金银花中绿原酸和黄酮的同时提取分离工艺研究

合集下载

金银花中绿原酸提取方法的研究

金银花中绿原酸提取方法的研究

2 方 法
2 . 1 金银花提取 工艺的比较 2 . 1 . 1 水 煎煮 法 取 金银 花 3 0 g + l O倍 量水 一 煎 煮 3
取金银 花 2 0 g + l O倍 量 乙醇一
1 . 8 7 a r g 置2 5 m L容 量瓶 中 ,加 5 0 %甲醇使溶解 并稀释
裹5 验 证 试 验 结 果
参 考 文 献
川 盂 日增 。 石建平 . 等。 金银花 中绿原酸的提取工艺及抗 菌
2 0 0 8 。 l 1 ( 8 ) : 9 4 2 — 9 4 3 .
【 3 】 张春华, 严云良. 医药数理统计( 第 l 版) 【 ^ = I 】 . 北京: 科学出
中圈分类号 : R 2 8 4 . 2 文献标识码 : A
S t u d y o n Ex t r a c t i o n o f Ch l o r o g e n i c Ac i d i n F l o s Lo n i c e r a e
W ANG Ya n g - q i u, HE Mi a o
2 . 1 . 2 乙醇 回流提 取
回流提取 3 次, l h / 次一合并提取液一减压浓缩至 l: 1 的浸膏 。 2 . 1 . 3 酸 醇 回 流提 取 取 金银 花 2 0 g + 1 0倍 量 乙 醇 ( p H 4 ) 一 回流提取 3次 , l h /果 与 分 析
3 . 1 提取工艺 比较
通过 3 种 提取 工艺 比较 , 水 提结果偏低 , 此法不 可 行; 醇提 和酸 醇提法绿原 酸转移率较高 , 二 者差别不大 ( 表2 ) 。 考虑实验简便 , 故选择醇提金银花 , 制定 因素水 平表 , 做正交试验 优选最佳工艺 。

金银花中提取分离总黄酮的工艺研究

金银花中提取分离总黄酮的工艺研究

文章标题:金银花中提取分离总黄酮的工艺研究导言1. 金银花是一种常见的中草药材,广泛用于食品和药物制备中。

2. 其中的总黄酮具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等多种药理作用,因此对其提取分离的工艺研究具有重要意义。

工艺研究方法1. 传统提取方法:水煎、醇提等2. 现代提取方法:超声波提取、微波提取等3. 不同提取方法的优缺点比较1) 传统提取方法:操作简单,成本低,但提取效率低,环境污染严重2) 现代提取方法:提取效率高,操作简便,但设备成本较高提取工艺优化1. 提取溶剂的选择1) 水、乙醇、丙酮等2. 提取温度和时间的优化1) 不同温度下提取总黄酮的效果对比2) 不同提取时间下提取总黄酮的效果对比3. 提取压力和超声波功率的优化1) 不同压力下提取总黄酮的效果对比2) 不同超声波功率下提取总黄酮的效果对比分离工艺研究1. 薄层色谱法2. 高效液相色谱法3. 分离效果比较1) 薄层色谱法的分离效果2) 高效液相色谱法的分离效果4. 最佳分离工艺的确定总结与回顾1. 金银花中提取分离总黄酮的工艺研究是一项复杂但具有重要意义的工作。

2. 通过对不同提取和分离工艺的研究,可以找到最适合的方法来提取和分离金银花中的总黄酮。

3. 未来的研究方向可以集中在提高提取效率、降低成本、减少环境污染等方面。

个人观点和理解在提取分离总黄酮的工艺研究中,我认为现代提取方法具有更大的发展潜力,可以提高提取效率、减少操作时间和成本,并减少对环境的影响。

分离工艺研究也需要不断优化,以提高总黄酮的纯度和稳定性。

希望未来相关研究能够更加深入,为金银花的应用提供更多可能性。

结语通过对金银花中提取分离总黄酮的工艺研究,我们可以更好地利用这一中草药材,并发掘其更多的药理价值。

这项工作的持续深入研究将为中药制药行业带来更多的创新和发展。

提取总黄酮的过程中,首先需要选择合适的提取溶剂。

在传统方法中,水和醇是常用的提取溶剂,它们操作简单,成本低,但提取效率相对较低。

金银花中绿原酸提取工艺研究

金银花中绿原酸提取工艺研究

第5期刘金磊,等:金银花中绿原酸提取工艺研究-5 -金银花中绿原酸提取工艺研究刘金磊,邓皮凯,邓仕英(长江大学工程技术学院,湖北荆州434020)摘要:绿原酸作为金银花中的主要 成分,具有高 抗氧化、抗病毒、保肝利胆等功效,在医化工和食 有广泛的应用。

金银花为原料, 醇提法 ,探讨了 、、料液比、 、 浓及 pH 值 素对绿原酸 影响, 了 金银花中绿原酸的最:以70%的乙醇,料比为1 : 25,控制pH 值为6,60 < , 60 min 。

关键词:金银花;绿原酸;提中图分类号:TQ460.7文献标识码:A 文章编号:1008-021X ( 2021) 05-0005-02金银花作 见的植物,具有清热解毒,疏散风 功效,广泛用于中药制剂、抗病毒、降血脂等。

其中最主要的有效 成分为绿原酸,是 抗氧化剂,是重要 质,具有抗菌、抗病毒、保肝利胆、抗氧化等功效,在临床 中有重要作用。

近年来,从金银花中 绿原酸受到广泛关注”勺。

,绿原酸方法主要有:酶 法、超声波法、水醇 !法*4*。

王 [5]方 金银花中绿原酸,探讨了最 工艺;[6] 水热法对绿原酸进, 响分析法优化了 。

通过醇提法,对金银花中的绿原酸 ,探了 素对绿原酸影响, 过程中,影响 量 素 了分析。

1实验部分15实验材料与仪器金银花,无水乙醇(AR )、甲醇(AR )、丙酮(AR )、 酸 (AR )、氢氧化纳(AR )、绿原酸 (98%)、723分光光度计、DZTW -电子 、 、真空泵、 瓶、 烧瓶璃仪器。

15实验过程1.2.1 标准曲线的绘制6 mg 绿原酸,加 量80%的乙醇 解后,定容到50 mL 容量瓶的刻度线,静 备用。

用移 管分别量取 1.0,2.0,3.0,4.0,55) mL 的母 于 25 mL 的容量瓶中,用 80%乙醇 定容至刻度线,测光度, 328 nm , 测吸光值及 浓度绘制绿原酸 曲线, 方程。

1.2.2绿原酸的提取回 法⑴, 金银花粉末2.5000 g ,用25 mL 的乙醇 回 ,控制 、 、 pH 值、料比、 体积分数。

HPLC法检测金银花中的绿原酸和黄酮类物质的研究

HPLC法检测金银花中的绿原酸和黄酮类物质的研究

3.4、 3.4、样品的测定
表3
木犀草素 66.76 绿原酸 1345.91
样品的含量测定( g/g 样品的含量测定(µg/g )
芦丁 17.65 阿魏酸 33.65 新绿源酸 59.85
四、结论
本实验研究建立了用高效液相色谱法同时测定金银花中 的五种物质, 的五种物质,采用乙醇提取法和超声波萃取对金银花粗粉进 行了预处理。实验结果表明,采用80%乙醇浸泡和超声波萃取 行了预处理。实验结果表明,采用80%乙醇浸泡和超声波萃取 80% 能够有效的提取金银花中的五种有效成分,样品中的绿原酸 能够有效的提取金银花中的五种有效成分, 含量最高,五种组分的加标回收率为93.3%-98.9%, 含量最高,五种组分的加标回收率为93.3%-98.9%,相对标准 93.3% 偏差RSD≤3.02%。该方法提取率高,操作简单,重复性好, 偏差RSD≤3.02%。该方法提取率高,操作简单,重复性好, RSD≤3.02% 可同时分析金银花中的有机酸和黄酮类成分等有效成分, 可同时分析金银花中的有机酸和黄酮类成分等有效成分,改 变了把有机酸和黄酮类等分开的传统方法, 变了把有机酸和黄酮类等分开的传统方法,同时也提高了金 银花中的有效成分的提取率。
2.2、 2.2、样品的预处理
准确称取金银花粗粉5.064g, 准确称取金银花粗粉5.064g,置具塞锥形 5.064g 瓶中,准确加入80%乙醇50ml,浸泡24h, 瓶中,准确加入80%乙醇50ml,浸泡24h,转移 80%乙醇50ml 24h 至容量瓶中,然后在通风橱中超声波萃取 至容量瓶中, 30min,抽滤,合并滤液,再在60° 30min,抽滤,合并滤液,再在60°C下旋转蒸 60 发浓缩,并用石油醚脱脂, 0.45 m微孔滤膜。 发浓缩,并用石油醚脱脂,过0.45µm微孔滤膜。

金银花中绿原酸和黄酮的同时提取分离工艺研究

金银花中绿原酸和黄酮的同时提取分离工艺研究

将金银花原料在 2.1 节优化的工艺条件下提取,得 绿原酸和总黄酮的浓缩液。选择聚酰胺为吸附剂,选 择不同体积分数的乙醇(1 0 %、5 0 %、9 0 %)作为洗脱 剂,通过柱层析梯度连续洗脱,得到绿原酸、水溶 性黄酮和脂溶性黄酮 3 个不同类型的洗脱物。测定结 果见图 3。
mAU
350 300 250 200 150 100
1.3.1 紫外分光光度法
1.3.1.1 芦丁标准溶液的配制
收稿日期:2009-06-11 基金项目:国家自然科学基金项目(20565003);宁夏大学科学研究基金项目(ZR200706) 作者简介:郝凤霞(1978 -),女,讲师,硕士,主要从事天然产物开发研究。E-mail:hfx220@
1 材料与方法
1.1 材料与试剂 金银花采自宁夏银川市合木公司。 甲醇、磷酸、9 5 % 乙醇、氢氧化钠、硝酸铝为
分析纯 天津市科密欧化学试剂有限公司;绿原酸、 芦丁对照品 中国药品生物制品鉴定所;实验室用水为 自制蒸馏水。 1.2 仪器与设备
Agilent 1100 高效液相色谱仪 美国 Agilent 公司; UV-2450 紫外 - 可见分光光度计 日本岛津公司;AL204 型电子天平 梅特勒 - 托力多仪器有限公司;101A-1E 型电热鼓风干燥箱 上海实验仪器厂有限公司;TDL802B 型台式离心机 上海安亭科学仪器厂;KQ-250DE 型 数控超声波清洗器 昆山市超声仪器有限公司;SHBⅢ型循环水式多用真空泵 郑州长城科工贸有限公司。 1.3 方法
450
500
550
600
波长(nm)
图 1 芦丁络合物吸收光谱
Fig.1 Absorption spectrum of rutin complex

金银花黄酮活性成分分离纯化与生物学效应研究

金银花黄酮活性成分分离纯化与生物学效应研究

金银花黄酮活性成分分离纯化与生物学效应研究金银花为常用的传统中草药,功能清热解毒,临床上主要治疗细菌感染、感冒等症。

现代药理研究显示金银花中主要化学成分有黄酮类、有机酸类、苷类及挥发油等。

其中苷类中三萜皂苷类成分主要与金银花保肝利胆作用有关,而以绿原酸为主的有机酸类化合物和挥发油被认为与其抗菌活性相关。

但金银花黄酮是其组成中仍未经充分药理学研究的成分,其相关的生物学活性研究甚少。

对其它植物药黄酮的研究提示,该类成分多具有抗菌和抗氧化作用,因此本研究在国家自然科学基金的支持下,对金银花中黄酮类物质进行分离纯化,并考察其生物学效应,为说明金银花发挥药理作用的机制奠定实验基础。

第一部分金银花总黄酮的分离纯化及抑菌活性考察一、实验方法:1.金银花总黄酮的提取金银花总黄酮以醇提法提取,并采用均匀设计对提取条件进行优化。

2.金银花总黄酮初步分离及抑菌活性考察金银花总黄酮浸膏以DM130型大孔吸附树脂柱采用不同浓度乙醇(0,20%,40%,60%)梯度洗脱进行初步分离,对获得的分离组分按A、B、C等依序命名。

微量稀释法考察各分离组分对金黄色葡萄球菌(n=7)、肺炎克雷伯菌(n=5)、大肠杆菌(n=6)、铜绿假单胞菌(n=4)等细菌的MIC值。

3.金银花黄酮组分分离纯化及抑菌活性考察对方法2中分离所得且体外抑菌活性较好的黄酮组分采用制备型HPLC分离制备,对制备组分按A1、A2、 (1)B2等依序命名,并采用微量稀释法考察各制备组份对金黄色葡萄球菌(n=7)、肺炎克雷伯菌(n=5)、大肠杆菌(n=6)、铜绿假单胞菌(n=4)等细菌体外抑菌活性。

4.金银花黄酮抑菌活性成分结构鉴定对方法3中制备所得且体外抑菌活性较好组分采用HPLC分离提纯,并对纯化分离所得纯度较高单一成分进行LC-MS、1H NMR、13C NMR等鉴定。

二、实验结果:1.金银花总黄酮醇提法最佳提取工艺为:在10g金银花粉末(60目)中加入10倍体积50%乙醇溶液于90℃条件下提取1h。

金银花中绿原酸提取的研究前景和应用概述

金银花中绿原酸提取的研究前景和应用概述

金银花中绿原酸提取的研究前景和应用概述作者:赵御锜于方园来源:《食品安全导刊·下旬刊》2019年第02期摘要:绿原酸是金银花中的一种主要提取物。

常用的提取方法有聚酰胺柱层析法、石硫醇法、水提醇析法等。

本文介绍了绿原酸的生理活性及应用。

关键词:绿原酸;抗菌;应用金银花为忍冬科植物忍冬的干燥花蕾或者初开的花,呈棒状,上粗下细,略弯曲,长2~3 cm,表面黄白色或绿白色。

绿原酸是其主要有效成分,广泛存在于植物中,以金银花、杜仲中的含量较高,具有广泛的药理作用。

1 绿原酸的提取绿原酸半水合物为针状结晶(水)。

110 ℃变为无水化合物,熔点208 ℃,25 ℃水中溶解度为4%,热水中溶解度更大。

易溶于乙醇及丙酮,极微溶于醋酸乙酯。

绿原酸是由咖啡酸与奎尼酸生成的缩酚酸,是植物体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生的一种苯丙素类化合物。

绿原酸分子结构中有酯键、不饱和双键及多元酚三个不稳定部分的特殊结构,可以用乙醇等极性溶剂提取。

提取时不能在高温强光下进行,绿原酸通常存放置于棕色瓶、冰箱冷藏下条件保存[1]。

1.1 聚酰胺柱层析法蔡鹰等人用此法研究过分离总黄酮[2],称取金银花加入10倍量70%的乙醇冷凝回流,再用两次8倍量回流两次,过滤,合并滤液,然后浓缩滤液或者用旋蒸仪旋干滤液至无醇味得到金银花浓缩液,用聚酰胺装柱常压下用乙醇作为洗脱剂收集流分,与标准品对照合并相同流分旋干及为绿原酸。

此方法得到的绿原酸纯度较高。

1.2 硅胶吸附法金银花粉末用乙醇索氏回流4小时,得到残渣和滤液(粗提液),60 ℃进行减压浓缩进行干燥得到粗体物在1∶1硅胶拌样得到提取物。

将拌好的混合样上硅胶柱,用乙酸乙酯、甲醇、水按不同比例洗脱得到含绿原酸的洗脱液。

在氯仿—甲醇梯度进行洗脱得到绿原酸。

1.3 其他方法石硫醇法和水提醇析法也常见。

高海谦曾用酸沉淀法与石硫醇法对比提取黄岑甙[3],将提取液濃缩用石灰乳调节pH,过滤沉淀物加入乙醇再用浓硫酸调节pH,再过滤滤液用氢氧化钠中和,过滤浓缩干燥得含量一般在20%左右绿原酸粗品[4]。

金银花中绿原酸的提取与分离

金银花中绿原酸的提取与分离

现代分离技术实验安排一、实验说明1、本课程实验为一次性综合大实验,采取分班进行,每班实验必须在连续两天内完成,各组的实验安排均为周六和周日的上午8点到晚上的8点。

每次实验1个班,每个实验由两个人共同完成,即两人一组,每组一套实验仪器和一张实验台。

每班的班长负责实验室的卫生和安全。

2、课程考核方法采用实验考察形式进行,每人只安排一次实验机会,过期不补,希望各位同学能够按时参加。

若有冲突,学生之间可相互对调。

3、进入实验室后,各组同学首先按照仪器清单检查仪器的数量和完好情况。

若有仪器短缺或破损等问题,请在上课后20分钟内与实验室工作人员及时联系,并要求实验人员进行补充或更换。

4、实验结束后,各组同学应对照仪器清单检查,分别洗净后交实验人员验收。

如有损坏或缺少,应按规定缴纳赔偿金。

因此,希望同学们爱惜仪器,认真操作。

实验期间,应注意保持实验室台面、地面和水槽的卫生,尤其是自己的工作区域。

同时应注意实验室的财产安全和自身安全,不可在实验室喧哗吵闹。

二、实验内容题目:金银花中绿原酸的提取与分离学习内容:固体中有效成分的提取(索氏法)技术;减压浓缩(旋转蒸发)技术;硅胶吸附柱层析;硅胶吸附TLC技术;薄层色谱对产品纯度检测金银花为忍冬科忍冬属植物忍冬及同属多种植物的干燥花蕾,它是一种“药食同源”的绿色植物,是临床常用的中药之一。

具有清热解毒、凉风散热、抗病毒、保肝利胆的功能,主治痈肿疗疮、喉痹、丹毒、热血毒痢、风热感冒、瘟病发热、急性支气管炎、肺炎、腮腺炎、胆道感染、关节炎等,能改善放、化疗所致的白细胞降低,有“中药中的青霉素”的美誉。

另外,金银花还被广泛地应用于保健品、化妆品、卷烟、食品等行业。

近代研究一般认为金银花的主要生物活性有效成分为绿原酸类化合物,并且常以绿原酸含量的高低来评价金银花质量的优劣。

绿原酸结构式HO HOOO2'3'4'5'6'8'9'OHHO OH OHO 1234567'1'三、实验方案 四、方法1、TLC 板的制备与活化在干净的研钵内加入约6g 硅胶GF254,在轻轻研磨的同时缓慢加入15ml 0.5%羧甲基纤维素钠水溶液。

金银花中绿原酸提取方法的研究进展

金银花中绿原酸提取方法的研究进展

re—
Key words
for the thorough research in the future. FLOS LONICERAE JAPONICAE:Chlorogcnic acid:Extraction method
refel℃nce
金银花(FLOS
LONICERAE
JAPONICAE)为忍冬属植物
安徽农业科学,Journal
ofAnhui
A西.Sci.2014,42(16):4969-4970,4973
责任编辑石金友责任校对李岩
金银花中绿原酸提取方法的研究进展
李杰,王学廷,吴银萍,王利辉
(河南科技大学医学院,河南洛阳471003)
摘要金银花为忍冬属植物忍冬干燥花蕾,包含挥发油、黄酮类、绿原酸类等多种有效成分,其中绿原酸具有抗茵消炎、降血脂、升高白 细胞等作用,目前常以绿原酸的含量评价金银花的质量。该文综述了金银花中绿原酸的提取方法,为今后深入的研究提供参考。 关键词金银花(FLOS LONICERAE JAPONICAE);绿原酸;提取方法
李荣¨叫以总浸膏率和绿原酸含量为指标,采用水煎煮 工艺提取绿原酸,认为金银花粉末过50目筛,料液比为1:30
(∥rnl),煎煮3次,每次30 vain时,提取效果最佳,金银花总 浸膏得率为60.7%,绿原酸的含量为6.78%。程明川¨刘认 为水煎煮法可以最大限度的保留金银花药材中的化学成分,
有利于建立金银花药材的HPLC特征图谱。杨蓓蓓¨剐采用
绿原酸的提取,碱性条件下绿原酸的得率和质量分数都随着 pH值的增大而降低,在pH值约为4时,绿原酸的纯度和得 率最高,分别达到45.20%和36.59%。何德贵m’、高春 荣‘冽、梁玉敏㈣、范远景㈨的研究结果也表明乙醇溶液的

金银花叶茎藤中黄酮与绿原酸同时提取分离工艺

金银花叶茎藤中黄酮与绿原酸同时提取分离工艺
限公司)层析柱 ; 粹机. ; 粉
芦 丁 标 准 品 ; 原 酸 标 准 品 ( 国 药 品 生 物 制 品 鉴 定 所 ) 无 水 乙醇 ; 油 醚 ; 酸 乙 酯 ; 己 烷 ; a 绿 中 ; 石 乙 正 N NO。 A1NO。 。 ; ( );
N 0H; 1 以上 实试 剂 均 为 分 析 纯 . 0 大 孔 树 脂 ( 徽 三 星 树 脂 科 技 有 限公 司 ) a HC . D1 1 安 .
21 0 1年 9月
文章 编号 :0 7 9 5 2 1 ) 5—0 9 1 0 —2 8 ( 0 1 0 0 1—0 4
金 银 花 叶 茎 藤 中 黄 酮 与 绿 原 酸 同 时提 取 分 离 工 艺
罗 悠 , 莉华 , 陈 梁 玄 , 黄 浩 , 李 彪 , 黄 练
( 吉首 大 学 化 学 化 工 学 院 , 南 吉 首 湖 4 60 ) 1 0 0
好 的分 离 , D1 1大孔 树 脂 吸 附 、 O 乙醇 洗 脱 、 缩 过 滤 、 淀 用 乙 醇 重 结 晶 后 得 到 的 水 溶 型 黄 酮 纯 度 达 8 . ; 经 0 5 浓 沉 45 经
D0 1 1大 孔 树 脂 吸 附 、 O 乙醇 洗 脱 、 缩 干 燥 、 H 值 2 9 7 浓 p . 7条 件 下 乙 酸 乙酯 萃 取 、 己烷 分 相 后 , 到 的绿 原 酸 纯 度 达 9 . 正 得 1 2 . 法 已 用 于金 银 花 叶藤 中黄 酮 与 绿 原 酸 的 同 时提 取 、 离与 纯 化 , 果 满 意. 方 分 结 关 键 词 : 银 花 叶 茎藤 ; 酮 ; 原酸 ; 金 黄 绿 大孔 树 脂 中 图分 类 号 : —3 2 06 3 文 献 标 志 码 : B

金银花中绿原酸的分离纯化工艺研究

金银花中绿原酸的分离纯化工艺研究

金银花中绿原酸的分离纯化工艺研究
杨敏丽;郝凤霞
【期刊名称】《食品科学》
【年(卷),期】2007(028)007
【摘要】目的:对金银花中的绿原酸的提取、分离工艺进行研究.方法:绿原酸经乙醇热回流提取后,采用聚酰胺柱层析法进行分离除杂,对主要工艺参数进行了优化.结果:将待分离的绿原酸粗品和聚酰胺(80~100目)按物料比1∶5装入柱径与柱长比为1∶7的层析柱中,常压下用10%的乙醇以最大流速洗脱至14倍柱体积,收集绿原酸含量较高(A322/A216≥0.9)的流分,浓缩后得到纯度为70%的绿原酸产品,经重结晶后纯度可提高到93%.结论:该工艺简单、成本较低,适于工业化.
【总页数】5页(P255-259)
【作者】杨敏丽;郝凤霞
【作者单位】宁夏大学能源化工重点实验室,宁夏,银川,750021;宁夏大学能源化工重点实验室,宁夏,银川,750021
【正文语种】中文
【中图分类】Q946.8
【相关文献】
1.金银花中绿原酸的分离纯化 [J], 徐涛;潘见
2.金银花中绿原酸的提取工艺研究 [J], 王鑫;李楠;齐佳慧;李晓辉;蔺彬彬
3.液-液萃取法从金银花中分离纯化绿原酸 [J], 崔春雨;杨宇婷;肖丽;李青
4.金银花中绿原酸提取工艺研究 [J], 刘金磊;邓皮凯;邓仕英
5.环糊精键合凝胶介质分离纯化金银花中绿原酸 [J], 张毅敏;谭天伟
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

金银花中绿原酸的提取工艺研究

金银花中绿原酸的提取工艺研究

金银花中绿原酸的提取工艺研究摘要:近年来,社会发展迅速,各行各业的发展也有了提高。

研究了金银花中绿原酸的提取工艺,利用乙醇溶液为提取剂,以不同的提取方式提取金银花中的绿原酸,研究不同因素对金银花中绿原酸提取率的影响。

结果显示,两种提取方式中的回流法提取效果较好。

回流法的最佳提取条件:乙醇体积分数55%,料液比(g∶mL)1∶40,时间60min,温度60℃,绿原酸得率11.0%;超声法的最佳提取条件:乙醇体积分数55%,料液比(g∶mL)1∶40、时间120min、温度60℃,绿原酸得率为6.23%关键词:金银花;绿原酸;提取工艺研究引言金银花为忍冬科植物忍冬(LonicerajaponicaThunb.)干燥的花蕾或者初开的花。

研究表明,金银花含有挥发油、有机酸、黄酮类、三萜皂苷和微量元素等成分,具有广谱抗菌、抗炎及解热作用。

作为有机酸主要成分的绿原酸,具有抗菌、抗病毒、保肝利胆、抗肿瘤、降血压及兴奋中枢神经系统等多种药理作用,因此绿原酸常被作为金银花质量控制的指标之一。

从金银花中提取绿原酸常用回流提取法、超声波提取法、微波提取法、酶解醇提法等,其中超声提取法提取时间短、提取效率高,但是应用超声提取结合HPLC对金银花中绿原酸含量测定的研究较少,并且研究不够全面。

作者拟在考察影响绿原酸提取率单因素实验的基础上,采用正交设计进一步优化提取工艺,为金银花的综合利用提供依据。

1材料与方法1.1材料与试剂金银花药材,购于黑龙江省药材公司;绿原酸标准品(≥98%),购于上海阿拉丁生化科技股份有限公司;乙腈(色谱纯99.9%),购于美国Tedia公司;无水乙醇(分析纯)、甲醇(色谱纯),购于赛默飞世尔科技(中国)有限公司。

1.2仪器LC-10AT高效液相色谱仪(岛津,日本);C18色谱柱(岛津,LC-C18150×4.6mm);HWS24电热恒温水浴锅(上海一恒科学仪器有限公司)。

1.3方法1.3.1金银花提取液的制备称取0.500g金银花粉末于圆底烧瓶中,加入一定体积分数的乙醇溶液(按照乙醇与水的体积比配制),80℃回流2h,过滤并转移至离心管中,4000r/min离心15min,收集上清液,用乙醇定容至50mL容量瓶;再取4mL,定容至10mL容量瓶,取适量溶液超声、脱气、过膜后,用高效液相色谱测其浓度。

金银花中绿原酸的提取、分离及纯化工艺研究的开题报告

金银花中绿原酸的提取、分离及纯化工艺研究的开题报告

金银花中绿原酸的提取、分离及纯化工艺研究的开题报告一、选题背景金银花是一种常见的中药材,具有清热解毒、解热祛病、抗菌消炎等多种功效,广泛用于传统中药的制剂中。

其中,绿原酸是金银花中的一种重要有效成分,具有较强的抗氧化、抗癌、抗炎、抗病毒等作用,是一种很有发展前景的天然药物。

目前,金银花提取绿原酸的工艺研究较少,大多数研究都是基于传统的水提法、酒精提法和乙酸乙酯提法等,这些方法都存在绿原酸回收率低、工艺复杂、有机溶剂残留等问题。

因此,本研究将探讨一种新型的金银花中绿原酸的提取、分离及纯化工艺,旨在提高绿原酸的提取效率和纯度,为金银花的开发利用提供科学依据。

二、研究内容及意义(一)研究内容:1. 金银花中绿原酸的特性研究;2. 建立绿原酸的提取、分离及纯化流程;3. 优化提取、分离及纯化工艺参数,并对提取液进行组分分析;4. 对提取液中绿原酸进行纯化和结晶,分别采用重结晶、溶剂结晶等方法进行纯化处理,得到高纯度的绿原酸;5. 对最优工艺进行评估和验证。

(二)研究意义:1. 系统掌握金银花中绿原酸的特性及提取分离纯化技术,为金银花的开发利用提供科学依据;2. 提高绿原酸的提取效率和纯度,从而增加其市场价值;3. 探索一条绿色环保的金银花中绿原酸提取分离纯化新途径,有助于推动中药现代化进程。

三、研究方法和思路(一)研究方法:1. 实验室规模的萃取实验,选用不同有机溶剂作为提取溶剂,优化不同因素对绿原酸提取率的影响;2. 对提取液进行组成分析,采用高效液相色谱仪和质谱仪检测不同组分的含量;3. 对提取液进行纯化处理,采用重结晶、溶剂结晶等方法进行纯化处理,得到高纯度的绿原酸;4. 对最优工艺进行评估和验证。

(二)研究思路:1. 研究金银花中绿原酸的特性,确定其适宜的提取、分离及纯化方法;2. 确定提取液的组成,分析其组分及含量;3. 优化提取、分离及纯化工艺参数,降低操作成本,提高提取效率和纯度;4. 对提取液中的绿原酸进行纯化处理,得到高纯度的绿原酸;5. 对最优工艺进行评估和验证,确定工业化生产技术流程。

金银花叶中黄酮类化合物的提取、纯化及抗氧化研究

金银花叶中黄酮类化合物的提取、纯化及抗氧化研究

金银花叶中黄酮类化合物的提取、纯化及抗氧化研究金银花叶中黄酮类化合物的提取、纯化及抗氧化研究摘要:金银花是一种常见的中药材,具有广泛的药用价值。

其中的黄酮类化合物是金银花的主要活性成分之一,在抗氧化方面具有显著的功效。

本文主要对金银花叶中黄酮类化合物的提取、纯化方法进行研究,并探讨其抗氧化活性。

1.引言金银花(Lonicera japonica)是一种常见的中草药,既可入药,又可食用,一直以来受到人们的青睐。

金银花含有丰富的活性成分,其中最重要的成分之一就是黄酮类化合物。

黄酮类化合物具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种生物活性,被广泛应用于食品、药物、化妆品等行业。

2.提取方法的选择金银花叶中的黄酮类化合物含量较低,为了获得较高的提取效果,我们选择了不同的提取方法进行比较。

经过对乙醇提取、水提取和超声波辅助提取等方法的研究,发现超声波辅助提取的效果最好。

该方法不仅提取效果高,而且操作简单、省时省力。

3.纯化方法的优化为了获得较纯的黄酮类化合物,我们采用了凝胶柱层析和高效液相色谱等方法进行纯化。

凝胶柱层析能有效分离出黄酮类化合物,但纯化效果一般,需进一步使用高效液相色谱进行二次纯化。

通过优化分离条件,我们成功地得到了较高纯度的黄酮类化合物。

4.抗氧化活性的研究通过体外实验,我们评估了金银花叶中黄酮类化合物的抗氧化活性。

结果显示,黄酮类化合物具有较强的清除自由基能力,能够显著降低氧化应激引起的细胞损伤。

此外,黄酮类化合物还可以增强体内抗氧化酶的活性,从而进一步提高抗氧化能力。

这些结果表明金银花叶中的黄酮类化合物具有潜在的抗氧化用途。

5.结论本研究通过对金银花叶中黄酮类化合物的提取、纯化和抗氧化研究,得出如下结论:超声波辅助提取是提取黄酮类化合物的最佳方法;凝胶柱层析和高效液相色谱是纯化黄酮类化合物的有效手段;黄酮类化合物具有较强的抗氧化活性,具有潜在的抗氧化用途。

本研究为金银花叶的利用和开发提供了科学依据,也为其他药用植物中活性成分的提取和应用提供了借鉴综上所述,本研究利用超声波辅助提取方法成功提取出金银花叶中的黄酮类化合物,并通过凝胶柱层析和高效液相色谱等方法进行纯化,得到了较高纯度的黄酮类化合物。

药学专业毕业论文金银花和金银花露中绿源酸和4种黄酮含量的测定

药学专业毕业论文金银花和金银花露中绿源酸和4种黄酮含量的测定

药学专业毕业论文金银花和金银花露中绿源酸和4种黄酮含量的测定药学专业毕业论文金银花和金银花露中绿源酸和4种黄酮含量的测定金银花和金银花露中绿原酸和4种黄酮含量的测定金银花为忍冬科多年生半常绿缠绕植物忍冬的花蕾及初开的花,又名忍冬花、银花、双花等,其主要成分有机酸——绿原酸具有抗菌、抗病毒及抗真菌、增强机体防御机能的作用,也是鉴定金银花品质的标准。

同时金银花中含有木犀草素、金丝桃苷、槲皮素、芹菜素等多样黄酮类化合物。

现代医学研究表明,黄酮类化合物具有降低心肌耗氧量,使冠脉、脑血管流量增加,软化血管,降血糖、血脂等作用。

同时黄酮还是一类天然的抗氧化剂,具有抗衰老,增加机体免疫力的生理活性作用。

鉴于此,金银花中黄酮的含量也可以作为金银花品质检验的标准。

目前对以上这5种物质已经建立的分析方法已经有:阻抑催化褪色光度法、分光光度法、高效液相色谱法、共振瑞利散射光谱法、催化动力学光度法、流动注射化学发光法、毛细管电泳法等.但文献中多为一种或两种物质的测定,而同时对金银花中绿原酸和黄酮类化学物进行测定的报导还未曾出过。

本文则建立了一种反相高效液相色谱法同时对绿原酸、金丝桃苷、木犀草素、槲皮素、芹菜素进行测定,旨为增加对金银花质量检测的补充。

1 实验部分 1.1 仪器与试剂Agilentl100高效液相色谱仪(美国,Agilent公司);DF一101s集热式恒温加热磁力搅拌器(中国,郑州长城科工贸有限公司);DZF一6021真空干燥箱(中国,上海齐欣科学仪器有限公司);pHs一3c酸度计(中国,成都世纪方舟科技有限公司).绿原酸、金丝桃苷对照品(98%),槲皮素对照品(98%,中国药品生物制品检定),木犀草素对照品(99%,中国药品生物制品检定),芹菜素对照品。

甲醇(分析纯)、磷酸(分析纯)、金银花样品(购于重庆市)和金银花露(每500 mL相当于金银花31.25 g)。

水为二次蒸馏水。

1.2 实验方法 1.2.1 色谱条件Eclipse XDB-C8柱(4.6×150 mm,5mm);流动相为甲醇-水(用磷酸调节pH-2.60)。

金银花中绿原酸的提取分离纯化方式研究进展

金银花中绿原酸的提取分离纯化方式研究进展

金银花中绿原酸的提取分离纯化方式研究进展摘要:金银花是我国重要的中药种类,主要功能为清热解毒,其中含有大量挥发油类和有机酸,对人体保健以及治疗具有重要意义。

鉴于此情况,本文将重点围绕金银花中绿原酸的提取分离纯化方法开展研究,以为关注这一话题的人士提供参考。

关键词:金银花;绿原酸;提取分离提纯引言:金银花是一种被用于抗病毒和消炎的中药品种,其中,含有大量的有机酸。

然而就目前而言,在借助传统技术提取过程中。

不仅效率较差。

而且纯度不够。

严重制约行业发展。

由此可见,围绕金花中绿原酸的提取分离纯化方式开展分析尤为关键。

一、金银花中绿原酸的提取分离纯化方法研究(一)水提法当前金银花已经成为我国很多药方中的重要材料。

根据研究显示,金银花不仅能够阻断多种新型冠状病毒,而且还可以达到抗病毒、抗肿瘤的效果。

绿原酸作为金银花有机酸的一种,在提取分离和纯化的过程中对专业度的要求较高,要求技术人员应综合使用技术手段,强化提取效率,确保纯化水准。

其中水提法是指一种非常常见的技术形式,在运用的过程中技术人员需要利用水为溶剂,完成重要成分处理。

结合当前数据来看,在水提法的运用背景下,绿原酸的提取效率可以达到3%左右,而在技术不断完善的过程中,水热等技术形式也开始被广泛运用。

该技术是指在封闭环境下通过水加热的方式提升水的介质速率。

与传统的技术相比,此技术减少了对周围环境的影响。

结合数据来看,在水热法使用的过程中,要求温度应该为120℃左右,时间为20分钟,此时绿原酸的提取效率可以达到3.6%。

目前此技术运用由于安全度较高、经济效益良好,因此前期使用范围较广,但是后续由于杂质较多,因此应用范围逐渐缩小[1]。

(二)乙醇回流法绿原酸是一种酚酸类物质,与乙醇相溶,因此乙醇回流等技术成为绿原酸提取的重要技术手段。

该技术是指按照1:30的配比完成乙醇水溶液的配制,使其保持在90摄氏度的温度环境。

结合数据来看,在70分钟的提取过程内,绿原酸的提取效率可以达到3.7%左右。

金银花中绿原酸的提取分离研究的开题报告

金银花中绿原酸的提取分离研究的开题报告

金银花中绿原酸的提取分离研究的开题报告题目:金银花中绿原酸的提取分离研究研究背景:金银花作为一种常用中药材,含有多种有效成分,其中绿原酸是一种重要的活性成分。

绿原酸具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种生物活性,因此在医药、保健品等领域有广泛的应用前景。

目前金银花中绿原酸的分离提取方式主要是采用色谱法、萃取法等传统分离方法,但这些方法都存在操作复杂、成本高等缺点。

因此,需要开发新的绿原酸分离提取方法,提高提取效率、降低成本。

研究目的:本研究旨在开发一种简便、高效、低成本的金银花中绿原酸提取分离方法,为其应用提供技术支持。

研究内容:本研究将采用超声波萃取技术提取金银花中绿原酸,并通过温度、时间、浓度等参数优化提取条件,得到最佳提取工艺。

随后将采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对提取物进行分离,进一步研究分离效果和分离机理。

研究意义:本研究将开发一种高效、低成本的金银花中绿原酸提取分离方法,为金银花中绿原酸的应用提供技术支持。

此外,本研究还对于超声波萃取技术在中药提取中的应用和绿原酸分离机理的研究都具有一定的学术意义。

研究方法:采用超声波萃取技术提取金银花中的绿原酸,通过正交实验优化超声波萃取条件,包括温度、时间和浓度。

随后采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对提取物进行分离,进一步研究绿原酸的分离效果和分离机理。

最后,通过HPLC等技术对提取物中绿原酸的含量进行定量分析。

研究计划:第一年:对金银花中绿原酸的提取条件进行研究和优化,确定最佳提取工艺,并建立超声波萃取与绿原酸提取的定量分析方法。

第二年:对绿原酸的分离技术进行研究和建立,包括聚丙烯酰胺凝胶电泳法、高效液相色谱法等方法的应用和比较。

第三年:对新提取分离方法的效果进行评价,并与现有的提取分离方法进行比较。

同时,对该方法进行实际应用的研究和探索,提出推广应用的建议和意见。

预期成果:开发一种高效、低成本的金银花中绿原酸提取分离方法,并获得其绿原酸含量的定量分析结果。

同时,对超声波萃取技术在中药提取中的应用和绿原酸分离机理进行深入探究,并推广该方法的应用。

金银花中绿原酸提取工艺研究进展

金银花中绿原酸提取工艺研究进展

金银花中绿原酸提取工艺研究进展
马烽;朱亚玲;陈明辉;李飞
【期刊名称】《食品研究与开发》
【年(卷),期】2010(031)007
【摘要】金银花是忍冬科植物忍冬的干燥花蕾,是常用的功能性植物,绿原酸是其中主要有效成分,具有显著的清热解毒、抗菌消炎以及防腐作用等.通过比较的方法,对金银花中绿原酸的提取工艺进行综述,并展望其提取工艺发展趋势.
【总页数】4页(P164-166,184)
【作者】马烽;朱亚玲;陈明辉;李飞
【作者单位】山东轻工业学院,化学工程学院,山东,济南,250353;山东轻工业学院,化学工程学院,山东,济南,250353;山东轻工业学院,化学工程学院,山东,济南,250353;山东轻工业学院,化学工程学院,山东,济南,250353
【正文语种】中文
【相关文献】
1.金银花中绿原酸的提取工艺及制剂研究进展 [J], 王爱萍;郑茂东;徐今宁;闪云
2.正交试验比较金银花中绿原酸、异绿原酸A的提取工艺 [J], 汤洁;程庆兵;付恩桃;刘修树;范高福;方丽波
3.金银花中绿原酸的提取工艺研究 [J], 王鑫;李楠;齐佳慧;李晓辉;蔺彬彬
4.金银花中绿原酸提取工艺研究 [J], 刘金磊;邓皮凯;邓仕英
5.高效液相色谱法同时检测金银花中绿原酸和总黄酮及其提取工艺 [J], 王玉洁;接伟光;郭娜;乔巍;张颖智
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

金银花叶茎藤中黄酮与绿原酸同时提取分离工艺

金银花叶茎藤中黄酮与绿原酸同时提取分离工艺

金银花叶茎藤中黄酮与绿原酸同时提取分离工艺罗悠;陈莉华;梁玄;黄浩;李彪;黄练【摘要】Chlorogenic acid and flavonoids were simultaneously extracted by ethanol with the aid of ultrasonic treatment from leaves and rattan of Lonicera japonica and then isolated by ethyl ecetate and macroporous resin D101. The purification of soluble flavonoid and chlorogenic acid was achieved by re-crystallization with ethanol and N-Hexane phase separation, respectively. Results showed that two products (A and B) were obtained and identified to be chlorogenic acid and soluble flavonoid. The chlorogenic acid content in product A was 91.2% with a yield of 1.23 % and the flavonoid content in product B was 84.5 % with a yield of 0.50%. The proposed method has been used to obtain flavonoids and chlorogenic acid from leaves and rattan of Lonicera japonica with satisfactory results.%超声辅助乙醇提取金银花叶茎藤中的绿原酸与黄酮,乙酸乙酯萃取分离黄酮与绿原酸,D101大孔树脂梯度洗脱绿原酸与黄酮,乙醇及正己烷分相法纯化黄酮与绿原酸.结果表明,乙酸乙酯萃取可将金银花叶茎藤中的黄酮与绿原酸较好的分离,经D101大孔树脂吸附、50%乙醇洗脱、浓缩过滤、沉淀用乙醇重结晶后得到的水溶型黄酮纯度达84.5%;经D101大孔树脂吸附、70%乙醇洗脱、浓缩干燥、pH值2.97条件下乙酸乙酯萃取、正己烷分相后,得到的绿原酸纯度达91.2%.方法已用于金银花叶藤中黄酮与绿原酸的同时提取、分离与纯化,结果满意.【期刊名称】《吉首大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2011(000)005【总页数】4页(P91-94)【关键词】金银花叶茎藤;黄酮;绿原酸;大孔树脂【作者】罗悠;陈莉华;梁玄;黄浩;李彪;黄练【作者单位】吉首大学化学化工学院,湖南吉首416000;吉首大学化学化工学院,湖南吉首416000;吉首大学化学化工学院,湖南吉首416000;吉首大学化学化工学院,湖南吉首416000;吉首大学化学化工学院,湖南吉首416000;吉首大学化学化工学院,湖南吉首416000【正文语种】中文【中图分类】O6-332金银花为忍冬科多年生半常绿缠绕植物,又名忍冬花、银花、双花等,《中国药典》[1]收载在药材及饮片部分,具有清热解毒、凉热散风的功效[2].长期以来,金银花不仅广泛应用在医院临床和中成药生产中,同时还作为提取绿原酸的大宗工业原料应用于工业生产中,其价格逐年攀升.而研究中对其枝叶的重视程度却不够,大量金银花的枝叶被视为非药用部位而弃之.研究表明,金银花叶和金银花在临床上均有清热解毒之功效[3].金银花叶茎藤中主要含有以下成分[3]:(1)黄酮类.金银花叶茎藤的黄酮类化合物有木犀草素、忍冬苷等.(2)有机酸类.绿原酸类化合物是金银花叶的主要有效成分,包括绿原酸和异绿原酸.同一时期的金银花叶中绿原酸类有效成分约为花的60%~70%.(3)多糖类.(4)粗蛋白、粗脂肪等营养物质.金银花植株幼嫩枝叶粗蛋白高于23%,粗脂肪高于47%,适口性较好,牛、羊等牲畜喜食.近5年来,金银花叶茎藤中绿原酸的提取仅见于文献[4],有少量文献关于叶中黄酮的提取[5-7],尚未见对金银花叶茎藤中黄酮、绿原酸、多糖的综合提取的研究报道.本研究将以系列文章探讨利用价格低廉的金银花叶茎藤进行黄酮、绿原酸、多糖的联合提取并将残渣处理为饲料添加剂,为金银花叶叶茎藤资源化综合利用提供实验依据.UV75TCRT紫外分光光度计(日本岛津);KQ-250E超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);RH-201B-Ⅱ旋转蒸发仪(郑州长城科工贸有限公司);SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司);pHS-25酸酸度计(上海日岛科学仪器有限公司);DZF-6020真空干燥箱(上海精宏实验设备有限公司);HH-S恒温水浴锅(郑州长城科工贸有限公司);层析柱;粉粹机.芦丁标准品;绿原酸标准品(中国药品生物制品鉴定所);无水乙醇;石油醚;乙酸乙酯;正己烷;NaNO2;Al(NO3)3;NaOH;HCl.以上实试剂均为分析纯.D101大孔树脂(安徽三星树脂科技有限公司).1.2.1 大孔树脂的预处理取一定量的D101大孔树脂,先用95%乙醇浸洗数次,每次24h,至浸洗液加适量的水无白色浑浊现象止.用水反复清洗干净至无醇味,加入4倍体积2mol/L的NaOH溶液,浸泡12h,以水洗至中性.再加入4倍体积量2mol/L的HCl溶液,浸泡12h,用水洗至中性备用.1.2.2 黄酮标准曲线以芦丁为黄酮对照品按照NaNO2-Al(NO3)3-NaOH法绘制标准曲线.测定样品溶液在510nm处的吸光度值,以浓度(c)对吸光度(A)进行线性回归得回归方程为:c=0.093 9A,R2=0.999 8,浓度在0~0.05mg/mL之间有良好的线性关系.1.2.3 绿原酸标准曲线精确称取绿原酸标准品5.1mg,95%的乙醇定容至25mL,精密吸取1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,7.0 mL于25mL容量瓶中,加入45%的乙醇定容至25mL,混匀.此为标准系列溶液,紫外扫描测出最大吸收波长,并在最大吸收波长处测吸光度.以浓度为横坐标、吸光度为纵坐标绘制标准曲线[8].在329nm处测一系列的溶液的吸光度A,以浓度(c)对吸光度(A)进行线性回归得回归方程为c=0.020 3A-0.000 5,R2=0.999 7,浓度在0~0.057mg/mL 之间有良好的线性关系.1.2.4 样品的处理与粗分离1.2.5 黄酮的富集与精制1.2.6 绿原酸的富集与精制1.2.7 黄酮与绿原酸的得率与纯度计算将得到的固体或晶体配制成一定体积的溶液,分别按黄酮及绿原酸的步骤进行处理,在最大吸收波长处测出吸光度,代入线性回归方程求出浓度,结合体积求出各物质的质量,再根据下式求出纯度:称取50g金银花粉末,按料液比1∶10先加入总体积一半的60%乙醇,温度50℃、功率100W、超声萃取30min.超声波特殊的强纵向振动、冲击破碎、空化效应及搅拌加热等物理性能,破坏提取物的细胞结构,使溶媒能渗入细胞内部,从而加速有效成分的溶解,提高有效成分的提取率.将上述超声后的溶液抽滤,滤渣再加入另一半体积的60%乙醇,合并滤液,减压回收乙醇,得浓缩液,滤渣洗净干燥制备绿色饲料的添加剂.在浓缩液中,按1∶1加入石油醚[7],脱色3次,每次4min.分液,上层为含黄酮的黄绿色乙酸乙酯层,下层为含绿原酸的暗红色水层.将乙酸乙酯层用旋转蒸发器减压回收乙酸乙酯,得粗黄酮的浓缩液.称取预处理好的D101大孔树脂100g,湿法装柱,在装柱的过程中,应使层析柱中的大孔树脂一直处于有水的环境中,避免与空气直接接触,导致装柱不密实,出现大量气孔,使柱性能下降,影响分离效果.将浓缩液倒入玻璃层析柱中浸泡2h后,控制流速2mL/min,先用2倍柱体积的水洗脱除去糖类、蛋白质和大分子杂质[7],再用50%的乙醇洗脱,每一份柱体积收集一份流出液.从每份流出液中取1mL进行黄酮的颜色反应(NaNO2-Al (NO3)3-NaOH法),溶液由无色变为红色,第1份到第3份的颜色较深,从第4份开始颜色逐渐变浅,在510nm处测第5份、第6份的吸光度,分别为0.128,0.084.对应的洗脱液浓度为0.012,0.084mg/mL.因此6倍体积洗脱液后,大孔树脂中吸附的黄酮已大致洗脱完,合并洗脱液(亮黄色),减压回收乙醇,伴随着乙醇的蒸出,滴液速度渐慢,有淡黄色沉淀析出,重1.256 1g.黄酮易溶于热水、丙酮,溶于甲醇、乙醇.因此,以乙醇为溶剂,采用重结晶法可有效提高金银花叶茎藤中黄酮的纯度.在金银花提取物中加入少量的50%的乙醇,在恒温水浴中使之溶解,温度60℃,时间30min.过滤除去不溶物,溶液颜色为淡黄色,用HCl调节pH值至4左右,在室温下静置8h,析出淡黄色晶体.过滤,得晶体0.250 8g,计算黄酮的得率为0.5%.本实验中,金银花中黄酮的提取率远低于文献值,除实验条件不同导致的差距外,还可能由于金银花中脂溶性的黄酮远低于水溶性的黄酮的缘故.笔者在实验过程中,曾取含绿原酸的水层溶液少量,做黄酮的颜色反应实验,发现显色较深.说明水溶液层中确实还含有大量的水溶性黄酮,与文献[6]所得结论一致.精密称取干燥黄酮晶体0.081 3g,置于100mL的容量瓶中,加95%乙醇溶解并定容至刻度,摇匀,备用.精密移取对照品溶液1.0mL,按照实验方法测定溶液的吸光度为0.293,计算得到晶体中含黄酮量为0.068 7g,因此黄酮的纯度为84.5% .本研究采用了大孔树脂和混合溶剂分相结合法纯化绿原酸,先采用大孔树脂在一定酸性条件下,对绿原酸进行初步富集得到绿原酸粗品(含量40%左右),然后对绿原酸粗品使用混合溶剂分相新工艺[9]进行精制,可使绿原酸纯度达到99.5%.由于绿原酸在酸性条件下,以分子形式存在,又易溶于醇、丙酮等极性溶剂,因此可首先使用萃取剂(乙酸乙酯、正丁醇、异戊醇等偏极性有机溶剂)把绿原酸从其粗品的酸性水溶液中萃取出来,获得萃取液后(萃取液为溶解绿原酸的乙酸乙酯相和极少量与乙酸乙酯互溶的水形成的均相),再加入分相剂(正己烷、苯、石油醚等非极性有机溶剂),此时整个溶剂系统由加入分相剂前的偏极性逐渐向加入后的非极性过渡.同时绿原酸分子不溶于非极性的分相剂以及萃取剂、分相剂的互溶效应远大于萃取剂和少量水的互溶效应,因此充分静置后,萃取剂、分相剂形成均相,而萃取剂中的绿原酸则随少量水重新析出,从而达到纯化的目的.称取预处理好的D101大孔树脂85g湿法装柱,用HCl调节水层提取液至pH值为3左右,上柱,浸泡2h后,控制流速2mL/min,先用2倍柱体积的水洗脱除去糖类,蛋白质和大分子杂质,再用70%的乙醇洗脱.每一份柱体积收集一份流出液.第1份为浅黄色,第2份为橘红色,从第3份开始颜色逐渐变浅.在329nm处测第4份、第5份的吸光度,分别为0.701,0.160,对应的洗脱液浓度为0.014,0.003mg/mL.因此,5倍体积洗脱液后,绿原酸大致洗脱完全,合并洗脱液(深红色),减压回收洗脱液中的乙醇,并放入真空干燥箱中干燥,时间30min,温度50℃,真空度0.09Mp,得绿原酸粗品(淡黄色)1.288 1g.精密称取粗品32.4mg,按料液比1∶7在绿原酸粗品中加入水226.8mL,HCl调pH值至2.97,再加入等体积的乙酸乙酯,萃取时间为4min,萃取次数为4次,合并萃取液总计907.2mL,按分相剂/萃取液=0.4[9],加入正己烷362.8mL.分液,取下层水溶液层,约为15mL,在冰箱中静置24h,温度0℃,过滤,真空干燥晶体,真空度0.09Mp,时间30min,温度50℃,得白色晶体[8],称量,为15.4mg,得率1.23%.将绿原酸晶体置于25mL容量瓶中,加入95%的乙醇溶解.精密吸取1.0mL于25mL容量瓶中,加入45%的乙醇定容,混匀,在最大吸收波长329nm处测吸光度为1.129.由此算出纯度为91.2%.本研究以价格低廉的金银花叶茎藤为原料,同时提取绿原酸及黄酮,绿原酸纯度为91.2%,得率1.23%,黄酮纯度为84.5%,得率为0.5%,文献[10]用金银花为原料同时提取绿原酸及黄酮,绿原酸纯度为68.2%,得率1.34%,黄酮纯度为95%,得率为1.12.本研究得到的绿原酸纯度比文献[10]得到的绿原酸纯度高23%,而得率几乎相近.由此可见:本研究提出的方法能够较好地对金银花叶茎藤中的黄酮与绿原酸同时提取分离与纯化;本研究中,提取液经乙酸乙酯萃取后,黄酮与绿原酸得到了较好的分离;与已有研究结果的比较表明,本研究结果具有原料来源广、价格低廉、绿原酸产品纯度高、得率高的特点,对金银花叶茎藤的综合开发具有应用价值.【相关文献】[1]国家药典委员会编.中华人民共和国药典(2005年版1部)[S].北京:化学工业出版社,2005:152-153.[2]庞瑞.金银花有效成分的药理学研究进展[J].陕西中医学院学报,2011,34(3):77-79.[3]郭玉,阳育聪,刘运美,等.金银花及其叶中有效成分的比较研究[J].南华大学学报:医学版,2008,36(2):154-157.[4]杨军宣,尹蓉莉,陈金玉,等.金银花叶中绿原酸的大孔吸附树脂纯化工艺研究[J].中国实验方剂学杂志,2010,16(15):20-23.[5]姜洪芳,张卫明,张玖.忍冬叶黄酮类化合物的提取分离与结构鉴定[J].安徽农业科学,2008,36(27):11 795-11 797.[6]朱英,裘德胜,陈民,等.金银花叶总黄酮的水提取工艺研究[J].中成药,2007,29(1):60-63.[7]王丽婷,王丽娟.大孔树脂分离纯化金银花叶中的总黄酮[J].华西药学杂志,2010,25(5):575-576.[8]时军波,徐娜,刘长安,等.金银花不同部位中绿原酸和木犀草苷含量的测定[J].化学分析计量,2010,19(6):45-47.[9]胡居吾,李雄辉.分相萃取法制备高纯度绿原酸的工艺研究[J].食品科学,2010,31(14):37-41.[10]郝凤霞,杨敏丽.金银花中绿原酸和黄酮的同时提取分离工艺研究[J].食品科学,2009,30(20):211-214.(责任编辑易必武)。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

Abstract:Chlorogenic acid and flavonoids were simultaneously extracted by ethanol with the aid of ultrasonic treatment from Flos lonicerae and then isolated by polyamide column chromatography. Results showed that three products (A, B and C) were
原 K2 13.85 9.25 11.53 12.53
酸 K3 5.00 9.86 9.17 10.44
直 k1 3.58 3.49 2.96 2.20
观 k2 4.62 3.08 3.84 4.17
分 k3 1.67 3.29 3.06 3.48
析 R 2.95 0.41 0.88 1.97
K1 27.35 19.95 19.2 14.22 黄 K2 25.89 16.1 20.66 23.06 酮 K3 6.93 24.12 20.31 22.89 直 k1 9.12 6.65 6.4 4.74 观 k2 8.63 5.37 6.89 7.69 分 k3 2.31 8.04 6.77 7.63 析 R 7.77 2.67 0.49 2.95
试验号 A
B
C
D 绿原酸得率(%) 总黄酮得率(%)
11
1
1
1
2.37
6.85
21
2
2
2
4.82
9.00
31
3
3
3
3.54
11.5
42
1
2
3
5.57
9.74
52
2
3
1
3.10
5.45
62
3
1
2
5.18
10.7
73
1
3
2
2.53
3.36
83
2
1
3
1.33

1.65
93
3
2
1
1.14
1.92
绿 K1 10.73 10.47 8.88 6.61
1 材料与方法
1.1 材料与试剂 金银花采自宁夏银川市合木公司。 甲醇、磷酸、9 5 % 乙醇、氢氧化钠、硝酸铝为
分析纯 天津市科密欧化学试剂有限公司;绿原酸、 芦丁对照品 中国药品生物制品鉴定所;实验室用水为 自制蒸馏水。 1.2 仪器与设备
Agilent 1100 高效液相色谱仪 美国 Agilent 公司; UV-2450 紫外 - 可见分光光度计 日本岛津公司;AL204 型电子天平 梅特勒 - 托力多仪器有限公司;101A-1E 型电热鼓风干燥箱 上海实验仪器厂有限公司;TDL802B 型台式离心机 上海安亭科学仪器厂;KQ-250DE 型 数控超声波清洗器 昆山市超声仪器有限公司;SHBⅢ型循环水式多用真空泵 郑州长城科工贸有限公司。 1.3 方法
C 时间(min) 10 30 50
D 次数 1 2 3
采用乙醇超声波法提取,考察了乙醇体积分数、 料液比、提取时间、提取次数这 4 个主要因素对绿原 酸和黄酮得率的影响,并采用正交试验法 L9(34)对主要 影响因素进行了优化,正交试验结果及分析见表 1~4。
※工艺技术
食品科学
2009, Vol. 30, No. 20 213
由表 2~4 直观分析及方差分析结果可知,综合考 虑绿原酸和总黄酮得率,得出最佳的提取工艺条件: 70% 的乙醇体积分数、料液比为 1:8、超声时间 30min、 超声温度为 3 0 ℃、超声提取两次。
表 2 正交试验结果表 L9(34) Table 2 Results of L9(34) orthogonal array design experiments
槲皮素和木犀草素:色谱柱为 Zorbax-C18 柱(250mm × 4.6mm,5μm);流动相:甲醇 -0.02% 磷酸(50:50, V / V );流速:1 . 0 m l / m i n ;检测波长:3 5 0 n m ;柱温: 3 0 ℃;进样量:1 0 . 0μl 。
1.3.2.2 对照品溶液的制备 绿原酸:精密称取绿原酸对照品 0.001g,用 50%
1.3.2.3 标准曲线的绘制 绿原酸:精密吸取绿原酸对照品溶液 0、1.0、3.0、
5.0、7.0、9.0、10.0ml 于 10ml 容量瓶中,用 50% 甲醇 定容至刻度,作峰面积 - 绿原酸浓度标准曲线,得直 线回归方程为 y = 14270x,R2 = 0.9997;绿原酸在 0~ 0.02mg/ml 范围内呈良好的线性关系。
甲醇溶解,转移至 50ml 容量瓶中,定容至刻度,摇匀, 配制成 0.02mg/ml 的绿原酸对照品溶液。
槲皮素和木犀草素:准确称取槲皮素对照品 0.030g, 用甲醇溶解并定容于 50ml 容量瓶,配制成 0.60mg/ml 的 溶液。取该溶液 1.00ml 用甲醇稀释并定容至 10ml,即 得浓度为 0.06mg/ml 的槲皮素对照品溶液。以相同的方 法制备浓度为 0.057mg/ml 的木犀草素的对照品溶液。
2 结果与分析
2.1 金银花中绿原酸和总黄酮的提取工艺研究
表 1 正交试验因素水平表 Table 1 Factors and levels in L9(34) orthogonal array design
水平 1 2 3
A乙醇体积分数(%) 70 50 95
B 料液比(m/V) 1:12 1:5 1:8
※工艺技术
食品科学
2009, Vol. 30, No. 20 211
金银花中绿原酸和黄酮的同时提取分离 工艺研究
郝凤霞,杨敏丽
(宁夏大学能源化工重点实验室,宁夏 银川 750021)
摘 要:采用乙醇超声波法提取,聚酰胺柱层析法分离的方法对金银花中的绿原酸和黄酮进行提取分离。结果表 明:聚酰胺柱层析法分离、梯度洗脱得到绿原酸、水溶性黄酮和脂溶性黄酮 3 个不同产品 A、B 和 C,其中 A 绿 原酸含量为 68.2%,得率为 1.34%;B 黄酮含量 95%,得率为 1.12%;C 中槲皮素和木犀草素含量分别为 7.5%、 16.9%,得率为 0.11%。 关键词:金银花;绿原酸;黄酮;槲皮素;木犀草素
1.3.1 紫外分光光度法
1.3.1.1 芦丁标准溶液的配制
收稿日期:2009-06-11 基金项目:国家自然科学基金项目(20565003);宁夏大学科学研究基金项目(ZR200706) 作者简介:郝凤霞(1978 -),女,讲师,硕士,主要从事天然产物开发研究。E-mail:hfx220@
槲皮素和木犀草素:取槲皮素对照品溶液和木犀草 素对照品溶液,分别用甲醇稀释,得一系列不同质量 浓度的对照品溶液后进样,以对照品溶液的浓度 C (μg / ml)为横坐标,峰面积 Y 为纵坐标,得槲皮素和木犀草 素的对照品溶液的回归方程分别为:Y=19.12C - 0.6778, R2 = 0.9999 和 Y= 47.20C + 120.2,R2 = 0.9999,它们分 别在 4.0~20μg/ml 和 3.8~19μg/ml 范围内呈良好的线性 关系。
212 2009, Vol. 30, No. 20
食品科学
※工艺技术
准确称取芦丁标品 0.0050g,用 95% 乙醇溶解,并 完全溶解后转入 25ml 容量瓶中,用 95% 乙醇定容,配 成 0.20mg/ml 的芦丁标准溶液。
1.3.1.2 标准曲线的绘制
1.2
0.9
吸光率
0.6
0.3
0
400
obtained from column chromatography with gradient elution, which were identified to be chlorogenic acid, soluble flavonoid and
lipid-soluble flavonoid, respectively. The chlorogenic acid content in product A was 68.2% with a yield of 1.34%; the
1.3.1.3 绿原酸和总黄酮得率的计算
浓缩液中绿原酸浓度×浓缩液体积 绿原酸得率(%)= ———————————————× 100
金银花质量
浓缩液中黄酮浓度×浓缩液体积 总黄酮得率(%)= ———————————————× 100
金银花质量
1.3.2 高效液相色谱法 1.3.2.1 色谱条件
绿原酸:色谱柱:Zorbax SB -C18 柱(250 mm × 4.6mm,5μm);流动相:0.4% 磷酸 - 乙腈(87:13,V/V); 流速:1.0ml/min;检测波长:327nm;柱温:2 0 ℃; 进 样 量:5 μl 。
吸光度
1
A=1.157C+0.014
0.8
R2=0.9988
0.6
0.4
0.2
0
0
0.2 0.4 0.6 0.8
1
浓度(mg/ml)
图 2 芦丁工作曲线 Fig.2 Standard curve of rutin
在最大吸收波长 505nm 处,分别测定不同浓度的络 合物,绘制标准曲线(图 2),得到芦丁浓度 C 与吸光 度 A 关系曲线的回归方程式:A=1 .15 7C +0 .01 4,R2= 0.9988。
50 0
0
2.634
2.5
5
7.5
时间(min)
a.绿原酸对照品
mAU
350 300 250 200 150 100
50 0
0
9.200
2.5 5 7.5 10 12.5 15 时间(min)
相关文档
最新文档