酵母RNA的提取实验报告
实验三 酵母RNA的提取及含量测定
华南师范大学实验报告学生姓名吴志军学号20082502046专业生物工程年级、班级08工程1班课程名称下游技术实验项目酵母RNA提取实验类型验证设计综合实验时间2011年10月17 日实验指导老师江学文实验评分实验三酵母RNA的提取及含量测定一、实验目的与要求1、了解并掌握稀碱法提取RNA的原理和方法。
2、熟悉和掌握紫外吸收法测定核酸含量原理和操作方法，3、熟悉紫外分光光度计的基本原理和使用方法。
二、实验原理由于RNA的来源和种类很多，因而提取制备方法也很各异。
一般有苯酚法、去污剂法和盐酸胍法。
其中苯酚法又是实验是最常用的。
组织匀浆用苯酚处理并离心后，RNA即溶于上层被酚饱和的水相中，DNA和蛋白质则留在酚层中。
向水层加入乙醇后，RNA即以白色絮状沉淀析出，此法能较好的除去DNA和蛋白质。
上述方法提取的RNA具有生物活性。
工业上常用稀碱法和浓盐法提取RNA，用这两种方法所提取的核酸均为变性的RNA，主要用作制备核苷酸的原料，其工艺比较简单。
浓盐法使用10%左右氯化钠溶液，90℃提取3-4h，迅速冷却，提取液经离心后, 上清液用乙醇沉淀RNA。
稀碱法使用稀碱使酵母细胞裂解，然后用酸中和，除去蛋白质和菌体后的上清液用乙醇沉淀RNA或调pH2.5利用等电点沉淀。
酵母含RNA达2.67-10.0%，而DNA含量仅为0.03-0.516%，为此，提取RNA多以酵母为原料。
核酸、核苷酸及其衍生物的分子结构中的嘌呤、嘧啶碱基具有共轭双健系统（-C=C一C=C-），能够强烈吸收250-280nm 波长的紫外光。
核酸（DNA,RNA）的最大紫外吸收值在260nm 处。
遵照Lambert-Beer 定律，可以从紫外光吸收值的变化来测定核酸物质的含量。
在不同pH 溶液中嘌呤、嘧啶碱基互变异构的情况不同，紫外吸收光也随之表现出明显的差异，它们的摩尔消光系数也随之不同。
所以，在测定核酸物质时均应在固定的pH溶液中进行。
核酸的摩尔消光系数（或吸收系数），通常以ε（ρ）来表示，即每升含有一摩尔核酸磷的溶液在260nm 波长处的消光值（即光密度，或称为光吸收）。
酵母rna的提取与鉴定实验报告
4. RNA含量的测定
- 使用紫外分光光度计测定RNA在260nm处的吸光度- 根据标准曲线计算RNA浓度
- OD260值：- 标准曲线方程：- RNA浓度（μg/ml）：
- 测定结果的准确性和可靠性- 与标准RNA液的浓度对比
- 酵母粉质量：- 沸水浴时间：- 离心转速和时间：- 乙醇体积和洗涤次数：
- 提取的RNA沉淀量（通过观察或称重）- 提取过程中可能的损失和干扰因素
3. RNA的纯化
- 使用特定试剂（如异硫氰酸胍-苯酚-氯仿）进行抽提- 或根据RNA在等电点的pH环境下溶解度最小进行纯化
- 纯化试剂的种类和用量：- pH调节范围和纯化时间：
- 分析实验结果的可靠性和准确性- 讨论可能的误差来源和改进措施
7. 结论与展望
- 总结实验过程和结果，得出实验结论- 提出改进方法和未来研究方向
- 实验结论：- 改进建议：- 未来研究方向：
- 对实验结果的全面评价- 对未来研究的展望和建议
5. RNA的鉴定
- 进行磷酸的检测、核糖的显色反应以及嘌呤碱基的检测等化学反应- 观察颜色变化或生成物
- 磷酸检测结果：- 核糖显色反应结果：- 嘌呤碱基检测结果：
- 鉴定结果的准确性和可靠性- RNA组分的完整性和稳定性
6. 数据整理与分析
- 整理实验数据，计算RNA的纯度、提取率和产率等
- RNA纯度（%）：- RNA提取率（%）：- 总制品重量和产率：
rna的提取与鉴定实验报告
实验步骤
操作细节与试剂
数据记录
结果与分析
1. 实验准备
- 仪器：紫外分光光度计、离心机、水浴锅等- 试剂：酵母粉、NaCl、HCl、乙醇、氨水、RNA沉淀剂等
生物化学实验报告-酵母RNA的提取与鉴定
实验五酵母RNA的提取与鉴定一、实验目的1.掌握稀碱法分离酵母RNA的原理与操作过程。
2.了解RNA的组分并掌握定性鉴定的具体方法。
二、实验原理1.酵母核酸中RNA含量较多，DNA含量则少于2%。
2.RNA可溶于碱性溶液，当碱被中和后，可加乙醇使其沉淀，有此可得粗RNA制品。
3.用碱液提取的RNA有不同程度的降解三、实验仪器1.离心机2.水浴锅3.电炉4.烧杯5.量筒四、实验试剂1.干酵母粉2.0.2%氢氧化钠溶液：2g氢氧化钠溶于蒸馏水并稀释至1000ml。
3.乙酸4.95%乙醇5.无水乙醚6.10%硫酸7.氨水9.5%硝酸银溶液：5g硝酸银溶于蒸馏水并稀释至100ml，贮于棕色瓶中。
1.苔黑酚-三氯化铁溶液：将100mg苔黑酚溶于100ml浓盐酸中，再加入100mgFeCl3.6H2O。
临用时配制。
五、实验步骤1.RNA的提取：（1）称取2g干酵母粉于100ml烧杯中，加入0.2%氢氧化钠溶液10ml，沸水浴加热30分钟，经常搅拌（如沸水浴过程中溶液蒸干可再加5~10ml氢氧化钠）。
然后加入乙酸数滴，使提取液呈酸性（pH 试纸检验），离心10-15分钟（4000r.p.m）。
（2）取上清液，加入2倍体积的95%乙醇，边加边搅，加毕，静止，待完全沉淀，过滤。
（3）滤渣先用95%乙醇洗2次，每次约5毫升，再用无水乙醚洗2次，每次也约5ml。
（4）洗涤时可小心地用玻璃棒搅动沉淀。
乙醚滤干后，滤渣即为粗RNA，可鉴定。
2.鉴定：（1）取上述RNA约0.5g，加10%硫酸5ml,加热至沸1—2分钟，将RNA水解。
（2）取水解液0.5ml，加入苔黑酚-三氯化铁溶液1ml，加热至沸1分钟，观察颜色变化。
（3）水解液2ml，加入氨水2ml和5%硝酸银溶液1ml，观察是否产生絮状嘌呤银化合物。
六、实验结果加热至沸1分钟后，溶液变成绿色；产生絮状嘌呤银化合物沉淀七、实验分析实验注意事项1.过滤时,洗涤不能带水,否则沉淀粘在滤纸上取不下来。
酵母RNA的提取
目录
• 实验准备 • 实验步骤 • 结果分析 • 实验结论 • 参考文献
01 实验准备
实验材料
01
02
03
04
新鲜酵母样品
确保酵母样品新鲜且无污染， 以保证RNA提取的质量。
无菌水
用于清洗实验器具和稀释提取 液。
离心管和离心机
用于离心分离酵母细胞和上清 液。
滤纸和过滤器
用于过滤上清液和去除杂质。
价值的信息。
05 参考文献
参考文献
01
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02
[请在此处插入参考文献2]
[请在此处插入参考文献3]
03
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破碎条件优化
为了获得最佳的破碎效果，可能 需要优化破碎条件，如破碎时间 、破碎次数、破碎温度等。
沉淀与洗涤
沉淀
在破碎后的酵母细胞液中加入适量的沉淀剂，如异丙醇或乙醇，使RNA沉淀下 来。
洗涤
将沉淀物洗涤干净，去除杂质和残留的沉淀剂。洗涤过程中需注意洗涤液的更 换和洗涤次数。
RNA的提取与纯化
提取RNA
将沉淀物溶解在适量的缓冲液中，通过离心或过滤的方法将 RNA从细胞残渣中分离出来。
纯化RNA
去除提取液中的蛋白质、DNA等杂质，获得纯度较高的RNA 。纯化方法包括凝胶电泳、离心机分离、酶解等方法。
03 结果分析
RNA浓度测定
总结词：准确测量
详细描述：使用紫外分光光度计测定提取的RNA溶液的吸光度，根据标准曲线计 算RNA浓度。
实验结果可重复
通过实验操作，成功从酵母细胞中提 取出RNA，且质量较高，无明显杂质。
酵母RNA的提取实验报告
酵母RNA的提取实验报告实验报告：酵母RNA的提取一、实验目的1.学习和掌握酵母RNA的提取基本原理和方法。
2.了解RNA在生物体内的生物功能及其重要性。
3.培养实验技巧和操作能力，提高实验素养。
二、实验原理RNA（核糖核酸）是生物体内的重要生物分子之一，它参与蛋白质合成、基因表达等重要生命活动。
酵母是一种常用的真核生物模型，其RNA提取方法与人体、植物等真核生物类似。
本实验采用氯仿-异戊醇法提取酵母RNA。
主要步骤包括细胞破碎、离心分离、有机溶剂抽提、乙醇沉淀等。
三、实验步骤1.准备试剂和器材（1）试剂：氯仿、异戊醇、无水乙醇、DEPC水、RNA酶。
（2）器材：研钵、离心管、移液器、玻璃棒、氮气吹干器、分光光度计等。
2.酵母细胞破碎（1）在冰上用研钵将酵母细胞研磨成粉末。
（2）加入适量DEPC水，搅拌均匀。
（3）用玻璃棒将细胞碎片挑出，弃去上清液。
（4）加入适量DEPC水，搅拌均匀，重复上述步骤，直到细胞完全破碎。
3.离心分离（1）将破碎的酵母细胞溶液转移到离心管中。
（2）在4℃下，以12000rpm的转速离心15分钟。
4.有机溶剂抽提（1）用移液器将上清液小心地转移到另一个离心管中。
（2）加入等体积的氯仿-异戊醇混合液（氯仿：异戊醇=24：1），用玻璃棒搅拌均匀。
（3）在4℃下，以12000rpm的转速离心15分钟。
5.乙醇沉淀（1）将上清液转移到新的离心管中，并加入等体积的无水乙醇，用玻璃棒搅拌均匀。
（2）在4℃下，以12000rpm的转速离心15分钟。
6.洗涤和干燥（1）用移液器小心地将上清液吸出，留下沉淀物。
（2）加入适量75%乙醇，用玻璃棒搅拌均匀，去除残留的乙醇和水分。
（3）在氮气吹干器下将沉淀物吹干约5分钟。
7.RNA溶解与定量（1）加入适量DEPC水，将沉淀物溶解。
（2）用分光光度计测定RNA溶液的吸光度值（A260nm），计算RNA浓度。
四、实验结果与分析表1：酵母RNA提取结果本实验通过氯仿-异戊醇法成功地提取出了高浓度的酵母RNA。
酵母rna的提取实验报告
酵母rna的提取实验报告酵母RNA的提取实验报告引言：RNA是一种重要的生物分子，它在细胞内承担着转录和翻译的重要功能。
在分子生物学研究中，提取RNA是一项常见的实验操作。
本实验旨在通过提取酵母细胞中的RNA，探究RNA的提取方法和应用。
材料与方法：1. 实验材料：酵母细胞、细胞裂解缓冲液、RNA提取试剂盒、异丙醇、氯仿、异丁醇、乙醇、载玻片、显微镜等。
2. 实验步骤：a. 酵母细胞的培养与收获：将酵母细胞培养于培养基中，通过离心将细胞收获。
b. 细胞裂解：将收获的细胞用细胞裂解缓冲液裂解，以释放RNA。
c. RNA提取：使用RNA提取试剂盒，按照说明书中的步骤进行RNA提取。
d. 纯化RNA：通过异丙醇沉淀和氯仿萃取，去除DNA和蛋白质等杂质。
e. 洗涤与干燥：使用异丁醇和乙醇进行洗涤，最后将RNA干燥。
f. 检测RNA：将提取得到的RNA溶解于适当的缓冲液中，使用紫外可见光谱仪或显微镜观察RNA的浓度和纯度。
结果与讨论：通过上述实验步骤，我们成功地提取到了酵母细胞中的RNA。
在实验过程中，我们注意到以下几点：1. 细胞裂解的缓冲液选择：细胞裂解缓冲液的选择对RNA提取至关重要。
合适的缓冲液可以有效地破坏细胞膜，释放细胞内的RNA。
在本实验中，我们选择了一种经充分验证的缓冲液，以确保细胞能够完全裂解。
2. RNA提取试剂盒的使用：RNA提取试剂盒是一种常用的RNA提取方法。
它通过特定的试剂和离心步骤，将RNA从细胞裂解物中分离出来。
在本实验中，我们按照试剂盒的说明书进行操作，成功地提取到了RNA。
3. RNA的纯化：RNA的纯化是为了去除细胞裂解物中的杂质，如DNA和蛋白质。
在本实验中，我们使用了异丙醇沉淀和氯仿萃取的方法，成功地纯化了RNA。
这些方法可以有效地去除DNA和蛋白质，提高RNA的纯度。
4. RNA的检测：在实验中，我们使用紫外可见光谱仪或显微镜对提取得到的RNA进行检测。
通过观察RNA的浓度和纯度，我们可以评估提取的RNA是否适用于后续的实验操作。
实验三酵母核糖核酸(RNA)的提取
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12
2.磷酸的鉴定：取试管两只，分别标明测 定管与对照管，然后依次加入下列各试剂：
管号
RNA水解 5％H2SO4 钼酸铵试剂 液
测定管 0.2ml
不加
5滴
VC 5滴
对照管 不加
0.2ml
5滴
5滴
放置数分钟，观察两管颜色有何不同。 磷酸+钼酸铵——磷钼酸+Vc——钼蓝
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实验三 酵母菌RNA的提取、鉴定及
定量测定
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1
一、实验目的
• 掌握稀碱（NaOH）法分离酵母RNA的原理 与方法
• 了解RNA的组分并掌握定性鉴定的具体方法。
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2
二、实验原理
• （一）目前常用的RNA的制备方法 • 浓盐法：是用高浓度盐溶液处理，同时加热，以改变细胞壁
的通透性，使核酸从细胞内释放出来。成本低、适于大规模 操作。
3.核糖的鉴定：取试管两只，分别标明测定管与 对照管，然后依次加入下列各试剂。
管 号 RNA水解液 5％H2SO4 3，5-二羟甲苯
测定管 4滴
不加
6滴
对照管 不加
4滴
6滴
将两试管放入沸水浴内加热10分钟，比较两管之颜色。
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4.脱氧核糖的鉴定：取两试管分别标明测定管与 对照管，然后依次加入下列各试剂。
管 号 RNA水解液 5％H2SO4 二苯胺
测定管 4滴
不加
6滴
对照管 不加
4滴
6滴
将两试管同时放入沸水浴内，加热10分钟后，比较两 管之颜色。
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思考题
酵母rna的提取实验报告
酵母rna的提取实验报告酵母RNA的提取实验报告。
实验目的，通过实验研究酵母RNA的提取方法，为后续的基因表达调控研究提供技术支持。
实验材料与方法：1. 实验材料，酵母细胞培养物、TRIzol试剂、异丙醇、氯仿、乙醇、DEPC水等。
2. 样品制备，取酵母培养物，离心收集酵母细胞，冰上洗涤去除培养基。
3. 细胞破碎，向酵母细胞中加入TRIzol试剂，用离心管摇匀，静置离心管5分钟。
4. RNA提取，加入氯仿，摇匀，离心分离上清液，上清液转移至新离心管中，加入异丙醇沉淀RNA。
5. RNA沉淀，离心沉淀RNA，弃上清液，加入乙醇洗涤RNA，再次离心沉淀RNA。
6. RNA溶解，用DEPC水溶解RNA，测定纯度和浓度。
实验结果：1. 细胞破碎，经过加入TRIzol试剂处理后，酵母细胞成功破碎，形成混浊的混合液。
2. RNA提取，通过氯仿萃取法，成功分离出上清液中的RNA，得到透明的上清液。
3. RNA沉淀，加入异丙醇后，观察到RNA在离心管底部形成白色沉淀。
4. RNA溶解，最终得到溶解度较高的RNA样品，纯度和浓度符合实验要求。
实验分析：本次实验采用的酵母RNA提取方法较为简单，通过TRIzol试剂的使用，成功实现了酵母细胞的破碎和RNA的提取。
氯仿的加入有效分离出RNA，异丙醇的沉淀步骤也取得了良好的效果。
最终得到的RNA样品纯度高，浓度适宜，可以用于后续的实验研究。
实验结论：本实验成功建立了一种适用于酵母细胞的RNA提取方法，为后续的基因表达调控研究提供了可靠的技术支持。
该方法操作简便，提取效果良好，适用于大规模样品的提取工作。
参考文献：1. Chomczynski P, Sacchi N. Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction. Anal Biochem. 1987Apr;162(1):156-9.2. Schmitt ME, Brown TA, Trumpower BL. A rapid and simple method for preparation of RNA from Saccharomyces cerevisiae. Nucleic Acids Res. 1990 Jan25;18(10):3091-2.。
生化实验3 RNA提取
南京大学医学系实验报告题目：酵母RNA的提取姓名：彭睿学号：171230511 日期：2019年3月29日(一)实验目的：掌握稀碱法提取酵母RNA的原理和方法。
(二)实验材料：市售酵母粉、冰醋酸、无水乙醚、95%乙醇溶液、氢氧化钠溶液（0.2%）(三)实验原理：电子天平、水浴锅、冷冻离心机、离心管、玻璃棒、抽滤瓶、砂芯漏斗、烧杯、量筒、广泛pH试纸(四)实验原理：1. 酵母核酸中RNA含量较多，DNA则少于2%， RNA可溶于碱性溶液，当碱被中和后，可加乙醇使其沉淀，由此可得到粗RNA制品。
2. 用碱液提取的RNA有不同程度的降解，不能用做进一步的性质测量。
3.稀碱沸水浴的作用是：破碎细胞、释放出细胞内容物，溶解RNA。
加入乙酸的目的：调节pH。
第一次离心：去除蛋白质、菌体等杂质。
95%冷乙醇与第二次离心的目的：沉淀RNA，获得粗品。
最后乙醇洗两次，乙醚洗两次，即获得粗RNA。
(五)实验步骤：1.称取8.05g酵母粉于100ml烧杯中，加入0.2%NaOH溶液40ml，沸水浴加热30min，同时不断用玻璃棒搅拌。
2.冷却后，加入乙酸调pH为5-6，转入离心管，离心15min（4000r/min）。
3.吸取上清于100ml烧杯中，加入两倍体积的95%乙醇，缓慢加入，边加边搅。
静置，待完全沉淀后，离心5min（4000r/min），倒置离心管彻底去除上清液，留下糊状沉淀。
4.沉淀先用10ml的95%乙醇悬浮，抽滤。
滤渣用95%乙醇洗两次，无水乙醚洗两次；洗涤时用玻璃棒小心搅动沉淀。
5.粗RNA称重，贴好标签，留作下次鉴定和测量用。
(六)实验结果：1.沸水浴后，得到的混悬液呈米黄色。
2.调节pH至5-6时，溶液滴在广泛pH试纸上几乎不变色，颜色接近pH试纸原色。
3.第一次离心的结果如图，沉淀为灰白色，上清液为澄清的淡黄色溶液。
4. 加入两倍量的乙醇并搅拌后，出现了一些白色沉淀，因为第一次离心后我们进行了洗涤与转移，溶液量较大，我们选择均分到两个离心管进行离心，离心前进行了约5min 的静置，最终沉淀呈白色，溶液为很淡的黄色。
酵母RNA的提取实验报告
酵母RNA的提取紫外吸收法测RNA浓度实验报告一、实验目的1、掌握稀碱法提取酵母RNA的原理和方法。
2、掌握紫外线（UV）吸收法测定核酸浓度的原理。
3、熟悉紫外分光光度计的使用方法。
二、实验原理核酸是生命的最基本物质之一，广泛存在于所有动植物细胞、微生物体内。
对核酸的研究是更深入研究生命体的基本前提之一。
研究核酸需要纯度很高的核酸，所以核酸的提取方法也就在生物学研究中相当重要。
本次实验提取酵母的核糖核酸（RNA）。
RNA离体后稳定性很差，含量低，所以在提取的时候就要注意防止核酸的降解和变性，防止过酸、过碱、避免剧烈搅拌，尤其重要的是防止RNA酶的作用。
本实验是医药卫生领域与大工业生产的基础方法。
核酸（RNA）都是由核苷酸组成的多聚核苷酸化合物，而核苷酸是由糖、碱基和磷酸以等分子比例构成的，故测定组成核苷酸的任意一种组分即可以测定生物体内核酸的含量或者是提取出来的核酸的含量。
提取RNA的方法很多，在工业生产上常用的是稀碱法和浓盐法。
前者是利用碱使细菌细胞壁溶解，是RNA释放出来，后者是在加热的条件下，利用高浓度的盐改变细胞膜的通透性，使RNA释放出来。
使用浓盐法提取RNA的时候应该注意掌握温度，直接至90~100℃浸提，避免在20~70℃的时间过长，因为这是磷酸二酯酶和磷酸单酯酶的作用活跃的温度范围，会使RNA降解而降低提取率。
这两种方法是从废弃的啤酒酵母中提取RNA的一般方法。
但是这两种方法各有利弊，如浓盐法提取的RNA纯度高，而稀碱法提取的时间短，提取率高，更利于工业化生产。
RNA在260nm处有最大吸收峰，一定浓度范围内其浓度与吸光度成正比，故可以用紫外分光光度计通过比色来测定RNA含量。
由于蛋白质在280nm波长处也有光吸收，对RNA测定有一定的干扰作用，但蛋白质的最大吸收峰在280nm处，如同时测定280nm的光吸收，通过计算可消除其对RNA测定的影响。
因此如其中含有蛋白质时必须同时测定280nm和260nm 的吸光度，可通过计算测定溶液中RNA的含量。
实验四酵母RNA的提取
实验四酵母RNA的提取一、原理酵母含有丰富的核酸，其中DNA较少，而RNA较多(约占干重的3-10%)，加之菌体收集容易，所以多用酵母作为提取RNA的材料。
本实验用浓盐法提取RNA，基本过程和原理是：用10%氯化钠使核糖核蛋白中的RNA解聚并溶于盐溶液中，离心除去菌体残渣及变性蛋白质后，调节溶液的pH值至RNA的等电点，RNA即可沉淀析出。
本法提取的RNA已变性并有部分降解，工业上常将其进一步水解，以制备核苷酸、核苷和碱基等。
如要避免RNA降解，可用苯酚法提取。
通过鉴定RNA的组成成分可对RNA定性。
磷酸：磷酸可与钼酸铵作用生成磷钼酸，后者在还原剂的作用下被还原为蓝色的钼蓝。
嘌呤碱：它们能与硝酸银作用产生白色的嘌呤银化物沉淀。
核糖：核糖与酸共热生成糠醛，后者与苔黑酚反应生成绿色化合物。
二、试剂与仪器(一)试剂：1．干酵母2．10%氯化钠溶液3．6摩尔/升盐酸溶液4．乙醚5．10%硫酸溶液6．钼酸铵试剂：2克钼酸铵溶于100毫升10%硫酸7．10%维生素C溶液8．0.1摩尔/升硝酸银溶液9．1摩尔/升氨水。
10．Fe3+-HCL试剂：0.99克硫酸高铁铵〔NH4Fe(S04)2·12H20〕溶1000毫升浓盐酸中。
11.5%苔黑酚乙醇溶液。
(二)仪器：1．沸水浴2．离心机三、操作：1.酵母RNA的提取①干酵母约0.3克置于离心管内，加入10%氯化钠5毫升，搅匀后置沸水浴加热10分钟。
②取出离心管，流水猝冷后，3000rpm离心10分钟，上层即为RNA提取液，下层为菌体残渣及变性蛋白质沉淀。
③将上层清液小心倾入另一离心管中，逐滴加6摩尔/升盐酸，边加边搅拌，随着pH下降，RNA逐渐沉淀析出，当调节pH至2.O-2.5(接近RNA等电点)时，沉淀最多，此时，静置几分钟，然后在3000rpm离心10分钟。
收集RNA沉淀。
用少量乙醚洗涤以除去脂类和色素等杂质。
2.RNA的水解在上述RNA沉淀中，加入10%硫酸5毫升，搅匀，沸水浴加热5分钟，使RNA水解。
酵母rna提取实验报告
酵母rna提取实验报告酵母RNA提取实验报告引言RNA提取是分子生物学研究中的重要步骤，它可以用于分析基因表达、克隆和测序等多种应用。
酵母RNA作为一种常见的模式生物体，在研究中也经常需要进行RNA提取实验。
本实验旨在通过酵母细胞提取RNA的方法，探索酵母RNA的纯化和分析技术。
材料和方法1. 酵母细胞培养液2. 离心管3. 离心机4. 细胞破碎液5. 氯仿6. 异丙醇7. 乙醇8. DEPC水9. 热盖式混合器10. 磁珠11. 离心管架12. 离心管架13. 紫外可见分光光度计实验步骤1. 收集酵母细胞并离心2. 加入细胞破碎液并用热盖式混合器破碎细胞3. 加入氯仿并离心，收集上清液4. 加入异丙醇和磁珠，混合悬浮5. 使用离心管架将磁珠沉淀，去除上清液6. 加入乙醇洗涤磁珠7. 用DEPC水溶解RNA8. 使用紫外可见分光光度计检测RNA浓度和纯度结果通过本实验方法，成功提取了酵母细胞中的RNA，并且得到了较高的纯度和浓度。
实验结果表明，所提取的RNA可用于后续的实验分析和研究。
讨论本实验采用了经典的酵母RNA提取方法，通过破碎细胞、沉淀RNA、洗涤和溶解等步骤，成功地提取了酵母细胞中的RNA。
实验结果表明，所提取的RNA具有较高的纯度和浓度，可以满足后续实验的需要。
然而，也需要注意到在实验过程中可能存在的污染和损失，需要进一步优化实验条件和技术。
结论通过本次实验，我们成功地提取了酵母细胞中的RNA，并得到了较高的纯度和浓度。
这为我们进一步研究酵母基因表达和调控提供了重要的实验基础。
同时，也为其他研究人员在酵母RNA提取方面提供了一种可靠的实验方法和参考。
总结酵母RNA提取实验是分子生物学研究中的重要步骤，通过本次实验，我们成功地提取了酵母细胞中的RNA，并得到了较高的纯度和浓度。
这为我们的研究提供了重要的实验基础和技术支持。
希望通过我们的努力，能够为相关领域的研究工作做出一定的贡献。
酵母rna的提取实验报告
酵母rna的提取实验报告实验目的：本实验旨在通过提取酵母细胞中的RNA，研究酵母细胞的基因表达情况。
实验步骤：1. 准备工作：将所需试剂及设备准备好。
包括酵母细胞培养液、收集酵母细胞的离心管、琼脂糖、Rnase-free水、DTE溶液、Tris-HCl缓冲液、氯仿、异丙醇、盐溶液等。
2. 收集酵母细胞：将酵母培养液离心，将细胞沉淀至离心管中。
使用离心机将细胞沉淀。
3. 细胞破碎：向离心管中加入30μL DTE溶液，充分混合。
将离心管置于冰上，加入等体积的琼脂糖。
轻轻翻转管子，使细胞与琼脂糖充分混合。
继续在冰上离心。
4. 分层：将离心管放入冰上15分钟，离心10000g，4°C，15分钟，将上清转移至新离心管中。
5. 分液：加入等体积的Tris-HCl缓冲液，混合均匀。
加入等体积的氯仿，轻轻翻转混合。
在冰上离心15分钟，以分离上层水相和下层有机相。
6. 收集RNA：将上层水相转移至新离心管中，加入等体积的异丙醇，充分混合。
在-20°C放置30分钟，使RNA充分沉淀。
离心12000g，4°C，15分钟，将上清抽离。
7. 洗涤：加入70%乙醇洗涤一次，离心12000g，4°C，5分钟，弃上清。
重复此步骤一次。
8. 干燥：将离心管开盖，室温下干燥15分钟。
加入Rnase-free水，重悬RNA。
实验结果：完成实验后，得到1μg/μL浓度的酵母RNA。
使用NanoDrop 光度计检测RNA纯度，A260/A280比值为2.0，显示RNA被成功提取。
使用琼脂糖凝胶电泳分析酵母RNA，显示主要为2个明显的条带，符合预期。
实验结论：本实验成功地提取了酵母细胞中的RNA，并证实RNA的纯度和完整性。
这为进一步研究酵母细胞的基因表达提供了基础。
酵母相关的实验报告
一、实验目的1. 掌握稀碱法分离酵母RNA的原理与操作过程。
2. 了解RNA的组分并掌握定性鉴定的具体方法。
二、实验原理酵母核酸中RNA含量较多，DNA含量则少于2%。
RNA可溶于碱性溶液，当碱被中和后，可加乙醇使其沉淀，有此可得粗RNA制品。
用碱液提取的RNA有不同程度的降解。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：2g干酵母粉。
2. 试剂：0.04M NaOH溶液、石英砂、乙酸、95%乙醇、RNA酶抑制剂、DEPC水、RNA提取试剂盒、电泳试剂盒、凝胶成像系统等。
四、实验步骤1. RNA的提取（1）称取2g干酵母粉于研钵中，加入石英砂研磨。
（2）将研磨好的酵母粉转移至2mL离心管中，加入0.04M NaOH溶液1mL，沸水浴加热30分钟，经常搅拌。
（3）将加热后的离心管冷却至室温，加入乙酸数滴，使溶液pH值约为5.0。
（4）加入95%乙醇1mL，混匀，室温静置10分钟。
（5）将离心管置于4℃冰箱中，以12,000r/min离心10分钟。
（6）弃去上清液，加入DEPC水500μL，溶解RNA沉淀。
2. RNA组分鉴定（1）取50μL提取的RNA溶液，加入1μL RNA酶抑制剂，混匀。
（2）取5μL上述溶液，加入5μL电泳缓冲液，混匀。
（3）将混合液加入1%琼脂糖凝胶中，进行电泳。
（4）用凝胶成像系统观察电泳结果，鉴定RNA组分。
五、实验结果与分析1. 电泳结果显示，提取的RNA呈特征性条带，表明RNA提取成功。
2. 通过对RNA组分进行鉴定，发现提取的RNA主要由rRNA、mRNA和tRNA组成，符合酵母RNA的组分特点。
六、实验结论通过本实验，我们成功掌握了稀碱法分离酵母RNA的原理与操作过程，并了解了RNA的组分。
实验结果表明，提取的RNA成分符合酵母RNA的组分特点，说明实验操作正确。
七、实验讨论1. 在RNA提取过程中，注意防止RNA酶的污染，避免RNA降解。
2. 在实验操作过程中，严格控制pH值和温度，以保证RNA提取的纯度和完整性。
酵母RNA的提取和鉴定
实验八酵母RNA的提取和鉴定一.实验原理酵母核酸中RNA含量较多，DNA则少于２％。
RNA可溶于碱性溶液，当碱被中和后，可加乙醇使其沉淀，由此即可得到ＲＮＡ制品。
二.试剂1.干酵母粉。
2.2g／L氢氧化钠溶液。
3.乙酸。
4.95%乙醇。
5.5%磷酸。
6.浓氨水。
7. 3，5-羟甲苯试剂：取比重1.19HCll00m1，加入FeCl3〃6H20100mg及二羟甲苯100mg，混匀溶解后，置于棕色瓶中，此试剂必须在临用前新鲜配制。
市售的3，5-二羟甲苯不能使用，必须用苯纯化结晶l-2次，并用活性炭脱色方可使用。
8. 50g／L硝酸银溶液。
9.钼酸铵试剂：20ml水溶解2.5克钼酸铵，加5mo1/LH2SO430ml，用水稀释置100ml，此试剂可在冷处保存一个月不变质。
10.氨基萘酚磺酸：取195ml150g/LNaHCO3溶液(溶液必须透明)加入0.5克纯炼的氨基萘酚磺酸及200g／LNa2SO4溶液5m1。
并在热水浴中搅拌使固体溶解(如不能全部溶解，可再加200g／LNa2SO4溶液，每次数滴，但加入量以1m1为限)，此为浓溶液，置冷处可保存2-3周。
如颜色变黄时，须重新配制。
测定时，将上述浓溶液用蒸馏水稀释10倍．注：市售的氨基萘酚磺酸为暗红色，可纯炼如下：在100m1热水(90o C)中溶解15克NaHSO4及1克Na2SO4，加入l g商品氨基萘酚碱酸，搅匀使其溶解(少量杂质不溶)，乘热过滤，再迅速使其冷却。
加1m1浓盐酸(12mol/L)，则有白色氨基萘酚磺酸沉淀析出。
过滤并用水洗固体数次，再用乙醇洗涤，直至纯白为止。
最后用乙醚洗涤，并将固体放置在暗处，使乙醚挥发。
将此纯炼的氨基萘酚磺酸保存于黄色瓶中。
三.实验操作1.RNA的提取：置1ｇ干酵母粉于50m1三角瓶中，加入2ｇ/L NaOH溶液10ml，沸水浴加热30分钟，并经常搅拌。
待冷却后加入乙酸数滴，使提取液呈酸性（石蕊试纸），离心10-15分钟(4000转／分)。
酵母RNA的提取与测定
实验项目名称酵母RNA的提取与测定一、实验目的1.了解并掌握稀碱法提取 RNA。
2.学习地衣酚显色法测定RNA含量的基本原理和具体方法。
二、实验原理1. 细胞内大部分RNA均与蛋白质结合在一起，并且多以核蛋白的形式存在。
因此，分离制备RNA时，首先遇到的是必须使RNA与蛋白解离，并除去蛋白质。
2. 由于RNA的来源和种类很多，因而提取制备方法也各异。
一般有苯酚法、去污剂法和盐酸胍法。
其中苯酚法又是实验室最常用的。
组织匀桨用苯酚处理并离心后，RNA即溶于上层被饱和的水相中，DNA和蛋白质则留在酚层中，向水层加人乙醇后，RNA即以白色絮状沉淀出，此法能较好地除去DNA和蛋白质。
上述方法提取的RNA具有生物活性。
工业上常用碱法和浓盐法提取RNA，用这2种方法所提取的核酸均为变性的RNA，主要用作制备核酸的原料，其工艺比较简单。
浓盐法是用有10%左右氯化纳溶液，90℃提取3~4 h , 迅速冷却，提取液经离心后，上清液用乙醇沉淀 RNA。
稀碱法使用稀碱（本实验用0.2% NaOH 溶液）使酵母细胞裂解，然后用酸中和，除去蛋白质和菌体后的上清液用乙醇沉淀 RNA 或调pH 2.5 利用等电点沉淀。
酵母含 RNA 达2.67~10.0%，而 DNA 含量仅为0.03 - 0.516%，为此，提取RNA多以酵母为原料。
DNA和RNA都有吸收紫外线的性质，最大吸收峰在260 nm波长处。
紫外吸收是嘌呤环和嘧啶环的共轭双键系统所具有的性质，所有含嘌呤和嘧啶的物质，都具有吸收紫外线的特性。
因此，RNA含量测定，可用紫外吸收法。
紫外吸收法具有操作简便、快速、灵敏度高、对被测样品无损、用量少等优点，适合于核酸分离纯化过程的检测。
该法对纯品核酸准确度高，但由于有紫外吸收的物质对测定有干扰，对不纯核酸样品误差较大。
若样品内混杂大量的蛋白质和核苷酸等吸收紫外线的物质，应设法事先除去。
3.细胞破碎方法-机械物理法：可以用研磨和组织捣碎法。
酵母核酸实验报告
一、实验目的1. 掌握酵母核酸提取的方法。
2. 了解核酸的组成和性质。
3. 学会鉴定核酸组分的方法和操作。
二、实验原理酵母核酸主要由RNA和少量DNA组成。
RNA可溶于碱性溶液，当碱被中和后，可加乙醇使其沉淀，从而得到RNA制品。
DNA则不易溶于乙醇，可以通过进一步处理分离。
本实验主要关注RNA的提取和鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：酵母粉、NaOH溶液、乙醇、硫酸、三氯化铁、苔黑酚乙醇溶液、硝酸银溶液等。
2. 实验仪器：研钵、研杵、烧杯、试管、离心机、显微镜、载玻片、盖玻片、酒精灯、沸水浴锅等。
四、实验步骤1. 酵母RNA提取（1）称取1g干酵母于研钵中，加入少许石英砂，再加入2ml 0.04mol/L NaOH溶液，在研钵中充分研磨至少5min。
（2）再加4ml 0.04mol/L NaOH溶液于匀浆液中，混匀后，将匀浆液转移到大试管中，再用4ml 0.04mol/L NaOH溶液洗涤研钵，洗涤液并入匀浆液中。
（3）将大试管小心在沸水浴中加热30min，冷却后倒入离心管中，与另一组同学的离心管在托盘天平上平衡，然后两组的离心管对称地放入离心机中，2000r/min 下离心15min。
（4）吸取10ml酸性乙醇溶液于小烧杯中，将离心管上清液小心倒入小烧杯中，边倒入边搅拌，直到RNA沉淀完全。
（5）将小烧杯中的液体倒入2个干净的离心管，平衡、离心（2000r/min）3min。
（6）弃去两离心管上清液，各离心管中加入95%乙醇，混匀后，再次离心（2000r/min）3min。
（7）弃去上清液，用无菌滤纸吸干沉淀，晾干备用。
2. 酵母RNA鉴定（1）嘌呤碱鉴定：取水解液1mL加入过量浓氨水，然后加入约1mL 0.1mol/L硝酸银溶液，观察有无嘌呤碱的银化合物沉淀。
（2）核糖鉴定：取1支试管加入水解液1mL、三氯化铁浓盐酸溶液2mL和苔黑酚乙醇溶液0.2mL。
放沸水浴中10分钟。
注意溶液是否变成绿色，说明核糖的存在。
生物化学实验六——酵母RNA的提取与含量测定 山东大学实验报告
实验六——酵母RNA的提取与含量测定13生物基地 201300140059 刘洋 2015-05-10同组者：张奕一、实验目的1.掌握稀碱法提取酵母RNA的原理和方法。
2.掌握紫外分光光度计的使用。
3.了解和掌握紫外吸收法测定RNA浓度的原理。
二、实验原理酵母核酸中RNA含量较多，DNA则少于2%。
RNA可溶于碱性溶液，当碱被中和后，可加乙醇使其沉淀，由此即可得到RNA制品。
但是用碱液提取的RNA有不同的降解。
核酸及其衍生物，核苷酸、核苷、嘌呤和嘧啶有吸收紫外光的性质，其吸收高峰在260nm 左右，且一定浓度范围内其浓度与吸光度成正比（浓度为5µg/ml—45µg/ml吸光度与浓度成正比），利用此性质，可用RNA标准液绘制RNA吸光标准曲线(标准曲线的斜率为0.022-0.024左右)，测定样品RNA浓度。
由于蛋白质在280nm的光吸收，对核酸测定有一定的干扰作用，最大吸收峰在280nm处，原因是蛋白质组成中常含有酪氨酸和色氨酸等芳香族氨基酸。
所以如果有蛋白质的干扰必须得先测260nm处的吸光度，再测280nm处的吸光度，通过计算消除其对核酸的影响。
三、实验器材干酵母粉电子天平量筒容量瓶100ml 磁力搅拌器试管100℃水浴锅pH试纸（pH1-14）烧杯离心机722型分光光度计锥形瓶离心管四、实验试剂0.2%氢氧化钠溶液95%乙醇无水乙醚酸性乙醇（5ml浓Hcl加入到500ml95%乙醇中混匀）RNA标准蛋白溶液（200µg/ml）1.RNA的提取（1）称取4g干酵母粉，放入200ml锥形瓶中，加入40ml0.2%的氢氧化钠溶液混匀，在沸水浴中煮沸30min中并冷却；（2）冷却后，把液体倒入离心管中，在4000r/min的条件下离心15min；（3）离心后留上清液加入95%的酸性乙醇40ml，边加边搅拌，静置5min左右，再4000r/min的条件下离心5min；（4）离心后保留沉淀，用20ml 95%乙醇分两次洗涤沉淀，每次洗后在3000r/min的条件下离心5min；（5）离心后的沉淀再用无水乙醇10ml洗涤两次，每次用3000r/min离心5min；（6）离心结束后，收集沉淀与滤纸上，称重备用。
酵母RNA的提取、组分鉴定和含量测定
定磷试剂含有还原剂抗坏血酸，抗坏血 酸很容易被空气中的氧所氧化，使定磷 试剂失效。因此可以改用钼酸铵试剂定 磷。核酸分子中的有机磷经强酸消化后 形成无机磷，在酸性条件下,无机磷与 钼酸铵结合形成黄色磷钼酸铵沉淀。
【思考题】
01 如何得到高产量RNA粗制品？ 02 验证RNA中核糖的办法，可否用以检验脱氧核糖，为什么？ 03 用你所学过的化学知识,分析3种催化剂：
【操作步骤】
RNA的提取：将5g酵母悬浮30mL0.04mol/L氢氧化钠 溶液中，并在乳钵中研磨均匀。将悬浮液转移至100毫 升锥形瓶中。在沸水浴上加热30分钟后，冷却。离心 (3000r/min)15分钟，将上清液缓缓倾入15 mL酸性乙 醇溶液中。注意要一边搅拌一边缓缓倾入。待核糖核酸 沉淀完全后，离心(3000r/min)3分钟。弃去清液。用 95％乙醇洗涤沉淀两次，乙醚洗涤沉淀一次后，再用乙 醚将沉淀转移至布氏漏斗中抽滤。沉淀可在空气中干燥。
标准曲线的制作
按上表编号及加入试剂。加毕，摇匀，置沸 水浴加热25min，取出后冷水冷却，以零号 管作对照,于670nm波长处测定各管光吸收 值。取测定的平均值,以RNA浓度为横坐标, 光吸收为纵坐标作图,绘制标准曲线。
样品的测定
取两支试管,各加入2.0mL样品注液,再加 2.0mL地衣酚-Cu2+试剂，如前述进行 测定.
RNA含量的计算
根据测得的光吸收值,从标准曲线上查出 相当该光吸收的RNA含量，计算出制品 中RNA的百分含量。
第一步
第二步
【注意事项】
01 样 品 中 蛋 白 质 含 量 较 高 时 , 应 先 用 5 % 三 氯 乙 酸 溶 液 沉 淀 蛋白质后再测定。
02 本 法 特 异 性 较 差 , 凡 属 戊 糖 均 有 反 应. 微 量 D NA 无 影 响 , 较 多DNA存在时,亦有干扰作用。如在试剂中加入适量 CuCl2 .2H2O可减少DNA的干扰。此外,利用RNA和 DNA显色复合物的最大光吸收不同,且在不同时间显示 最大色度加以区分。反应2min后,DNA在600nm呈现 最大光吸收,而RNA则在反应15min后,在670nm下呈 现最大光吸收。
酵母核糖核酸的分离及组分鉴定实验报告
酵母核糖核酸的分离及组分鉴定实验报告酵母核糖核酸的分离及组分鉴定实验报告引言：酵母核糖核酸（RNA）是一种重要的生物分子，具有多种功能。
通过对酵母RNA的分离和组分鉴定实验，我们可以更好地了解其结构和功能。
本实验旨在通过一系列实验步骤，从酵母细胞中分离出RNA，并对其进行组分鉴定。
实验材料和方法：1. 酵母细胞培养液2. 细胞裂解液3. 高速离心机4. RNase酶5. RNA提取试剂盒6. 紫外可见光分光光度计实验步骤：1. 酵母细胞的培养和收获：将酵母细胞培养液置于适宜的培养条件下，培养至细胞密度达到一定程度后，用离心机将细胞沉淀下来。
2. 细胞裂解：将细胞裂解液加入细胞沉淀中，充分裂解细胞膜，释放出内部的细胞器和分子。
3. RNA提取：使用RNA提取试剂盒，按照说明书的步骤进行RNA的提取。
这一步骤主要是通过化学方法将RNA分离出来。
4. RNase酶处理：为了去除可能存在的DNA和蛋白质的污染物，可以使用RNase酶对提取的RNA进行处理。
5. 紫外可见光分光光度计测定：使用紫外可见光分光光度计对提取的RNA溶液进行测定，以确定RNA的浓度和纯度。
结果与讨论：通过以上的实验步骤，我们成功地从酵母细胞中分离出了RNA，并对其进行了组分鉴定。
在RNase酶处理后，我们发现RNA的纯度得到了明显的提高。
通过紫外可见光分光光度计的测定，我们确定了RNA的浓度。
酵母RNA的组分鉴定是一个复杂而重要的过程。
通过进一步的实验，我们可以对RNA进行凝胶电泳分析，以确定RNA的大小和分子量。
此外，我们还可以使用逆转录酶和聚合酶链反应（RT-PCR）等技术，对RNA进行进一步的研究，以了解其在基因表达调控中的作用。
结论：通过本实验，我们成功地从酵母细胞中分离出了RNA，并对其进行了组分鉴定。
这为我们进一步研究RNA的结构和功能奠定了基础。
酵母RNA在生物学研究中具有重要的意义，对于深入了解细胞的基因表达调控机制具有重要的参考价值。
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酵母RNA的提取紫外吸收法测RNA浓度实验报告
一、实验目的
1、掌握稀碱法提取酵母RNA的原理和方法。
2、掌握紫外线（UV吸收法测定核酸浓度的原理。
3、熟悉紫外分光光度计的使用方法。
二、实验原理
核酸是生命的最基本物质之一，广泛存在于所有动植物细胞、微生物体内。
对核酸的研究是更深入研究生命体的基本前提之一。
研究核酸需要纯度很高的核酸，所以核酸的提取方法也就在生物学研究中相当重要。
本次实验提取酵母的核糖核酸（RNA o RNA离体后稳定性很差，含量低，所以在提取的时候就要注意防止核酸的降解和变性，防止过酸、过碱、避免剧烈搅拌，尤其重要的是防止RNA 酶的作用。
本实验是医药卫生领域与大工业生产的基础方法。
核酸（RNA都是由核苷酸组成的多聚核苷酸化合物，而核苷酸是由糖、碱基和磷酸以等分子比例构成的，故测定组成核苷酸的任意一种组分即可以测定生物体内核酸的含量或者是提取出来的核酸的含量。
提取RNA的方法很多，在工业生产上常用的是稀碱法和浓盐法。
前者是利用碱使细菌细胞壁溶解，是RNA释放出来，后者是在加热的条件下，利用高浓度的盐改变细胞膜的通透性，使RNA释放出来。
使用浓盐法提取RNA勺时候应该注意掌握温度，直接至90~100C浸提，避免在20~70C的时间过长，因为这是磷酸二酯酶和磷酸单酯酶的作用活跃的温度范围，会使RNA降解而降低提取率。
这两种方法是从废弃的啤酒酵母中提取RNA的—般方法。
但是这两种方法各有利弊，如浓盐法提取的RNA纯度高，而稀碱法提取的时间短，提取率高，更利于工业化生产。
RNA在260nm处有最大吸收峰，一定浓度范围内其浓度与吸光度成正比，故可以用紫外分光光度计通过比色来测定RNA t量。
由于蛋白质在280nm波长处也有光吸收，对RNA测定有一定的干扰作用，但蛋白质的最大吸收峰在280nm 处，如同时测定280nm的光吸收，通过计算可消除其对RNA M定的影响。
因此如其中含有蛋白质时必须同时测定280nm和260nm的吸光度，可通过计算测定溶液中RNA的含量。
三、实验器材
电子天平、离心机、量筒、烧杯、锥形瓶、紫外分光光度计、容量瓶（100mL 、移液管（5ml）、试管和试管架、PH 1-14试纸
四、实验试剂
0.2%NaOH酸性乙醇(5mlHCI加入剂、500ml 95%乙醇)、95聽醇、无水乙醇、酵母粉、第一次实
验所提取的酵母 RNA 标准RNA 液(100ug/ml )、0.2%NaoH 溶液、蒸馏水 五、实验步骤
1、 称取4g 干酵母粉，放入200ml 锥形瓶中，加入40mI0.2%NaOH 沸水浴 30分钟，后流水冷却。
将冷却后的液体倒入离心管中，离心15分钟，4000转/min 。
留上清液，加入95%酸性乙醇溶液40ml ，边加边搅拌，再4000转/min 离心5min 。
保留沉淀，用10ml95%L 醇洗沉淀两次，每次洗后离心 3000转/min ，5分钟。
洗 完后，再用10ml 无水乙醇分别洗涤两次，每次洗后离心 5min ，3000转/min 。
最 后，收集沉淀于滤纸上，保存备用。
2、 称取 0.2460gRNA 于 100ml 烧杯中，加 2ml0.2%NaOHS 1mlH 2O 溶解，调 成糊状，加入50ml
左右水，边溶解边用0.2%NaOH^ PH 至7.0，后定容至100ml 混匀。
3、 取2ml 定容后溶液再定容至100ml ，按表1.所示分别向试管中加入定量 试剂，混匀，用紫外
分光光度计 260nm 紫外线测吸光度其并记录表格
4、 重复步骤3.
5、 再一次重复步骤3.
表1.
1
2 3 4 5
6
7平衍
平他 平他
10 15 20 25
30 x.
初\
、
徐恵曲量) 0 : 1.5 2
2.5
3
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瞞埶⑴ 10
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8
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刪耐量(11)
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10 10
六、实验结果
表2.
1
2
3
4 5
6
7
怖1
怖3
260 M 彌
0 0.235
0J52
0.468 0.5E2 0.6E9
OJOB
0.698 0.T25 0.69?
根据表1.表2.绘制出标准曲线
紫外线测RNA 浓度标准曲线
260nm吸光^
♦260nrr吸光度
----- Unear(2fiOnm 服光度］
样品平均吸光度为0.707
通过标准曲线可得到稀释后样品浓度为30.739卩g/ml
所得样品RNA百分含量3 = =62.48%
七、分析与讨论
1、在使用离心机时，离心管要对称放置，而且对称的离心管重量也要相同，否则会对离心机造成毁坏。
2、提取RNA最后在用酒精洗涤沉淀时，要充分混匀，提高提取的RNA勺浓度。
3、根据理论在5-45卩g/ml与吸光值成正比，而该范围的两个端点没有取到，这样所得到的标准曲线的范围变小，而且可能会有一定偏差，进而可能导致实验结果出现误差。
4、用紫外光吸收法测定样品的核酸含量，具有简单、快速、灵敏度高的优
点，但是待测核酸样品中含有的微量蛋白质和核苷酸等吸收紫外光物质时，会产生较小测定误差。
由于蛋白质在280nm波长处有光吸收，如果同时测定280nm
的光吸收，通过计算可消除蛋白质对RNA测定的影响，减少实验误差
5、我们组得到的RNA的浓度相对来说是较高的，这得益于我们操作过程的更加准确与细心，在
测定吸光度时，对没有用手碰触比色皿的光滑一面，保持实验的准确性。