银耳多糖的提取工艺
银耳多糖的制备及一般鉴定
银耳多糖的制备及一般鉴定【实验目的】1．学习真菌多糖类的分离、纯化原理。
2．学习多糖类物质的一般鉴定方法。
3. 掌握真菌多糖类粗提取的具体步骤及相应原理。
【实验原理】银耳是我国传统的一种珍贵药用真菌，具有滋补强壮、扶正固本之功效。
银耳中含有的多糖类物质则具有明显提高机体免疫功能、抗炎症和抗放射等作用。
提取与纯化动植物中存在的多糖或微生物胞内多糖，因其细胞或组织外大多有脂质包围，要使多糖释放出来，第一步就是去除表面脂质, 常用醇或醚回流脱脂。
第二步将脱脂后的残渣以水为主体的溶液提取多糖，这样提取得到的多糖提取液含有许多杂质。
杂质主要是无机盐，低分子量的有机物质及高分子量的蛋白质、木质素等。
第三步则要除去这些杂质，对于无机盐及低分子量的有机物质可用透析法、离子交换树脂或凝胶过滤法除去；对于大分子杂质可用酶消化(如蛋白酶．木质素酶) ，乙醇或丙酮等溶剂沉淀法或金属络合物法。
多糖提取液中除去蛋白质是一个很重要的步骤，常用方法有S e v a g e法、三氯乙酸法、酶解法、三氟三氯乙烷法等。
（1）S e v a g e法是除蛋白的经典方法，主要是利用蛋白质在氯仿中变性的特点，用氯仿:正丁醇=5:1或4:1的二元溶剂体系按1:5加入到多糖提取液中，混合物经剧烈振摇后离心，蛋白质与氯仿-正丁醇生成凝胶物而分离，分去水层和溶剂层交界处的变性蛋白质。
（2）三氯乙酸法利用三氯乙酸，在低温下搅拌加入到多糖提取液中，直到溶液不再继续混浊为止离心弃沉淀，即可达到脱蛋白的目的。
存在于溶液中的三氯乙酸经中和后，通过透析或超滤等方法除去。
（3）酶解法提取是根据植物细胞壁的构成，利用酶反应所具有高度专一性的特点，选择相应的酶，将细胞壁的组成成分(纤维素、半纤维素和果胶质)水解或降解，破坏细胞壁结构，使细胞内的成分溶解、混悬或胶溶于溶剂中，从而达到提取目的，且有利于提高成分的提取率。
（4）三氟三氯乙烷法将三氯乙烷按1:1的比例加到多糖提取液中，在低温下搅拌约10min，离心得上层水层，水层继续用上述方法处理几次即得，此法效率较高，但因其易挥发，不宜大量应用。
银耳提取银耳多糖工艺流程-12
银耳提取银耳多糖工艺流程一、综述1、银耳银耳又名白木耳，是一种高等真菌，性味甘、平、具有滋阴润肺、养胃生津之功效，自古以来被人们看作是延年益寿的佳品，是世界公认的最珍贵的食用菌和重要药材。
银耳子实体中除银耳多糖物质外，还含有一定量的果胶质、蛋白质、粗纤维等成分，这些物质的存在，将不利于多糖物质的提取分离和纯化。
2、多糖多糖又名多聚糖，通常由多个单糖分子通过缩合、失水从而由甘糖键结合而成的一类分子结构复杂的高分子化合物。
根据其脱水缩合的成分不同，可分为均一性多糖、不均一性多糖。
多糖具有抗肿瘤、抗病毒、抗炎、抗衰老、抗氧化、抗溃疡、降血糖、调节身体免疫力等多种作用。
3、银耳多糖简介银耳多糖(Tremella polysaccharides, TP)是银耳的重要活性成分(约占银耳干重的60%-70% )，是从银耳子实体或液体深层发酵的银耳孢子中提取出来的一种活性多糖。
大量研究表明，从银耳中提取分离得到的银耳多糖具有提高机体免疫力、降血糖、降血脂、抗衰老、抗溃疡、抗血栓形成、抗突变、抗肿瘤等作用，能增强机体耐缺氧能力，清除自由基。
1.1银耳多糖的组成银耳多糖的主链是由a-(1-3)-糖苷键组成的甘露聚糖，主链的2, 4, 6 位上连接有葡萄糖、木糖、岩藻糖及普通糖醛酸等残基组成的侧链，其活性中心是a -(1-3)-甘露聚糖这一共同结构部分。
银耳多糖种类包括酸性杂多糖、中性杂多糖、胞壁多糖、胞外多糖和酸性低聚糖五种，不含核酸、蛋白质类物质［3。
］1.1.1酸性杂多糖约占银耳总多糖的70%~75%，为木糖、甘露糖和葡萄糖醛酸为主的多聚体，中有少量岩藻糖。
1.1.2中性杂多糖约占银耳总多糖的20%左右，为木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖的多聚体。
1.1.3胞壁多糖根据文献报道，一种是从胞壁外层产生的酸性多糖，由D-葡萄糖醛酸、D-甘露糖和D-木糖组成；另一种为碱性多糖，由D-葡萄糖、D-葡萄糖醛酸、D-甘露糖和D-木糖组成。
实验一银耳多糖的制备及分析
实验一银耳多糖的制备及分析实验目的：1. 学习真菌多糖类的分离、纯化原理。
2. 掌握多糖类物质的提取及一般鉴定方法。
实验原理：银耳（Tremella fuciformis）是我国一种传统的珍贵的真菌，具有滋补强壮、扶正固本之功效。
银耳中含有的多糖类物质则具有明显提高机体免疫功能、抗炎症和抗放射等作用。
多糖（polysaccharides）的纯化方法很多，但必须根据目的物质的性质及条件选择合适的纯化方法。
而且往往用一种方法不易得到理想的结果，因此必要时应考虑合用几种方法。
1、乙醇沉淀法：乙醇沉淀法是制备黏多糖的最常用手段。
乙醇的加入，改变了溶液的极性，导致糖溶解度下降。
供乙醇沉淀的多糖溶液，其含多糖的浓度以1%----2%为佳。
加完酒精，搅拌数小时，以保证多糖完全沉淀。
沉淀物可用无水乙醇、丙酮、乙醚脱水，真空干燥即可得疏松粉末状产品。
2、分级沉淀法：不同多糖在不同浓度的甲醇、乙醇或丙酮中的溶解度不同，因此可用不同浓度的有机溶剂分级沉淀分子大小不同的黏多糖。
3、季铵盐络合法：黏多糖与一些阳离子表面活性剂如十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）和十六烷基氯化吡啶（CPC）等能形成季铵盐络合物。
这些络合物在低离子强度的水溶液中不溶解，在离子强度大时，这种络合物可以解离，溶解，释放。
本实验采用银耳子实体，经沸水抽提、氯仿—正丁醇法除蛋白质和乙醇沉淀分离可制得银耳多糖粗品，再用CTAB（溴化十六烷基三甲铵）络合法进一步精制可得银耳多糖精品。
然后进行定性和定量测定及杂质含量测定。
实验器材：1、器材（1）布氏漏斗 1 只（2）500ml抽滤瓶 1 只（3）250ml分液漏斗 1 只（4）100ml量筒 2 只（5）10ml量筒 1 只(6) 离心机 1 只（7）烧杯 2 只（8）水浴锅 1 只2、试剂（1）银耳实体：10g（2）2%CTAB:取2gCTAB溶于100ml蒸馏水中，摇匀备用（3）2mol/L 氢氧化钠溶液，6.2mol/L氯化钠溶液（4）氯仿—正丁醇溶液（4：1）（5）95%乙醇（6）甲苯胺（7）乙醚（8）无水乙醇（9）浓硫酸（10）a—萘酚（11）斐林试剂：A液：将34.5g硫酸铜（Cuso4.5H2O）溶于500ml水中B液：将125g氢氧化钠和137g酒石酸钾钠溶于500ml水中，临用时，将A B两液等量混匀。
银耳多糖制备实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握银耳多糖的提取和分离纯化方法。
2. 了解银耳多糖的理化性质和生物活性。
3. 培养实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理银耳多糖（Tremella fuciformis polysaccharide，TFP）是一种具有多种生物活性的天然高分子化合物，主要存在于银耳子实体中。
银耳多糖具有提高免疫力、降血糖、降血脂、抗衰老、抗肿瘤等生理活性，在食品、医药、化妆品等领域具有广泛的应用前景。
本实验采用水提醇沉法提取银耳多糖，该方法操作简便、成本低、提取效率较高。
首先，将银耳子实体粉碎，用热水提取其中的多糖成分；然后，通过加入乙醇使多糖沉淀，再进行离心分离和洗涤，最后得到银耳多糖粗品。
三、实验材料与仪器1. 实验材料- 银耳子实体：市售优质银耳- 试剂：95%乙醇、蒸馏水、氢氧化钠、氯化钠、苯酚、硫酸、活性炭等- 仪器：粉碎机、恒温水浴锅、旋转蒸发仪、离心机、分析天平、紫外可见分光光度计等2. 实验步骤（1）银耳子实体粉碎：将银耳子实体洗净、干燥、粉碎，过60目筛，备用。
（2）提取：取粉碎后的银耳子实体10g，加入100mL蒸馏水，于80℃恒温水浴锅中提取2小时。
（3）醇沉：将提取液冷却至室温，加入95%乙醇，使溶液中乙醇浓度达到70%，静置过夜。
（4）离心分离：将醇沉后的溶液以3000r/min离心15分钟，取沉淀。
（5）洗涤：用95%乙醇和蒸馏水分别洗涤沉淀3次，每次30分钟。
（6）干燥：将洗涤后的沉淀置于50℃真空干燥箱中干燥，得到银耳多糖粗品。
（7）银耳多糖含量测定：采用苯酚-硫酸法测定银耳多糖含量。
四、实验结果与分析1. 银耳多糖提取率根据苯酚-硫酸法测定，银耳多糖提取率为4.5%。
2. 银耳多糖的理化性质（1）外观：银耳多糖粗品为白色粉末，无异味。
（2）溶解性：银耳多糖在水中溶解度较好，在乙醇、丙酮等有机溶剂中不溶。
（3）分子量：通过凝胶渗透色谱（GPC）测定，银耳多糖分子量约为10万。
实验一银耳多糖的制备
汇报人：XX
目录
银耳多糖的简介
01
实验步骤与操作
04
银耳多糖的制备方法
02
实验结果与数据分析
05
实验材料与设备
结论与展望
03
06
银耳多糖的简介
银耳多糖的来源
银耳：一种真菌，广泛用于食品和 药品
制备方法：热水浸提、醇沉淀等
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来源：从银耳子实体中提取
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应用领域：食品、保健品、药品等
实验材料与设备
实验材料
银耳
水
葡萄糖
硫酸
氢氧化钠
实验设备
银耳多糖制备设备：用于提取银耳多糖的专用设备 离心机：用于分离银耳多糖和杂质 烘箱：用于干燥银耳和提取物 搅拌器：用于混合银耳和其他材料
实验步骤与操作
实验准备
实验材料：银耳、 水、葡萄糖等
实验设备：粉碎 机、搅拌器、蒸 发皿等
实验试剂：硫酸、 氢氧化钠等
实验结果与数据 分析
实验结果记录
银耳多糖的得 率：XX%
分子量分布： 主要分布在XX
范围
纯度：通过色 谱分析，纯度
达到XX%
结构表征：通 过红外光谱和 核磁共振氢谱 证实了银耳多 糖的结构特征
数据分析与处理
实验数据收集： 确保数据的准确 性和完整性
数据预处理：清洗、 整理、转换数据， 使其符合分析要求
讨论：对实验结果进行深入讨论，探讨银耳多糖的潜在应用价值和未来研究方向，提出改进和优化实验方法的建议。
结论与展望
结论总结
银耳多糖具有显著的抗氧化 和抗炎作用，对健康有益。
银耳多糖的制备方法得到优 化，提高了提取率和纯度。
银耳多糖咀嚼片的制备工艺的实验方案
银耳多糖咀嚼片的制备工艺的实验方案1、银耳粗多糖的提取1.1 提取的工艺流程1.2 操作要点1.2.1 原料粉碎将市售的银耳干品置于70℃电热鼓风干燥箱中干燥4h，之后机械粉碎机完全粉碎1.2.2 热水浸提将粉碎好的银耳干品以料液比1:60置于3000ml的锥形瓶中，90℃水浴，并不断搅拌浸提8h1.2.3 离心及浓缩将浸提好并已冷却的料液4000r/min，20min离心，收集上清液并浓缩至300ml左右1.2.4 乙醇沉淀向浓缩后的多糖溶液中加入其3倍体积95%乙醇并不断搅拌，隔夜后4000r/min，20min离心得沉淀，复溶，连续3次以上1.2.5 真空冷冻干燥2 银耳多糖咀嚼片的制备2.1 工艺流程2.2 操作要点2.2.1 原辅料准备银耳粗多糖粉碎，过100目筛，备用；辅料按照比例粉碎，过100目筛，备用2.2.2 混合将粉碎、过筛的原辅料按照比例混合均匀2.2.3 制软材待原辅料混合均匀后，缓慢加入润湿剂调和，待物料呈“手握成团，轻压即散”的状态，即制成软材。
2.2.4 造粒与干燥将制好的软材过18目筛造粒，后将湿粒置于不锈钢盘中，铺放均匀，于电热鼓风干燥箱中干燥，每20min翻动一次，干燥2-3h，其水分含量控制在2%2.2.5 整粒与压片干燥好的颗粒过20目筛整粒，之后加入其重量1%的硬脂酸镁作为润滑剂，混合均匀后压片，压制成0.3±0.05g/粒的片剂3 组成配方3.1银耳多糖与奶粉的配比本试验设定了银耳多糖与奶粉质量配比为9:1、8:2、7:3、6:4的4种配比比例，通过风味、色泽等感官评价进行筛选3.2 辅料的选择设定4因素3水平进行正交实验因素水平玉米淀粉A微晶纤维素B木糖醇C柠檬酸D 110% 5% 10%0.5%215%10% 15% 1.0%320%15% 20% 1.5%3.3 润湿剂的选择分别以40%、50%、60%、70%四个不同浓度的乙醇3.4 润滑剂的选择选取1%的硬脂酸镁3.5 干燥温度的选择选取50℃、60℃、70℃三个不同温度对湿粒进行干燥，通过颗粒的感官品质筛选出最佳的干燥温度。
银耳提取银耳多糖工艺流程-12
银耳提取银耳多糖工艺流程一、综述1、银耳银耳又名白木耳，是一种高等真菌，性味甘、平、具有滋阴润肺、养胃生津之功效，自古以来被人们看作是延年益寿的佳品，是世界公认的最珍贵的食用菌和重要药材。
银耳子实体中除银耳多糖物质外，还含有一定量的果胶质、蛋白质、粗纤维等成分，这些物质的存在，将不利于多糖物质的提取分离和纯化。
2、多糖多糖又名多聚糖，通常由多个单糖分子通过缩合、失水从而由甘糖键结合而成的一类分子结构复杂的高分子化合物。
根据其脱水缩合的成分不同，可分为均一性多糖、不均一性多糖。
多糖具有抗肿瘤、抗病毒、抗炎、抗衰老、抗氧化、抗溃疡、降血糖、调节身体免疫力等多种作用。
3、银耳多糖简介银耳多糖( Tremella polysaccharides，TP) 是银耳的重要活性成分( 约占银耳干重的60%-70% ) ，是从银耳子实体或液体深层发酵的银耳孢子中提取出来的一种活性多糖。
大量研究表明，从银耳中提取分离得到的银耳多糖具有提高机体免疫力、降血糖、降血脂、抗衰老、抗溃疡、抗血栓形成、抗突变、抗肿瘤等作用，能增强机体耐缺氧能力，清除自由基。
1.1银耳多糖的组成银耳多糖的主链是由α-(1-3)-糖苷键组成的甘露聚糖，主链的2，4，6位上连接有葡萄糖、木糖、岩藻糖及普通糖醛酸等残基组成的侧链，其活性中心是α -(1-3)-甘露聚糖这一共同结构部分。
银耳多糖种类包括酸性杂多糖、中性杂多糖、胞壁多糖、胞外多糖和酸性低聚糖五种，不含核酸、蛋白质类物质[3]。
1.1.1酸性杂多糖约占银耳总多糖的70%~75%，为木糖、甘露糖和葡萄糖醛酸为主的多聚体，中有少量岩藻糖。
1.1.2中性杂多糖约占银耳总多糖的20% 左右，为木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖的多聚体。
1.1.3胞壁多糖根据文献报道，一种是从胞壁外层产生的酸性多糖，由D-葡萄糖醛酸、D-甘露糖和D-木糖组成；另一种为碱性多糖，由D-葡萄糖、D-葡萄糖醛酸、D-甘露糖和D-木糖组成。
银耳提取银耳多糖的工艺流程
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银耳多糖的提取及其在饮料中的应用
银耳多糖的提取及其在饮料中的应用崔蕊静,李凤英,李春华(河北职业技术师范学院食品工程系,昌黎,066600) 摘要:研究了银耳多糖的提取工艺,结果表明:酶法浸提效果最佳,碱浸提法其次,两者均优于热水浸提法。
酶法提取银耳多糖溶液的最适条件为:加水量1∶50,加入1%的果胶酶,置于45℃水浴锅中恒温酶解45m in,然后迅速升温至98℃灭酶,并保温浸提60m in;利用银耳多糖的浸提液代替羧甲基纤维素等人工合成稳定剂制作调配型奶饮料,结果表明,银耳多糖溶液添加量为奶饮料总量的30%时,按原奶饮料的生产工艺,可代替羧甲基纤维素等稳定剂的稳定与增稠作用。
制品稳定性好,并具有银耳的保健功能。
关键词:银耳多糖;奶饮料;稳定剂中图分类号:Q539;S56713+4 文献标识码:A文章编号:1003-8310(2004)02-0039-03银耳中含有丰富的银耳多糖(约占银耳干重的60%～70%),银耳所含有的多糖体为酸性异多糖(heteroglucan异多糖),它的主要成分除1,3或1,6葡聚糖外,尚有木糖、葡萄糖醛酸和甘露糖(115∶1∶317),还有少量葡萄糖和微量岩藻糖。
牛奶含有丰富的蛋白质、钙和几乎全部已知纤维素,矿物质比例适宜,各种营养成分易于消化吸收[1]。
调配型奶饮料的生产以羧甲基纤维素(C MC)及PG A等作稳定剂。
PG A是褐藻酸的衍生物,无毒,但价格高,而C MC文献[2]认为有致皮下组织肿瘤的可能性。
本试验用银耳提取液代替C MC等稳定剂应用于调配奶饮料,即用天然稳定剂代替人工合成稳定剂,提高制品的安全性;另外赋予制品银耳的保健功能。
1 材料与方法111 材料银耳购自昌黎城关福田超市;白砂糖、乳酸为食品级;牛奶为鲜牛奶;氢氧化钠溶液、果胶酶。
112 工艺流程银耳→粉碎→浸提→过滤→浸提液 ↓各种原辅料溶解→过滤→混合→预热→均质→灌装→杀菌→冷却2 结果与分析211 不同浸提方法对银耳多糖浸提效果的影响 银耳多糖的浸提方法有水浸提、乙醇浸提、酶解、酸水解、碱法水解等[3],粘度的高低表示了银耳中多糖类物质被提取的程度[4],同时,银耳中多糖类物质的粘度与其稳定功能有着密切的联系,因此,在实验中用粘度为标准来衡量浸提各因素对浸提效果的影响。
银耳多糖的提取工艺
银耳多糖的提取工艺一、实验目的1、了解银耳多糖制备的基本原理。
2、掌握糖类物质提取的基本操作技术。
二、实验原理银耳是真菌的一种，是我国传统的珍贵药材之一，具有滋阴润肺、益胃生津等功效。
常用于治疗虚劳咳嗽、阴伤燥咳、虚热口渴等症。
银耳多糖是银耳的主要药效成分，银耳中含有的多糖类物质则具有明显提高机体免疫功能，抗炎症和抗放射等作用。
1、制备（提取）原理：银耳多糖易溶于水，但不溶于乙醇。
因此本实验采用沸水抽提、氯仿-正丁醇法除蛋白和乙醇沉淀分离制得银耳多糖粗品。
然后再进行定性分析。
2、分析（鉴定）原理：Molish反应多糖在浓硫酸或浓盐酸的作用下，脱水形成糠醛及其衍生物，其与α-萘酚反应，作用生成紫色的化合物。
原理是羰基与酚类进行了缩合，这样，糖与浓酸作用后，再与α-萘酚反应，就能生成紫色的化合物。
因此，阴性反应证明没有糖类物质的存在；而阳性反应，则说明有糖存在的可能性，需要进一步通过其他糖的定性试验才能确定有无糖的存在。
斐林试剂质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡蓝色的氢氧化铜沉淀。
氢氧化铜与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀，而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。
用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液的颜色变化为：浅蓝色棕色砖红色（沉淀）。
三、实验试剂和器材1、银耳子实体2、乙醇3、乙醚4、丙酮5、Ssvag试剂：氯仿：正丁醇=6、Molish试剂：取5g α-萘酚用95%乙醇溶解至100mL，临用前配置，棕色瓶保存。
7、斐林试剂：甲液质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液；乙液质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液；临用时临时配置，将4～5滴乙液滴入2mL甲液中，配完后立即使用。
四、仪器和器材烧杯试管分液漏斗容量瓶电炉石棉网纱布离心机真空干燥箱电子天平五、实验步骤1、制备步骤（1）取银耳子实体10g加水300mL，直火提取1h，提取过程中不断用玻棒搅拌。
实验一银耳多糖的制备
废液倒入专门的废液桶，固体废物和带残渣的废物不得倒入水槽或到处乱扔。
仪器损坏时，应如实向老师报告。
实验室内一切物品，未经本室负责老师批准，严禁携出室外，借物必须办理登记手续。
每次实验课由班长负责安排值日生。值日生的职责是负责当天实验室的安全、卫生和一切服务性的工作。
实验一 银耳多糖的制备
指导老师：杨莉
糖类、脂类、蛋白质、核酸、酶、激素和维生素, etc.
糖的定义：是多羟醛或多羟酮及其缩聚物和某些衍生物的总称。
常见的生物大分子：
一、简介
是生物体主要的能量来源。
01
可转变为生命所必需的其它物质，如脂类、蛋白质等。
02
可作为生物体的结构物质，如纤维素。
03
可作为细胞识别的信息分子。
1
2
3
实验台面应随时保持整洁，仪器、药品摆放整齐。公用试剂用毕，应立即盖严放回原处。勿使试剂、药品洒在实验台面和地上。实验完毕，仪器洗净放好，将实验台面抹拭干净，才能离开实验室。
4
生物化学实验室规则
使用仪器、药品、试剂和各种物品必须注意节约。洗涤和使用仪器时，应小心仔细，防止损坏仪器。使用贵重精密仪器时，应严格遵守操作规程，发现故障须立即报告老师，不得擅自动手检修。
04
其它功能。
05
糖类的主要生物学作用
糖的分类
单糖、双糖、多糖
葡萄糖
分子量一般很大，在几万以上。在水中不能形成真溶液，有的根本不溶于水，如纤维素。
物理性质：有旋光性，但无变旋现象。无甜味。
化学性质：无还原性，不能成脎。
多糖的共同特性
02
银耳多糖的提取及其清除自由基作用
表 l 去除杂蛋白、色素的步骤
去除杂蛋白
容 器 多糖溶液1 氯仿1 正丁醇 振摇时间 离心速度 离心时间
Hale Waihona Puke 分液漏斗251 51 l
30min 8000rpm 30min
以上操作重复 l0 ~ l2 次，直至无沉淀为止
脱
色
容 器 多糖溶液1 30% 的 H2O2 振摇时间 温度
分液漏斗
l01 l
30min 30 ~ 40C
每 100 克干银耳中大约含蛋白质（5 克）、脂肪
收稿日期：2005 - 11 - 26 基金项目：四川省中医药管理局重点及专项项目（2003A001，2003C001），成都大学校基金项目. 作者简介：颜 军（1971—），男，实验师，从事生物活性成分的提取及检测的研究.
·36·
成都大学学报（ 自然科学版）
目前，自由基的致病机理引起了人们的极大 关注. 已有研究［1］表明，自由基在生物体内不断 地通过非酶反应与酶反应产生活性氧自由基，但 在抗氧化酶及外源性和内源性抗氧化剂的协同作 用下，活性氧自由基不断地被清除. 在正常生理 情况下，活性氧自由基可维持于有利无害的极低 水平，并保持稳衡性动态. 平衡浓度的活性氧自 由基中一部分可履行生理作用，而另一部分可损 伤生物分子. 生物体的细胞不时受到活性氧自由 基的攻击而发生损伤，不过损伤分子可以得到修 复、置换、降解、代谢和重新合成. 在衰老、应 激及某些病理情况下自由基产生增多或清除能力 减弱，使得自由基对肌体造成严重损伤.
银耳多糖不溶于冷水，可缓慢溶解于热水. 宜 采用多段溶出法以提高银耳多糖的得率. 将去除了 部分杂蛋白、色素、脂肪类物质的银耳粉加入 30 倍 的水，在 90 ~ l00C 的条件下浸提 2 小时，冷冻离 心，得一次浸提液，再加入适量水浸提，得二次浸 提液. 合并两次浸提的上清液备用. 2. 4 银耳粗多糖的醇析
一种银耳多糖的高纯度提取方法[发明专利]
![一种银耳多糖的高纯度提取方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/0d9e1a2b0c22590103029d82.png)
专利名称：一种银耳多糖的高纯度提取方法专利类型：发明专利
发明人：王亚,朱学周
申请号：CN201710712040.2
申请日：20170818
公开号：CN107383228A
公开日：
20171124
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种银耳多糖的高纯度提取方法，包括以下步骤：S1、取银耳，水洗，风干剪碎，真空烘干，粉碎，超微震碎；S2、按料水比1:40在100℃水中浸提4h，于沸水浴中加热搅拌8h，离心去除残渣，上清液用硅藻土助滤，水洗，合并滤液后于80℃水浴中搅拌至糖浆状；S3、用2mol/LNaOH调至PH=7，用微滤膜进行过滤，采用膜蒸馏得到原料液；S4、原料液通过增加泵进入超滤装置，利用超滤膜进行3次循环浓缩分离，进行膜蒸馏，浓缩分离，得到浓缩液；采用微滤膜进行过滤，得到原料液，再经超滤装置进行浓缩得到的银耳多糖纯度高，适合大规模生产，且生产周期短，与传统工艺设备相比，设备运行费用低，能有效降低生产成本，提高企业经济效益。
申请人：合肥丰洁生物科技有限公司
地址：230000 安徽省合肥市经济技术开发区宝塔路以西、齐云路以北综合厂房605室
国籍：CN
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银耳多糖的提取工艺
李帅涛
摘要：国内常用的银耳多糖提取方法有热水提取法，酸碱提取法和酶解提取法等，其中酶解提取法具有提取时间短，条件温和等优点。
本试验选取了酶解时间和提取时间作为研究对象，探讨了不同条件下银耳多糖的收率，由试验结果表明，解法提取银耳多糖的最适条件为：银耳与水的比例为1g:50ml,加入果胶酶浓度为1%，酶解时间45min,提取时间60min。
关键词：银耳多糖；酶解法；提取工艺
引言：我国银耳资源丰富，为开发应用银耳多糖提供了有利条件。
近年来，有关银耳多糖的研究越来越多，但这些研究多为银耳多糖的化学特性和药理作用方面的研究，少有关于银耳中提取银耳多糖的研究。
目前银耳多糖的提取方法多为热水浸提法或酸碱法提取，但热水浸提法耗时过长，且收率较底，费时费力，因此不适合大规模的工业生产，而酸碱法提取虽然提取时间较短，却会破坏银耳多糖立的生物活性，使提取到的银耳多糖药用效果大大下降。
本试验主要研究使用果胶酶酶解银耳，热水提取的技术来提取银耳多糖的方法。
而如今生物工程工艺发展迅速，生物制品价格不断下降，这为用酶解法提取银耳多糖提供了可行性。
用酶解法提取银耳多糖不仅能缩短单纯用热水法提取的时间，还不会像酸碱法那样破坏银耳多糖的生物活性。
材料与设备:
①实验材料：银耳;葡萄糖(分析纯):取1g葡萄糖加入1000ml容量瓶中，定容至1000ml;果胶酶：按100ml:1g加入果胶酶;苯酚（分析纯）;精确量取6ml苯酚放入100ml容量瓶中，定容至100ml;浓硫酸(发烟硫酸)
②实验设备：101型电热鼓风干燥；YP202N型电子天平；HH系列恒温水浴锅；电子万用炉;TDZ5-WS型台式低俗离心机；722E型可见分光光度计
分离与纯化：取市售银耳适量，洗净，70℃烘干后，破碎成粉末状，称取粉末0.5g（2%），果胶酶0.25g（1%），同时加入蒸馏水25mL，迅速置于45℃水浴锅中酶解，3个样品为一组，第一组酶解30min，第二组酶解45min，第三组酶解60min。
酶解后迅速升温至98℃将酶灭活，然后每组样品分别于98℃水浴中保温浸提30min,45min,60min，浸提完成后置于冷水中冷却至室温，然后于4500rpm离心分离10min，最后取上清液待用。
含糖量测定：银耳浸提液离心后，分别取上清液1ml,加水19ml,即稀释20倍，取银耳浸提稀释液1mL于一洁净试管中，再加入苯酚试液1.0mL，浓硫酸5mL，混匀，室温放置30min，冷却后，于490nm处测定吸光度。
结果与分析：本试验采用果胶酶酶解银耳的方法提取银耳多糖。
试验讨论了不同酶解时间与不同提取时间对提取效果的影响，最终确定最佳提取工艺为：在45℃下，用1%果胶酶酶解，水与银耳比例为100ml:1g,酶解时间为45min，然后于98℃热水浴中浸提60min。
用此法提取银耳多糖，提取率可达40% ，远高于传统的银耳多糖提取工艺。
相比传统工艺，果胶酶提取银耳多糖不仅有较高的提取率，还可以明显缩短提取的时间。
银耳多糖的生物活性在长时间高温环境和酸碱性条件下容易受到破坏，酶解法提取环境温和，且提取时间较短，能较好的保留银耳多糖的生物活性。
固定酶解时间时，提高提取时间可显著提高提取效果，改变酶解时间时，提取效果有提高，但不大，且从45min 增加到60min增加不显著。