植物组织培养技术
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在30-50m2。在实验室的一侧设置专用的洗涤水 槽，用来清洗玻璃器皿。中央实验台还应配置2 个水槽，用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大， 可以购置一台洗瓶机。准备1-2个洗液缸，专门 用于洗涤对洁净度要求很高的玻璃器皿。此外还 应配置落水架、干燥箱、柜子、超声波清洗器等。 地面应耐湿并排水良好。
1.2培养基配制间
（2）湿热灭菌
适用于各种器皿、培养基、器皿、蒸馏水、 棉塞、纸等。121℃ 维持20～30min 注意点：加足水、排尽气、气压降到0时， 才能开盖
1.4 无菌操作室
无菌操作室主要用于实验材料的接种操作，所以又叫 接种室。通常由里外两间组成，外间是缓冲间，用于 准备工作，还有防止污染的作用。缓冲间的门应该与 接种室的门错开，两个门也不要同时开启，以保证无 菌室不因开门和人的进出带进杂菌。缓冲间内应该设 有水槽、实验台、鞋帽架、和柜子、紫外灯。无菌操 作室的内壁应当用塑钢板或瓷砖装修，工作人员进入 操作间前要穿上消过毒的工作服和拖鞋。
室内应配有超净工作台，紫外灯、解剖镜、各种 接种器械等。
1.5 培养室
为了控制培养室的温度和光照时间及其强度，培养 室的房间不要窗户，但应当留一个通气窗，并安上排气 扇。室内温度由空调控制，光照由日光灯控制。天花板 和内墙最好用塑料钢板装修，地面用水磨石或瓷砖铺设， 一般要分两间，一为光照培养室，一为暗培养室。培养 室外应有一预备间或走廊。
植物细胞工程实验室及基本操作
§1 实验室设置及仪器设备 §2 实验基本操作 §3 培养基的成分及其配制 §4 培养条件的选择
§1 实验室设置及仪器设备
实验室是进行组培研究的主要场所，应能 满足清洗、培养基制备、储藏、无菌操 作、培养、鉴定等多方面的工作。
1．基本实验室
1.1 洗涤间 根据工作量的大小决定其大小，一般面积控制
1.3 消毒间
配备实验台、高压灭菌锅、排风灭火设备、细 菌过滤设备、干热消毒柜、电炉等。灭菌锅的选择 应根据不同的要求选择不同型号的灭菌锅。一般实 验室可选用小型的医用手提式高压灭菌锅，较大的 实验室可选用立式自动控制压力和温度的灭菌锅。 生产性的实验室可选用大型的卧式灭菌锅。
如果没有条件的话，可以将上述工作间合并 成一个准备间，要求是设备的安装和排列要合理、 房间要宽敞、明亮、透风，地面要便于清洁、防滑。
C、 塑料器皿的清洗
聚乙烯、聚丙烯等制成的塑料器皿，在生物化学 实验中已用的越来越多。第一次使用塑料器皿时， 可先用8mol/L尿素（用浓盐酸调pH = 1）清洗，接 着依次用无离子水、1 mol/L KOH和无离子水清洗， 然后用10—3 mol/L EDTA 除去金属离子的污染，最 后用无离子水彻底清洗，以后每次使用时，可只用 0.5％的去污剂清洗，然后用自来水和无离子水洗净 即可。
生化分析室 在以培养细胞产物为主要目的的实验室 中，应建立相应的分析化验实验室，以便于对培养 物的有效成分随时进行取样检查。 离心机、酶联免 疫检测仪、天平、PCR仪等。
2.2、温室
为试管苗提供满足生长的适宜环境条件。
§2 实验基本操作
一.洗涤技术
(1)洗涤液的 配制
(2)洗涤方法
A、新购买的玻璃仪器表面常附着有游离的碱性 物质，可先用0.5％的去污剂洗刷，再用自来水洗 净，然后浸泡在1％～2％盐酸溶液中过夜（不可 少于四小时），再用自来水冲洗，最后用无离子 水冲洗两次，在100℃～120℃烘箱内烘干备用。
B、使用过的玻璃仪器的清洗
先用自来水洗刷至无污物，再用合适的 毛刷沾去污剂（粉）洗刷，或浸泡在0.5％ 的清洗剂中超声清洗（比色皿决不可超声）， 然后用自来水彻底洗净去污剂，用无离子水 洗两次，烘干备用（计量仪器不可烘干）。 清洗后器皿内外不可挂有水珠，否则重洗， 若重洗后仍挂有水珠，则需用洗液浸泡数小 时后（或用去污粉擦洗），重新清洗。
各种灭wk.baidu.com方法及其使用范围
干热灭菌 湿热灭菌 熏蒸灭菌 过滤灭菌 药剂灭菌 烧灼灭菌 辐射灭菌
玻璃器皿、器械 培养基、蒸馏水、器械、棉塞等 接种室、培养室 液体培养基、蒸馏水 培养材料 器械、瓶口、棉塞、包头纸 接种室。培养间
（1）干热灭菌
适用于玻璃器皿和金属器械的灭菌。操作方 法：150℃ 、40min或120℃ 、120min， 如果发现芽孢杆菌，160℃ 、90～120min
D、金属用品洗涤
金属用品一般不宜用各种洗涤液洗涤（新的 可以用热洗衣粉水洗净），需要清洗时，一 般用酒精擦洗，然后火焰干燥。 E、除菌过滤器用清水冲洗后，用洗液冲洗， 再用清水冲洗，最后用蒸馏水冲洗，晾干备 用。
二.灭菌
（一）、灭菌工作是极其重要的。
首先应建立有菌和无菌的概念有菌的范畴： 有菌：凡是暴露在空气中的物体，至少其表面都是有菌的。 如植物的表面、超净工作台的台面，未处理的工具和手等。 无菌：高压高温处理（工具、器皿、培养基等）
物理或化学处理； 火烤后的物体； 健康的动植物不与内外部表面接触的组织 内部可能是无菌的（有时也有内生菌，但 不会影响培养，也不会污染）
（二）、灭菌的方法
1、物理方法：干热、湿热、过滤（0.25微 米）紫外灯、超声波等。 2、化学方法：使用灭菌剂或抗菌素，如酒 精、次氯酸钠、升汞、漂白粉、高锰酸钾、 双氧水、福尔马林等
面积60平方米左右，配备的主要仪器设备有 ：冰 箱、天平、微波炉、pH计、培养基分装器、药品 柜、器械柜、抽气泵、电炉、各种规格的培养瓶、 培养皿、移液管、烧杯、量筒、容量瓶、储藏瓶 等。冰箱以体积180-200L为宜，用于储存培养基 母液、激素维生素等贵重药品、彩色胶卷、及保 存植物材料。天平应有不同感量。
培养室应配有培养架、转床、摇床、光照培养箱、 生化培养箱、自动控时器等。日光灯一般用40W，固定 在培养架的侧面或搁板的下面，每层有两支日光灯，距 离在20cm，光照强度为2000-3000lx。
2．辅助实验室
2.1鉴定室
细胞学鉴定室 其功能是对培养材料进行细胞学鉴定 和研究。要求清洁、明亮、干燥，使各种光学仪器 不受潮湿和灰尘污染。应配置各种显微镜、照相系 统等。
1.2培养基配制间
（2）湿热灭菌
适用于各种器皿、培养基、器皿、蒸馏水、 棉塞、纸等。121℃ 维持20～30min 注意点：加足水、排尽气、气压降到0时， 才能开盖
1.4 无菌操作室
无菌操作室主要用于实验材料的接种操作，所以又叫 接种室。通常由里外两间组成，外间是缓冲间，用于 准备工作，还有防止污染的作用。缓冲间的门应该与 接种室的门错开，两个门也不要同时开启，以保证无 菌室不因开门和人的进出带进杂菌。缓冲间内应该设 有水槽、实验台、鞋帽架、和柜子、紫外灯。无菌操 作室的内壁应当用塑钢板或瓷砖装修，工作人员进入 操作间前要穿上消过毒的工作服和拖鞋。
室内应配有超净工作台，紫外灯、解剖镜、各种 接种器械等。
1.5 培养室
为了控制培养室的温度和光照时间及其强度，培养 室的房间不要窗户，但应当留一个通气窗，并安上排气 扇。室内温度由空调控制，光照由日光灯控制。天花板 和内墙最好用塑料钢板装修，地面用水磨石或瓷砖铺设， 一般要分两间，一为光照培养室，一为暗培养室。培养 室外应有一预备间或走廊。
植物细胞工程实验室及基本操作
§1 实验室设置及仪器设备 §2 实验基本操作 §3 培养基的成分及其配制 §4 培养条件的选择
§1 实验室设置及仪器设备
实验室是进行组培研究的主要场所，应能 满足清洗、培养基制备、储藏、无菌操 作、培养、鉴定等多方面的工作。
1．基本实验室
1.1 洗涤间 根据工作量的大小决定其大小，一般面积控制
1.3 消毒间
配备实验台、高压灭菌锅、排风灭火设备、细 菌过滤设备、干热消毒柜、电炉等。灭菌锅的选择 应根据不同的要求选择不同型号的灭菌锅。一般实 验室可选用小型的医用手提式高压灭菌锅，较大的 实验室可选用立式自动控制压力和温度的灭菌锅。 生产性的实验室可选用大型的卧式灭菌锅。
如果没有条件的话，可以将上述工作间合并 成一个准备间，要求是设备的安装和排列要合理、 房间要宽敞、明亮、透风，地面要便于清洁、防滑。
C、 塑料器皿的清洗
聚乙烯、聚丙烯等制成的塑料器皿，在生物化学 实验中已用的越来越多。第一次使用塑料器皿时， 可先用8mol/L尿素（用浓盐酸调pH = 1）清洗，接 着依次用无离子水、1 mol/L KOH和无离子水清洗， 然后用10—3 mol/L EDTA 除去金属离子的污染，最 后用无离子水彻底清洗，以后每次使用时，可只用 0.5％的去污剂清洗，然后用自来水和无离子水洗净 即可。
生化分析室 在以培养细胞产物为主要目的的实验室 中，应建立相应的分析化验实验室，以便于对培养 物的有效成分随时进行取样检查。 离心机、酶联免 疫检测仪、天平、PCR仪等。
2.2、温室
为试管苗提供满足生长的适宜环境条件。
§2 实验基本操作
一.洗涤技术
(1)洗涤液的 配制
(2)洗涤方法
A、新购买的玻璃仪器表面常附着有游离的碱性 物质，可先用0.5％的去污剂洗刷，再用自来水洗 净，然后浸泡在1％～2％盐酸溶液中过夜（不可 少于四小时），再用自来水冲洗，最后用无离子 水冲洗两次，在100℃～120℃烘箱内烘干备用。
B、使用过的玻璃仪器的清洗
先用自来水洗刷至无污物，再用合适的 毛刷沾去污剂（粉）洗刷，或浸泡在0.5％ 的清洗剂中超声清洗（比色皿决不可超声）， 然后用自来水彻底洗净去污剂，用无离子水 洗两次，烘干备用（计量仪器不可烘干）。 清洗后器皿内外不可挂有水珠，否则重洗， 若重洗后仍挂有水珠，则需用洗液浸泡数小 时后（或用去污粉擦洗），重新清洗。
各种灭wk.baidu.com方法及其使用范围
干热灭菌 湿热灭菌 熏蒸灭菌 过滤灭菌 药剂灭菌 烧灼灭菌 辐射灭菌
玻璃器皿、器械 培养基、蒸馏水、器械、棉塞等 接种室、培养室 液体培养基、蒸馏水 培养材料 器械、瓶口、棉塞、包头纸 接种室。培养间
（1）干热灭菌
适用于玻璃器皿和金属器械的灭菌。操作方 法：150℃ 、40min或120℃ 、120min， 如果发现芽孢杆菌，160℃ 、90～120min
D、金属用品洗涤
金属用品一般不宜用各种洗涤液洗涤（新的 可以用热洗衣粉水洗净），需要清洗时，一 般用酒精擦洗，然后火焰干燥。 E、除菌过滤器用清水冲洗后，用洗液冲洗， 再用清水冲洗，最后用蒸馏水冲洗，晾干备 用。
二.灭菌
（一）、灭菌工作是极其重要的。
首先应建立有菌和无菌的概念有菌的范畴： 有菌：凡是暴露在空气中的物体，至少其表面都是有菌的。 如植物的表面、超净工作台的台面，未处理的工具和手等。 无菌：高压高温处理（工具、器皿、培养基等）
物理或化学处理； 火烤后的物体； 健康的动植物不与内外部表面接触的组织 内部可能是无菌的（有时也有内生菌，但 不会影响培养，也不会污染）
（二）、灭菌的方法
1、物理方法：干热、湿热、过滤（0.25微 米）紫外灯、超声波等。 2、化学方法：使用灭菌剂或抗菌素，如酒 精、次氯酸钠、升汞、漂白粉、高锰酸钾、 双氧水、福尔马林等
面积60平方米左右，配备的主要仪器设备有 ：冰 箱、天平、微波炉、pH计、培养基分装器、药品 柜、器械柜、抽气泵、电炉、各种规格的培养瓶、 培养皿、移液管、烧杯、量筒、容量瓶、储藏瓶 等。冰箱以体积180-200L为宜，用于储存培养基 母液、激素维生素等贵重药品、彩色胶卷、及保 存植物材料。天平应有不同感量。
培养室应配有培养架、转床、摇床、光照培养箱、 生化培养箱、自动控时器等。日光灯一般用40W，固定 在培养架的侧面或搁板的下面，每层有两支日光灯，距 离在20cm，光照强度为2000-3000lx。
2．辅助实验室
2.1鉴定室
细胞学鉴定室 其功能是对培养材料进行细胞学鉴定 和研究。要求清洁、明亮、干燥，使各种光学仪器 不受潮湿和灰尘污染。应配置各种显微镜、照相系 统等。