人封闭抗体(BA)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
人凝溶胶蛋白(Gelsolin)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
人凝溶胶蛋白(Gelsolin)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围:7.8ng/ml-500ng/ml最低检测限:1.95ng/ml特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的人凝溶胶蛋白,且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期:6个月预期应用:ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中凝溶胶蛋白含量。
说明1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
概述凝溶胶蛋白(Gelsolin)是凝溶胶蛋白超家族的成员之一,是一种重要的肌动蛋白结合蛋白,其通过切断、封端肌动蛋白丝,或使肌动蛋白聚集成核等方式来控制肌动蛋白的结构。
凝溶胶蛋白除了在重组肌动蛋白丝中发挥作用以外,还在细胞运动、控制细胞程序性死亡等细胞活动中发挥重要的作用。
此外,肿瘤细胞中凝溶胶蛋白的表达量也发生变化。
凝溶胶蛋白的变异还是某些遗传疾病的基础。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗凝溶胶蛋白抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗凝溶胶蛋白抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的凝溶胶蛋白呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板(Assay plate):一块(96孔)。
2.标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3.样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
人可溶性CD40配体(sCD40L)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
人可溶性CD40配体(sCD40L)酶联免疫分析试剂盒使用说明书人可溶性CD40配体(sCD40L)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围:156pg/ml-10000pg/ml最低检测限:39pg/ml特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的人sCD40L,且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期:6个月预期应用:ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中sCD40L 含量。
说明1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗sCD40L抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗sCD40L抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的sCD40L呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板(Assay plate):一块(96孔)。
2.标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3.样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)7.辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)8.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
人封闭抗体BA试剂盒使用方法
人封闭抗体(BA)试剂盒使用方法检测范围:96T4ng/L - 120ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中封闭抗体(BA))含量。
实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中封闭抗体(BA)水平。
用纯化的人封闭抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中依次加入封闭抗体(BA),再与HRP标记的人封闭抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的封闭抗体(BA)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人封闭抗体(BA)浓度。
试剂盒组成1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
酶联免疫分析试剂盒说明书
人chemerin酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关液体中chemerin含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中chemerin水平。
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入chemerin抗原、生物素化的抗人chemerin抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的chemerin呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板:一块(96孔)2.标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为20,000pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释10,000pg/ml,5,000pg/ml,2,500pg/ml,1,250pg/ml,625pg/ml,312.5pg/ml,156pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0pg/ml,临用前15分钟内配制。
如配制10,000pg/ml标准品:取0.5ml20,000pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3.样品稀释液:1×20ml/瓶。
4.检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5.检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6.检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100ul),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如1ul检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7.检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B1:100稀释。
检测试剂盒(酶联免疫法)说明书
清洗去除非特异抗体。
抗人 IgM 的辣根过氧化物(HRP)结合物加入后在 37℃下孵育 1 小时。此步骤与之前形成的抗原抗 体复合物结合。
洗去未结合物。
加入 TMB 底物,底物由过氧化物酶水解,减少底 物的液体产生蓝色产物。
加入终止液,蓝色变为黄色并且在由 ELISA 读数 仪在波长为 450nm 上读取吸光度。 吸光度与结合到包被抗原的特异性抗体的水平成
公式计算:
COL=样本吸光度/COV COV:临界值 NC:阴性质控 COL:临界指数 3. 结果解释: 图 1:肺炎衣原体抗体与 450nm 下吸光度之间的关系
吸光度 (450nm) O.D<1.4XC
OV 1.4XCOV≤ O.D≤1.5×
COV
COL
<1.4
1.41.5
结果
阴性 没有检 测 IgM 抗体 临界值 低水 平的 IgM 抗体
1) 阳性质控:吸光度应在 450nm 波长下≥0.8。 2) 阴 性 质 控 : 阴 性 质 控 的 吸 光 度 平 均 值 在 450nm 波长下为 0.1< NC ≤ 0.4 2. 计算 COV 和 COL 值:
COV=NC×2 NC=在 450nm 波长下检测两个阴性质控吸光度的平均 值
人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)标准操作规程
1、 检验申请单独检验项目申请:人类免疫缺陷病毒抗体{缩写抗HIV (1+2)]测定。
临床医生根据需要提出检验申请。
2、 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml ,不抗凝,置普通试管中,或采用含分离胶的真空采血管。
也可采集血浆,用肝素、EDTA 或枸橼酸盐抗凝。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足:少于0.3ml 的全血标本,或少于0.1ml 的血清或血浆。
2.1.5.2对检测结果可能有干扰的标本,包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在置1-2h 后将标本离心分离出血清或血浆,避免溶血。
离心必须达到3000rpm 15min ,离心后的血清中不能含有颗粒物和微量纤维蛋白。
2.2.2标本保存时间:室温(15-25℃)下可稳定48h ,普通冰箱中(2-8℃)稳定7d ,在-20℃最多可保存4周。
避免反复冻融。
不可使用热灭活的标本。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号,置4-8℃冰箱内保存7d 。
2.3标本采集的注意事项采血前使受检者保持平静、松弛,避免剧烈活动。
医院检验科免疫室 体诊断试剂盒(酶联免疫法)标准操作规程 生效日期: 年 月 日版本:第1版第 页,共 页3.方法原理本实验采用HIV 特异性抗原gp160和gp36等包被微孔反应板,用gp36、gp41标记辣根过氧化物酶。
当待测标本中存在HIV 抗体时,该抗体和固化的抗原结合于反应板上,并进一步与酶结合物相结合,在TMB 底物参与反应的情况下,产生显色反应。
人HLA-DPB1酶联免疫法说明书
人HLA-DPB1酶联免疫酶联免疫分析分析分析试剂试剂盒使用说明书盒使用说明书盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围检测范围:: 96T0.8pg/ml-35pg/ml使用目的使用目的::本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中HLA-DPB1含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人HLA-DPB1水平。
用纯化的人HLA-DPB1抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入HLA-DPB1,再与HRP 标记的HLA-DPB1抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。
TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的HLA-DPB1呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人HLA-DPB1浓度。
试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液 20ml ×1瓶 7 终止液6ml ×1瓶 2 酶标试剂 6ml ×1瓶 8 标准品(64pg/ml ) 0.5ml ×1瓶 3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml ×1瓶 4 样品稀释液 6ml ×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A 液 6ml ×1瓶 11 封板膜 2张 6显色剂B 液6ml ×1/瓶12密封袋1个标本标本要求要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP )活性。
操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
32pg/ml 5号标准品 150µl 的原倍标准品加入150µl 标准品稀释液 16pg/ml 4号标准品 150µl 的5号标准品加入150µl 标准品稀释液 8pg/ml 3号标准品 150µl 的4号标准品加入150µl 标准品稀释液 4pg/ml 2号标准品 150µl 的3号标准品加入150µl 标准品稀释液 2pg/ml1号标准品150µl 的2号标准品加入150µl 标准品稀释液2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
人抗人类免疫缺陷病毒抗体ELISA试剂盒说明书
人抗人类免疫缺陷病毒抗体ELISA试剂盒说明书人抗人类免疫缺陷病毒抗体ELISA试剂盒说明书产品规格:96T/48T供应商:上海樊克生物有限公司本产品只用于科研实验人抗人类免疫缺陷病毒抗体ELISA试剂盒说明书,小鼠(LR/Ob-R)ELISA试剂盒,苗条素受体elisakit elisa试剂盒上海樊克生物供应!人抗人类免疫缺陷病毒抗体ELISA试剂盒说明书Liquid type specimen:Including serum, plasma, urine, pleural effusion and ascites, cerebrospinal fluid, cell culture supernatant, etc..1) serum:Room temperature blood natural coagulation 10-20 minutes after the centrifuge about 20 minutes (2000-3000 turn / min). Carefully collect the supernatant. In the process of preservation, if there is precipitation, should be re - centrifugal.2) plasma:According to the requirements of the specimens of choice of EDTA, sodium citrate or heparin as an anticoagulant, 10-20 minutes after mixing, centrifuged for 20 minutes or so (2000-3000 r.p.m.). Carefully collect the supernatant. In the process of preservation, if there is precipitation, should be re - centrifugal.3) urine:Collecting with sterile tubes. Centrifugal 20 minutes or so (2000-3000 turn / min). Carefully collect the supernatant. In the process of preservation, if there is precipitation, should be re - centrifugal. Pleural effusion, cerebrospinal fluid with reference to this practice.4) cell culture supernatant:To collect the ingredients for the detection of secretory components. Centrifugal 20 minutes or so (2000-3000 turn / min). Carefully collect the supernatant. Detection of cell components, with PBS (PH7.2-7.4) diluted cell suspension, the cell concentration reached 1 million /ml or so. Through repeated freezing and thawing, in order to make the cell damage and release of intracellular components. Centrifugal 20 minutes or so (2000-3000 turn / min). Carefully collect the supernatant. In the process of preservation, if there is precipitation, should be re - centrifugal.5) tissue specimen:After cutting the specimen, weigh the weight. Add a certain amount of PH7.4, PBS. Rapid freezing with liquid nitrogen. The specimens were melted and still maintained at 2-8. Add a certain amount of PBS (PH7.4), with a hand or a homogenate of the specimen homogenate full. Centrifugal 20 minutes or so (2000-3000 turn / min). Carefully collect the supernatant. Be detected after a repackaging, remaining frozen spare.人抗人类免疫缺陷病毒抗体ELISA试剂盒说明书国产/进口Elisa试剂盒,96T/48TElisa试剂盒, 96T/48Telisakit价格人抗人类免疫缺陷病毒抗体ELISA试剂盒说明书Elisa试剂盒操作步骤:3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
人封闭抗体(BA)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书.
人封闭抗体(BA)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中封闭抗体(BA)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人封闭抗体(BA)水平。
用纯化的人封闭抗体包被微孔板,制成固相抗原,往包被抗原的微孔中依次加入封闭抗体(BA),再与HRP标记的封闭抗体结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB 在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的封闭抗体(BA)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人封闭抗体(BA)浓度。
试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:135ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存20倍浓缩洗涤液20ml×1瓶23ml×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
人的抑制素A(INH-A)酶联免疫吸附测定试剂盒 说明书
Uscn Life Science Inc.Wuhan网址: 电话:+862784259552传真:+862784259551E-mail:***************人的抑制素A(INH-A)酶联免疫吸附测定试剂盒使用酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明说明说明书书产品编号:E0395Hu规格:96T本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!预期应用本酶联免疫吸附测定试剂盒运用双抗体夹心ELISA 法定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中INH-A 含量。
本试剂盒试剂盒未提供但需自备的设备及试剂未提供但需自备的设备及试剂1、450±10nm 滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热)2、单道和多道微量加液器及吸头3、稀释样品的EP 管4、蒸馏水或去离子水5、吸水纸6、盛放洗液的容器试剂盒的储存及有效期所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。
请注意,收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶液A 、检测溶液B 以及96孔板保存于-20。
开封后的酶标板要密封加干燥剂后保存于-20,避免潮湿。
有效期为6个月。
实验原理将INH-A 抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中依次加入标准品和标本,其中的INH-A 与连接于固相载体上的抗体结合,洗板之后加入生物素化的INH-A 抗体,将未结合的生物素化抗体洗净后,加入HRP 标记的亲和素,再次彻底洗涤后加入底物(TMB)显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的INH-A呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(值),计算样品浓度。
标本的采集与与保存标本的采集1、血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置30分钟或4过夜,然后1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20或-80保存,但应避免反复冻融。
2、血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-81000g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20或-80保存,但应避免反复冻融。
人肺炎衣原体抗体CpnAb酶联免疫分析试剂盒使用方法
人肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab)酶联免疫分析试剂盒使用方法检测范围:96T4pg/ml-120pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab)水平。
用纯化的人肺炎衣原体(Cpn)抗原包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab),再与HRP标记的人肺炎衣原体(Cpn)抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的人肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab)浓度。
试剂盒组成1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
人免疫球蛋白GIgG酶联免疫分析
人免疫球蛋白G(IgG)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T2.5μg/ml -80μg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白G(IgG)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人免疫球蛋白G(IgG)水平。
用纯化的抗-IgG抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白G(IgG),再与HRP标记的羊抗人抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白G(IgG)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人免疫球蛋白G(IgG)浓度。
试剂盒组成标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl (样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
人布鲁氏菌病抗体酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
测量各孔的光密度(OD 值)。 注: 1. 每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及 2NH2SO4。
测量时先用此孔调 OD 值至零。 2.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内。 洗板方法 手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸, 酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少 0.4ml 注入孔内,浸泡 1-2 分钟,根据需要, 重复此过程数次。 自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。 特异性
品 100ul,注意不要有气泡,轻轻混匀,酶标板加上盖,37℃反应 120 分钟。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。 3. 每孔加检测溶液 A 工作液 100ul,37℃,60 分钟。洗板 3 次,350ul/每孔,甩干。 4. 每孔加检测溶液 B 工作液 100ul,37℃,60 分钟,洗板 5 次,甩干。 5. 依序每孔加底物溶液 90ul,37℃避光显色 30 分钟(此时肉眼可见标准品的前 3-4 孔有明显
人布鲁氏菌病抗体酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
产品编号:E2191h
本试剂盒仅供体外研究使用!
预期应用 ELISA 法定量测定人血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物上清或其它相关液体中布鲁氏菌
分析法测定标本中布鲁氏菌病抗体水平。用纯化的抗体 包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入布鲁氏菌病标准品或受检样本、生 物素化的抗人布鲁氏菌病抗体、HRP 标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物 TMB 显色。TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中 的布鲁氏菌病抗体呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。 试剂盒组成及试剂配制 1. 酶联板:一块(96 孔) 2. 标准品(冻干品):2 瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至 1ml,盖好后静置 10 分钟以上,
人抗子宫内膜抗体EMAb酶联免疫分析试剂盒使用方法
人抗子宫内膜抗体(EMAb)酶联免疫分析试剂盒使用方法检测范围:96T150pg/ml-4000pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中抗子宫内膜抗体(EMAb)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗子宫内膜抗体(EMAb)水平。
用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中依次加入抗子宫内膜抗体,再与HRP 标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB 在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的抗子宫内膜抗原呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人抗子宫内膜抗体(EMAb)浓度。
试剂盒组成标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
人肾损伤分子酶联免疫分析试剂盒使用说明书
人肾损伤分子酶联免疫分析试剂盒使用说明书使用目的本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中肾损伤分子-1(Kim-1)含量。
实验原理人肾损伤分子酶联免疫分析试剂盒使用说明书应用双抗体夹心法测定标本中人肾损伤分子-1(Kim-1)水平。
用纯化的人肾损伤分子-1(Kim-1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肾损伤分子-1(Kim-1),再与HRP标记的肾损伤分子-1(Kim-1)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的肾损伤分子-1(Kim-1)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人肾损伤分子-1(Kim-1)浓度。
试剂盒组成1 30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7 终止液6ml×1瓶2 酶标试剂6ml×1瓶8 标准品(160ng/L)0.5ml×1瓶3 酶标包被板12孔×8条9 标准品稀释液1.5ml×1瓶4 样品稀释液6ml×1瓶10 说明书1份5 显色剂A液6ml×1瓶11 封板膜2张6 显色剂B液6ml×1/瓶12 密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
80ng/L 5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液40ng/L 4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液20ng/L 3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液10ng/L 2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液5ng/L 1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
人白细胞分化抗原40配体酶联免疫分析试剂盒使用方法
人白细胞分化抗原40配体酶联免疫分析试剂盒使用方法检测范围:48T30ng/L - 2000ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中白细胞分化抗原40配体含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞分化抗原40配体水平。
用纯化的人x40L抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入40L,再与HRP标记的40L抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB 在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的40L呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度,通过标准曲线计算样品中人白细胞分化抗原40配体浓度。
试剂盒组成1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
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人封闭抗体(BA)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用
特异性:本试剂盒可检测人封闭抗体(BA),且与其他相关抗体无交叉反应。
有效期:6个月
预期应用:ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中封闭抗体(BA)含量。
说明
1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
试剂盒组成及试剂配制
1.酶联板(Assay plate):一块(96孔)。
2.酶结合物(Conjugate):2×6ml/瓶。
3.样品稀释液(Sample Diluent):2×6ml/瓶。
4.阳性对照(Positive Control):1×0.5ml/瓶。
5.阴性对照(Negative Control):1×0.5ml/瓶。
6.底物溶液A(Substrate A):1×7ml/瓶。
7.底物溶液B(Substrate B):1×7ml/瓶。
8.浓洗涤液(Wash Buffer):1×15ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释20倍。
9.终止液(Stop Solution):1×7ml/瓶。
需要而未提供的试剂和器材
1.标准规格酶标仪
2.高速离心机
3.电热恒温培养箱
4.干净的试管和Eppendof管
5.系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器
6.蒸馏水,容量瓶等
标本的采集及保存
1.血清:全血标本请于室温放置2小时或室温过夜后于1000x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8°C1000x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
操作步骤
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。
如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.加样:分别设空白孔,不加任何溶液;设阴性对照孔2孔,加阴性对照100μl;设阳性对照孔2孔,加阳性对照100μl;余孔加100μl样本稀释液,然后直接加待测样本5μl。
注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃放置30分钟。
2.弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,200μl/每孔,甩干。
3.每孔加酶结合物100μl(空白孔除外),充分混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃放置20分钟。
4.弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,200μl/每孔,甩干。
5.依序每孔加底物溶液A和B各50μl,37℃避光显色10分钟。
6.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
终止液的加入顺序应尽量与底物液的加
入顺序相同。
为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
7.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
在加终止液后15分钟以内进行检测。
注:
1.用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。
2.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及2N H2SO4。
测量时先用此孔调OD值至零。
3.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
4.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。
5.建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
洗板方法
手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟。
根据需要,重复此过程数次。
自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
计算
1.目测法:比临界对照显色深的样本为阳性,比临界对照显色相同或显色浅的为阴性。
2.酶标仪测定:判断值(OD值)=阴性对照平均OD值×2.1,样品OD值大于判断值为阳性,小于等于为阴性。
阴性对照平均OD值小于0.05时,按0.05计算。
注意事项
1.当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。
2.洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。
3.一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请最后乘以稀释倍数。
5.在配制检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。
6.底物请避光保存。
7.不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。