肠杆菌科细菌替加环素耐药机制研究
替加环素对不同耐药基因型耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的敏感性研究
替加环素对不同耐药基因型耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的敏感性研究刘立荣;李向阳;瞿玲娜;唐玉霞;曹景宏;颜小萍【摘要】目的：探讨替加环素对不同耐药基因型耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌（CRE）的敏感性。
方法采用改良Hodge试验（MHT）筛查厄它培南耐药的肠杆菌科细菌，采用纸片扩散法检测替加环素的抑菌环直径，采用聚合酶链反应（PCR）测定CRE的β-内酰胺酶基因种类。
结果68株CRE中有48株（70.6%）MHT初筛阳性，其中40株（83.3%）携带能水解碳青霉烯类抗菌药物的超广谱β-内酰胺酶基因（KPC、NDM-1、IMP-8、IMP-4，以KPC为最多，占67.5%）。
68株菌株中有54株对替加环素敏感，12株中介，2株耐药，总敏感性为97%。
MHT 筛查试验阳性和阴性菌株对替加环素的敏感性差异无统计学意义（χ2=3.599，P>0.05）。
结论替加环素对CRE显示出优异的抗菌活性，其抗菌作用不受β-内酰胺酶的影响。
%ObjectiveTo investigate the sensitivity of carbapenem-resistantEnterobacteriaceae(CRE)with different resistant genotypes against tigecycline.MethodsThe isolates ofEnterobacteriaceae against ertapenem were screened by modified Hodge test(MHT),the diameters of tigecycline inhibition zones were determined by K-B method, and beta-lactamase gene of CRE was determined by polymerase chain reaction(PCR).ResultsA total of 68 isolates of CRE were screened by MHT,and there were 48 positive isolates,accounting for 70.6%. In the 48 positive isolates, there were 40 isolates(83.3%) carrying hydrolyzed carbapenem antibiotics extended-spectrum beta-lactamase gene, includingKPC,NDM-1,IMP-8 andIMP-4.KPC was the most,accounting for 67.5%. In the 68 isolates ofCRE,54 isolates were sensitive,12 isolates were intermediary,2 isolates were resistant,and the total sensitivity was 97%. There was no statistical significance for the sensitivity of positive and negative isolates in the 68 isolates of CRE by MHT(χ2=3.599,P>0.05).ConclusionsTigecycline for CRE exhibits excellent antibacterial activity. Antibacterial effect of tigecycline is not influenced by enzyme activity.【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2016(031)005【总页数】4页(P383-386)【关键词】耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌;替加环素;敏感性【作者】刘立荣;李向阳;瞿玲娜;唐玉霞;曹景宏;颜小萍【作者单位】台州市中西医结合医院检验科，浙江台州 317523;温州医科大学附属第二医院检验科，浙江温州 325027;台州市中西医结合医院检验科，浙江台州317523;台州市中西医结合医院检验科，浙江台州 317523;台州市中西医结合医院检验科，浙江台州 317523;台州市中西医结合医院检验科，浙江台州 317523【正文语种】中文【中图分类】R378.2近年来，产超广谱β-内酰胺酶的肠杆菌科细菌所占的感染比例逐年增高［1］。
某院2017—2018年替加环素的临床应用调查及用药合理性评价
中国乡村医药·药物与临床·某院2017—2018年替加环素的临床应用调查及用药合理性评价吴积升 阮璐雅 苏银法 杨秀斐 林宝丽 祝尔乐 林冬冬替加环素是一种新的甘氨酰环素类抗菌药物。
随着近几年替加环素在临床广泛使用，出现超说明书应用甚至滥用等现象，导致肠杆菌科细菌替加环素耐药的报道逐年增多[1]。
国家卫健委于2017—2019年提出要加强抗菌药物临床应用管理，以遏制细菌耐药的发生。
现回顾某院替加环素的临床使用情况，为进一步管理提供参考。
1 资料与方法1.1 资料来源 利用医院逸曜合理用药管理系统2.0版回顾性调取2017年1月至2018年12月某院使用替加环素的出院病历250份，使用嘉和电子病历系统收集所有患者相关资料。
1.2 方法 采用Excel电子表格，记录患者性别、年龄、体重、科室、病原菌、感染相关诊断、用法用量、疗程、用药前后感染指标等信息。
以《替加环素临床应用评价细则》为评价标准[2]对病例进行合理性评价。
2 结果2.1 患者基本情况 250例患者中，男174例，女76例；年龄16～96岁，平均68岁，60岁以上189例（75.6%）。
分布在血液科118例（47.2%），重症监护病房75例（30.0%），化疗科16例（6.4%），呼吸内科8例（3.2%），其他33例（13.2%）。
2.2 临床应用情况 5例在住院期间有两个替加环素使用疗程，故总数为255例次。
给药剂量：100mg，每12小时1次157例次（61.6%）；首剂100mg，维持50mg，每12小时1次96例次（37.6%）；100mg和50mg更换变化，均每12小时1次2例次（0.8%）。
用药疗程：＜7天107例次（42.0%），基金项目：温州市基础性科研项目（R20190026）作者单位：325000 浙江温州市中心医院药剂科（吴积升、苏银法、杨秀斐、林宝丽、祝尔乐、林冬冬）；温州医科大学附属第二医院内分泌科（阮璐雅）通信作者：吴积升，7～14天98例次（38.4%），＞14天50例次（19.6%）。
质粒介导的替加环素耐药机制的研究进展
·综 述·质粒介导的替加环素耐药机制的研究进展王知任， 李荷楠关键词： 替加环素； 耐药机制； 质粒中图分类号：R978.14；R378 文献标识码：A 文章编号：1009-7708 ( 2021) 02-0230-05DOI: 10.16718/j.1009-7708.2021.02.024Recent advances in plasmid-mediated mechanism of tigecycline resistanceWANG Zhiren, LI Henan （Department of Laboratory Medicine, Peking University People ’s Hospital, Beijing 100044, China ）基金项目： 国家自然科学基金（81871693）；北京大学人民医院研究与发展基金（RS2018-03）。
作者单位：北京大学人民医院检验科，北京 100044。
第一作者简介： 王知任（1998—），女，本科，主要从事细菌耐药相关的临床研究。
通信作者：李荷楠，E-mail ：*****************.cn 。
1 概述替加环素（tigecycline ）是四环素类衍生的新型甘氨酰环素类抗菌药物，其在米诺环素的中心构架上增加了9-叔丁基-甘氨酰胺基侧链修饰结构[1]。
替加环素进入细菌后可逆地结合于核糖体30S 亚单位中的16S rRNA ，阻断tRNA 进入A 位点从而抑制蛋白质转录翻译过程。
通过结构研究发现，替加环素与核糖体30S 亚基结合的同时，也与核糖体亚基H34残基相互作用，所以两者的结合比其他四环素类药物更牢固，抑制细菌蛋白合成的能力是四环素的20倍[2]。
替加环素对除变形杆菌属和假单胞菌属外大多数革兰阳性和革兰阴性菌都有较强的抗菌活性，包括肠杆菌科、鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌、肠球菌属、肺炎链球菌等[3]。
替加环素介绍
替加环素：第一个甘氨酰环素类抗生素
甘氨酰环素是四环素类抗生素（米诺环素）的半合成 衍生物，该类药物在D环的第9位置上连接了一个甘 氨酰氨基 此种修饰既可维持四环素类的抗菌作用，又能对抗四 环素类药物的耐药性机制
3
化学结构式
在9 位上增加甘氨酰 氨基
特点：
•
不受常见耐药机制的影响
抗生素作用靶位改变
如青霉素结合蛋白的修饰与β-内酰胺类抗生素耐药相关(包 括碳青霉烯类等)
抗生素酶的降解
•
与β-内酰胺类抗生素耐药相关
与其他四环素类或 其他抗菌药物不易 产生交叉耐药
DNA解旋酶突变 • 与喹诺酮类的耐药相关
约有59%*通过胆 汁/粪便排泄消除
*：8%经其他途径排泄
33%*经尿液排泄
老年患者无需调整剂量
药代动力学特性—分布
• • 替加环素的稳定状态分布容积约为500-700升(7至9 L/kg)，且其分布范围要超过血浆的分布 容积，可广泛分布到全身各个组织 根据临床研究观察(0.1至1.0 μg/mL)，替加环素的体外血浆蛋白结合率约为71%至89%
广谱覆盖 G+菌、G-菌、厌氧菌和非典型病原体
广谱覆盖G+菌、G-菌、厌氧菌和非典型病原体# ，涵盖碳青霉烯和糖肽类不能 覆盖的致病菌
14
2011 CHINET 耐药监测前6位革兰阴性菌菌种分布
细菌
大肠埃希菌
株数
替加环素用药时机与方法(刘进)
Listeria Corynebacterium
Atypicals
- Legionella - Mycoplasma - Chlamidia - M. fortuitum
Enterobacteriaceae
(incl. ESBL, AmpC, MBL)
Acinetobacter
危重的医院获得性腹腔内感染
推荐的抗菌治疗
阿莫西林/克拉维酸，或环丙沙星+甲硝唑 厄他培南或替加环素 哌拉西林/他唑巴坦 亚胺培南或美罗培南+/-氟喹诺酮类 阿莫西林/克拉维酸，或环丙沙星+甲硝唑 替加环素 哌拉西林/他唑巴坦 亚胺培南或美罗培南+/-氟喹诺酮类 哌拉西林+替加环素+氟喹诺酮类 亚胺培南或多利培南+替考拉宁+棘白菌素 哌拉西林+替加环素+棘白菌素
40版《热病》
• 推荐替加环素治疗以下感染性疾病 – 疾病：轻中度住院治疗的憩室炎，直肠周围脓肿，腹膜炎，四肢、非糖
尿病性蜂窝组炎的起始经验性治疗
–高度耐药菌：耐药肠球菌、金黄色葡萄球菌
南非《替加环素合 理用药指南》
2011年欧洲专家对 IDSA 指南的评论 和补充
推荐替加环素治疗成人cSSSIs和cIAIs
2
A
2
A
2
A
2
A
4
B
4
B
见耐药菌推荐意见
见真菌推荐意见
Eckmann C et al. Eur J Med Res.2011;16:115-126.
腹腔内感染治疗指南
患者情况
CA, 胆道外, 稳定, 无 ESBL（+）菌感染的危险因素 CA, 胆道外, 稳定, 存在 ESBL（+）菌感染的危险因素 CA, 胆道外, 危重,无 ESBL（+）菌感染的危险因素 CA,胆道外, 危重,存在 ESBL（+）菌感染的危险因素 CA, 胆道,稳定, 无 ESBL（+）菌感染的危险因素 CA,胆道,稳定, 存在 ESBL（+）菌感染的危险因素 CA,胆道,危重, 无 ESBL（+）菌感染的危险因素 CA,胆道,危重, 存在 ESBL（+）菌感染的危险因素 稳定的医院获得性腹腔内感染
替加环素-重症感染副本
亚胺培南
美罗培南
头孢哌酮/舒巴坦
哌拉西林/他唑巴坦
替加环素
大肠埃希菌
0.2%
0.2%
14.5%
6.7%
0.0%
鲍曼不动杆菌
72.3%
71.6%
35.5%
73.0%
2.1%
MRSA
—
—
—
—
0.0%
肺炎克雷伯菌
2.9%
4.7%
12.3%
8.7%
2.9%
铜绿假单胞菌
29.3%
金黄色葡萄球菌
82
13.44
肺炎克雷伯杆菌
59
9.67
前四位的是鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、以及以肺炎克雷伯杆菌
数据来源：刘又宁 等 中华结核和呼吸杂志2012年10月第35卷第10期
腹部感染主要致病原 替加环素VS碳青霉烯
金葡菌中MRSA比例为87.76%；替加环素敏感率100%VS碳青霉烯天然耐药 鲍曼不动杆菌对替加环素敏感率约为95.77%VS碳青酶烯敏感率约为22.13% 肠杆菌科对替加环素敏感性97.92%VS碳青霉烯敏感性91.67% 铜绿假单胞菌对替加环素天然耐药VS碳青霉烯敏感性25.61%
从2008年-2011年进行的前瞻性、双盲、随机对照研究，共纳入患者274例，观察多利培南7天疗法（1g ，每8小时静注4个小时）和亚胺培南10天疗法（1g，每8小时静注1个小时）在革兰阴性杆菌引起的机械通气相关性肺炎（VAP）中的疗效。
仅约一半比例患者达到临床治愈，细菌清除率同样不超过50%
MITT人群(改良的意向治疗人群)在EOT时(治疗结束时)的临床治愈率
数据来源：2011年CARES数据分析
替加环素研究新进展_钟雪 (1)
收稿日期：2015-01-08基金项目：国家科技部十二五重大新药创制-心脑血管疾病新药临床评价技术平台研究课题(No. 2012ZX09303-008-002)。
作者简介：钟雪，女，生于1988年，在读博士研究生，主要研究抗菌药物耐药机制。
E-mail: bhdxzhongxue@*通迅作者，胡欣，E-mail: huxinbjyy@ ；程刚，E-mail: chenggang63@文章编号：1001-8689(2015)11-0870-06替加环素研究新进展钟雪1,2 陈东科2 许宏涛2 程刚1,* 胡欣2,*(1 沈阳药科大学药学院， 沈阳 110016；2 北京医院药学部，北京 100730)摘要: 近年来随着广谱抗生素、免疫抑制剂、侵入性治疗的广泛应用，多重耐药菌、甚至泛耐药菌比例不断上升，给临床抗感染治疗带来了巨大困难。
替加环素这一具有对抗多种耐药机制的新型抗生素于2011年进入我国市场，为临床有效抗感染治疗带来了新的希望，也被誉为抗感染的最后一道防线。
随着国内外科研人员及临床医生不断探索，近些年对替加环素的认识又有了新的突破。
我们综述了近年来替加环素的研究进展，包括体外抗菌活性测定，耐药机制及应对措施，超适应症用药及使用剂量。
关键词： 替加环素；体外抗菌活性；耐药机制；适应症；剂量中图分类号：R978.1 文献标志码：A New advance in the study of tigecyclineZhong Xue 1,2, Chen Dong-ke 2, Xu Hong-tao 2, Cheng Gang 1 and Hu Xin 2(1 Department of Pharmaceutics, School of Pharmcy, Shenyang Pharmaceutical University, Shenyang 110016;2 Department of Pharmacy, Beijing Hospital, Beijing 100730)Abstract There is a huge challenge for clinical anti-infection treatment due to the increasing proportion of multidrug-resistant pathogens and pan drug-resistant pathogens caused by wide application of broad spectrum antibiotics, immunosuppressants and invasive treatment in recent years. Tigecycline, a new antimicrobial agent which can overcome multiple resistance mechanisms, was launched in China in 2011. It has brought new hope for clinical effective anti-infection treatment, and it has been known as the last line for anti-infection treatment. We have a new breakthrough understanding of tigecycline with continuously exploring by the domestic and foreign researchers and clinicians in recent years. In this article we reviewed advance of tigecycline in recent years, including antibacterial activity test in vitro , resistance mechanism and solutions, super indication and dosage.Key words Tigecycline; Susceptibility testing; Drug-resistance mechanism; Indication; Dosage 近年来耐药菌的检出率逐年增高，尤其是产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)和AmpC 酶肠杆菌属及泛耐药的肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的抗生素选择已成为世界抗感染治疗面临的严峻挑战。
四环素类的耐药机制与新药_替加环素的研究进展
膜结合,影响蛋白、DNA及RNA合成,使细胞膜破裂而导致细菌死亡。
对金葡菌包括M RSA、链球菌属、粪肠球菌具良好抗菌活性。
本品4mg/kg,每日一次,静滴7日后稳态血药浓度为57. 8m g/L,蛋白结合率为92%,消除半衰期为8.1h。
主要用于复杂性皮肤软组织感染。
常见不良反应为注射部位疼痛、恶心、呕吐、便秘、腹泻及头痛,少数患者可有肌酸磷酸激酶增高及肾功能异常。
推荐给药方案为4mg/kg、每日1次、静滴30m i n以上。
2.替加环素(ti g ecyc line,GAR-936) 属甘氨酰环素类(g l y cy lcy-cli ne),对革兰阳性菌包括M RSA、VRE及PRSP均具抗菌作用,对肠杆菌科细菌等革兰阴性杆菌亦具良好抗菌活性,对厌氧菌也有抗菌作用。
期临床试验表明,本品25m g或50m g,q12h (首剂加倍)静滴7-14日治疗复杂性皮肤软组织感染及腹腔感染,取得满意疗效。
主要不良反应为恶心、呕吐、腹痛及肝功能异常。
目前正进行 期临床试验。
四环素类的耐药机制与新药-替加环素的研究进展周黎明,赵妍妍(四川大学华西医学中心基础药理教研室,四川成都 610041)四环素类是由链霉菌产生或经半合成制取的一类碱性广谱抗生素。
1948年发现第一种四环素类--金霉素(aureo m yc i n)至今,其家族成员还包括天然品:土霉素、地美环素等,和半合成品:多西环素、米诺环素、美他环素等。
该类抗生素具有共同的氢化骈四苯的基本母核,仅在5、6、7位上的取代基不同。
其抗菌机制是通过阻止氨基酰t RNA进入核糖体A位而抑制细菌蛋白质合成。
四环素类抗生素的抗菌谱广,能抑制包括G+和G-菌,还有如衣原体、支原体、立克次体及原虫(原生性寄生虫)等非典型性微生物的生长。
这类药物有良好的抗微生物特性以及不出现严重不良反应,使其被广泛用于人感染性疾病的治疗。
然而,随着临床上四环素类耐药菌的大量产生,目前这类药物的使用逐渐减少。
替加环素介绍
（5）刘春亮， 王华.替加环素的研究进展及临床应用[J] 安徽医药，2007，11 （7）：154-156；
替加环素：第一个甘氨酰环素类抗生素
➢ 甘氨酰环素是四环素类抗生素（米诺环素）的半合成 衍生物，该类药物在D环的第9位置上连接了一个甘 氨酰氨基
非典型病原体：对肺炎支原体活性强于米诺环素或四环素，但对解脲支原体活性弱 于米诺环素、四环素。对肺炎衣原体、沙眼衣原体、沙眼支原体活性强大。
广谱覆盖 G+菌、G-菌、厌氧菌和非典型病原体
广谱覆盖G+菌、G-菌、厌氧菌和非典型病原体# ，涵盖碳青霉烯和糖肽类不能 覆盖的致病菌
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2011 CHINET 耐药监测前6位革兰阴性菌菌种分布
独特作用机制，有效抑制细菌蛋白质的合成
• 替加环素通过与核糖体30S 亚单位结合、阻止氨酰 化tRNA分子进入核糖体A 位而抑制细菌蛋白质合 成
7
替加环素肝肾安全性好
约有59%*通过胆 汁/粪便排泄消除
*：8%经其他途径排泄
33%*经尿液排泄
天解®肝肾双通道排泄，安全性好 ➢ 肾脏安全性良好，肾功能不全及
与其他四环素类或 其他抗菌药物不易
产生交叉耐药
有效对抗多种耐药机制
对常见致病菌(包括耐药菌)抗菌活性强
有效对抗四环素类两大耐药机制
• 替加环素有效对抗四环素类两大耐药机制-核糖体保护和外排泵机制
核糖体保护机制
外排泵机制
• 结合位点不同，结合方式独特 • 具有很高的结合力
• 外排泵无法识别替加环素，不会将其泵出 • 排出蛋白无法识别或是排出蛋白诱导不足
替加环素临床有效性及耐药机制研究进展
替加环素临床有效性及耐药机制研究进展摘要替加环素是一种独特的甘氨酰环素类半合成抗菌剂，用于治疗由多重耐药革兰氏阳性和革兰氏阴性病原体引起的多种微生物感染。
通过在米诺环素的9 位添加甘环酰胺部分，替加环素避开了主要的四环素抗性遗传机制，例如四环素特异性外排泵获取和核糖体保护。
胃肠外形式的替加环素被批准用于成人复杂的皮肤和皮肤结构感染（不包括糖尿病足感染）、复杂的腹内感染和社区获得性细菌性肺炎。
新证据还表明替加环素治疗严重艰难梭菌的有效性感染。
替加环素在体外对Coxiella sPP.、立克次体sPP.和多药耐药淋病奈瑟菌菌株表现出易感性，这表明替加环素可能用于治疗由这些病原体引起的感染。
除了某些革兰氏阴性菌固有的或经常报告的耐药性外，替加环素对多种多重耐药的医院内病原体有效。
在此，我们总结了目前关于替加环素药代动力学和药效学、其作用机制、替加环素耐药流行病学及其临床有效性的可用数据。
介绍耐多药 (MDR) 或广泛耐药 (XDR) 细菌病原体的发病率不断增加，这是一个主要的公共卫生问题，由于住院时间延长、发病率和死亡率升高，给医疗保健系统带来了经济负担。
替加环素是一种四环素类抗菌剂，用于治疗多种微生物 MDR 感染，包括革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌。
替加环素，称为 GAR-936 或 Tygacil，是第一个独特的甘氨酰环素类半合成药物，以肠胃外形式给药，并于 2005 年获得美国食品和药物管理局 (FDA) 的批准。
后来，在 2010 年，FDA 发布了一项警告，称使用替加环素治疗严重感染和败血症与全因死亡风险增加显着相关。
目前，替加环素已被批准作为成人单药治疗三种适应症，包括复杂性皮肤和皮肤结构感染 (cSSTI)，不包括糖尿病足感染、复杂性腹腔内感染 (cIAI) 和社区获得性细菌性肺炎 (CAP) ，最近的证据表明替加环素可能有效治疗严重的艰难梭菌感染。
对替加环素的耐药性包括染色体或辅助基因编码机制。
替加环素与临床常用抗菌药物对碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的协同作用研究
１３５ 文章编号 ：１００１—８６８９（２０１８）０２—０１３５—０４
替加环 素与Ｉ临床常用抗菌药物对碳 青霉烯 类耐药肠杆菌科细菌 的 协 同作 用研究
冯 贺强 张彩 红 李 玉芬 （天津市第五 中心 医院检验科，天津 ３００４５０）
摘要 ：目的 评价替加 环素与临床常用抗菌药物对 碳青 霉烯类耐药肠杆菌科细菌（ＣＲＥ）的协 同作用 。方法 收集２Ｏ１４—２０１６ 年 临床 分离的非重复ＣＲＥ共２３５株 。琼脂稀释法进 行药物敏感性试验并分析 替加环素和９种常用抗菌药物 的耐药率。选取替加环 素 非敏感 的３５株作为研究对象 ，并采用棋盘稀释法检测替加环素联合其他９种抗菌药物（亚胺培南 、美罗培南、头孢他啶 、头孢噻 肟 、氨 曲南 、左氧氟沙星、阿米卡星 、哌拉西林／三唑 巴坦和头孢哌酮／舒巴坦）对ＣＲＥ的协同作用 。结果 肺炎克雷伯菌 、沙雷菌 属 、产气肠杆菌 、阴沟肠杆菌对替加环素的耐药率较高，分别 是５．１％（７／１３７）、５．６％（１／１８）、７．７％（１／１３）和８．３％（１／１２）。替加环素与 头孢他啶 、哌拉西林／三唑 巴坦联合效果最明显，协 同百分 比都是２８．６％（１０／３５）。替加环素与头孢 噻肟（９／３５，２５．７％１、左氧氟沙星 （８／３５，２２．９％）和头孢哌酮／舒巴坦（７／３５，２０．０％）也显示出较 好的协 同作用 。研究中未出现药物拮抗的作用。结论 替加环素与头孢 他啶、哌拉西林／三唑 巴坦联合对ＣＲＥ的协同作用比较 明显 。替加环素的联合治疗可能 比单用更为有效 。
ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｒａｔｅｓ ｏｆ ｔｉｇｅｃｙｃｌｉｎｅ ｗｅｒｅ ５．１％ ｆ７／１３７）ｉｎ Ｋ／ｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａ，５．６％ （１／１８）ｉｎ ｓｅｒｒａｔｉａ，７．７％ （１／１３）ｉｎ Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｅｒｏｇｅｎｅｓ，８．３％ （１／１２ ｉｎ Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ｃｌｏａｃａｅ．Ｔｉｇｅｃｙｃｌｉｎｅ ｉｎ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｃｅｆｔａｚｉｄｉｍｅ ａｎｄ ｐｉｐｅｒａｃｉｌｌｉｎ／ｔａｚｏｂａｃｔａｍ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｇａｉｎｓｔ ＣＲＥ ｗｉｔｈ ｓｙｎｅｒｇｙ ｒａｔｅ ０ｆ ２８．６％ ｆ１０／３５）．Ｔｉｇｅｃｙｃｌｉｎｅ ｉｎ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｃｅｆｏｔａｘｉｍｅ（９／３５，２５．７％１，ｌｅቤተ መጻሕፍቲ ባይዱｏｆｌｏｘａｃｉｎ（８／３５，２２．９％）ａｎｄ ｃｅｆｏｐｅｒａｚｏｎｅ／ｓｕｌｂａｃｔａｍ （７／３５，２０．０％）ａｌｓｏ
肠杆菌科细菌碳青霉烯类抗生素耐药治疗的研究进展
Mod Diagn Treat 现代诊断与治疗2021Apr 32(8)肠杆菌科细菌碳青霉烯类抗生素耐药治疗的研究进展吴鸿滨(天津市第五中心医院检验科,天津300450)Research Progress in the Treatment of Carbapenem-resistant Enter 鄄obacteriaceaeWU Hong-bin (Department of Clinical Laboratory,Peking University Binhai Hospital,Tianjin 300450,China )Abstract :Enterobacteriaceae are facultative anaerobic or obligate aerobic gram -negative bacilli and coccobacillusthat widely exist in human and in the intestine of most warm-blooded animals,and most of them are normal flora.As one of the most widely distributed pathogenic bacteria,Enterobacteriaceae can be transformed into conditional pathogenic bacteriawhen the immunity of host decreases,which not only causes external acquired infection,but also iatrogenic infection inside the hospital.Carbapenems are β-lactam antibiotics with broadantibacterial spectrum and strong antibacterial property,and is thus often used as the final drug therapyin the treatment of multi-drugresistant gram-negative bacillus infection.However,the unscientific usage and dosage of broad-spectrum antibioticsin recent years has given rise toa large number of carbapenem-resistant Enterobacteriaceae (CRE),the drug resistance rate ofwhich is increasing year by year.Keywords :Enterobacteriaceae ;Drug resistance ;Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae ;Resistance mechanism;Ther ⁃影响,其不同形状大小会对患者治疗效果产生较大影响,在治疗时应根据患者实际情况进行选择。
肠杆菌科细菌SDD菌株特征及替加环素药敏结果分析
肠杆菌科细菌SDD菌株特征及替加环素药敏结果分析邹自英;刘媛;曾平;胡宗海;朱冰;吴丽娟【摘要】目的分析医院肠杆菌科细菌剂量依赖性敏感(SDD)菌株的药物敏感性情况和检出分布特征,并检测产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对替加环素的敏感性,以指导临床对SDD菌株的抗菌药物及对ESBLs产酶株替加环素的选择.方法采用VITEK 2 COMPACT全自动微生物分析仪进行细菌鉴定及仪器法抗菌药物敏感性试验.对50株ES-BLs阳性大肠埃希菌和50株肺炎克雷伯茼分别采用微量肉汤稀释法、MTS测试条法、Vitek2仪器检测法、纸片扩散法检测替加环素的敏感性.结果采用M100-S24标准头孢吡肟判断为敏感的肠杆菌科细菌有3.58％～12.50％的菌株为SDD菌株;ESBLs阳性大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的SDD菌株检出率分别为13.31％和8.60％,显著高于ESBLs阴性菌株(P＜0.05);所有肠杆菌科细菌SDD菌株最低抑菌浓度(MIC)4 mg/L菌株检出率显著高于SDD 菌株MIC 8 mg/L茼株检出率(P＜0.05);ESBLs阳性大肠埃希菌和肺炎克雷伯采用微量肉汤稀释法和MTS测试条法的敏感率均为100％.结论当肠杆菌科细菌头孢吡肟MIC为4 mg/L或8 mg/L时,实验室应在检验报告提示SDD菌株的检出.替加环素对ESBLs阳性大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的敏感率为100％.【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2016(045)006【总页数】4页(P779-781,786)【关键词】头孢吡肟;剂量依赖性敏感菌株;替加环素;超广谱β内酰胺酶【作者】邹自英;刘媛;曾平;胡宗海;朱冰;吴丽娟【作者单位】成都军区总医院检验科,四川成都610083;成都军区总医院检验科,四川成都610083;成都军区总医院检验科,四川成都610083;成都军区总医院检验科,四川成都610083;成都军区总医院检验科,四川成都610083;成都军区总医院检验科,四川成都610083【正文语种】中文【中图分类】R3782014年美国临床和实验室标准协会(CLSI)文件M100-S24首次对肠杆菌科细菌抗菌药物头孢吡肟引入了剂量依赖性敏感(susceptible-dose dependent,SDD)的概念，SDD概念的使用对于完善临床微生物药敏检验报告，避免临床将“中介”作为“耐药”的过渡进行处理，指导临床合理使用抗菌药物具有重要意义[1-2]。
临床多重耐药肠杆菌科细菌对替加环素的体外敏感性分析
饮食 或者 呕 吐 ， 使 肠 道 细 菌 返 至下 呼 吸 道 而 引 发感
染 。这也 与 国外 的研究 相一 致【 。
鉴 于 ＮＩ Ｃ Ｕ 的医 院感 染 发 生 率 较 高 ， 应 采 取综
合 预 防措 施 。①合 理 使 用 抗 菌 药 物 ： 选 用 抗 菌 药 物
１ ２ ３
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４
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１
染调查Ｅ Ｊ ］ ． ６ 中国 消毒学杂志， ２ ０ １ １ ， ２ ８ （ ６ ） ： ７ ７ ７ ７ ７ ８ ．
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严 格 消毒 ， 术 中控 制 进 入 手 术 室 人 员 数 量 、 严 禁 开 窗， 保 障手 术环 境 的洁 净 。 防止 同种 侵 袭 性 操作 多
收 稿 日期 ： ２ ０ Ｉ ３ － ０ ３ ２ ９
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信 息 交 流 ・
分 析
Ｉ ｎ ｖ ｉ ｔ ｒ ｏ ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ｉ ｔ ｙ ｏ ｆ ｔ ｉ ｇ ｅ ｃ ｙ ｃ ｌ ｉ ｎ ｅ ａ ｇ ａ ｉ ｎ ｓ ｔ ｃ ｌ ｉ ｎｉ ｃ ａ ｌ ｓ ｔ ｒ ａ ｉ ｎ ｓ ｏ ｆ ｍ ｕ ｌ ｔ ｉ — ｄ ｒ ｕ ｇ ｒ ｅ ｓ ｉ ｓ ｔ ａ ｎ ｔ
林妍 ， 邵启蕙 ， 安毅． 神 经 科 重 症 监 护 病 房 医 院 感 染 的 调 查 分 析［ Ｊ ］ ． 中华 医院 感 染 学 杂 志 ， ２ ０ ０ ７ ， １ ７ （ １ ２ ） ： Ｉ ５ ２ ０ — １ ５ ２ ２ ． 舒凯， 吴俊， 殷波涛， 等． 神 经 外 科 重 症 监 护 病 房 医 院感 染 的 ｌ 临 床调查［ Ｊ ］ ．中华 医 院感 染 学 杂 志 ， ２ ０ ０ ９ ， １ ９ （ １ ０ ） ： Ｉ ２ １ ４ － １ ２ １ ６ ． 欧阳玲， 张玲 ， 王厚 照， 等． 神 经 外 科 重 症 监 护 病 房患 者 医 院感
替加环素对耐药菌的抗菌活性及其临床应用
替加环素对耐药菌的抗菌活性及其临床应用替加环素（tigecycline）是第一个用于临床的新一代的甘氨酰四环素，具有广谱抗菌活性，常见多重耐药菌，包括耐甲氧西林金葡菌（MRSA），耐万古霉素肠球菌（VRE）、耐青霉素肺炎链球菌（PRSP）以及多耐药鲍曼不动杆菌对替加环素高度敏感。
临床试验证明替加环素对治疗复杂的腹腔感染和皮肤感染有良好的疗效，在多重耐药菌感染治疗中可考虑合理应用。
标签：替加环素；抗菌活性；多重耐药菌；感染治疗替加环素（tigecycline）是第一个用于临床的甘氨酰四环素，是在米诺环素的9位上添加叔丁基甘氨酰氨基而成的米诺环素的半合成衍生物。
由于结构改造使得替加环素的抗菌活性优于其他四环素药物，具有抗菌谱广，细菌耐药性低等优点，对临床常见G+菌、G-菌、厌氧菌都有效，特别是多重耐药菌，如MRSA、VRE、PRSP等，均有很高的体外敏感性。
FDA正式批准用于治疗复杂性成人腹腔感染、复杂皮肤及其软组织感染的一线用药，对治疗复杂的腹腔感染和皮肤感染有良好的效果[1-2]。
本文对替加环素抗耐药菌作用及其临床应用进行综述如下。
1 替加环素的抗耐药菌作用替加环素抗菌谱广，覆盖常见G+菌、G-菌、厌氧菌、非典型病原体，对临床常见耐药菌也具有抗菌活性包括：（1）万古霉素耐药肠球菌（VRE）、甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌（MRSA）、青霉素耐药的肺炎链球菌（PRSP）；（2）对产NDM-1泛耐药肠杆菌科细菌具有较高体外敏感性[3]；（3）对多重耐药鲍曼不动杆菌（MDRAB）、广泛耐药鲍曼不动杆菌（XDRAB）有一定抗菌活性[4]。
1.1 万古霉素耐药肠球菌（VRE）研究表明，替加环素对肠球菌属具有极强的抗菌活性[5]。
对万古霉素耐药不影响肠球菌对替加环素的敏感性，其抗菌活性分别是万古霉素和利奈唑胺的8倍和16倍[6]。
梁慧等[7]将米诺环素、替加环素对多重耐药菌的体外抗菌活性进行对比试验，结果显示93株多重耐药的屎肠球菌，仅36株（38%）对米诺环素敏感，而对替加环素呈现100%敏感；5株耐万古霉素的屎肠球菌均对替加环素敏感；周澎涛等[8]报道的根据TEST和SENTRY的研究数据表明：替加环素对耐万古霉素的粪肠球菌有效，其MIC90为0.12～0.15 μg/ml，对全部22株耐万古霉素的粪肠球菌的MIC90为0.12 μg/ml，提示替加环素对耐万古霉素的肠球菌具有良好的抗菌活性。
高水平耐药实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的本研究旨在探究高水平耐药菌的耐药机制，特别是针对第三代头孢菌素类抗生素的耐药性。
通过分子生物学技术，分析耐药菌的耐药基因及其表达情况，为临床合理用药和耐药菌的防控提供科学依据。
二、实验材料1. 实验菌株：临床分离的高水平耐药肠杆菌科细菌（如肺炎克雷伯菌、大肠杆菌等）。
2. 主要试剂：PCR试剂盒、DNA提取试剂盒、引物合成、限制性内切酶、质粒提取试剂盒等。
3. 主要仪器：PCR仪、电泳仪、凝胶成像系统、紫外分光光度计等。
三、实验方法1. 菌株鉴定：采用常规细菌学方法对实验菌株进行鉴定。
2. 耐药性检测：采用K-B纸片扩散法检测实验菌株对第三代头孢菌素类抗生素的耐药性。
3. 耐药基因检测：（1）DNA提取：采用DNA提取试剂盒提取实验菌株的总DNA。
（2）PCR扩增：针对目标耐药基因设计特异性引物，通过PCR扩增耐药基因片段。
（3）产物鉴定：将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，观察特异性条带。
（4）序列分析：将扩增得到的耐药基因片段进行测序，分析序列特征。
4. 耐药基因表达分析：（1）RNA提取：采用RNA提取试剂盒提取实验菌株的总RNA。
（2）RT-PCR：将RNA进行逆转录合成cDNA，再进行PCR扩增耐药基因片段。
（3）产物鉴定：将RT-PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，观察特异性条带。
1. 菌株鉴定：实验菌株经鉴定均为肠杆菌科细菌。
2. 耐药性检测：实验菌株对第三代头孢菌素类抗生素均表现出高水平耐药性。
3. 耐药基因检测：（1）测序结果显示，实验菌株携带第三代头孢菌素类抗生素耐药基因，如AmpC酶基因、KPC酶基因、OXA-48型碳青霉烯酶基因等。
（2）耐药基因片段经琼脂糖凝胶电泳鉴定，特异性条带清晰。
4. 耐药基因表达分析：（1）RT-PCR结果显示，实验菌株中耐药基因表达水平较高。
（2）琼脂糖凝胶电泳鉴定，特异性条带清晰。
五、实验结论1. 实验菌株对第三代头孢菌素类抗生素表现出高水平耐药性，其耐药机制可能与携带多种耐药基因有关。
替加环素的药学特点
替加环素的药学特点加环素是一种广谱抗生素，属于四环素类药物，可抑制细菌蛋白质的合成，从而起到抗菌作用。
以下将对加环素的药学特点进行详细介绍。
1.药理作用：加环素能与细菌的30S核糖体亚单位结合，阻碍tRNA进入A位点，从而抑制蛋白质的合成。
加环素对于グ+菌、グ-菌、立克次体、支原体、衣原体等多种细菌有很好的抗菌活性。
此外，加环素还具有一定的抗病毒、抗原虫和免疫调节作用。
2.药代动力学：加环素口服后能很好地吸收，尤其在空腹状态下吸收更佳。
食物的摄入会明显减慢加环素的吸收，而与乳制品、铁、铝、锌盐等离子复合物的络合会降低其生物利用度。
加环素的血药浓度普遍较低，但可以积累在组织中。
3.药动学特点：加环素通过被肝脏代谢，产生代谢产物进行排泄。
约30%～60%以原药和代谢产物的形式通过肾脏排泄，也有部分经胆汁排泄。
加环素的半衰期约为16～18小时，适合2次或3次/日给药。
4.药物相互作用：加环素与一些药物（如巴比妥类、苯妥英钠和异丙肾上腺素等）存在相互作用，可能降低加环素的疗效，因此，在联合使用这些药物时需谨慎。
5.药效学：加环素具有较广的抗菌谱，对于多种革兰氏阳性和阴性细菌、立克次体、支原体、衣原体等有较高的抗菌活性。
加环素对肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、赫曼氏杆菌、艰难梭菌等革兰氏阳性菌有很好的疗效，同时对一些霉菌和原虫也有较好的抗菌作用。
然而，加环素对肠杆菌科、流感嗜血杆菌等革兰氏阴性菌的抗菌作用较弱。
6.耐药性问题：有研究表明，加环素的耐药性逐年增高，这与长期广泛应用加环素有关。
耐药性主要是由表达四环素应响应要素(R)基因所编码的四环素排出蛋白(ref1A)或其样蛋白引起的。
此外，还可以通过酶解四环素分子使药效下降，或改变四环素的靶点等方式导致耐药。
7.适应症和用量：加环素适用于治疗呼吸道感染、泌尿道感染、软组织感染、舍斯勒氏病、斑疹伤寒、副伤寒、支气管炎和支气管扩张症等多种感染疾病。
一般成人用量为每日2～3次口服100～300mg/次，注意饭前或饭后服用的区别。
替加环素的药学特点共34页文档
1、产品说明书。
特殊人群代谢：肝功能障碍
• Child Pugh A 患者代谢无变化
– 无需调整给药剂量
• Child Pugh B患者:
– 系统清除率减少 25% – 半衰期延长 23% – 平均AUC增加 50%
– 无需调整给药剂量
• Child Pugh C患者:
– 系统清除率减少 55% – 半衰期延长 43% – 平均的AUC增加 105%
替加环素的药学特点
1
1928年弗莱明发明青霉素，1935年钱 恩和弗罗里对之进行分离、提纯和强化， 1941年青霉素药物上市，标志着人类进入
抗生素时代
抗生素上市以来的耐药：
△1920’- 60’ △1960’- 70’ △1970’末-今天
G + 葡萄球菌耐药 G- 铜绿假单胞菌耐药
G+ G-
在全球范围内，
AUC24比值 部位/组织
AUC0-12比值 组织/血清
胆囊a
38倍
23/14
—
结肠a
2.3倍
2.6/1.8
—
皮肤水疱液b
比血清低26％
—
1.6/2.18
肺泡上皮细胞b
78倍
—
134/1.73
上皮细胞衬液b
比血清高32%
—
2.28/1.73
肺组织a
8.6倍
2.0/2.0
—
滑膜液a
0.58倍
0.3/0.3
13
泰阁(替加环素) 药代动力学特性—分布
替加环素广泛的分布于身体各组织
• 替加环素的稳定状态分布容积约为500-700升(7至9 L/kg)，其分布 超过血浆容积
• 根据临床研究观察(0.1至1.0 μ g/mL)，替加环素的体外血浆蛋白 结合率约为71%至89%
肠杆菌科细菌质粒介导氨基糖苷类耐药基因研究进展
·综述·肠杆菌科细菌质粒介导氨基糖苷类耐药基因研究进展施清喻， 胡付品关键词： 16S rRNA 甲基酶； 质粒； 氨基糖苷类； 耐药； 基因中图分类号：R378.2 文献标识码：A 文章编号：1009-7708 ( 2019 ) 06-0691-06DOI: 10.16718/j.1009-7708.2019.06.019Research updates on plasmid-mediated aminoglycoside resistance genes in EnterobacteriaceaeSHI Qingyu, HU Fupin. （Institute of Antibiotics, Huashan Hospital, Fudan University, Key Laboratory of Clinical Pharmacology of Antibiotics, National Health Commission, Shanghai 200040, China ）作者单位： 复旦大学附属华山医院抗生素研究所，国家卫健委临床药理重点实验室，上海 200041。
第一作者简介： 施清喻（1996—），女，硕士研究生，主要从事细菌耐药机制研究。
通信作者：胡付品，E-mail ：hufupin@ 。
氨基糖苷类抗菌药物（aminoglycosides ）通过结合原核生物30S 核糖体亚基16S rRNA 的高保守A 位点，干扰细菌蛋白质的合成导致细菌的死亡[1]，现用于临床革兰阴性菌所致严重感染的治疗及畜牧业中。
按其作用部位可分为：①与A 位点结合，4，6-二取代脱氧链霉胺类（如卡那霉素和庆大霉素）；4，5-二取代脱氧链霉胺类（如新霉素）。
②非与A 位点结合（如链霉素和大观霉素）[2]。
但氨基糖苷类抗菌药物由于其不良反应，且随着广谱抗生素的出现，临床应用逐渐减少。
近年多重耐药肠杆菌科细菌不断出现，但首选治疗药物碳青霉烯类耐药性却逐年上升。
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肠杆菌科细菌替加环素耐药机制研究
肠杆菌科细菌,包括肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌,是当今世界范围内出现的引起院内感染的重要病原体。
替加环素因其良好的抗菌活性和临床使用的安全性,是目前国内外用于应对碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌的首选抗菌药物。
近年来随着替加环素的广泛使用,关于肠杆菌科细菌替加环素耐药的报道逐年增多,尤其是肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对替加环素的耐药率也呈逐年上升趋势,而现有的研究并不能合理解释肠杆菌科细菌对替加环素耐药的原因。
本研究通过两部分内容,探讨了肠杆菌科细菌对替加环素耐药的主要机制,并深入探索了肠杆菌科细菌替加环素耐药的新机制。
第一部分,主要研究产KPC肺炎克雷伯菌临床菌株对替加环素的敏感性以及探索RND型外排泵在肺炎克雷伯菌替加环素耐药中所起的作用。
我们共收集了215株产KPC肺炎克雷伯菌临床菌株,通过微量肉汤稀释法测定这些菌株的替加环素最低抑菌浓度(MIC);挑选替加环素耐药菌株,使用外排泵抑制剂探讨外排泵在这些菌株替加环素耐药中所起的作用;通过荧光定量PCR检测RND型外排泵基因acrB和oqxB以及它们的转录调节因子(ramA、marA、soxS和rarA)的表达并分析这些基因与替加环素MIC的相关性。
结果显示:215株产KPC肺炎克雷伯菌中有24株对替加环素耐药(MIC≥
4mg/L,EUCAST标准),耐药率为11.2%。
而外排泵抑制剂NMP可有效恢复上述菌株对替加环素的敏感性(91.7%的菌株恢复敏感)。
荧光定量PCR结果显示外排泵基因acrB的表达量与替加环素的MIC呈正相关关系(P<0.05)。
此外,我们还在3株耐药菌株中发现ramA高表达现象,进一步研究发现这些菌株均存在ramR突变。
对其中一株ramR突变引起基因表达终止的菌株进行野生型ramR回补,回补后的菌株恢复对替加环素的敏感性,同时ramA和acrB的表达均受到抑制。
本研究结果表明:RND型外排泵AcrAB-TolC在肺炎克雷伯菌临床菌株替加环素耐药中起着关键的作用,它的表达量和细菌替加环素MIC呈正相关关系(P<0.05);同时我们发现ramR基因的突变进而引起ramA基因和外排泵AcrAB的高表达是肺炎克雷伯菌临床菌株替加环素耐药的主要机制之一。
第二部分,通过基因敲除、体外诱导等技术探索了大肠埃希菌替加环素耐药的新机制。
我们利用Red重组系统,进行基因敲除。
以标准菌株大肠埃希菌ATCC 25922为亲本菌株,构建了大肠埃希菌外排泵AcrAB敲除株25922△acrAB,然后以ATCC 25922和25922△acrAB为亲本菌株进行替加环素体外诱导实验,获得耐药菌株25922△acrAB-TGC8和25922-TGC8。
对耐药菌株和亲本菌株进行全基因组测序,并通过比较基因组学数据分析方法寻找突变基因,发现在25922△acrAB-TGC8和25922-TGC8中均存在mlaA基因突变,而随后的基因敲除和回补实验亦证明mlaA基因的突变可以导致大肠埃希菌替加环素的MIC升高8倍。
进一步研究表明,在菌株25922-TGC8中该细菌对替加环素耐药是Mla系统、外排泵AcrAB和核糖体蛋白变异三种机制共同作用的结果,最终使菌株对替加环素的MIC从0.125mg/L上升到8mg/L(FDA耐药标准)。
因为Mla系统、外排泵AcrAB 和核糖体蛋白均由细菌染色体编码,当细菌在替加环素药物选择压力的作用下,上述基因易发生突变,进而导致替加环素耐药的发生,可能是对肠杆菌科细菌在替加环素治疗过程中容易从敏感发展成为耐药较为合理的解释。