(完整word版)高效液相色谱仪常用的检测器及其性能
高效液相色谱仪常用的检测器及其性能
高效液相色谱仪常用的检测器及其性能(1)紫外汲取(UV)检测器 UV检测器是目前HPLC应用最广泛的检测器。
它是依据光汲取原理,以适当的光路和电路,输出一个与试样组分浓度成正比的紫外一可见光汲取信号,其结构与普通光度计相像。
其流通池是组分流过的光学通道,池体积普通为8μl,内径小于lmm,长度10mm 左右。
这种检测器敏捷度高,线性范围宽,对流速和温度变幻不敏感,可用于梯度洗脱分别。
紫外汲取检测要求被检测样品组分有紫外一可见光汲取,而用法的流淌相无汲取,或在被测组分汲取波特长无汲取。
普通挑选在欲分析物有最大汲取的波特长举行检测,以获得最大敏捷度和抗干扰能力。
在没有最大汲取时,可采纳末端汲取。
检测波长的挑选除取决于待测物质的成分和分子结构外,还必需考虑流淌相组成、共存组分干扰等因素。
特殊是各种溶剂都有一定的透过波长下限值,超过这个波长,溶剂的汲取会变得很强,以至于不能很好地测出待测物质的汲取强度。
表1列出了HPLC中一些常用的溶剂透过波长的下限。
(2)光电二极管阵列(IJDA)检测器 PDA检测器又称为二极管阵列检测器(diode array UV detector,DAD),这种检测器以光电二极管阵列作为检测元件,可举行多通道并行检测,在一次色谱测量中,可同时获得时光、波长、吸光度三者的关系,通过计算机处理,在荧光屏上显示出三维图谱,也可作出随意波长的吸光度一时问曲线和随意时光的吸光度一波长曲线。
DAD的光路与紫外检测器不同,光源发出的光聚焦后先通过检测池,通过检测池的透射光由全息光栅色散成多色光,不同波长的色散光按波长挨次聚焦在阵列元件上,每个元件对应一定的纳米数。
当光照耀到光电二极管时,光电二极管产生讯号。
因为色散过程及透射光的检测是全波长范围的,可在眨眼检测流经检测池的全汲取光谱,得到三维色谱一光谱图。
计算机化的数据处理,还可举行色谱峰光谱相像性比较、峰纯度检测及利用谱图库对掣定样品举行检索等,为定性、定量分析提供更丰盛的信息。
液相检测器特点
高效液相色谱仪常用检测器的种类及分析检测器的作用是将柱流出物中样品组成和含量的变化转化为可供检测的信号,常用检测器有紫外吸收、荧光、示差折光、化学发光等。
一般常用的有固定波长紫外检测器,可调波长紫外,可见检测器、可编程紫~ '1-/可见检测器,光电二极管矩阵检测器、示差折光检测器、荧光检测器、电化学检测器、电导检测器,其他还有放射性检测器、质谱检测器、热能检测器、I J A u5检测器、蒸发质量检测器、粘度检测器等。
1.紫外可见吸收检测器(ultraviolet-visibledetector,UVD)紫外可见吸收检测器(UVD)是HPLC中应用最广泛的检测器之一,几乎所有的液相色谱仪都配有这种检测器。
其特点是灵敏度较高,线性范围宽,噪声低,适用于梯度洗脱,对强吸收物质检测限可达1ng,检测后不破坏样品,可用于制备,并能与任何检测器串联使用。
紫外可见检测器的工作原理与结构同一般分光光度计相似,实际上就是装有流动地的紫外可见光度计。
(1)紫外吸收检测器紫外吸收检测器常用氘灯作光源,氘灯则发射出紫外-可见区范围的连续波长,并安装一个光栅型单色器,其波长选择范围宽(190nm~800nm)。
它有两个流通池,一个作参比,一个作测量用,光源发出的紫外光照射到流通池上,若两流通池都通过纯的均匀溶剂,则它们在紫外波长下几乎无吸收,光电管上接受到的辐射强度相等,无信号输出。
当组分进入测量池时,吸收一定的紫外光,使两光电管接受到的辐射强度不等,这时有信号输出,输出信号大小与组分浓度有关。
局限:流动相的选择受到一定限制,即具有一定紫外吸收的溶剂不能做流动相,每种溶剂都有截止波长,当小于该截止波长的紫外光通过溶剂时,溶剂的透光率降至10%以下,因此,紫外吸收检测器的工作波长不能小于溶剂的截止波长。
(2)光电二极管阵列检测器( photodiodearraydetector, PDAD )-- Waters配备光电二极管阵列检测器( Diode Array Detector, DAD ) --Aglient配备也称快速扫描紫外可见分光检测器,是一种新型的光吸收式检测器。
高效液相色谱法所用的检测器
高效液相色谱法所用的检测器
高效液相色谱法通常使用以下检测器:
1. 紫外光吸收检测器(UV检测器): 这是最常用的检测器之一。
它利用样品分子在特定波长下吸收的紫外光的数量来检测分离出来的化合物。
2. 荧光检测器:此检测器利用分离出来的化合物的荧光强度来检测分离出来的化合物。
这可以使它有效地检测探测极小浓度的化合物。
3. 电导检测器: 此检测器通过检测样品中离子的电导率来检测分离出来的化合物。
这种检测器通常用于离子交换色谱。
4. 质谱检测器(MS检测器):在某些情况下,需要识别和定量化合物。
在这种情况下,使用质谱检测器非常有用。
它将化合物的分子质量与一个反应谱库进行比较,以进行准确的定量和鉴定。
5. 折射率检测器(RI检测器): 检测样品分子与溶剂的差异折射率。
该检测器对于不具有紫外吸收或荧光的化合物是很有用的。
不同液相检测器的区别
不同液相检测器的区别公司标准化编码 [QQX96QT-XQQB89Q8-NQQJ6Q8-MQM9N]高效液相色谱仪的常用检测器有哪几种,有什么区别高效液相色谱仪常用检测器种类及分析检测器的作用是将柱流出物中样品组成和含量的变化转化为可供检测的信号,常用检测器有紫外吸收、荧光、示差折光、化学发光等。
1.紫外可见吸收检测器(ultraviolet_visibledetector,UVD)紫外可见吸收检测器(UVD)是HPLC中应用最广泛的检测器之一,几乎所有的液相色谱仪都配有这种检测器。
其特点是灵敏度较高,线性范围宽,噪声低,适用于梯度洗脱,对强吸收物质检测限可达1ng,检测后不破坏样品,可用于制备,并能与任何检测器串联使用。
紫外可见检测器的工作原理与结构同一般分光光度计相似,实际上就是装有流动地的紫外可见光度计。
(1)紫外吸收检测器紫外吸收检测器常用氘灯作光源,氘灯则发射出紫外-可见区范围的连续波长,并安装一个光栅型单色器,其波长选择范围宽(190nm-800nm)。
它有两个流通池,一个作参比,一个作测量用,光源发出的紫外光照射到流通池上,若两流通池都通过纯的均匀溶剂,则它们在紫外波长下几乎无吸收,光电管上接受到的辐射强度相等,无信号输出。
当组分进入测量池时,吸收一定的紫外光,使两光电管接受到的辐射强度不等,这时有信号输出,输出信号大小与组分浓度有关。
局限:流动相的选择受到一定限制,即具有一定紫外吸收的溶剂不能做流动相,每种溶剂都有截止波长,当小于该截止波长的紫外光通过溶剂时,溶剂的透光率降至10%以下,因此,紫外吸收检测器的工作波长不能小于溶剂的截止波长。
(2)光电二极管阵列检测器(photodiodearraydetector,PDAD)也称快速扫描紫外可见分光检测器,是一种新型的光吸收式检测器。
它采用光电二极管阵列作为检测元件,构成多通道并行工作,同时检测由光栅分光,再入射到阵列式接收器上的全部波长的光信号,然后对二极管阵列快速扫描采集数据,得到吸收值(A)是保留时间(tR)和波长(l)函数的三维色谱光谱图。
(一)高效液相色谱仪(二极管阵列检测器 荧光检测器 双
(一)高效液相色谱仪(二极管阵列检测器+荧光检测器+双泵柱后衍生)一、配置清单:1.液相色谱主机(主机包括:梯度系统,自动进样器,1台在线柱塞清洗装置,在线脱气机,柱温箱)2.荧光检测器1台3.二极管阵列检测器1台4.柱后衍生系统1套5.正版软件1套(工作站、操作系统、驱动等),全中文色谱1套管理系统,包括:64位色谱管理软件6.Oracle关系型图文数据库。
1套7.2ml样品瓶及瓶盖。
200个8.通用色谱柱接头。
2个9.原装C18色谱柱(5um 4.6×150mm;)1根10.1L溶剂瓶。
5个11.国产品牌电脑,含品牌打印机。
1套二、技术参数:1.四元梯度泵★1.1 工作模式:相互独立、电子控制的双柱塞直线驱动装置,双压力传感器反馈回路1.2 溶剂数量:四元1.3 流速范围:0.001~10.000mL/min,以0.001递增1.4 流速精确度:≦0.075%RSD(小数点后三位数字)1.5 流速准确度:±0.5%1.6 延迟体积:<650µL(包括进样器扩散体积),并且不随反压变化1.7 混合范围:0.0—100.0% 以0.1% 增量1.8 最大耐受压力:≧5000psi1.9 梯度准确度:± 0.5%,不随反压变化★1.10 梯度精度:≦0.15%RSD ,不随反压变化1.11 具有操作面板,可以独立设定工作参数、显示运行状态(必须提供彩页或官方文件证明)2.自动进样器★2.1 样品瓶数:≧115位(必须提供彩页或官方文件证明)2.2 进样范围:0.1—100uL2.3 进样次数:每个样品1—99次进样2.4 进样精度:≦0.25%RSD2.5 进样范围:0.1—100µL2.6 进样线性度:>0.999进样针清洗:针内外每次进样后通过专用流路自动清洗3.荧光检测器3.1 灯:150W 氙灯,连续弧光,3.2 灵敏度:水的拉曼光谱≥10003.3 激发波长:200~890nm3.4 发射波长:210~900nm3.5 波长重现性:±0.25nm3.6 波长准确度:±3nm3.7 流通池:< 13ul3.8 采样频率:80Hz3.9 流通池耐压:145psi3.10 需提供至少5次进样保留时间和峰面积重现性色谱图。
仪器分析技术w6202-2高效液相谱仪常用检测器的分类及工作原理和应用
高效液相色谱仪常见检测器分类及工作原理和应用
主讲教师:长春职业技术学院 王磊
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检测器的分类 常用检测器的工作原理及应用
过渡页 TRANSITION PAGE
1
检测器的分类
高效液相色谱仪常用检测器分类及工作原理和应用
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高效液相色谱仪常用的检测器
主要特点
池体积可制作的很小,检测后不破坏杨品, 可用于制备
灵敏度比紫外检测器高,噪音低,线性范围 宽,适用梯度洗脱及制备色谱;紫外吸收大 的溶剂不能做流动相
易受背景荧光、pH和溶剂的影响,适用于痕 量分析
可检测所有物质,不适合微量分析
蒸发光散射检测器 ELSD 纳克级激光计数检测器NQAQ
任何挥发型低于流动想的样品均能 被检测
高效液相色谱仪常见检测器分类及工作原理和应用
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常见检测器的工作原理及应用
荧光检测器的应用
环境中的污染物
– 多环芳烃(PAH),多酚, 氨基甲酸酯等
食品、饮料 – 食品中的毒素;例如:黄 曲霉毒素
– 染料 – 维生素及衍生氨基酸 生物技术及制药
多环芳烃(PAH)
H3C CH3
CH3
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常见检测器的工作原理及应用
荧光检测原理
原理:发荧光的化合物吸收光使其分子达 到激发态,当其返回到基态时发射光的现象即 荧光。
检测过程:由光源发出的光,经激发光单 色器后,得到所需波长的激发光。经过样品池 被样品吸收,并使其被激发后发射出荧光。再 经选择发射波长的单色器分光后,单一波长的 发射光波被送至检测器进行检测,吸光强度与 激发光强度成正比。
紫外可见吸收检测器
高效液相色谱仪性能指标
高效液相色谱仪性能指标一、工作条件:1.1 工作环境1.1.1 220V+5%电压范围,48-66HZ1.1.2 实验室温度:4-55 C1.1.3 湿度:<95%二、技术参数1 四元梯度泵(含在线真空脱气机)*1.1串联式双柱塞往复泵,20-100ul可变冲程,主动电磁阀,柱塞清洗,自主溶剂压缩因子设置1.2流量范围:0.2ml/min--10.0ml/min,递增率0.001ml/min*1.3流量精度:<0.07%RSD*1.4最大操作压力:400bar1.5滞后体积:600-900ul1.6混合精度:+ 0.20%SD1.7真空脱气机:四通路在线真空膜过滤技术,内置真空泵,压力传感器,实时监控真空腔压力变化,保证及时高效的脱气操作2 自动进样器*2.1自动进样器采用高压、阀进样技术,进样速度快,且进样系统中残留小2.2自动进样器可进行编程进样,用于进行柱前衍生,柱前样品自动稀释,自动混合等复杂进样方式。
此外,用户可根据样品的粘度,调节取样及进样速度。
2.3自动进样器均采用深色避光盖板,便于光敏感样品的长时间放置;同时进样器内安装有照明装置,便于用户操作。
2.4进样范围:0.1~100μL,增量为0.1μL2.5进样精密度:< 0.25% RSD2.6样品容量: 132个2-mL样品瓶*2.7样品残留:<0.004%2.8重复进样次数:1~99次/样品*2.9最大操作压力:600bar3柱温箱:3.1控温范围:最高80℃3.2:色谱柱容量:2根300mm色谱柱4电化学检测器4.1、操作模式:直流,脉冲和扫描4.2、电位范围: 2500 mV4.3、直流模式:电流范围: 10pA-200μA数据采集速率:1-100Hz4.4.电流范围:10nA-200μA;* 脉冲波型:5段脉冲4.5、脉冲时间:tl:100-2000ms; t2,t3,t4,t5:0-2000 ms4.6、采样时间: ts:20ms to (t1- 60ms)4.7、扫描范围:10nA-200μA4.8、扫描速率:1-100mV/s4.9、恒温箱: 法拉第屏蔽式控温箱,室温+7℃~60℃,温度稳定性0.1℃; 可同时放置色谱柱和流通池,ong ine EC/LC/MS)or HPLC and MS*4.10、降噪滤波器:先进的数字滤波器(ADF),10-0.001Hz4.11、分析流通池结构:中央喷壁式结构, 玻碳工作电极, 银/氯化银参比电极*4.12、分析流通池灵敏度可连续调节,工作体积在0-300nl之间连续可调,一个电极就可满足不同灵敏度的应用需求5紫外检测器5.1光源:氘灯5.2范围:190~600nm5.3狭缝宽度:6.5nm5.4光谱:停流扫描5.5检测通道:双通道5.6波长校正:氘灯和内置氧化钬滤光片自动校正5.7波长精度:《0.1nm*5.8基线噪音:±0.25⨯10-5AU at 230nm5.9基线漂移:1⨯10-4mAU/h at 230nm5.10线性范围:>2.5AU5.11测量范围:>2AUFS5.12最快采样速率:120Hz6荧光检测器6.1性能:纯水拉曼〉5006.2光源:氙闪灯,20W,寿命不低于4000h6.3脉冲频率:296Hz6.4波长重现性:±0.2nm6.5波长准确度:±3nm*6.6激发单色器:全息凹面光栅,F/1.6,闪耀波长300nm,范围200-1200nm,零序,带宽20nm*6.7发射单色器:全息凹面光栅,F/1.6,闪耀波长400nm,范围280-1200nm,零序,带宽20nm*6.8采集速率:74Hz6.9 波长范围:200-1200nm.8化学工作站8.1全中文操作软件:操作环境:图形界面液相色谱软件,中文版工作站8.2软件能够仪器控制,数据采集,数据分析,可进行色谱操作定性,定量分析;8.3报告:内置多种报告格式,可自动生成系统适应性报告、峰纯度报告、光谱检索报告等;用户也可编辑个性化的报告模板9、配件样品瓶500个,工具包一个,4.6*150mmC18色谱柱一根。
高效液相色谱仪仪器配置及性能要求
高效液相色谱仪仪器配置及性能要求1.泵:串联式双柱塞往复泵,四元梯度;流速:0.001ml/min~10.0ml/min,配置柱塞清洗附件;流量精度: <0.070%RSD;最高耐压: 600bar。
2.脱气机:在线脱气机:四通道,最大流速:10ml/min3.柱温箱:控温范围:室温下10℃-80˚C,可降温;控温区域:2个;柱容量:30cm ×4。
4.自动进样器:进样体积:0.1 –100 μL;进样重复性:<0.25 % RSD;最大操作压力:600 bar;交叉污染:<0.004 % (40 ppm)。
5.二极管阵列检测器:光源:氘灯和钨灯;波长范围:190 – 950 nm;波长准确度:±1 nm,自动校正;短期噪音: <± 0.7·10-5 AU;漂移:<0.9·10-3 AU/h;线性范围: >2.0 AU (5 %)。
6.示差折光检测器:短期噪音: 1.25 x 10-9RIU;基线漂移:<200 x 10-9RIU/h;示差折光系数范围:1.00~1.75;流通池:耐压5bar;温控范围:室温以上5℃~55℃;自动回零。
7.仪器控制,数据处理系统及技术资料:仪器控制参数,数据采集及计算处理参数设定;具备多种报告格式;仪器性能可在线诊断;具备仪器维护的早期预警;具备电子日志功能回溯仪器使用操作情况;提供在线帮助及教程提示用户设定适合的参数;提供内置培训教程供用户自主学习系统操作。
8.服务要求:提供仪器现场安装调试,现场操作培训,后期提供免费培训中心提高培训。
验收合格后三年保修,在保修期内,所有服务及配件全部免费。
提供技术支持,保证仪器的正常操作,并协助用户进行方法开发。
不同液相检测器的区别
高效液相色谱仪的常用检测器有哪几种,有什么区别?高效液相色谱仪常用检测器种类及分析检测器的作用是将柱流出物中样品组成和含量的变化转化为可供检测的信号,常用检测器有紫外吸收、荧光、示差折光、化学发光等。
1.紫外可见吸收检测器(ultraviolet_visibledetector,UVD)紫外可见吸收检测器(UVD)是HPLC中应用最广泛的检测器之一,几乎所有的液相色谱仪都配有这种检测器。
其特点是灵敏度较高,线性范围宽,噪声低,适用于梯度洗脱,对强吸收物质检测限可达1ng,检测后不破坏样品,可用于制备,并能与任何检测器串联使用。
紫外可见检测器的工作原理与结构同一般分光光度计相似,实际上就是装有流动地的紫外可见光度计。
(1)紫外吸收检测器紫外吸收检测器常用氘灯作光源,氘灯则发射出紫外-可见区范围的连续波长,并安装一个光栅型单色器,其波长选择范围宽(190nm-800nm)。
它有两个流通池,一个作参比,一个作测量用,光源发出的紫外光照射到流通池上,若两流通池都通过纯的均匀溶剂,则它们在紫外波长下几乎无吸收,光电管上接受到的辐射强度相等,无信号输出。
当组分进入测量池时,吸收一定的紫外光,使两光电管接受到的辐射强度不等,这时有信号输出,输出信号大小与组分浓度有关。
局限:流动相的选择受到一定限制,即具有一定紫外吸收的溶剂不能做流动相,每种溶剂都有截止波长,当小于该截止波长的紫外光通过溶剂时,溶剂的透光率降至10%以下,因此,紫外吸收检测器的工作波长不能小于溶剂的截止波长。
(2)光电二极管阵列检测器(photodiodearraydetector,PDAD)也称快速扫描紫外可见分光检测器,是一种新型的光吸收式检测器。
它采用光电二极管阵列作为检测元件,构成多通道并行工作,同时检测由光栅分光,再入射到阵列式接收器上的全部波长的光信号,然后对二极管阵列快速扫描采集数据,得到吸收值(A)是保留时间(tR)和波长(l)函数的三维色谱光谱图。
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高效液相色谱仪常用的检测器及其性能
(1)紫外吸收(UV)检测器
UV检测器是目前HPLC应用最广泛的检测器。
它是依据光吸收原理,以适当的光路和电路,输出一个与试样组分浓度成正比的紫外一可见光吸收信号,其结构与一般光度计相似。
其流通池是组分流过的光学通道,池体积一般为8μl,内径小于lmm,长度10mm左右。
这种检测器灵敏度高,线性范围宽,对流速和温度变化不敏感,可用于梯度洗脱分离。
紫外吸收检测要求被检测样品组分有紫外一可见光吸收,而使用的流动相无吸收,或在被测组分吸收波长处无吸收。
一般选择在欲分析物有最大吸收的波长处进行检测,以获得最大灵敏度和抗干扰能力。
在没有最大吸收时,可采用末端吸收。
检测波长的选择除取决于待测物质的成分和分子结构外,还必须考虑流动相组成、共存组分干扰等因素。
特别是各种溶剂都有一定的透过波长下限值,超过这个波长,溶剂的吸收会变得很强,以至于不能很好地测出待测物质的吸收强度。
表1列出了HPLC中一些常用的溶剂透过波长的下限。
(2)光电二极管阵列(IJDA)检测器
PDA检测器又称为二极管阵列检测器(diode array UV detector,DAD),这种检测器以光电二极管阵列作为检测元件,可进行多通道并行检测,在一次色谱测量中,可同时获得时间、波长、吸光度三者的关系,通过计算机处理,在荧光屏上显示出三维图谱,也可作出任意波长的吸光度一时问曲线和任意时间的吸光度一波长曲线。
DAD的光路与紫外检测器不同,光源发出的光聚焦后先通过检测池,通过检测池的透射光由全息光栅色散成多色光,不同波长的色散光按波长顺序聚焦在阵列元件上,每个元件对应一定的纳米数。
当光照射到光电二极管时,光电二极管产生讯号。
由于色散过程及透射光的检测是全波长范围的,可在瞬间检测流经检测池的全吸收光谱,得到三维色谱一光谱图。
计算机化的数据处理,还可进行色谱峰光谱相似性比较、峰纯度检测及利用谱图库对掣定样品进行检索等,为定性、定量分析提供更丰富的信息。
①多通道多波长检测可以同时得到多个波长的色谱图,每个成分均可在最佳波长下检测定量。
②光谱相似性比较在HPLC中,两个物质出峰时间一致并不能完全说明为同一物质,通过色谱峰紫外光谱一致性比较,可提高测定的可靠性。
③峰纯度检测对色谱峰峰顶、上、下3个点的光谱进行比较,完全吻合意味这是1个单组分峰,不吻合则表示为未分离峰。
并可计算出纯度系数PI,PI值在0~1之问,越接近1,表示峰纯度越好,PI可由计算机自动计算。
④光谱检索与比较二极管阵列检测器得到的光谱图可分类存储到光谱库中,当测定类似成分时,可调出相关谱图,进行检索和比较,也可通过比较光谱相似系数比较相似性。
(3)示差折光检测器(RID)
示差折光检测器(refractive index detector,RID)是一种通用型检测器。
基于连续测定色谱柱流出物光折射率的变化而用于测定溶质浓度,溶液的光折射率是溶剂流动相和溶质各自的折射率乘以基物质的量浓度之和,溶有样品的流动相和流动相本身之间光折射率之差即表示样品在流动相中浓度。
原则上,凡是与流动相光折射率有差别的样品都可用它来测定,其检测限可达(10-6~10-7)g/ml。
应注意的是,选择溶剂时必须考虑溶剂的光折射率。
但这种检测器灵敏度低,对温度、流动相组成等的变化敏感,而且与梯度洗脱不相容,很大程度地限制了它的应用范围。
在药物分析中,这种检测器多用于多糖类、萜类化合物等分子量和含量的测定。
(4)蒸发光散射检测器(ELSD)
蒸发光散射检测器(evaporative light—scattering detector,E1SD)是一种新型的通用型质量检测器,它的通用检测原理克服了常见于HPLC传统检测方法的不足,已越来越多地应用于HPLC、超临界色谱和逆流色谱中。
①ELSD的检测原理 ELSD运行有三个过程:第一是雾化过程,用惰性气体或净化空气将色谱柱流出物雾化;第二是蒸发过程,在一个加热管(漂移管)中将流动相挥发;第三是检测过程,测定留下来的样品颗粒的光散射。
所有商品ELSD都由一种或两种模式完成这三个过程。
模式A的操作是全部柱流出物(气溶胶)都进入直的漂移管,让流动相在其中蒸发,模式B中是将气溶胶通过一个弯管,在此管中大的颗粒沉积下来流入废气管,其余的小颗粒进入螺旋状的漂移管,在上述两种模式中,样品颗粒均进入光管,使激光发生散射而得以检测。
②ELSD检测的优点及缺点
优点:α具有较好的通用性,任何挥发性低于流动相的样品均能被检测;b.在相同的色谱条件下,物理性质相似的物质可给出一致的响应;c.能与梯度洗脱方式相容;d.灵敏度高于示差折光检测器、紫外末端吸收检测法。
e.在ELSD上开发的实验方法移植到质谱上则无需修改。
ELSD检测的不足之处主要是:a.灵敏度不够理想;b.流动相的选择受限;
c.某些样品线性范围较窄等。
③影响ELSD检测性能的基本因素 a.操作模式的选择,选择合适的操作模式可提高方法的灵敏度,操作模式的选择取决于样品的挥发性、流动相的组成及其流速。
b.流动相组成及流速的选择,流动相的挥发性越好,方法的灵敏度越高。
流动相的流速越低,相应的信号越强。
c.漂移管温度对基线水平和噪音的影响并无明显的规律性。
最优温度应为在流动相基本挥发的基础上,产生可接受噪音的最低温度。
d.载气流速是影响检测性能的一个很重要的因素。
最优载气流速应是在可接受噪音的基础上(例如0.5mV),产生最大检测响应
值时的最低流速。
④ELSD检测时的数据处理模式 ELSD检测最常采用的数学模型是lgy=algx+b (y为响应值,x为进样量或样品浓度,a、b为回归常数),也有采用二次曲线模型的
(y=ax2+bx+c)。
由于响应值(y)与进样量(x)之间并非线性关系,故其数据处理不同于紫外检测方法。
ELSD测定已知物质的含量时,一般应用随行标准曲线法而非外标法,因为校正线性方程的截距并不为零。
新药基准品的建立,除了对照品为另外一种含量已知、结构相似的物质外,数据处理方式同上相似。
ELSD测定物质纯度时,由于响应值与进样量间并非线性关系,多通过绘制其中的一种或数种物质的随行标准曲线来加以校正。
多组分物质的分析,除了随行校正曲线的线性范围有所区别外,数据处理同上类似。
尽管存在一些不足之处,但是ELSD作为一种新型的通用型质量检测器,具有许多独特的优势,例如它的通用性,响应因子的一致性以及与梯度洗脱相容等,将在无特征紫外吸收物质的分析方面发挥越来越重要的作用。
(5)荧光检测器(FSD)
荧光检测器是基于化合物的光致发光现象,荧光检测器流通池为直角形的试样池,用石英材料制成。
这一检测器特别适用于痕量组分和能显示荧光的物质检测。
这种检测器的最大优点是极高的灵敏度和良好的选择性。
一般来说,它比紫外吸收检测器的灵敏度要高10一1000倍,可达μg/L级,而且它所需要的试样很小,因此在药物和生化分析中有着广泛的应用。
(6)其他检测器
在HPLC中除上述常用检测器外,还有一些检测器可供选择使用。
①电化学检测器(ECD) 这类检测器主要有:电导检测器、安培检测器、介电常数检测器和电位测定检测器等。
电导、电位等检测器已在离子色谱巾得到了广泛应用;介电常数检测器性能类似于示差折光检测器;安培检测器可检测氧化性物质,适用范围很宽。
②化学反应检测器(CRD) 氨基酸分析仪采用的是典型的将被测物质进行某种化学反应后,再用高灵敏度的某种检测器检测的化学反应检测器。
此外,还有光电导检测器、放射性检测器以及HPLC/IR、HPLC/MS和HPLC/NMR等联用检测方法。