糖类脂质蛋白质的鉴定试验
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
考点三 （实验）检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（5年6考）检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1.检测原理(1)糖类的检测(2)脂肪的检测：脂肪＋⎩⎨⎧苏丹Ⅲ染液―→橘黄色苏丹Ⅳ染液―→红色 (3)蛋白质的检测：蛋白质＋双缩脲试剂―→紫色2.实验步骤3.实验成功关键点(1)三个实验中都不宜选取有颜色的材料，否则会干扰实验结果的颜色变化。
(2)由于苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液易溶于酒精，故可用体积分数为50%的酒精洗去浮色。
(3)蛋白质鉴定中，若用大豆作材料，必须提前浸泡；若用蛋清作材料，必须稀释，防止其黏在试管上不易刷洗。
(4)物质鉴定实验一般可预留部分样液作对照实验，若需进一步设立对照实验，对照组应加入成分已知的物质，如验证唾液淀粉酶是蛋白质，对照组可加入稀释的鸡蛋清溶液。
1.下图是检测还原糖的实验(1)如下图示的处理，2 min后试管内将呈现何种颜色？试加以分析说明。
(2)向某试管内无色液体中加入斐林试剂，经加热若出现砖红色沉淀，则表明试管内含有葡萄糖，对吗？提示(1)应为蓝色(斐林试剂的颜色，因未经水浴加热，只有将试管置于50～65 ℃温水中，经水浴加热后，方可呈现“砖红色沉淀”)。
(2)不对。
只能证明含有“还原糖”，不能具体证明是哪种还原糖。
2.下图为某种物质鉴定方案，请推测：(1)图示的实验方案用于鉴定何类物质，其中“某试剂”是什么？A液、B液分别指什么？(2)若溶液中有被检测物质则右侧试管“摇匀后”变成何种颜色？提示(1)蛋白质及多肽化合物；双缩脲试剂；A为0.1 g/mL NaOH溶液；B为0.01 g/mL CuSO4溶液。
(2)紫色。
糖类、脂肪与蛋白质的检测1.(2016·海南卷，15)下列实验中，加入试剂后不能产生特定颜色的是()A.取成熟香蕉匀浆，用斐林试剂检测还原糖B.黑暗中生长24 h的天竺葵叶片，用碘液检测淀粉C.玉米根尖经甲基绿染色后，在显微镜下观察细胞核D.花生子叶经苏丹Ⅲ染色后，在显微镜下观察脂肪颗粒解析成熟香蕉中含有较多葡萄糖，用斐林试剂检测会出现砖红色沉淀；黑暗中生长24 h的天竺葵叶片，淀粉被消耗，加入碘液不会产生蓝色；玉米根尖经甲基绿染色后，在显微镜下观察细胞核呈绿色；花生子叶经苏丹Ⅲ染色后，在显微镜下观察脂肪颗粒呈橘黄色。
检测脂肪、蛋白质、糖类
砖红色沉淀
Байду номын сангаас
3、蛋白质＋双缩脲试剂 、蛋白质＋
紫色反应
二、实验材料： 实验材料： 鉴定的有机物 适宜材料 选用的材料 苹果汁 花生种子 豆 浆
含糖量较高、 含糖量较高、颜色为 可溶性还原糖 白色或近于白色的植 物组织
脂肪 蛋白质
富含脂肪的种子 富含蛋白质的 生物组织
∗ 深入原理 1.可溶性还原糖的鉴定原理 可溶性还原糖的鉴定原理： 1.可溶性还原糖的鉴定原理： 生物组织中常见的可溶性糖有葡萄糖 、 果糖、麦芽糖、 蔗糖。 生物组织中常见的可溶性糖有 葡萄糖、 果糖 、 麦芽糖 、 蔗糖 。 葡萄糖 前三种糖分子中都含有游离的具有还原性的半缩醛羟基 还原性的半缩醛羟基， 前三种糖分子中都含有游离的具有 还原性的半缩醛羟基 ， 因此 还原性糖，而蔗糖的分子中没有，因此叫非还原性糖。 叫还原性糖，而蔗糖的分子中没有，因此叫非还原性糖。 斐林试剂与可溶性还原糖在加热的条件下 生成砖红色的 与可溶性还原糖在加热的条件下， 斐林试剂与可溶性还原糖在加热的条件下，生成砖红色的 沉淀。如用沸水浴加热， 沸水浴加热 沉淀颗粒较大，呈现砖红色 砖红色； Cu2O沉淀。如用沸水浴加热，Cu2O沉淀颗粒较大，呈现砖红色； 如用酒精灯直接加热， 沉淀颗粒较小，呈现黄色。 如用酒精灯直接加热，Cu2O沉淀颗粒较小，呈现黄色。
∗ 深入原理
2.蛋白质的鉴定原理： 2.蛋白质的鉴定原理： 蛋白质的鉴定原理
碱性溶液（NaOH） 双缩脲（ 在 碱性溶液 （ NaOH ） 中 ， 双缩脲 （ H2NCO NH－ 能与Cu 作用， 可形成紫色 － NH － CONH2 ） 能与 Cu2 ＋ 作用 ， 可形成 紫色 或紫红色的络合物 这一反应称双缩脲反应 的络合物， 双缩脲反应。 或紫红色 的络合物，这一反应称双缩脲反应 。 凡在本身结构中具有双缩脲基的化合物， 凡在本身结构中具有双缩脲基的化合物，都能 进行双缩脲反应，这是特定的颜色反应。 进行双缩脲反应 ，这是特定的颜色反应。蛋白 质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键( 中含有很多与双缩脲结构相似的肽键 质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键(两 个相邻的肽键与双缩脲结构相似) 个相邻的肽键与双缩脲结构相似)，因此又称为 肽键反应。 肽键反应。
生物中糖类脂肪蛋白质的检测试验
2、实验目的： 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类 3、实验选材： 做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色 的植物组织，如苹果、梨。（因为组织的颜色较浅，易 于观察。）
4、实验试剂
斐林试剂（包括甲液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和 乙液：质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液）、
(2)下列生物材料中，可用于还原糖鉴定的是( B) A.柑橘 B.苹果 C.新鲜肝脏 D.甘蔗
生物组织中 还原糖的鉴定
一、验证鉴定类实验 1．实验目的 针对已知的生物学事实进行验证，巩固和加强 有关知识内容，培养实验操作能力。
2．常用方法和技术 (1)研磨、过滤：如生物组织样液制备。 (2)颜色反应：如生物组织中有机物的鉴定。 (3)纸层析法：如叶绿体中色素的分离。 (4)同位素示踪法：如噬菌体侵染细菌实验。
体积分数为50%的酒精溶液，碘液、蒸馏水。
5、实验流程
甲液和乙液等量混合均 匀后使用。使用时加入 1mL。
6、方法步骤：
操作方法 注意问题 解释 因苹果多酚氧化酶含量高，组 织液很易被氧化成褐色，将产 生的颜色掩盖。 1. 制备组织样液。 苹果或梨组织液必须临时 （去皮、切块、研磨、过滤）制备
2. 取1支试管，向试管内注 入2mL组织样液。 3. 向试管内注入1mL新制 的斐林试剂，振荡。 应将组成斐林试剂的甲液、 斐林试剂很不稳定，甲、乙液 乙液分别配制、储存，使 混合保存时生成Cu ( OH ) 2 用前才将甲、乙液等量混 在70~90℃下分解成黑色CuO 匀成斐林试剂； 和水； 切勿将甲液、乙液分别加 甲乙液分别加入时可能与组织 入苹果组织样液中进行检 样液发生反应无Cu ( OH ) 2 测。 生成。 最好用试管夹夹住试管上 部，使试管底部不触及烧 杯底部，试管口不朝向实 验者。 防止试管内的溶液冲出试管， 造成烫伤；
细胞中糖类、蛋白质、脂肪的鉴定实验
蔗糖
2 紫色 3、实验结论：淀粉遇碘变蓝色。
淀粉
2 蓝色
鉴定还原性糖
1、材料用具 2mL 稀释的唾液
2
蓝色
2
蓝色
2
砖红色沉淀
3、实验结论：糖类中的可溶性还原性糖与斐林试剂发生
作用，在水浴加热时生成砖红色沉淀。
实验：脂肪的鉴定
实验原理：脂肪易被苏丹Ⅲ染成橘黄色。 1、材料用具（见教材P19）
细胞中糖类蛋白质脂肪的鉴定实验蛋白质会转化成脂肪吗高蛋白质低脂肪食物花生中蛋白质和脂肪蛋白质脂肪碳水化合物蛋白质能转化成脂肪吗蛋白质转化成脂肪先消耗脂肪还是蛋白质蛋白质脂肪蛋白质转化脂肪
第 二 节
细胞中糖类、脂肪及蛋白质的 鉴定实验
主讲： 刘乔顺老师
实验：鉴定生物组织中的糖类
实验原理：淀粉遇碘变蓝色，糖类中的可溶性 还原性糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖 等），与斐林试剂发生作用，在水浴加热时生 成砖红色沉淀。 实验目的：学会鉴定生物组织中的成分。 一、鉴定淀粉(参考教材) 1、材料用具 2、方法步骤
2、方法步骤
制作装片
徒手切片 材料染色 显微镜观察
漂洗浮色
（使用体积分数为50%的酒精）
3、实验结论：脂肪可被苏丹Ⅲ染成 橘黄色。
边学边做
鉴定蛋白质
• 原理：蛋白质与双缩脲试剂反应呈紫色 操作： １．取材: 取一支洁净试管,加入2 ml组织 样液（黄豆研磨液，蛋清稀释液） ２．加双缩脲Ａ液（０.１g／ml的NaOH溶 液）：２ml 震荡后观察颜色 ３．加双缩脲Ｂ液（０.０１g/ml 的CuSO４ 溶液 ）：３－４滴．震荡 • ４.观察颜色变化 ５.结论： 大豆和蛋清中都含有蛋白质
糖类脂质蛋白质的检测
5、观察DNA RNA在细胞中的分布 ：
5、观察DNA RNA在细胞中的分布 ：
实验原理
甲基绿 + DNA 吡罗红 + RNA 绿色 红色 1.能改变细胞膜的的通透性， 加速染色剂进入细胞。
盐酸的作用
2.使DNA与蛋白质分离， 有利于DNA与染色剂结合。
实验步骤 步骤 制片 器材与试剂 作用与原理
水解 冲洗
染色
观察
先低倍镜观察，选择染色均匀、色泽浅的区域，移至视 野中央，调节清晰后才换用高倍物镜观察
细胞核区域呈现 绿 色 细胞质区域呈现 红 色
DNA主要分布在 细胞核 RNA主要分布在 细胞质
实验结论
真核细胞 DNA：主要在细胞核 线粒体和叶绿体中也含有少量的DNA RNA：主要在细胞质 细胞核中也含有少量RNA 原核细胞 DNA：集中在拟核区域
蛋 白 质 的 检 测 结 果
③用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释，以免
实验后粘住试管壁，不易洗刷
斐林试剂与双缩脲试剂的比较：
斐林试剂 检测 对象 还原性糖 双缩脲试剂 蛋白质 A液:0.1g/mLNaOH B液:0.01g/mLCuSO4
试剂 甲液:0.1g/mLNaOH 组成 乙液:0.05g/mLCuSO4
试剂 甲液与乙液先混再用， 先加A液，再加B液，不 用法 且现配现用，需加热 需加热
检验 结果
砖红色沉淀
紫色物质生成
4、淀粉的检测和观察：
取材： 马铃薯匀浆
组织 样液 2mL 碘液 2滴
检测
摇匀后变 成蓝色
结论： 说明组织样液中存在淀粉。
注意： 常用材料：马铃薯 试剂： 碘液 。颜色变化： 变蓝 。
二.目的要求：
尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、 脂肪和蛋白质
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
实验一检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一．实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质，阐明实验原理—颜色反应，识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色，初步掌握鉴定上述化合物的基本方法,学会描述实验现象，掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法.二．实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。
1．生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多,有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。
前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原糖;蔗糖分子内没有，为非还原糖。
实验中所用的斐林试剂，只能鉴定生物组织中可溶性还原糖，而不能鉴定可溶性非还原糖。
可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu 2O沉淀。
如：葡萄糖+ 2Cu2+ + 4OH—加热葡萄糖酸+ Cu 2O↓(砖红色）+ H 2O 即Cu 2+被还原成Cu 2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。
用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色沉淀淀粉遇碘变蓝色(直链）或紫（红)色(支链）。
2．脂肪和类脂（磷脂、糖脂、固醇脂等）统称为脂类.它是构成人体组织的正常成分，不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。
在化学组成上，脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。
脂类的主要功能是氧化供能.脂肪主要存积于脂肪组织中,并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。
在病理检验中，脂类染色法最常用以证明脂肪变性，脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。
脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料，最常用的有苏丹Ⅲ，苏丹Ⅳ,苏丹黑及油红O等。
脂肪被染色,实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。
经研究认为组织中脂质在液态或半液态时，对苏丹染料着色效果最好。
根据这一原理，适当提高温度(37℃—60℃）对组织切片染色效果是有好处的。
脂类染色，用冰冻或石蜡切片，以水溶性封固剂封固,如甘油、明胶和阿拉伯糖胶等。
糖类、蛋白质、脂肪的鉴定
1.实验原理
生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
实验原理
鉴定物质 还原性糖
脂肪
蛋白质 淀粉
试剂 斐林试剂
苏丹Ⅲ 苏丹Ⅳ 双缩脲试剂
碘
实验现象
砖红色沉淀 橘黄色 红色 紫色 蓝色
方法步骤： 1．实验材料、仪器和试剂的选择 2．设计记录表格，记录预测结果 3．检测的方法步骤 (1)还原糖的检测和观察; (2)脂肪的检测和观察; (3)蛋白质的检测和观察;
D、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用
第二章组成细胞的分子 网络构建
蛋白质的结构和功能
细胞的分子组成
核酸的结构和功能
水和无机盐的作用
糖类的种类和作用
脂质的种类和作用
C、H、O、N 种类
20种
氨基酸 脱水缩合 多肽 化学键名称 肽键
氨基酸种类、数目、排列顺序、空间结构
蛋白质结构的多样性
蛋白质7~10%
显微观察：先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察
现象：有被染成橘黄色(或红色)的脂肪微粒
脂肪的检测结果
3.蛋白质的鉴定
选材与制备 黄豆组织样液（或鸡蛋蛋清稀释液） 组织样液：［黄豆浸泡 →去皮→切片→研磨→过滤→滤液］
显 色 反 应 现象：
(创设碱性条件)
(提供Cu2+)
无色
紫色或紫红色
而后立即使用。
砖 红 色 沉
0.05g/mL
淀
在碱性
NaOH 浓度为
蛋白质 的鉴定
双缩脲试 剂NaOH和
CuSO4
环境下 的Cu2+
0.1g/mL
CuS04 浓度为
先加入Na0H 1mL，然后 再加CuS04 4滴，摇匀。 (不能过量)
糖类、脂质、蛋白质的检测
-2-
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
实验原理:某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产
生特定的颜色反应。
鉴定物质
试剂
实验现象
还原性糖
斐林试剂
砖红色沉淀
脂肪 蛋白质
淀粉
苏丹Ⅲ 苏丹Ⅳ 双缩脲试剂
碘
橘黄色 红色 紫色 蓝色
-3-
一:还原糖的检测和观察
选材 含糖量较高、白色或近于白色的植物组织
取材 马铃薯匀浆
待
碘
检测
测
液2
组
滴摇
织
匀
样
蓝
液
色
2mL
结论 马铃薯匀浆样液中含有淀粉
-10-
问题探讨:
1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时，
为什么要留出一部分样液
作对照
2、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加3～4 滴而不能过量？ 过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而掩盖
生成的紫色。
3、为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？
C 作用产生砖红色沉淀，下列结论中最合理的是 ( ) A．青苹果汁中有淀粉，不含还原糖 B．熟苹果汁中含还原糖，没有淀粉 C．苹果转熟时，大量淀粉水解成还原糖 D．苹果转熟时单糖聚合成淀粉
-13-
6、安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国，引起世
人注目。鉴定探究：
斐林试剂 甲液：0.1g/mlNaOH 双缩脲试剂 A液:0.1g/mlNaOH
乙液:0.05g/mlCuSO4
B液:0.01g/mlCuSO4
斐林试剂与双缩脲试剂成分相同，但在使用时，斐林试剂甲液 与乙液必须混合使用，而双缩脲试剂则先加A液，再滴加B液， 请分析原因。
糖类脂肪蛋白质的鉴定
VS
脂肪
是长期能量储存的形式，通过β-氧化产生 ATP。
生物功能比较
• 蛋白质：在能量需求增加时可以作为能量来源，通过脱氨基产生ATP。
生物功能比较
01
糖类
是细胞膜和细胞壁的重要组成成 分。
02
03
脂肪
蛋白质
是生物膜的组成成分，并参与信 号转导。
是细胞的主要结构成分和功能执 行者，参与细胞运动、物质运输、 催化反应等。
脂肪
由碳、氢、氧组成，是脂类。
化学性质比较
• 蛋白质：由碳、氢、氧、氮、硫组成，是 氨基酸的聚合体。
化学性质比较
糖类
单糖之间通过糖苷键连接，如α-1,4-糖苷键和α-1,6-糖苷键。
脂肪
脂肪酸之间通过酯键连接。
蛋白质
氨基酸之间通过肽键连接。
物理性质比较
要点一
糖类
易溶于水，尤其是单糖和低聚糖。
要点二
酸水解法
03
将样品中的糖类物质在酸的作用下水解成单糖，再通过化学反
应进行鉴定。
物理鉴定
色谱法
利用色谱柱将糖类物质与其他物质分 离，通过检测器检测糖类物质的峰， 判断糖的存在。
红外光谱法
利用红外光谱技术检测样品中糖类物 质的特征吸收峰，判断糖的存在。
生物鉴定
酶法
利用酶与糖类物质反应，生成可被检测的产物，通过检测产物判断糖的存在。
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酯化反应
脂肪分子中的羧基可以与醇发生酯化反应，生成 酯类化合物，通过测定酯的生成量，可以判断脂 肪的存在。
物理鉴定
折射率法
脂肪分子中含有大量的碳、氢等元素， 对光线的折射率较高，可以通过测定 折射率的大小来判断脂肪的存在。
糖类脂肪蛋白质的鉴定
③刀口向内，与花生断面平行，以均匀的动作，
自左前方向右后方快速拉刀，滑行切片（注意 要整个臂部用力，而不要腕部用力。）如此连
续动作，切下一些薄片。
（2）染色
用毛笔将最 薄的几片材料移至洁净的载玻片的 中央→滴苏丹Ⅲ溶液2-3滴于花生子叶薄片上→21min后，吸去染液→滴50%的酒精洗去浮色→吸去 多余酒精→再滴1-2滴蒸馏水→盖上盖玻片，制成 临时装片。
R—CHO+2Cu(OH)2→R—COOH+Cu2O↓+2H2O
2.实验材料
做可溶性还原糖的鉴定实验，还原糖 的含量、生物组织有无色素是影响实验结 果及其观察的最重要因素。
因此要选用可溶性还原糖含量高、 白色或近于白色的植物组织，其中以 苹果、梨最好，也可用白萝卜替代。
3.试剂配制 甲液（0.1g/mL的氢氧化钠溶液）
2.实验材料 做蛋白质的鉴定实验，一般选用蛋白质
含量较高的大豆(可用豆浆替代）或鸡蛋清。 3.试剂配制
A液（0.1g/mL的氢氧化钠溶液） 双缩脲试剂
B液（0.01g/mL的硫酸铜溶液）
4.实验步骤：
（1）制备生物组织样液（教师制备） （2）鉴定
先加 2mL组 织样液
再加 2mL双 缩脲试 剂A液
（3）镜检鉴定
在低倍镜下观察，找到花生子叶切片的 最薄处（最好只有1-2层细胞），移至视野 的中心→换用高倍镜观察，调焦至最清晰。 可发现细胞内橘黄色的圆形小颗粒，这就是 脂肪滴（油滴）。若发现观察物外围也有许 多橘黄色小颗粒，则是脂肪跑了出来。
脂肪检测实验的实验结果
若用物理方法如何鉴定脂肪的存在?
斐林试剂 乙液（0.05g/mL的硫酸铜溶液）
甲液乙液等量混合，现用现配， 切不可分开滴加，或者久置后 才用。
实验一 检测生物组织的糖类,脂质,蛋白质
2）实验材料：豆浆
3）试剂：双缩脲试剂 A液：质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液 B液：质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液
4）检测的方法步骤
①向试管内注入2mL待测组织样液。
②向试管内注入双缩脲试剂A液1mL ，摇匀。 ③向试管内注入双缩脲试剂B液4滴，摇匀。
2021/6/21
6
四：检测生物组织中的淀粉
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
2021/6/21
1
一：检测生物组织中的还原性糖类
1）实验原理： 还原糖 + 斐林试剂→砖红色沉淀
2）实验材料：苹果汁
3）试剂：斐林试剂 甲液：质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液 乙液：质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液
4) 检测的方法步骤
2021/6/21
3）试剂：苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液
4 ) 检测的方法步骤
①方法一：向待测组织样液中滴加3滴苏丹
Ⅲ染液，观察样液被染色的情况。
2021/6/21
4
②方法二：制作子叶临时切片，用显微镜观察子叶细胞 的着色情况。（取材，切片，制片，观察）
5）实验现象
2021/6/21
5
三：检测生物组织中的蛋白质
1）实验原理： 蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色
2
①向试管内注入2mL待测组织样液。 ②向试管内注入1mL斐林试剂（甲乙液等量混 合均匀后再注入）。 ③将试管放入盛有50~65℃温水的大烧杯中加热约2min。
④观察试管中出现的颜色变化。 5）实验现象
2021/6/21
3
二：检测生物组织中的脂肪
1）实验原理： 脂肪 + 苏丹Ⅲ→橘黄色
脂肪 + 苏丹Ⅳ→红色 2）实验材料：花生种子或花生种子匀浆
实验课 生物组织中糖类、脂肪和蛋白质的检测
注意事项：
• 实验中应分工合作 ，以便缩短实验的等待 时间 • 加热试管中的溶液时, 用试管夹夹住试管 上部,放入盛开水的大烧杯中加热,注意试 管底部不要接触烧杯底部,同时试管口不要 朝向实验者,以免试管内溶液沸腾时冲出试 管,造成烫伤。
还原糖的检测：
1、取材：含糖较高，颜色为白色或近于白 色的植物组织（梨、苹果） 2、步骤：取样液→加斐林试剂→振荡→水 浴加热→观察颜色变化 3、实验现象：蓝色→棕色→砖红色
还原糖检测 实验的实验 结果
蛋白质的检测：
1、取材：豆浆或稀释的鸡蛋清 2、步骤：取样液→加双缩脲试剂A→振荡 加→双缩脲试剂B→振荡→观察颜色变化 3、实验现象：出现紫色
蛋白质检测 实验的实验 结果
脂肪的检测：
1、取材：浸泡3-4小时的花生种子 2、步骤：切片→制片（取最薄的子叶切片放在
载玻片中央→苏丹Ⅲ染色3分钟→吸水纸吸去多余的 染液→体积分数50%的酒精洗去浮色，吸水纸吸去 酒精→滴一滴蒸馏水→盖盖玻片）→显微镜观察
3、实验现象：细胞有橘黄色颗粒
脂肪检测 实验的实 验结果
还原糖 +
葡萄糖 果糖 麦芽糖
斐林试剂
加 → 热
砖红色沉淀
等量混合，再加入还原糖中 （ NaOH +CuSO4）
溶液的 浓度相 同吗？
先加A（NaOH），再加B（CuSO4 ） 蛋白质 + 双缩脲试剂 → 紫色
实验：
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
实验原理： 某些化学试剂能够使生物组织中的有关 有机化合物产生特定的颜色反应。如： 还原糖 + 斐林试剂肪 + 苏丹Ⅲ染液 ----→ 橘黄色 蛋白质 + 双缩脲试剂 ----→ 紫色
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
约2min50~65℃水浴加热三、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1.实验原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。
①还原糖+斐林试剂———————>砖红色沉淀②淀粉+碘液→蓝色③脂肪+苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）→橘黄色（或红色） ④蛋白质+双缩脲试剂→紫色2.实验步骤及实验现象：①还原性糖鉴定：取材→制备组织样液→加斐林试剂1ml →水浴加热煮沸→显色（浅蓝色→棕色→砖红色沉淀） ②淀粉鉴定：取材→制备组织样液（马铃薯匀浆）→滴加碘液→摇匀后变成蓝色③脂肪鉴定：方法一：取材与制备组织样液（花生种子匀浆）→滴加苏丹Ⅲ（苏丹Ⅳ）→摇匀后变成橘黄色（红色） 方法二：取材、切片、制片：花生种子浸泡，将子叶切成薄片→滴加苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）→用50%酒精洗去浮色→镜检（看到橘黄色或红色的脂肪颗粒）④蛋白质鉴定：取材→制备组织样液（豆浆或蛋清稀释液）→加双缩脲试剂A 液1ml →摇匀→加双缩脲试剂B 液4滴→观察颜色（紫色）3.实验注意事项：（1）从植物器官中提取糖类、脂肪、蛋白质的方法：设法使细胞破碎（如研磨、挤压或切割等），再将这些物质提取出来。
（2）禾谷类的果实、种子中含淀粉较多；甘蔗的茎和甜菜的根含蔗糖较多；花生、芝麻的种子中含脂质较多；大豆种子中含蛋白质较多。
（3）显色反应材料选择时要注意：①材料本身应浅色，以免对实验结果的观察产生干扰； ②材料应含有丰富的相关物质，使现象更显著。
（4）还原性糖鉴定①常见的还原糖有葡萄糖、果糖、半乳糖、麦芽糖、果糖、乳糖等。
②实验材料要选含还原性糖量高，白色或近于白色的组织，如苹果和梨的匀浆。
③不能选用甜菜、甘蔗，因为它们所含的蔗糖属于非还原性糖。
④马铃薯含淀粉较多，也不能作为该实验材料。
⑤西瓜、血液、绿色叶片等材料本身的颜色会对实验结果造成干扰，也不能作为该实验材料。
⑥斐林试剂实际上是Cu(OH)2的悬液，不稳定，如果长时间放置，Cu(OH)2悬液会变成Cu(OH)2沉淀，不易和还原糖发生反应。
糖类脂质蛋白质的鉴定实验
• 2．方法步骤： • (1)制备生物组织样液
• (2)实验操作方法和观察
• ①向试管内注入组织样液2 mL(或蛋白稀 释液2 mL)
• (3)结论：组织样液加入双缩脲试剂A后，颜色变 化为无色，再加双缩脲试剂B后，颜色的变化是 紫色。这说明组织样液中含有蛋白质。从而鉴 定黄豆组织中或者蛋白稀释液中或新鲜的肝脏 中有蛋白质。
()
• A．肽键
B．氨基酸
• C．羧基
D．氨基
• 解析：蛋白质分子中含有肽键，可与双缩 脲试剂反应产生颜色反应，以鉴定蛋白质 的存在。
• 答案：A
• 鉴定脱脂淡奶粉是否是伪劣产品，不需用 的化学试剂是
()
• A．斐林试剂
B．苏丹Ⅳ染液
• C．双缩脲试剂 D．红墨水
• 答案：D
• 解析：本题是还原糖、脂肪和蛋白质的鉴 定在生活中的应用。普通奶粉中主要含有 蛋白质、脂肪和糖类。题干中的脱脂淡奶 粉因脱去脂，所以无脂肪；因是淡奶粉， 所以无糖；主要成分只剩下蛋白质。供选 答案中，斐林试剂是用来鉴定还原糖的， 苏丹Ⅳ染液是用来鉴定脂肪的，双缩脲试 剂是用来鉴定蛋白质的，红墨水是用来观 察水分的运输作用的。
• (3)结论：该颗粒可被苏丹Ⅲ染液染成橘黄 色，它是生物组织中的脂肪物质。从而鉴 定花生种子(子叶)组织中有脂肪存在。
• 注意：花生子叶切片切得要薄(最薄处最好 是一层细胞)，因为切片较厚就观察不清脂 肪颗粒。
特别提醒 实验用的花生种子需提前浸泡3～4 h，浸泡时间 太短，不易切片；浸泡时间太长，则组织太软， 切下的薄片不易成形。 (3)蛋白质的检测和观察 选材与制备：鲜肝提取液或黄豆浆滤液
(3)验证性实验的实验结果通常是已知的，探究性实验
的实验结果是未知的，这是两类实验的最大区别。
实验报告：检测糖类脂肪蛋白质
实验报告：检测糖类脂肪蛋⽩质
⼀、实验⽬的：尝试⽤化学试剂检测组织中糖类、脂肪和蛋⽩质。
⼆、材料⽤具：
实验材料：苹果或梨匀浆，花⽣种⼦，⾖浆。
⽤具：双⾯⼑⽚，试管，试管夹，⼤⼩烧杯，⼩量筒，三脚架，⽯棉⽹，⽕柴，载玻⽚，显微镜等。
试剂：斐林试剂，甲液：质量浓度为，⼄液：质量浓度为；苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液，双缩脲试剂：A液：质量浓度为，B液质量浓度为。
三、⽅法步骤：
（⼀）还原糖的检测和观察
①向试管内注⼊2ml 。
（选择具体材料）
②向试管内注⼊1ml 斐林试剂，（甲液和⼄液再注⼊。
）
③将试管放⼊盛有的⼤烧杯中加热,④观察试管中出现的颜⾊变化。
（⼆）脂肪的检测和观察
制作花⽣⼦叶临时装⽚，⽤显微镜观察花⽣⼦叶细胞的着⾊情况。
①取材：取⼀粒花⽣⼦叶，去掉。
②切⽚：⽤⼑⽚在花⽣⼦叶的上平⾏切下若⼲薄⽚，放⼊盛有清⽔的培养⽫中待⽤。
③制⽚：从培养⽫中选取的切⽚，⽤⽑笔蘸取放在载玻⽚中央，在花⽣⼦叶薄⽚上滴2—3滴，染⾊。
⽤吸⽔纸吸去染液，再滴加1—2滴溶液。
洗去浮⾊，⽤吸⽔纸吸去花⽣⼦叶周围的酒精，滴⼀滴，盖上盖玻⽚，制成临时装⽚。
④观察：在下找到花⽣⼦叶的最薄处，移到，将物象调节清楚，换上观察，视野中央被染成的脂肪颗粒清晰可见。
（三）蛋⽩质的检测和观察
①向试管内注⼊2ml （选择具体材料）。
②向试管内注⼊1ml双缩脲试剂，摇匀。
③向试管内注⼊3 - 4滴双缩脲试剂，摇匀。
④观察试管中出现的颜⾊变化。
四、实验结果和分析：。
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成分
鉴定物质 添加顺序
反应条件 反应现象
斐林试剂
双缩脲试剂
甲液
乙液
A液
B液
0.1g/mL
0.05g/mL
NaOH溶液 CuSO4溶液
还原糠
0.1g/mL 0.01g/mL NaOH溶液 CuSO4溶液
蛋白质
甲乙两液等量混匀后立即 先加入A液1mL，摇匀，
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ使用
再加入B液4滴，摇匀
水浴50～65℃加热
? 2．方法步骤： ? (1)制备生物组织样液
? (2)实验操作方法和观察
? ①向试管内注入组织样液 2 mL(或蛋白稀 释液2 mL)
? (3)结论：组织样液加入双缩脲试剂 A后，颜色变 化为无色，再加双缩脲试剂 B后，颜色的变化是 紫色。这说明组织样液中含有蛋白质。从而鉴 定黄豆组织中或者蛋白稀释液中或新鲜的肝脏 中有蛋白质。
? (2)试剂：斐林试剂，苏丹Ⅲ染液，双缩脲试剂。
验证性实验和探究性实验 (1)验证性实验：是指实验者针对已知的实验结果而进 行的以验证实验结果、巩固和加强有关知识内容、培 养实验操作能力为目的的重复性实验。 (2)探究性实验：是指实验者在不知晓实验结果的前提 下，通过自己实验、探索、分析、研究得出结论，从 而形成科学概念的一种认识活动。
? 注意： 做鉴定蛋白质的实验时，在鉴定之前， 要留出一些黄豆组织样液，以便用来与化学试 剂发生反应后的颜色作对比，增强说服力。
? 若不用豆浆，用蛋白稀释液或新鲜肝脏提取液 做实验材料，应稀释到一定程度，如果稀释不 够，与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管的 内壁上，使反应不容易彻底，并且试管不易刷 干净。
(3)验证性实验的实验结果通常是已知的，探究性实验
的实验结果是未知的，这是两类实验的最大区别。
先根据选材预测实验结果，然后再实验验证，因此 本实验属验证性实验。
(四)方法步骤 ? A．还原性糖的鉴定 ? 1．选材：本实验最理想的实验材料是 含
糖量较高 的生物组织 (或器官 )，而且 组织 的颜色较浅，或近于白色 的，如苹果和梨 的果实。经试验比较，颜色反应的明显程 度，依次为苹果、梨、白萝卜。 ? 2．方法步骤： ? (1)制备生物组织样液
［实验］生物组织中糖类、脂肪、蛋白质的鉴定
一、实验原理： 1、还原糖＋斐林试剂 ? 砖红色沉淀
（还原糖：葡萄糖、果糖、麦芽糖） 2、脂肪＋苏丹 III ? 橘黄色
脂肪＋苏丹 IV ? 红色 3、蛋白质＋双缩脲试剂 ? 紫色反应 4、淀粉+碘液 ? 蓝色
［实验］生物组织中糖类、脂肪、蛋白质的鉴定
试剂 ： 1、斐林试剂 （现配现用）
A液 质量浓度为 0.1g/mL 的NaOH溶液 B液 质量浓度为 0.05g/ mL的CuSO4溶液 2、双缩脲试剂 （先加A液，再加B液） A液 质量浓度0.1g/mL 的NaOH溶液 B液 质量浓度0.01g/mL的CuSO4溶液 3、苏丹III （或苏丹IV）染液 4、体积分数为 50%的酒精溶液 5 、碘液
不需加热，摇匀即可
样液有砖红色沉淀产生 样液变紫色
二、实验材料选用
1、糖类的鉴定 ：含还原糖较高，颜色较浅或近于白色 （如：苹果、梨匀浆）
2、脂肪的鉴定 ：富含脂肪（植物油）的种子 （如花生、核桃、蓖麻等的种子） 3、蛋白质的鉴定 （1）植物组织样液：黄豆种子或用豆浆 （2）动物组织样液：鸡蛋清
例2 下列关于检测“生物组织中糖类、脂 肪、蛋白质”实验操作步骤的叙述中，正确 的是( )
A．用于鉴定还原糖的斐林试剂甲液和乙液， 可直接用于蛋白质的鉴定
B．若要鉴定花生种子细胞中是否含有脂肪， 一定需要用显微镜观察
? 1．选材：
? 选材：实验材料最好选用 富含蛋白质的生 物组织 (或器官 )，植物材料常用的是 大豆， 动物材料常用的是 鸡蛋清或新鲜肝脏研磨 液(因为里面富含酶，而酶的成份主要是蛋 白质)。如用大豆，必须提前浸泡 1～2d， 这样容易研磨成浆。有条件的话，可以直 接采用现成的大豆磨成的豆浆，如果用稀 释的鸡蛋清或研磨的新鲜肝脏液做实验材 料，实验效果会更好。
(2)脂肪＋苏丹Ⅲ染液 ―→橘黄色 脂肪＋苏丹Ⅳ染液 ―→红色 (3)蛋白质＋双缩脲试剂 ―→紫色 (4)淀粉 +碘液 ―→蓝色
? (二)目的要求
? 初步学会用化学试剂检测生物组织中的糖类、 脂肪和蛋白质。
? (三)实验仪器和试剂
? (1)仪器：剪刀，解剖刀，双面刀片，试管，试 管架，试管夹，大、小烧杯，小量筒，滴管， 玻璃漏斗，酒精灯，三角架，石棉网，火柴， 研钵，石英砂，纱布，载玻片，盖玻片，毛笔， 吸水纸，显微镜。
? 实验材料最好选择 富含脂肪的种子，如花 生种子 (取其子叶 )。供实验用的花生种子， 必须提前浸泡 3～4h。浸泡时间短了，不 容易切成片；浸泡时间过长，则组织太软， 切下的薄片不易成形。
? 2．方法步骤： ? (1)制备生物组织实验材料(组织切片)
? (2)实验操作方法和观察
? ①观察脂肪小颗粒：用显微镜观察薄片最 薄处(最好一层细胞)
实验：检测生物组织中的糖类、脂 肪和蛋白质
1．实验原理 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有 机化合物产生特定的颜色反应。
简记 “三特”： “特定的物质与特定的试剂反应产生特定的颜色”。
物质 还原糖
脂肪
蛋白质 淀粉
试剂
颜色
斐林试剂 砖红色沉淀
苏丹Ⅲ液 橘黄色
苏丹Ⅳ液
红色
双缩脲试剂 紫色
碘液
蓝色
(1)糖类
? (3)结论：该颗粒可被苏丹Ⅲ染液染成橘黄 色，它是生物组织中的脂肪物质。从而鉴 定花生种子(子叶)组织中有脂肪存在。
? 注意：花生子叶切片切得要薄(最薄处最好 是一层细胞)，因为切片较厚就观察不清脂 肪颗粒。
特别提醒 实验用的花生种子需提前浸泡 3～4 h，浸泡时间 太短，不易切片；浸泡时间太长，则组织太软， 切下的薄片不易成形。 (3)蛋白质的检测和观察 选材与制备：鲜肝提取液或黄豆浆滤液
? (2)实验操作的方法和观察 ? ①向试管内注入样液2 mL
结论：可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生 成砖红色沉淀，说明组织样液中有可溶性还原糖。
(2)脂肪的检测和观察 方法一：花生种子匀浆＋ 3滴苏丹Ⅲ染液 →橘黄色 方法二： 取材：花生种子 (浸泡)，将子叶削成薄片
? 1．选材：