糖类脂质蛋白质的鉴定试验
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
? 实验材料最好选择 富含脂肪的种子，如花 生种子 (取其子叶 )。供实验用的花生种子， 必须提前浸泡 3～4h。浸泡时间短了，不 容易切成片；浸泡时间过长，则组织太软， 切下的薄片不易成形。
? 2．方法步骤： ? (1)制备生物组织实验材料(组织切片)
? (2)实验操作方法和观察
? ①观察脂肪小颗粒：用显微镜观察薄片最 薄处(最好一层细胞)
成分
鉴定物质 添加顺序
反应条件 反应现象
斐林试剂
双缩脲试剂
甲液
乙液
A液
B液
0.1g/mL
0.05g/mL
NaOH溶液 CuSO4溶液
还原糠
0.1g/mL 0.01g/mL NaOH溶液 CuSO4溶液
蛋白质
甲乙两液等量混匀后立即 先加入A液1mL，摇匀，
使用
再加入B液4滴，摇匀
水浴50～65℃加热
A．用于鉴定还原糖的斐林试剂甲液和乙液， 可直接用于蛋白质的鉴定
B．若要鉴定花生种子细胞中是否含有脂肪， 一定需要用显微镜观察
? (2)试剂：斐林试剂，苏丹Ⅲ染液，双缩脲试剂。
验证性实验和探究性实验 (1)验证性实验：是指实验者针对已知的实验结果而进 行的以验证实验结果、巩固和加强有关知识内容、培 养实验操作能力为目的的重复性实验。 (2)探究性实验：是指实验者在不知晓实验结果的前提 下，通过自己实验、探索、分析、研究得出结论，从 而形成科学概念的一种认识活动。
? 1．选材：
? 选材：实验材料最好选用 富含蛋白质的生 物组织 (或器官 )，植物材料常用的是 大豆， 动物材料常用的是 鸡蛋清或新鲜肝脏研磨 液(因为里面富含酶，而酶的成份主要是蛋 白质)。如用大豆，必须提前浸泡 1～2d， 这样容易研磨成浆。有条件的话，可以直 接采用现成的大豆磨成的豆浆，如果用稀 释的鸡蛋清或研磨的新鲜肝脏液做实验材 料，实验效果会更好。
? (3)结论：该颗粒可被苏丹Ⅲ染液染成橘黄 色，它是生物组织中的脂肪物质。从而鉴 定花生种子(子叶)组织中有脂肪存在。
? 注意：花生子叶切片切得要薄(最薄处最好 是一层细胞)，因为切片较厚就观察不清脂 肪颗粒。
特别提醒 实验用的花生种子需提前浸泡 3～4 h，浸泡时间 太短，不易切片；浸泡时间太长，则组织太软， 切下的薄片不易成形。 (3)蛋白质的检测和观察 选材与制备：鲜肝提取液或黄豆浆滤液
? 2．方法步骤： ? (1)制备生物组织样液
? (2)实验操作方法和观察
? ①向试管内注入组织样液 2 mL(或蛋白稀 释液2 mL)
? (3)结论：组织样液加入双缩脲试剂 A后，颜色变 化为无色，再加双缩脲试剂 B后，颜色的变化是 紫色。这说明组织样液中含有蛋白质。从而鉴 定黄豆组织中或者蛋白稀释液中或新鲜的肝脏 中有蛋白质。
不需加热，摇匀即可
样液有砖红色沉淀产生 样液变紫色
二、实验材料选用
1、糖类的鉴定 ：含还原糖较高，颜色较浅或近于白色 （如：苹果、梨匀浆）
2、脂肪的鉴定 ：富含脂肪（植物油）的种子 （如花生、核桃、蓖麻等的种子） 3、蛋白质的鉴定 （1）植物组织样液：黄豆种子或用豆浆 （2）动物组织样液：鸡蛋清
例2 下列关于检测“生物组织中糖类、脂 肪、蛋白质”实验操作步骤的叙述中，正确 的是( )
［实验］生物组织中糖类、脂肪、蛋白质的鉴定
一、实验原理： 1、还原糖＋斐林试剂 ? 砖红色沉淀
（还原糖：葡萄糖、果糖、麦芽糖） 2、脂肪＋苏丹 III ? 橘黄色
脂肪＋苏丹 IV ? 红色 3、蛋白质＋双缩脲试剂 ? 紫色反应 4、淀粉+碘液 ? 蓝色
［实验］生物组织中糖类、脂肪、蛋白质的鉴定
(2)脂肪＋苏丹Ⅲ染液 ―→橘黄色 脂肪＋苏丹Ⅳ染液 ―→红色 (3)蛋白质＋双缩脲试剂 ―→紫色 (4)淀粉 +碘液 ―→蓝色
? (二)目的要求
? 初步学会用化学试剂检测生物组织中的糖类、 脂肪和蛋白质。
? (三)实验仪器和试剂
? (1)仪器：剪刀，解剖刀，双面刀片，试管，试 管架，试管夹，大、小烧杯，小量筒，滴管， 玻璃漏斗，酒精灯，三角架，石棉网，火柴， 研钵，石英砂，纱布，载玻片，盖玻片，毛笔， 吸水纸，显微镜。
实验：检测生物组织中的糖类、脂 肪和蛋白质
1．实验原理 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有 机化合物产生特定的颜色反应。
简记 “三特”： “特定的物质与特定的试剂反应产生特定的颜色”。
物质 还原糖
脂肪
蛋白质 淀粉
试剂
颜色
斐林试剂 砖红色沉淀
苏丹Ⅲ液 橘黄色
苏丹Ⅳ液
红色
双缩脲试剂 紫色
碘液
蓝色
(1)糖类
(3)验证性实验的实验结果通常是已知的，探究性实验
的实验结果是未知的，这是两类实验的最大区别。
先根据选材预测实验结果，然后再实验验证，因此 本实验属验证性实验。
(四)方法步骤 ? A．还原性糖的鉴定 ? 1．选材：本实验最理想的实验材料是 含
糖量较高 的生物组织 (或器官 )，而且 组织 的颜色较浅，或近于白色 的，如苹果和梨 的果实。经试验比较，颜色反应的明显程 度，依次为苹果、梨、白萝卜。 ? 2．方法步骤： ? (1)制备生物组织样液
试剂 ： 1、斐林试剂 （现配现用）
A液 质量浓度为 0.1g/mL 的NaOH溶液 B液 质量浓度为 0.05g/ mL的CuSO4溶液 2、双缩脲试剂 （先加A液，再加B液） A液 质量浓度0.1g/mL 的NaOH溶液 B液 质量浓度0.01g/mL的CuSO4溶液 3、苏丹III （或苏丹IV）染液 4、体积分数为 50%的酒精溶液 5 、碘液
? 注意： 做鉴定蛋白质的实验时，在鉴定之前， 要留出一些黄豆组织样液，以便用来与化学试 剂发生反应后的颜色作对比，增强说服力。
? 若不用豆浆，用蛋白稀释液或新鲜肝脏提取液 做实验材料，应稀释到一定程度，如果稀释不 够，与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管的 内壁上，使反应不容易彻底，并且试管不易刷 干净。
Fra Baidu bibliotek
? (2)实验操作的方法和观察 ? ①向试管内注入样液2 mL
结论：可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生 成砖红色沉淀，说明组织样液中有可溶性还原糖。
(2)脂肪的检测和观察 方法一：花生种子匀浆＋ 3滴苏丹Ⅲ染液 →橘黄色 方法二： 取材：花生种子 (浸泡)，将子叶削成薄片
? 1．选材：
? 2．方法步骤： ? (1)制备生物组织实验材料(组织切片)
? (2)实验操作方法和观察
? ①观察脂肪小颗粒：用显微镜观察薄片最 薄处(最好一层细胞)
成分
鉴定物质 添加顺序
反应条件 反应现象
斐林试剂
双缩脲试剂
甲液
乙液
A液
B液
0.1g/mL
0.05g/mL
NaOH溶液 CuSO4溶液
还原糠
0.1g/mL 0.01g/mL NaOH溶液 CuSO4溶液
蛋白质
甲乙两液等量混匀后立即 先加入A液1mL，摇匀，
使用
再加入B液4滴，摇匀
水浴50～65℃加热
A．用于鉴定还原糖的斐林试剂甲液和乙液， 可直接用于蛋白质的鉴定
B．若要鉴定花生种子细胞中是否含有脂肪， 一定需要用显微镜观察
? (2)试剂：斐林试剂，苏丹Ⅲ染液，双缩脲试剂。
验证性实验和探究性实验 (1)验证性实验：是指实验者针对已知的实验结果而进 行的以验证实验结果、巩固和加强有关知识内容、培 养实验操作能力为目的的重复性实验。 (2)探究性实验：是指实验者在不知晓实验结果的前提 下，通过自己实验、探索、分析、研究得出结论，从 而形成科学概念的一种认识活动。
? 1．选材：
? 选材：实验材料最好选用 富含蛋白质的生 物组织 (或器官 )，植物材料常用的是 大豆， 动物材料常用的是 鸡蛋清或新鲜肝脏研磨 液(因为里面富含酶，而酶的成份主要是蛋 白质)。如用大豆，必须提前浸泡 1～2d， 这样容易研磨成浆。有条件的话，可以直 接采用现成的大豆磨成的豆浆，如果用稀 释的鸡蛋清或研磨的新鲜肝脏液做实验材 料，实验效果会更好。
? (3)结论：该颗粒可被苏丹Ⅲ染液染成橘黄 色，它是生物组织中的脂肪物质。从而鉴 定花生种子(子叶)组织中有脂肪存在。
? 注意：花生子叶切片切得要薄(最薄处最好 是一层细胞)，因为切片较厚就观察不清脂 肪颗粒。
特别提醒 实验用的花生种子需提前浸泡 3～4 h，浸泡时间 太短，不易切片；浸泡时间太长，则组织太软， 切下的薄片不易成形。 (3)蛋白质的检测和观察 选材与制备：鲜肝提取液或黄豆浆滤液
? 2．方法步骤： ? (1)制备生物组织样液
? (2)实验操作方法和观察
? ①向试管内注入组织样液 2 mL(或蛋白稀 释液2 mL)
? (3)结论：组织样液加入双缩脲试剂 A后，颜色变 化为无色，再加双缩脲试剂 B后，颜色的变化是 紫色。这说明组织样液中含有蛋白质。从而鉴 定黄豆组织中或者蛋白稀释液中或新鲜的肝脏 中有蛋白质。
不需加热，摇匀即可
样液有砖红色沉淀产生 样液变紫色
二、实验材料选用
1、糖类的鉴定 ：含还原糖较高，颜色较浅或近于白色 （如：苹果、梨匀浆）
2、脂肪的鉴定 ：富含脂肪（植物油）的种子 （如花生、核桃、蓖麻等的种子） 3、蛋白质的鉴定 （1）植物组织样液：黄豆种子或用豆浆 （2）动物组织样液：鸡蛋清
例2 下列关于检测“生物组织中糖类、脂 肪、蛋白质”实验操作步骤的叙述中，正确 的是( )
［实验］生物组织中糖类、脂肪、蛋白质的鉴定
一、实验原理： 1、还原糖＋斐林试剂 ? 砖红色沉淀
（还原糖：葡萄糖、果糖、麦芽糖） 2、脂肪＋苏丹 III ? 橘黄色
脂肪＋苏丹 IV ? 红色 3、蛋白质＋双缩脲试剂 ? 紫色反应 4、淀粉+碘液 ? 蓝色
［实验］生物组织中糖类、脂肪、蛋白质的鉴定
(2)脂肪＋苏丹Ⅲ染液 ―→橘黄色 脂肪＋苏丹Ⅳ染液 ―→红色 (3)蛋白质＋双缩脲试剂 ―→紫色 (4)淀粉 +碘液 ―→蓝色
? (二)目的要求
? 初步学会用化学试剂检测生物组织中的糖类、 脂肪和蛋白质。
? (三)实验仪器和试剂
? (1)仪器：剪刀，解剖刀，双面刀片，试管，试 管架，试管夹，大、小烧杯，小量筒，滴管， 玻璃漏斗，酒精灯，三角架，石棉网，火柴， 研钵，石英砂，纱布，载玻片，盖玻片，毛笔， 吸水纸，显微镜。
实验：检测生物组织中的糖类、脂 肪和蛋白质
1．实验原理 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有 机化合物产生特定的颜色反应。
简记 “三特”： “特定的物质与特定的试剂反应产生特定的颜色”。
物质 还原糖
脂肪
蛋白质 淀粉
试剂
颜色
斐林试剂 砖红色沉淀
苏丹Ⅲ液 橘黄色
苏丹Ⅳ液
红色
双缩脲试剂 紫色
碘液
蓝色
(1)糖类
(3)验证性实验的实验结果通常是已知的，探究性实验
的实验结果是未知的，这是两类实验的最大区别。
先根据选材预测实验结果，然后再实验验证，因此 本实验属验证性实验。
(四)方法步骤 ? A．还原性糖的鉴定 ? 1．选材：本实验最理想的实验材料是 含
糖量较高 的生物组织 (或器官 )，而且 组织 的颜色较浅，或近于白色 的，如苹果和梨 的果实。经试验比较，颜色反应的明显程 度，依次为苹果、梨、白萝卜。 ? 2．方法步骤： ? (1)制备生物组织样液
试剂 ： 1、斐林试剂 （现配现用）
A液 质量浓度为 0.1g/mL 的NaOH溶液 B液 质量浓度为 0.05g/ mL的CuSO4溶液 2、双缩脲试剂 （先加A液，再加B液） A液 质量浓度0.1g/mL 的NaOH溶液 B液 质量浓度0.01g/mL的CuSO4溶液 3、苏丹III （或苏丹IV）染液 4、体积分数为 50%的酒精溶液 5 、碘液
? 注意： 做鉴定蛋白质的实验时，在鉴定之前， 要留出一些黄豆组织样液，以便用来与化学试 剂发生反应后的颜色作对比，增强说服力。
? 若不用豆浆，用蛋白稀释液或新鲜肝脏提取液 做实验材料，应稀释到一定程度，如果稀释不 够，与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管的 内壁上，使反应不容易彻底，并且试管不易刷 干净。
Fra Baidu bibliotek
? (2)实验操作的方法和观察 ? ①向试管内注入样液2 mL
结论：可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生 成砖红色沉淀，说明组织样液中有可溶性还原糖。
(2)脂肪的检测和观察 方法一：花生种子匀浆＋ 3滴苏丹Ⅲ染液 →橘黄色 方法二： 取材：花生种子 (浸泡)，将子叶削成薄片
? 1．选材：