邻二氮菲分光光度法测定微量铁教学提纲

邻二氮菲分光光度法测定微量铁

邻二氮菲分光光度法测定微量铁

一、实验原理

邻二氮菲（1，10—二氮杂菲），也称邻菲罗啉是测定微量铁的一个很好的显色剂。在pH2—9范围内（一般控制在5—6间）Fe2+与试剂生成稳定的橙红色配合物Fe（Phen）32+lgK=21.3，在510nm下，其摩尔吸光系数为

1.1104L/moL.cm, ）Fe3+与邻二氮菲作用生成兰色配合物，稳定性较差，因此在实际应用中常加入还原剂盐酸羟胺使Fe2+还原为Fe3+：

2 Fe3++2NH2OHHCl=2 Fe2++N2+4H++2H2O+2Cl-

二、试剂与仪器

仪器：

1．721型分光光度计

2．50mL容量瓶8个,100mL1个,500mL1个

3．移液管：2 mL1支，10 mL1支

4．刻度吸管：10mL、5mL、1mL各1支

试剂：

1．铁标准储备溶液100ug/mL：1000 mL（准确称取0.4317g铁盐NH4Fe

（SO4）212H2O置于烧杯中，加入3moL/LHCI20mL和30ml水，然后加水稀释至刻度，摇匀。)

2．铁标准使用液10ug/mL：用移液管移取上述铁标准储备液10.00 mL，置于100 mL容量瓶中，加入3moL/LHCI2.0mL和少量水，然后加水稀释至刻度，摇匀。

3．HCI3moL/L：100mL

4．盐酸羟胺100g/L（新鲜配制）：100mL

5．邻二氮菲溶液1.5g/L（新鲜配制）：200mL

6．HAc—NaAc缓冲溶液（pH=5）500 mL：称取136gNaAc，加水使之溶解，再加入120 mL冰醋酸，加水稀释至500 mL

7．水样配制（0.4ug/mL）：取2mL100ug/mL铁标准储备溶液加水稀释至500mL

三、实验步骤

1.配置10.00ug/mL的铁标准溶液。

1．绘制吸收曲线：用吸量管吸取铁标准溶液（10ug/mL）0.0、2.00ml、

4.00mL、6.00mL、8.00mL、10.00ml分别放入50 mL容量瓶中，加入1 mL10%盐酸羟胺溶液、2.0 mL1.5g/L邻二氮菲溶液和5 mL HAc—NaAc缓冲溶液，加水稀释至刻度，充分摇匀，放置5分钟，用3cm比色皿，以试剂溶液为参比液，于721型分光光度计中，在440—560nm波长范围内分别测定其吸光度A 值。当临近最大吸收波长附近时应间隔波长5—10nm测A值，其他各处可间隔波长20—40nm测定。然后以波长为横坐标，所测A值为纵坐标，绘制吸收曲线，并找出最大吸收峰的波长。

2．标准曲线的绘制：用吸量管分别移取铁标准溶液（10ug/mL）0.0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL依次放入7只50mL容量瓶中，分别加入10%盐酸羟胺溶液1 mL，稍摇动，再加入0.1%邻二氮菲溶液2.0 mL及5 mL HAc—NaAc缓冲溶液，加水稀释至刻度，充分摇匀，放置5分钟，用3cm比色皿，以不加铁标准溶液的试液为参比液，选择最大测定波长为测定波长，依次测A 值。以铁的质量浓度为横坐标，A值为纵坐标，绘制标准曲线。

3．水样分析：分别加入5.00mL（或10.00mL，铁含量以在标准曲线范围内为宜）未知试样溶液，按实验步骤2的方法显色后，在最大测定波长处，用3cm

比色皿，以不加铁标准溶液的试液为参比液，平行测A值。求其平均值，在标准曲线上查出铁的质量，计算水样中铁的质量浓度。

四、数据记录与结果计算

1、实验数据记录表

2、计算结果

3计算公式

样品中铁含量的计算

Cx=C所读取的数值×50.00/2.50（mol/L）

五、实验结论与总结

1、对测定产品项目质量作结论，根据实验结果作出判断（用数据说话）

2、实验总结：总结本次试验成功的方面，失误的操作，总结实验误差。

3、总结最佳实验条件。