免疫学检验总结表格
医学检验免疫学检验归纳总结
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医学检验免疫学检验归纳总结三大免疫结合反应直接凝集反应玻片凝集反应试管凝集反应间接凝集反应间接血凝试验胶乳凝集试验凝集反应P47 明胶凝集试验自身细胞凝集试验抗球蛋白试验直接coombs试验(RBC膜上的不完全抗原)间接coombs试验(血清中的游离抗原)液体内沉淀试验絮状沉淀试验抗原稀释法抗体稀释法方针滴定法免疫浊度测定沉淀反应凝胶内沉淀试验单向扩散试验双向扩散试验免疫电泳技术对流免疫电泳 CIEP火箭免疫电泳RIE免疫电泳IEP免疫固定电泳交叉免疫电泳三大标记技术一、放射免疫:放射免疫:免疫放射:二、荧光免疫技术P81 荧时间分辨荧光免疫测定(方法)双抗体夹心法光免固相抗体竞争法疫分固相抗原竞争法析类型荧光偏振免疫测定测定荧光酶免疫测定(方法)双抗体夹心法双抗原夹心法固相抗原竞争法三、酶免疫技术 P95 酶免疫技术分类均相酶免疫测定EMIT克隆酶测定分析异相酶免疫测定异相液相酶免疫测定固相酶免疫测定酶联免疫吸附试验ELISA (方法)Ab 双抗体夹心法双位点一步法竞争法Ag 间接法双抗体夹心法竞争法捕获法其他标记技术化学发光免疫分析技术 CLIA 直接化学发光免疫分析CLIAP109类型化学发光酶免疫分析CLEIA电化学发光免疫分析ECLIA 生物素,亲和素放大技术固相膜免疫测定免疫试验IFA免疫层析试验 ICA膜免疫测定的种类斑点酶免疫吸附试验 DOT-ELISE酶联免疫斑点试验 ELISPOT免疫印迹法 IBT/EITB放射免疫浊度试验 RIPA免疫细胞1、分离方法外周血单个核细胞分离 PBMCP161淋巴细胞分离贴壁粘附法吸附柱滤过法磁铁吸引法Percoll分离液法T细胞和B 细胞的分离 E花环沉降法尼龙毛柱分离法T细胞亚群分离亲和板结合分离法磁性微球分离法荧光激法细胞分离仪分离法2、免疫细胞表面标志的检测方法抗体致敏细胞花环法P174 免疫细胞化学法免疫荧光法FCM3、功能检测 T 细胞增殖试验方法形态学P178 3H-TdR掺入法淋巴细胞 T细胞 MTT比色法CFSE(活细胞染料)T细胞分泌功能检测T细胞介导的细胞毒性试验体内试验B细胞:B细胞增殖试验、溶血空斑实验、ELISPOT、体内试验NK细胞:..........。
临床免疫试验总结
![临床免疫试验总结](https://img.taocdn.com/s3/m/ed949881f021dd36a32d7375a417866fb84ac0bf.png)
临床免疫常用实验操作步骤
临床免疫常用实验注意事项
备注:1.红细胞破裂后释放的血红蛋白中含有血红素集团,其具有过氧化物的活性,如标本中血红蛋白浓度较高,则容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面的IRP底物反应显色,造成假阳性(在HBeAb和HBcAb测定时,由于采用的方法不同,而造成假阴性结果)。
2.类风湿因子是一种抗变性IgG的自身抗体,可作为固相抗体和酶标抗体(均为IgG)之间的桥接抗原,而产生假阳性(佃8«人6和HBcAb测定时,由于采用的方法不同,而造成假阴性结果)。
3.TRUST实验干扰反应:①本实验系非特异性血清学过筛试验,阴性结果不能排除梅毒感染,阳性结果需作进一步梅毒螺旋体抗体特异性试验,结合临床综合分析;②血浆标本抗凝应充分,以避免纤维蛋白引起的假阳性;③待测血清须新鲜,无污染,否则可能出现假阳性或假阴性结果;④由于所用抗原是类脂抗原,故特异性差,生物学假阳性可见于多种疾病,如麻风、结核、红斑狼疮、类风湿性关节炎、猩红热等。
HBV五项血清指标物联合检测的临床意义
常见模式HBsAg抗-HBs HBeAg抗-HBe抗-HBc临床意义1+一+一+急性或慢性乙型肝炎,高传染性
2+一一一+急性、慢性乙型肝炎或慢性HBsAg携带者
3+++急性乙肝趋向恢复或慢性乙肝,弱传染性
4一+一一+急性HBV感染康复期或有既往病史,目前保持免疫力
5++乙肝恢复期,弱传染性
6一一一一+急性HBV感染“窗口期”或既往曾感染过乙肝,有流行病学意义7+疫苗接种后或HBV感染后康复
8一+一++急性乙肝康复期,开始产生免疫力
9非乙肝感染
HBV五项血清指标物可能组合祥表。
医院免疫检验报告单
![医院免疫检验报告单](https://img.taocdn.com/s3/m/543d9ec4e43a580216fc700abb68a98271feac37.png)
医院免疫检验报告单检测单位:XXX医院检测科室:免疫检验科报告日期:XXXX年XX月XX日尊敬的患者:您好!感谢您选择XXX医院进行免疫检验。
根据您的检测样本,我们已完成相关检测,并为您提供本次免疫检验的报告单。
报告编号:XXXXX患者姓名:XXX年龄:XX岁性别:XX一、免疫检验项目:1.总IgE水平检测:检测结果:XX IU/ml结果评价:您的总IgE水平为XX IU/ml,属于正常范围内。
总IgE是指机体本身产生的IgE抗体的总量,正常范围在XXX IU/ml。
2.特异性IgE检测:特异性IgE是对特定抗原产生的IgE抗体,针对不同的抗原进行检测,可以帮助判断您对一些过敏原的敏感性。
-对XXX过敏原的特异性IgE检测:检测结果:阳性/阴性结果评价:阳性表示您对XXX过敏原存在过敏反应的可能性较高,我们建议您进一步了解相关过敏原并采取相应的防护和治疗措施。
-对XXX过敏原的特异性IgE检测:检测结果:阳性/阴性结果评价:阳性表示您对XXX过敏原存在过敏反应的可能性较高,我们建议您进一步了解相关过敏原并采取相应的防护和治疗措施。
总结:根据本次免疫检验结果,您的总IgE水平在正常范围内,但特异性IgE检测中可能存在对一些过敏原的过敏反应,需要进一步了解具体的过敏原并采取相应的预防和治疗措施。
二、检测建议:1.如果您对特定过敏原的特异性IgE检测结果为阳性,请尽量避免接触该过敏原,以预防过敏反应的发生。
2.如果您有过敏症状或疑似过敏病史,请及时就诊,接受相关的过敏性疾病检查和治疗。
3.如果您对一些过敏原的特异性IgE检测结果不确定或阴性,但仍有相关过敏症状出现,请及时就诊,我们的医生将根据您的具体情况进行综合判断和诊疗。
三、注意事项:2.免疫检验结果可能受到多种因素的影响,如检验时间、个体差异等,请综合考虑其他临床病史和检查结果。
此致敬礼!XXX医院免疫检验科。
免疫学检验总结表格
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IgE
单体分子、含量最少、特异性过敏和寄生虫感染中有意义
抗原抗体反应原理
结合力、亲和力与亲合力
抗原抗体反应特点
①特异性;②比例问题:等价带、前带、后带;③可逆性
影响因素
反应物
抗原
理化性质、抗原表位等
抗体
来源:R型血清和H型血清
特异性与亲和力
反应条件
电解质、酸碱度、温度、比例
利用生物发光物质标记Ag或Ab
微粒子化学发光免疫分析
顺磁性微粒子为载体、用ALP标记;以AMPPD作为发光剂
电化学发光免疫分析
三联吡啶钌是电化学发光免疫分析用的发光剂;检测广泛;持续时间长;信号强;灵敏度高等
第三部分:具体物质的检测
免疫细胞的检测
细胞分离法
外周血WBC的分离
自然沉降法和高分子聚合物沉降法
基因芯片
超敏反应及其检验
超敏类型
Ⅰ型
①发作快、消退快;有明显的个体和遗传倾向;不引起严重的组织细胞损伤;主要由于IgE的产生和介导②过敏性休克、呼吸道过敏、消化道过敏、皮肤过敏
Ⅱ型
①细胞溶解型或细胞毒型;有IgG和IgM等其他介导,然后再补体和吞噬细胞的作用下引起细胞溶解或组织损伤②输血反应;新生儿溶血反应;自身免疫溶血性贫血;肺-肾炎综合征;药物过敏引起的血细胞减少;甲状腺功能亢进
双位点一步法
双抗夹心时,待测样品和酶标物一起加入
间接法
检测抗体最常用
竞争法
既可测抗原,又可测抗体;参考管和待测管对照观察
5.荧光免疫技术(F)
*阳性细胞数量和荧光强度可以作为定量或半定量指标
常用荧光物质
异硫氰酸荧光素(FITC)
免疫学总结图
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免疫学总结图多能肝细胞(CD34+、CD117+、lin-)EPO 红细胞红母细胞髓样细胞淋巴样干细胞TPO血小板巨核细胞髓系干细胞前体B细胞( ) 前体T细胞()粒单核祖细胞双阴性T细胞前B2细胞γβ (CD3Low,CD4-,CD8-) (pre-BCR受体) Mo-Mø Baso Eo Mas PMN DC NK B1 NKT Τ Th17分别于血包括血广泛主要分主要主要分布主要通过分布于分布分布于液与组织液中的分布布于外分布于骨髓、分布分泌血液,于血皮肤、呼液中,占Mo和于全周血和于胸肝脏和胸于肠IL-17固占血液液、组吸道和血液白细组织器身组脾脏腔、腹腺中道、呼刺激白细胞织液,消化管胞总数的官中的织脏腔和吸道Ep、总数占白的结缔60%-70% Mø,占器肠壁及泌En、0%-1% 细胞组织内血液白固有尿生Fb和有总数细胞总层中,殖道Mø的数的在个等粘等分0.5% 3%-8% 体发膜和泌多- 3% 育过皮下种细免程中组织胞因出现子、早(胚趋化胎因子疫期),和募具有集中自我性粒更新细系能力胞,并诱胞内含胞内胞内含表面表达表达未成表面标B1的表面标其导局分泌型含分分泌型IgG、FcPRR熟DC志:TCR、BCR志:TCR部炎嗜碱性泌型嗜碱性受体和补(主要高表mIg、缺乏CD56+、缺乏统症反颗粒,嗜酸颗粒,能体C3b受包括达CD56+、多样TCR-CD3多样应; 内含有性颗合成白体,以吞MR、PRR、CD16+; 性,主复合受性,可肝素、粒,内三烯;表噬细菌为SR、调理要识体,识别直接组胺、含有达主; TLR)性受细胞杀别某CD1分子识别嗜酸性组胺PRR、过调理性体、细伤机制:些细所提呈的某些粒细胞酶(抗敏毒素、受体胞因(1)穿菌表磷脂和糖完整趋化因组C3a/C5a(主要子受孔素/颗面共脂类抗的多H17子等,胺)、受体和包括补体,而粒酶途有的原,不受肽抗参与细胞基芳基高亲和体受低表径(2)多糖,MHC分原,可了炎质内含硫酸力IgE 体,达Fas/Fasl抗原,子限制识别症反有白三酯酶Fc受体 IgGFcMHC-途径(3)和某的抗应,烯 (抗受体)、?/?TNF-α些变原有:感染白三细胞因类分/TNFR-1性的HSP,性疾烯)、子受体子,其途径(4)自身CD1病以阳离摄取、ADCC途抗原分子及自子蛋加工、径识别身免白(抗处理的脂疫性寄生抗原类抗疾病虫) 能力原某的发强,而些病生,提呈毒蛋在固抗原白,细有免激发菌裂疫中免疫解产发挥应答物中重要能力的磷作用弱;成酸化熟DC抗原则相反可被趋具有在机体具有很强具有很主要NK无需在机发挥的生是皮化因子趋化抗肿瘤、的趋化作强的清功能抗原,预体早物学效肤黏募集,作用抗感染用与吞噬楚、杀是摄先致敏,期抗应:细胞膜局是参与和一和免疫功能,局伤病原取、加在机体感染毒作用,部参Ι型超定的调节中部感染时体的功工、处抗肿瘤,与维增强免疫与早敏反应吞噬、发挥重能迅速穿能;参理和早期抗持自反应,分期抗的重要杀菌要作用;过VE,与和促提呈病毒或稳中泌多种趋感染效应细能力,可引发进入感染进炎症抗原,胞内寄具有化因子参免疫胞。
临床、生化、细菌、免疫及细胞学检验(续表二)
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临床、生化、细菌、免疫及细胞学检验(续表二)续表(二)(八)激素(内分泌激素)促肾上腺皮质激素 ACTHP 8:0018:0025~100mg/L<50mg/L1125~100pg/ml<50pg/ml促甲状腺激素 TSHS2~10mU/L0.11~0.54nmol/L10.035712~10μU/ml3~15ng/ml促性腺激素P7.5±5U/L17.5±5mU/ml生长激素Growth hormone GHP 男女<2μg/L<10μg/l11<2ng/ml<10ng/ml皮质醇CortisolP,S 8:0016:0020:00140~630nmol/L80~410nmol/L比8:00值≤50%27.5927.5927.595~23μg/dl3~15ug/dl同左醛固酮AldosteroneP,S普食平卧立位男女P,S低钠食0.08~0.28nmol/L0.16~0.60nmol/L0.14~0.84nmol/L增加2~5倍0.02770.02770.02773~10ng/dl6~22ng/dl5~30ng/dl同左17-羟皮质类固醇17-OHCSP,S男193-524nmol/L27.67~19μg/dl17-Hydroxy corticosteroid女248-580nmol/L19~21μg/dl卵泡激素Follicile stimulating hormone FSHS,P绝经期排卵期妊娠期绝经期后4~30IU/L10~90IU/L极度减少IU/L40~250IU/L11114~30mIU/ml10~90mIU/ml40~250mIU/ml黄体生成素Luteinizing hormone LHS,P 男女卵泡期黄体期排卵期绝经期6~235~30IU/L3~40IU/L75~150IU/L30~200IU/L111116~23mIU/ml5~30mIU/ml3~40mIU/ml75~150mIU/ml30~200mIU/ml缩宫素(催产素)S哺乳期<2mU/L5~15mU/L11<2mU/ml5~15mU/ml催乳素Prolactin RBL女卵泡期黄体期<20mU/L<23mU/L5~40mU/l111<20ng/ml<23ng/ml5~40ng/ml抗利尿素(加压素)ADHP放免法6.4±0.9ng/ml1.0~1.5ng/L116.4±0.9pg/ml1.0~1.5pg/ml胰岛素InsulinP 空腹成人6~24mIU/L16~24μIU/mlC肽C-PeptideS >60岁6~35mU/L16~35μIU/ml0.5~2.0ng/ml高血糖素GlucagonP14~57pmol/L0.28750~200pg/ml降钙素CalcitoninS22~65pmol/L0.29276~224ng/ml促甲状腺素释放激素 TRH S5~60ng/L15~60pg/ml甲状腺素Thyroxine T4S总(RIA)游离(FT4)65~155nmol/L10~30pmol/L12.912.95~12μg/dl0.8~2.4ng/dl游离甲状腺素指数 FT4I S4.8~14-同左三碘甲状腺原氨酸 Tri-IodothyronineT3S 总(RIA)游离(FT3)1.6~3.0nmol/L3.5~10pmol/L0.01540.0154100~200ng/dl100~200ng/dl三碘甲状腺原氨酸 T3RUS树脂摄取率60岁26~35%-同左反三碘甲状腺原氨酸反T3,rT3S0.5~1.3nmol/L0.015430~80ng/ml甲状腺球蛋白ThyroglobulinTGS<50μg/L1<50ng/ml甲状腺结合球蛋白Thyroxine binding globulinTBCs15~34mg/L115~34μg/ml甲状旁腺素Parathyroid hormone PTH S24~36pmol/L0.1176205~305pg/ml孕酮ProgesteroneS男女卵泡期黄体期<2nmol/L6.3nmol/L20~96nmol/L3.183.183.18<0.63ng/ml0~2ng/ml6.3~30.2ng/ml雌三醇 EstradiolE2P,S 男女卵泡期黄体期排卵期绝经期30~130pmol/L40~330pmol/L180~880pmol/L370~1840pmol/L40~100pmol/L3.673.673.673.673.678~36pg/ml10~90pg/ml50~240pg/ml100~500pg/ml10~30pg/ml总雌三醇E3S 24~28孕周28~32孕周32~36孕周36~40孕周男子,未孕女子104~590nmol/L140~760nmol/L208~970nmol/L280~1215nmol/L<5nmol/L3.473.473.473.473.4730~170ng/ml40~220ng/ml60~280ng/ml80~350ng/ml<2ng/ml游离雌三醇Free estriol FE3S 妊娠25周妊娠36周妊娠39周妊娠40~41周12~34nmol/L24~86nmol/L34~118nmol/L36~86nmol/L3.673.673.673.673.5~10μg/L7~25μg/L10~34μg/L10.5~25.0μg/L胎盘生乳素S妊娠末三月0.24~0.45μmol/L0.054.7~8.9μg/ml绒促性素Chorionic gonadotropin HCGS,U未孕妊后停经4~8天妊娠期峰值阴性女<30IU/L阳性120000IU/L--1同左,女<30mIU/m同左,女<30mIU/m120000mU/ml绒促性素β亚基β-HCGS,P0~0.13nmol/L,<3.0IU/L0.042630~3mIU/ml胃泌素GastrinS 空腹<100ng/L1<100pg/ml肾素活性Renin activityP普钠食立位卧位低钠食立位卧位0.08~1.0ng/L.S0.08~0.53ng/L.S1.14~2.53ng/L.S0.25~1.25ng/L.S0.27770.27770.27770.27770.3~3.6ng/ml.h0.3~1.9ng/nl.h4.1~9.1ng/ml.h0.9~4.5ng/ml.h血管紧张素ⅠAngiotensin-ⅠP11~88ng/L111~88pg/ml血管紧张素ⅡAngiotensin-ⅡP普钠食立位卧位低钠食立位卧位46±22ng/L26±11ng/L90±31ng/L65±25ng/L111146±22pg/ml26±11pg/ml90±31pg/ml65±25pg/ml前列腺素Prostaglandin PGP PGEPGF1.01~1.18nmol/L0.35~0.44nmol/L0.0028370.002813355~415pg/ml126~156pg/ml睾酮TestosteroneP 男女14.0~28.02.0nmol/L3.4673.4674.0~8.0μg/dl0.6μg/dl黄体酮ProgesteroneP 卵泡期黄体期<6nmol/L6~64nmol/L3.183.18<2ng/ml2~20ng/ml胰泌素SecretinP21~53ng/L121~53pg/ml三、临床免疫学检验(一)传染病病源体及其有关抗原抗体肥达氏试验Widal testSO,ABC<1:80,H<1:160-同左外斐氏试验Weil-Felix testSOX19,OX2,OXK<1:40同左布鲁氏菌凝集试验S<1:40放免25cpm-同左抗链球菌溶血素O 抗OS<166U Todd-同左嗜异性凝集试验及Davidsohn鉴别吸附试验S羊红细胞凝集豚鼠肾吸附后牛红细胞吸附后<1:32O不变---同左同左同左甲型肝炎抗体抗HAIgM,抗HAIgGS阴性或低值(依方法及个体情况而异)乙型肝炎表面抗原抗体HBsAg,抗-HBs同上乙型肝炎e抗原抗体HBeAg,抗-HBeS同上乙型肝炎核心抗原抗体HBcAg,抗-HBc,抗-HBcIgM,抗-HBcIgG 同上乙型肝炎前S2及其抗体PreS2,抗Pre-S2,S同上乙型肝炎病毒去氧核糖核酸HBV DNAS同上乙型肝炎病毒去氧核糖核酸多聚酶HBV DNAPS同上丙型肝炎病毒抗体抗HCV,抗-HCVIgMS同上丁型肝炎抗原抗体HDAg,抗-HD,抗-HDIgMS同上戊型肝炎病毒抗体抗HEV,抗-HEVIgMS同上流行性出血热病毒IgM抗体抗EHFIgM同上爱滋病毒抗原抗体S同上梅毒螺旋体玻片絮状沉淀试验 VDRLS同上快速血浆反应素卡片试验RPRS同上(二)肿瘤相关抗原检验癌胚抗原Carcinoembryonic antigenCEAS 不吸烟者<2.5μg/L1<2.5ng/ml甲种胎儿蛋白(甲胎蛋白)α fetoprotein AFPS 成人RIA1岁儿RIA<40μg/L<30μg/L凝溶蛋白(本周氏蛋白)Bence-Jones Protein S阴性1阴性α1酸性糖蛋白α1Acid glycoproteinP550~1400mg/L1055~140mg/dl前列腺特异抗原Prostate specific antigen S阴性或低值,依方法及个体情况而异鼻咽癌抗EBVIgAS同上(三)蛋白质和酶的免疫检验(参见第页)免疫球蛋白GIgGIgAIgMIgDIgESSS男女SS5.65~17.65g/L0.90~4.50g/L0.60~2.50g/L0.70~2.80g/L0~80mg/L7~1015μg/L0.010.010.010.01102.4565~1765mg/dl90~450mg/dl60~250mg/dl70~280mg/dl0~8mg/dl3~423IU/ml前白蛋白Pre-albuminS100~400mg/L1010~40mg/mlC反应蛋白C reactive protein CRP SS68~8200μg/L168~8200ng/ml纤维蛋白(原)降解产物FDPS<10mg/L1<10μg/ml铜蓝蛋白CeruloplasminS150~600mg/L1015~60mg/ml乳铁蛋白LactoferrinS<80mg/L1<80mg/ml转铁蛋白TransferrinS2.20~4.00g/L1015~60mg/ml冷球蛋白CryoglobulinS0.01220~400/dl载脂蛋白A1Apo-lipoprotein A1 Apo A1 S载脂蛋白B Apo-lipoprotein B Apo B Sβ2微球蛋白β2MicroglobulinS1.0~2.6mg/L0.10.1~2.6mg/dl去唾液酸糖蛋白AsialoglycoproteinS191±172μg/L10000.191±0.721μg/ml缓激肽BradykininS4.93±2.38μg/L14.93±2.38ng/ml抑胃肽SⅢ型胶原肽ProcollagenⅢ Peptide S8.8±3.5μg/L18.8±3.5ng/mlⅢ型前胶肽S7.7±1.6μg/L17.7±1.6ng/ml胃蛋白酶原亚群PepsinogenS ⅠⅡ38~90μg/L4~21μg/L1138~90ng/ml4~21ng/ml5-羟色胺SerotoninS0.30~1.70μmol/L0.5685~30μg/dl环磷酸腺苷Cycli adenosine monophosphate cAMPP 男女17~33nmol/L11~27nmol/L3.043.045.6~10.9ng/ml3.6~8.9ng/ml环磷酸鸟苷Cyclic guanylmonophos cGMPp5.95±0.36pmol/L15.95±0.36pmol/ml肾素ReninP仰卧,正常食立位1.6±1.5μg/L.h4.5±2.9μg/L.h111.6±1.5ng/ml.h4.5±2.9ng/ml.h。
医学免疫学实验报告
![医学免疫学实验报告](https://img.taocdn.com/s3/m/5c307af564ce0508763231126edb6f1aff0071da.png)
医学免疫学实验报告免疫学实验报告引言:免疫学是研究人体免疫系统的科学,通过实验研究可以更好地了解免疫系统的功能和应对机制。
本次实验旨在探究免疫系统对外来抗原的应答过程,并评估免疫细胞的活性和效能。
实验材料与方法:1. 实验动物:使用小鼠作为实验对象,因其免疫系统与人类相似度较高。
2. 抗原制备:选择一种常见的抗原,如牛血清白蛋白(BSA),通过纯化和浓缩得到高纯度的抗原溶液。
3. 免疫程序:将小鼠随机分为实验组和对照组,实验组注射抗原溶液,对照组注射生理盐水。
观察并记录两组小鼠的免疫应答情况。
4. 免疫指标测定:采集小鼠血液样本,使用酶联免疫吸附试验(ELISA)等技术测定血清中特定免疫球蛋白(如IgG、IgM)的水平。
实验结果与讨论:1. 免疫应答:实验组小鼠在注射抗原后,免疫系统迅速启动,产生针对抗原的特异性免疫应答。
对照组小鼠未注射抗原,免疫系统无明显应答。
2. 抗原特异性免疫球蛋白:ELISA结果显示,实验组小鼠血清中特定抗原特异性免疫球蛋白(如IgG)的水平显著升高,而对照组无明显变化。
这表明实验组小鼠的免疫系统成功识别并产生了针对抗原的免疫应答。
3. 免疫细胞活性:通过流式细胞术等技术,观察并比较实验组和对照组小鼠免疫细胞的活性。
实验结果显示,实验组小鼠的免疫细胞活性较高,表明其免疫系统对抗原的识别和攻击能力增强。
4. 免疫记忆效应:在实验组小鼠中,注射抗原后,免疫系统形成了对抗原的记忆效应。
再次注射相同抗原时,免疫应答更为迅速和强烈。
而对照组小鼠未形成明显的免疫记忆效应。
结论:本次实验结果表明,免疫系统对外来抗原具有高度的特异性和记忆性。
免疫细胞的活性和效能在免疫应答中起到关键作用。
这些实验数据为进一步研究免疫系统的功能和应对机制提供了重要依据。
展望:在未来的研究中,可以进一步探究免疫系统对不同类型抗原的应答差异,以及免疫细胞的分化和调控机制。
此外,可以结合其他技术手段,如基因工程和单细胞测序,深入研究免疫系统的细节和复杂性。
医学检验 免疫学检验 归纳总结
![医学检验 免疫学检验 归纳总结](https://img.taocdn.com/s3/m/3a77df97ba1aa8114531d93b.png)
三大免疫结合反应直接凝集反应玻片凝集反应试管凝集反应间接凝集反应间接血凝试验胶乳凝集试验凝集反应P47 明胶凝集试验自身细胞凝集试验抗球蛋白试验直接coombs试验(RBC膜上的不完全抗原)间接coombs试验(血清中的游离抗原)液体内沉淀试验絮状沉淀试验抗原稀释法抗体稀释法免疫浊度测定沉淀反应凝胶内沉淀试验单向扩散试验双向扩散试验免疫电泳技术对流免疫电泳CIEP火箭免疫电泳RIE免疫电泳IEP免疫固定电泳交叉免疫电泳三大标记技术一、放射免疫:放射免疫:—二、荧光免疫技术P81 荧时间分辨荧光免疫测定(方法)双抗体夹心法光免固相抗体竞争法疫分固相抗原竞争法析类型荧光偏振免疫测定测定荧光酶免疫测定(方法)双抗体夹心法双抗原夹心法固相抗原竞争法三、酶免疫技术P95 酶免疫技术分类均相酶免疫测定EMIT克隆酶测定分析异相酶免疫测定异相液相酶免疫测定固相酶免疫测定酶联免疫吸附试验ELISA (方法)Ab双位点一步法Ag 间接法双抗体夹心法竞争法捕获法其他标记技术化学发光免疫分析技术CLIA 直接化学发光免疫分析CLIAP109类型化学发光酶免疫分析CLEIA电化学发光免疫分析ECLIA生物素,亲和素放大技术固相膜免疫测定免疫试验IFA免疫层析试验ICA膜免疫测定的种类斑点酶免疫吸附试验DOT-ELISE—酶联免疫斑点试验ELISPOT免疫印迹法IBT/EITB放射免疫浊度试验RIPA免疫细胞1、分离方法外周血单个核细胞分离PBMCP161淋巴细胞分离贴壁粘附法吸附柱滤过法磁铁吸引法Percoll分离液法T细胞和B 细胞的分离E花环沉降法尼龙毛柱分离法T细胞亚群分离亲和板结合分离法磁性微球分离法荧光激法细胞分离仪分离法2、免疫细胞表面标志的检测方法抗体致敏细胞花环法P174 免疫细胞化学法免疫荧光法FCM3、功能检测T 细胞增殖试验方法形态学P178 3H-TdR掺入法淋巴细胞T细胞MTT比色法CFSE(活细胞染料)T细胞分泌功能检测T细胞介导的细胞毒性试验体内试验B细胞:B细胞增殖试验、溶血空斑实验、ELISPOT、体内试验NK细胞:..........吞噬细胞...............。
免疫学检验总结表格
![免疫学检验总结表格](https://img.taocdn.com/s3/m/2f57e744a76e58fafbb0030c.png)
用于分离密度相近大小不同;常用介质为蔗糖、甘油;离心分离的物质密度一定要大于密度梯度介质的最大密度;有共沉
等密度梯度
分离大小相同密度不同的物质;介质常用铯盐;铯盐对铝有腐蚀,防止溅出;不会有共沉
沉淀分离
盐析法
原理:盐的存在减弱了蛋白分子周围的水化膜,导致蛋白发生聚集而沉降
有机溶剂沉淀
优:分辨率高、溶剂易除;缺:有毒、可能会是蛋白失活
补体结合免疫荧光
结合激活补体;荧光素标记抗补体的抗体;
双标记染色
标记不同抗体检测同一样品
流式荧光免疫技术
定量分析或纯化;流式细胞仪与荧光免疫结合
6.放射免疫技术(R)
*精确测定各种微量物质
放射免疫分析()
原理:标记抗原(可以为半抗原)*和非标记抗原对特异性抗体(一定量)的竞争结合反应
四甲基异硫氰酸罗丹明()
紫红色粉末,激发后有橙红色荧光;猝灭速度慢
藻蛋白类
藻红蛋白(此类最常用)、藻青蛋白、别藻青蛋白;多呈现橙色或红色物质
荧光显微技术
光源
短波光;波长连续或不连续;
滤板
隔热滤板、激发滤板、吸收滤板;
光路
透射光或落射光
分类
直接染色法
荧光标记抗原(抗体)直接检测抗体(抗原)
间接染色法
酶联免疫+荧光标记
双位点一步法
双抗夹心时,待测样品和酶标物一起加入
间接法
检测抗体最常用
竞争法
既可测抗原,又可测抗体;参考管和待测管对照观察
5.荧光免疫技术(F)
*阳性细胞数量和荧光强度可以作为定量或半定量指标
常用荧光物质
异硫氰酸荧光素()
最常用、最广泛;黄色或橙黄色粉末;激发后发出黄绿色
免疫学检验知识点总结
![免疫学检验知识点总结](https://img.taocdn.com/s3/m/9030d40dbf1e650e52ea551810a6f524ccbfcbd1.png)
免疫学检验知识点总结Immunology testing is a crucial aspect of modern medicine, encompassing a diverse range of techniques used to detect and monitor immune responses. It plays a pivotal role in diagnosing diseases, assessing the effectiveness of treatments, and understanding the immune system's intricate functions.免疫学检验是现代医学的关键领域,包括一系列用于检测和监测免疫反应的技术。
它在诊断疾病、评估治疗效果以及理解免疫系统的复杂功能方面发挥着核心作用。
One fundamental aspect of immunology testing is the identification of antigens and antibodies. Antigens are substances that trigger an immune response, while antibodies are proteins produced by the immune system to neutralize these antigens. Techniques such as immunoassay and ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) are commonly used to detect and measure the presence of antigens and antibodies in biological samples.免疫学检验的一个基本方面是抗原和抗体的识别。
儿童免疫接种检查统计分析表
![儿童免疫接种检查统计分析表](https://img.taocdn.com/s3/m/7b37f9589a6648d7c1c708a1284ac850ac020475.png)
儿童免疫接种检查统计分析表
介绍
本文档旨在统计和分析儿童免疫接种检查的相关数据,以帮助更好地了解和管理免疫接种计划。
数据收集
为了进行统计和分析,需要收集以下数据:
1. 儿童基本信息:年龄、性别、地址等。
2. 接种疫苗信息:疫苗种类、接种时间、剂次等。
3. 免疫接种结果:是否完成接种、接种反应等。
数据分析
通过收集的数据,可以进行以下统计和分析:
1. 免疫接种覆盖率:计算免疫接种的总覆盖率,即完成接种的儿童占总体儿童数量的比例。
2. 疫苗接种率:统计每种疫苗的接种率,即完成接种该疫苗的儿童占相应年龄段儿童数量的比例。
3. 接种剂次分析:分析每个儿童的接种剂次情况,包括已接种剂次和未接种剂次。
可以统计每个剂次的完成率。
4. 接种反应分析:记录儿童接种后出现的不良反应情况,包括轻微反应和严重反应,以及相应的处理措施。
统计分析表格
根据数据分析需求,设计相应的统计分析表格,可包括以下内容:
1. 儿童基本信息表:包括年龄、性别、地址等。
2. 接种疫苗信息表:包括疫苗种类、接种时间、剂次等。
3. 免疫接种覆盖率表:统计总体免疫接种覆盖率。
4. 疫苗接种率表:统计各疫苗的接种率。
5. 接种剂次分析表:统计每个儿童的接种剂次情况。
6. 接种反应记录表:记录儿童接种后的不良反应情况。
结论
通过对儿童免疫接种检查统计分析的进行,可以更好地了解接种情况和影响因素,为制定和改进免疫接种计划提供基础数据和参
考指标。
同时,及时记录和分析接种反应,能够有效提醒和处理相关问题,保障儿童健康和安全。
免疫分析知识点实验总结
![免疫分析知识点实验总结](https://img.taocdn.com/s3/m/1aeaad6e182e453610661ed9ad51f01dc3815748.png)
免疫分析知识点实验总结在本次实验中,我们将学习并掌握免疫分析的基本原理、常用技术及其应用。
通过实践操作,我们将详细了解和探究免疫分析在疾病诊断和药物筛选领域中的应用。
本次实验内容主要包括ELISA实验、免疫印迹(Western blot)实验和流式细胞术(flow cytometry)实验。
ELISA实验ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)是一种常用的免疫分析技术,用于检测和定量分析样品中的蛋白质或其他生物分子。
在本次实验中,我们将学习和掌握间接ELISA实验的操作步骤及其原理。
此外,我们还将探究亚型特异性与络合物酶的选择性和专一性、酶标记的抗体免疫活性、染色试剂的制备及性能等相关知识。
在ELISA实验中,我们首先需要制备试剂盒和试剂液,包括包囊抗体、酶标记的抗体、底物缓冲液等。
接下来,我们将进行样品处理和样品检测,包括特异性的抗体和过度饱和的酶标记抗体的反应。
最后,我们将进行光度计检测,计算所需的数据,并进行数据分析与解释。
免疫印迹(Western blot)实验Western blot(免疫印迹)是一种用于检测和鉴定蛋白质的方法,其原理是利用特异性抗体与目标蛋白结合,然后利用酶标记二抗进行免疫活性的检测。
在本次实验中,我们将学习和掌握Western blot实验的操作步骤及其原理,包括蛋白质的电泳分离、膜转移、抗体反应、显色和成像等步骤。
在实验中,我们首先需要进行蛋白质的电泳分离,将蛋白质从混合物中分离出来。
接下来,我们将进行膜转移,将分离得到的蛋白质迁移至膜上。
然后,我们将进行抗体反应,使用特异性抗体结合目标蛋白。
最后,我们将进行显色和成像,用于检测和鉴定蛋白质。
流式细胞术(flow cytometry)实验流式细胞术是一种用于检测和分析单个细胞的技术,其原理是利用流式细胞仪和特异性抗体对细胞进行特异性检测。
在本次实验中,我们将学习和掌握流式细胞术实验的操作步骤及其原理,包括细胞样本的准备、抗体标记、流式细胞仪检测和数据分析等步骤。
临床免疫学检验知识点汇总
![临床免疫学检验知识点汇总](https://img.taocdn.com/s3/m/fa226d2a6edb6f1aff001f4d.png)
临床免疫学检验1、免疫:是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能2、免疫防御(对外);免疫自稳(防自身免疫病);免疫监视(防肿瘤)。
3、中枢免疫器官:骨髓、胸腺;外周免疫器官:淋巴结、脾脏(最大)、黏膜相关淋巴组织4、B细胞:通过识别膜免疫球蛋白来结合抗原,介导体液免疫;B细胞受体=BCR=mIg表面标志:膜免疫球蛋白(SmIg)、Fc受体、补体受体、EB病毒受体和小鼠红细胞受体。
成熟B细胞:CD19、CD20、CD21、CD22 (成熟B细胞的mIg主要为mIgM和mIgD)同时检测CD5分子,可分为B1细胞和B2细胞。
B细胞功能检测方法:溶血空斑形成试验(体液免疫功能)。
5、T细胞:介导细胞免疫。
共同表面标志是CD3(多链糖蛋白);辅助T细胞的标志是CD4;杀伤T细胞的标志是CD8;T细胞受体=TCR。
T细胞和NK细胞的共同表面标志是CD2(绵羊红细胞受体);CD3+CD4+CD8- = 辅助性T细胞(Th)CD3+CD4-CD8+ = 细胞毒性T细胞(Tc或CTL)(T细胞介导的细胞毒试验)CD4+CD25+ = 调节性T细胞(Tr或Treg)T细胞功能检测:植物血凝素(PHA)刀豆素(CONA)刺激T细胞增殖。
增殖试验有:形态法、核素法。
T细胞亚群的分离:亲和板结合分离法,磁性微球分离法,荧光激活细胞分离仪分离法*E花环试验是通过检测SRBC受体而对T细胞进行计数的一种试验;6、NK细胞:具有细胞介导的细胞毒作用。
直接杀伤靶细胞(肿瘤细胞和病毒感染的细胞)表面标志:CD16(ADCC)、CD56。
测定人NK细胞活性的靶细胞多用K562细胞株,而测定小鼠NK细胞活性则常采用YAC-1细胞株。
7、吞噬细胞包括:单核-吞噬细胞系统(MPS,表面标志CD14,包括骨髓内的前单核细胞、外周血中的单核细胞和组织内的巨噬细胞)和中性粒细胞。
(表达MHCⅡ类分子)8、人成熟树突状细胞(DC)(专职抗原呈递功能):表面标志为CD1a、CD11c和CD83。
免疫检验的自我鉴定表
![免疫检验的自我鉴定表](https://img.taocdn.com/s3/m/dddd4150fe00bed5b9f3f90f76c66137ee064f01.png)
免疫检验的自我鉴定表
《免疫检验的自我鉴定表》
姓名:_______________
性别:_______________
年龄:_______________
职业:_______________
自我鉴定目的:
本人自觉身体健康,但想通过免疫检验了解自身免疫系统的状况,以便及时发现潜在的健康问题并进行预防和治疗。
自我鉴定项目:
1. 免疫系统相关症状:自评是否容易感染、是否有过敏反应、是否出现疲劳等免疫系统相关症状。
2. 个人生活方式评估:睡眠质量、饮食习惯、运动状况等对免疫系统的影响。
3. 环境因素评估:是否常在污染环境中工作或生活,是否有不良的生活习惯等对免疫系统的影响。
4. 家族病史评估:了解家族成员是否有免疫系统相关的疾病,
以便评估个人患病风险。
自我鉴定结果:
通过自我鉴定,我发现自己生活方式较为健康,未出现明显的免疫系统相关症状。
但考虑到家族成员中有免疫系统相关疾病史,我仍希望进行免疫检验,以了解自身免疫系统的状况并及时采取预防措施。
个人声明:
我愿意接受免疫检验并听从医生的建议,以维护自身健康并预防潜在的免疫系统相关疾病。
同时我也会继续保持健康的生活方式,促进免疫系统的健康发展。
鉴定人签名:_______________
日期:_______________
以上内容仅供自我鉴定参考,具体的免疫检验和治疗方案仍需在医生的指导下进行。
免疫学检验知识点总结
![免疫学检验知识点总结](https://img.taocdn.com/s3/m/43895bb1c9d376eeaeaad1f34693daef5ff71359.png)
免疫学检验知识点总结免疫学检验是临床检验中非常重要的一个领域,通过检查人体的免疫系统功能,可以帮助医生诊断疾病、监测疾病进展以及评估治疗效果。
免疫学检验涉及到许多知识点,包括免疫学基础知识、免疫学检验方法、常见的免疫学检验指标等。
本文将对免疫学检验的相关知识点进行总结。
一、免疫学基础知识1. 免疫系统的组成免疫系统由两大部分组成:体液免疫和细胞免疫。
体液免疫主要通过抗体来进行免疫应答,而细胞免疫则通过吞噬细胞和T细胞来进行免疫应答。
2. 免疫系统的功能免疫系统的主要功能包括防御感染、清除异常细胞、调节炎症反应等。
免疫系统通过对抗原的识别和消除来维护机体内稳态,保护机体免受外界病原体的侵害。
3. 免疫系统的异常免疫系统的异常会引发一系列疾病,包括自身免疫病、免疫缺陷病、过敏性疾病等。
免疫系统的异常分析对于疾病的诊断和治疗至关重要。
二、免疫学检验方法1. 免疫荧光法免疫荧光法是一种常用的免疫学检验方法,包括直接免疫荧光法和间接免疫荧光法。
直接免疫荧光法可以用于检测抗原,间接免疫荧光法可以用于检测抗体。
该方法操作简便、灵敏度高,被广泛应用于临床诊断。
2. 酶联免疫吸附测定法(ELISA)ELISA是一种敏感度高、特异性强的免疫学检验方法,可以用于检测抗体或抗原。
它的操作简便,可以同时进行多个样本的检测,被广泛应用于病毒感染、免疫性疾病等的诊断。
3. 免疫印迹法(Western Blot)西方印迹法是一种用于检测蛋白质的技术,可以用于分析抗原或抗体的特异性。
该方法适用于检测免疫印迹图谱,可用于疾病的诊断和治疗。
4. 流式细胞术流式细胞术是一种用于分析或分选细胞的技术,可以用于检测免疫细胞的表面标记物、分析细胞免疫学特性等。
该方法操作简便、高通量化,被广泛应用于免疫学研究和临床诊断。
5. 免疫电泳法免疫电泳法是一种用于分离和检测蛋白质的技术,可以用于检测血清中的免疫球蛋白和其他蛋白质。
该方法适用于检测免疫球蛋白谱图、诊断多发性骨髓瘤等。
免疫检验总结
![免疫检验总结](https://img.taocdn.com/s3/m/d234f7b365ce050876321354.png)
6.免疫活性细胞 能接受抗原刺激而发生分化、增殖形成免疫效应物质并能进行特性免疫反应的细胞。
7.体液免疫 B细胞参与的免疫应答。
8.细胞免疫 T细胞参与的免疫应答。
9.变态反应 是机体受同一抗原再刺激后发生的组织损伤或生理功能紊乱的特异性反应。
23.自身免疫 自身免疫病有哪些特征 :自身免疫是指机体免疫系统对自身抗原发生免疫应答,产生自身抗体和(或)自身致敏淋巴细胞的现象。自身免疫性疾病往往同时具有以下特征: 1.患者血液中可测得高效价自身抗体和(或)自身组织成份起反应的致敏淋巴细胞.2.自身抗体和(或)自身致敏淋巴细胞作用于靶 抗原所在组织、细胞造成相应组织器官的病理性损伤和功能障碍。动物实验中可复制出相似的病理模型,并能通过患者的血清或淋巴细胞 使疾病被动转移。3.病情转归与自身免疫反应强度密切相关。4.除一些病因明了的继发性自身免疫性疾病可随原发疾病的治愈而消退 外,多数原因不明的自身免疫病常反复发作和慢性迁延。5.疾病的发生有一定的遗传倾向。
30.白细胞分化抗原(CD分子)的应用 CD抗原及其相应的单克隆抗体在基础和临床免疫学研究中已得到广泛的应用。基础免疫学研究中CD主要应用于:1.CD抗原的基因 克隆,新CD抗原及新配体的发现。2.CD抗原结构与功能关系。3.细胞激活途径和膜信号的传导。4.细胞分化过程中的调控。5 .细胞亚群的功能。在临床免疫学研究中,CD单克隆抗体可用于:1.机体免疫功能的检测。2.白血病、淋巴瘤免疫分型。3.免疫 毒素用于肿瘤治疗、骨髓移植及移植排斥反应的防治。4.体内免疫调节治疗。
22.变态反应的防治原则: 1.脱敏注射:采用小剂量、短间隔、连续多次注射变应原的方法,逐渐消耗体内已形成的IgE,以便可大量注射抗毒素血清而不致发 病。2.减敏疗法:皮下多次,小剂量注射变应原后,循环中出现IgG封闭抗体,阻断变应原与IgE结合,可防止支气管哮喘等疾病 的复发。3.免疫抑制剂的应用:如肾上腺皮质激素类,其作用有:①抗炎作用;②稳定溶酶体;③减少淋巴细胞数量;④抑制单核-吞 噬细胞系统功能。4.阻止活性介质释放:如采用色甘酸二钠,阿司匹林和儿茶酚胺类药物等。5.对抗活性介质的作用:临床上常用苯 海拉明,扑尔敏等抗组织胺药物。
免疫学检查(总结材料)
![免疫学检查(总结材料)](https://img.taocdn.com/s3/m/9fb5855ccf84b9d528ea7ac1.png)
在 SLE 诊断中的意义(TANG 小结) 标记性抗体, 特异性 99%, 敏感性 30%。 与疾病活动性无关。 重要抗体,与活动性密切相关;狼疮肾。 见于几乎所有患者,但特异性低。 与雷诺现象有关。 与皮肤病变有关。 阳性的母亲所产婴儿易患新生儿 SLE。 包括:抗心磷脂抗体、狼疮抗凝物、梅毒血清试验假阳性。 对诊断 SLE 和抗磷脂抗体综合征(流产)有意义。 有助于诊断,且提示疾病活动
Hale Waihona Puke 6.抗磷脂抗体 补体 总补体以及补体 C3、C4
免疫学检验期末总结
![免疫学检验期末总结](https://img.taocdn.com/s3/m/6d2cac3f30b765ce0508763231126edb6f1a76d2.png)
免疫学检验期末总结免疫学检验是运用免疫学原理和方法进行临床检验的一门学科,是现代医学检验技术的重要组成部分。
它通过检测和评估机体免疫系统的功能状态,为诊断和治疗各种免疫性疾病提供了重要的依据。
免疫学检验涉及广泛,包括了体液免疫学检验和细胞免疫学检验两大类。
体液免疫学检验主要是通过检测体液中的免疫相关分子和抗体来评估机体的免疫状态。
这些检测项目包括血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM的测定、补体成分的测定、病毒和细菌抗体的检测以及自身抗体的测定等。
这些指标可以用来评估机体的免疫功能是否正常,例如,IgG、IgA、IgM的测定可以用来评估机体的免疫应答情况,补体成分的测定可以用来评估机体的免疫炎症反应情况。
细胞免疫学检验主要是通过检测机体免疫细胞的数量和功能状态来评估机体的免疫功能。
这些检测项目包括外周血淋巴细胞亚群的测定、嗜中性粒细胞吞噬活力的测定、淋巴细胞活化指标的测定以及淋巴细胞功能的测定等。
这些指标可以用来评估机体的免疫细胞的数量和功能状态是否正常,例如,外周血CD4+ T细胞/CD8+ T细胞比值的测定可以用来评估机体免疫响应的平衡性,嗜中性粒细胞吞噬活力的测定可以用来评估机体非特异性免疫的功能状态。
在免疫学检验中,常用的技术包括酶联免疫吸附法(ELISA)、放射免疫分析法(RIA)、免疫荧光法(IFA)、流式细胞仪技术和免疫组化技术等。
这些技术可以对免疫学检验项目进行定量或定性的测定,并且具有灵敏、特异、快速和可重复性的特点,对于免疫功能的评估具有重要的临床应用价值。
免疫学检验在临床医学中有着广泛的应用。
它不仅可以用于诊断各种免疫性疾病,如自身免疫性疾病、免疫缺陷病、过敏性疾病等,还可以用于评估疫苗的免疫效果、研究药物的免疫毒性、判断移植排斥反应和检测感染病原体等。
然而,免疫学检验也存在一些技术和方法上的局限性。
首先,免疫学检验项目繁多,选择合适的检测项目需要综合考虑患者的临床症状和免疫学异常指标。
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1.沉淀反应
①可溶性抗原;②多克隆抗体更适合;③R型血清首选
液相沉淀试验
环状沉淀试验:定性
絮状沉淀试验
抗体稀释法、棋盘格法(找出Ag、Ab最佳比例)
凝胶沉淀试验
单向扩散试验
定量试验;两个曲线
双向免疫扩散试验(定性)
沉淀线数目:抗原或抗体不纯;沉淀线弯向分子量大的;沉淀线靠近浓度低的;可以测定效价(半定量)
第一部分:基本理论
抗原抗体反应
抗原
抗原的两种特性:免疫原性、免疫反应性
共同抗原、交叉反应、异嗜性抗原、超抗原等
抗原的分类依据性能:完全抗原、不完全抗原
依据抗体产生是否要T cell刺激:胸腺依赖性抗原(TD-Ag)、 胸腺非依赖性抗原(TI-Ag)
丝裂原
刀豆蛋白A(ConA)
T细胞有丝分裂原
植物凝集素
间接血凝试验
载体颗粒为红细胞
其它凝集试验
抗球蛋白试验(Coombs试验)
是抗球蛋白参与的间接血凝试验
直接Coombs
检测已粘附在RBC的不完全抗体;新生儿溶血、自身免疫溶血性贫血
间接Coombs
血清中游离抗体;多用于检测母体Rh(D)
协同凝集试验
载体颗粒为SPA的间接凝集试验
冷凝集试验
检测冷凝集素的方法,0~4℃最明显
②定性试验
直接凝集试验
玻片凝集
定性;多用于红细胞ABO血型
试管凝集
半定量、多用于Ab;外斐试验、肥达试验
间接凝集试验
①将抗原与某一载体结合;②常用载体:人O型RBC、SRBC、SPA等
间接凝集试验
正向间接凝集试验
用抗原致敏颗粒检测抗体
反向间接凝集试验
用已知抗体检测抗原
间接凝集抑制试验
用已知抗原致敏颗粒和相应抗体,检测样本中是否有与致敏颗粒相同的抗原,有正向和反向
T细胞有丝分裂原
美洲商陆丝裂原
T细胞和B细胞有丝分裂原
脂多糖(LPS)
B细胞有丝分裂原
葡萄球菌A蛋白(SPA)
B细胞有丝分裂原
抗体
结构与功能:略
IgG
单体分子、血清和细胞外液中含量最高
IgM
五聚体、分子量最大、不能透过胎盘、宫内感染指标
IgA
有两种类型(血清型和分泌型)、对新生儿早期抗感染十分重要
IgD
橘红色粉末;激发后为橘红色荧光
四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC)
紫红色粉末,激发后有橙红色荧光;猝灭速度慢
藻蛋白类
藻红蛋白PE(此类最常用)、藻青蛋白PC、别藻青蛋白APC;多呈现橙色或红色物质
荧光显微技术
光源
短波光;波长连续或不连续;
单体分子、膜结合型IgD是Bcell分化成熟的标志
IgE
单体分子、含量最少、特异性过敏和寄生虫感染中有意义
抗原抗体反应原理
结合力、亲和力与亲合力
抗原抗体反应特点
①特异性;②比例问题:等价带、前带、后带;③可逆性
影响因素
反应物
抗原
理化性质、抗原表位等
抗体
来源:R型血清和H型血清
特异性与亲和力
反应条件
电解质、酸碱度、温度、比例
抗原抗体的制备
免疫原的制备
颗粒性免疫原的制备
较简单、分离或纯培养
可溶性抗原的制备
粗抗原制备:捣碎组织、破碎细胞、粗提取
分离与纯化、浓缩与保存
人工免疫原的制备
将半抗原与载体结合,常用蛋白质作为载体
合成肽抗原的制备
合成肽属于半抗原的一种,所以·····
基因工程抗原的制备
获得目的抗原的基因编码,然后扩增纯化
双位点一步法
双抗夹心时,待测样品和酶标物一起加入
间接法
检测抗体最常用
竞争法
既可测抗原,又可测抗体;参考管和待测管对照观察
5.荧光免疫技术(F)
*阳性细胞数量和荧光强度可以作为定量或半定量指标
常用荧光物质
异硫氰酸荧光素(FITC)
最常用、最广泛;黄色或橙黄色粉末;激发后发出黄绿色
四乙基罗丹明(RB200)
免疫电泳
对流免疫CIEP
双扩+电泳;Ag向正极泳动、Ab向负极泳动
火箭电泳
单扩+电泳;定量
免疫电泳
先蛋白区带电泳、再双扩
免疫浊度测定(定量)
透射浊度测定、散射浊度测定
免疫速率抑制浊度测定
用一定量的已知半抗原-载体与限量特异性抗体反应,测定生成的半抗原-载体-抗体所造成的散色速率
2.凝集反应
①颗粒性抗原或带有可溶性抗原的载体
制备单克隆抗体:在小鼠腹腔诱生出肿瘤并产生含McAb的腹水
鉴定、保存、应用
基因工程抗体的制备
抗原抗体的纯化
离心分离
差速离心
粗分离;会有共沉;分离分子量相差大的物质;动力学方法
密度梯度离心
用于分离密度相近大小不同;常用介质为蔗糖、甘油;离心分离的物质密度一定要大于密度梯度介质的最大密度;有共沉
等密度梯度
抗体的制备
多克隆抗体制备
使用免疫原免疫动物获得抗体、又叫抗血清;
弗氏完全佐剂(CFA,石蜡油+羊毛脂+卡介苗)和弗氏不完全佐剂(IFA,石蜡油+羊毛脂)
大致过程:获取、鉴定、纯化、保存
单克隆抗体(McAb)制备
原理:杂交瘤技术等
亲本细胞的选择与融合:无菌取脾
HAT培养基的选择作用
阳性克隆选择与克隆化
亲和层析
利用欲分离物质和它们的特异性配体间பைடு நூலகம்有特异性亲和力
电泳
有支持体
纸电泳
醋酸纤维薄膜
薄层电泳(薄膜或薄板)
非凝胶性支持体区带电泳(淀粉、纤维素粉、硅胶等)
凝胶支持体区带电泳(淀粉液、聚丙烯酰胺凝胶)
无支持体
Tiselius移界电泳
显微电泳
等点聚焦电泳
等速电泳
密度梯度电泳
聚丙烯酰胺凝胶电泳与SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳区别
分离大小相同密度不同的物质;介质常用铯盐;铯盐对铝有腐蚀,防止溅出;不会有共沉
沉淀分离
盐析法
原理:盐的存在减弱了蛋白分子周围的水化膜,导致蛋白发生聚集而沉降
有机溶剂沉淀
优:分辨率高、溶剂易除;缺:有毒、可能会是蛋白失活
非离子聚合物沉淀
常用聚乙二醇
离子交换层析
凝胶层析
常用凝胶:葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶、Superdex
自身红细胞凝集试验
主要试剂为抗人O型红细胞MCAb,可以与各型RBC结合却不引起凝集;样本为全血
特点是排除由于红细胞凝集可能引起的假阳性
3.补体试验
系统:①缓冲液PBS②补体③SRBC④溶血素
补体测定试验
血清总补体活性(CH50)测定
活化经典途径;为么要50%溶血作为终点测定;意义
旁路活化途径(AP-H50)测定
EGTA螯合Ca2+,封闭Cl,阻断经典途径
补体结合试验
分为直接(不溶血为阳性)和间接(溶血为阳性)两类
实验结果要对照众多对照实验观察
4.酶免疫技术(E)
定量或定性
固相载体
最常用聚苯乙烯
酶和底物
最常用辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP);还有β-半乳糖胺酶
分类
双抗体(原)夹心
检测抗原最常用;只适用于二价或二价以上大分子抗原