沉淀法综述论文

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静置沉淀对于化学反应中产物纯度及产品收率的影响研究

静置沉淀对于化学反应中产物纯度及产品收率的影响研究

静置沉淀对于化学反应中产物纯度及产品收率的影响研究静置沉淀是一种重要的分离和纯化技术,常常用于化学反应过程中产物纯度的提高和产品收率的增加。

在本篇文章中,我们将探讨静置沉淀对于化学反应中产物纯度及产品收率的具体影响。

首先,静置沉淀能够降低反应混合物中的杂质含量,从而提高产物的纯度。

在化学反应过程中,产物经常与其他物质混合在一起。

这些杂质可能是未反应的废料、副产物或反应中产生的不纯物质。

通过静置沉淀,可以利用不同物质的比重差异,将产物与杂质进行有效地分离。

当反应混合物静置一段时间后,杂质会沉淀到底部,而产物则浮在上面。

这样一来,可以用简单的操作将上层产物分离出来,从而提高产物的纯度。

其次,静置沉淀还能够提高产品收率。

产品收率是指在化学反应中得到的产物的实际产量与理论最大产量之间的比值。

产物收率一般受多种因素的影响,例如反应条件、反应时间和反应物质料比等。

静置沉淀作为一种有效的纯化方法,可以去除反应混合物中的杂质和废料,从而减少产物的损失。

此外,通过静置沉淀,还可以将产物与副产物有效地分离,提高产物的回收率。

因此,静置沉淀在提高产品收率方面起着关键作用。

然而,静置沉淀对于化学反应中产物纯度及产品收率的影响也受到其他因素的制约。

首先,反应物质料比是影响产品收率和纯度的重要因素之一。

如果反应物质料比不合适,可能会导致产物无法充分反应或过量反应。

这样一来,即使进行静置沉淀,也无法改善产物的纯度和产量。

其次,反应条件对于静置沉淀的效果也有重要影响。

如温度、气压和搅拌程度等,这些因素会影响反应混合物的物理性质,从而对静置沉淀过程产生影响。

因此,在进行静置沉淀时,需要根据不同的反应条件进行调控,以达到最佳的效果。

总结起来,静置沉淀对于化学反应中产物纯度及产品收率具有重要的影响。

通过分离杂质和废料,静置沉淀可以提高产物的纯度;同时,通过分离产物和副产物,静置沉淀可以提高产物的收率。

然而,静置沉淀的效果还受到其他因素的限制,如反应物质料比和反应条件等,需要综合考虑各种因素,以达到最佳的分离和纯化效果。

有机溶剂沉淀法综述

有机溶剂沉淀法综述

学校代码:__11059__学号:1302021005Hefei University下游处理技术XIAYOUC HULIJIS HUZONGSH U论文题目:有机溶剂沉淀法综述学位类别:本科学科专业:生物技术作者姓名:方婷导师姓名:于宙完成时间:2016.5.4有机溶剂沉淀法综述摘要:有机沉淀法是现代沉淀法中比较常用的方法,有机溶剂能降低溶液的电解常数,从而增加蛋白质分子上不同电荷的引力,导致溶解度的降低;有机溶剂能与水作用,破环蛋白质的水化膜,在一定浓度的有机溶剂中差异中蛋白质分离,常用于蛋白质或酶的提纯。

关键词:有机溶剂沉淀;分离;沉淀引言:早期人们认为有机溶剂沉淀法的机理是加入溶剂后,会使水溶液的介电常数降低,而使蛋白质分子间的静电引力增大,而导致凝集和沉淀。

后来又提出一种说法,认为有机溶剂沉淀法的机理是蛋白质纯化,使原来和蛋白质结合的水被溶剂所取代,从而降低了它们的溶解度。

但是这种理论不能说明为什么乙醇比丙酮的亲水性强,丙酮却比乙醇沉淀蛋白质能力强,也解释不了丙酮、乙醇之类溶剂在所谓脱去蛋白质水膜的过程中容易造成变性,而盐析脱水时不造成变性。

近年来对蛋白质变性的研究有所发展,对有机溶剂沉淀蛋白质的机理有了新的探索认为有机溶剂可能破坏蛋白质的某种键,使其空间结构发生变化,致使一些在内部疏水基团暴露于表面,并与有机溶剂的疏水基团结合形成疏水层,从而使蛋白质沉淀[1]。

一、有机溶剂沉淀法简介(一)、概念有机溶剂沉淀法是向蛋白质溶液中加入丙酮或乙醇等水溶性有机溶剂,水的活度降低,水对蛋白表面荷电基团或亲水基团的水化程度降低,溶液介电常数下降,蛋白质分子间静电引力增加,从而凝聚和沉淀[2]。

(二)、选择溶剂选择的原则是:与水可以混溶,不与蛋白反应,沉淀效应良好,无毒。

其中主要效应是水的活度降低。

当有机溶剂浓度很大时,水对蛋白质分子表面上核电基因或亲水基团的水化程度降低,或者说有机溶剂的介电常数降低,因而静电吸力增大,促进了蛋白质分子的聚集和沉淀。

沉淀法

沉淀法

阴阳离子盐析效果
阴离子盐析效果 : 柠檬酸>PO43- >SO42- > CH3COO-> Cl->
NO3->SCN-
阳离子盐析效果:
NH4+ > K+>Na+ >高价阳离子
硫酸铵是最常用的蛋白质盐析沉淀剂 盐析作用强,溶解度大且受温度影响小,
(硫酸铵的溶解度在0~30℃范围内变化 很小,25℃时的饱和浓度约为4 mol/L. 用1.0L水制备硫酸铵的饱和溶液,需加 入767g硫酸铵,饱和溶液体积为 1.425L) 。 不使蛋白质变性,价廉易得; 缺点:缓冲能力差,水解后变酸;高pH 释氨,腐蚀性;残留,对产品有影响。
等电点沉淀法适用于憎水性较强的蛋白质,
例如酪蛋白在等电点时能形成粗大的凝聚 物。但对一些亲水性强的蛋白质。如明胶, 则在低离子强度的溶液中,调 pH在等电点 并不产生沉淀。 所以其很少单独使用,往往与盐析法、有 机溶剂沉淀法或其他沉淀法一起使用。
有机溶剂沉淀法
定义:向水溶液中加入一定量亲水性的有
沉淀法
(precipitation)
沉淀的手段,主要是为了通过沉 淀达到浓缩的目的,或者通过沉淀,固液分 相后,除去留在液相或沉积在固体中的非必 要成分;其次,沉淀可以将已纯化的产品由 液态变成固态,加以保存或进一步处理。 沉淀方法用于分离纯化是有选择性的,即有 选择地沉淀杂质或有选择地沉淀所需成分。
选择性溶剂沉淀法
金属离子沉淀蛋白质
一般可分三类: ①能与羧基、胺基等含氮化合物以及含氮杂环化 合物强烈结合的一些金属离子,如:Mn2+.Fe2+ . Co2+.Ni2+ .Cu2+.Zn2+ .Cd2+ ; ②能与羧酸结合而不与含氮化合物结合的一些金 属离子,如:Ca2+ .Ba2+.Mg2+ .Pb2+ ; ③能巯基化合物强烈结合的一些金属离子,如: Hg2+ .Ag2+ .Pb2+ 。 实际应用时,金属离子的浓度常为0.02mol/L。 复合物中金属离子的去除,可用离子交换法或 EDTA金属螯合剂。

沉淀法制备二氧化硅综述

沉淀法制备二氧化硅综述

沉淀法制备二氧化硅综述沉淀法制备二氧化硅是一种常用的制备方法,其基本原理是通过化学反应在溶液中生成沉淀,再将沉淀物进行分离、洗涤、干燥等步骤,最终得到二氧化硅。

下面将对沉淀法制备二氧化硅进行详细综述。

一、基本原理沉淀法制备二氧化硅的化学反应基于硅酸盐与酸反应,生成硅酸沉淀。

其化学方程式可以表示为:xSio2•yH2O+yH+→Sio2+(x+y)H2O其中,x和y是反应物的系数,表示硅酸盐与酸的比例。

通过控制反应物的浓度、温度和反应时间等参数,可以获得不同粒径和纯度的二氧化硅粉末。

二、制备方法沉淀法制备二氧化硅主要包括以下步骤:1.准备原料:通常使用硅酸钠、无机酸(如盐酸和硫酸)作为原料。

也可以使用含有硅酸盐的天然矿物,如海泡石、坡缕石等。

2.化学反应:将硅酸钠或硅酸盐矿物与无机酸混合,在一定温度下反应一定时间,生成硅酸沉淀。

3.分离:将生成的硅酸沉淀与溶液分离,可以采用过滤、沉降等方法。

4.洗涤:将硅酸沉淀洗涤干净,去除其中的杂质。

5.干燥:将洗涤干净的硅酸沉淀进行干燥处理,得到二氧化硅粉末。

6.煅烧:在一定温度下对二氧化硅粉末进行煅烧处理,去除其中的水分和有机物等杂质,得到高纯度的二氧化硅。

三、影响因素沉淀法制备二氧化硅的过程中,影响产品质量的因素主要包括原料质量、反应条件、洗涤和干燥等步骤的操作条件。

具体如下:1.原料质量:原料中杂质的含量会影响最终产品的纯度和质量。

因此,应选择纯度较高的原料进行制备。

2.反应条件:反应温度、反应时间和溶液浓度等因素都会影响硅酸的生成和结晶过程,从而影响最终产品的粒度和纯度。

3.洗涤和干燥:洗涤和干燥过程中的操作条件也会影响产品的纯度和质量。

如洗涤次数、干燥温度和时间等因素都会影响产品的质量。

四、应用领域沉淀法制备的二氧化硅粉末可以应用于许多领域,如陶瓷、玻璃纤维、涂料等领域作为高性能填料,也可以用于制造光学器件、电子材料等领域。

同时,通过控制制备过程中的参数,可以得到不同粒径和纯度的二氧化硅粉末,满足不同领域的需求。

盐析法

盐析法

盐析法综述摘要:沉淀法是利用沉淀反应,将被测组分转化为难溶物,以沉淀形式从溶液中分离出来,并转化为称量形式,最后称定其重量进行测定的方法。

盐析法是其中的一种,盐析法是在中药水提液中,加入无机盐至一定浓度,或达饱和状态,可使某些成分在水中溶解度降低,从而与水溶性大的杂质分离。

常作盐析的无机盐有氯化钠、硫酸钠、硫酸镁、硫酸铵等。

关键词:沉淀法;盐析;原理;方法评价;蛋白质盐析 沉淀法沉淀法是利用沉淀反应,将被测组分转化为难溶物,以沉淀形式从溶液中分离出来,并转化为称量形式,最后称定其重量进行测定的方法。

有机溶剂沉淀法多用于生物小分子、多糖及核酸产品的分离纯化,有时也用于蛋白质沉淀。

有机溶剂的沉淀机理是降低水的介电常数,导致具有表面水层的生物大分子脱水,相互聚集,最后析出。

等电点沉淀法用于氨基酸、蛋白质及其它两性物质的沉淀。

但此法单独应用较少,多与其它方法结合使用。

两性电解质分子上的净电荷为零时溶解度最低,不同的两性电解质具有不同的等电点,以此为基础可进行分离。

、非离子多聚体沉淀法用于分离生物大分子非离子多聚物是六十年代发展起来的一类重要沉淀剂,最早用于提纯免疫球蛋白、沉淀一些细菌和病毒,近年来逐渐广泛应用于核酸和酶的分离提纯。

最常用的是铅盐法,可以用于除去杂质,也可用于沉淀有效成分。

沉淀法通常是在溶液状态下将不同化学成分的物质混合,在混合液中加人适当的沉淀剂制备前驱体沉淀物,再将沉淀物进行干燥或锻烧,从而制得相应的粉体颗粒。

一般来说,所有固体溶质都可以在溶液中加入中性盐而沉淀析出,这一过程叫盐析。

在生化制备中,许多物质都可以用盐析法进行沉淀分离,如蛋白质、多肽、多糖、核酸等,其中以蛋白质沉淀最为常见,特别是在粗提阶段。

对沉淀形式的要求(1)沉淀的溶解度要小,以保证被测组分能沉淀完全。

(2)沉淀要纯净,不应带入沉淀剂和其他杂质。

(3)沉淀易于过滤和洗涤,以便于操作和提高沉淀的纯度。

(4)沉淀易于转化为称量形式。

化学学士学位毕业论文——直接沉淀法制备纳米氧化锌

化学学士学位毕业论文——直接沉淀法制备纳米氧化锌

学士学位论文题目:直接沉淀法制备纳米氧化锌直接沉淀法制备纳米氧化锌摘要:以硝酸锌和碳酸铵为原料,通过直接沉淀法制备了纳米ZnO.采用DSC、FT-IR、XRD、TEM等对前驱物和纳米ZnO粉体结构和形貌进行了表征,结果表明:前驱物是[Zn5(OH)6(CO3)2];前驱物在550℃焙烧2h得到六方晶系的ZnO粉体;该粉体的形貌为长条形,平均宽度约为50nm, 长度为200nm,分布较均匀、纯度高。

关键词:氧化锌、纳米材料、直接沉淀法、XRDSynthesis of nano-sized ZnO powders by direct precipitation method Abstract Using Zinc nitrate and ammonium carbonate as raw materials, nanocrystalline ZnO was prepared by direct precipitation method. The structure and Morphology of nano-sized ZnO powders and the precursors were characterized by DSC、FT-IR、XRD、TEM. The result showed that the precursor was [Zn5(OH)6(CO3)2]; ZnO crystal powders obtained was six-party crystal when precursor was calcined at550℃ for 2h; The morphology of the powders is a long strip, with an average width of about 50nm, a length of 200nm, a more even distribution, high purity. Keyword ZnO;Nanoparticles; Direct precipitation method; XRD目录1 前言 (1)1.1 纳米氧化锌的制备方法 (1)1.2 纳米氧化锌的表征 (4)1.3 纳米氧化锌应用及前景 (5)2实验部分 (6)2.1 实验药品及仪器 (6)2.2样品的制备 (7)2.3 样品表征 (7)3 实验结果与讨论 (8)3.1 前驱体的热分析 (8)3.2前驱体及样品的XRD分析 (8)3.3前驱体及样品的红外光谱分析 (10)3.4 样品的透射电镜(TEM)分析 (11)4结论 (12)参考文献 (13)1 前言氧化锌是Ⅱ—Ⅵ族具有六方纤锌矿晶体结构的宽禁带直接带隙的半导体,室温禁带宽度约为3.37 eV,激子束缚能为60 meV [1];它具有优良的物性,在声表面波、透明电极、蓝光器件等方面都有较大的应用潜力,目前倍受人们重视[2]。

沉淀法

沉淀法

沉淀法制备催化剂摘要:本文主要阐述了固体催化剂制备方法最常用的沉淀法。

分别简介了沉淀法发展中出现的单组份沉淀法、多组分沉淀法、均匀沉淀、超均匀沉淀、浸渍沉淀法和导晶沉淀法。

对各种方法进行了简要介绍及对比,其中着重介绍了共沉淀法的改进研究,最后对沉淀法的发展进行总结。

关键词:固体催化剂沉淀法工艺影响因素前言对大多数固体催化剂来说,通常都是将金属细小颗粒,负载于氧化铝、氧化硅或其他物质载体上而形成负载型催化剂,也有负载型的金属氧化物催化剂,还有先制成氧化物,然后用硫化氢或其他硫化物处理使之转化为硫化物催化剂。

这些过程可用多种方法实现,一般说来,以沉淀操作作为关键步骤的制造方法称沉淀法。

沉淀法是制备固体催化剂最常用的方法之一,沉淀法开始阶段总要先将两种或更多种溶液或固体物质的悬浮液加以混合,有时也是用简单的非沉淀的干法混合,导致沉淀。

接着进行过滤、洗涤、干燥、成型与焙烧等工艺。

而采用焙烧等高温处理时,会产生热扩散和固态反应,使各物种之间密切接触,催化剂才能分布更均匀。

沉淀法的优点是,可以使各种催化剂组分打到分子分布的均匀混合,而且最后的形状和尺寸不受载体形状的限制,还可以有效地控制孔径的大小和分布。

缺点是当两种或两种以上金属化合物同时存在时,由于沉淀速率和次序的差异,会影响固体的最终结构,重现性较差。

1沉淀法的类型随着催化实践的发展,沉淀的方法已由单组份沉淀法发展到多组分共沉淀法,并且产生均匀沉淀、超均匀沉淀、浸渍沉淀法和导晶沉淀法等,使沉淀法更趋完善。

1.1单组份沉淀法本法是通过沉淀与一种待沉淀组分溶液作用以制备单一组分沉淀物的方法,是催化剂制备中最常用的方法之一。

由于沉淀物质只含一个组分,操作不太困难,再与机械混合或其他操作单元相配合,既可用来制备非贵金属单组份催化剂或载体,又可用来制备多组分催化剂。

1.2多组分共沉淀法(共沉淀法)共沉淀法是将催化剂所需的两个或两个以上组分同时沉淀的一种方法。

其特点是一次可以同时获得几个组分,而且各个组分的分布比较均匀。

化学沉淀法处理重金属废水的研究进展

化学沉淀法处理重金属废水的研究进展

化学沉淀法处理重金属废水的研究进展化学沉淀法处理重金属废水的研究进展摘要:重金属污染是当前环境中的一大问题,尤其是重金属废水的排放对水体的污染更加严重。

化学沉淀法作为一种常用的重金属废水处理方法,具有操作简单、成本低廉等优点,在实际应用中得到了广泛的关注和应用。

本文通过对化学沉淀法处理重金属废水的研究进展进行综述,从理论分析、工艺优化和应用效果等方面进行了详细的介绍和讨论。

1. 引言重金属的排放对环境造成了严重的污染,其中重金属废水的处理是防止水体污染的重要途径之一。

化学沉淀法作为一种常用的重金属废水处理方法,通过在废水中加入适当的化学试剂,使得重金属离子与试剂反应生成沉淀进而达到净化水体的目的。

本文通过对化学沉淀法处理重金属废水的研究进展进行综述,旨在总结目前该领域的研究成果,为进一步的研究和应用提供参考。

2. 理论分析化学沉淀法处理重金属废水的理论基础主要包括溶液化学平衡理论、羟基化学理论和颗粒沉淀动力学理论等。

溶液化学平衡理论通过分析溶液中各种化学物质的浓度与反应平衡之间的关系,确定化学沉淀过程中合适的试剂和反应条件。

羟基化学理论则研究了不同金属离子在碱性溶液中生成金属水合氧化物沉淀的机理。

而颗粒沉淀动力学理论则探讨了沉淀的形成速率与溶液中各种因素的关系,为实际操作提供了理论指导。

3. 工艺优化化学沉淀法处理重金属废水的工艺优化主要包括试剂选择、试剂添加顺序、pH值调节和沉淀分离等。

试剂选择是影响化学沉淀法处理效果的关键因素,通常选择具有较高沉淀能力和成本较低的试剂。

试剂添加顺序会影响到反应的进行及沉淀产物的形成,合理的试剂添加顺序可以提高沉淀的效果。

调节pH值可以改变重金属离子的溶解度和沉淀物的生成速率,通过优化pH值可以提高沉淀的效率。

沉淀分离则是将形成的沉淀和溶液分离的过程,采用适当的分离工艺可得到高质量的沉淀产物。

4. 应用效果化学沉淀法在重金属废水处理中已经得到了广泛的应用,并取得了一定的效果。

毕业论文化学沉淀法处理氨氮废水

毕业论文化学沉淀法处理氨氮废水

毕业论文化学沉淀法处理氨氮废水第1章引言氨氮废水的来源及危害水是人们居住星球上的一种物质资源,它具有可循环性和独特的物理化学性质,是任何物质不可替代的,它是人类生存的基本条件和生产活动的物资基础。

我国由于缺水和水污染对经济发展和人民的身体健康造成了极大危害。

全国每年废水排放总量由1998年的395亿吨[1]增至2000年的1415亿吨[2],全国估计每年水污染造成的经济损失约400亿元[3]保护水资源、防止水体污染已成为我国政府十分关注的重大问题。

随着工农业的发展和人民生活水平的提高,含氮化合物废水的排放量急剧增加,已经成为环境的主要污染源而备受关注。

氨态氮是水相环境中氮的主要污染形态[4],其中氨态氮主要存在形式为铵离子和游离氨。

总之,来源比较广泛,排放量较大,其主要来源包括生活污水和动物排泄物、工业废水、煤油废水、某些制药防水、垃圾填埋场渗滤液及钢铁、煤油、化肥无机化工、铁合金、玻璃制造、肉类加工和饲料生产等排放废水。

随着科学工作者对氨氮进一步研究和探讨发现,氨氮是水体富营养化和环境污染的一种重要污染物质,一旦氨氮进入水体,可导致水体缺氧滋生有害水生物导致鱼类中毒,并且人类在食用此种鱼类的同时又肯会有轻度中毒状甚至死亡。

此外,氨氮还会影响鱼鳃的氧气传递,浓度较高时甚至导致鱼类死亡[5]。

大量的氨氮废水排入江河湖海给工业废水的处理带来了困难[6],在用氯消毒时,氨氮就会与氯气作用生成氯胺,明确降低氯的消费速率,大大增加了氯的需要量[7]。

氨转化为硝酸、硝酸盐进一步转化为亚硝酸铵具有严重的三致作用,直接影响人类健康。

氮、磷是水体中某些藻类的营养物质。

在一定的水温,光照和水流状态下,当水体中氮、磷达到一定浓度时形成水体富营养化,藻类大量繁殖,使水体严重缺氧,对其他水生生物的呼吸造成障碍,尤其是赤潮生物及其代谢物含有毒素,可引起水生生物中毒、死亡。

处理氨氮废水的国内外研究状况1.2.1国内研究状况国内在污水生物脱氮方面做了大量工作[8]。

沉淀法分离纯化蛋白质综述

沉淀法分离纯化蛋白质综述

沉淀法分离纯化蛋白质综述摘要:蛋白质分离纯化是用生物工程下游技术从混合物之当中分离纯化出所需要得目的蛋白质的方法,是当代生物产业当中的核心技术。

分离纯化蛋白质的方法有沉淀法、电泳法、透析法、层析法及高速离心法。

根据蛋白质的溶解性质,利用沉淀法对其分离纯化方式进行综述。

关键词:蛋白质沉淀法盐析法有机溶剂沉淀法等电点沉淀法蛋白质是生命的物质基础,没有蛋白质就没有生命。

蛋白质具有巨大的商业价值,广泛应用于医药、食品、食品添加剂、纺织、制革、工业催化剂等领域。

从生物材料中分离制备蛋白质,研究其结构与功能,对于了解生命活动的规律,阐明生命现象的本质有重大意义。

而蛋白质分离纯化是当代生物产业当中的核心技术,该技术难度、成本均高。

根据蛋白质的酸碱性质、分子大小与形状、溶解性质及其与配体亲和性等性质可对蛋白质进行分离纯化。

沉淀法也称溶解度法。

其纯化生命大分子物质的基本原理是根据各种物质的结构差异性来改变溶液的某些性质,进而导致有效成分的溶解度发生变化。

沉淀是溶液中的溶质由液相变成固相的过程。

在生物工业、有机化工偶那个专业、无机化工工业及实验室分析中是分离与纯化最常用的方法之一。

常用的蛋白质沉淀法有盐析法、有机溶剂沉淀法及等电点沉淀法,实际工作中常联合使用这三种沉淀法以达到较高的蛋白质分离提纯的效果。

1.盐析法蛋白质在高盐浓度下发生盐溶,这是因为当向蛋白质溶液中加入中性盐到一定浓度时,蛋白质表面电荷被大量中和,即亲水基团被大量中性盐离子所包围,水分子离开蛋白质的周围,暴露出疏水区域,疏水区域间的相互作用使蛋白质分子相互聚集而沉淀。

盐析的一般操作步骤是,选择一定浓度范围的盐溶液(如0-25%饱和度的硫酸铵)使部分杂质呈“盐析”状态从溶液中沉淀出来,经离心去除。

而目的的蛋白质呈盐溶状态,而从溶液中分离出来。

盐析的影响因素包括蛋白质浓度、溶液pH值及温度。

当蛋白质浓度较低时,发生盐析需要较高的离子浓度;当pH值为蛋白质的等电点时,蛋白质分子上的净电荷数为零,溶解度最小;较高的温度有利于盐析沉淀,但较高温度易使蛋白质变性和发生共沉作用。

生物工艺学下游技术第四章 沉淀法

生物工艺学下游技术第四章 沉淀法

硫酸铵盐析 固体法 533(S )/(100 100g = 533(S2-S1)/(100-0.3S2)
g:1升溶液中需加入固体硫酸铵的克数 S1:表示需要达到的百分饱和度 S2:表示原溶液中的百分饱和度
(20 ℃)
饱和溶液法 V = V0(S2-S1)/ (S3-S1)
表示需要加入的硫酸铵溶液体积(ml) V :表示需要加入的硫酸铵溶液体积(ml) 表示原来溶剂的体积(ml) V0 :表示原来溶剂的体积(ml) S1与S2同上 S3 :表示需要加入的硫酸铵溶液的饱和度
定义 沉淀是物理环境的变化引起溶质的溶解度
降低、生成固体凝聚物的现象。 降低、生成固体凝聚物的现象。
沉淀的种类
盐析 等电点沉淀 有机溶剂沉淀 非离子型聚合物沉淀法 聚电解质沉淀法 高价金属离子沉淀法 热沉淀法
蛋白质的溶解特性
亲水性氨基酸残基基本分布在蛋白质立体结构 的外表面,形成亲水区 亲水区。 的外表面,形成亲水区。 在水溶液中, 在水溶液中,多肽链中的疏水性氨基酸残基具 有向内部折叠的趋势,即便如此, 有向内部折叠的趋势,即便如此,一般仍有部分疏 水性氨基酸残基暴露在外表面,形成疏水区 疏水区。 水性氨基酸残基暴露在外表面,形成疏水区。 蛋白质表面由不均匀分布的荷电基团形成荷电 蛋白质表面由不均匀分布的荷电基团形成荷电 亲水区和疏水区构成。 区、亲水区和疏水区构成。
防止蛋白质凝聚沉淀的屏障
蛋白质周围的水化层( shell), ⑴蛋白质周围的水化层(hydration shell), 保护了蛋白质粒子,避免了相互碰撞, 保护了蛋白质粒子,避免了相互碰撞,使蛋白 质形成稳定的胶体溶液。 质形成稳定的胶体溶液。 蛋白质两性电解质 分子间静电排斥作用。 两性电解质, ⑵蛋白质两性电解质,分子间静电排斥作用。 存在双电层) (存在双电层)蛋白质粒子在水溶液中是带电 的,带电的原因主要是吸附溶液中的离子或自 身基团的电离。 身基团的电离。蛋白质表面的电荷与溶液中反 离子的电荷构成双电层。 离子的电荷构成双电层。

液相直接沉淀法制备Ag_3VO_4及其可见光催化性能研究

液相直接沉淀法制备Ag_3VO_4及其可见光催化性能研究
节反 应混合 物 的 p H 值 为 7时, 所 制 备 的样 品 为 单 斜
在高 温高 压下 长 时 间反 应 , 对 设 备要 求 高 。而相 对 于
其 它 制备 方法 , 沉淀 法具 有实 验工 艺简 单 、 过程 容 易控 制、 不 需要 复杂 设 备 和 操作 等优 点 , 因此 , 这种 方 法 被 常用来 制备 无 机材料 。液相直 接沉 淀法 除 具有 沉 淀法
朱启安 等 : 液 相 直 接 沉 淀 法 制 备 Ag 。 VO 及 其 可 见 光 催 化 性 能 研 究
液 相 直 接 沉 淀 法 制 备 Ag 。 VO4 及 其 可见 光 催 化 性 能 研 究
朱启 安 , 吴 尧 , 胡 耐 根 , 倪 彬 , 孙 玉环 , 吴红 娟
为 原料 , 用 液相直 接 沉淀 法制 备 了 Ag 。 VO , 并研究 了
反 应时 间 、 反应 温 度及 添 加 的表 面 活性 剂 等 因素 对 样
关键 词 : Ag 。 VO ; 液相直接沉淀法; 光 催化 ; 化性 能 的影 响 , 该 方法 未见 文 献
2 . 1 试 剂
硝酸 银 ( Ag NO。 , 广 东 汕 头 市 西 龙 化 工 有 限 公
司) ; 偏 钒 酸铵 ( NH VO。 , 天 津科 密欧化 学 试剂 有 限公 司) ; 十六烷 基 三 甲基 溴化 铵 E c 。 H。 。 ( C H。 ) 。 NB r , 简称 C TAB, 天 津 科 密 欧 化 学 试 剂 有 限 公 司] ; 氢 氧 化 钠 ( N a OH,长 沙 市 湘 科 精 细 化 工 厂 ) ;罗 丹 明 B ( C 。 H。 C l N O。 , 简称 R h B, 天津 科 密 欧化 学试 剂 有 限

纳米TiO2的制备

纳米TiO2的制备

纳米TiO2的制备方法综述关键字:纳米TiO2制备均匀沉淀法实验操作前言:TiO2由于其粒子具有表面效应、量子尺寸效应、小尺寸效应、宏观量子隧道效应等性质使得其晶体具有优异的特性。

纳米Ti02在可见光区有较强的紫外光吸收能力、反射能力和散射能力,因此它可以广泛应用于防晒化妆品、光催化剂、高档涂料、人造纤维中。

由于其具有非常好的催化性能,可应用于空气净化、除臭杀菌、污水净化等领域。

同时Ti02纳米颗粒具有很好的亲油性和亲水性,可以制成防雾和自净化玻璃。

另外Ti02微粒具有良好的耐候性、耐腐蚀性、较高的热稳定性和化学稳定性、高比表面积、无毒、易分散、易烧结和低熔点等独特性能,又被广泛应用于功能陶瓷、油墨、高性能涂料、半导体材料、太阳能电池等诸多领域[1]。

目前,纳米Ti02的制备方法很多,一般可以分为物理法和化学法。

以下对Ti02纳米粒子的制备工艺进行了详细的分析和比较[2]。

1、物理法常用的物理法有气相冷凝法、粉碎法、真空冷凝法。

气相冷凝法是通过多种方法使物质挥发成气相,并经过特殊工艺冷凝成核得到纳米粉体。

由于使材料气化的方法有很多种,因此气相冷凝法的具体工艺也千差万别。

在气化和冷凝过程中须有保护性气氛,可以通过控制蒸发和冷凝的工艺条件来控制粉体的粒径。

气相蒸发沉积法、溅射法、蒸发-凝聚法、等离子法都是气相冷凝制备纳米粉体的重要方法,该方法制备的粉体纯度高,颗粒大小分布均匀,尺寸可控,适合于生产高熔点纳米金属粒子或纳米颗粒薄膜。

粉碎法,是利用球磨机转动和振动时的巨大能量,将原料粉碎为细小颗粒。

其制备纳米粉体的优点是工艺简单,易实现连续生产,并能制备出高熔点的金属和合金材料;缺点是其对设备要求很高,而且颗粒大小不均匀,容易引入杂质。

真空冷凝法用真空蒸发、加热、高频感应等方法使原料气化或形成等离子体,然后骤冷。

其特点纯度高、结晶组织好、粒度可控,但技术设备要求高。

2、化学法化学法在制备纳米Ti02粉体的方法中很重要,而目前研究最多的是气相法和液相法。

硝酸铵钙和微量元素沉淀_概述及解释说明

硝酸铵钙和微量元素沉淀_概述及解释说明

硝酸铵钙和微量元素沉淀概述及解释说明1. 引言1.1 概述本文旨在对硝酸铵钙和微量元素沉淀进行综述和解释说明。

硝酸铵钙是一种常见的无机化合物,其沉淀现象出现在多个领域。

而微量元素沉淀则指的是微量元素与其他物质形成沉淀过程。

本文将重点探讨硝酸铵钙沉淀和微量元素沉淀的定义、特性、形成机理以及应用领域,同时也会展开对它们共同沉淀效应的探讨。

1.2 文章结构本文分为五个部分:引言、硝酸铵钙沉淀、微量元素沉淀概述、硝酸铵钙和微量元素共同沉淀效应探讨以及结论与展望。

每个部分都有各自的子章节,以便于阐述相关主题内容。

1.3 目的本文的目的是对硝酸铵钙和微量元素沉淀进行全面而清晰地概述,并解释其背后的原理和作用机制。

通过对实验研究结果进行分析,我们还将探讨这两者之间可能存在的相互作用机制以及共同沉淀条件的优化方法。

最后,我们将总结当前研究成果,分析存在的问题和不足之处,并展望未来可能的研究方向和应用前景。

这样设计文章结构的目的是为了全面介绍硝酸铵钙和微量元素沉淀现象,并为读者提供清晰而逻辑严谨的阅读体验。

通过本文,读者将能够对硝酸铵钙和微量元素沉淀有更深入的了解,并掌握其在不同领域中的应用价值。

2. 硝酸铵钙沉淀2.1 定义与特性硝酸铵钙是一种常见的无机化合物,其化学式为NH4Ca(NO3)3。

它是由硝酸铵和硝酸钙反应生成的沉淀物。

硝酸铵钙主要以颗粒状形式存在,并且具有良好的溶解性。

在水中溶解度高,能迅速溶解成离子形式。

2.2 形成机理硝酸铵钙的形成是由硝酸铵和硝酸钙的反应引起的。

当这两种化合物在水溶液中相遇时,发生反应并产生无定形或结晶沉淀。

该反应可用以下方程式表示:NH4NO3 + Ca(NO3)2 →NH4Ca(NO3)3↓其中,"↓"表示产生沉淀。

2.3 应用领域硝酸铵钙沉淀在许多领域都有广泛的应用。

首先,在农业领域中,硝酸铵钙被用作肥料成分。

作为氮和钙源,它可以提供植物所需的营养元素,并促进植物的正常生长和发育。

17 沉淀法

17 沉淀法

定义
沉淀是物理环境的变化引起溶质的溶解度降低、 沉淀是物理环境的变化引起溶质的溶解度降低、 溶解度降低 生成固体凝聚物的现象。 生成固体凝聚物的现象。
沉淀的种类
盐析 等电点沉淀 有机溶剂沉淀 非离子型聚合物沉淀法 聚电解质沉淀法 高价金属离子沉淀法 热沉淀法
一、 蛋白质表面特性与其溶液稳定性
1、蛋白质表面特性:蛋白质是两性高 、蛋白质表面特性: 分子电解质, 分子电解质,主要由疏水性各不 相同的20种氨基酸组成 种氨基酸组成。 相同的 种氨基酸组成。 亲水性和疏水性: 亲水性和疏水性:
4、盐析用盐要求
根据盐析理论, ※ 根据盐析理论,离子强度对蛋白质等溶质的溶解度 起决定性影响。但在相同的离子强度下, 起决定性影响。但在相同的离子强度下,离子的种类 对蛋白质的溶解度也有一定程度的影响。 对蛋白质的溶解度也有一定程度的影响。一般的解释 提出) 是(Hofoneister提出)半径小的高价离子在盐析时作 提出 用较强,半径大的低价离子作用较弱。 用较强,半径大的低价离子作用较弱。 不同盐类对同一蛋白质的不同盐析作用, ※ 不同盐类对同一蛋白质的不同盐析作用,其Ks值有 值有 顺序为: 顺序为: 磷酸钾>硫酸钠>硫酸铵>柠檬酸钠> 磷酸钾>硫酸钠>硫酸铵>柠檬酸钠>硫酸镁
等电点沉淀操作
等电点沉淀的操作条件是:低离子强度, 等电点沉淀的操作条件是:低离子强度, pH=pI 。因此,等电点沉淀操作需在低离 因此, 子强度下调整溶液的pH至等电点 至等电点, 子强度下调整溶液的 至等电点,或在等 电点的pH下利用透析等方法降低离子强度 下利用透析等方法降低离子强度, 电点的 下利用透析等方法降低离子强度, 使蛋白质沉淀 由于一般蛋白质的等电点多在偏酸性范围内, 由于一般蛋白质的等电点多在偏酸性范围内, 故等电点沉淀操作中多通过加入无机酸( 故等电点沉淀操作中多通过加入无机酸(如 盐酸、磷酸和硫酸等)调节pH。 盐酸、磷酸和硫酸等)调节 。 等电点沉淀法一般适用于疏水性较大 疏水性较大的蛋白 等电点沉淀法一般适用于疏水性较大的蛋白 如酪蛋白)。 质(如酪蛋白)。

哲学方法论系列文库:沉淀法

哲学方法论系列文库:沉淀法

哲学方法论系列文库——沉淀法哲学是人类文化结晶,方法论在哲学中占有重要地位。

本文提供“沉淀法”的现代视点解读,以供大家了解。

沉淀法亦称“浓集法”。

检验粪便内某些寄生虫卵和寄生原虫包囊的一种方法。

可提高检出的阳性率。

通常分为:(1)自然沉淀法。

本法利用某些蠕虫卵和原虫包囊比重大于水,在水中易下沉的原理,取粪便加水搅拌成混悬液,用细铜筛或2-3层纱布过滤于锥形量杯中,并加清水,静置半小时后,倾去上层液,再加水,如此反复数次,直至上层液清晰为止,倾去上液,吸取沉渣,置于载玻片上,用显微镜检查。

(2)离心沉淀法。

原理与自然沉淀法基本相同。

为了缩短沉淀时间,改自然沉淀为离心沉淀。

将滤去粗渣的粪液,置于离心管中,以每分钟1,500-2,000转的速度离心1-2分钟,倾去上液,再加水,调匀,离心沉淀,如此反复数次,至上液澄清为止,取沉渣镜检。

(3)醛、醚离心沉淀法。

用离心沉淀法获得的沉渣中,加入适量10%甲醛固定5分钟后,再加入乙醚2-3毫升,塞紧离心管口,充分摇匀,再以慢速离心(每分钟1000转)5分钟,管内明显分为乙醚、粪渣、甲醛和沉淀物四层,弃去上面三层,取沉淀物镜检。

(4)汞碘醛离心沉淀法。

取粪便少许(约黄豆粒大),加适量汞碘醛液,搅匀,滤去粗渣,置于离心管中,再加入乙醚4毫升,充分摇匀,静置2分钟后,离心1分钟,管内明显分为乙醚、粪渣、汞碘醛及沉淀物四层,取沉淀物镜检。

此法以浓集、固定和染色三结合,适用于检查粪便中的原虫滋养体和包囊及蠕虫卵。

(5)消化沉淀法。

取10%氢氧化钠溶液5毫升于离心管中,加入粪便少许(黄豆粒大),充分搅匀后,静置1小时,取底层沉渣镜检。

沉淀法综述论文

沉淀法综述论文

盐析法分离纯化生物物质综述摘要:盐析作用被认为是盐夺去了溶解蛋白质的水所引起的。

蛋白质疏水部分附近的水分子结合成所谓窗格的规则网状结构,和疏水部分表面形成界面。

蛋白质分子的-COOH、-NH2和-OH都是亲水基团,这些基团与极性水分子相互作用形成水化层,包围于蛋白质分子周围形成1nm~100nm颗粒的亲水胶体。

亲水胶体在水中的稳定因素有两个:即电荷和水膜。

因为中性盐的亲水性大于蛋白质分子的亲水性,所以加入大量中性盐后,夺走了水分子,破坏了水膜,暴露出疏水区域,同时又中和了电荷,破坏了亲水胶体,蛋白质分子即形成沉淀。

关键词:盐析法;分离纯化;蛋白质;溶解度;离子强度正文:引言沉淀法是最经典的分离和纯化生物物质的方法,目前仍广泛运用在实验和工业中。

由于其浓缩作用常大于纯化作用,因而沉淀法常作为初步分离的一种方法,用于去除了菌体或细胞碎片的发酵液中沉淀出生物物质,然后然后再利用色层分离等方法进一步提高其纯度。

沉淀法由于其成本低、收率高(不会使蛋白质等大分子物质失活)、浓缩倍数高(可达10~50倍)、操作简单等优点,根据有关统计,大约80%的酶浓缩过程采用沉淀方法,其中用硫酸铵沉淀的约60%,有机溶剂乙醇沉淀的约35%。

沉淀法制得,平均收率约为87%。

沉淀法的优点使其成为生物下游加工过程中运用最广泛的纯化方法[1-2]。

沉淀法分离纯化的基本原理是根据不同物质在溶剂中的溶解度不同或热稳定性的差异而达到分离的目的,不同溶解度的产生是由于溶质分子之间及溶质与溶剂分子之间亲和力的差异而引起的,溶解度的大小与溶质和溶剂的化学性质及结构有关,溶剂组分的改变或加入某些沉淀剂以及改变溶液的pH值、离子强度和极性都会使溶质的溶解度产生明显的改变。

在生物大分子制备中最常用的几种沉淀方法是:⑴中性盐沉淀(盐析法):多用于各种蛋白质和酶的分离纯化;⑵有机溶剂沉淀:多用于蛋白质和酶、多糖、核酸以及生物小分子的分离纯化;⑶选择性沉淀(热变性沉淀和酸碱变性沉淀):多用于除去某些不耐热的和在一定pH 值下易变性的杂蛋白;⑷ 等电点沉淀:用于氨基酸、蛋白质及其他两性物质的沉淀,但此法单独应用较少,多与其他方法结合使用;⑸ 有机聚合物沉淀: 是发展较快的一种新方法, 主要使用PEG 聚乙二醇(Polyethyene glycol )作为沉淀剂。

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盐析法分离纯化生物物质综述摘要:盐析作用被认为是盐夺去了溶解蛋白质的水所引起的。

蛋白质疏水部分附近的水分子结合成所谓窗格的规则网状结构,和疏水部分表面形成界面。

蛋白质分子的-COOH、-NH2和-OH都是亲水基团,这些基团与极性水分子相互作用形成水化层,包围于蛋白质分子周围形成1nm~100nm颗粒的亲水胶体。

亲水胶体在水中的稳定因素有两个:即电荷和水膜。

因为中性盐的亲水性大于蛋白质分子的亲水性,所以加入大量中性盐后,夺走了水分子,破坏了水膜,暴露出疏水区域,同时又中和了电荷,破坏了亲水胶体,蛋白质分子即形成沉淀。

关键词:盐析法;分离纯化;蛋白质;溶解度;离子强度正文:引言沉淀法是最经典的分离和纯化生物物质的方法,目前仍广泛运用在实验和工业中。

由于其浓缩作用常大于纯化作用,因而沉淀法常作为初步分离的一种方法,用于去除了菌体或细胞碎片的发酵液中沉淀出生物物质,然后然后再利用色层分离等方法进一步提高其纯度。

沉淀法由于其成本低、收率高(不会使蛋白质等大分子物质失活)、浓缩倍数高(可达10~50倍)、操作简单等优点,根据有关统计,大约80%的酶浓缩过程采用沉淀方法,其中用硫酸铵沉淀的约60%,有机溶剂乙醇沉淀的约35%。

沉淀法制得,平均收率约为87%。

沉淀法的优点使其成为生物下游加工过程中运用最广泛的纯化方法[1-2]。

沉淀法分离纯化的基本原理是根据不同物质在溶剂中的溶解度不同或热稳定性的差异而达到分离的目的,不同溶解度的产生是由于溶质分子之间及溶质与溶剂分子之间亲和力的差异而引起的,溶解度的大小与溶质和溶剂的化学性质及结构有关,溶剂组分的改变或加入某些沉淀剂以及改变溶液的pH值、离子强度和极性都会使溶质的溶解度产生明显的改变。

在生物大分子制备中最常用的几种沉淀方法是:⑴中性盐沉淀(盐析法):多用于各种蛋白质和酶的分离纯化;⑵有机溶剂沉淀:多用于蛋白质和酶、多糖、核酸以及生物小分子的分离纯化;⑶选择性沉淀(热变性沉淀和酸碱变性沉淀):多用于除去某些不耐热的和在一定pH 值下易变性的杂蛋白;⑷ 等电点沉淀:用于氨基酸、蛋白质及其他两性物质的沉淀,但此法单独应用较少,多与其他方法结合使用;⑸ 有机聚合物沉淀: 是发展较快的一种新方法, 主要使用PEG 聚乙二醇(Polyethyene glycol )作为沉淀剂。

盐析沉淀法1、盐析法1.1 中性盐沉淀(盐析法)的定义在溶液中加入中性盐使生物大分子沉淀析出的过程称为"盐析"。

除了蛋白质和酶以外,多肽、多糖和核酸等都可以用盐析法进行沉淀分离,20%~40%饱和度的硫酸铵可以使许多病毒沉淀,43%饱和度的硫酸铵可以使DNA 和rRNA 沉淀,而tRNA 保留在上清。

盐析法应用最广的还是在蛋白质领域,已有八十多年的历史,其突出的优点是:①成本低,不需要特别昂贵的设备;②操作简单、安全;③对许多生物活性物质具有稳定作用。

1.2盐溶、盐析当中性盐加入蛋白质分散体系时可能出现以下两种情况:(1)“盐溶”现象—低盐浓度下,蛋白质溶解度增大(2)“盐析”现象—高盐浓度下,蛋白质溶解度随之下降,原因如下:a 、无机离子与蛋白质表面电荷中和,形成离子对,部分中和了蛋白质的电性,使蛋白质分子之间的排斥力减弱,从而能够相互靠拢;b 、中性盐的亲水性大,使蛋白质脱去水化膜,疏水区暴露,由于疏水区的相互作用导致沉淀。

[4]1.3盐析法沉淀蛋白质的基本原理盐析作用被认为是盐夺去了溶解蛋白质的水所引起的。

蛋白质疏水部分附近的水分子结合成所谓窗格的规则网状结构,和疏水部分表面形成界面。

蛋白质分子的-COOH 、-NH2和-OH 都是亲水基团,这些基团与极性水分子相互作用形成水化层,包围于蛋白质分子周围形成1nm ~100nm 颗粒的亲水胶体,削弱了蛋白质分子之间的作用力,蛋白质分子表面极性基团越多,水化层越厚,蛋白质分子与溶剂分子之间的亲和力越大,因而溶解度也越大。

亲水胶体在水中的稳定因素有两个:即电荷和水膜。

因为中性盐的亲水性大于蛋白质分子的亲水性,所以加入大量中性盐后,夺走了水分子,破坏了水膜,暴露出疏水区域,同时又中和了电荷,破坏了亲水胶体,蛋白质分子即形成沉淀。

[4]1.4离子强度对盐析过程的影响Cohn 经验公式IK S s -=βlog式中:S —蛋白质溶解度,mol/L ;I —离子强度(c:离子浓度;Z :离子化合价) β—盐浓度为0时,蛋白质溶解度的对数值。

与蛋白质种类、温度、pH 值有关,与盐无关;Ks —盐析常数,与蛋白质和无机盐的种类有关,与温度、pH 值无关。

[5] 以Cohn 经验公式为基础,可将盐析方法分为两种类型:①Ks 盐析法:在一定pH 和温度下,改变体系离子强度进行盐析的方法; ②β盐析法:在一定离子强度下,改变pH 和温度进行盐析;其中,Ks 盐析法由于蛋白质对离子强度的变化非常敏感,易产生共沉淀现象,因此常用于提取液的前处理;而β盐析法由于溶质溶解度变化缓慢,且变化幅度小,因此分辨率更高,常用于初步的纯化。

[3]1.5盐析用盐的选择在相同离子强度下,盐的种类对蛋白质溶解度的影响有一定差异,一般的规律为:半径小的高价离子的盐析作用较强,半径大的低价离子作用较弱。

不同盐类对同一蛋白质的不同盐析作用,其Ks 值的顺序为:磷酸钾>硫酸钠>硫酸铵>柠檬酸钠>硫酸镁选用盐析用盐的几点考虑:(1)盐析作用要强,即分离效果要好;(2)盐析用盐需有较大的溶解度,最好是低温时也有很高的溶解度;(3)盐析用盐必须是惰性,即不易引起变性,有稳定的与蛋白质结构作用;(4)来源丰富、经济。

[3]1.6盐析的操作方法最常用的是固体硫酸铵加入法。

欲从较大体积的粗提取液中沉淀蛋白质时,往往使用固体硫酸铵,加入之前要先将其研成细粉不能有块,要在搅拌下缓慢均匀少量多次地加入,尤其到接近计划饱和度时,加盐的速度更要慢一些,尽量避免局部硫酸铵浓度过大而造成不应有的蛋白质沉淀。

盐析后要在冰浴中放置一段时间,待沉淀完全后再离心与过滤。

在低浓度硫酸铵中盐析可采用离心分离,高浓度硫酸铵常用过滤方法,因为高浓度硫酸铵密度太大,要使蛋白质完全沉降下来需要较高的离心速度和较长的离心时间。

221i i Z c I ∑=各种饱和度下需加固体硫酸铵的量可由附录中查出。

硫酸铵浓度的表示方法是以饱和溶液的百分数表示,称为百分饱和度,而不用实际的克数或克分子数,这是由于当固体硫酸铵加到水溶液中去时,会出现相当大的非线性体积变化,计算浓度相当麻烦,为了克服这一困难,有人经过精心测量,确定出1升纯水提高到不同浓度所需加入硫酸铵的量,附录中的实验数据以饱和浓度的百分数表示,使用时十分方便。

1.7盐析影响因素1、蛋白质的浓度:中性盐沉淀蛋白质时,溶液中蛋白质的实际浓度对分离的效果有较大的影响。

通常高浓度的蛋白质用稍低的硫酸铵饱和度即可将其沉淀下来,但若蛋白质浓度过高,则易产生各种蛋白质的共沉淀作用,除杂蛋白的效果会明显下降。

对低浓度的蛋白质,要使用更大的硫酸铵饱和度,但共沉淀作用小,分离纯化效果较好,但回收率会降低。

通常认为比较适中的蛋白质浓度是2.5%~3.0%,相当于25 mg/mL~30mg/mL。

2、离子强度:各种蛋白质的沉淀要求不同的离子强度。

3、盐的性质:最有效的盐是多电荷阴离子。

4、pH值:一般说来,蛋白质所带净电荷越多,它的溶解度就越大。

改变pH 值可改变蛋白质的带电性质,因而就改变了蛋白质的溶解度。

远离等电点处溶解度大,在等电点处溶解度小,因此用中性盐沉淀蛋白质时,pH 值常选在该蛋白质的等电点附近。

5、温度:除对温度敏感的蛋白质在低温(4℃)操作外,一般可在室温中进行。

一般温度低蛋白质溶介度降低。

但有的蛋白质(如血红蛋白、肌红蛋白、清蛋白)在较高的温度(25℃)比0℃时溶解度低,更容易盐析。

蛋白质沉淀后宜在4℃放3 小时以上或过夜,以形成较大沉淀而易于分离。

盐析时,分子量较小的蛋白质逐步沉淀下来可能就值得怀疑。

具体的蛋白需要具体的摸索,当然,对肽来说,结论也是一样的。

[4]1.8 盐析曲线的制作如果要分离一种新的蛋白质和酶,没有文献数据可以借鉴,则应先确定沉淀该物质的硫酸铵饱和度。

具体操作方法如下:取已定量测定蛋白质或酶的活性与浓度的待分离样品溶液,冷至0℃~5℃,调至该蛋白质稳定的pH值,分6~10次分别加入不同量的硫酸铵,第一次加硫酸铵至蛋白质溶液刚开始出现沉淀时,记下所加硫酸铵的量,这是盐析曲线的起点。

继续加硫酸铵至溶液微微混浊时,静止一段时间,离心得到第一个沉淀级分,然后取上清再加至混浊,离心得到第二个级分,如此连续可得到6~10个级分,按照每次加入硫酸铵的量,在附录中查出相应的硫酸铵饱和度。

将每一级分沉淀物分别溶解在一定体积的适宜的pH缓冲液中,测定其蛋白质含量和酶活力。

以每个级分的蛋白质含量和酶活力对硫酸铵饱和度作图,即可得到盐析曲线。

2.盐析法与其他沉淀法在细胞提取物的进一步分离纯化的运用区别从细胞中提取出来的生物大分子是不纯净的,必须进一步分离纯化才能获得纯品。

在生物大分子制备工作中,分离纯化是比较复杂和重要的一个环节。

对于异类的物质,如提纯蛋白质和酶时混杂着核酸,提纯核酸时混杂着蛋白质或多糖,一般可用专一性酶水解、有机溶剂抽提、选择性分部沉淀等方法处理,小分子物质常在整个制备过程中多次液相与固相互相转化被分离或最后用透析方法除去。

而对同类物质,如酶和杂蛋白,RNA和DNA以及不同结构的蛋白质、酶、核酸之间的分离,情况则复杂得多,主要应用的方法有盐析法、有机溶剂沉淀法、等电点沉淀法、吸附法、结晶法、电泳法、超速离心法、柱层析法等。

其中盐析法、等电点法、结晶法用于蛋白、酶的提纯较多;有机溶剂抽提和沉淀用于核酸提纯较多;柱层析法、梯度离心法在蛋白质和核酸的提纯工作中应用均十分广泛。

3.总结盐析法由于具有:a、成本低,不需要特别昂贵的设备;b、操作简单、安全;c、不会引起蛋白质变性,经透析去盐后,能得到保持生物活性的纯化蛋白质的优点,使得盐析法在生物分离纯化中得到广泛的运用。

盐析沉淀法不仅是蛋白质初级纯化的常用手段,在某些情况下,盐析沉淀法也可用于蛋白质的高度纯化。

对于杂质含量较高的料液,可利用反复盐析沉淀并结合其他沉淀法,制备纯度较高的酶制剂。

当然,盐析法也有不足之处,他就是分辨率不够高,利用盐析沉淀初级纯化的产物中盐含量较高,一般在盐析沉淀后,需进行脱盐处理,才能进行后续的纯化操作。

除盐的方法有超滤、透析、凝胶过滤,将沉淀重新溶解后再用有机溶剂沉淀,树脂除盐。

参考文献:[1]俞俊棠.生化分离工程.北京:化学工业出版社,2001;[2]欧阳平凯.生物分离原理及技术.北京:化学工业出版社,1999;[3]储炬,李友荣.现代生物工艺学.上海:华东理工大学出版社,2007,P287-291;[4]日本生物工学会编.刘彬,曾祯,李馨译.生物工程.北京:科学出版社,2008,P435;[5]俞俊棠,唐孝宣,邬行彦,李友荣,金青萍.新编生物学工艺学(下册).北京:化学工业出版社,2003,P37。

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