酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴别
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南京林业大学实验报告
实验四
酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴别(一)实验目的
1、观察酵母菌的细胞形态及出芽生殖方式;
2、学习掌握区分酵母菌死、活细胞的染色方法;
3、掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别。
(二)实验原理
酵母菌是多形的、不运动的单细胞真核微生物。无性繁殖主要是出芽生殖。
本实验通过用美蓝染色浸片来观察生活的酵母形态和出芽生殖方式。
美蓝是一种无毒性染料,它的氧化型是蓝色的,而还原型是无色的,用它来对酵母的活细胞进行染色。
三)实验器材
1、菌种:酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)培养约2d的麦芽汁斜面培养物;
2、染色液和试剂:0.1% 吕氏碱性美蓝染液;
3、器材:载玻片、盖玻片、酒精灯、擦镜纸、显微镜等。
(四)实验方法(美蓝浸片)
在载玻片中央加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染色液,用接种环挑取少量酵母菌苔放入上述液滴里,混合均匀;
用镊子取一块盖玻片,先将一边与菌液接触,然后慢慢将盖玻片放下使其盖在菌液上;
将制片放置约3min,先低倍镜后高倍镜观察酵母形态和出芽情况,并根据颜色区别死活细胞。
(五)注意事项
1、加染液不宜过多或过少,否则,在盖上盖玻片时,菌液会溢出或出现大量气泡而影响观察;
2、盖玻片不宜平着放下,以免产生气泡影响观察。
酵母菌死活细胞区别图(10×40倍下观察)
死细胞(呈蓝色或淡蓝色)活细胞(无色)
(六)心得体会:
在制片的时候,先将盖玻片一边与菌液接触,然后慢慢将盖玻片放下使其盖在菌液上,并且要避免产生气泡。
在用美篮染色的时候,注意染色液和菌液不宜过多或过少,并且应该尽量等量而且要混匀。