氨态氮(NH4+-N)测定方法
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氨态氮(NH4+-N)测定方法——氧化镁直接蒸馏法1.原理
通过弱碱(氢氧化镁)对氨态氮的作用,NH
4+转换成NH
3
释放出来,通过硼
酸吸收,标准酸滴定后可以计算出样品中NH3-N的量。
本方法中弱碱对有机态氨有一定水解能力,一般可忽略不计,但为提高测定精度,在确保蒸馏完全的前提下,每样品的蒸馏时间尽量保持一致。
2.试剂
2.1.氧化镁
化学纯,购买时注意选择高温灼烧的产品(灼烧过的产品质地疏松,轻质)。否则需经500-600℃茂福炉灼烧后使用。
2.2.液体石蜡油
化学纯或医用。
2.3.2%硼酸溶液
调节pH约等于4.5使之与指示剂混合呈淡红色。
2.4.指示剂
分别称取0.1g甲基红和0.5溴甲酚绿指示剂,放入研钵中,并用100mL无水乙醇研磨溶解,在阴凉处保存期为三个月。
2.5.0.01-0.15M HCL标准溶液
邻苯二甲酸氢钾法标定,按GB601制备。
3.仪器
凯氏定氮蒸馏装置,酸式滴定装置,250mL三角瓶若干等。
4.方法步骤
①量(称)取样品至蒸馏反应管中。推荐取样量瘤胃液10-15mL,十二指肠液10-15mL(g)、回肠液10g,粪10-15g。
②加入氧化镁0.8-1.2g,液体石蜡1mL,蒸馏水约25mL。
③按照凯氏定氮法操作蒸馏,蒸馏时间为硼酸变色后继续蒸馏7-8分钟,滴定。
5.结果计算
+-N含量W(%,g/dL)按下式计算:
样品中NH
4
W=[(V2-V1)×C×0.014/m] ×100
C-标准酸浓度,mol/L
V2-滴定试样时所需要的标准酸溶液体积,mL
V1-滴定空白时所需要的标准酸溶液体积,mL
M-样品质量或体积,g或mL
0.0140-每豪摩尔氮(N)的克数
6.重复性
每个试验取两个平行样进行测定,以其算术平均值为结果
7. 参考文献
本文主要参考中国农业大学畜牧系养牛教研组编写的《反刍动物营养学试验知道》及其GB/T6432-94饲料中粗蛋白测定方法。