效液相色谱法 速度 灵敏度 高速 高灵敏度 经典液相色谱法 极慢 低
自动化
进料方式 效率
高自动化
高压输液设备 高效
低
重力加料 低
如对氨基酸分离，用经典色谱法，需用20多小时才能分离出20种氨基酸； 而用高效液相色谱法，只需lh之内即可完成。
高效液相色谱仪工作原理
CAP2000+粘度计使用说明书（下）
• • 样品应完全覆盖锥转子底部表面，并且溢出其边沿 1.0mm。 8. 等待约 1至 3分钟，使锥转子、加热板及样品的温度到达设置温度。
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高效液相色谱法的特点 高效液相色谱法仪器工作原理 高效液相色谱仪的维护 高效液相色谱法仪的注意事项
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高效液相色谱法的特点
高效液相色谱法（HPLC）是20世纪60年代末70 年代初发展起来的一种新型分离分析技术。它是 在经典液相色谱基础上，引入了气相色谱的理论， 在技术上采用了高压泵、高效固定相和高灵敏度 检测器，因而具备速度快、效率高、灵敏度高、 操作自动化的特点。为了更好地了解高效液相色 谱法优越性，现从两方面进行比较：
• 高压输液系统 • 进样系统 • 分离系统 • 检测系统
高效液相色谱仪工作原理
其工作过程如下：
高效液相色谱仪的维护 泵的使用和维护
1.防止任何固体微粒进入泵体，输液泵的滤器应经常清洗或更换。 2.流动相不应含有任何腐蚀性物质，含有缓冲液的流动相不应保留在泵内。泵工 作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完，否则空泵运转也会磨损柱塞、缸体或 密封环，最终产生漏液。 3.泵的工作压力决不要超过规定的最高压力，否则会使高压密封环变形，产生漏 液。 4.流动相应该先脱气，以免在泵内产生气泡，影响流量的稳定性，如果有大量气 泡，泵就无法正常工作
高效液相色谱法的特点
高效液相色谱法与经典液相色谱法
高效液相色谱法 速度 灵敏度 高速 高灵敏度 经典液相色谱法 极慢 低
自动化
进料方式 效率
高自动化
高压输液设备 高效
低
重力加料 低
如对氨基酸分离，用经典色谱法，需用20多小时才能分离出20种氨基酸； 而用高效液相色谱法，只需lh之内即可完成。
高效液相色谱仪工作原理
CAP2000+粘度计使用说明书（下）
• • 样品应完全覆盖锥转子底部表面，并且溢出其边沿 1.0mm。 8. 等待约 1至 3分钟，使锥转子、加热板及样品的温度到达设置温度。
液相色谱仪ppt课件
5
保养与维护
首先
仪器应保持清洁，每日用棉布擦拭仪器表面。
其次
当仪器脱气时，若气泡排不净，可将过滤头先用异丙醇超声处 理5-10分钟，再用色谱甲醇超声处理5-10分钟，若气泡仍存在， 则更换过滤头。
最后
使用前先检查仪器是否正常，如有异常，立即与有关部门联系， 进行维修做好记录。 检验结束后及时填写使用记录，具体执行《检验仪器设备管理规 程》。
样品分析
双击界面，进入主项目 界面，双击【文件】图标， 选中需要处理的文件， 单击文件名，打开该文 件，单击程序，出现手 动积分栏，对色谱图进 行积分处理，色谱图积 分处理结束后，保存处 理结果。单击数据报告， 预览数据报告，确认无 误，输出报告。
4
ADD A TITLE SLIDE
注意事项
仪器安装环境：放置点应远离强磁场，避免震动、静电干扰及腐蚀性气体的腐蚀。 冲洗管路约60分钟后，待基线走平且无杂质峰出现即停泵关机。若实验中使用了缓冲盐或者其他电解 质，在做实验前后，一定要先用10%甲醇冲洗约30分钟，之后甲醇浓度依次以10%的浓度递增，并进行 冲洗。
图标，进入工作站登陆界面。
III
单击【仪器】图标，双击，进入仪器操作界面在线系统，出现在线控制主界面。
IV 打开排放阀（逆时针旋转﹤180°），单击【自动排气】，进入排气操作界面，根据需要选择 流路及排气时间，完成设置后单击【下载】。
2
用户权限
操作员
操作员
操作员
管理员
CLICK TO ADD TEXT 管理操作员的结果是符合 操作员检验方法是否符合员
产品检验
3
数据采集方法编辑
常数设置
单击[常规]，进入常规操 作界面，运行时间、泵 流速、检测器波长和柱 温箱温度（5℃～85℃） 等，完成设置后单击[下 载]，将该方法下载至液 相色谱仪。
保养与维护
首先
仪器应保持清洁，每日用棉布擦拭仪器表面。
其次
当仪器脱气时，若气泡排不净，可将过滤头先用异丙醇超声处 理5-10分钟，再用色谱甲醇超声处理5-10分钟，若气泡仍存在， 则更换过滤头。
最后
使用前先检查仪器是否正常，如有异常，立即与有关部门联系， 进行维修做好记录。 检验结束后及时填写使用记录，具体执行《检验仪器设备管理规 程》。
样品分析
双击界面，进入主项目 界面，双击【文件】图标， 选中需要处理的文件， 单击文件名，打开该文 件，单击程序，出现手 动积分栏，对色谱图进 行积分处理，色谱图积 分处理结束后，保存处 理结果。单击数据报告， 预览数据报告，确认无 误，输出报告。
4
ADD A TITLE SLIDE
注意事项
仪器安装环境：放置点应远离强磁场，避免震动、静电干扰及腐蚀性气体的腐蚀。 冲洗管路约60分钟后，待基线走平且无杂质峰出现即停泵关机。若实验中使用了缓冲盐或者其他电解 质，在做实验前后，一定要先用10%甲醇冲洗约30分钟，之后甲醇浓度依次以10%的浓度递增，并进行 冲洗。
图标，进入工作站登陆界面。
III
单击【仪器】图标，双击，进入仪器操作界面在线系统，出现在线控制主界面。
IV 打开排放阀（逆时针旋转﹤180°），单击【自动排气】，进入排气操作界面，根据需要选择 流路及排气时间，完成设置后单击【下载】。
2
用户权限
操作员
操作员
操作员
管理员
CLICK TO ADD TEXT 管理操作员的结果是符合 操作员检验方法是否符合员
产品检验
3
数据采集方法编辑
常数设置
单击[常规]，进入常规操 作界面，运行时间、泵 流速、检测器波长和柱 温箱温度（5℃～85℃） 等，完成设置后单击[下 载]，将该方法下载至液 相色谱仪。
《液相色谱仪》课件
液相色谱仪的组成部分
色谱柱
泵
液相色谱仪包含不同种类的色谱 柱，如气相分离柱、反相柱等， 每种柱子都有其特点和应用范围。
液相色谱仪中的泵用于提供恒定 的流动相压力，保证样品的流动 速度和分离效果。
进样器
液相色谱仪的进样器用于将样品 引入色谱柱，保证准确的进样量 和分离效果。
液相色谱仪的操作步骤
正确的操作步骤对于获得准确的分析结果非常重要。
1
样品的进样
2
样品的进样过程需要注意选择适当的进样
量和进样方式，以保证分析的准确性和重
现性。
3
流动相的选用
4
合适的流动相对于分离效果和分析速度至 关重要，需要根据分析目的选择最佳的流
动相组合。
样品的制备
样品的制备是液相色谱仪分析的第一步， 需要根据分析需求选择合适的样品制备方 法。
色谱柱的选择和配置
液相色谱仪的发展趋势
液相色谱仪的技术不断进步，发展出新的分析方法和设备。 液相色谱仪的未来发展方向包括更高的分离效果、更快的分析速度、更广泛 的应用范围等。
液相色谱仪的结论
液相色谱仪具有许多优点和局限性，但在现代化学分析中具有重要的地位。 通过对液相色谱仪的理解和应用，可以更好地提高分析效率和准确性。 希望本课件能为大家了解液相色谱仪提供帮助。
《液相色谱仪》PPT课件
液相色谱仪是一种常用的分析仪器，用于化学分析、制药以及食品安全等行 业。本课件将介绍液相色谱仪的工作原理、组成部分、操作步骤、数据分析、 应用案例、发展趋势以及结论。
液相色谱仪的简介
液相色谱仪是一种常用的化学分析仪器，用于分离和检测混合物中的化合物。 液相色谱仪通过液相进样、色谱柱分离、检测器检测等步骤实现分析。
液相色谱基本原理与应用ppt课件
一、液相色谱定义
高效液相色谱是在经典液相色谱基础上， 引入了气相色谱的理论，在技术上采用了 高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器， 因而具备速度快、效率高、灵敏度高、操 作自动化的特点。
病原体侵入机体，消弱机体防御机能 ，破坏 机体内 环境的 相对稳 定性， 且在一 定部位 生长繁 殖，引 起不同 程度的 病理生 理过程
三、HPLC在各领域的主要应用
• 环境：常见多环芳烃、多氯联苯、硝基化 合物、酚类化合物、邻苯二甲酸脂、有机 农药等。
• 农业：土壤矿物成分、肥料、饲料添加剂、 茶叶等农产品中无机和有机成分等。
• 食品：有机酸、氨基酸、糖、维生素、脂 肪酸、香料、甜味剂、防腐剂、人工色素、 病原微生物、霉菌毒素、多核芳烃等。
病原体侵入机体，消弱机体防御机能 ，破坏 机体内 环境的 相对稳 定性， 且在一 定部位 生长繁 殖，引 起不同 程度的 病理生 理过程
病原体侵入机体，消弱机体防御机能 ，破坏 机体内 环境的 相对稳 定性， 且在一 定部位 生长繁 殖，引 起不同 程度的 病理生 理过程
病原体侵入机体，消弱机体防御机能 ，破坏 机体内 环境的 相对稳 定性， 且在一 定部位 生长繁 殖，引 起不同 程度的 病理生 理过程
多环芳烃标准品色谱图
mV 900
萘 苊
800
700
600
二 苯 并a，h蒽 苯 并g，h，i苝 茚 苯1，2，3-cd苝
苯 并a蒽 屈 苯 并b荧 蒽 苯 并k荧 蒽 苯 并a芘
500
荧蒽
苊烯
400
芴 菲
蒽 芘
300
200
100
0
3 -100
6
9
12
15
18
高效液相色谱是在经典液相色谱基础上， 引入了气相色谱的理论，在技术上采用了 高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器， 因而具备速度快、效率高、灵敏度高、操 作自动化的特点。
病原体侵入机体，消弱机体防御机能 ，破坏 机体内 环境的 相对稳 定性， 且在一 定部位 生长繁 殖，引 起不同 程度的 病理生 理过程
三、HPLC在各领域的主要应用
• 环境：常见多环芳烃、多氯联苯、硝基化 合物、酚类化合物、邻苯二甲酸脂、有机 农药等。
• 农业：土壤矿物成分、肥料、饲料添加剂、 茶叶等农产品中无机和有机成分等。
• 食品：有机酸、氨基酸、糖、维生素、脂 肪酸、香料、甜味剂、防腐剂、人工色素、 病原微生物、霉菌毒素、多核芳烃等。
病原体侵入机体，消弱机体防御机能 ，破坏 机体内 环境的 相对稳 定性， 且在一 定部位 生长繁 殖，引 起不同 程度的 病理生 理过程
病原体侵入机体，消弱机体防御机能 ，破坏 机体内 环境的 相对稳 定性， 且在一 定部位 生长繁 殖，引 起不同 程度的 病理生 理过程
病原体侵入机体，消弱机体防御机能 ，破坏 机体内 环境的 相对稳 定性， 且在一 定部位 生长繁 殖，引 起不同 程度的 病理生 理过程
多环芳烃标准品色谱图
mV 900
萘 苊
800
700
600
二 苯 并a，h蒽 苯 并g，h，i苝 茚 苯1，2，3-cd苝
苯 并a蒽 屈 苯 并b荧 蒽 苯 并k荧 蒽 苯 并a芘
500
荧蒽
苊烯
400
芴 菲
蒽 芘
300
200
100
0
3 -100
6
9
12
15
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液相色谱仪.ppt
二、工作原理及组成
2.1、高效液相仪的构 成 高效液相色谱仪主要包 括以下部件：溶剂瓶， 溶剂瓶箱，在线脱气机， 液相泵，（手动）自动 进样器（六通阀），色 谱柱，柱温箱，检测器。 不同的配置可以有不同 的模块（如自动进样器 恒温器，二维色谱接不 同类型检测器等）。仪 器如图
液相色谱管路流程为：
三、液相色谱仪的应用 药物分析：药剂组分及含量 食品分析：化学物质残留量 化学化工：非离子型祛垢剂分析 生物制药：无活菌素分析
液相色谱仪分析图
三氯生
中文名：二氯苯氧氯酚/三氯羟基二苯醚 外文名：Triclosan 相对分子质量：289.5 化学名称：2,4,4‘-三氯-2羟基-二苯醚 别名：玉洁纯MP、三氯新（沙）、三氯生 熔点/沸点：55-57°C/ 120 °C 毒性：微毒
化学分子式为 C12H7Cl3O2 三氯生常态为白色或 灰白色晶状粉末，稍 有酚臭味。不溶于水， 易溶于碱液和有机溶 剂。三氯生是一种广 谱抗菌剂，被广泛应 用于肥皂、牙膏等日 用化学品之中。
•
可个 能别 致牙 膏 癌中
含 有 三 氯 生
•
三氯生的毒性不大，为什么会传言 致癌呢？
根据美国弗吉尼亚理工大学Dr. Peter Vikesland的 研究，三氯生会和自来水处理过程中残留在水 中的氯气反应，生成氯仿。而 氯仿是可能致癌 的物质 2005年4月，中国疾病预防控制中心专家向数家 北京媒体表示，低剂量的氯仿对人体影响不足 以导致癌症。
2.4、进样器
进样器主要分为手动进样器和自动进样器。
2.5、检测器 检测器是液相色谱的三大关键部件之一。理想的检测器应具 有以下特点：(1)灵敏度高;(2)对温度变化和流量波动不敏感 ;(3)死体积小，不使峰额外地扩展;(4)对溶剂无响应，能用于 梯度洗脱操作;(5)线性范围宽;(6)对所有样品都有响应;(7)对 样品无破坏性。在高效液相色谱技术发展中，至今还没有一 种检测器可以同时满足以上几点要求。检测器的主要性能指 标:(1)噪声(Noise)和漂移(Drift);( 2 )灵敏度(Sensitivity);( 3 ) 检 测限(Detectability);( 4 )线性范围(Linearra nge);(5 )波长的精 度和准确度。 检测器的种类繁多，常用的有紫外一可见分光检测器、荧光 检测器、示差折光检测器、电化学检测器、二极管阵列检测 器、测定大分子绝对分子量的多角度激光光散射仪。另外还 有蒸发光检测器、化学发光检测器、手性检测器(旋光检测 器、圆二色检测器)、分子量检测器、放射性检测器、热学 性质检测器、光电导检测器、磁旋光检测器等。
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色谱法是利用混合物中各组份在不同的两 相中溶解,分配,吸附等化学作用性能的差异, 当两相作相对运动时,使各组分在两相中反复 多次受到上述各作用力而达到相互分离。
两相中有一相是固定的,叫作固定相,有一 相是流动的,称为流动相流动相又叫洗脱剂， 溶剂。
一、色谱基础知识
色谱法：利用组分在两相间分配系数不同而 进行分离的技术。
进样前，进样，进样后3个过程示意图
三、液相色谱基本构造
三、液相色谱基本构造
2.输液系统 流路—单泵、双泵、三元泵、四元泵、
多泵 压力—低压、中压、高压、超高压 控制方式—恒流、恒压 流动相—等度、梯度 混合方式—低压、高压 流量—分析泵、半制备泵、制备泵 材质—金属泵、非金属泵（peek)
三、液相色谱基本构造
三、液相色谱基本构造
1.进样系统： 自动进样系统（是否带温控） 手动进样系统
核心部件： 六通阀
三、液相色谱基本构造
六通阀原理示意图
取样时，流动相 直接进柱，进样口与定 量管连接，样品充满定 量管后，多余样品从6 流出。
进样时，泵将流动 相压入定量管，将样品 全部进入色谱柱分析。
三、液相色谱基本构造
二、液相色谱概述
高效液相色谱 -HPLC (High Performance Liquid Chromatography ) -是一种区别于经典液相色谱,基于仪器方法的高效能
分离手段: ������ 高性能色谱柱,高精度输液泵,高灵敏度检测
器… -广泛应用于各个领域: ������ 医药,环保,石化,生命科学,食品工业,农业… -无论在技术上,理论上,还是在应用上仍有较大的发展
空间
二、液相色谱概述
超高效液相色谱 –UPLC (Ultra Performance Liquid Chromatography ) –是区别于HPLC的液相色谱新领域 –基于小颗粒填料和LC原理的一种创新技术 –实现超高分离度、灵敏度、分析速度
三、液相色谱基本构造
主要组成部分如下： 1. 进样系统 2. 输液系统 3. 分离系统 4. 检测系统 5. 数据处理系统
1ppm=1000ppb;1ppb=100紫外-可见光检测器（UV）
三、液相色谱基本构造
2、二极管阵列检测器（DAD）
用光电二极管取代了是传统 的光电倍增管，在一次色谱操作 中可同时获得多波长的吸光度， 并且可以采用现代微机技术将各 组份的保留时间、吸收波长和吸 光度汇合一起，绘制三维谱图， 提供既定量又定性的色谱信息。
液相色谱常规分析的柱温在20-60度。 不同温度对样品的保留时间有很大的影响。 柱温箱的优点： 分析结果重现性好 提高柱效 降低柱压 保证检测稳定性
三、液相色谱基本构造
4.检测系统 灵敏度分级 ppm级 per parts of million ppb级 per parts of billion ppt级 per parts of trillion 如：浓度及浓度换算单位 1ppm即：mg/L 1ppb即：ug/L 1ppt即：ng/L
液相色谱基础知识
内容提要
一、色谱基础知识 二、液相色谱概述 三、液相色谱基本构造 四、液相色谱基本工作原理 五、液相色谱的用途及应用领域
一、色谱基础知识
色谱法最早是由俄国植物学家 茨维特在1906年研究用碳酸钙 分离植物色素时发现的，色谱 法(Chromatography)因之得 名。
一、色谱基础知识
3.分离系统 3.1色谱柱 色谱柱是HPLC分离系统的关键！ 色谱柱分类：可根据柱管、类型、规格大小、填料、分离类型进行分类。 色谱柱标签的识别：
三、液相色谱基本构造
3.2 柱温箱
柱温箱的作用： 控温系统大多数并不是HPLC的必须备件，凝胶系统一般是要求控温的，
采用示差检测最好配置控温箱，离子色谱也同样。有些仪器除了加热的 控温系统外，还自带低温冰箱。
流动相：携带样品流过整个系统的流体。 固定相：静止不动的一相，色谱柱。 色谱是一种分离技术。 色谱的主要目的是对混合物中的目标物分离 和定量。
一、色谱基础知识
按流动相的物态分: 气相色谱(Gas Chromatography, GC) 用气体作为流动相(又叫载气) 液相色谱(Liquid Chromatography, LC) 用液体作为流动相(又叫洗脱剂)
二、液相色谱概述
液相色谱：以液体作为流动相的色谱分离方法。
������
适用于高沸点、大分子、强极性和热稳
定性差的化合物的分析。������
流动相具有运载样品分子和选择性分离的双重 作用。
气相色谱：以气体作为流动相的色谱分离方法。
适用于沸点较低、热稳定性好的中小分子化合物 的分析。
流动相只起运载样品分子的能力。
是利用样品组分雾化和蒸发形成 固体微粒后对光的散射现象来 检测色谱流出组分的方法（可 检测任何挥发性低于流动相的 样品。碳水化合物，类脂化合 物，表面活性剂，聚合物，药 物，氨基酸和天然产物。）
雾化
载气 D0
蒸发
散射
D
光源
三、液相色谱基本构造
高压梯度：用两台高压输液泵将两种溶剂输入。 低压梯度：在常压下将两种溶剂（或多元溶剂）混合，然后用
高压输液泵将流动相输入到色谱柱中。（混合前高压与混合 后高压）
三、液相色谱基本构造
二元梯度---需2个泵-----高压梯度 四元梯度----需比例阀一个泵--低压梯度
三、液相色谱基本构造
泵系统为输液系统中最为核心部分，也是 整个液相色谱系统中最为核心的部分。
关于泵系统中等度、梯度、高压、低压、 二元、四元将做主要介绍。
三、液相色谱基本构造
等度分析：针对单一样品、或者简单 样品采用等度分析。示意图如下
三、液相色谱基本构造
梯度分析：对于复杂样品，一般采用梯度分析，且 必须是二元以上的泵系统。示意图如下：
三、液相色谱基本构造
3、荧光检测器（FLD）
高灵敏度：10-12～10-13g/mL; 高选择性：对多环芳烃，维 生素B、黄曲霉素、卟啉类化合 物、农药、药物、氨基酸、甾 类化合物等有响应对温度和流 动相的流速变化不敏感 所需试样少，适合恒量分析
三、液相色谱基本构造
4、蒸发光散射检测器（ELSD） 流动相
两相中有一相是固定的,叫作固定相,有一 相是流动的,称为流动相流动相又叫洗脱剂， 溶剂。
一、色谱基础知识
色谱法：利用组分在两相间分配系数不同而 进行分离的技术。
进样前，进样，进样后3个过程示意图
三、液相色谱基本构造
三、液相色谱基本构造
2.输液系统 流路—单泵、双泵、三元泵、四元泵、
多泵 压力—低压、中压、高压、超高压 控制方式—恒流、恒压 流动相—等度、梯度 混合方式—低压、高压 流量—分析泵、半制备泵、制备泵 材质—金属泵、非金属泵（peek)
三、液相色谱基本构造
三、液相色谱基本构造
1.进样系统： 自动进样系统（是否带温控） 手动进样系统
核心部件： 六通阀
三、液相色谱基本构造
六通阀原理示意图
取样时，流动相 直接进柱，进样口与定 量管连接，样品充满定 量管后，多余样品从6 流出。
进样时，泵将流动 相压入定量管，将样品 全部进入色谱柱分析。
三、液相色谱基本构造
二、液相色谱概述
高效液相色谱 -HPLC (High Performance Liquid Chromatography ) -是一种区别于经典液相色谱,基于仪器方法的高效能
分离手段: ������ 高性能色谱柱,高精度输液泵,高灵敏度检测
器… -广泛应用于各个领域: ������ 医药,环保,石化,生命科学,食品工业,农业… -无论在技术上,理论上,还是在应用上仍有较大的发展
空间
二、液相色谱概述
超高效液相色谱 –UPLC (Ultra Performance Liquid Chromatography ) –是区别于HPLC的液相色谱新领域 –基于小颗粒填料和LC原理的一种创新技术 –实现超高分离度、灵敏度、分析速度
三、液相色谱基本构造
主要组成部分如下： 1. 进样系统 2. 输液系统 3. 分离系统 4. 检测系统 5. 数据处理系统
1ppm=1000ppb;1ppb=100紫外-可见光检测器（UV）
三、液相色谱基本构造
2、二极管阵列检测器（DAD）
用光电二极管取代了是传统 的光电倍增管，在一次色谱操作 中可同时获得多波长的吸光度， 并且可以采用现代微机技术将各 组份的保留时间、吸收波长和吸 光度汇合一起，绘制三维谱图， 提供既定量又定性的色谱信息。
液相色谱常规分析的柱温在20-60度。 不同温度对样品的保留时间有很大的影响。 柱温箱的优点： 分析结果重现性好 提高柱效 降低柱压 保证检测稳定性
三、液相色谱基本构造
4.检测系统 灵敏度分级 ppm级 per parts of million ppb级 per parts of billion ppt级 per parts of trillion 如：浓度及浓度换算单位 1ppm即：mg/L 1ppb即：ug/L 1ppt即：ng/L
液相色谱基础知识
内容提要
一、色谱基础知识 二、液相色谱概述 三、液相色谱基本构造 四、液相色谱基本工作原理 五、液相色谱的用途及应用领域
一、色谱基础知识
色谱法最早是由俄国植物学家 茨维特在1906年研究用碳酸钙 分离植物色素时发现的，色谱 法(Chromatography)因之得 名。
一、色谱基础知识
3.分离系统 3.1色谱柱 色谱柱是HPLC分离系统的关键！ 色谱柱分类：可根据柱管、类型、规格大小、填料、分离类型进行分类。 色谱柱标签的识别：
三、液相色谱基本构造
3.2 柱温箱
柱温箱的作用： 控温系统大多数并不是HPLC的必须备件，凝胶系统一般是要求控温的，
采用示差检测最好配置控温箱，离子色谱也同样。有些仪器除了加热的 控温系统外，还自带低温冰箱。
流动相：携带样品流过整个系统的流体。 固定相：静止不动的一相，色谱柱。 色谱是一种分离技术。 色谱的主要目的是对混合物中的目标物分离 和定量。
一、色谱基础知识
按流动相的物态分: 气相色谱(Gas Chromatography, GC) 用气体作为流动相(又叫载气) 液相色谱(Liquid Chromatography, LC) 用液体作为流动相(又叫洗脱剂)
二、液相色谱概述
液相色谱：以液体作为流动相的色谱分离方法。
������
适用于高沸点、大分子、强极性和热稳
定性差的化合物的分析。������
流动相具有运载样品分子和选择性分离的双重 作用。
气相色谱：以气体作为流动相的色谱分离方法。
适用于沸点较低、热稳定性好的中小分子化合物 的分析。
流动相只起运载样品分子的能力。
是利用样品组分雾化和蒸发形成 固体微粒后对光的散射现象来 检测色谱流出组分的方法（可 检测任何挥发性低于流动相的 样品。碳水化合物，类脂化合 物，表面活性剂，聚合物，药 物，氨基酸和天然产物。）
雾化
载气 D0
蒸发
散射
D
光源
三、液相色谱基本构造
高压梯度：用两台高压输液泵将两种溶剂输入。 低压梯度：在常压下将两种溶剂（或多元溶剂）混合，然后用
高压输液泵将流动相输入到色谱柱中。（混合前高压与混合 后高压）
三、液相色谱基本构造
二元梯度---需2个泵-----高压梯度 四元梯度----需比例阀一个泵--低压梯度
三、液相色谱基本构造
泵系统为输液系统中最为核心部分，也是 整个液相色谱系统中最为核心的部分。
关于泵系统中等度、梯度、高压、低压、 二元、四元将做主要介绍。
三、液相色谱基本构造
等度分析：针对单一样品、或者简单 样品采用等度分析。示意图如下
三、液相色谱基本构造
梯度分析：对于复杂样品，一般采用梯度分析，且 必须是二元以上的泵系统。示意图如下：
三、液相色谱基本构造
3、荧光检测器（FLD）
高灵敏度：10-12～10-13g/mL; 高选择性：对多环芳烃，维 生素B、黄曲霉素、卟啉类化合 物、农药、药物、氨基酸、甾 类化合物等有响应对温度和流 动相的流速变化不敏感 所需试样少，适合恒量分析
三、液相色谱基本构造
4、蒸发光散射检测器（ELSD） 流动相