6.第二章 细菌的生物学特性,第六节抑制或杀灭微生物的理化因素

三、化学消毒灭菌法
1.高效消毒剂 含氯消毒剂； 过氧化物消毒剂； 醛类消毒剂； 环氧乙烷
2.中效消毒剂 含碘消毒剂； 醇类消毒剂
3.低效消毒剂 季铵盐类； 氯已定； 高锰酸钾
三、化学消毒灭菌法
0.1%新洁尔灭（苯扎溴铵） 0.2%—0.5%过氧乙酸 2%煤酚皂溶液（来苏水）
洁净区地面、门、墙、玻 璃窗、天花板、清洁间水 池和清洁工具的消毒
饮水、游泳池水、地面 水、空气等、皮肤
染料
2%—4%龙胆紫
与蛋白质的羧基结合
皮肤、伤口
酸类
0.1%苯甲酸 0.1%山梨酸
食品防腐 食品防腐
重金属盐类 表面活性剂
0.05%—0.1%升汞、2%红汞 0.1%—1%硝酸银、0.1%—0.5%硫酸铜
0.05%—0.1%新洁尔灭（苯扎溴铵） 0.05%—0.1%杜灭芬
二、物理消毒灭菌法
物理灭菌法
方法
主要技术参数
应用特点
干热灭菌
药典规定160-170℃，2h 或140℃，3h
穿透力弱，温度不易均匀，温度高，不适 于大部分药品
热压灭菌 9Baidu NhomakorabeakPa(1kg/cm2),15-20min 穿透力强，效果可靠，适用广
湿热灭菌
流通蒸汽 100℃，30-60min
不能杀灭细菌芽胞
一、消毒灭菌的常用术语
无菌车间
无菌操作台
二、物理消毒灭菌法
包括热力、辐射、滤过、干燥和低温
（一）热力灭菌法
高温对细菌具有明显的致死作用，因此最常用于消毒和灭菌。多数 无芽胞细菌经55-60℃作用30~60分钟后死亡。湿热80℃经5~10分钟 可杀死绝大部分细菌繁殖体和真菌。 细菌芽胞对高温有很强的抵抗力，例如炭疽芽胞杆菌的芽胞，可耐 受5~10分钟煮沸，肉毒梭菌的芽胞则需煮沸3~5小时才死亡。
115℃，70.91kPa，30min 121℃，103.1kPa，15-20min
二、物理消毒灭菌法
影响热力灭菌的因素
微生物的种类和数量 灭菌温度与作用时间（灭菌温度与时间成反比） 被灭菌物品的性质（所含营养、pH）
二、物理消毒灭菌法
影响热力灭菌的因素
同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好 湿热中细菌菌体蛋白较易凝固 湿热的穿透力比干热大 湿热的蒸汽有潜热
二、物理消毒灭菌法
（一）热力灭菌法
原理 使微生物蛋白质变性凝固 ； 酶失活； 微生物体内的DNA断裂。
分类
1.干热灭菌法 2.湿热灭菌法
二、物理消毒灭菌法
（一）热力灭菌法 1.干热灭菌法
焚烧----最彻底的灭菌方法 烧灼----直接用火焰灭菌方法。如接种环、试管口、三角瓶口 干烤----加热160-170℃ 2h。如玻璃器皿、陶瓷 红外线----热效应，与干烤类似。如医疗器械、食具
蛋白质变性、酶失活 变性、沉淀蛋白 蛋白质变性、酶失活
蛋白变性、破坏细胞膜
非金属器皿、体温计、皮肤、 粘膜、伤口、皮肤、新生儿 眼睛防治植物病害
皮肤、粘膜、器械 皮肤、金属、棉织品、塑料
四、消毒灭菌的运用
（一）医疗器械物品的消毒灭菌
1.高危器械物品 用时需进入无菌组织的物品。所有这些物品都 应该灭菌。 2.中危器械物品 用时不进入无菌组织但接触黏膜的器械。采用 消毒即可。 3.低危器械物品 只接触未损伤皮肤但不进入无菌组织和不接触 黏膜的物品。一般用后清洗、消毒即可。 4.快速周转的医疗器械
二、物理消毒灭菌法
（三）滤过除菌法
二、物理消毒灭菌法
（四）干燥与低温抑菌法
有些细菌的繁殖体在空气中干燥时会很快死亡，例如脑 膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、霍乱弧菌、苍白密螺旋体等 。
低温可使细菌的新陈代谢减慢，故常用作保存细菌菌种 。当温度回升至适宜范围时，又能恢复生长繁殖。为避 免解冻时对细菌的损伤，可在低温状态下真空抽去水分 ，此方法称为冷冻真空干燥法。该法是目前保存菌种的 最好方法，一般可保存微生物数年至数十年。
灭菌效果：可杀死营养体和芽 胞
二、物理消毒灭菌法
（一）热力灭菌法
二、物理消毒灭菌法
（一）热力灭菌法
2.湿热灭菌法 巴氏消毒法----较低的温度：71 ℃ 30s（杀致病菌） 煮沸法----水煮100 ℃ 5min（杀繁殖体）-2h（杀芽胞） 流动蒸汽消毒法----水蒸汽100 ℃ 15-30min（杀繁殖体） 间歇蒸汽灭菌法----反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌（杀芽胞） 压力蒸汽灭菌法----121 ℃ 15-20min（杀芽胞）。最有效的
一、消毒灭菌的常用术语
灭菌 杀灭物体上所有微生物的方法。
消毒 杀死物体上或环境中的病原微生物的方法。
防腐 防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法。
清洁 是指通过除去尘埃和一切污秽以减少微生物数量的过程
。
无菌和 无菌是无活菌的意思，多是灭菌的结果。防止细菌 无菌操作 进入人体或其它物品的操作技术，称为无菌操作。
用途：医疗器械、室内空气、皮肤等
影响因素：微生物的种类、状态、数量 消毒剂的性质、浓度与作用时相 温度、酸碱度、有机物
β射线（电子束灭菌，适用薄、密度低的物料） γ射线（同位素辐射灭菌法）
杀菌机理：产生游离基，破坏DNA。 特点：射线穿透力强、被灭菌物体温度变化小。 适用范围：一次性医用塑料制品的消毒、食品的消毒不破坏其营养成分。
二、物理消毒灭菌法
（二）辐射杀菌法
2.电离辐射 适用于热敏性药物的灭菌； γ射线穿透力强，特别适用于已包装密封的药品消毒灭菌可 防二次污染 ； 杀菌作用可靠，广泛适用于固、液、半固体物料。 有可能使药效活性降低，使用中注意安全保护。
四、消毒灭菌的运用
（三）手和皮肤的消毒
用肥皂和流动水经常并正确洗手，病原微生物污染时应用消毒剂消毒 。
四、消毒灭菌的运用
（四）黏膜的消毒 （五）病人排泄物与分泌物的消毒灭菌 （六）病人污染物品的消毒 （七）饮水的消毒 （八）环境的消毒
五、影响消毒灭菌效果的因素
（一）微生物的种类
真菌＞细菌繁殖体＞有包膜病毒＞ 无包膜病毒＞分支杆菌＞芽孢
间歇灭菌
100℃，30min + 室温24h， 适于必须加热灭菌而又不耐高温者；时间长，效果不
重复操作3次以上
理想；须加抑菌剂
紫外线灭菌 微波灭菌
200-300nm，254nm最强 2450MHz，3-6min
用于空气灭菌和表面灭菌，效果与微生物敏感性有关， 对酵母菌和霉菌力弱
强热效应，快速高效，适于热不稳定者
（二）微生物的物理状态 营养缺陷＞营养丰富
（三）微生物的数量
数量越大，消毒时间越长
（四）消毒剂性质、浓度与作用时间
（五）温度
温度越高，消毒时间越短
（六）酸碱度
受酸碱度影响很大
（七）有机物
影响消毒剂的效果
本章小结
消毒灭菌：灭菌、消毒、防腐、清洁、无菌 物理消毒灭菌法：热力、辐射、滤过、干燥和低温 化学消毒灭菌法：高效、中效、低效消毒剂
70%—75%乙醇：皮肤、直接接触药物的仪器设备
低毒，价廉，低破坏，易贮存，方便，有效
三、化学消毒灭菌法
类型
名称及使用方法
作用原理
应用范围
醇类
70%—75%乙醇
脱水、蛋白质变性
皮肤、器皿
醛类
0.5%—10%甲醛、2%戊二醛（pH=8） 蛋白质变性
房间、物品消毒
酚类
3%—5%石炭酸 2%来苏儿（煤酚皂） 3%—5%来苏儿
辐射灭菌
γ射线 β射线
60Co，穿透力强
由电子加速器产生，穿透 力弱，灭菌效果差
不升高温度，设备费用高，辐射能引起一些药物pH值、 含量、活性等改变，某些制品不宜选用
三、化学消毒灭菌法
利用化学药物（消毒防腐剂）破坏微生物的化学组成、物理结构和 生理活动，达到防腐灭菌目的。
化学消毒剂作用机制
促进菌体蛋白质变性凝固（酚、醇、醛、酸碱类等） 干扰细菌酶系统和代谢（氧化剂、重金属盐类等） 损伤细菌细胞膜，增加其通透性（表面活性剂、脂溶剂等） 菌体成分氧化、水解或结构改变（氧化剂、卤素、醛、酚等）
适用对象
不宜高压灭菌的培养基 不耐热的药物和营养物 发酵车间的管道等 中药注射剂常用该法
缺点：时间长、功效低，消灭芽孢效果差
二、物理消毒灭菌法
（一）热力灭菌法
煮沸灭菌法，100℃ 5min（杀繁殖体），2h（杀芽胞），适 用于注射器和外科器械的消毒。
二、物理消毒灭菌法
（一）热力灭菌法
压力蒸汽灭菌法采用高压饱和蒸汽杀灭微生物，是最有效的灭 菌方法，常用于医院。
细菌的生物学特性
学习 目标
掌握 消毒灭菌的术语；分类 熟悉 消毒灭菌的运用 了解 影响消毒灭菌的效果的因素
第五节
抑制或杀灭微生物 的理化因素
细菌为单细胞生物，极易受外界环境中各种因素的影响。 环境适宜时，生长繁殖；若环境条件不适宜或剧烈变化时， 细菌可发生代谢障碍，使生长受到抑制，甚至死亡。 利用理化因素对微生物的影响进行消毒灭菌，以抑制或杀 死外环境中及机体体表的微生物，是防止微生物污染或病 原微生物传播的重要措施。 消毒灭菌在医学生物科学、工农业生产和日常生活中有着 广泛的应用。
二、物理消毒灭菌法
（二）辐射杀菌法
1.紫外线 波长240-300nm（265-266nm） 杀菌机理：干扰DNA的复制与转录 特点：紫外线穿透力较弱 房间静态空气消毒时剂量一般为0.1～0.4w/m2 通风管内流通空气可采用大于100w/m2的大剂量
二、物理消毒灭菌法
（二）辐射杀菌法
2.电离辐射 包括：
破坏细胞膜、蛋白质变性
地面、器具 皮肤 地面、器具
氧化剂
0.1%高锰酸钾 3%过氧化氢 0.2%—0.5%过氧乙酸
氧化蛋白质活性基团，酶失 活
皮肤、水果、蔬菜 皮肤、物品表面 水果、蔬菜、塑料等
卤素及其化合物
0.2—0.5mg/L氯气、10%—20%漂白粉 0.5%—1%漂白粉、2.5%碘酒
破坏细胞膜、蛋白质
湿热灭菌法
二、物理消毒灭菌法
（一）热力灭菌法
巴氏消毒法（杀致病菌），适用对象：奶制品、果汁、酒、 糖浆等食品消毒。
61℃ 30min或71℃ 15s或82℃ 4s
二、物理消毒灭菌法
（一）热力灭菌法
间歇蒸汽灭菌法，将灭菌物体置于100℃ ，15-30min后，置于 37℃温箱 ，过夜，使芽胞发育成繁殖体。反复三次（杀芽胞）
四、消毒灭菌的运用
（二）室内空气消毒灭菌
1.物理消毒法 ①紫外线照射（1.5W/m3，1h）最常用； ②滤过除菌：空气通过孔径小于0.2 μm的高效过滤装置以除去 细菌和带菌尘埃。 2.化学消毒法 包括化学消毒剂喷雾和熏蒸： ①过氧乙酸喷雾、熏蒸； ②过氧化氢喷雾； ③二氧化氯溶液喷洒； ④中草药点燃烟熏。
二、物理消毒灭菌法
（二）辐射杀菌法
3.微波
微波是波长为1~1000mm的 电磁波，可穿透玻璃、陶瓷 和薄塑料等物质，但不能穿 透金属表面。主要用于食品、 非金属器械、检验室用品、 食品用具和药杯等消毒。
二、物理消毒灭菌法
（三）滤过除菌法
杀菌机理：含有微细小孔<0.22μm,只允许液体或气体 及孔径<0.22μm的颗粒通过，细菌不能滤过。 不能除病毒、支原体。 适用范围：血清、毒素、输液、生物制品、抗生素以及 空气等的除菌。