HPLC法测定三七中三七素的含量
三七素提取工艺及检测方法的优化
热带作物学报2019, 40(11): 2255 2260Chinese Journal of Tropical Crops三七素提取工艺及检测方法的优化段绍凤1,2,3，陈庚1,2,3，闫静1,2,3，覃忠明3，张广辉1,2，梁艳丽1,2,3*1. 云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心，云南昆明650201；2. 云南农业大学云南省药用植物生物学重点实验室，云南昆明650201；3. 云南农业大学农学与生物技术学院，云南昆明650201摘要本研究以三七（Panax notoginseng）植株及其产品和近缘种为研究对象，采用L9(34)正交试验对三七素的提取工艺进行了优化，然后利用HPLC法检测三七素含量，并对各样品中的三七素含量进行了比较分析。
结果表明：优化后的三七素提取条件为超纯水、料液比1∶20（g/mL），提取1次（10 min）；三七素在三七花蕾中的含量最高，其次是根状茎和主根，但是三七茎叶中也有较高含量的三七素，说明三七花蕾和茎叶均可作为三七素的提取原料；在三七产品中三七花的三七素含量最高，达到3.33%，其次是剪口（根状茎）、筋条（侧根）和须根；但三七素的含量与三七个头大小（头数）并无明显的相关性；在三七近缘种姜状三七（P. zingiberensis）和野三七（P. vienamensis var. fuscidiscus）主根、珠子参（P. japonicus var. major）根状茎中的三七素含量显著低于三七主根三七素含量，也显著低于三七其他部位的三七素含量，说明三七是最佳的三七素来源植物。
三七素的含量主要受到物种和部位的影响，与产品规格无关。
本文所建立的三七素提取方法和HPLC检测方法，能够快速简便、稳定可靠测定样品中三七素含量；并可为三七素相关标准的建立奠定基础，为三七的综合利用开发提供依据。
关键词三七；三七素；HPLC；超声提取中图分类号R284 文献标识码 AOptimization of Extraction Process and Detection Method of Dencichine DUAN Shaofeng1,2,3, CHEN Geng1,2,3, Y AN Jing1,2,3, QIN Zhongming3, ZHANG Guanghui1,2, LIANG Yanli1,2,3* 1. National & Local Joint Engineering Research Center on Germplasms Utilization & Innovation of Chinese Medicinal Materials in Southwest, Yunnan Agricultural University, Kunming, Yunnan 650201, China; 2. Yunnan Provincial Key Laboratory of Medicinal Plant Biology, Yunnan Agricultural University, Kunming, Yunnan 650201, China; 3. College of Agriculture and Biotechnology, Yunnan Agricultural University, Kunming, Yunnan 650201, ChinaAbstract The extraction process of dencichine in Panax notoginseng was optimized by the L9(34) orthogonal test, and the content of dencichine was determined by HPLC. The optimized extraction condition for dencichine was extracted once with ultrapure water at solid-to-liquid ratio of 1∶20 (g/mL) for 10 min. Flower bud had the highest dencichine content, followed by rhizome, main roots and leaves. The content of dencichine in flower buds was 3.33%. There was no significant correlation between the content of dencichine and the rhizom size. The content of dencichine in the rhizome of P. zingiberensis and P. vienamensis var. fuscidiscus was significantly lower than that of the main root of P. notogin-seng. It was also significantly lower than that of other parts of P. notoginseng, indicating that P. notoginseng was the best source of dencichine. The content of dencichine was mainly affected by species and parts, and had nothing to do with product specifications. The extraction method and HPLC detection method established in this paper could quickly and easily determine the content of dencichine.It can lay a foundation for the establishment of related standards of den-cichine and provide a basis for the comprehensive utilization and development of P. notoginseng.Keywords Panax notoginseng; dencichine; HPLC; supersonic extractionDOI 10.3969/j.issn.1000-2561.2019.11.021收稿日期 2019-02-19；修回日期 2019-05-14基金项目 国家自然科学基金项目（No. 8176140700）。
高效液相色谱法测定三七片中三七皂苷R1和人参皂苷Rg1的含量
俞 坚1, 刘 杭 1, 王京霞2
( 1. 杭州市第六人民医院, 浙江 杭 州 310014; 2. 浙江省中医院, 浙江 杭州 310006)
摘 要: 目 的: 用 R P - H PLC 法测 定 三七 片 中三 七 皂 苷 R1 和 人 参皂 苷 R g1 的 含量。 方 法: 以 ZORBAX
2. 3 对照品溶液的制备 精 密称取 80 干燥至恒 重的三 七皂苷 R 1 2. 55mg、人参皂苷 R g1 13. 1mg 对照品, 置 50mL 量瓶中, 加甲醇溶解并稀释至 刻度, 使成每毫升含有三七皂 苷 R 1 0. 051mg、人参 皂 苷 R g1 0. 262m g 的 混 合对 照 品溶 液。
V o.l 26 N o. 2 Feb. 2 0 0 8
表 1 系统适 应性试验结果
1. 32% , 人参皂苷 R g1 R SD = 0. 93% 。 ( n = 5)。
被测组分 保留时间 ( m in) 理论塔板数 相邻两峰分离度
三七皂苷 R1
4. 068
5861. 7
人参皂苷 R g1
5. 237
关键词: 三 七片; 三七皂苷 R 1; 人参皂苷 Rg1; R P- HPLC; 含量测定
中图分类号: R284. 1
文献标识码: A 文章编号: 1673- 7717( 2008) 02- 0421- 02
Determ ination o f No tog insenoside R1 and G insenoside Rg1 in Sanq i T ab le ts by RP - H PLC
中
效以三七皂苷 R1计, 理 论塔 板数不 应低 于 5000。结 果被 华
测组分可 在 6m in内出完, 二元等度洗脱全程为 0 ~ 15m in。
不同干燥条件的三七中三七素含量的测定
不同干燥条件的三七中三七素含量的测定SONG Jianping;LOU Jie;ZHANG Zhixin;LIANG Jiao【摘要】三七素是三七中的特殊氨基酸,能明显缩短凝血时间.将三七采用几种常用的方法进行干燥加工,利用HPLC对三七素的含量进行分析.结果表明三七素的含量未随干燥温度的升高呈线性变化,40℃和冷冻干燥三七中的三七素含量最低,50℃烘干处理的三七中三七素含量最高.【期刊名称】《文山学院学报》【年(卷),期】2019(032)003【总页数】4页(P6-8,12)【关键词】三七;三七素;含量【作者】SONG Jianping;LOU Jie;ZHANG Zhixin;LIANG Jiao【作者单位】【正文语种】中文【中图分类】R284三七[Panax notoginseng（Burk.）F.H.Chen]为五加科人参属多年生草本植物，是我国传统珍贵中药材，为云南省文山州道地药材。
三七饮片具有“散瘀止血，消肿定痛、益气活血的功效。
用于跌扑肿痛、内外出血、气虚血瘀、脉络瘀阻、胸痹心痛、中风偏瘫，气虚体弱；软组织挫伤、出血性疾病、高血压、冠心病、脑卒中、高脂血症、糖尿病血管病变、免疫功能低下见上述证候者”[1]。
传统中医认为三七有生、熟用药之分及“生打熟补”，生三七用于止血祛瘀、消肿止痛，熟三七主要用于补血、补气。
有学者研究认为，三七的生熟之分主要是炮制过程中三七中的各种化学成分含量、结构、比例均发生改变而引起[2]。
三七素是三七中存在的一种特殊的水溶性氨基酸，其化学名为β-草酰-L-α，β-二氨基丙酸，1981年日本学者首次从三七中发现将其命名为三七素。
药理研究证明，三七素能明显缩短凝血时间、凝血酶原时间和凝血酶时间，提高血小板数和黏附率，增强血小板的功能，起到止血的作用[3]。
三七的干燥方法传统上采用自然晾晒，近年来随着产量增加采用快速烤房干燥的三七量已占绝大多数。
对三七中皂苷在不同干燥条件下的变化研究较多，但对三七素的影响尚未见报道。
HPLC法测定三七水煎液中三七皂苷R1、人参皂苷Rg-和Re的含量
的 质 量控 制 标 准 。
关 键 词 ： 七 水 煎 液 ； 七 皂 苷 Ｒ ； 参 皂 苷 Ｒ ｌ 人 参 皂 苷 三 三 ｌ人 ｇ；
Ｒｅ； ＰＩＣ Ｈ
中 图分 类号 ： ９ ７ ２ Ｒ ２ ． 文献标识码 ： Ａ 文 章 编 号 ： ０ ４２ ０ （ ０ ８ ０ — ０ ６０ １ ０ — ４ ７ ２ ０ ） ２０ ７ —２
于 ２３ｎ 检 测三 七皂苷 Ｒ 、 ０ ｍ １人参 皂苷 Ｒ １ 人 参 皂苷 Ｒ 的 含 ｇ和 ｅ 量 。结果 三 七皂苷 Ｒ 在 ０１４ ．４ （ 一０９９ ）人 参皂 ｌ ．４￣２６ ｇ ｒ ．９ ， ５ 苷 Ｒ 在 ０ １～１ （ ．Ｏ ２ ｒ＝０９９７ ， 参 皂 苷 Ｒ 在 ０ １～ １４ ．９ ）人 ｅ ．５ ．
Ｅ ］ 谭生建 ， ８ 闵庆 旺 ， 培让 ， ． 效 液 相 色 谱 法 测定 益 气 聪 陈 等 高 明丸 中葛 根 素 含量 ［］药 物分 析 杂 志 ，９７ １ （） １． Ｊ． １９ ，７ １ ：７
ｆ 稿 日期 ： ０ ７０ —６ 收 ２ ０ —８ ０ ）
色谱 纯 （ ｉｈ ｒＳ ｉｎｉｃ ； 为去 离 子 重蒸 水 ； 余 Ｆｓ ｅ ｃ ｔ ｉ） 水 ｅ ｆ 其
参 皂苷 Ｒ 批 号 １ ０ ０ —Ｏ ３ ２ 和人参 皂 苷 Ｒ （ ｇ（ １７ ３２ Ｏ ２ ） ｅ 批 号 １ ０ ４ —０ ４ ４ 对 照 品 （ 国药 品生 物 制 品 检 定 １ ７ ５２ ０ １ ） 中 所 ） 三 七药 材 （ ； 市售 ， 自陕西 ， 购 云南文 山产 ） 乙腈 为 ；
摘要 ： 目的 建 立三 七 水 煎液 中三 七 皂苷 类 成 分 的 含量 测 定 方 法 。方 法 采 用高 效液 相 色谱 法 ， 乙腈一 （０： Ｏ 为 流动 相 ， 以 水 ２ ８）
反相离子对色谱法测定三七中三七素含量
反相离子对色谱法测定三七中三七素含量建立反相离子对色谱法测定三七中三七素含量。
通过超声提取样品中的三七素，并采用四丁基氢氧化铵离子对试剂与反相高效液相色谱法结合直接测定三七素含量。
确定超声提取优化条件为物液比为1∶20，连续超声提取2次，每次15min，3500r·min-1，离心15min。
三七不同生长年限、产地、部位、以及同属植株中三七素含量均有差异：一年生三七茎叶三七素含量最高；红河州样品三七素含量高于文山州；真空冷冻干燥方式优于其他加工方式；三七高于其他同属植株。
该检测方法操作简便，分离度好，稳定性好，适用于三七素含量直接测定，为三七中三七素的质量标准控制提供参考。
标签：三七；三七素；高效液相色谱法；离子对试剂；含量测定三七素（dencichine）是三七中止血活性的主要成分，它是一种特殊的非蛋白质氨基酸，相对分子质量小，极性大，水溶性好[12]。
三七素最早被发现于山黧豆中，同时人参、西洋参种属植物中也存在[34]。
美国FDA在收载的三七药材中，已将三七素作为重要质量控制指标进行定性检测。
但是目前国内现行药品标准，如《中国药典》2010年版、《云南省饮片标准》2005年版对三七的质量标准控制主要集中在皂苷[78]，缺乏三七素定性和定量的评价。
因此，采用适当的分析测试方法，对三七中三七素的含量进行系统地分析测定，有利于三七药材的质量控制，有利于三七资源更好地开发和利用。
本文通过超声提取工艺最佳优化条件进行三七素提取，采用反相离子对色谱法系统、全面考察了三七不同生长年限、产地、部位、同属植株以及加工方式三七素含量的影响，为三七中三七素的质量标准控制提供参考。
1材料LC20A高效液相色谱仪（日本岛津公司）；FLB200型万能高速粉碎机（上海菲力博食品机械有限公司）；优普系列超纯水器UPTI20T（成都超纯科技有限公司）；CP114电子天平（上海奥豪斯仪器有限公司）；TD25WS台式低速离心机（湖南湘仪实验室仪器开发有限公司）。
三七粉检验报告
三七粉检验报告1. 引言三七粉作为一种常见的中药材，被广泛用于医药行业。
为了确保三七粉的质量和安全性，本文对三七粉进行了全面的检验和分析。
本报告旨在提供关于三七粉的详细检验结果，以及对三七粉质量的评估。
2. 检验方法实验使用了以下检验方法来评估三七粉的质量：2.1 外观检验对三七粉的外观进行了检查和描述，包括颜色、形状、有无异物等。
2.2 水分含量检验使用干燥烘箱法测定样品的水分含量，以判断样品的干燥程度和储存稳定性。
2.3 药品标识的检验对三七粉的相关药品标识进行了检验，包括产品名称、成分、制造商等信息。
2.4 含量测定使用高效液相色谱法(HPLC)测定三七粉中有效成分的含量，以评估其药效。
2.5 重金属含量检验使用原子吸收光谱法(AAS)检测三七粉中重金属元素的含量，以评估其安全性。
3. 检验结果及分析3.1 外观检验结果经过外观检验发现，三七粉呈灰白色细粉状，无明显异味，并没有发现任何异物。
3.2 水分含量检验结果对三七粉的水分含量进行了测定，结果显示水分含量为7.8%，符合国家标准要求。
3.3 药品标识的检验结果经过对三七粉药品标识的检验发现，产品名称标明为纯正三七粉，制造商信息齐全，说明书中也详细列出了成分和用法用量。
3.4 含量测定结果通过HPLC测定，发现三七粉中三七总皂苷含量为3.2%，达到国家药典规定的标准。
3.5 重金属含量检验结果对三七粉中重金属元素进行了检测，结果显示镉、铅、汞、砷的含量均在国家标准允许范围内，符合安全要求。
4. 结论通过对三七粉的全面检验和分析，得出以下结论：•三七粉外观无异物，干燥程度良好，符合标准要求；•三七粉水分含量符合标准要求，适合长期储存；•三七粉药品标识完整，产品名称、成分、制造商信息清晰明确；•三七粉中三七总皂苷含量达到国家药典规定的标准；•三七粉中重金属元素含量符合国家标准，安全可靠。
综上所述，本次三七粉的检验结果显示其质量良好，符合相关标准要求。
三七皂苷含量标准
三七皂苷含量标准三七，又称田七、人参三七，是五加科人参属植物，具有丰富的药用价值。
三七皂苷是三七的主要活性成分，具有抗炎、镇痛、抗氧化、抗肿瘤等多种生物活性。
因此，三七皂苷含量的测定对于评价三七质量具有重要意义。
本文主要对三七皂苷含量的测定方法及其标准进行研究。
一、三七皂苷含量的测定方法1. 液相色谱法（HPLC）液相色谱法是目前最常用的三七皂苷含量测定方法。
该方法具有灵敏度高、分离效果好、重复性好等优点。
常用的检测器有紫外检测器（UV）和蒸发光散射检测器（ELSD）。
根据三七皂苷的化学性质，可以选择适当的色谱柱和流动相进行分离和检测。
2. 薄层色谱法（TLC）薄层色谱法是一种常用的定性分析方法，也可以用于三七皂苷含量的初步测定。
该方法操作简单，但灵敏度和分离效果相对较低。
常用的显色剂有碘化铋钾、香草醛-硫酸等。
3. 毛细管电泳法（HPCE）毛细管电泳法是一种新型的分离分析方法，具有分离效果好、操作简单、运行成本低等优点。
该方法可以用于三七皂苷组分的分离和含量测定，但目前仍处于研究阶段。
二、三七皂苷含量标准三七皂苷含量标准是评价三七质量的重要依据。
目前，国内外尚无统一的三七皂苷含量标准。
不同国家和地区根据当地的气候、土壤、生长条件等因素，制定了相应的质量标准。
例如，中国药典规定三七中人参皂苷Rb1、Rg1和Re的含量分别不低于0.8%、0.5%和0.3%。
三、三七皂苷含量标准的影响因素1. 品种差异：不同品种的三七，其皂苷含量存在显著差异。
例如，云南三七的皂苷含量通常高于云南三七。
因此，在制定三七皂苷含量标准时，需要考虑到品种的差异。
2. 生长环境：生长环境对三七皂苷含量也有显著影响。
例如，土壤肥力、光照时间、降水量等因素都会影响三七的生长和皂苷含量。
因此，在制定三七皂苷含量标准时，需要考虑到生长环境的差异。
3. 采收时间：三七的生长周期较长，不同时间段采收的三七，其皂苷含量存在显著差异。
一般来说，种植后2-3年的三七，其皂苷含量高。
HPLC法测定三七总皂苷提取废液中三七素的含量
２ １ 色谱条件 ．
Ｄｋ １ 谱柱 （ ｔ １０ ． ｉ Ｃ８ ｍａ 色 ５ｐ ５ ×４ ６ｍｍ） 乙 ｍ， ，
腈 一水 （ ０：７ ） 流 速 １ ｍＬ ｍｉ， 温 ２ ℃， 测 波 长 ３ ０， ／ ｎ柱 ５ 检
１ 仪 器与试药 高效 液 相 色 谱 仪 （ 安 Ｓ ｍ ｔ ； 孔 滤 膜 （ 径 ： 戴 ｕ ｍｉ 微 ） 孔
Ｏ ２ ｍ） 分析天平（ ．５ ； 上海天平仪器厂） 三七 总皂苷提取废液 ； 浓缩物 由云南植物 药业有 限公 司提 供 ； 三七素 对照 品为 自制 （ Ｌ ＨＰ Ｃ自身对照法检测 纯度 ＞９ ． ）含 量测定 用试 剂为 ８Ｏ ； 色谱 纯 ， 其它试剂均为分析纯 。 ２ 方 法与结果
三七 总皂苷提取废液为三七总皂苷提 取水洗多糖工 序过
程 中产生的废液 ， 水洗多糖 是三七 提取工艺 中的必 须工序 ， 该
工序产生的水 洗多 糖废液 量多 ， 而且 富含 营养 物质 （ ＯＤ值 Ｃ
高） 直接排放会给 环境造成 很大 污染 ， ， 如何将 该废 液加 以利
释至刻度 ， 取一定体积 的溶液稀释至一定浓度 即可 。
图 １ 对照品色谱 图
一
文 章 编 号 ：０ ７ ２ ４ （０ ０ ０ －０ ６ － ０ １０ － ３９ ２ １ ） ２ ０ １ ２
三七素（ ｅｃ ｈｎ ） 又名 田七氨酸ｌ ， ｄ ｎｉ ｉｅ ， ｃ ＿ 是五加科 人参属 １ ］ 名贵 中药材三七中的主要止血活性成分 。三七素首次于 １８ ９１ 年 由小 营 卓 夫 提 取 分 离 并 命 名 为 ｄ ｎｉ ｉｅ 其 化 学 名 为 ｅｃ ｈｎ ， ｃ ｐ 一草酰基一Ｉ ，一二氨基 丙酸 ， ｐ 一ａ 鲁岐 等嘲 又相继对 其做
三七素提取工艺及检测方法的优化
三七素提取工艺及检测方法的优化段绍凤; 陈庚; 闫静; 覃忠明; 张广辉; 梁艳丽【期刊名称】《《热带作物学报》》【年(卷),期】2019(040)011【总页数】6页(P2255-2260)【关键词】三七; 三七素; HPLC; 超声提取【作者】段绍凤; 陈庚; 闫静; 覃忠明; 张广辉; 梁艳丽【作者单位】云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南昆明 650201; 云南农业大学云南省药用植物生物学重点实验室云南昆明650201; 云南农业大学农学与生物技术学院云南昆明 650201【正文语种】中文【中图分类】R284三七素是三七[Panax notoginseng (Burk.) F. H. Chen]中的一种非蛋白游离氨基酸，化学名称为β-N-草酰-L-α, β-二氨基丙酸（β-N-Oxalyl-L- α, β-diaminopropionic acid, β-ODAP）。
三七素具有止血活性成分，通过增加体内血小板数量止血，并缩短凝血和出血的时间，被广泛用于外伤出血治疗等，是云南白药等多种传统药方的有效成分[1-2]。
低剂量三七素可以止血，高剂量则引发神经毒性，而人畜过度食用会导致不可逆瘫痪[3]。
三七素存在于五加科人参属植物中，如三七[P. notoginseng (Burk.) F. H. Chen]、人参（P. ginseng）、西洋参（P. quinquefolium）等[4-7]，还存在于山黧豆（Lathyrus sativus）中。
三七素含量的检测方法，包括氨基酸自动分析仪[8-9]、柱前衍生化HPLC法[10-13]、HPLC-ELSD法[14]、直接高效液相色谱法[15-16]、毛细管区带电泳法[17]、多孔石墨化碳柱分析法[18]、荧光衍生后薄层扫描[19]等。
在上述方法中氨基酸自动分析仪、HPLC-ELSD法、毛细管区带电泳法中存在仪器昂贵、应用不广泛、分析过程复杂、特异性强等问题，特别是用毛细管区带电泳法时会存在无关的峰，对三七素测定有一定的影响。
工业三七药渣中三七素的提取纯化及其止血药理活性研究
工业三七药渣中三七素的提取纯化及其止血药理活性研究李双;杨晓涵;李怀宇;陈丽玲;刘艳红;王华晶;秦华炎;陈彤【摘要】为考察工业三七药渣中是否含有三七素,探究提取、分离纯化三七素的方法,并考察三七素的止血药理活性.实验以提取过三七总皂苷的工业三七药渣为原料,采用水提醇沉法,过滤沉淀得滤液,回收滤液中的乙醇得粗提液,粗提液经001 ×7阳离子树脂柱分离,薄层鉴别法检测洗脱液中是否含有三七素,收集与三七素对照品显相同斑点的洗脱液,经丙酮结晶,冷冻干燥得三七素供试品;高效液相色谱法测定三七素供试品中三七素的含量;玻片法测定三七素供试品的凝血时间.建立的高效液相色谱法测定三七素含量,该方法准确度、精密度、稳定性均良好,三七素供试品中三七素含量为59.03％;小鼠腹腔注射不同剂量的三七素供试品与阳性组比较,均能显著缩短凝血时间.建立的高效液相色谱法可用于三七素供试品含量的测定;三七素供试品能显著缩短凝血时间;三七素供试品中三七素含量反推到工业三七药渣中含量为0.72％;采用价格低廉的001 ×7阳离子交换树脂柱分离纯化三七素,此方法简单易行,成本低廉,适合大工业生产.综上,从工业三七药渣中提取纯化三七素具有良好的综合利用前景.【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2019(031)004【总页数】6页(P663-668)【关键词】三七;三七素;001 ×7阳离子树脂;HPLC;玻片法【作者】李双;杨晓涵;李怀宇;陈丽玲;刘艳红;王华晶;秦华炎;陈彤【作者单位】昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室,昆明650500;四川省凉山州中西医结合医院,凉山615000;大理护理职业学院,大理671006;昆明医科大学临床技能中心,昆明650500;昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室,昆明650500;昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室,昆明650500;昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室,昆明650500;昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室,昆明650500【正文语种】中文【中图分类】R284.2;R965三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen为五加科人参属植物，是我国珍贵的中药材[1]。
快速高分离度液相色谱(RRLC)法测定复方丹参片中三七的含量
快速高分离度液相色谱(RRLC)法测定复方丹参片中三七的含量摘要：目的：采用高效液相色谱法（HPLC）和高分离度快速液相色谱法（RRLC）测定复方丹参片中三七含量。
方法：采用HPLC法（药典方法）和高分离度快速液相色谱法（RRLC），Eclipse plus C18 3.5μm，4.6*100mm柱，流动相为乙腈和水梯度洗脱；流速：1.0mL/min ；检测波长：203nm；柱温：25℃。
结果：《中国药典》2010年版第一增补本中，复方丹参片中三七含量测定用HPLC（高效液相色谱）法，此法分析需要高性能的系统和很长的分析时间。
利用RRLC（高分离度快速液相色谱）法分析简便、快速，高效、节省溶剂和时间，线性关系良好。
结论： RRLC法简便可行，分析时间短，重复性好，可用于复方丹参片中三七的4种有效成分的含量测定。
关键词：复方丹参片；三七；含量测定； RRLC复方丹参片中用RRLC进行三七含量测定研究的文献并不多,其他研究主要集中在对三七药材的HPLC法研究和UPLC（超高效液相色谱）法研究。
本文采用高效液相色谱法（HPLC）和高分离度快速液相色谱法（RRLC）测定复方丹参片中三七含量。
建立测定复方丹参片中三七含量的RRLC（高分离度快速液相色谱）法。
1.仪器和试药1.1 仪器Agilent1260高效液相色谱仪(YX001)，附紫外检测器；MS205DU天平（METTLER TOLEDO）；AL-204天平（METTLER TOLEDO）； KQ5200DB型数控超声波清洗器（昆山市超生仪器有限公司）；微量无机除热原型超纯水机（型号：SC082664）；1.2 试药乙腈为色谱纯，甲醇为分析纯，水。
2.方法与结果2.1 色谱条件色谱柱：Eclipse plus C18 3.5μm，4.6*100mm柱流速：1.0ml/min柱温：30℃；紫外检测波长：203nm流动相：乙腈为流动相A ,以水为流动相B ,按下表进行梯度洗脱。
三七有效成分含量测定的研究进展
三七有效成分含量测定的研究进展标签：三七；有效成分；含量测定三七又名田七，为五加科植物三七Panax notoginseng(Burk)F.H .Chen的干燥根，具有散瘀止血、消肿镇痛等功效，历版药典均有收载。
现代药理研究表明，三七具有增强机体功能、增加冠脉血流量、扩张血管、降低心肌耗氧量、抑制血小板聚集、降低血粘度等作用；对三七的现代药学分析表明，人参皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1是三七的主要有效成分，对三七药材或以三七为主药的药品进行质量控制时，多采用测定以上几种有效成分含量的方法。
近年来随着中药现代化的要求和药物分析手段的提高，对三七有效成分含量测定的方法有了新的变化，现总经如下。
1三七中药材有效成分含量测定的研究进展1.1高效液相色谱法近年来，高效液相色谱以其快速、高效、分离效能高、重现性好、结果准确可靠等优势，被广泛应用于三七药材的含量测定。
其中流动相多采用梯度洗脱；在线检测方法多以测定样品的紫外吸收为主；检测波长多为203nm；检测对象主要是样品中的人参皂苷R1、人参皂苷Rg1人参皂苷Rb1等有效成分。
但从文献来看，对三七药材有效成分的提取方法各有不同，采用的色谱柱变化较多，因梯度洗脱方法存在检测时间过长的缺点(检测时间从25min到60min不等)，因此也有用非紫外检测器的方法。
1.1.1以人参皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1为指标、流动相梯度洗脱、在线紫外检测的高效液相色谱法2005版《中国药典》(一部)改变了2000版中薄层扫描法测定三七有效成分含量的方法，以高效液相色谱法测定有效成分含量。
该方法主要是用流动相梯度洗脱的方法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为乙腈(A)：水(B)，检测波长为203nm。
流动相梯度变化如表l。
药典方法中选用的对照品为人参皂苷Rm、人参皂苷Rb，和三七皂苷R1。
供式品制备方法：取药材粉末(过4号筛)0.6g，精密称定，精密加入甲醇50ml，称定重量，放置过夜，置80℃水浴上保持微沸2h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀、滤过、取续滤液，即得。
HPLC法测定三七中人参皂苷Rg1和三七皂苷R1的含量
ＨＰＬＣ法 测 定 三七 中人 参 皂苷 Ｒｇ 和 三七 皂苷 Ｒ 的含 量
李华 丽 ，王 小龙 ，李梅 荣 ，叶晓 亚 （河 南省 平顶 山市食 品药 品检验 所 中药 室 平顶 山 ４６７０００）
摘 要 ：目的 建 立高效液相 色谱 法测定三七 中人参皂苷 Ｒｇｌ和三七 皂苷 Ｒ１的含量 的方 法。方 法 采用高效液相 色谱法 ，色谱 柱分析柱为 Ｃｌ８ 柱 ，流动相 为 乙腈－０．０５％磷 酸溶液 ，检 测波长是 ２０３ｎｍ。 结 果 高效液相色谱 法测定三七 中人 参皂苷 Ｒｇ１和三七皂苷 Ｒ１的含 量的方法线性 关 系较好 ，三七 中人参 皂苷 Ｒｇ】和三七皂苷 Ｒｌ含量平均加样 回收率分别 为 ９９．１２％和 ９９．８７％（ｎ＝６）。结 论 高效液相 色谱 法分 离较 好 ，结 果
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Ｓｔｒａｉｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ Ｖｏ１ ３０ Ｎｏ．５ ２０１８
准确 性 高 。 关 键 词 ：高效液相 色谱 法；三七 ；人参皂苷 Ｒｇ１；Ｙ－Ａｚ皂苷 Ｒｌ 中 图分 类 号 ：Ｒ９２７ 文 献标 识 码 ：Ａ 文 章 编 号 ：１００６—３７６５（２０１８）－０５－０９１５２－００８６－０３
三七 属于人参 类植物 三七 的干燥 根 ，是 我 国著 名 的中药 材 ，并 于明代李 时珍《本草 纲 目》有 相关记 录… 。对 于三七 中 人 参皂苷 Ｒｇ．和三七皂苷 Ｒ 的含量测 定在 中国药典 中有 所
在 四种介质 中的 Ｆ值 均相近 ，介质 的不 同不影 响呋塞米 的峰
试验结果表 明，三批 中试样品在 ｐＨ ５．８磷 酸盐缓冲液介 质 中溶 出的 ＲＳＤ均小 ５％ ，批 间溶 出均一性 良好 ，各批次样 品 的溶出趋势基本一致 。 自制 品与参 比制剂在 １５ｍｉｎ内 的溶 出 均 大 于 ８５％ ，溶 出 相 似 。 ３ 讨 论 ３．１ 对溶 出装置 （蓝法 、浆法 ）进行 考察 ，结果 本 品在 转篮 中 胶囊壳盐酸介质 中产 生粘 连 ，导致溶 出缓慢 ，因此选用浆法 测 定 。
高效液相色谱法(HPLC)测定三七药材中成分含量研究
高效液相色谱法（HPLC）测定三七药材中成分含量研究发表时间：2018-11-30T10:34:06.100Z 来源：《健康世界》2018年21期作者：曹本男[导读] 高效液相色谱法（HPLC），已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。
山西省运城市食品药品检验所 044000摘要：高效液相色谱法（HPLC），已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。
近年来，在药品成分含量的测定中也得到广泛应用。
本文针对采用高效液相色谱法对三七中各成分含量进行测定的方法做一阐述和分析，以期为三七药材的检验及质量控制提供参考。
关键词：高效液相色谱法；HPLC；三七；含量测定高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。
高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析[1]。
1三七来源及性状三七为五加科植物三七的干燥根及根茎。
支根习称“筋条”，根茎习称“剪口”。
主根呈类圆锥形或圆柱形。
表面灰褐色或灰黄色。
顶端周围有瘤状突起。
体重，质坚实，击碎后皮部与木部常分离，断面灰绿色、黄绿色或灰白色。
气微，味苦回甜。
筋条呈圆柱形，上端直径约0.8cm，下端直径约0.3cm。
剪口呈不规则的皱缩块状及条状，表面有数个明显的茎痕及环纹，断面中心灰白色，边缘灰色[2]。
2质量标准2.1《中国药典》2000年版一部三七项下规定含量测定：照薄层色谱法进行扫描，本品含人参皂苷Rb1（C54H92O23）和人参皂苷Rg1（C4d-172014）的总量不得少于3.8％[3]。
2.2《中国药典》2005年版一部三七项下新增根茎入药（1）增订：水分：用水分测定法测定，不得过14.0％；总灰分：不得过6.0％；酸不溶性灰分：不得过3.0％；浸出物：用熟浸法测定，本品含甲醇浸出物不得少于16.0％。
HPLC-ELSD法测定通迪胶囊中三七皂苷R_1和人参皂苷Rg_1、Rb_1的含量
摘 要： 目的 ： 用 Ｈ Ｌ — Ｅ Ｓ 法测 定通迪胶 囊 中三七 皂苷 Ｒ 和 人参 皂苷 Ｒ Ｒ 的含 量 。方 法 ： 采 ＰＣ ＬＤ 】 ｇ、 ｂ 色谱 柱 Ｄａ ｎ ｉＣ ８ １０ ４ ６ ｉ ｍｏ ｓ 】（５ ｍｍ Ｘ ． ｍｍ， Ｉ ， ｌ ５ｘ ｍ） 流动 相 ： 乙腈 一水 ， 度 洗 脱 ０～５ ｎ 乙腈 ２ ％ ～ ５ ； 梯 ｍｉ ， ０ ２％ ５～２ ｍｉ ，乙 腈 ２ ％ ～４ ％ ； 速 ： ． ｍ ・ｍｉ ～； 温 ： ５ ； 移 管 温 度 ： ０ ； 气 流 速 ０ ｎ ５ ５ 流 １Ｏ Ｌ ｎ 柱 ２℃ 漂 ７℃ 载 ２ ０ ｍｉ～。结果 ： 七皂 苷 Ｒ ． Ｌ・ ｎ 三 和人 参 皂 苷 Ｒ Ｒ 样 量 分 别在 ０ ３—１ ５ （ ０ ９ ９ ） １５ ｇ、 ｂ进 ． ． ｇ ｒ＝ ． ９ ７ ， ． ７ ５ （ ＝ ．９８ ． ｇ ｒ ０ ９ ９ ）和 １５～ ． ｇ ｒ ０ ９ ９ ． ７ ５ （ ＝ ． ９ ９）范 围 内呈 良好 的 线性 关 系 ； 均 回 收 率 （ ６ 分 别 为 平 ｎ＝ ） １ １８ 、０ ． ％ 、０ ． ％ ； Ｓ ０ ． ％ １２ １ １ ３ ６ Ｒ Ｄ分 别 为 １６ 、． ％ 、 ． ％ 。结 论 ： Ｐ Ｃ—Ｅ Ｓ ． ％ ２ １ １８ ＨＬ Ｌ Ｏ法 结 果准 确 ， 于操 便
酶类溢 出 ， 致 细 胞 溶 解 。Ｔ Ｆ—ｏ 直 接 抑 制 细 胞 生 导 Ｎ 【
［ ］ 苏 云明， ２ 章艳 ， 崔艳 ， 蝙蝠 葛酚性 碱对 Ｂ Ｐ 等． Ｘ Ｃ一３荷瘤小 鼠细胞 相 亡 基 因 Ｐ ６表 达 的影 响 ［ ］ 中医 药 学 报 ，０ ０，８ ２ ：５— ６ １ Ｊ． ２１ ３ （ ）３ ３ ． ［ ］ 杨成 ． 瘤坏 死 因子与肿 瘤治 疗 ［ ］ 滨 州 医学 院学报 ，９ ７ ２ ３ 肿 Ｊ． １９ ，０
RP-HPLC法测定三七血伤宁胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1以及人参皂苷
临床医药文献杂志Journal of Clinical Medical2019 年第 6 卷第 17 期2019 Vol.6 No.17189RP-HPLC 法测定三七血伤宁胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1以及人参皂苷Rb1的含量周晓妮，黄荣娟，雷肖琳（桂林三金药业股份有限公司，广西 桂林 541000）【摘要】目的 使用高效液相色谱法检测三七血伤宁胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1以及人参皂苷Rb1的含量。
方法 采用C18色谱柱，以乙腈-水为流动相，检测波长为203 nm ，流速为1.0 ml/min 。
结果 三七皂苷R1在0.02096～0.4193 mg/mL 范围内线性关系良好，r=0.9999；人参皂苷Rg1在0.07712～1.5424 mg/mL 范围内线性关系良好，r=0.9999；人参皂苷Rb1在0.07244～1.4488 mg/mL 范围内线性关系良好，r=0.9999。
结论 本方法操作简单、方法可靠，结果准确、灵敏度高，重复性好，可作为该产品质量控制的方法。
【关键词】高效液相色谱法；三七血伤宁胶囊；三七皂苷R1；人参皂苷Rg1；人参皂苷Rb1【中图分类号】R259 【文献标识码】A 【文章编号】ISSN.2095-8242.2019.17.189.01三七血伤宁胶囊是桂林三金药业股份有限公司独有产品，由三七、重楼、制草乌、大叶紫珠等制成的中成药。
具有止血镇痛，祛瘀生新的功效。
标准收载于《中国药典》2015版一部，其含量测定项下仅测定人参皂苷Rg1及人参皂苷Rb1的含量。
本文对供试品溶液的处理方法进行优化，并增加了三七皂苷R1的含量测定。
1 仪器与试药Agilent 1260高效液相色谱仪，Waters 2695高效液相色谱仪。
电子天平：梅特勒-托利多，XS205。
低速台式大容量离心机：金坛市医疗仪器厂，TDL-5。
超声波清洗器：昆山市超声仪器有限公司，600 W ，40 KHz 。
QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定三七中26种真菌毒素
QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定三七中26种真菌毒素引言三七是一种中草药，被广泛应用于中医药领域，具有明显的药用价值。
由于种植和储存条件的不同，三七很容易受到真菌毒素的污染，这对人体健康造成了巨大的威胁。
对三七中真菌毒素的快速、准确的检测显得尤为重要。
本文将介绍一种新的分析方法——QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法，通过该方法可以同时测定三七中的26种真菌毒素，具有非常重要的意义。
一、QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法概述QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法是一种新兴的分析方法，该方法结合了QuEChERS样品处理技术、超高效液相色谱（UHPLC）和串联质谱（MS/MS）技术，可以实现对复杂样品中多种目标分析物的快速、高效分析。
QuEChERS是一种样品前处理技术，最初是用于农产品中农药残留的分析，后来逐渐应用于其他领域。
超高效液相色谱是一种高效的分离方法，可实现对多种目标分析物的同时测定。
串联质谱是一种高灵敏度、高精确度的分析技术，可以对目标分析物进行定性和定量分析。
通过将这三种分析技术结合在一起，QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法可以实现对三七中的多种真菌毒素的快速、准确检测。
二、三七中的真菌毒素及其健康风险三七生长过程中容易受到真菌的侵染，一些真菌会在三七中产生毒素，例如赭曲霉、青霉素等。
这些真菌毒素对人体健康产生严重影响，例如引起食物中毒、免疫系统异常、肝肾损伤等。
及时检测和控制三七中的真菌毒素含量对保障人体健康至关重要。
三、QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法在三七中真菌毒素检测中的应用通过QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法，可以在短时间内实现对三七中多种真菌毒素的同时检测，提高了检测的效率和准确度。
该方法在样品前处理、分析过程和结果分析等方面有以下优点：1. 样品前处理简便、高效。
QuEChERS样品前处理技术将固体样品与有机溶剂（如乙腈）混合，通过离心分离，可获得高纯度的提取液。
丹七片中4种成分的HPLC定量测定
丹七片中4种成分的HPLC定量测定韩桂茹;张少杰;姚振林;杨蕾【期刊名称】《中成药》【年(卷),期】2005(027)011【摘要】目的:为制定丹七片(丹参,三七)的质量控制方法.方法:采用HPLC法分别同时测定了丹参素与原儿茶醛,三七皂苷R1与人参皂苷Rg1的含量.结果:通过方法学考察,丹参素钠的进样量在0.164～3.28μg(r=0.999 99),原儿茶醛的进样量在0.013～0.52μg(r=0.999 999),三七皂苷R1的进样量在0.2～6μg(r=0.999 97),人参皂苷Rg1的进样量在0.824～24.72μg(r=0.999 96)范围内,呈良好的线性关系.丹参素钠的平均回收率为98.34%(n=9),RSD为2.03%;原儿茶醛的平均回收率为100.64%(n=9),RSD为2.96%;三七皂苷R1的平均回收率为98.97%(n=9),RSD 为2.81%;人参皂苷Rg1的平均回收率为98.93%(n=9),RSD为0.57%.结论:方法简便、准确、重现性好.可准确控制丹七片的质量.【总页数】5页(P1259-1263)【作者】韩桂茹;张少杰;姚振林;杨蕾【作者单位】河北省药品检验所,河北,石家庄,050011;河北医科大学药学院;河北以岭医药研究院;河北以岭医药研究院【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.RP-HPLC法分离和定量测定未变性的乳清蛋白成分 [J], 朱鑫鑫;刘晓辉;赵征;于景华2.HPLC测定丹七片中丹酚酸B的含量 [J], 黄湘;刘丹;文萍3.HPLC法同时定量测定养血清脑颗粒中7个主要成分 [J], 陈晓鹏;鄂秀辉;夏忠庭;张学玉;张兰兰;周水平;朱永宏;刘昌孝4.RP-HPLC定量测定冬虫夏草中5种核苷类成分 [J], 张占蓬;黄宏南;李晓明;林宏琳;周芬霞5.坤乳宁颗粒HPLC指纹图谱及2种成分定量测定 [J], 孙志勇; 薛刚强; 张阳; 苑子林; 高淑丽因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
三七止血和活血活性部位的筛选
三七止血和活血活性部位的筛选黄加文;李倩;杨和金;袁名睿;肖茹月;李晋玉;苏钛;王自梁【期刊名称】《云南中医学院学报》【年(卷),期】2018(041)006【摘要】目的对三七不同洗脱部位成分进行分析,并筛选止血与活血活性部位.方法采用70％乙醇回流提取,大孔树脂柱划段制备样品;紫外分光光度法测定总皂苷含量,HPLC法测定三七素和5种主要皂苷的含量;小鼠断尾止血和玻片凝血实验观察样品的止血作用;肾上腺素—胶原蛋白诱导小鼠体内血栓形成实验观察样品的抗血栓作用;高分子右旋糖酐致大鼠急性血瘀实验观察样品的活血散瘀作用.结果制备得到总提物、水洗脱部位、30％乙醇洗脱部位、70％乙醇洗脱部位的三七总皂苷的含量分别为:32.51％、0％、52.39％、83.61％;三七素集中在水洗脱部位(2.78％);总提物、三个洗脱部位均能明显缩短出血时间与凝血时间,但水洗脱部位缩短凝血时间的作用最显著;总提物和30％乙醇洗脱部位能明显提高小鼠偏瘫恢复率;总提物、30％和70％乙醇洗脱部位能明显降低大鼠血液在不同切变率下的黏度.结论在本实验设计与条件下,三七素仅存在于水洗脱部位中,三七皂苷在30％和70％乙醇洗脱部位中均有分布,但种类与含量存在较大差异;水洗脱部位为三七止血主要活性部位;30％乙醇洗脱部位为三七抗血栓主要活性部位;30％和70％乙醇洗脱部位为三七活血散瘀主要活性部位.【总页数】7页(P12-18)【作者】黄加文;李倩;杨和金;袁名睿;肖茹月;李晋玉;苏钛;王自梁【作者单位】云南省药物研究所,云南昆明650111;云南白药集团创新研发中心,云南昆明650111;云南省中药和民族药新药创制企业重点实验室,云南昆明650111;云南省药物研究所,云南昆明650111;云南白药集团创新研发中心,云南昆明650111;云南省中药和民族药新药创制企业重点实验室,云南昆明650111;云南省药物研究所,云南昆明650111;云南白药集团创新研发中心,云南昆明650111;云南省中药和民族药新药创制企业重点实验室,云南昆明650111;云南省药物研究所,云南昆明650111;云南白药集团创新研发中心,云南昆明650111;云南省中药和民族药新药创制企业重点实验室,云南昆明650111;云南省药物研究所,云南昆明650111;云南白药集团创新研发中心,云南昆明650111;云南省中药和民族药新药创制企业重点实验室,云南昆明650111;云南省药物研究所,云南昆明650111;云南白药集团创新研发中心,云南昆明650111;云南省中药和民族药新药创制企业重点实验室,云南昆明650111;云南省药物研究所,云南昆明650111;云南白药集团创新研发中心,云南昆明650111;云南省中药和民族药新药创制企业重点实验室,云南昆明650111;云南省药物研究所,云南昆明650111;云南白药集团创新研发中心,云南昆明650111;云南省中药和民族药新药创制企业重点实验室,云南昆明650111【正文语种】中文【中图分类】R284.1;R285.5【相关文献】1.三七止血活血机理的研究Ⅰ．不同剂量三七对小鼠凝血系统的作用 [J], 杜力军;何卫世;国月英;马茹2.三七止血活血机理的研究——Ⅲ·三七对凝血活素所致小鼠体内血栓形成的抑制作用 [J], 杜力军;国月英;马立炎;於兰;孙绍美;金文3.三七止血活血机理的研究III不同剂量三七对小鼠脑膜微循环的影响 [J], 杜力军;马立焱;於兰;孙绍美;金文4.马勃止血活性部位的筛选研究 [J], 隋新;李鹏;谢洋;付东;张晓臣5.小白花地榆止血作用活性部位筛选研究 [J], 孟令锴;李阳;于得泓;李洁因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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表 3. 不同采收期三七中三七素的含量 (n=3)
No 采收期 1 三月 2 四月 3 五月 4 六月 5 七月 6 八月 7 九月 8 十月 9 十一月
含量(%) 0.567 0.573 0.440 0.601 0.599 0.760 0.664 0.738 0.681
表 4. 不同规格三七中三七素的含量 (n=3)
6 文山乐诗冲 0.382 28
7 文山乐诗冲 0.390 29
8 文山乐诗冲 0.430 30
9
蒙自名就
0.523 31
10 蒙自名就
0.465 32
产地 马关大栗树 马关马白 马关马白 砚山阿猛 砚山阿猛 砚山者腊 砚山者腊 砚山干河 砚山江那 砚山郊址
含量(%) 0.599 0.448 0.479 0.498 0.489 0.589 0.571 0.567 0.525 0.481
21 马关八寨
0.328 43
22 马关大栗树 0.325 44
砚山盘龙 砚山盘龙 砚山盘龙 广南马街 广南马街 文山坝心 文山坝心 文山马塘 广西靖西 广西靖西 广西靖西 广东南雄
0.480 0.433 0.494 0.503 0.393 0.333 0.526 0.417 0.453 0.398 0.425 0.457
HPLC 法测定三七中三七素的含量
董婷霞 1 赵奎君 2 崔秀明 3 詹华强 1
1 香港科技大学生物技术研究所 香港九龙 2 北京军医学院 北京 100071 3 云南省 文山州三七研究所 云南文山 663000
三七为五加科植物三七 Panax notoginseng (Burk.) F. H. Chen 的干燥根 是著名的 云南 白药 的主要组成药物 具有较好的散淤止血 消肿止痛的功效 用于咳血 吐血 衄血 便 血 外伤出血等 其止血的有效成分为三七素 是一种特殊的氨基酸 1 因此 三七素是中药 三七质量评价的重要指标之一 有关三七素的含量测定仅见高效薄层扫描法 1 因易受实验条 件影响 误差较大 为更准确控制三七的质量 我们建立了三七素的 HPLC 含量测定方法 方 法简便 快速 稳定 可靠 同时 我们用该方法对不同产地 不同采收期 不同规格的三七 和三七的不同部位中三七素的含量进行了测定 以为三七的生产和质量评价提供科学的依据 1 仪器 试剂 样品 1 1 仪器 WatersTM600E 高效液相色谱仪 WatersTM2487UV 检测器 WatersTMMillennium32 色 谱工作站, BRNASON5200 超声仪 1 2 试剂 乙腈 HPLC 级, 甲醇 分析级 购自 sigma 公司 美国 , 标准品三七素
2
根茎
3
側根
4 纤状根
5
花
6 茎和叶
含量(%)
0.523 0.881 0.409 0.886 0.856 0.371
3.讨论 3 1 三七素是三七中能准确表达三七生物活性的重要有效成分之一 有关三七活性成分的含 量测定方法的研究 以往多集中在皂苷类成分上 而对三七素含量测定的研究却极少[1] 这很 不利于全面准确地评价三七的内在质量 本文中所建立的 HPLC 分析方法能快速 准确地测定 三七中三七素的含量 3 2 我们测定了产于云南 广西 广东的 44 件三七样品中的三七素含量 全国 90%的三七分 布在云南省文山州 其中又主要分布于文山 砚山和马关 3 县 因此 我们重点分析了文山 19 个样品 马关 6 个样品 砚山 10 个样品 结果表明 产地对三七素含量有一定的影响 其变 化幅度在 0.311%~ 0.615% 之间 但变化规律不明显 3 3 在不同采收期的三七中 三七素的含量以 8,9,10 三个月的含量较高 这和三七传统的采 收期是一致的 3 4 在不同规格的三七中 160 头和 200 头三七素的含量最高 其他规格含量变化不明显 说 明三七素的含量与三七传统的商品规格并不成正相关 3 5 对三七不同部位中三七素的含量测定表明 根茎 纤状根和花的含量均高于块根 说明 这些部位均有较高的开发利用价值 [参考文献] 1 郑虎占 董泽宏 佘靖. 中药现代研究与应用. 第一卷. 北京 学苑出版社 1997. 202~206.
11 蒙自老寨
0.512 33
12 文山老回龙 0.557 34
13 文山平坝
0.449 35
14 文山平坝
0.405 36
15 文山平坝
0.407 37
16 文山新街
0.311 38
17 文山新街
0.615 39
18 文山小街
0.390 40
19 文山小街
0.373 41
20 马关浪桥
0.385 42
dencichine 由云南白药研究所高崇昆研究员惠赠 1 3 样品 不同采收期: 三年生三七 3 月至 11 月采收, 每月采收一次 不同产地 在三七采收 期分别于云南文山 砚山 马关 广西靖西 广东华雄采收 不同规格 于云南文山同一地块 采收 所有样品均采收 30 株 清洗干燥后分别取根 根茎等药用部位粉碎过 80 目筛备用 实 验样品均经过崔秀明研究员鉴定 2 实验部分 2 1 色谱条件 分析柱 WatersTM Carbolydrate Caryridge Column C18 (5.9 150nm) 流动相 95%缓冲液 A (0.001% 醋酸)- 5% 缓冲液 B (46% 乙腈 10% 甲醇 46%水) 流速 1.0ml/min; 检测波长 213 nm;柱温 室温 2 2 稳定性考察 精密称取三七素对照品 1.0 mg, 用水溶解定容于 1 mL 容量瓶中 在 1 d 内重 复进样 5 次 按上述色谱条件进行测定 结果峰面积积分值的平均值为 34250670 其 RSD 为 0.95% 结果表明三七素在 24 小时内稳定性良好 2 3 线性关系考察 精密称取三七素对照品 1 mg 加水定容于 1 ml 容量瓶中 精密吸取 10.0, 30.0, 50.0, 70.0, 90.0 µL 进样 按上述色谱条件测定峰面积积分值 以三七素量为纵坐标 峰面 积积分值为横坐标 绘制标准曲线 计算回归方程 Y = 2.8 10- 7 X + 0.0072, r = 0.9996 实验 表明三七素在 10.0 ~ 90.0 µg 具有良好的线性关系
No 规格 1 20 头 2 30 头 3 40 头 4 60 头 5 80 头 6 120 头 7 160 头 8 200 头
含量 (%) 0.647 0.611 0.627 0.603 0.540 0.492 0.702 1.175
表 5. 不同部位三七中三七素的含量(n=3)
No 部位
1
块根
样品中量 /mg 0 4925 0 4951 0 4934 0 4960 0 4929
加入量 /mg 0 2250 0 2250 0 2250 0 2250 0 2250
表 1. 三七素加样回收率试验结果
测得量
回收率
平均值
/mg
/%
/%
0 2189 97 3
0 2196 97 6
0 2279 101 3
98 22
0 2207 98 1
0 2178 96 8
RSD /%
1.82
表 2.不同产地三七中三七素的含量 n=3
No
产地
含量(%) No
ห้องสมุดไป่ตู้
1 文山追栗街 0.478 23
2 文山莲花塘 0.490 24
3 文山莲花塘 0.434 25
4 文山乐诗冲 0.537 26
5 文山乐诗冲 0.541 27
2 4 精密度实验 精密吸取上述对照品溶液 重复进样 5 次 测定 三七素峰面积积分值的平 均值为 34221870 其 RSD 为 0.85% 2 5 重复性实验 取相同的样品 5 份 精密称定 按供试品溶液制备方法制备样品溶液 按上 述色谱条件测定 平均含量为 0.49 %,其 RSD 为 1.75% 2 6 回收率试验 采用加样回收法 取已知含量的样品分别添加三七素对照品 按样品制备方 法制备供试液 按上述色谱条件进行测定 计算回收率 结果见表 1 2 7 供试品溶液的制备与测定 取各样品粉末约 5g 精密称定 置具塞三角瓶中 精密加水 25ml 称定重量 超声提取 60 min,放冷 再称定重量 加水补足减失的重量 摇匀 以 4000 rpm 离心 5min,收取上清液 用 0.2 µm 滤膜过滤 取续滤液加水适量 调整三七素浓度至线 性范围内 进样 20µL, 测定峰面积积分值 用外标法根据峰面积积分值计算三七素的含量 结 果见表 2,3,4 5