体外受精和早期胚胎培养学习目标简述哺乳动物体外受精

体外受精和早期胚胎培养学习目标：

1、简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。

2、简述哺乳动物胚胎的早期培养方法。

3、认同体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。

学习重点

1、体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。

2、哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。

学习难点

1、卵母细胞的采集和培养。

2、精子的采集和获能。

学习过程

巩固练习：

1．中科院动物所和福州大熊猫研究中心合作，通过将大熊猫细胞核植入去核后的兔子卵细胞中，在世界上最早克隆出一大批大熊猫早期胚胎，表明我国大熊猫人工繁殖研究再次走在世界前列。下列描述与克隆无关的是( )

A.“复制”

B.无性繁殖

C.组织培养

D.人类基因组计划

2．超数排卵的做法正确的是( )

A．口服促性腺激素 B．注射促性腺激素

C．口服或注射促性腺激素 D．以上方法均不正确3．胚胎早期培养需要用液体培养基，此培养液的成分是( ) A．水、无机盐、维生素、激素、有机盐、氨基酸、核苷酸、血清等B．蔗糖、水、无机盐、维生素、激素

C．蔗糖、水、无机盐、氨基酸、核苷酸、血清

D．水、无机盐、维生素、有机盐、淀粉等

4．下列关于屠宰场和“胚胎工厂”合建的说法正确的是( )

①可保证屠宰场的肉是鲜肉，防止实验过长，肉变质②有利于生产大量的胚胎和胚胎工程所需要的原材料③不够卫生，不能合建④从屠宰场废弃的卵巢中可直接获取卵细胞

A．①②④ B．②④ C．①② D．③5．下列关于培育试管婴儿的叙述，不正确的是( )

A．培育试管婴儿要进行体外受精过程 B．试管婴儿的发育场所主要在试管内

C．试管婴儿的发育场所主要在母体内 D．试管婴儿具有双亲的遗传特性

6．卵母细胞的采集之前，用_____________处理雌性个体，使其排出更多的卵子，然后，从输卵管中冲取卵子，又叫______。收集精子的方法有______法、______法和______法等。

答案：促性腺激素冲卵假阴道手握电刺激

7．在体外受精前，要对精子进行获能处理。通常采用的方法有__________、___________两种，其中后者是将精子放在一定浓度的____________中，用化学药物诱导精子获能。

答案：培养化学诱导肝素或钙离子载体A23187溶液8．胚胎发育到适宜的阶段时，将其取出向_____________或_____________。

答案：受体移植冷冻保存

拓展题

9．以下是制定并研究设计的“试管牛”工厂化生产技术流程，其中正确的顺序是( )

①卵母细胞的采集和培养②精子的采集和获能

③画出“试管牛”工厂化生产技术流程④受精⑤胚胎的早期培养

A．①②③④⑤ B．①②④⑤③ C．①②④③⑤ D．①②⑤③④

10．哺乳动物胚胎的早期培养所用培养液成分一般都比较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需添加___________、____________、__________、__________等营养成分，以及___________等物质。

答案：维生素激素氨基酸核苷酸血清

知识拓展：

何谓试管婴儿技术

“试管婴儿”是指分别将卵子与精子取出后，在体外 (培养皿中) 使其受精，并发育成胚胎后，再植回母体子宫内。因此，胚胎在体外培养的时间只有几天，最重要的目的是确定精卵能结合成功，并筛选好的胚胎植回母体，以增加怀孕成功的机会。

“试管婴儿”技术主要包括：

1．超排卵 2．卵泡监测 3．取卵手术 4．精卵体外处理5．体外受精

6．胚胎的体外培养 7．胚胎移植

“试管婴儿”技术是一项高、精、尖技术，需要具备一组有经验及

专门技术的人员，一定的仪器，必需的药品。“试管婴儿”费用包括药物费用及手术费用，由于促排卵的药品费用较高，卵子受精、胚胎发育所需外界条件高，所以做一例“试管婴儿”的费用也较高。因为每一名患者所用的药物剂量不同，所以每个做IVF的患者所需的费用也有所不同，一般来讲，年龄轻、卵巢反应性好的患者需要的费用较低，具体费用应向生殖医学中心的医生咨询。

“试管婴儿”的成功率是大家非常关心的一个问题，一般情况下，一对正常育龄夫妻每月的自然妊娠机率不超过27%，通俗一点，就是说每对夫妇不是每个月想要小宝宝都能得到的。同样“试管婴儿”也不是每个治疗周期都会成功，我所目前“试管婴儿”的成功率为37%，这一比例在国内居领先水平。国外好的辅助生殖中心“试管婴儿”的成功率一般为30～40%。

目前“试管婴儿”技术可帮助几乎所有类型的不孕症患者，但由于其费用较高，尚难以在国内普及，但我们认为如果存在需要进行“试管婴儿”技术助孕的特征，应及早来辅助生殖中心诊治，以提高其成功率。

胚胎冷冻保存

胚胎冷冻保存：要建立胚胎库和长途运送胚胎，就需要解决胚胎冷冻保存问题。冷冻保存的方法大体可分为缓慢冷冻、快速冷冻、玻璃化冷冻三类。快速冷冻的主要操作过程如下：

1．冷冻液：一般用加有10％～20％的胎犊血清(FCS)的杜氏磷酸盐缓冲液(PBS)来配制，防冻剂可采用甘油或二甲亚枫(DMSO)等。也可

用1摩尔浓度的甘油作为冷冻液。

2．冷冻：将胚胎洗净后置于1摩尔浓度的甘油溶液中，在室温下平衡10分钟，用O．25毫升细管包装胚胎，用聚乙醇粉末封口。细管放人0℃冷冻仪，以1℃／分钟速度降温，－7℃诱发结晶(用在液氮中冷却的镊子夹细管含胚段上端1／3处)。随后将冷冻仪以0．5℃／分钟(O．3～O．8℃分钟)降至—30℃，投入液氮。

3．解冻：于35℃水浴中解冻后，剪断封口，将胚胎回收于干燥洁净表面皿内；分别间隔5分钟，依次通过1摩、O．75摩、0．5摩、O．25摩的甘油磷酸盐缓冲液，最后通过10％胎犊血清--磷酸盐缓冲液洗2～3次，然后进行移植或体外培养。