月季组织培养技术
月季组织培养
目录摘要 (4)前言 (4)综述 (5)1．外植体 (5)1.1取材部位1.2取材时间1.3取材大小2. 消毒 (8)3. 接种方式 (8)4.培养基 (9)4.1基本培养基4.2激素4.2.1不同激素对诱导愈伤组织的影响4.2.2不同激素对继代培养的影响4.2.3不同激素对生根培养的影响4.3糖浓度的影响4.4无机盐4.5琼脂5.培养基的配置 (13)6.培养条件 (14)7．防褐化 (14)技术路线与实验设计 (15)参考文献 (17)摘要：为了进行月季组织培养实验，我们查阅了相关文献，从多个方面了解影响月季组织培养的因素，如外植体的取材部位、时间、大小、消毒、接种方式、不同阶段激素的配比、培养基成分、培养条件等，以期在实验中调控月季组培的环境，确保实验顺利进行。
基于我们想探究激素对组织培养中细胞的脱分化和再分化的作用这一想法，我们的设计了以ＮＡＡ浓度、６ＢＡ浓度、外植体部位为影响因素的正交实验（L9（3４）），并考察NAA与6BA的交互作用。
同时，我们还以接种方式作为单因素考察其对愈伤组织诱导的影响。
关键词：组织培养、影响因素、正交前言在阅读了植物组织培养的相关文献资料后，我们设计了此次组织培养实验方案，考察细胞分裂素浓度、生长素浓度、接种方式、取材部位因素对愈伤组织的形成有何影响，期望寻找出诱导月季愈伤组织的最佳条件；同时探究由愈伤组织诱导出芽及生根所需的最佳浓度配比。
并在月季组织培养过程中，掌握外植体消毒方面要注意的事项，整个培养过程中培养条件的选取与控制，实验过程中出现的现象的观察记录以及分析，在这个过程中不断加强理论与实践的联系，深化对理论知识的理解。
对于外植体选择，我们采用了以往研究者的做法，即选用带腋芽的枝条。
但是，我们的不同之处在于，我们还保留了一部分刚好能包裹住腋芽的叶柄。
这样做的目的是为了在消毒时避免芽受到太大损伤。
参考论文中防褐化多用抗氧化剂和其他抑制剂，减轻外植体在组培中的酶促褐变，我们根据生理生化原理，考虑到酶活性与温度有关、以及外植体内的酚类物质含量有关，因此需对外植体做如下处理：接种前先将外植体用低温水流冲洗24小时；选择晴朗天气采摘外植体。
月季的组织培养
外植体的取材部位对芽的萌发也有影响，“Gold Glow”和“Improved fire”月季的侧芽如果在不 同激素的培养基上进行组培，可发现在枝条顶部 和基部的芽发育慢，而枝条中部的芽发育快。在 研究中发现靠近外植体顶端的芽较其他部位芽的 发育慢，在茎尖脱毒培养时，由嫩茎的顶芽得到 的外植体成活率高于腋芽。在实际工作中由于顶 芽数量少，故月季的组培依旧常常使用腋芽作为 外植体，这时一般需要进行茎切除顶芽（摘心） 以打破顶端优势、促使腋芽健壮生长，以促进嫩 茎的增殖。 此外，外植体的取材时间及培养所需时间对月季 嫩茎的发育和增殖也有影响。对于“Bulgarian rose”而言，选取外植体的最佳时间是冬季 （1～3月），而“Improved fire”月季的培养时 间以28d继代一次较好，超过 28d，茎的数目就 不再增加了。
诱导培养基以MS为基本培养基（硝酸 盐、钾和铵的含量高），附加适量的 细胞分裂素6-卞氨基嘌呤（6-BA）0.53.0mg/L和生长素萘乙酸（NAA） 0.01-1.0mg/L,且培养基中添加蔗糖有 增加丛生芽数量的作用。
壮苗培养与生根
1、壮苗培养 在继代培养过程中，细胞分裂素浓度的增加有助于增殖系 数的提高。但伴随着增殖系数的提高，增殖的芽往往出现 生长势减弱，不定芽短小、细弱，无法进行生根培养的现 象；即使能够生根，移栽成活率也不高，必须经过壮苗培 养。壮苗培养时，可将生长较好的芽分成单株培养，而将 一些尚未成型的芽分成几个芽丛培养。 通过选择适宜的细胞分裂素和生长素的种类及不同浓度配 比，可以同时满足增殖和壮苗的不同要求。高浓度的生长 素和低浓度的细胞分裂素的组合有利于形成壮苗。因此， 在以丛生芽方式进行增殖时，适当降低培养基中BA等细胞 分裂素的浓度，并增加NAA等生长素的浓度，就能达到壮 苗培养的目的。在实际生产中，我们一般用较低浓度的细 胞分裂素与生长素组成合理的比列，将有效增殖系数控制 在3.0-5.0，以实现增殖和壮苗的双重目的。
浅谈月季组织培养技术研究
高校 图书馆创新服务建设进 行 了探讨 。 关键词 ： 高校 图书馆 ； 新 内容； 创 动脑动手； 益智 室
师生 ， 包括 学院行政领导干部在 内的各项服务 。图书馆服务 内容也 １高职 院校 图书馆基本服务现状 ２１ ０ ０以来 ， 高校都大大改善 了教学和 实验 等条件 ， 也有力地推 从馆藏 资源发展到 网络 资源 ， 服务 的手段也 向现代化 发展 ， 为读者 还包 括多媒体 、 图像 、 字化文献 等 ， 数 它 动 了高校 图书馆事业的发展 。近年来 ， 各高校校逐步加大 了对 图书 提供 的不仅仅是纸质 文献 ， 馆建设的投入力度。 目前 ， 高校图书馆 已全部实现 了计算机集成化 使传统 图书馆以书 目为中心的内务管理 ， 发展到现在 的面 向公众 的 管理 ， 数字化 、 网络化建设也 已开始运转 。 但在读者服务方 面还是 图 信 息服务 ， 并且 通过网络 ， 图书馆馆藏资 源与服务可 以无 障碍地走 书借 阅 、 刊阅览及 电子 阅览 室的数字文献 、 网服务 。随着互联 向世界 ， 强社会效益 。读者 可以预先通过 电脑输 入书名 、 期 上 增 作者姓 Ｓ Ｎ号等多种途径查询所需 的图 网、 手机移号、图书的 ＴＢ 通 然后进 入书库 中取书 ； 还可以通过网络查询多个馆的馆藏情况 ， 过互联网终端、 手机获得大量信息， 对图书馆的需求度大为下降。 例 书 ， 如图书馆的装帧精美字词典 已经成 了摆设 ， 人们 已经 习惯在 随身 电 直接在 网上进行预借 、 续借 和享受数 字图书馆 的全套 服务 ， 轻松地 建立个人 图书馆 、 联网 、 将所需资料下载到 自己的硬 盘上 ， 手机看 电影 、 看小说等愈来愈普及。 来图书馆的读者也愈来愈少 。 通 建立特色服务。有学者将图书馆特色服务定义为“ 以某种特 凡 某种 ＇Ｊ －ｌ ］￣ 过我们来图书馆读 者的分析统计 ， 借阅现代小说类和上 网的读者最 色藏书， 特色服务内容和某一特定读者群为专 Ｉ ／ 务对象 的服 多 ， 阅与 自已专业相关书籍的也不多 ， 网看 数字图书几乎没有 。 务就是特色服务” 这一定义准确地概括了图书馆特色服务 的内涵 、 借 上 。 因此 ， 图书馆在 全球 网络化 、 信息化 的大 环境 下 ， 图书馆 的功 能、 信 特征与服务对象 ， 从概念上将图书馆特色服务 与图书馆传统常规服 息用户的需求特征等都将发生 了很大 的变化 。读者 获取 知识 、 信息 务予以区分。图书馆特色服务通 常有 三种 表现形式 ： 第一， 以特色 是 之 目的， 以及获取渠道与要求等也与以往有很大 的不 同。以及读者 馆藏为基础而提供的特色服务。由于地域 、 历史及特定 的历史 文化 服务的个性化 ， 都要求图书馆进行服务创新 。 背景等原 因而形成 的特色馆藏 资源， 针对某一领域 的读者开展专 门 ２ 创 新 图书 馆 服 务 内容 化服务 。第二， 开展有别于传统 内容的具有特色的服务， 或运用新颖 ２１ ．服务理念创新 。经济学家约瑟夫 ・ 熊彼特于 １ １ ９ ２年首次提 的手段开展服务， 如视频点播 、 专家讲座 、 上门服务等 。第三， 针对某 出了“ 创新 ” 的概念 。 创新是指 以独特的方式综合 各种思想或在各种 特定读者群和 目标读者而定制 的个性化服务。 思想之 间建立起独特 的联 系的这样 一种能力 。能 激发创 造力的组 图书馆特色服务的特点 。 其一 ， 要有独特性。 独特性是相对 于图 织， 以不断地 开发出做事的新 方式 以及解决 问题 的新 办法。管理 书馆传 统服务 而言所表现 出来的特色 ，这些特色 可表现为 藏书结 可 创新 则是 指组织形成一创造性思想并将其转换为有用 的产 品、 服务 构 、 务内容 、 服 服务方式， 也可表现为针对特殊群体 的特殊 服务 。强 或作业方法的过程 。 创新必须在 以人为本思想指 导下对管理 中存在 调独特性并非刻意追求标新立异 ， 蹊径， 独辟 而是要 以需求作为 出发 的问题进行改革 。高校 图书馆 目前存在 的问题 很多， 最为关键 的 点， 但 以特色满足需求。其二 ， 要有针对性 。特色服务必须具有针对性， 是管理的封闭性 以及基础建设和人才缺乏 。 这主要是 由于各高职院 重点针对服务 对象 而展开 。 如根据辖 区丰富的旅游资源而设立旅游 校在图书馆管理上缺乏有效 的协调， 自为政 的分散 型管理使得宏 图书馆， 区域人才济济的优势开办专家论坛等。其三 ， 各 利用 要有创新 观规划 、 管理 、 调控 的能力丧失， 加之严格的行政监控使 图书馆缺乏 性。从某 种意义上来说， 色服务是在传统服务基础上 的创新 。 特 必要的管理 自主权 ， 活性 、 其灵 积极性 、 创新性都受 到限制， 图书馆管 ２ ． ３增加图书馆创新服务 。高职院校是培养高素质高技能 的实 理模 式趋 于僵化 。 先进 的服务理念是公共 图书馆服务创新 的思想基 用人才为 目地 ， 也是 高等职业教育体 现办学特色 、 把握教育 属性 的 础。应从传统 图书馆服务观念的禁锢 中走 出来 ， 确立新时期图书馆 重要 任务 。针对当前“ 高素质 、 高技能 ” 才培育 的实践， 人 高等职业院 服务的新 理念 。 一是 以人 为本理念 。 就是要 以读者为本 ， 把满足读者 校 图书馆应 当从 教育教学观念 转变 、 文教育专业渗透 、 师职业 人 教
月季的组培实践
月季的组培实践1.1 实验材料月季。
1.2 材料处理月季枝条在自来水下冲洗干净, 用75%乙醇表面消毒30–40秒, 再用0.1%HgCl 2溶液灭菌2–6分钟, 无菌水冲洗3–5次。
在无菌条件下将叶片、叶柄和茎段剪成0.5 cm见方的小块或1 cm的小段, 并露出新鲜伤口。
培养瓶开口于酒精灯火焰处，接种于诱导愈伤组织培养基上2 培养基成分与培养条件2.1 培养基及培养条件(1) 诱导愈伤组织和不定芽均以MS培养基为基础.培养基诱导愈伤组织的最佳培养基配比为1.0 mg·L–16-BA+3.0 mg·L–12,4-D(2) 诱导不定芽产生的植物生长调节剂配比1.0 mg²L–1 6-BA+0.1 mg·L–1NAA+0.02 mg·L–1TDZ(3) 1/4MS+0.1 mg·L–1NAA为生根培养基.(含30 g²L–1蔗糖和7.0 g²L–1琼脂, pH 5.8–6.2), 并于121°C高压蒸汽灭菌25分钟。
培养条件为(25±2)°C, 每天16小时光照, 光照强度为40 μmol²m–2²s–1。
2.2 愈伤组织诱导选取经处理的外植体接种于不同激素配比(表1)的MS培养基上进行愈伤组织诱导。
定期观察, 3–4周继代1次。
2.3 不定芽的诱导和增殖外植体在愈伤组织诱导培养基上培养30天后, 挑选长势良好的愈伤组织, 接种yu配比植物生长调节剂的培养基中进行不定芽诱导.2.4 生根诱导将长势良好的再生苗移植到生根培养基上诱导生根.2.5 移栽炼苗将再生根生长状况良好的微型月季幼苗取出, 用流水缓慢地将根部残留的培养基冲洗干净(注意不要伤及根部), 移栽至土壤中炼苗1–7天。
月季组织培养
有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等
植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等
不同植物激素使用顺序和使用量
使用顺序 实验结果
先生长素， 有利于分裂但 后细胞分裂素 不分化 先细胞分裂素， 细胞既分裂也 分化 后生长素 同时使用 分化频率提高
生长素细胞 结果 分裂素比值 比值高时 促根分化， 抑芽形成 比值低时 促芽分化， 抑根形成 比值适中 促进愈伤组 织生长
3 .培养基
• 用于月季的基本培养基种类很多，如 B5、N6、WPM和 MS 培养基等。众多培养基中以 MS 培养 基的效果为最好，广泛用于月季的离体快速繁殖中。培养基的培养成分（主要是各类无机盐浓度） 及物理性能（pH 值、糖分以及固化支持物）会影响月季的组培。对 MS 培养基的成分及物理性能 进行合理的选择会提高月季组织培养的成功率。 MS 培养基中无机盐离子浓度因月季培养阶段的不同而有不同： 1）茎段培养阶段，将带有腋芽的嫩茎接种到不添加任何激素类物质的 MS 和 1/2MS 培养基上，两 周后，MS 培养基上的腋芽生长，而在 1/2MS 培养基上的腋芽几乎不萌发或发育不良。通过提高 MS 培养基中氯化钴的浓度，并用硫酸铵代替硝酸铵培养“Bulgarian rose”，可使其茎的生长状况 得到改善。同时有报道认为在 MS 培养基中添加硝酸银可以缓解叶片衰败并提高茎段侧芽的生长。 2）诱导生根阶段，一般要求较低的 MS 培养基无机盐离子浓度。Skirvin 等在用（Forever Yours ）月季做生根试验时发现，采用1/4MS 培养基，不加生长素即可以促进生根。
外植体消毒
接种
冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌 水冲洗至少三次之上
培
养
栽
培
移
栽
月季花的组织培养
（b）移栽。幼苗出瓶后，先洗去沾附的琼脂培养基，再 种植到粗沙+园田土（1：3）介质中，总的原则是疏松透 气，有一定的保水、保肥能力。种植密度2～3厘米×4～6 厘米/株，移栽完毕浇透水，并用0.1％的百菌清、多菌灵 或甲基托布津等喷雾保苗，能显著提高成活率。
（c）移栽后管理。移栽后需保持相对湿度85％以上，在 温室、拱棚中移栽，覆好遮荫网，一般成活率都比较高， 并注意通风和温度管理。4～6周后，须做好第二次移植， 通常植入5厘米×9厘米的塑料杯中，每杯种1苗，再经4～ 6周，地上、地下部分都充分生长，有些植株还能开花。
（4） 壮苗培养
①对增殖倍率高的品种，所增殖的嫩茎很细弱，要求进行 一次壮苗培养，以取得适合生根和今后移栽的苗子。壮苗 培养的培养基为：MS+BA0.3-0.5+NAA0.01-0.1，如果并 不特别强调繁殖速度，也可以一直使用这种培养基，以壮 苗为主，增殖为辅，使增殖与壮苗合为一步。
②培养条件。光照10～12小时/天，光强800～1800LX， 温度20～23℃，最高24～26℃。
4.在切割组织块时候，用酒精灯灭刀、剪后 未完全晾凉就切割叶片。
5.因为温度太高将叶片杀死；叶片比起茎段 来说组织较薄胶脆弱，灭菌很可能伤害到 组织内部，影响其愈伤组织的形成。
6.花药及萼片出愈率很低，原因可能是因为 花药为单倍体，在培养方面的要求较高， 配制的培养基的成分上不能充分满足；萼 片的分化能力较低，所以出愈率不高。
问题分析及解决
1. 可能是在外植体灭菌过程中个别没有灭菌完全 ，是自生菌；或者升汞灭菌后没有将升汞完全洗 干净。
2.可能因为培养基内水分较大，在培养过程中平 皿上方形成很多水珠，造成加大了污染几率。
有菌条件下月季组织培养技术
有菌条件下月季组织培养技术摘要介绍有菌环境条件下月季组织培养技术，包括培养基组成、培养瓶灭菌、灭菌培养基的制作、取材、材料处理、接种、培养、继代增值培养、生根培养、炼苗等方面内容，以为月季无性繁殖提供参考。
关键词月季；组织培养；有菌环境月季属蔷薇科蔷薇属花卉，品种繁多，近100年来累计的品种数以万计，目前流行的有数千个品种，而且每年许多国家仍在不断选育新品种。
现在许多国家都在用组织培养技术来繁殖月季的优良品种，目前这种快速繁殖方法技术成熟，已进行工厂化生产，对加速老品种的更新换代，迅速普及月季名优新特品种将起到重要的作用。
月季常规组培技术报道很多，但在有菌环境条件下的月季组织培养技术未见报道。
1培养基组成诱导萌芽培养基：MS+BA 0.5-1.0 mg/L+S106杀菌剂0.3 mL/L；增殖培养基：MS+BA 1-2 mg/L+NAA 0.1-0.2 mg/L+S106杀菌剂0.3 mL/L；生根培养基：1/2 MS+NAA 0.1-0.2 mg/L+IAA 1.0 mg/L（或NAA 0.5 mg/L）+S106杀菌剂0.3 mL/L。
2培养瓶灭菌根据培养瓶的大小、数量，以浸没培养瓶及瓶盖为度，在水池或容器中量取适度的自来水，然后加入S105杀菌剂0.2 mL/L，搅拌均匀，放入洗净的培养瓶及盖浸泡2 h以上。
然后捞取培养瓶及盖，将其倒扣在干净的工作台面上滤干水，待用。
3灭菌培养基的制作以制取1 L培养基为例：量取1 L自来水放在电饭煲内加热（因加热蒸发加入母液后到分装时煮沸刚好是定容要求的1 100 mL，冷却后就是1 L，故配1 L 培养基量取1 L自来水），称取白糖30 g、琼脂4 g，加入电饭煲锅水中，待全部溶解，再加入100倍MS母液（其中：大量元素A 10 mL、大量元素B 10 mL、铁盐10 mL、微量元素10 mL、有机物10 mL、1 mg/mL BA 0.5-1.0 mL），煮沸。
月季组培实验报告(3篇)
第1篇一、实验简介实验名称：月季组培实验实验目的：通过组培技术，了解月季组织培养的原理和方法，掌握无菌操作技术，提高植物繁殖效率，为月季的快速繁殖和遗传改良提供技术支持。
实验时间：2023年X月X日至X月X日实验地点：XX大学园艺实验室实验材料：月季植株（品种：XX）实验设备：超净工作台、无菌操作箱、高温高压灭菌器、移液枪、解剖刀、培养皿、试管、滤纸、镊子、剪刀、酒精灯、高压蒸汽灭菌锅等。
二、实验方法1. 外植体选取与消毒：- 选择生长健壮的月季植株，取其茎尖作为外植体。
- 使用无菌水清洗外植体，然后用75%酒精浸泡30秒，再用无菌水冲洗3次。
- 将外植体置于0.1%的氯化汞溶液中消毒5分钟，再用无菌水冲洗5次。
2. 诱导生根：- 将消毒后的外植体切成1-2厘米的小段，接种到含有不同激素比例的MS培养基中。
- 将接种后的培养皿放入培养箱中，培养温度为25℃，光照时间为12小时/天。
3. 生根培养：- 当外植体开始生根时，将培养基更换为含有较低激素浓度的MS培养基。
- 继续培养至生根率达到80%以上。
4. 炼苗与移栽：- 将生根的植株从培养皿中取出，置于温室中炼苗。
- 炼苗成功后，将植株移栽到花盆中，进行正常的养护管理。
三、实验结果与分析1. 外植体消毒效果：- 通过显微镜观察，发现消毒后的外植体表面无细菌污染，说明消毒效果良好。
2. 诱导生根效果：- 在不同激素比例的培养基中，生根效果最好的培养基为1/2MS+0.5mg/LNAA+0.5mg/L IBA。
- 在此培养基中，生根率达到90%，平均根长为3.5厘米。
3. 炼苗与移栽效果：- 炼苗过程中，植株生长良好，无病虫害发生。
- 移栽后的植株成活率达到了95%。
四、实验讨论1. 外植体选取：- 本实验选择茎尖作为外植体，主要是因为茎尖细胞分裂旺盛，易于诱导生根。
2. 消毒方法：- 消毒是组培实验的关键步骤，本实验采用氯化汞溶液消毒，效果良好。
3. 激素配比：- 激素配比对生根效果有显著影响，本实验通过优化激素配比，提高了生根率。
月季的植物组织培养
月季的植物组织培养一．实验目的1．掌握蔷薇科月季的组织培养技术2．熟悉、巩固无菌操作技术二．实验器皿及试剂1.仪器及用品：超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、电子天平、电热炉酒精灯、镊子、解剖刀、解剖剪、烧杯、三角瓶、培养皿、滤纸、封口膜2.试剂：MS+6BA1+NAA1（诱导）培养基、MS+6BA2+NAA2（继代）培养基、70%酒精、3%次氯酸钠、无菌水3.材料：月季茎段、幼嫩叶片、花萼片、花瓣及花药。
三．实验步骤配制诱导培养基：MS+6BA1+NAA1，1升，灭菌后分装到35个培养1.皿中。
2.取材：将采集的月季茎段、幼嫩叶片、花萼片、花瓣及花药冲洗干净，按不同部位分装到3个500烧杯中，放入超净工作台；先用70%酒精浸没并轻摇10秒进行预消毒；倒出酒精，加入3%次氯酸钠浸没，轻摇11分钟；倒净次氯酸钠，用无菌水冲洗5遍以上，倒出无菌水。
3.将消毒后的外植体放入带有滤纸的无菌平皿中，用解剖剪和解剖刀将嫩叶剪成5mm2大小、茎段长2—3cm每段至少有1 个侧芽、将花苞打开取花药，分别接种到带有培养基的平皿中并封口（每皿3—5个）。
4.标记好后，放入培养室中培养（2周左右）。
5.配制分化培养基：MS+6BA2+NAA2培养基，配制1升，灭菌后分装到35个100ml的三角瓶中。
6.挑选长有愈伤组织的外植体，将其转移到分化培养基中。
在超净工作台中，将培养皿封口膜在酒精灯旁打开，将长有愈伤组织的外植体用灭菌的镊子从平皿中取出，转移到带有分化培养基三角瓶中（每瓶最多）并封口。
7.标记好后，放入培养室培养。
继续观察愈伤组织的生长情况。
四．实验结果茎段出愈率=25根出愈/总接种40根*100%=63%叶片出愈率=5片出愈／总接种30片*100%=17%花药及萼片出愈率=1片出愈/总接种20片*100%=5%通过实验得出月季茎段的出愈率最高，其次是叶片及花药。
接种过程中有三个平皿出现污染现象。
五．问题分析及解决1.三个污染的外植体，两个是叶片内延至周围。
月季植物组培方案
月季组织培养方案1供试材料来源:本实验材料取自盆栽的丰花月季,剪取腋芽尚未萌发的枝条,去除茎段两端各2毫米，选芽以茎段中芽为最好。
2技术路线:外植体选取——初代培养——增值培养——生根培养——训化3方法步骤:（1）外植体的剪取和消毒程序的筛选: 取无菌苗叶片切成0.5cm×0.5cm的小块，叶柄，茎段切成小段。
外植体很小时，有利于培养脱毒的植株(对月季的杉树坏疽环斑病毒可通过茎尖培养的方式达到脱毒的目的，如果单纯为了快速繁殖，可用大的茎尖或茎段进行离体培养，这时外植体的大小决定了茎尖的成活比例。
一般说外植体愈大，成活率愈高，成苗时间愈短。
外植体的大小同时影响外植体自身的发育和月季组培苗茎的增殖，外植体的长度在9.0-10.0mm，直径在3.0-3.5mm范围时(茎的增殖和发育是最好的）.消毒:接种材料为当年抽生侧芽饱满的幼嫩茎段，自来水冲洗10-20min;75%或70%乙醇表面消毒15s。
用无菌水冲洗3次。
2%NaClO灭菌5—10min。
然后用无菌水冲洗3次。
（2）初代培养基的筛选:诱导培养基以MS为基本培养基，附加适量的细胞分裂素6一苄氨基嘌呤(6-BA)和生长素萘乙酸(NAA)。
NAA增加至0.1mg,L时，6一BA浓度的高与低已对增殖系数不产生明显影响。
最适的侧芽诱导培养基为MS + 6一B A 0.5,3.0 mg,L + NAA 0.0l,1(0mg,L，且培养基中添加蔗糖有增加丛生芽数量的作用。
（3）增殖培养基的筛选:诱导培养基上已经萌发的嫩芽转入附加6一BA、NAA等激素的MS培养基中，进行增殖继代。
KT，IAA等激素作用效果较差，协同作用不明显。
低浓度的6 一BA有利于不定芽的增殖，浓度过高则抑制不定芽增殖，适量NAA有利于芽和叶生长，但浓度过高诱导产生大量愈伤组织，不利于侧芽的直接分化和生长。
在NAA浓度相同BA 浓度不同的培养基中，随BA浓度的升高，芽苗的增殖系数也相应提高。
月季分生组织培养技术要点
外植体清洗干净后"放在消毒过的超净工作 台上"用无菌的脱脂棉擦拭 & 遍外植体表面&
+*酒精消毒 & 分钟" 用无菌水冲洗 & 次* 有效氯 !,的 -./01 溶液消毒 !" 分钟"用无菌水 冲洗 # 次% 最后加入 "$& )234 5( 浸泡 !" 分钟% 接种及培养条件
刀用酒精灯灼烧灭菌"解剖刀)镊子的先端 在 %*,的酒精中蘸一下"再用酒精灯灼烧灭菌" 置于刀架上冷却"待用% 用镊子夹住蘸有酒精的 脱脂棉点着"对接种盘里外进行灼烧灭菌"灭菌 好的接种盘放上滤纸%
关键词 紫斑牡丹繁育嫁接砧木
紫 斑 牡 丹 又 名 甘 肃 牡 丹 西 北 牡 丹 紫 斑 牡 丹品种群是中国第二大牡丹品种群 仅次于中 原牡丹品种群 紫斑牡丹是我国特有的一级保
!基 金 资 助 "#甘 肃 省 农 业 科 学 院 重 点 研 发 计 划 项 目 $甘肃紫斑牡丹品种资源收集% 评价及种质创新& '!"!0=883!%()
从培养室移到温室的瓶苗在移栽前必须进 行驯化需 0)!" 天 先用遮阴网把瓶苗全部盖 住白天温度 !#!9 晚上 !"!# 湿度 9"* 左右使瓶苗逐渐适应温室环境 经过一段时间 的锻炼幼苗叶片由嫩绿色变深绿色萌发新叶 茎变粗壮幼苗整体长高并生出新根表明幼苗 已经适应外界环境 选择阴天或晴天早上移栽
月季组织培养培养基配方
月季组织培养培养基配方1. 介绍月季是一种常见的花卉植物，广泛应用于观赏园艺领域。
在月季繁殖和培养过程中，培养基配方起着至关重要的作用。
本文将深入探讨月季组织培养培养基配方的要点和方法。
2. 月季组织培养的意义月季组织培养是繁殖月季的一种重要方法。
通过无菌培养、组织再生和快速繁殖，可以大量繁殖优良品种，并用于育种和病毒检测等研究。
因此，合理的培养基配方对月季组织培养的成功至关重要。
3. 月季组织培养培养基的成分月季组织培养培养基的成分包括植物激素、糖类、无机盐和其他添加剂。
3.1 植物激素植物激素在月季组织培养中起到调节生长和分化的作用。
常用的激素包括生长素、细胞分裂素和愈伤组织激素。
它们的浓度和比例对培养基的效果有着重要影响。
3.2 糖类糖类是提供能量和碳源的重要成分。
常用的糖类包括蔗糖、葡萄糖和半乳糖。
不同的月季品种和培养阶段对糖类的需求不同，需要根据具体情况进行调整。
3.3 无机盐无机盐是提供植物所需微量元素的重要来源。
常用的无机盐包括氮、磷、钾等。
它们的浓度和比例需要根据培养阶段的需求进行合理调整。
3.4 其他添加剂除了植物激素、糖类和无机盐外，还可以添加一些其他的添加剂来增强培养基的效果，例如维生素、抗生素、染料等。
这些添加剂的使用需要根据具体实验目的和需求来决定。
4. 月季组织培养培养基配方的优化方法优化月季组织培养培养基配方可以提高培养成功率和培养体系的稳定性。
4.1 脱菌方法月季组织培养需要在无菌条件下进行，因此脱菌方法是非常重要的。
常用的脱菌方法包括酒精消毒、高压蒸汽灭菌和紫外线照射等。
不同的方法有各自的特点和适用范围，需要根据实际情况选择合适的脱菌方法。
4.2 成分优化成分优化是指根据具体需求对培养基的成分进行调整和优化。
通过改变植物激素、糖类和无机盐的浓度和比例，可以提高培养基的适用性和培养效果。
4.3 pH值调节月季对培养基的pH值敏感，过高或过低的pH值都会影响生长和分化。
月季植物组织培养
月季植物组织培养月季介绍月季为常绿有刺灌木，或呈蔓状与攀援状。
常绿或落叶灌木，直立，茎为棕色有一点绿，具有钩刺或无刺，但也有几乎无刺的。
小枝绿色，叶为墨绿色，多数羽状复叶，宽卵形或卵状长圆形，长 2.5-6厘米，先端渐尖，具尖齿，叶缘有锯齿，两面无毛，光滑；托叶与叶柄合生，全缘或具腺齿，顶端分离为耳状。
花朵常簇生，稀单生，花色甚多，色泽各异，径4-5厘米，多为重瓣也有单瓣者；萼片尾状长尖，边缘有羽状裂片；花柱分离，伸出萼筒口外，与雄蕊等长；每子房1胚珠。
果卵球形或梨形，长1-2厘米，萼片脱落。
花期4--10月。
大多数是完全花，或者是两性花。
有花中皇后的美称。
现为天津市的市花，还是中国十大名花.实验原理植物的组织培养广义又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织.器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
狭义是指组培指用植物各部分组织，如形成层.薄壁组织.叶肉组织.胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。
实验材料及用具实验材料：月季实验试剂：MS母液70％酒精氯化汞0.1 mol/L NaOH与0.1 mol/L HCl IAA 2,4-D实验器具：广口瓶棕色瓶锥形瓶剪刀镊子酒精灯紫外灯实验步骤：培养基的配制1 称取6.5g～12g琼脂，先用蒸馏水置1000ml搪瓷杯浸泡2小时后充分洗去杂质。
弃去浸液用无离子水再洗1～2次，并加入500ml无离子水在电炉上溶化。
边搅拌边溶化，直至完全溶化备用。
2 另取蔗糖30g于上述溶液中搅拌完全溶解备用。
3 另按MS培养基用量量取无机大量微量元素及有机成分的母液于一烧杯中，并完全倒入②液中搅拌溶解混匀备用。
4 按目的要求用取样器加入各种激素并搅拌混匀，加稀碱或稀释酸调pH值应比目的要求的pH值稍高0.1～0.2。
定溶1000ml。
《月季组织培养》课件
组织处理和培养基制备
2
详细讲解每个步骤的操作及注意事项。
3
操作和注意事项
指导实验者在每个步骤中的具体操作， 并提醒可能出现的注意事项。
实验结Байду номын сангаас与分析
分享月季组织培养的实验结果，并分析结果的意义和影响。
实验应用
繁殖与育种
探究月季组织培养在月季繁殖与育种方面的应用。
药物与生物活性物质生产
探讨月季组织培养在药物与生物活性物质生产方面 的应用。
结语
总结月季组织培养的重要性及应用前景，并展望未来研究方向和应用前景。
参考文献
列出进行本研究所用到的参考文献列表。
《月季组织培养》PPT课 件
欢迎阅览《月季组织培养》的PPT课件。本课件将介绍月季组织培养的概述、 实验步骤、实验结果与分析、实验应用、结论以及参考文献。
概述
背景和意义
介绍进行月季组织培养的原因和重要性。
应用和前景
探讨月季组织培养在相关领域的应用及未来发 展的前景。
实验步骤
1
材料准备
介绍进行月季组织培养所需的材料。
月季组织培养培养基配方
月季组织培养培养基配方月季组织培养是一种无性繁殖技术，可以通过组织培养的方式获得大量的相同基因型的植株。
而培养基则是月季组织培养中不可或缺的一部分，它提供了植物生长所需的营养和生长因子。
本文将介绍月季组织培养中常用的培养基配方。
一、基础培养基1. MS 培养基MS 培养基是由 Murashige 和 Skoog 在 1962 年开发出来的一种广泛使用的无机盐类和生长因子混合物。
这种培养基含有氮、磷、钾等元素以及多种微量元素和生长因子，可以促进植物体外生长。
对于月季来说，MS 培养基是最常用的一种。
2. B5 培养基B5 培养基是 Gamborg 等人在 1968 年开发出来的另一种无机盐类和生长因子混合物。
与 MS 培养基相比，B5 培养基中含有更高浓度的硝酸盐和钙离子，适合于某些需要高硝酸盐和钙离子的植物生长。
二、添加剂1. 植物生长素植物生长素是一种植物内源性激素，可以促进细胞分裂和伸展。
在月季组织培养中，常用的植物生长素包括吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）和半胱氨酸（2,4-D）等。
它们可以促进月季愈伤组织的形成和分化。
2. 细胞分裂素细胞分裂素是一种植物内源性激素，可以促进细胞分裂。
在月季组织培养中，常用的细胞分裂素包括腺苷酸（BA）、基因催化剂（KT）等。
它们可以促进月季愈伤组织的增殖。
3. 抗生素抗生素是一种可以抑制或杀死微生物的化合物。
在月季组织培养中，常用的抗生素包括青霉素、链霉素、卡那霉素等。
它们可以防止由于污染而引起的愈伤组织感染。
三、常用的月季组织培养基配方1. MS 培养基配方成分每升MS 盐类 4.43 g蔗糖 30 g吲哚乙酸（IAA） 0.1 mg腺苷酸（BA） 0.5 mg琼脂 7 gpH 值 5.82. B5 培养基配方成分每升B5 盐类 4.3 g蔗糖 30 g吲哚乙酸（IAA） 0.1 mg腺苷酸（BA） 0.5 mg琼脂 7 gpH 值 5.8以上两种培养基配方仅供参考，不同的月季品种和不同的实验目的需要不同的培养基配方。
月季如何组织培养
月季如何组织培养月季属蔷薇科蔷薇属多年生草本植物，每年多次开花，而且香味怡人，在观赏植物中地位很高，分布极广，适应性强，栽培容易，使得月季无愧于“花中皇后”之美誉，随着组织培养技术的应用，成功培育了大量优质月季组培苗，那月季如何组织培养呢?以下是小编为你整理的月季组织培养技术，希望能帮到你。
无菌培养的建立(1)选条从中国一级科研机构引进6个月季优良品种，分别是“红双喜”、“白雪山”、“彩云”、“和平”、“皇冠”、“金丝鸟”。
选取生长健壮的当年生枝条，用饱满而未萌发的侧芽作为外植体。
以枝条中段芽最好，因为接种后，中段芽第5天左右就能萌发，而基部和梢部的芽往往迟至15天才萌发。
(2)培养基的配制整个培养过程都可用MS培养基，诱导芽萌发所加的植物激素只需要BA一种即可，每升用0.3～1.Omg，6个品种均适用，只是萌发迟早有些差别。
(3)清洗外植体采回的枝条切去叶，再剥去附在茎上的叶柄及皮刺，先整段用洗手刷沾浓洗衣粉水仔细刷洗，再用自来水冲洗，毛巾擦干，放置在小木板上，用利刀切成2～3厘米一段，每段至少一个侧芽，装入消毒过的培养皿，放在超净工作台上，打开紫外灯，做表面灭菌30分钟。
(4)消毒与接种在超净工作台上，用饱和漂白粉上清液作表面灭菌25～30分钟，灭菌时间快到时，即倾去灭菌溶液，用无菌水涮洗数次，无菌纱布吸干茎段外表水分，按无菌操作要求，接种到小试管里，从芽萌发到芽长到1厘米左右需要2～3周。
(5)培养培养温度21℃最好，最高不超过25℃，有昼夜温差，光照10～12小时/天，光强800～1200LX。
继代增殖(1)将上述无菌芽从原茎段上切下，转接到MS+BA1-2+1AA0.1-0.3或MS+BA1-2+NAA0.01-0.1的培养基上，促使嫩茎长出更多的侧芽，原茎段弃去。
继代增殖培养基每升用蔗糖30克。
(2)5周后，“红双喜”增殖了3.5倍，“白雪山”4.1倍，“和平”、“彩云”5～6倍，“皇冠”、“金丝鸟”达15倍。
月季植物组培方案
月季植物组培方案月季是一种常见的观赏花卉，其花朵色彩丰富，花期长，是花坛、花境、花笼和花圃中常见的植物。
然而，传统的繁育方法存在效率低下、时间长、容易受到病害感染等问题。
因此，利用组织培养技术进行月季植物的繁育具有十分重要的意义。
一、材料准备1.可供选择的月季植株，选择健康无病害的茎干作为外植体。
2.组培基质：可以选择MS培养基，配制麦芽糖浓度为30g/L，琼脂浓度为7g/L。
3.消毒液：例如75%酒精、10%双氧水、0.1%漂白粉。
4.无菌器皿：例如培养瓶、试管、平皿等。
5.显微镜及显微镜片：用于观察、检验组培过程中的细胞分裂情况。
6.整枝针和剪刀：用于取样。
二、外植体消毒处理1.将外植体的茎干从月季植株上剪下。
2.将茎干进行无菌处理，先用70%酒精擦拭，再浸泡于10%双氧水中10-15分钟，最后用无菌水洗净。
3. 将处理后的茎干切成0.5-1.0cm长的段，并观察切割的部位是否出现霉变，如有则再次进行消毒处理。
三、组培基质配制1.取适量MS培养基粉末，按照说明书配制，加入适量麦芽糖并充分溶解。
2.将溶解的培养基过滤灭菌，滤液加热至煮沸并充分搅拌，再加入适量琼脂并搅拌均匀。
3.将配制好的培养基灌装到无菌器皿中，如培养瓶、试管或平皿。
四、组培过程1.将处理好的茎段放置于准备好的无菌器皿中，使其埋入培养基中。
2.将无菌器皿密封，并放入无菌环境，通常应保持在25-28℃、光周期为16/8小时（光照/黑暗）的条件下，以促进茎段的快速生长。
3.在培养过程中，应定期观察外植体的生长情况，如出现异常或病害感染，应及时更换培养基或采取其他措施进行处理。
4.经过3-4周后，可观察到茎段的侧芽开始发生增殖，此时外植体可进行移植。
五、移植1.在移植之前，应先准备好新的无菌器皿和培养基。
2.将茎段取出，用消毒液进行消毒处理，然后将其移植到新的培养基中。
3.将培养皿重新密封，并放回无菌环境中继续培养。
4.经过数周后，可将外植体移植到普通培养基中，进行生根和生长。
《月季组织培养》课件
月季组织培养在园艺产业中的应用前景
01
02
03
花卉品种保护
通过组织培养技术，保护 和繁殖珍稀、濒危月季品 种，维护生物多样性。
花卉生产
利用组织培养技术快速繁 殖月季，满足市场需求， 提高花卉产业的产量和效 益。
花卉品种改良
通过组织培养技术，改良 月季品种的性状，提高其 观赏价值和适应性。
月季组织培养对花卉产业的影响与贡献
抗病育种提供了新的思路和方法。
案例三：月季繁殖效率的组织培养
总结词
通过组织培养技术，提高月季的繁殖效率，缩短繁殖 周期。
详细描述
繁殖效率是月季生产中的重要指标之一，通过组织培 养技术，可以显著提高月季的繁殖效率。在实验中， 研究人员采用适当的培养基和激素组合，优化了月季 外植体的培养条件，提高了增殖速度和生根率。同时 ，研究人员还探索了小型化培养容器和快速繁殖技术 ，以进一步缩短繁殖周期和提高繁殖效率。这一技术 为月季的快速繁育和生产提供了有力支持。
01
设定适宜的培养温度、光照、湿度等条件，以满足月季组织生 长的需求。
02
制备适合月季组织生长的培养基，添加适量的营养物质和激素
。
培养基的pH值要调整到适宜的范围，以保证组织的正常生长。
03
细胞分裂与增殖
1
在适宜的培养条件下，月季组织开始分裂和增殖 。
2
定期观察组织的生长情况，记录生长数据，以便 及时调整培养条件。
推动花卉产业技术创新
月季组织培养技术的发展将促进花卉产业的技 术创新和进步。
增加花卉产业的附加值
通过组织培养技术，开发新品种和特色产品， 提高花卉产业的附加值。
促进花卉产业的可持续发展
月季组织培养技术的应用将有助于实现花卉产业的可持续发展，提高产业竞争 力。
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月季组织培养技术
月季组织培养技术一、培养意义?月季属蔷薇科蔷薇属多年生草本植物，每年多次开花，而且香味怡人，在观赏植物中地位很高。
另一大优点是分布极广，适应性强，栽培容易。
使得月季无愧于“花中皇后”之美誉，古今中外文人墨客咏叹月季的佳作，不胜枚举。
多伦县就是一个月季之乡，但品种比较单一，更新换代缓慢。
随着组织培养技术的应用，多伦县农业技术推广中心于2000年11月引进组织培养全套设备，成功培育了大量优质月季组培苗，填补了市场空白，对加速新老品种更新换代，迅速普及名优新品种起到了重要作用。
?二、培养程序?（一）无菌培养的建立?（1）选条?从中国科学院、中国农科院等一级科研机构引进6个月季优良品种，分别是“红双喜”、“白雪山”、“彩云”、“和平”、“皇冠”、“金丝鸟”。
选取生长健壮的当年生枝条，用饱满而未萌发的侧芽作为外植体。
以枝条中段芽最好，因为接种后，中段芽第5天左右就能萌发，而基部和梢部的芽往往迟至15天才萌发。
?（2）培养基的配制?整个培养过程都可用ms培养基，诱导芽萌发所加的植物激素只需要ba一种即可，每升用0.3～1.omg，6个品种均适用，只是萌发迟早有些差别。
?（3）清洗外植体?采回的枝条切去叶，再剥去附在茎上的叶柄及皮刺，先整段用洗手刷沾浓洗衣粉水仔细刷洗，再用自来水冲洗，毛巾擦干，放置在小木板上，用利刀切成2～3厘米一段，每段至少一个侧芽，装入消毒过的培养皿，放在超净工作台上，打开紫外灯，做表面灭菌30分钟。
?（4）消毒与接种?在超净工作台上，用饱和漂白粉上清液作表面灭菌25～30分钟，灭菌时间快到时，即倾去灭菌溶液，用无菌水涮洗数次，无菌纱布吸干茎段外表水分，按无菌操作要求，接种到小试管里，从芽萌发到芽
长到1厘米左右需要2～3周。
?（5）培养?培养温度21℃最好，最高不超过25℃，有昼夜温差，光照10～12小时/天，光强800～1200lx。
?（二）继代增殖?（1）将上述无菌芽从原茎段上切下，转接到ms+ba1-2+1aa0.1-0.3或ms+ba1-2+naa0.01-0.1的培养基上，促使嫩茎长出更多的侧芽，原茎段弃去。
继代增殖培养基每升用蔗糖30克。
?（2）5周后，“红双喜”增殖了3.5倍，“白雪山”4.1倍，“和平”、“彩云”5～6倍，“皇冠”、“金丝鸟”达15倍。
?（3）每5～6周做一次继代增殖，继代前先制备好培养基，然后在无菌操作条件下，将月季嫩茎切成1～2节一段，投入新鲜的增殖培养基上，月季小苗就会按几何级数增殖起来，也可以将大苗转入到生根培养基上。
?（4）壮苗培养?
①对增殖倍率高的品种，所增殖的嫩茎很细弱，要求进行一次壮苗培养，以取得适合生根和今后移栽的苗子。
壮苗培养的培养基为：ms+ba0.3-0.5+naa0.01-0.1，如果并不特别强调繁殖速度，也可以一直使用这种培养基，以壮苗为主，增殖为辅，使增殖与壮苗合为一步。
②培养条件。
光照10～12小时/天，光强800～1800lx，温度20～23℃，最高24～26℃。
?（5）生根与移栽?月季嫩芽生长到一定长度时，就应切割下来，转入生根培养基。
切下的嫩芽长度以2～3厘米为宜，让幼苗基部伤口愈合，已长出根原基，幼根尚未长出，即出瓶种植。
这种方法不会损伤根系，移栽速度快，成活率高。
?（a）以ms培养基为基础，配方为ms+naa0.5，此外加入300mg/l活性炭，30g/l蔗糖。
插植2厘米以上无根嫩茎，经2周左右出现根原基，幼根尚未长出即出瓶种植。
?（b）移栽。
幼苗出瓶后，先洗去沾附的琼脂培养基，再种植到粗沙+园田土（1：3）介质中，总的原则是疏松透气，有一定的保水、保肥能力。
种植密度2～3厘米×4～6厘米/株，移栽完毕浇透水，并用0.1％的百菌清、多菌灵或甲基托布津等喷雾保苗，能显
著提高成活率。
?（c）移栽后管理。
移栽后需保持相对湿度85％以上，在温室、拱棚中移栽，覆好遮荫网，一般成活率都比较高，并且注意通风和温度管理。
4～6周后，须做好第二次移植，通常植入5厘米×9厘米的塑料杯中，每杯种1苗，再经4～6周，地上、地下部分都充分生长，有些植株还能开花，此时即可出售，或上盆种植，利于观赏。