胰岛素设计性实验报告doc

胰岛素设计性实验报告

篇一：实验设计-修订版

胰岛素所致的低血糖休克及药物

和激素对血糖的影响

第一临床医学院XX级医学检验一班

设计人：郭英刘雨霏刘妮彭超

XX年3月12日

【题目】胰岛素所致低血糖休克及药物和激素对血糖的影响

【背景】

胰岛素是重要的内分泌激素之一，主要生理作用是全面地调节糖类代谢，同时也相应地调节脂肪和蛋白代谢。正常动物由于神经系统的调节和激素的相互作用，血液中胰岛素浓度是相对稳定的。若给正常动物注射胰岛素，可造成人胰岛素性低血糖症状。血糖浓度持续降低而出现交感神经兴奋性增高和脑功能障碍症群而导致的综合症就是低血糖休克。在实验条件下如果给动物注射过量的胰岛素，使动物体内胰岛素量骤然升高，可造成动物实验性低血糖，会使神经组织的正常代谢和功能发生障碍，以至产生痉挛昏迷，外部表现为惊厥，称之为胰岛素休克。小鼠的低血糖休克实验属于经典实验．传统的胰岛素休克实验目的是观察人工胰岛素性低血糖休克以及注射葡萄糖后的消失过程，以加深对胰岛素

生理作用的理解．但实验中一般不测定小鼠血糖的变化，只是观察胰岛素造成低血糖休克时的行为变化。

现阶段对胰岛素降低血糖的原理研究较多，其他药物和激素如甲状腺素、生长激素、糖皮质激素对血糖的研究也以较多，但都是单量试验，并未将多种激素和药物联合起来观察对血糖影响的研究。本次试验将通过制作胰岛素低血糖休克模型来同时观察多种药物和激素对血糖的影响。

体内降低血糖的激素只有胰岛素一种，但升高血糖的激素却不止胰高血糖素一种。糖皮质激素是一种胰岛素拮抗激素，可以增强肝脏中的糖原异生，促进肝糖原分解，抑制外周组织对葡萄糖的摄取和利用，从而导致血糖升高。而甲状腺素有促进生长发育的作用，也能够促进糖的吸收和糖异生，也可升高血糖。生长激素的主要生理功能是促进神经组织以外的所有其他组织生长；促进机体合成代谢和蛋白质合成；促进脂肪分解；对胰岛素有拮抗作用；抑制葡萄糖利用而使血糖升高等作用。但其剂量不同，对血糖的影响亦不同，本次试验就胰岛素等临床常见的与血糖有关的药物和激素对血糖的影响做相应的探讨。

【目的】

学习检测血糖的方法，观察胰岛素及药物和激素对血糖的影响，同时验证不同剂量的生长激素对血糖的影响不同，从而加深理解药物和激素影响血糖水平的机制。

【原理】

胰岛素是胰岛B细胞所分泌的一种激素，其主要生理功能是调节代谢，既能增强血糖的去路，又能减少血糖的来源。因此使血糖浓度降低，同时对脂肪和蛋白质代谢也有调节作用。小鼠静脉注射胰岛素，数分钟内血糖浓度即显著降低，若剂量较大，可导致低血糖休克，发生精神不安、搐搦。而静脉注射葡萄糖溶液或肾上腺素溶液后，小鼠很快能恢复正常。此外，胰高血糖素促进糖原分解和异生，具有升高血糖的作用；糖皮质激素抑制糖的利用，促进糖原异生，具有升高血糖的作用；甲状腺素促进糖的吸收和糖异生，也可升高血糖；生理剂量的生长激素能促进胰岛素的分泌，具有降低血糖作用，而过量的生长激素则抑制糖的利用，具有提高血糖作用。

【实验动物】

1. 选取20~25g之间的健康昆明系小鼠128只作为实验对象，雌雄对半；

2. 实验前小鼠禁食6小时，不禁水；

3. 将128只随机分成3组，A组32只，B组32只，C 组64只。

【药品与器材】

生理盐水，胰岛素针剂，20%葡萄糖溶液，1:10000 肾上腺素溶液，胰高血糖素针剂，糖皮质激素针剂，甲状腺素

针剂，生长激素针剂，血糖检测仪，小鼠手术器械，纱布，注射针头，注射器，鼠笼，小鼠固定器，苦味酸。

【实验步骤】

A. 胰岛素所致低血糖休克的实验

1) 随机取小鼠 32 只，称重，随机分为 4 组，每组 8 只，用苦味酸分别标记。三个组分

别为空白对照、胰岛素低（0.25U/kg）、中（1U/kg）、高（4U/kg）剂量受试组。

2) 具体给药方法如下：

一组：空白组：生理盐水0.1ml/10g皮下注射；

二组：低剂量组：胰岛素0.25U/kg，0.1ml/10g （0.025U/ml）皮下注射；

三组：中剂量组：胰岛素1U/kg，0.1ml/10g（0.1U/ml）皮下注射；

四组：高剂量组：胰岛素 4U/kg，0.1ml/10g（0.4U/ml）皮下注射。

3) 观察四组小鼠，比较得出会使小鼠出现低血糖休克现象（精神不安，四肢抽搐、继而瘫

软）胰岛素的浓度c(U/ml)及出现低血糖休克的平均时间t(min)。

B. 不同剂量的生长激素对小鼠血糖的影响

1) 剩下小鼠 32只，称重，随机分为 4 组，每组 8 只，

用苦味酸分别标记编号。四个组

分别为对照组、生长激素低（0.025U/ml）、中（0.05U/ml）、高（0.1U/ml）剂量受试组。给予生长激素前采血测量一次血糖。

2) 给药具体如下：

对照组：生理盐水0.1ml/10g腹腔注射；

低剂量：（0.025U/ml）的生长激素 0.1ml/10g 腹腔注射；

中剂量：（0.05U/ml）的生长激素 0.1ml/10g 腹腔注射；

高剂量：（0.1 U/ml）的生长激素0.1ml/10g腹腔注射；

3) 血糖测定：各组腹腔注射药物后分别在 5 min、10 min、20min、30min、45min从小鼠

尾部采血一滴，滴在血糖检测试纸上进行血糖浓度测定，记录使血糖升高的生长激素剂量b。

C. 不同药物或激素对胰岛素所致低血糖休克的解救效果比较

1) 随机取小鼠 64 只，称重，随机分为 8 组，每组 8 只，用苦味酸分别标记。六个组分

别为空白对照组，葡萄糖组，肾上腺素组，胰高血糖素组，糖皮质激素组和甲状腺素组。

2) 依据A组实验结论，先注射可至低血糖休克的胰岛素，具体给药方法如下：