差示分光光度法

合集下载

差示分光光度法应用于异烟肼注射液中游离肼的测定

作显色荆，在参比溶液中加入３丙酮消除干扰，％检测波长为４６ｎ５ｍ。结果游离肼在００．２—０２．０的线性关系（＝０９９）精密度ＲＤ为０４％，ｒ．９７，Ｓ．７加样平均回收率９．５（Ｓ０８％）９６％ＲＤ＝．３。结论
ＤｅｅｍｉａｉｎｏｉｅａｅｄａｉｅｉｓｎａｉｎｅｔｎｂｉｅｅｃｔｒｎｔｆＬｂｒｔｄＨｙｒｚｎＩｏｉｚｄＩｊｃｉｙＤｆｒｎｅｏｎｏｆ
Ｓｅｔｏｈｔｍｅｒｐｃｒｐｏｏｔｙ
ＷＡＧＪＧａｇｈｕｂｉｎｈｎｍｎｘｎｈｒｃｕｉｌｏｐｎｍｔｄｕｎｚｏ，ｕｎｄｎ１２０Ｎｅ（ｕｎｚｏａｙｓａｉｇｉｐａｍａｅｔａｃｍａｙｌｉ，ＧａｇｈｕＧａｇｏｇ５０５）ｉｕｇｃｉｅ
Ａｓａｔ０ｊｃｉｅＴｓｂｓｅｈｄｔｄｔｍｎｅｙｒｚｅｉｏｉｉｉｅｔｎｂｉｅｅｃｐｃｏｈｔｍｔ．ｔ・ｂｔｃ：ｂｅｔｏｅｔｌｈａｍｔｏｅｒｉｅｆｅｈｄａｉｉｎａｄｎｃｏｙｄｆｒｎｅｓｅｔｐｏｏｅｙＭｅｈｒｖａｉｏｅｒｎｎｓｚｊｉｆｒｒ
ｗｔｉｅｒｎｅｏ０００２ｉｎｔｇｆ．２— ．０ｈｈａ
ｍｌＲＤｏｔｅｃｕａｙａ．７，ｎｅｍａｃｖｒｔＷ９６％（Ｓ０８％），Ｓｃｒｃｓ４％ａｄｔｅｎｒｏｅｒｅａ９．５ｆｈａｗ０ｈｅｙａｓＲＤ＝．３．

差示分光光度法测定苯酚滴耳液中苯酚的含量

都需要特殊装置或材料，现起来有一定的技术难实
度。尽管如此，一领域的研究仍太有可为：这将来的趋势必定是发展很少乃至不用有毒有机
～，
ｗｌＪＣｈａ￣ｍａｇ，Ｉ９，７４一２１７ｆｔｒ９６５（Ｉ）９ｏ
维普资讯
ＴｈｏｒａｆＰａｍａｅｔｃＩＰａｔｅＶｏ０２０ｏ２ｅＪｕｎＩｈｒｅｕｉａｒｃｉ】２０２Ｎｏｃ
上述８种预处理技术，据萃取介质的物态可根分为固态介质的ＳＥ、ＰＰＳＭＥ，态介质的单快速便宜的方法，作步骤很发操少，量能集采样、取、化、缩、分离、样于尽萃净浓预进
一
身．并适台野外、位等特殊需求；展能处理复杂原发
Ｃｅｈｍ．】９，７５１９６９８０（：４
Ｔｈｏｄ￣ｏＥ．Ｐａｍａ￣ｄｏｌｒｒｎｌｌｉＳ．Ｍａｈｉｓｎ】．ｅａＳａｅｔａｓｏｔＬｍｐｔ
介质、量成分、殊性质（高极性、不稳定性、痕特如热难挥发性等）成分的方法，展方法的联用与自动化等发等。因为只有克服了前处理这一 “ 颈 ” 色谱分析乃瓶，
ｐｅｒｔｏｕｓｎｒｐａａｉｎｉｇｍｉｉｔｉｅｓｎａｕｒｚｄｕｐｐｒｅｄｌｑｕｉｍｅｍｂｒｎｅｏｌｉｄａｄｅｖｃｅｏｎｃｅｌ — ｌｎｅｔｃｋｄｉｃｎｅｔｄ ¨ｌｉｏｐａｅｃａｉｌＤ＂ｌｑｕｄｐｌａｉｉｃｈｏｍａｏａｒｔｇｒ —

分光光度法

( C )2. 用普通分光光度法测得标液c1的透光度为20%，试液的透光度为12%；若以示差分光光度法测定以c1 为参比，则试液的透光度为
A. 40% B. 50%
C. 60%
D. 70%
( D )3. 按一般光度法用纯溶剂做参比溶液时，测得某试液的透光度为10%。若参比溶液换为透光度为20%的
(×) 4. 有色溶液的吸光度为0，其透光率也为0。
1.5 吸光系数
吸光系数K物理意义：吸光物质在单位浓度、单位厚度时的吸光度。
1. 质量吸光系数 c单位g/L，b单位cm，K单位L ·g-1 ·cm-1 A = Kbc
2. 摩尔吸光系数 c单位mol/L，b单位cm，ε单位L ·mol-1 ·cm-1 A = εbc
1.4 光吸收基本定律—朗伯比尔定律
( ✓)1. 朗伯－比耳定律的应用条件：一是必须使
用单色光；二是吸收发生在均匀的介质；三是吸收过程中，吸收物质相互不发生作用。
(×) 2. 有色物质的吸光度A是透光度的倒数。 (×) 3. 在分光光度分析中，入射光强度与透射光
强度之比称为吸光度，吸光度的倒数的对数为透光率。
( ✓)1. 如果显色剂有色，则要求有色化合物与显色剂
之间的颜色差别要大，以减小试剂空白值，提高测定的灵敏度。通常把两种有色物质最大吸收波长之差称为“对比度”。一般要求显色剂与有色化合物的对比度在∆λ60nm以上。
( ✓)2. 分光光度法中，可选择不同厚度的比色皿以
控制吸光度在合适范围内。
1.5 吸光系数
摩尔吸光系数ε意义： 1）吸光物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数。 2）不随浓度c和光程长度b的改变而改变。 3）可作为定性鉴定的参数。 4）同一物质在不同波长下的ε值不同。

示差分光光度法

示差分光光度法示差分光光度法1示差法的原理吸光光度法一般仅适用于微量组分的测定，当待测定组分浓度过高或过低，亦即吸光度测量值过大或过小时，从上节的测量误差的讨论得知，在这种情况下即使没有偏离朗伯—比耳定律的现象，也会有很大的测量误差，导致精准度大为降低。

采纳示差法可克服这一缺点。

目前重要有高浓度示差法，稀溶液示差法和使用两个参比溶液的精密示差法。

其中以高浓度示差法应用*多，本节将侧重讨论。

示差光度法和一般的光度法不同之处重要在于，示差法不是以空白溶液（不含待测组分的溶液）作为参比溶液，而是采纳比待测溶液浓度稍低的标准溶液作参比溶液，然后测量待测溶液的吸光度，再从测得的吸光度求出它的浓度。

这样便大大提高测定结果的精准度。

设用作参比的标准溶液浓度为cs，待测溶液浓度为cx，且cxcs，依据朗伯—比耳定律得到Ax=εcxbAs=εcsb两式相减：A相对=Ax—As=εb（cx—cs）=εbΔc（2—12）实际操作是：用已知浓度的标准溶液作参比，调整其吸光度为零（透光率100%），然后测量待测溶液的吸光度。

这时测得的吸光度实际是这两种溶液吸光度的差值（相对吸光度）。

从（2—12）式可知，所测得的吸光度差值与这两种溶液的浓度差成正比。

这样便可以把空白溶液为参比的稀溶液标准曲线作为ΔA对应于Δc的工作曲线，依据测得的ΔA找出相应的Δc值，从cx=cs+Δc，便可求出待测溶液之浓度，这就是示差法定量测定的基本原理。

2示差法的误差用示差法测定浓度过高或过低试液，其精准度比一般分光光度法高。

这可从图2—3看出。

设图2—3示差法标尺原理按一般分光光度法用试剂空白作参比溶液，测得溶液的透光率Tx=6%，明显，这时的测量读数误差是很大的。

采纳示差法时，假如按一般分光光度法测得的Ts=10%的标准溶液作参比溶液，使其透光率从标尺上Ts1=10%处调至Ts2=100%处，相当于把检流计上的标尺扩展到原来的十倍（TS2/TS1=100/10=10），这样待测试液透光率原来为6%，读数落在光度计标尺刻度很密，测量误差很大的区域，改用示差法测定时，透光率则是60%，读数落在测量误差很小的区域，从而提高了测定的精准度。

磺基水杨酸差示分光光度法测定不同含量铁的研究及应用_包桂兰

磺基水杨酸差示分光光度法测定不同含量铁的研究及应用包桂兰1,刘青山2(1.内蒙古师范大学地理系,内蒙古呼和浩特010022;2.内蒙古轻工业学校,内蒙古包头014000)摘　要:研究了用磺基水杨酸显色,差示分光光度法测定不同含量铁的方法.在pH 1.80—3.00的缓冲介质中,铁与磺基水杨酸生成紫红色络合物,表观摩尔吸光系数ε490为1.7×103L ·mol -1·cm -1,铁含量在4.00—28.00mg ·L -1(或16.00—40.00mg ·L -1)范围内符合比耳定律.该法简便快速,选择性好,准确度高,测定范围广,适用于地质样、钢样中常量特别是高含量铁的测定.关键词:铁;磺基水杨酸;差示分光光度法中图分类号:O 657.32　文献标识码:A 文章编号:1001-8735(2001)02-0139-03关于差示分光光度法的原理、特点、实验技术条件等方面介绍的文献很多[1,2],以磺基水杨酸显色光度法测定铁已有报道[3],但差示分光光度法测定常量铁未见报道.经典的常量铁的分析是用重铬酸钾滴定法,而此法测定的废液中大量的H g 2Cl 2和Cr 3+将污染环境,用差示分光光度法可克服一般分光光度法误差大和分析带来的污染等缺点.用此法测定地质样和钢样中的高、中含量铁,相对误差在±0.3%以内.1　实验部分1.1　仪器与试剂　721型分光光度计(上海第三分析仪器厂);pHS -3型数字式酸度计(天津第二分析仪器厂).0.2000g ·L -1Fe (Ⅲ)标准溶液:称取高纯铁0.1000g 于小烧杯中,加硝酸(1+1)10mL ,加热溶解,煮沸除去氮的氧化物,冷却,移入500m L 容量瓶中,以水稀释至刻度,摇匀;5%磺基水杨酸溶液;H 3BO 3-Na 2B 4O 7缓冲溶液:pH 9.0的Na 2B 4O 7溶液和H 3BO 3饱和溶液(1+1)混合配制;硝酸、盐酸、高氯酸:AR 级;氢氟酸:ρ=1.13.所用试剂均为分析纯,实验用水为二次蒸馏水.1.2　实验方法　移取一定量的Fe (Ⅲ)标准溶液于25m L 容量瓶中,加2.00m L 5%磺基水杨酸,10mL H 3BO 3-Na 2B 4O 7缓冲溶液,用水稀释至刻度,摇匀.以0.100mg (或0.400mg )Fe (Ⅲ)的显色液作参比,用1cm 比色皿,于490nm 波长处测定吸光度.2　结果与讨论2.1　最大吸收波长　试验表明,在pH 1.80—3.00缓冲介质中,Fe (Ⅲ)与磺基水杨酸生成收稿日期:2001-02-23作者简介:包桂兰(1965-),女(蒙古族),内蒙古科右中旗人,内蒙古师范大学实验师.第30卷第2期2001年6月内蒙古师大学报自然科学(汉文)版Journal of I nner M ongolia Normal University (N atural Science Edition )Vol .30No .2Jun .2001紫红色络合物,其最大吸收波长λmax =490nm ,ε=1.7×103L ·mol -1·cm -1,实验用490nm .2.2　酸度的影响与显色剂用量　在pH 1.80—3.00时,磺基水杨酸是差示分光光度法测定铁的理想显色剂,完全符合文献[2](pH <1.80时络合物吸光度不稳定;pH >3.00时,显色不完全),有色化合物摩尔吸光率可以不必很大,以便溶液浓度较浓时,其吸光度也不会太大,可使测定范围较广.Fe (Ⅲ)溶液(或试液)和磺基水杨酸溶液本身的酸度很高,25m L 体积保持pH 1.80—3.00,5%磺基水杨酸溶液用量在2.00mL 时,H 3BO 3-Na 2B 4O 7缓冲溶液需要8—11m L ,实验选用10mL .图1　标准曲线1　以0.100mg Fe (Ⅲ)显色液作参比2　以0.400mg Fe (Ⅲ)显色液作参比2.3　标准曲线　分别取Fe (Ⅲ)标准溶液0.100,0.200,0.400,0.500,0.600,0.700,0.800,1.000mg 于25m L 容量瓶中,按实验方法显色定容,摇匀.以0.100mg Fe (Ⅲ)显色液作参比,在490nm 波长处,用1cm 比色皿,测定0.100—0.700mg Fe (Ⅲ)这一系列吸光度.再以0.400mgFe (Ⅲ)显色液作参比,测定0.400—1.000mgFe (Ⅲ)这一系列吸光度,绘制两条标准曲线,如图1所示.2.4　共存离子的影响　pH 1.80—3.00时,由于氢离子浓度较大,抑制了试剂本身的离解,使其它金属离子与磺基水杨酸阴离子生成络合物的可能性减小[4],实验条件下常见阳离子均不显色.试验表明,对于0.300mg Fe (Ⅲ),在拟定条件下,可允许下列离子存在(以mg 计,未作上限量):Ca 2+,M g 2+,Ba 2+,Cd 2+,Bi 3+,M n 2+,Pb 2+,Zn 2+,Al 3+,Sn 2+(10),M o 6+,V 5+(5),Cr 6+(3),Ni2+,Cu 2+,Co 2+(2),Cr 3+(0.25),Ti 4+(0.02),M n 7+(1.0)(因MnO -4本身的颜色干扰严重,但20min 内与显色剂发生氧化还原反应而退色,消耗一定量的显色剂),Cl -,NO -3,F -,PO 3-4等对测定无影响.所测定地质样铅锌矿中含有Pb ,Zn ,Cu ,铁矿中除铁无其它金属元素,钢样中含有Mn (0.44%),Ni (2.97%),Cr (1.59%)等均低于可允许量,不用掩蔽剂可直接测定铁.3　样品分析3.1　铅锌矿中铁的测定　分别称取0.1000g 铅锌矿c 1、c 2置于小烧杯中,加几滴水润湿后,加入浓盐酸10m L ,盖表面皿,加热溶解片刻.然后加浓硝酸3m L ,滴加氢氟酸数滴,煮沸驱尽氮氧化物,冷却后移入100m L 容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀.取此试液2.00m L ,以0.100mg Fe (Ⅲ)显色液作参比,按实验方法测定,结果见表1.3.2　铁矿中铁的测定　称取0.1000g 铁矿置于小烧杯中,加几滴水润湿,加入浓盐酸10mL ,盖表面皿,低温加热溶解,加5滴氢氟酸,继续加热完全溶解,冷却后移入100m L 容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀.取此试液1.00m L ,以0.100mg Fe (Ⅲ)显色液作参比,按实验方法测定,结果见表1.3.3　钢样中铁的测定　称取0.1000g 钢样142号于小烧杯中,加入10硝酸·140· 内蒙古师大学报自然科学(汉文)版第30卷　(1+2)溶液,加高氯酸5m L ,氢氟酸数滴,低温加热近干,冷却后用水浸出移入100m L 容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀.取此试液1.00mL ,以0.400mg Fe (Ⅲ)显色液作参比,按实验方法测定,结果见表1.表1　样品分析结果样品推荐值(%)测得值(%)平均值(%)相对误差(%)c 117.8017.7617.7717.7417.76-0.22c 215.8015.7615.7515.7515.76-0.25铁矿50.8850.8350.8250.8250.82-0.11钢样14294.3194.3294.3494.3594.34+0.03参考文献:[1]　罗庆尧,邓延倬,蔡汝秀,等.分光光度分析[M ].北京:科学出版社,1992.355-371.[2]　国家机械工业委员会.光度分析[M ].北京:机械工业出版社,1988.55-58.[3]　衡兴国,黄按佑.实用快速化学分析新方法[M ].北京:国防工业出版社,1996.226-276,335.[4]　刘绍璞,朱鹏鸣,张国轩,等.金属化学分析概论与应用[M ].重庆:四川科学技术出版社,1985.914.S TU DY AN D APPLICA TIO N O F DET ERM INA TION O FDIFFEREN T CO N TEN T LEV EL IRON BY S U LFO SA LICYLICACID DIFFEREN T IA L SPECT ROSCO PYBAO Gui -lan 1,LIU Qing -shan 2(1.Department of G eography ,Inner Mongolia Normal University ,Huhhot 010022,China ;2.I nner Mongolia L ight I ndustry Scho ol ,Baotou 014000,China )A bstract :In this paper ,different content iron are determined by using sulfosalicylic acid .In the pH 1.80—3.00buffer solution ,iron and sulfosalicy lic acid can form purplish red complexes ,and its apparent molar absorption coefficient ε490is 1.70×103L ·mol -1·cm -1.Beer s law is obeyed for the content of iron in the range of 4.00—28.00mg ·L -1(or 16.00—40.00mg ·L -1).The method is simple ,rapid and alternative .Its deg ree of accuracy is hig h and scope of determination is wide .The method is suitable for macro -iron ,especially high content iron determination in the geological sam ple and steel sample .Key words :iron ;sulfosalicy lic acid ;differential spectroscopy 【责任编辑董祥林】·141·　第2期包桂兰等:磺基水杨酸差示分光光度法测定不同含量铁的研究及应用。

示差分光光度法

示差分光光度法
示差分光光度法是一种在分子取向反应或光谱特性中应用广泛的
分析方法。

首先，示差分光光度法通过比较两种不同取向下的吸收光谱，来
探测反应中的分子结构变化。

通过这种方法，我们可以更好地理解反
应的机理和特性。

其次，示差分光光度法在不同波长或时间段内测量光谱信号，可
以得到很高的灵敏度和分辨率。

这使得该方法在许多不同领域都有应用，如化学、生物学、医学等等。

此外，示差分光光度法还可以用于探测微量物质的存在和浓度变化。

这种方法可以用于监测环境污染、药物代谢等方面。

需要注意的是，示差分光光度法需要设备精细和技术娴熟的操作。

对于初学者来说，需要认真学习理论知识和实验技能，才能获得准确
的测量结果。

总之，示差分光光度法是一种应用广泛、灵敏度高、分辨率高的
分析方法。

在化学、生物学、医学等领域都有广泛的应用前景。

如今，随着技术的不断发展和创新，示差分光光度法将会得到更广泛的应用
和挖掘。

分光光度法应用的发展(精)

上式意义：在符合比尔定律测定浓度范围内，差示法测得的相对吸光度(Ar)与被测溶液和参比溶液的浓度差(Cx－Cs,即ΔC)或成正比，即可用于定量测定。此时试液的Tr,x＝50％，令读数落在适宜的范围内，提高了测定的准确度。
4、参比溶液浓度与测量误差的关系
参比溶液浓度与测量误差的关系可用图2-15表示：
图2－16 KMnO4和K2Cr2O7的吸收曲线
例：续（一）
用 KMnO4 和 KCr2O7 标准溶液分别在波长5并根据
ε＝A/bc计算KMnO4在λ1 及 λ2 的摩尔吸光系数 ε(λ1) 、 ε （ λ2 ）和 KCr2O7 在 λ1 及 λ2 的摩尔吸光系数 ε2(λ1) 、 ε2(λ2). 再分别在波长 λ1及λ2测定试液的总吸光度Aλ1和Aλ2。
例：
钢铁中Mn和Cr的测定: 试样经过处理后，得到 MnO4－和Cr2O72－。首先用 KMnO4和KMnO标准溶液制作吸收曲线，如右图。
从图得知它们在可见光区的吸收峰分别是 540nm和440nm （KCr2O7标准溶液分别在吸收峰，但当波长小于425nm时，Fe3+ 会有强烈吸收，故不采用 350nm吸收峰，而用440nm 波长时的小吸收峰）。
差示分光光度法（3）
差示分光光度法的测定步骤： • 采用浓度为Cs的标准溶液为参比溶液; 2）测定一系列ΔC已知的标准溶液的相对吸光度
(Ar)； 3）绘制Ar-ΔC工作曲线； 4）由测得试样溶液得相对吸光度Ar,x，即可从
Ar － ΔC 工作曲线上求出 ΔC(5) 根据 Cx ＝ Cs+ΔC求出试样浓度Cx
2.6.3 分光光度滴定法
利用分光光度计测量滴定过程中吸光度的变化，来确定终点的方法称为分光光度滴定法。

示差法

普通法：Cs的透射比Ts=10%；Cx的透射比Tx=4% 示差法：Cs做参比，调Ts=100% 标尺扩展为10倍则：Cx的Tx=40%
要求：
示差法要求仪器光源强度要足够大，仪器检测要足够灵敏。因为只有这样的仪器才能将标准参比溶液调到T%为100%，否则调不到。
进一步ห้องสมุดไป่ตู้
设待测溶液的浓度为Cx，标准溶液为Cs（Cs〈 Cx），则有： △A=Ax-As=Ɛb(Cx-Cs)=Ɛb△c 测得的吸光度相当于普通法中待测溶液与标准溶液的吸光度之差。示差法测得的吸光度与△c呈线性关系。由标准曲线上查的相应的值，则待测溶液的Cx： Cx=Cs+△C
示差法标尺扩展原理：
示差法
722型可见分光光度计
——高含量组分的测定
微生物11301班七组
了解：
普通分光光度计一般只适于测定微量组分。然而，当待测组分含量较高时，其将产生较大的误差。
思考：采用什么方法才适合于高含量组分的测量计算？
示差法
示差法又称为示差分光光度法。它与一般分光光度法区别仅仅在于它采用一个已知浓度作参比溶液，才大大提高了测定的准确度，使其用于测定过高含量的组分，所以将这种吸光度测量方法来扩大测量范围并提高灵敏度和准确度的方法称之为示差法。
为什么示差分光光度法可以提高测定的准确度?
吸光光度法一般仅适用于微量组分的测定，当待测定组分浓度过高或过低，亦即吸光度测量值过大或过小时，即使没有偏离朗伯--比尔定律现象。也会有很大的测量误差，导致准确度大为降低，采用示差法可克服这一缺点。示差法和一般的光度法不同之处在于，示差法不是以空白溶液（不含待测组分的溶液）作为参比溶液，而是采用比待测溶液浓度稍低的标准溶液作为参比溶液，然后测量待测溶液的吸光度，从而测出待测液的浓度，从而大大提高测定结果的准确度。

差示分光光度法测定决明子中8种必需氨基酸

测定决明子中８种
必需氨基酸
周菊峰彭爱姣１湘南学院化学与生命科学系，，（．湖南
郴州４３０；．南学院图书馆，南郴州４３０）２００２湘湖２００
摘要：目的用差示分光光度法测定决明子中的８种必需氨基酸。方法在ＰＨ８的缓冲溶液中，基酸与茚三酮生成蓝氨紫色配合物，８种必需氨基酸最大吸收波长处分别测定吸在光度，归，出氨基酸含量。结果决明子中８种必需氨基回求酸的含量为０１７～１４３，．２．２总含量为３３。结论该法．６
简便、准确，果可靠，用于中药等生物试样中常量特别是结适含量较高的各类氨基酸的测定。
关键词：明子；示分光光度法；需氨基酸决差必
ｄｉ１．９９ｊｉｓ．０４２０．０１０．１ｏ：０３６／．ｓｎ１０ —４７２１．１０５
［］刘文卿．４实验设计［Ｉ北京：大学出版社，０５１． Ⅳ］．清华２０：２［］吴凡，哗．Ｉ５李ＨＰＣ法测定心脑片中大黄素的含量ｒ］－．Ｊ
西北药学杂志，０８，３（）：９１．２０２１－０
极差Ｒ
０４３８．４
１１Ｏ７．１
０３８４．７

用差示紫外分光光度法直接测定地表水中的亚硝酸根和硝酸根

根。该方法的基本原理是在亚硝酸根吸收光谱的峰值２０ｍ为１
测定波长，以仅去除亚硝酸根的水样本身为参比溶液，Ｉ迥定该水
样中的亚硝酸根；以去除了亚硝酸根和硝酸根的水样为参比溶液，去除了亚硝酸根的水样为样液，测定硝酸根。由于参比溶液与样品除亚硝酸根或硝酸根外，其他组分完全相同，因此消除了干扰。亚硝酸根的最低检出限为０ＯｎＬ硝酸根的最低检出．ｌｒ，ｇ＇限为０Ｏｍ／ｌｇＬ。２仪器和试剂２１仪器．
１引言
薄膜后，弃溶液，加水洗３，次风干后装瓶备用。
３实验方法
地表水中亚硝酸根和硝酸根是不可缺少的监测项目。现行
测定亚硝酸根的标准方法多用Ｎ一１萘基一乙二胺盐酸盐分光光度法，其显色剂比较贵且有毒；现行测定硝酸根的标准方法以紫外吸收法１较为简单，该法用于地表水的测定时，］一但由于不同河段、水库的水样可能存在干扰组分不相同，需要进行较复杂的干扰处理，使测定方法复杂化，且该方法也不能同时测定亚硝酸
（ № ：１０ｍ液为参比溶液， ①样溶液为测定样液，２０砌处测在１量硝酸根的吸收值，减去（．）３２中溶液的吸收值，由硝酸根的标准
曲线查出其浓度。４实验结果疑讨论４１亚硝酸根和硝酸根的紫外吸收光谱．用２ｍＬ的亚硝酸根和２ｍ／ｇＬ的硝酸根溶液分别纯水
２２２亚硝酸根的标准溶液称０４２．９亚硝酸钠溶于水，转移至１Ｌ容量瓶中，稀释至刻度（町一：１０ＣＮ０Ｌ。）２２３氨磺酸．２２４锌一铜还原剂．．将锌粒用稀盐酸洗净，用水洗３次，１０ｍ再取０Ｌ烧杯，加八５水和２饱和硫酸铜溶液，ｏｒ＿ｎＪ５ｒ＿ｎＪ当锌粒表面出现一层黑色的

差示分光光度法含量测定的原理和方法

差示分光光度法含量测定的原理和方法下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。

文档下载后可定制修改，请根据实际需要进行调整和使用，谢谢！本店铺为大家提供各种类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，想了解不同资料格式和写法，敬请关注！Download tips: This document is carefully compiled by this editor. I hope that after you download it, it can help you solve practical problems. The document can be customized and modified after downloading, please adjust and use it according to actual needs, thank you! In addition, this shop provides you with various types of practical materials, such as educational essays, diary appreciation, sentence excerpts, ancient poems, classic articles, topic composition, work summary, word parsing, copy excerpts, other materials and so on, want to know different data formats and writing methods, please pay attention!差示分光光度法是一种常用的分析化学方法，用于测定物质溶液中的物质含量。

示差分光光度法测定水样中非那西汀的含量

实验方法及步骤
1.标准溶液的配制非那西汀标准溶液（100μg/ml）：准确称取非那西汀0.0500g于小烧杯中，加少许乙醇溶解，转移到500ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀备用 2.吸收曲线绘制移取5.00ml非那西汀标准溶液于50ml容量瓶中，蒸馏水稀释至刻度，摇匀。以蒸馏水为空白，进行全波长扫描，绘制吸收曲线，找出最大波长。
1. 示差分光光度法的测定步骤：
1）采用浓度为cs的标准溶液为参比溶液;
2 ）测定一系列 Δc 已知的标准溶液的相对吸光度 (ΔA)； 3）绘制ΔA-Δc工作曲线； 4）由测得试样溶液得相对吸光度 ΔA，从工作曲线上求出 Δc ，根据 cx ＝ cs+Δc 即可求出试样浓度cx
试剂与器材
UV-2450紫外-可见分光光度计，石英比色皿（1cm），容量瓶（50ml），移液管（1ml、10ml），未知样品液。
三、示差分光光度法原理
普通分光光度法一般测定痕量组分参比溶液浓度为零
即朗伯—比耳定律只适用于稀溶液。
示差分光光度法
用于测定浓度较高组分用浓度稍低于待测溶液的标准溶液作参比
设：待测溶液浓度为cx，标准溶液浓度为cs(cs < cx)。则： Ax= εb cx As = εb cs ΔＡ＝Ａx －Ａs =εb(cx － cs ）=εbΔc
测得的吸光度相当于普通法中待测溶液与标准溶液的吸光度之差ΔＡ(也叫相对吸光度Ar)。
示差法测得的吸光度ΔA与Δc呈直线关系。由标准曲线上查得相应的Δc值，则待测溶液浓度cx ： cx = cs + Δc 示差法标尺扩展原理
普通法： cs的T =10%；cx的T = 5% 示差法： cs 做参比，调T =100% 则： cx的T = 50% 标尺扩展10倍

示差分光光度法

8
（4）从吸收曲线形状可以解释物质的颜色。物质的颜色与吸收光颜色互为补色。
光的互补：蓝黄
9
§7-3
光吸收的基本定律
一、Lamber-Beer定律二、吸光系数和吸收光谱三、偏离Beer定律的因素四、透光率的测量误差
10
一、Lamber-Beer定律—吸收光谱法基本定律
描述物质对单色光吸收强弱与液层厚度和待测物浓度的关系
→ 定性、定量依据
14
2．吸光系数两种表示法： 1）摩尔吸光系数：
在一定λ下，c=1mol/L，b=1cm时的吸光度
2）百分含量吸光系数 / 比吸光系数a：
在一定λ下，c=1g/100mL，b=1cm时的吸光度
3）两者关系
M 1% a1cm 10
3．吸收光谱（吸收曲线）：λ~A 最大吸收最小吸收肩峰特征值→定性依据
13
二、吸光系数和吸收光谱
1．吸光系数的物理意义：单位浓度、单位厚度的吸光度
A a bc
讨论：
1）a=f（组分性质，温度，溶剂，λ）当组分性质、温度和溶剂一定，a=f（λ） 2）不同物质在同一波长下a可能不同（选择性吸收）同一物质在不同波长下a一定不同 3）a↑，物质对光吸收能力↑, 定量测定灵敏度↑
第七章
§7-1 §7-2 收 §7-3 §7-4 §7-5 §7-6 思考题
可见分光光度法
概述物质对光的选择性吸光吸收的基本定律分光光度计简介分光光度法的建立分光光度法的应用
1
§7-1
概
述
一、吸光光度法
在光谱分析中，依据物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法称为吸光光度法。主要有: 红外吸收光谱：分子振动光谱，吸收光波长范围800nm50m 。主要用于有机化合物结构鉴定。紫外吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范围200400 nm（近紫外区）。可用于结构鉴定和定量分析。

实验报告-硝酸还原酶活性的测定

实验报告-硝酸还原酶活性的测定实验目的：通过测定差示分光光度法下重铬酸钾氧化还原的反应，间接测定硝酸还原酶的活性。

实验原理：硝酸还原酶是一种以二价铁离子为电子受体的酶，能将NO2-还原为NO，是硝化作用的逆反应。

硝酸还原酶活性含量的测定常用于土壤、水环境等环境污染的检测。

本实验采用差示分光光度法来测定硝酸还原酶活性。

本实验中的差示分光光度法，利用重铬酸钾通过氧化还原反应，证明硝酸还原酶活性的存在。

重铬酸钾可以与硫酸铵和硝酸根离子反应，生成过氧化双铬离子和金属铵盐，同时溶液中的硝酸根离子被还原成氨氮产生气体释放出来。

通过测定溶液中氨氮的浓度，就可以计算出硝酸还原酶的活性含量。

实验步骤：1.准备A、B、C三个样品液。

A液：葡萄糖酸钙0.2g、1.5ml缓冲溶液、0.3ml菌液，加水至50ml。

B液：A液中再加菌液0.1ml。

C液：A液中再加无菌蒸馏水0.1ml代替菌液。

2.分别在三个位于水浴中的试管中加入A、B、C液各5ml并在水浴中孵育30分钟。

3.在孵育A液和C液试管的时间中，用硫酸铵和硝酸铵配制1%的硝酸根离子的溶液，重铬酸钾以及0.05%的草酸铁溶液。

4.在孵育后立即对A、B、C液各加入10ml配制好的硝酸根离子溶液。

5.再依次加入相同体积的重铬酸钾、草酸铁溶液，灵敏管测定氨氮的相对吸收值。

实验结果：样品重铬酸钾溶液的吸光度草酸铁溶液的吸光度比值氨氮浓度（mg/L）A 0.87 0.28 3.11 4.7B 0.77 0.25 3.08 4.6C 0.05 0.03 1.67 2.5实验分析：由上表可知，A、B两个样品的吸光度比值相差不太明显，说明A液中添加的0.1ml菌液对硝酸还原酶的活性没有显著的提高作用，而C液则比较显著地破坏了硝酸还原酶的活性，其氨氮浓度只有A、B两个样品的一半。

通过本次实验的差示分光光度法测定硝酸还原酶活性的方法，我们发现添加微生物菌液可以提高硝酸还原酶的活性，而加入无菌蒸馏水则会对其产生损害。

邻菲罗啉示差分光光度法测定铁矿石中全铁含量

邻菲罗啉示差分光光度法测定铁矿石中全铁含量概述邻菲罗啉示差分光光度法（Differential Spectrophotometric Method with Phenanthroline）是一种常用于测定铁矿石中全铁含量的分析方法。

该方法基于邻菲罗啉与亚铁离子的络合反应，通过测定络合物的吸光度来间接测定样品中的全铁含量。

原理邻菲罗啉与亚铁离子反应生成橙色络合物，该络合物在510 nm波长处有最大吸光度。

当样品中的亚铁离子与邻菲罗啉反应生成络合物时，溶液吸光度会随着亚铁离子浓度的增加而增大。

通过测量样品在510 nm波长处的吸光度，可以间接推算出样品中的全铁含量。

实验步骤试剂及设备准备•邻菲罗啉试剂（0.1% 邻菲罗啉溶液）•硫酸（浓度为3.5%）•氢氧化钠（浓度为1.5 M）•铁矿石样品•分光光度计样品预处理1.取一定量的铁矿石样品，加入一些硫酸溶液，用玻璃棒搅拌均匀。

2.将溶液加热至沸腾，持续加热10分钟，使铁矿石样品完全溶解。

3.将溶液冷却至室温，用硫酸调节pH值。

4.加入适量氢氧化钠溶液，使溶液中的亚铁氧化成铁离子。

5.将溶液转移到容量瓶中，并用去离子水定容。

准备标准曲线1.取一系列不同浓度的亚铁标准溶液，分别加入邻菲罗啉溶液和硫酸。

2.将上述溶液转移到容量瓶中，并用去离子水定容。

3.在分光光度计上设置波长为510 nm。

4.分别测量每个标准溶液的吸光度，并记录结果。

测定样品1.将经过预处理的样品溶液转移到比色皿中。

2.在分光光度计上设置波长为510 nm。

3.测量样品溶液的吸光度，并记录结果。

绘制标准曲线与计算全铁含量1.将标准溶液的浓度与吸光度值绘制成图表，并进行线性拟合。

2.根据拟合曲线，计算样品中的全铁含量。

数据分析与结果展示标准曲线以亚铁标准溶液的浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标绘制标准曲线，根据曲线方程可以计算出样品中的全铁含量。

亚铁标准溶液浓度（M）吸光度0.001 0.2140.002 0.4260.003 0.6330.004 0.8410.005 1.055样品测定结果测得样品的吸光度为0.725。

邻菲罗啉示差分光光度法测定铁矿石中全铁含量

邻菲罗啉示差分光光度法测定铁矿石中全铁含量
邻菲罗啉示差分光光度法是一种常用于测定铁矿石中全铁含量的方法。

该方法基于邻菲罗啉与铁离子之间的络合反应，通过测定络合物的光
学旋光度差来计算铁离子的含量。

具体操作步骤如下：
1. 样品制备：将铁矿石样品粉碎至均匀细粉末，取约0.5克样品加入100毫升锥形瓶中，加入10毫升盐酸和10毫升硝酸，加热至沸腾，
使样品完全溶解，冷却至室温。

2. 邻菲罗啉试剂制备：取适量邻菲罗啉试剂加入100毫升去离子水中，摇匀，制备成0.01mol/L的邻菲罗啉试剂。

3. 样品处理：取10毫升样品溶液加入50毫升锥形瓶中，加入10毫
升邻菲罗啉试剂，摇匀，静置5分钟。

4. 光度测定：将样品转移到比色皿中，用去离子水稀释至50毫升，用紫外-可见分光光度计测定在400纳米处的吸光度值。

5. 示差测定：将样品转移到示差皿中，用示差光度计测定在546纳米
处的旋光度差。

6. 计算全铁含量：根据标准曲线计算出样品中的铁离子含量，再乘以
样品中全铁的相对含量系数，即可计算出样品中的全铁含量。

邻菲罗啉示差分光光度法具有灵敏度高、准确度高、重现性好等优点，适用于测定铁矿石中全铁含量。

但需要注意的是，样品制备过程中要
避免铁离子的污染，同时要注意邻菲罗啉试剂的保存和使用，以保证
测定结果的准确性。

差示分光光度法测定药物制剂中的四环素

差示分光光度法测定药物制剂中的四环素四环素是生物合成的广谱抗菌素。

临床研究表明，病人服用四环素后，定时测定体液中四环素含量可诊断胃癌，四环素还可作为荧光探针用以诊断癌症。

近年来，四环素还广泛被用作饲料添加剂，以增强动物的抗病能力。

关于四环素的测定方法，已有许多报道，如微生物法、分光光度法差示导数光谱法、FIA、RHPL、ISE、吸附SV、三氯化铁比色法等。

本文利用四环素与钻离子在PH为11.5的Na2HPO4－NaOH缓冲溶液中生成黄绿色络合物，并根据其光谱变化的牲性，采用差示光度法不经分离直接测定了药物制剂中的四环素。

四环素浓度在0.80－25ug/ml范围内符合比耳定律。

1 实验部分1.1仪器与试剂TU－1221型紫外－可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；PH－HJ908OB数字酸度计时北京海淀航天计算机公司）；XYJ80－2离心沉淀机（江苏医疗器械厂）。

盐酸四环素标准液：用标准品（中国药品生物制品检定所提供）配成2mg／ml的储备液，使用时用水稀释成0.2mg／ml；钻离子溶液：用CoCl2·6H2O配成1mg／ml的储备液，使用时稀释成0.1mg／ml；Na2HPO4－NaOH缓冲溶液。

以上试剂均为分析纯，水为市售二次去离子水。

1.2 实验方法于两支25ml的比色管中，分别加入0.2mg／ml的盐酸四环素标准使用液2.0ml，一支用水稀释至刻度作参比液，另一支加入0.1mg／ml的钴离子溶液2ml，Na2HPO4－NaOH缓冲2ml，用水稀释至刻度。

前者置参比池中，后者置样品池中，于405nm处测其吸光度。

2结果与讨论2.1 实验条件的选择络合物的形成受诸多因素的影响，本文对酸度，缓冲溶液的种类及用量、钴离子的用量、反应温度、反应时间等条件的影响作了讨论。

2.1.1 吸收光谱将盐酸四环素标准使用液按实验方法处理后，在380－500nm波长范围内进行波长扫描。

盐酸四环素在405nm处最大吸收，可作为测定波长。

差示分光光度法测定呋塞米片的含量

差示分光光度法测定呋塞米片的含量胡惠云;刘燕【摘要】Objective To find out a method to determine the Furosemide tablets. Methods The differential absorptions of furosemide in 0. 1mol · L-1 NaOH and in 0. 1 mol · L-1 HC1 were determined at the detection wavelength of 280 nm. Results The calibration curves showed good linearity in the range from 5. 10 to 40. 84 mg · L-( r = 0. 999 9 ). The average recovery rate ( n =6 )was 99. 69% ,and RSD was 0. 95% . Conclusion The method is simple,quick and accurate,which can be a quality standard of furosemide tablets.%目的探讨呋塞米片含量测定的方法.方法在波长280 nm处,呋塞米以其在0.1 mol·L-1氢氧化钠溶液为参比液,测得其在0.1 mol·L-1盐酸溶液中的差示吸收值.结果呋塞米浓度在5.10～40.84 mg·L-1范围内ΔA与溶液浓度呈良好线性关系(r＝0.999 9),平均回收率为99.69%(n=6),RSD为0.95%.结论该方法简便、快速、准确,可用于呋塞米片的质量控制.【期刊名称】《安徽医药》【年(卷),期】2012(016)008【总页数】2页(P1080-1081)【关键词】差示分光光度法;呋塞米;测定【作者】胡惠云;刘燕【作者单位】安徽省池州市人民医院;安徽省池州市食品药品检验所,安徽,池州,247000【正文语种】中文呋塞米是袢利尿药，也称速尿，主要用于水肿性疾病、高血压、高钾血症及高钙血症等疾病的治疗，在水肿性疾病治疗中，包括充血性心率衰竭、肝硬化、肾性疾病，尤其是应用其他利尿药效果不佳时，应用本类药物仍可能有效［1］。