最新还原糖的测定方法
食品中还原糖的测定方法
食品中还原糖的测定方法1. 概述还原糖（Reducing sugar）是指具有还原性的碳水化合物，能够还原其他物质。
在食品中，还原糖广泛存在于各种食材中，包括水果、蔬菜、谷物等。
准确测定食品中还原糖的含量对于食品质量的评估和营养分析具有重要意义。
本文将介绍食品中还原糖的测定方法。
2. 基本原理还原糖测定的基本原理是利用还原糖与碱性溶液中的某些金属离子（如铜离子）发生氧化还原反应产生沉淀物的特性。
在碱性条件下，还原糖与铜离子发生氧化反应，将铜离子还原为氧化铜（Cu2O），同时还原糖自身被氧化。
生成的氧化铜沉淀可以通过比色法或电化学法进行测定，从而确定还原糖的含量。
3. 还原糖测定方法3.1 Benedict’s试剂法Benedict’s试剂是一种常用于测定还原糖含量的试剂。
其成分包括硫酸铜、碳酸钠和柠檬酸三钠。
该方法需要将待测溶液与Benedict’s试剂混合，加热反应一段时间后，观察溶液颜色的变化，通过比色法确定还原糖的含量。
实验步骤：1.准备试样：将待测食品样品加入适量的蒸馏水，搅拌均匀。
2.配制Benedict’s试剂：按照一定比例将硫酸铜、碳酸钠和柠檬酸三钠溶解在蒸馏水中，得到Benedict’s试剂。
3.反应：将试样加入Benedict’s试剂中，加热反应5分钟。
4.观察：根据溶液颜色的变化，可以初步估计还原糖的含量。
优缺点：•优点：操作简便、成本低廉。
•缺点：适用范围有限，无法测定低浓度还原糖。
3.2 蔗糖氧化法蔗糖氧化法是利用蔗糖与硫酸铜和氯化铜反应生成氧化铜沉淀的特性，间接测定还原糖的含量。
该方法适用于含有蔗糖的食品样品。
实验步骤：1.准备试样：将待测食品样品加入适量的蒸馏水，搅拌均匀。
2.氧化反应：将试样加入含有硫酸铜和氯化铜的试剂中，反应一定时间。
3.沉淀溶解：将反应后的沉淀溶解，并根据氧化铜溶液的颜色进行测定。
4.计算含量：根据溶液颜色的浓度，计算出还原糖的含量。
优缺点：•优点：适用范围广泛，可以测定含有蔗糖的食品样品。
还原糖的检验方法和具体步骤
还原糖的检验方法和具体步骤如下：
1. 检验方法：使用班氏试剂或斐林试剂检测还原糖。
首先观察试剂的颜色变化，然后加入待测样品，将试管放入水浴加热的烧杯中。
2. 具体步骤：
（1）在试管中加入2ml待测样品溶液。
（2）向试管中加入5滴班氏试剂或斐林试剂。
（3）将试管放入水浴加热的烧杯中，观察颜色变化。
如果试管中出现砖红色沉淀或蓝色沉淀，则说明待测样品中含有还原糖。
这是因为班氏试剂或斐林试剂主要用于检测还原性糖，如葡萄糖，而葡萄糖在加热条件下会与组织中的蛋白质生成砖红色沉淀。
此外，斐林试剂还可以与醛基反应生成蓝色沉淀。
需要注意的是，检测还原糖需要待测样品中的还原糖与试剂发生反应，因此需要确保待测样品溶液是新鲜的、未被污染的。
此外，检测过程中需要控制好温度、时间等条件，以确保实验结果的准确性。
还原糖的测定方法_国标.pdf
食物中还原糖的测定方法：高锰酸钾滴定法和直接滴定法。
一、高锰酸钾滴定法1.原理样品经除去蛋白质后，其中还原糖在碱性环境下将铜盐还原为氧化亚铜，加硫酸铁后，氧化亚铜被氧化为铜盐，以高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成的亚铁盐，根据高锰酸钾消耗量计算氧化亚同含量，再查表得还原糖量。
2.适用范围，本法适用于所有食品中还原糖的测定以及通过酸水解或酶水解转化成还原糖的非还原性糖类物质的测定。
3.仪器（1）滴定管（2） 25ml古氏坩埚或G4垂融坩埚（3）真空泵（4）水浴锅4.试剂除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。
6 mol/L盐酸：量取50ml盐酸加水稀释至100 ml。
甲基红指示剂：称取10mg甲基红，用100ml乙醇溶解。
5 mol/L氢氧化钠溶液：称取20g氢氧化钠加水溶解并稀释至100ml。
碱性酒石酸铜甲液：称取硫酸铜（CuSO4·5H2O），加适量水溶解，加硫酸，再加水稀释至500ml，用精制石棉过滤。
碱性酒石酸铜乙液：称取173g酒石酸钾钠与50g氢氧化钠，加适量水溶解，并稀释至500ml，用精制石棉过滤，贮存于橡胶塞玻璃瓶中。
精制石棉：取石棉先用3mol/L盐酸浸泡2～3天，用水洗净，再加L氢氧化钠溶液浸泡2～3天，倾去溶液，再用热碱性酒石酸铜已液浸泡数小时，用水洗净。
再以3 mol/L 盐酸浸泡数小时，以水洗至不呈酸性。
然后加水振摇，使成微细的浆状软县委，用水浸泡并贮存于玻璃瓶中，即可用做填充古氏坩埚用。
L高锰酸钾标准溶液。
1mol/L氢氧化钠溶液：称取4g 氢氧化钠，加水溶解并稀释至100ml。
硫酸铁溶液：称取50g硫酸铁，加入200ml水溶解后，慢慢加入100ml硫酸，冷却后加水稀释至1L。
3mol/L盐酸：量取30ml盐酸，加水稀释至120ml。
5. 操作方法样品处理：乳类、乳制品及含蛋白质的食品：称取约～ 2 g固体样品（吸取2～10 ml液体样品），置于250 ml容量瓶中，加50 ml水，摇匀。
还原糖的测定方法
还原糖的测定方法还原糖是指能够还原铜离子的糖类物质，通常用来测定葡萄糖、果糖、麦芽糖等在食品和生物样品中的含量。
测定还原糖的方法有很多种，其中包括费林试剂法、硫酸铜比色法、硼酸硫酸铜比色法等。
本文将介绍硫酸铜比色法和硼酸硫酸铜比色法两种测定还原糖的方法。
硫酸铜比色法测定还原糖的方法如下：1. 准备样品，将待测样品溶解于适量的水中，得到一定浓度的溶液。
2. 配制硫酸铜溶液，取一定容量的硫酸铜溶液，通常浓度为0.1mol/L。
3. 反应，将样品溶液与硫酸铜溶液混合，加热至沸腾，使得还原糖与硫酸铜发生反应，生成红色的氧化铜沉淀。
4. 沉淀析出，待反应结束后，将溶液冷却，沉淀析出。
5. 比色，用分光光度计在特定波长下测定溶液的吸光度，根据标准曲线计算出还原糖的含量。
硼酸硫酸铜比色法测定还原糖的方法如下：1. 准备样品，将待测样品溶解于适量的水中，得到一定浓度的溶液。
2. 配制硼酸硫酸铜试剂，将一定量的硼酸溶液与硫酸铜溶液混合制备硼酸硫酸铜试剂。
3. 反应，将样品溶液与硼酸硫酸铜试剂混合，加热至沸腾，使得还原糖与硫酸铜发生反应，生成蓝色的氧化铜沉淀。
4. 沉淀析出，待反应结束后，将溶液冷却，沉淀析出。
5. 比色，用分光光度计在特定波长下测定溶液的吸光度，根据标准曲线计算出还原糖的含量。
以上两种方法均是通过还原糖与硫酸铜发生反应生成沉淀，再通过比色法测定沉淀的吸光度来计算还原糖的含量。
在具体操作时，需要注意样品的处理、试剂的配制、反应条件的控制以及仪器的使用等细节，以确保测定结果的准确性和可靠性。
总结，硫酸铜比色法和硼酸硫酸铜比色法是常用的测定还原糖的方法，通过与硫酸铜发生反应生成沉淀，再通过比色法测定沉淀的吸光度来计算还原糖的含量。
在实际操作中，需要严格按照方法步骤进行操作，以获得准确可靠的测定结果。
还原糖的测定
还原糖的测定（直接滴定法） 还原糖的测定（直接滴定法） 1 原理样品经除去蛋白质后，在加热条件下，直接滴定标定过的碱性酒石酸铜液，以次甲基蓝 作指示剂，根据样品液与标准葡萄糖消耗体积，计算还原糖量。
2 试剂2.1 碱性酒石酸铜甲液： 称取 15g 硫酸铜(CuSO4·5H2O)及 0.05g 次甲基蓝，溶于水中并稀 释至 1000ml。
2.2 碱性酒石酸铜乙液：称取 50g 酒石酸钾钠及 75g 氢氧化钠，溶于水中，再加入 4g 亚 铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至 500ml，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
2.3 盐酸。
2.4 葡萄糖标准溶液：精密称取 1.000g 经过 98～100℃干燥至恒量的纯葡萄糖，加水溶 解后加入 5ml 盐酸，并以水稀释至 1000ml。
此溶液每毫升相当于 1mg 葡萄糖。
3 操作方法3.1 样品处理：吸取 2～10 ml 液体样品，置于 100 ml 容量瓶中，加 50 ml 水，摇匀。
边 摇边慢慢加入 5 ml 乙酸锌溶液及 5 ml 亚铁氢化钾溶液，加水至刻度，混匀。
静置 30 min， 用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。
（注意：乙酸锌可去除蛋白质、鞣质、树脂等， 使它们形成沉淀，经过滤除去。
如果钙离子过多时，易与葡萄糖、果糖生成络合物，使滴定 速度缓慢；从而结果偏低，可向样品中加入草酸粉，与钙结合，形成沉淀并过滤。
） 3.2 标定碱性酒石酸铜溶液：吸取 5.0ml 碱性酒石酸铜甲液及 5.0ml 乙液，置于 150ml 锥形瓶中，从滴定管滴加约 9ml 葡萄糖标准溶液，控制在 2min 内加热至沸，趁沸以每两秒 1 滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录消耗葡萄糖标准 溶液的总体积，同时平行操作三份，取其平均值，计算每 10ml(甲、乙液各 5ml)碱性酒石酸 铜溶液相当于葡萄糖的质量(mg)。
（注意：还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化，恢复成原 来的蓝色，所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态，并且避免滴定时间过长。
还原糖的检测研究方法
还原糖的检测研究方法
还原糖的检测研究方法主要包括以下几种：
1. 比色法：将还原糖与金属离子（如铜离子）反应生成有色产物。
该方法常用的还原糖指示剂有费林试剂和巴西林试剂，可以通过比色反应的颜色强度来定量分析还原糖的含量。
2. 电化学法：利用还原糖在电极上发生电化学反应，通过测量电流或电势的变化来定量分析还原糖的含量。
常用的电化学方法包括循环伏安法、方波伏安法和安培法。
3. 高效液相色谱法（HPLC）：通过将样品中的还原糖与某种反应试剂或色谱柱进行反应，在一定的条件下，测定生成物的色谱峰面积或峰高值与还原糖的含量成比例关系，以定量分析还原糖的含量。
4. 酶法：利用特定的酶催化还原糖与底物之间的反应，产生可测量的产物。
常用的酶法包括葡萄糖氧化酶法、葡萄糖去氢酶法和葡萄糖酸化酶法等。
5. 光度法：还原糖在酸性条件下能够与某些试剂发生特定的吸收峰，在特定波长下测量吸光度来定量分析还原糖的含量。
常用的试剂有安东氏试剂和费林试剂。
这些方法在还原糖的检测研究中应用广泛，可以根据具体实验需求选择合适的方
法进行研究。
还原糖的测定方法
还原糖的测定方法
还原糖是一种重要的碳水化合物，广泛存在于植物和动物体内。
它在食品加工中起着重要作用，也是一种重要的营养物质。
因此，
准确测定还原糖的含量对于食品加工和营养评估具有重要意义。
下
面将介绍几种常用的还原糖测定方法。
首先，最常用的还原糖测定方法是费林试剂法。
该方法利用费
林试剂与还原糖发生化学反应，生成可见的蓝色产物，通过比色法
测定产物的光密度来计算还原糖的含量。
费林试剂法操作简便，结
果准确，广泛应用于食品工业和科研领域。
其次，还原糖的测定方法还包括硫酸铜法。
该方法利用硫酸铜
与还原糖在碱性条件下发生化学反应，产生沉淀物，通过沉淀物的
重量来计算还原糖的含量。
硫酸铜法操作简单，结果准确，适用于
各种类型的食品样品。
此外，还原糖的测定方法还包括酚酞法。
该方法利用酚酞与还
原糖在碱性条件下发生化学反应，产生可见的红色产物，通过比色
法测定产物的光密度来计算还原糖的含量。
酚酞法操作简便，结果
准确，适用于各种类型的食品样品。
最后，还原糖的测定方法还包括高效液相色谱法。
该方法利用高效液相色谱仪对食品样品中的还原糖进行分离和测定，具有分离效果好、分析速度快、准确度高的优点，适用于各种类型的食品样品。
综上所述，还原糖的测定方法多种多样，各有其特点和适用范围。
在实际应用中，可以根据样品的特点和实验条件选择合适的测定方法，以获得准确的测定结果。
希望本文介绍的内容对您有所帮助。
还原糖检测方法
还原糖检测方法
还原糖是指能够还原氧化铜溶液的单糖和部分双糖，如葡萄糖、果糖、麦芽糖等。
还原糖检测方法是一种常见的食品分析方法，也被广泛应
用于生物医学领域和环境监测中。
常用的还原糖检测方法有以下几种：
1. 贝氏试剂法
贝氏试剂法是一种常用的还原糖检测方法。
该方法利用还原糖与碱性
铜酸钠反应，生成红色沉淀，沉淀的颜色与还原糖的浓度成正比。
该
方法操作简单、灵敏度高，但对于一些其他物质的干扰较大。
2. 亚甲蓝法
亚甲蓝法是一种比贝氏试剂法更为灵敏的还原糖检测方法。
该方法利
用还原糖与亚甲蓝反应，生成蓝色复合物，复合物的颜色与还原糖的
浓度成正比。
该方法灵敏度高、操作简单，但对于一些其他物质的干
扰也较大。
3. 酚硫酸法
酚硫酸法是一种常用的还原糖检测方法。
该方法利用还原糖与酚硫酸反应，生成紫色复合物，复合物的颜色与还原糖的浓度成正比。
该方法操作简单、灵敏度较高，但对于一些其他物质的干扰也较大。
4. 酶法
酶法是一种常用的还原糖检测方法。
该方法利用还原糖与葡萄糖氧化酶反应，生成过氧化氢和酮酸，过氧化氢与间苯二酚反应生成紫色化合物，化合物的颜色与还原糖的浓度成正比。
该方法灵敏度高、特异性强，但操作较为复杂。
总的来说，还原糖检测方法各有优缺点，选择合适的方法需要根据具体情况进行考虑。
在实际应用中，还原糖检测方法可以用于食品中还原糖的含量测定，也可以用于生物医学领域和环境监测中。
还原糖的测定方法_国标
还原糖的测定方法（1）食物中还原糖的测定方法：高锰酸钾滴定法和直接滴定法。
一、高锰酸钾滴定法1.原理样品经除去蛋白质后，其中还原糖在碱性环境下将铜盐还原为氧化亚铜，加硫酸铁后，氧化亚铜被氧化为铜盐，以高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成的亚铁盐，根据高锰酸钾消耗量计算氧化亚同含量，再查表得还原糖量。
2.适用范围GB5009.7-85，本法适用于所有食品中还原糖的测定以及通过酸水解或酶水解转化成还原糖的非还原性糖类物质的测定。
3.仪器（1）滴定管（2）25ml古氏坩埚或G4垂融坩埚（3）真空泵（4）水浴锅4.试剂除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。
4.1 6 mol/L盐酸：量取50ml盐酸加水稀释至100 ml。
4.2 甲基红指示剂：称取10mg甲基红，用100ml乙醇溶解。
4.3 5 mol/L氢氧化钠溶液：称取20g氢氧化钠加水溶解并稀释至100ml。
4.4 碱性酒石酸铜甲液：称取34.639g 硫酸铜（CuSO4·5H2O），加适量水溶解，加0.5ml硫酸，再加水稀释至500ml，用精制石棉过滤。
4.5 碱性酒石酸铜乙液：称取173g酒石酸钾钠与50g氢氧化钠，加适量水溶解，并稀释至500ml，用精制石棉过滤，贮存于橡胶塞玻璃瓶中。
4.6 精制石棉：取石棉先用3mol/L盐酸浸泡2～3天，用水洗净，再加2.5mol/L氢氧化钠溶液浸泡2～3天，倾去溶液，再用热碱性酒石酸铜已液浸泡数小时，用水洗净。
再以3 mol/L 盐酸浸泡数小时，以水洗至不呈酸性。
然后加水振摇，使成微细的浆状软县委，用水浸泡并贮存于玻璃瓶中，即可用做填充古氏坩埚用。
4.7 0.1000mol/L高锰酸钾标准溶液。
4.8 1mol/L氢氧化钠溶液：称取4g 氢氧化钠，加水溶解并稀释至100ml。
4.9 硫酸铁溶液：称取50g硫酸铁，加入200ml水溶解后，慢慢加入100ml硫酸，冷却后加水稀释至1L。
4.10 3mol/L盐酸：量取30ml盐酸，加水稀释至120ml。
《还原糖的测定方法国标》
《还原糖的测定方法_国标》还原糖的测定方法_国标一、范围本标准规定了用斐林试剂比色法测定试样中还原糖的含量。
本标准适用于所有食物样品中还原糖的测定。
二、原理还原糖与斐林试剂在加热条件下生成砖红色沉淀，通过与标准曲线对比，可以得出样品中还原糖的含量。
三、试剂和材料斐林试剂：甲液（称取14.3g硫酸铜（CuSO4·5H2O）和0.05g次甲基蓝（C13H16N3OClS）溶于水中，定容至100ml）、乙液（称取173g酒石酸钾钠（C4H4O6NaK·4H2O）和50g氢氧化钠溶于水中，定容至500ml）。
使用时将甲液、乙液等体积混合。
四、仪器和设备1.实验室用粉碎机2.水浴锅3.消煮炉或普通炉灶（能调节温度）4.容量瓶（100ml）5.移液管（10ml）6.比色管（10ml）7.试管（25ml）8.三角瓶（250ml）9.定时钟五、样品制备1.固体样品：取样品适量，用粉碎机粉碎，然后称取约0.2g样品置于试管中。
2.液体样品：直接取适量样品置于试管中。
3.在每个试管中加入4ml斐林试剂，充分混匀后静置10min。
4.将试管中的溶液倒入三角瓶中，加入约80ml水稀释，加热至沸后保持1min。
5.用移液管向每个试管中加入1ml样液，摇匀后置于试管架上。
6.在温度达到要求时将试管放入水浴中加热，同时开启计时器。
当时间达到要求时立即取出试管，用自来水冷却至室温。
7.将冷却后的溶液用移液管倒入比色管中，再加入约1ml的样液摇匀。
8.将比色管置于比色槽中，与标准曲线进行比色，得出样品的含量。
9.将整个测定过程中每个环节的时间、温度等条件记录下来，以便后续分析。
六、结果分析通过与标准曲线对比，可以得出样品中还原糖的含量。
计算公式为：含量=测定管吸光度÷校准管吸光度×标准品浓度。
其中吸光度需要在一定波长下测定。
同时需要注意实验过程中操作条件的控制，以保证结果的准确性。
如果操作条件不稳定或样品复杂性较高，需要进行适当调整或采取其他适合的方法进行测定。
测还原糖的方法
测还原糖的方法
测还原糖的方法：
概述：
还原糖是一种具有重要生化和营养学意义的简单糖类。
测定还原糖的含量在食品工业、医药工业等方面具有广泛的应用。
本文将介绍两种测定还原糖的方法。
方法一：法定含量法
该方法的原理是用铜离子还原剂将还原糖还原至醇，并测定铜离子的减量。
以下是测定步骤：
1.将已知量的样品加入酸性的铜离子还原剂中。
2.在恒温条件下，反应一定时间后，加入甲基橙指示剂，以测出剩余的铜离子量。
3.与标准曲线对比，计算出还原糖的含量。
方法二：显色法
该方法的原理是利用还原糖在碱性条件下能还原苏丹III为苏丹红色的特性。
以下是测定步骤：
1.将已知量的样品与酸性还原剂混合后，在沸水中加热反应。
2.反应结束后，将反应液冷却至室温，并加入苏丹III指示剂。
3.再加入苏丹红色指示剂，根据红色程度读取管理。
4.计算出还原糖的含量。
总结：
以上两种方法各有优缺点。
法定含量法适用于颜色较浅、待测糖分含量较高的样品，而显色法则适用于颜色较深、待测糖分含量较低的样品。
在实际操作中，应根据具体情况选择合适的方法进行测定。
食品中还原糖的测定方法
食品中还原糖的测定方法还原糖是指能够被还原剂还原为相应的糖醇或糖醛的单糖或双糖。
在食品中，还原糖是一种常见的添加剂，它能够增加食品的甜度和口感。
然而，过量的还原糖会对人体健康造成不良影响，因此需要对食品中的还原糖含量进行测定。
下面介绍几种常用的还原糖测定方法。
1. 蒽酮法蒽酮法是一种经典的还原糖测定方法，它基于还原糖与蒽酮反应生成有色产物的原理。
该方法操作简单，灵敏度高，适用于各种食品中还原糖的测定。
具体操作步骤如下：（1）取适量样品，加入适量水，加热至沸腾，使样品中的还原糖全部还原为糖醇。
（2）将样品冷却至室温，加入适量蒽酮试剂，摇匀。
（3）加入适量氢氧化钠溶液，使样品呈碱性。
（4）在紫外光下测定样品的吸光度，根据标准曲线计算还原糖的含量。
2. 酚硫酸法酚硫酸法是一种常用的还原糖测定方法，它基于还原糖与酚硫酸反应生成有色产物的原理。
该方法操作简单，适用于各种食品中还原糖的测定。
具体操作步骤如下：（1）取适量样品，加入适量水，加热至沸腾，使样品中的还原糖全部还原为糖醇。
（2）将样品冷却至室温，加入适量酚硫酸试剂，摇匀。
（3）加入适量氢氧化钠溶液，使样品呈碱性。
（4）在紫外光下测定样品的吸光度，根据标准曲线计算还原糖的含量。
3. 高效液相色谱法高效液相色谱法是一种精确、快速、灵敏的还原糖测定方法，它基于还原糖在色谱柱中的分离和检测。
该方法操作简单，适用于各种食品中还原糖的测定。
具体操作步骤如下：（1）取适量样品，加入适量水，加热至沸腾，使样品中的还原糖全部还原为糖醇。
（2）将样品冷却至室温，加入适量甲醇，摇匀。
（3）用过滤膜过滤样品，取上清液注入色谱柱中。
（4）在色谱柱中分离还原糖，检测各组分的峰面积或峰高，根据标准曲线计算还原糖的含量。
总之，还原糖是一种常见的食品添加剂，需要对其含量进行测定。
蒽酮法、酚硫酸法和高效液相色谱法是常用的还原糖测定方法，它们操作简单、灵敏度高、适用范围广，可以满足不同食品中还原糖的测定需求。
《还原糖的测定方法_国标》
《还原糖的测定方法_国标》还原糖是利用还原性固体物质与硫酸酸作用而形成的糖类物质，是各种天然糖和蔗糖等碳水化合物的主要成分。
还原糖的测定方法主要包括酚酞法和锁紫法两种。
一、酚酞法1.原理还原糖在酸性溶液中能够与酚酞形成红色络合物，按照这个特性可以利用测定还原糖的含量。
酚酞法是将酚酞加入葡萄糖溶液，并加入硫酸，使葡萄糖反应生成邻磺酸基苯甲醛，酚酞与邻磺酸基苯甲醛产生红色络合物，根据颜色变化来测定还原糖的含量。
2.步骤（1）样品处理：将样品取适量加入标准瓶中，加入适量蒸馏水稀释。
（2）试剂溶液制备①酚酞指示剂：0.1%酚酞水溶液，加入适量氢氧化钠溶液调节其pH值到8左右；②还原剂：0.05mol/L的亚硫酸钠溶液。
（3）测定操作①在滴定管中加入5ml淀粉指示液；②将50ml试剂用热水浴加热至60℃，在加热的过程中不断振荡，直到试剂完全溶解；③加入3ml样品，再加入1.5ml的硫酸；④加入恰好的量的还原剂，至混合溶液变成淡绿色，继续振荡至反应彻底；⑤从头部滴入酚酞指示液，直至溶液变为粉色，记录滴定管体积。
（4）计算还原糖的质量浓度二、锁紫法1.原理锁紫法是一种定量测定还原糖的方法，其原理是利用还原性糖在酸性条件下氧化生成醛酸物质，再与锁紫剂作用形成深紫色络合物，根据反应色深与被测样品中还原糖含量成正比关系的特点，来定量测定还原糖的含量。
2.步骤（1）样品前处理：将样品取适量加入到锥形瓶中加入适量蒸馏水稀释，搅拌溶解。
（2）试剂溶液制备①锁紫试剂：将0.2g锁紫用少量水样吸湿后加入10mL浓氢氧化钠（4mol/L），用水稀释到100ml，在加入5ml浓硫酸搅拌，备用；②还原剂：0.05mol/L的亚硫酸钠溶液。
（3）操作流程①在锥形瓶中加入1ml锁紫试剂和30ml蒸馏水；②加入3ml样品后加入2ml还原剂，充分搅拌均匀；③经过10分钟左右，样品溶液颜色变为紫色，放置待沉淀，用滤纸滤掉沉淀；④将过滤后的溶液转移到光度计试样池，用蒸馏水稀释至标线；⑤根据光度计读数计算样品中还原糖的质量浓度。
还原糖的测定
还原糖的测定
还原糖是指能够被还原剂还原成糖醇的单糖、二糖和少量寡糖。
常见的还原糖有葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖等。
测定还原糖含量是分析食品中糖类成分的重要手段之一。
还原糖的测定方法有许多种，下面介绍两种常用的方法。
一、费林试剂法
费林试剂法是将含还原糖的样品与费林试剂反应生成蓝色化合物，根据颜色深浅来测
定还原糖的含量。
试剂：1%费林试剂（若干费林试剂在50ml蒸馏水中搅拌，过滤后可得到1%的费林试剂），硫酸（浓度为98%），蒸馏水。
步骤：
1. 取适量样品，加入50ml蒸馏水搅拌均匀。
2. 取5ml上述混合液，加入试管中。
3. 加入2ml的费林试剂并摇匀。
4. 加入10ml的浓硫酸，容器要远离自己，慢慢倾倒并摇匀。
5. 用减色比色法，将混合液的吸光度在相应波长下读取。
6. 根据标准曲线计算还原糖的含量。
二、改良罗伯逊-梅利试剂法
试剂：改良罗伯逊-梅利试剂（一定量的酚水和氨水混合制成），硫酸（浓度为98%），蒸馏水。
无论使用哪种方法来测定还原糖的含量，都需要按照操作规范，严格控制试剂和样品
的量，避免误差的产生。
还原糖的测定方法_国标
还原糖得测定方法(1)食物中还原糖得测定方法：高锰酸钾滴定法与直接滴定法。
一、高锰酸钾滴定法ﻫ1、原理样品经除去蛋白质后，其中还原糖在碱性环境下将铜盐还原为氧化亚铜,加硫酸铁后，氧化亚铜被氧化为铜盐,以高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成得亚铁盐，根据高锰酸钾消耗量计算氧化亚同含量，再查表得还原糖量. ﻫ2、适用范围ﻫＧB5009、７－8５,本法适用于所有食品中还原糖得测定以及通过酸水解或酶水解转化成还原糖得非还原性糖类物质得测定。
3、仪器（1）滴定管ﻫ(2）2５ml古氏坩埚或G4垂融坩埚（３）真空泵ﻫ(4）水浴锅４、试剂除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。
４、1 ６ｍｏl／Ｌ盐酸：量取５0ml盐酸加水稀释至100 ｍl。
４、2 甲基红指示剂：称取1０mｇ甲基红,用100ml乙醇溶解. ﻫ4、3５mｏl／L氢氧化钠溶液:称取2０g氢氧化钠加水溶解并稀释至１00ml。
4、4 碱性酒石酸铜甲液：称取３４、６39g 硫酸铜(CuＳＯ４·５H2Ｏ），加适量水溶解,加０、5ml硫酸,再加水稀释至5００ml，用精制石棉过滤。
ﻫ4、5 碱性酒石酸铜乙液：称取１73g酒石酸钾钠与50g氢氧化钠,加适量水溶解，并稀释至5００ｍl，用精制石棉过滤,贮存于橡胶塞玻璃瓶中。
ﻫ４、６精制石棉：取石棉先用3mol/Ｌ盐酸浸泡2～3天，用水洗净,再加2、5mol/L氢氧化钠溶液浸泡2～3天，倾去溶液,再用热碱性酒石酸铜已液浸泡数小时,用水洗净。
再以３mol/L 盐酸浸泡数小时，以水洗至不呈酸性。
然后加水振摇，使成微细得浆状软县委,用水浸泡并贮存于玻璃瓶中,即可用做填充古氏坩埚用. ﻫ４、7 0、1000 mｏl/L高锰酸钾标准溶液。
4、8 1mol/L氢氧化钠溶液：称取4g 氢氧化钠,加水溶解并稀释至１00mｌ。
ﻫ４、９硫酸铁溶液：称取５0ｇ硫酸铁,加入2０0mｌ水溶解后，慢慢加入1０0ml硫酸,冷却后加水稀释至1L。
还原糖的测定方法
还原糖的测定方法还原糖是一种重要的碳水化合物，在食品工业以及生物化学领域具有广泛的应用。
测定还原糖的含量对于食品质量的控制以及生物化学实验的进行具有重要意义。
本文将介绍几种常用的还原糖测定方法，希望能够为相关领域的研究工作提供一些参考。
一、费林法测定法。
费林法是一种经典的还原糖测定方法，其原理是将还原糖与铜离子在碱性条件下发生氧化还原反应，生成红色沉淀。
通过测定沉淀的重量或者颜色深浅来确定还原糖的含量。
这种方法操作简单，结果准确，被广泛应用于食品工业中。
二、硫氰化铁法测定法。
硫氰化铁法是一种比较快速的还原糖测定方法，其原理是将还原糖与硫氰化铁在酸性条件下反应生成蓝色络合物，通过测定络合物的吸光度来确定还原糖的含量。
这种方法具有操作简便、结果快速的特点，适用于实验室中大批量样品的测定。
三、酶法测定法。
酶法是一种高灵敏度、高特异性的还原糖测定方法，其原理是利用还原糖酶将还原糖催化转化成葡萄糖，再利用葡萄糖氧化酶将葡萄糖氧化生成过氧化物，通过测定过氧化物的吸光度来确定还原糖的含量。
这种方法适用于对还原糖含量要求较高的实验，如生物化学实验和医学检测。
四、色谱法测定法。
色谱法是一种高分辨率、高灵敏度的还原糖测定方法，其原理是利用色谱柱将混合物中的还原糖分离出来，再通过检测器检测还原糖的峰值面积或者浓度来确定其含量。
这种方法操作复杂，但具有高分辨率、高灵敏度的特点，适用于对还原糖含量要求非常严格的实验。
五、红外光谱法测定法。
红外光谱法是一种非破坏性的还原糖测定方法，其原理是利用还原糖分子的振动和转动引起的红外吸收来确定其含量。
这种方法操作简单，无需样品的处理，适用于对还原糖含量要求不是很严格的实验。
六、电化学法测定法。
电化学法是一种高灵敏度、高精度的还原糖测定方法，其原理是利用还原糖在电极上的氧化还原反应来确定其含量。
这种方法操作简单，结果准确，适用于对还原糖含量要求非常严格的实验。
总结。
以上介绍了几种常用的还原糖测定方法，每种方法都有其特点和适用范围。
还原糖含量测定方法
还原糖含量测定方法嘿，你问还原糖含量测定方法啊？那咱就来唠唠。
要说测定还原糖含量呢，有几种常见的办法。
一种是斐林试剂法。
这斐林试剂就像是个小侦探，能把还原糖给找出来。
先把要测的东西弄成溶液，然后把斐林试剂加进去。
接着放在热水里煮一煮，这时候要是有还原糖，就会和斐林试剂发生反应，产生红色的沉淀。
根据沉淀的多少，就能大概知道还原糖的含量啦。
还有一种方法是班氏试剂法。
这个和斐林试剂法有点像。
也是把溶液和班氏试剂混合，然后加热。
如果有还原糖，就会出现颜色变化，从蓝色变成砖红色啥的。
通过观察颜色的变化程度，就能判断还原糖有多少。
另外呢，还有一种比较简单的方法，就是用血糖仪。
不过这个一般是用来测血糖的，但也能测一些含有还原糖的溶液。
把溶液滴在血糖仪的试纸上，就能读出一个数值。
不过这个方法不是很准确，只能大概知道个范围。
我给你讲个事儿吧。
有一次我在实验室里做实验，就是测定一种水果里的还原糖含量。
我们先用斐林试剂法试了试，把水果榨成汁，然后加入斐林试剂，放在热水里煮。
哇，果然出现了红色的沉淀。
我们根据沉淀的多少，估算出了还原糖的含量。
然后我们又用班氏试剂法做了一遍，结果差不多。
最后我们还用血糖仪测了一下，虽然数值不太准确，但是也能给我们一个参考。
通过这次实验，我们对还原糖含量的测定方法有了更深刻的理解。
总之呢，测定还原糖含量的方法有斐林试剂法、班氏试剂法和血糖仪法等。
不同的方法有不同的优缺点，可以根据实际情况选择合适的方法。
只要你认真去做，就能准确地测出还原糖的含量。
还原糖的测定国标法
直接滴定法测还原糖1.实验原理实验经除去蛋白质后，在加热条件下，以亚甲基蓝为指示剂，滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液（用还原糖标准溶液标定），根据样品液消耗体积计算还原糖含量。
2.实验药品与试剂硫酸铜、亚甲基蓝指示剂、酒石酸钾钠、氢氧化钠、乙酸锌、冰乙酸、亚铁氰化钾、葡萄糖、氢氧化钠溶液(40g/L)碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜及0.05g亚甲蓝加适量水溶解至1000ml碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠与75g氢氧化钠，加适量水溶解，再加4g亚铁氰化钾，完全溶解后稀释至1000ml，贮存于橡胶塞玻璃瓶中。
盐酸溶液：量取50ml盐酸加水稀释至100ml。
葡萄糖标液：称取1.0g干燥2h后的葡萄糖,加水溶解并加入5ml盐酸，并以水稀释到1000ml，此溶液每毫克相当于1.0mg葡萄糖。
3.仪器25ml滴定管、250 ml容量瓶、150ml锥形瓶、玻璃珠、真空泵、电子天平、可调电炉（带石棉板）4.实验步骤4.1 样品处理：一般食品是称取粉碎后的样品2.5~5g或吸取5～25g液体样品，置于250ml容量瓶中，加50ml水，摇匀。
加入5ml 乙酸锌溶液及5ml亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，混匀。
静置30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。
4.2标定碱性酒石酸铜溶液：吸取5.0g碱性酒石酸铜甲液及乙液，于150ml锥形瓶中加水10ml,加入玻璃珠两粒，从滴定管滴加约9ml葡萄糖或其他还原糖标液，控制在2min内加热至沸，趁热以1滴/2s的速度继续滴加葡萄糖或其他还原糖标液至蓝色刚好褪去，即为终点，记录消耗体积，平行测定3次并取平均值，计算每10ml酒石酸铜溶液（甲、乙各5ml）相当于多少葡萄糖或其他还原糖的质量（mg）。
4.3试样溶液预测：吸取5.0g碱性酒石酸铜甲液及乙液，于150ml锥形瓶中加水10ml,加入玻璃珠两粒，控制在2min内加热至沸，保持沸腾以先快后慢的速度，从滴定管中滴加试样溶液，病保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅时，以1滴/2秒的速度滴定，直至蓝色刚好褪去即为终点，记录样液消耗体积。
最新还原糖的测定方法
还原糖的测定方法食物中还原糖的测定方法：高锰酸钾滴定法和直接滴定法。
一、高锰酸钾滴定法1.原理样品经除去蛋白质后，其中还原糖在碱性环境下将铜盐还原为氧化亚铜，加硫酸铁后，氧化亚铜被氧化为铜盐，以高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成的亚铁盐，根据高锰酸钾消耗量计算氧化亚同含量，再查表得还原糖量。
2.适用范围GB5009.7-85，本法适用于所有食品中还原糖的测定以及通过酸水解或酶水解转化成还原糖的非还原性糖类物质的测定。
3.仪器（1）滴定管（2） 25ml古氏坩埚或G4垂融坩埚（3）真空泵（4）水浴锅4.试剂除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。
4.1 6 mol/L盐酸：量取50ml盐酸加水稀释至100 ml。
4.2 甲基红指示剂：称取10mg甲基红，用100ml乙醇溶解。
4.3 5 mol/L氢氧化钠溶液：称取20g氢氧化钠加水溶解并稀释至100ml。
4.4 碱性酒石酸铜甲液：称取34.639g 硫酸铜（CuSO4·5H2O），加适量水溶解，加0.5ml硫酸，再加水稀释至500ml，用精制石棉过滤。
4.5 碱性酒石酸铜乙液：称取173g酒石酸钾钠与50g氢氧化钠，加适量水溶解，并稀释至500ml，用精制石棉过滤，贮存于橡胶塞玻璃瓶中。
4.6 精制石棉：取石棉先用3mol/L盐酸浸泡2～3天，用水洗净，再加2.5mol/L氢氧化钠溶液浸泡2～3天，倾去溶液，再用热碱性酒石酸铜已液浸泡数小时，用水洗净。
再以3 mol/L 盐酸浸泡数小时，以水洗至不呈酸性。
然后加水振摇，使成微细的浆状软县委，用水浸泡并贮存于玻璃瓶中，即可用做填充古氏坩埚用。
4.7 0.1000mol/L高锰酸钾标准溶液。
4.8 1mol/L氢氧化钠溶液：称取4g 氢氧化钠，加水溶解并稀释至100ml。
4.9 硫酸铁溶液：称取50g硫酸铁，加入200ml水溶解后，慢慢加入100ml硫酸，冷却后加水稀释至1L。
4.10 3mol/L盐酸：量取30ml盐酸，加水稀释至120ml。
食品中还原糖的测定--直接滴定法
食品中还原糖的测定--直接滴定法国标规定的还原糖的检测有四种方法，第一法和第二法适用于食品中还原糖的测定。
第三法适用于小麦粉中还原糖含量的测定。
第四法适用于甜菜块根中还原糖的测定。
一. 实验原理:试样经除去蛋白质后，以亚甲基蓝作为指示剂，在加热条件下标定过的碱性酒石酸铜溶液（已用还原糖标准溶液标定），根据样品液消耗体积计算还原糖含量。
二. 试剂：2.1使用试剂2.2试剂的配置：a.盐酸溶液（1+1体积比例）：量取盐酸50ml，加水50ml混匀。
b.碱性酒石酸铜甲液：称取硫酸铜15g和亚甲基蓝0.05g，溶于水中，并稀释至1000ml。
c.碱性酒石酸铜乙液：称取酒石酸钾钠50g和氢氧化钠75g，溶于水中，再加入亚铁氰化钾4g，完全溶解后，用水定容至1000ml。
贮存于橡胶塞玻璃瓶中。
d.乙酸锌溶液：称取乙酸锌21.9g，加冰乙酸3ml，加水溶解并定容至100ml。
e.亚铁氰化钾溶液（106g/L）:称取亚铁氰化钾10.6g，加水溶解并定容至100ml。
f.氢氧化钠溶液（40g/L）：称取氢氧化钠4g，加水溶解后，放凉，并定容至100ml。
2.3使用的标准品2.4标准溶液配置a.葡萄糖标准溶液（1.0mg/ml）：准确称取经过98℃--100℃烘箱中干燥2h后的葡萄糖1g，加水溶解后，加入盐酸溶液5ml，并用水定容至1000ml。
此溶液每毫升相当于1.0mg葡萄糖。
b.果糖标准溶液（1.0mg/mL）：准确称取经过98℃--100℃烘箱中干燥2h后的果糖1g，加水溶解后加入盐酸溶液5ml，并用水定容至1000ml。
此溶液相当于1.0mg果糖。
c.乳糖标准溶液（1.0mg/ml）：准确称取经过94℃--90℃干燥2h的乳糖（含水）1g，加水溶解后加盐酸溶液5ml，并用水定容至1000ml。
此溶液每毫升相当于1.0mg乳糖（含水）。
d.转化糖标准溶液（1.0mg/ml）：准确称取1.0526g蔗糖，用100ml水溶解，置具塞锥形瓶中，加盐酸溶液5ml，在68℃--70℃水浴中加热15min，防止至室温，转移至1000ml容量瓶中并加水定容至1000ml。
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还原糖的测定方法食物中还原糖的测定方法：高锰酸钾滴定法和直接滴定法。
一、高锰酸钾滴定法1.原理样品经除去蛋白质后，其中还原糖在碱性环境下将铜盐还原为氧化亚铜，加硫酸铁后，氧化亚铜被氧化为铜盐，以高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成的亚铁盐，根据高锰酸钾消耗量计算氧化亚同含量，再查表得还原糖量。
2.适用范围GB5009.7-85，本法适用于所有食品中还原糖的测定以及通过酸水解或酶水解转化成还原糖的非还原性糖类物质的测定。
3.仪器（1）滴定管（2） 25ml古氏坩埚或G4垂融坩埚（3）真空泵（4）水浴锅4.试剂除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。
4.1 6 mol/L盐酸：量取50ml盐酸加水稀释至100 ml。
4.2 甲基红指示剂：称取10mg甲基红，用100ml乙醇溶解。
4.3 5 mol/L氢氧化钠溶液：称取20g氢氧化钠加水溶解并稀释至100ml。
4.4 碱性酒石酸铜甲液：称取34.639g 硫酸铜（CuSO4·5H2O），加适量水溶解，加0.5ml硫酸，再加水稀释至500ml，用精制石棉过滤。
4.5 碱性酒石酸铜乙液：称取173g酒石酸钾钠与50g氢氧化钠，加适量水溶解，并稀释至500ml，用精制石棉过滤，贮存于橡胶塞玻璃瓶中。
4.6 精制石棉：取石棉先用3mol/L盐酸浸泡2～3天，用水洗净，再加2.5mol/L氢氧化钠溶液浸泡2～3天，倾去溶液，再用热碱性酒石酸铜已液浸泡数小时，用水洗净。
再以3 mol/L 盐酸浸泡数小时，以水洗至不呈酸性。
然后加水振摇，使成微细的浆状软县委，用水浸泡并贮存于玻璃瓶中，即可用做填充古氏坩埚用。
4.7 0.1000mol/L高锰酸钾标准溶液。
4.8 1mol/L氢氧化钠溶液：称取4g 氢氧化钠，加水溶解并稀释至100ml。
4.9 硫酸铁溶液：称取50g硫酸铁，加入200ml水溶解后，慢慢加入100ml硫酸，冷却后加水稀释至1L。
4.10 3mol/L盐酸：量取30ml盐酸，加水稀释至120ml。
5. 操作方法5.1 样品处理：5.1.1 乳类、乳制品及含蛋白质的食品：称取约0.5～2 g固体样品（吸取2～10 ml液体样品），置于250 ml容量瓶中，加50 ml水，摇匀。
加入10 ml碱性酒石酸铜甲液及4 ml1mol/L氢氧化钠溶液，加水至刻度，混匀。
静置30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。
（注：此步骤目的是沉淀蛋白）5.1.2 酒精性饮料：吸取100 ml样品，置于蒸发皿中，用1 mol/L氢氧化钠溶液中和至中性，在水浴上蒸发至原体积1/4后（注：如果蒸发时间过长，应注意保持溶液pH为中性），移入250 ml容量瓶中。
加50 ml水，混匀。
以下按5.1.1自"加10ml碱性酒石酸铜甲液"起依法操作。
5.1.3 含多量淀粉的食品：称取2～10 g样品，置于250 ml容量瓶中，加200 ml水，在45℃水浴中加热1 h，并时时振摇。
（注意：此步骤是使还原糖溶于水中，切忌温度过高，因为淀粉在高温条件下可糊化、水解，影响检测结果。
）冷却后加水至刻度，混匀，静置。
吸取200 ml 上清液于另一250 ml容量瓶中，以下按5.1.1自"加10ml碱性酒石酸铜甲液"起依法操作。
5.1.4 含有脂肪的食品：称取2～10 g样品，先用乙醚或石油醚淋洗3次，去除醚层。
加入50ml 水混匀，以下按5.1.1自"加10ml碱性酒石酸铜甲液"起依法操作。
5.1.5 汽水等含有二氧化碳的饮料：吸取100 ml样品置于蒸发皿中，在水浴上除去二氧化碳后，移入250 ml容量瓶中，并用水洗涤蒸发皿，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀后，备用。
5.2 样品测定：吸取50ml处理后的样品溶液，于400ml烧杯中，加入25ml碱性酒石酸铜甲液及25ml乙液，于烧杯上盖一表面皿，加热，控制在4min内沸腾，再准确煮沸2min，乘热用铺好石棉的古氏坩埚或G4垂融坩埚抽滤，并用60℃热水洗涤烧杯及沉淀，至洗液不成碱性为止。
（注：还原糖与碱性酒石酸铜试剂的反应一定要在沸腾状态下进行，沸腾时间需严格控制。
煮沸的溶液应保持蓝色，如果蓝色消失，说明还原糖含量过高，应将样品溶液稀释后重做。
）将古氏坩埚或垂融坩埚放回原400ml烧杯中，加25 ml硫酸铁溶液及25ml水，用玻棒搅拌使氧化亚铜完全溶解，以0.1mol/L高锰酸钾标准液滴定至微红色为终点。
同时吸取50ml水，加与测样品时相同量的碱性酒石酸铜甲、乙液，硫酸铁溶液及水，按同一方法做试剂空白实验。
6. 计算：X1=（V-V0）×N×71.54 （1）式中： X1--样品中还原糖质量相当于氧化亚铜的质量，mg；V--测定用样品液消耗高锰酸钾标准液的体积，ml；V0--试剂空白消耗高锰酸钾标准液的体积，ml；N--高锰酸钾标准溶液的浓度；71.54--1ml 1mol/L高锰酸钾溶液相当于氧化亚铜的质量，mg。
根据（1）式中计算所得氧化亚铜质量，查附表"氧化亚铜质量相当于葡萄糖、果糖、乳糖、转化糖的质量表"，再计算样品中还原糖含量。
X2=（m1×V2）∕（m2×V1）×（100∕1000） (2)式中： X2--样品中还原糖的含量，g/100g（g/100ml）；m1--查表得还原糖质量，mg；m2--样品质量（或体积）， g（ml）；V1--测定用样品处理液的体积，ml；V2--样品处理后的总体积，ml。
7.举例：称取某食物样品3.00g，经过处理后用水定容至250ml。
取50ml进行测定，消耗0.1003 mol/L 高锰酸钾标准液5.20ml，同时测试剂空白为0.36ml，则样品中还原糖质量相当于氧化亚铜的质量为：X1（mg） =（5.20-0.36）×0.1003×71.54 = 34.73查表得还原糖质量为相当于葡萄糖16.22 mg，样品中还原糖含量（以葡萄糖计）为：X2（g/100g）=（16.22×250）∕（3.00×50）×（100∕1000）= 2.708.注释：本法用碱性酒石酸铜溶液作为氧化剂。
由于硫酸铜与氢氧化钠反应可生成氢氧化铜沉淀，氢氧化铜沉淀可被酒石酸钾钠缓慢还原，析出少量氧化亚铜沉淀，使氧化亚铜计量发生误差，所以甲、乙试剂要分别配制及贮藏，用时等量混合。
二、直接滴定法1.原理样品经除去蛋白质后，在加热条件下，直接滴定已标定过的费林氏液，费林氏液被还原析出氧化亚铜后，过量的还原糖立即将次甲基蓝还原，使蓝色褪色。
根据样品消耗体积，计算还原糖量。
2.适用范围GB5009.7-85，本方法适用于所有食品中还原糖的检测。
检出限0.1mg。
3.主要仪器滴定管4.试剂除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。
（1）费林甲液：称取15 g硫酸铜（CuSO4·5H2O），及0.05 g次甲基蓝，溶于水中并稀释至1 L。
（2）费林乙液：称取50 g酒石酸钾钠与75 g氢氧化钠，溶于水中，再加入4 g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至500 ml，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
（3）乙酸锌溶液：称取21.9 g乙酸锌，加3 ml冰乙酸，加水溶解并稀释至100 ml。
（4）亚铁氰化钾溶液。
称取10.6g亚铁氰化钾，用水溶解并稀释至100ml。
（5）盐酸。
（6）葡萄糖标准溶液：精密称取1.000 g经过80 ℃干燥至恒量的葡萄糖（纯度在99%以上），加水溶解后加入5 ml盐酸，并以水稀释至1 L。
此溶液相当于1 mg/ml葡萄糖。
（注：加盐酸的目的是防腐，标准溶液也可用饱和苯甲酸溶液配制）5.操作方法5.1样品处理：5.1.1乳类、乳制品及含蛋白质的食品：称取约0.5～2 g固体样品（吸取2～10 ml液体样品），置于100 ml容量瓶中，加50 ml水，摇匀。
边摇边慢慢加入5 ml乙酸锌溶液及5 ml亚铁氢化钾溶液，加水至刻度，混匀。
静置30 min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。
（注意：乙酸锌可去除蛋白质、鞣质、树脂等，使它们形成沉淀，经过滤除去。
如果钙离子过多时，易与葡萄糖、果糖生成络合物，使滴定速度缓慢；从而结果偏低，可向样品中加入草酸粉，与钙结合，形成沉淀并过滤。
）5.1.2酒精性饮料：吸取50 ml样品，置于蒸发皿中，用1 mol/L氢氧化钠溶液中和至中性，在水浴上蒸发至原体积1/4后，移入100 ml容量瓶中。
加25 ml水，混匀。
以下按4.1.1自"加5 ml乙酸锌溶液"起依法操作。
5.1.3含多量淀粉的食品：称取2～5 g样品，置于100 ml容量瓶中，加50 ml水，在45℃水浴中加热1 h，并时时振摇（注意：此步骤是使还原糖溶于水中，切忌温度过高，因为淀粉在高温条件下可糊化、水解，影响检测结果。
）。
冷后加水至刻度，混匀，静置。
吸取50 ml上清液于另一100 ml容量瓶中，以下按4.1.1自"5 ml乙酸锌溶液"起依法操作。
5.1.4汽水等含有二氧化碳的饮料：吸取50 ml样品置于蒸发皿中，在水浴上除去二氧化碳后，移入100 ml容量瓶中，并用水洗涤蒸发皿，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀后，备用。
（注意：样品中稀释的还原糖最终浓度应接近于葡萄糖标准液的浓度。
）5. 2标定费林氏液溶液：吸取5.0 ml费林氏甲液及5.0 ml乙液，置于150 ml锥形瓶中（注意：甲液与乙液混合可生成氧化亚铜沉淀，应将甲液加入乙液，使开始生成的氧化亚铜沉淀重溶），加水10 ml，加入玻璃珠2粒，从滴定管滴加约9 ml葡萄糖标准溶液，控制在2 min内加热至沸，趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液兰色刚好褪去并出现淡黄色为终点，记录消耗的葡萄糖标准溶液总体积，平行操作三份，取其平均值，计算每10 ml（甲、乙液各5 ml）碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量（mg）。
（注意：还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化，恢复成原来的蓝色，所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态，并且避免滴定时间过长。
）5.3样品溶液预测：吸取5.0 ml费林氏甲液及5.0 ml乙液，置于150 ml锥形瓶中，加水10 ml，加入玻璃珠2粒，控制在2 min内加热至沸，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管中滴加样品溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅时，以每秒1滴的速度滴定，直至溶液兰色褪去，出现亮黄色为终点。
如果样品液颜色较深，滴定终点则为兰色褪去出现明亮颜色（如亮红），记录消耗样液的总体积。
（注意：如果滴定液的颜色变浅后复又变深，说明滴定过量，需重新滴定。