血型鉴定、不规则抗体筛查及交叉配血步骤
血型鉴定与交叉配血
根据红细胞膜上有无A抗原或B抗原， 将血型分为A型、B型、AB型及O型四 种。通常利用红细胞凝集试验，通过 正定型和反定型鉴定ABO血型。
正定型是用已知抗A和抗B分型血清来测 定红细胞上有无相应的A抗原或B抗原； 反定型是用已知A细胞和B细胞来测定血 清中有无相应的抗A或抗B。
血型抗原
抗B A型RBC B型RBC O型RBC
-
-+
+
-
结果 O
+
--
+
-
A
-
++
--B来自++-
-
-
AB
Rh血型鉴定
一、试剂 1、IgM抗-D试剂血清 2、待检红细胞悬液
二、操作 1、取12×75mm干净小试管1支 2、滴入IgM抗-D试剂血清1~2滴 3、滴入红细胞悬液 4、混匀后3400转/分离心15秒 5、轻轻摇动试管，观察结果 6、凝集为阳性，不凝集为阴性
红细胞血型抗原： 已确定的有29个系统、200多种抗原
其中必查血型抗原： ABO抗原和RhD抗原
血型抗体
常见的血型抗体分子大多属于IgM或IgG两类
*五类免疫球蛋白具有相似的单体结构 *两条轻链(L链)和两条重链(H链)组成的四肽 链 (H2L2)---单体结构
1、 IgG 抗体
分子较小，通常以单体形式存在。多经妊娠 或输血后免疫产生。在盐水介质中只能致敏相应 抗原的红细胞，而不能使之凝集，所以又称为不 完全抗体。必须通过特定的方法（如抗人球蛋白） 使致敏红细胞发生凝集。
2. 各加LIM溶液0.7m1 ，混合均匀后，再各加 Polybrene溶液1滴，并混合均匀，置室温1分钟。
3．普通离心机1000g离心15秒，然后把上清液 倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。
稀有血型、不规则抗体阳性、及配血不相合等及时报告程序
稀有血型、不规则抗体阳性、及配血不相
合等及时报告程序
为确保临床用血的安全和合理性，本文制定了稀有血型、不规则抗体阳性及配血不相符等情况的报告程序。
在进行交叉配血实验时，输血科人员应按照操作规程认真完成实验，并由另一人进行复核后签字发出血液。
如果发现稀有血型的输血需求，输血科应立即通知用血临床科室，并在血液储备不足的情况下暂停手术。
同时，输血科人员应上报输血科主任，与市中心血站联系，确保血液的供应。
对于紧急的稀有血型输血，输血科人员应立即上报输血科主任，输血科主任应与血站联系，确保急症抢救用血并上报医务科。
对于不规则抗体阳性及配血不相合等情况，输血科人员应重新做不规则抗体及交叉配合实验并复查血型，必要时更换试剂，重做试验。
如果仍然不相符，应上报输血科主任，输血科主任应上报医务科和主管院长。
临床血型复查、不规则抗体筛查、交叉配血实验等红细胞输注前检验要点
临床血型复查、不规则抗体筛查、交叉配血实验等红细胞输注前检验要点临床治疗当中，输血治疗属于移植细胞治疗，红细胞作为运输氧气的重要载体，是治疗或者辅助治疗的重要手段，但不适当的血液制品的输注将造成不良后果，严重者可以危及生命，因此应该按照相关程序对受血者和供血者的血液进行准确的输血前血型血清学检查才能保证受血者的输血安全。
血型复查红细胞上的抗原纷繁复杂，但是具有重大临床意义的，也是现在临床上运用的是ABO 血型系统和Rh 血型系统，通常所有住院患者在一开始会常规查一个血型定性，就包括ABO 系统和Rh 系统。
大型医院一般微柱凝胶法，而在输血前也需要再进行血型复查，包括正定型（用抗-A 及抗-B 的试剂与被检测血细胞反应，检测红细胞表面是否存在A 抗原B 抗原），和反定型（用标准A 细胞和B 细胞与被检血清反应，检测血清中是否含有抗体），此时复查多采用试管法或者玻璃法，由于ABO 系统的天然抗体多属于IgM 型抗体，属于温抗体，盐水介质下就可以看见凝集，一般不需要离心即可看出结果，当受血者的抗体较弱时可以离心观察，临床上反定型防止假阴性均采用盐水介质法离心后观察。
不规则抗体筛查受血者有输血史、妊娠史或者短期内需要大量输血时应按规定进行不规则抗体的筛查和鉴定，以便及时发现有临床意义的不规则抗体从而避免输血反应的发生，不规则抗体指除了抗-A 和抗-B 抗体以外的抗体，分为自身抗体和同种异体抗体。
自身抗体是指受血者体内产生的抗体，针对自身红细胞的抗原，这种抗体不仅可以和自身红细胞反应还可以和大多数红细胞反应，而同种异体抗体是指多次输血或者妊娠刺激机体产生的针对同种异基因的红细胞的抗体。
不规则抗体按照抗体的类型可以分为IgM 和IgG 类，根据次分类可以选择不同的筛选方法，主要有盐水介质法、聚凝胺法、抗球蛋白实验，以及微柱凝胶法等。
交叉配血实验在完成前个试验后，复查收到的受血者血样的ABO、Rh 血型以及不规则抗体筛查实验，进行最后一步，交叉配血实验，主要是检查受血者血清中有无破坏供者的红细胞的抗体，使受血者和供血者的血液间没有可测的不相配合的抗原、抗体成分，实验包括以下几项：1、主侧配血：受血者的血清和供血者的血细胞反应，检测受血者体内是否存在针对供者红细胞的抗体。
血型及交叉合血操作规程
血型及交叉合血操作规程一、引言作为医疗机构中常见的操作流程之一，血型及交叉合血是确保输血安全的重要环节。
本文将介绍血型和交叉配血的基本概念、操作步骤以及注意事项，以提供规范的操作指南。
二、血型的基本概念血型是指个体红细胞膜上存在的抗原和抗体的组合情况，分为A、B、AB和O四种类型。
在血型鉴定中，需要使用抗A和抗B两种血清对被测血液进行试验，从而确定其血型类型。
此外，还需要测试被测血液中是否存在抗D抗体，以判断其Rh阴性或Rh阳性。
三、交叉配血的基本概念交叉配血是在输血前进行的一项重要试验，旨在检测受血者的血清中是否存在与供血者红细胞的抗体相对应的抗原，以避免输血反应的发生。
具体操作如下：1. 取受血者的血清和供血者的红细胞，将它们分别置于两个试管中。
2. 依次加入适量混合胶体试验红细胞悬液和抗人球蛋白试剂，轻轻振荡混合。
3. 观察反应是否出现凝集、增浊或溶解等现象。
4. 凝集或增浊反应表示交叉配血不合格，需停止输血操作；溶解反应则表示血型和抗体基本匹配，可以进行输血。
四、血型及交叉合血操作规程以下为血型及交叉合血操作的具体步骤，操作人员应根据实际情况进行：1. 准备工作a. 确认受血者的基本信息，包括姓名、住院号、血型等。
b. 根据受血者血型，选择相应的供血者。
c. 根据病情和输血需求，估计所需输血量。
d. 消毒操作台面和操作器具。
2. 操作步骤a. 将受血者的血液样本采集到干燥无菌试管中，标明受血者信息。
b. 将受血者的样本送至血库，进行血型鉴定。
c. 根据受血者的血型和抗体情况，在血库选择适当的供血者。
d. 从血库获取供血者的血液样本。
e. 将供血者样本标记并送至血型试验室进行交叉试验。
f. 根据交叉试验结果判断是否合适进行输血操作。
g. 如满足输血条件，按照医嘱进行输血操作。
五、注意事项1. 操作人员应进行严格的洗手和穿戴手套等防护措施，以防交叉感染。
2. 每一步操作都需要仔细核对患者信息，确保输血操作正确。
实验7ABO血型鉴定及交叉配血实验_基础生物学实验(安徽大学研究生复试用,生物 生命科学)
实验七ABO血型鉴定及交叉配血实验一、实验目的通过鉴定实验和配血实验来学习、掌握人类ABO血型的原理和方法。
二、实验原理血型是特指血细胞膜表面抗原的类型。
ABO血型系统是一类常用的血液分型体系。
在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。
A抗原加抗A抗体或B抗原加抗B抗体，则产生凝集现象。
血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清（含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无A 或/和B抗原。
在ABO血型系统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、B、AB、O四型(表7-1)。
统不同，人群中Rh血型的不匹配非常罕见，尤其在黄种人中，Rh(+)型占到99.7%,而Rh(-)型还不到0.3%。
所以在医疗输血中，通常只考虑献血者和输血者之间ABO血型是否匹配。
ABO血型在人群中的分布，存在着地理环境及民族、种族的差异，在我国汉族人群中，各血型的比例由多到少依次是O(34.11%)﹥ B(28.98%)﹥A(28.29%)﹥AB(8.69%)。
交叉配血是将受血者的红细胞与血清分别同供血者的血清与红细胞混合，观察有无凝集现象。
输血时，主要考虑供血者的红细胞不要被受血者的血清所凝集，其次才考虑受血者的红细胞不被供血者的血清所凝集。
前者叫交叉配血的主侧，后者称为交叉配血的次侧。
只有主侧和次侧均无凝集，称为“配血相合”。
如果主侧凝集，称为“配血不合”或“配血禁忌”，绝对不能输血；如果主侧不凝集，而次侧凝集，可以认为“基本相合”，但输血要特别谨慎，不宜过快过多，密切注视有无输血反应。
三、实验材料人外周血四、实验器材与试剂(一)器材采血针、尖头滴管、载玻片、1.5ml Eppendorf管、75%酒精棉球、消毒干棉球和记号笔。
(二)仪器显微镜、离心机。
(三)试剂标准A血清、标准B血清、生理盐水、碘酒。
五、实验操作（一）ABO血型鉴定1．用记号笔在载玻片两端分别作好标记A、B。
血型鉴定、交叉配血、不规则抗体筛查标本的采集
血型鉴定、交叉配血、不规则抗体筛查标本的采集1患者准备及原始标本识别1.1患者血液采集前，应避免跑步、骑自行车、爬楼梯等剧烈的运动，要求患者休息 15 分钟后进行采血。
冬季采血时应保持血液循环通畅；1.2.静脉血标本由临床医护人员采集，遵照医嘱准备好标本采集前所用的容器以及消毒器材、一次性注射器、标本条形码、检验申请单或输血申请单等备用。
首先确认患者姓名、住院号和血型，并将带有姓名、住院号、床位、检测项目的标本条形码贴于标本采血真空试管上；1.3.采血前应向患者作适当解释，以消除疑虑和恐惧。
如遇患者采血后发生晕厥，可让患者平卧，通常休息片刻即可恢复。
必要时可嗅芳香氨酊，针刺或指掐人中、合谷等穴位； 1.4.认真核对医嘱及患者信息，严格执行查对制度，询问患者姓名而不是询问你是 XX;. 采血前必须询问病人或病人家属，核对腕带，对受检者的身份信息进行确认，采血完成后必须再次核对病人与标本的条码信息是否一致。
1.5.标本条形码上的条形码是原始标本惟一标识。
1.6 非急诊输血时，ABO、RHD 血型鉴定和交叉配血标本不允许同一时间采集完成。
2 临床医生的指导2.1.临床医生必须对患者讲清楚血型鉴定、交叉配血检测的目的、采血时间(住院患者应在早晨卧床时取血；其他人员应最好在空腹时采血，急诊除外)及相关注意事项；2.2.临床医生应向患者讲清楚采集血液标本前，使用青霉素、非那西丁、氨基比林、磺胺、甲基多巴、肝素、右旋糖苷等药物可能会影响检验结果；临床医生确认患者近期使用上述药物，应在申请单中注明或直接通知检验科工作人员，以利于实验结果的正确判断。
3申请单的填写、处理及保存3.1.临床医生在开具输血申请单时，应采用计算机程序进行申请，填写完整，包括患者姓名、性别、年龄、申请科室、病人住院号、申请日期、标本类型、申请目的等。
输血申请单还需要填写患者输血前检测项目结果，包括 ABO 及RhD 血型、血红蛋白含量、白细胞计数、血小板计数、凝血酶原时间、凝血酶时间、部分活化凝血酶原时间、ALT、HBsAg 抗-HCV、抗HIV、梅毒实验结果；急诊申请输血时可写待定。
不规则抗体检测操作规程14-22
红细胞不规则抗体检测操作规程1．0 目的规范红细胞血型抗体筛选、鉴定操作，保证临床用血的安全性及有效性。
2．0 适用范围适用于输血科（血库）抗体筛选血标本、疑难血型标本及疑难配血标本。
3．0 材料抗球蛋白试剂、筛选细胞、患者血标本、生理盐水、小试管、滴管。
4．0 设备普通离心机、血型血清专用离心机、电热恒温水浴箱、显微镜。
5．0 抗体筛选操作步骤5．1 取试管3支，分别标记Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，各加入患者血清2滴，再分别加入Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号筛选细胞2滴。
5．2 混匀，37℃孵育1h。
5．3 1300g离心15s。
5．4 轻轻悬浮细胞，肉眼观察凝集结果并记录。
若肉眼不见凝集，以显微镜检查。
5．5 对没有凝集的试管，用盐水充分洗涤3次。
5．6 最后一次洗涤后，离心去上清，将试管边缘盐水用滤纸吸干。
5．7 按试剂说明书加最适释度抗球蛋白试剂1滴，充分混合。
5．8 1300g离心15s。
轻轻悬浮细胞，肉眼观察凝集反应，记录结果。
6．0 抗体鉴定步骤6．1 抗体筛选阳性，应作抗体鉴定试验以确定其特异性。
6．2 依据谱细胞数量的多少（一般由8～16个单人份的已知血型表型的O型红细胞组成）取相应数目的试管，分别标记序号，各加入患者血清2滴，再分别加入谱细胞2滴。
6．3 混匀，37℃孵育1h。
6．4 1300g离心15s。
6．5 轻轻悬浮细胞，肉眼观察凝集结果并记录。
若肉眼不见凝集，以显微镜检查。
6．6 对没有凝集的试管，用盐水充分洗涤3次。
6．7 最后一次洗涤后，离心去上清，将试管边缘盐水用滤纸吸干。
6．8 按试剂说明书加最适稀释度抗球蛋白试剂1滴，充分混合。
6．9 1300g离心15s。
轻轻悬浮细胞，肉眼观察凝集反应，记录结果。
7．0 注意事项7．1 按《临床输血技术规范》第十七条要求，必须对交叉配血不合时，对有输血史、妊娠史或短期内接受多次输血者进行抗体筛选试验。
7．2 抗体筛选有利于早期发现和确认具有临床意义的抗体，并可在配血前有足够的时间来选择缺乏相应抗原的相配合的血液，避免由于寻找不到相合的血液而造成患者不能及时输血。
血型鉴定、交叉配血操作规程
⾎型鉴定、交叉配⾎操作规程ABO、Rh-D⾎型鉴定操作规程1.⽬的：规范ABO、Rh-D检测的操作过程2. 标本采集：静脉采⾎2ml抗凝⾎,避免溶⾎试剂3. 试剂：长春博讯⽣物技术有限责任公司4.⽅法原理【原理】:标准⾎清中的完全抗体(lgM)抗A、抗B、和抗D能和红细胞表⾯相应的抗原在盐⽔介质中发⽣特异性的凝集反应。
根据红细胞凝聚类型可鉴别出A、B、O、AB四型和RHD阴性或阳性。
5. 操作:⼀、玻⽚法(⼀般只能做正定型)【正定型】:1、取⼀张玻⽚,⽤蜡笔或记号笔将其分为三等份,从左到右每⼀等份左上⾓标明A、B、D,2、对应加⼊抗A和抗B抗D标准⾎清⼀滴;3、分别加PC(患者10—15%红细胞悬液);4、⽤洁净⽵签将试剂和红细胞充分混匀,混合物约2cm2⼤⼩;5、轻轻地连续倾斜转动玻⽚2—5分钟,观察并记录; 【解释】:A端凝集为A型⾎;B端凝集为B型⾎;A、B 端均凝集则为AB型;A、B端均不凝集则为O型;D端凝集则为RH阳性者,⽆凝集则为RH阴性。
备注:玻⽚法可作为ABO⾎型初筛或复检;不适⽤于抗体鉴定和交叉配⾎;不适合检测ABO亚型。
⼆、试管法(盐⽔介质)【原理】:标准的A型和B型红细胞能和受检者⾎清(⾎浆)中相应的抗体发⽣特异性结合,形成⾁眼可见的凝集反应,从⽽可推断出受检者的⾎型。
【材料】:1、标准A型和B型红细胞悬液(浓度4%,商品有售,亦可⾃⾏新鲜配制);2、受试者⾎清或⾎清;3、洁净康⽒试管。
【正定型】:1、取⼆⽀洁净试管分别记上抗A和抗B;2、对应加⼊抗A和抗B⾎清1滴;3、分别加⼊病⼈红细胞悬液1滴(浓度为2%-5%);4、混匀,室温放置5分钟,1000rpm离⼼1分钟,取出观察结果【解释】:轻摇试管,检查是否凝集,抗A、抗B管均凝集,受试者为AB型⾎;抗A、抗B管均不凝集,则为O 型⾎;抗A管凝集则为A型⾎;抗B管凝集则为B型⾎。
【反定型】:1、取⼆⽀试管分别记上AC和BC;2、分别加⼊病⼈⾎清;3、对应加⼊A和B型试剂红细胞;4、混匀室温放置5分钟,1000rpm离⼼1分钟,取出观察结果;【解释】:⾸先检查上清液有⽆溶⾎,然后轻摇试管,检查是否凝集,A、B管均凝集受试者为O型⾎;A、B管均不凝集则为AB型⾎;A管凝集则为B型⾎;B管凝集则为A型⾎。
血库操作规范
血库操作规范一、配血必须做患者、献血员ABO血型正反定型、血型复检、不规则抗体筛查、实验前必须先做血型试剂质量验证，配血时做阴阳性对照和自身对照；二、血型试剂质量验证规范1.将A1、B、O型红细胞分别加入微柱凝胶卡抗A、抗B、抗D孔内；2.将A1、B、O型红细胞分别加入微柱凝胶卡Ac、Bc、空白对照孔内，然后再加入抗A1抗体、抗AB抗体、抗H 抗体；3.室温放置5分钟离心，结果均为4+凝集。
三、血型复检操作规范1.将患者和献血员0.8%的低离子介质红细胞悬液分别加入反定型血型鉴定卡中各一滴，再以此加入抗A1抗体、抗AB抗体、抗H 抗体各一滴；2.室温放置5分钟，离心后观察结果。
四、血型鉴定操作规范1.自身对照孔中加入患者红细胞悬液和血清各一滴，防止出现的冷凝集和自身凝集。
五、配血鉴定操作规范1.抗体筛查不做阴阳性对照，配血做阴阳性对照（抗体筛查卡和配血卡为同一批号卡），阴阳性对照红细胞分别使用I、II、III号不规则抗体筛查红细胞，阳性对照血清用IgG型抗RhD血型试剂，阳性对照血清用抗AB血型试剂；2. 自身对照为患者血清和红细胞悬液，献血员血清和红细胞悬液；六、收费以“U”计算，献血员的检测以条码计算，同一条码血型检测、血型复检、不规则抗体筛查一次，两个条码检测两次；七、意义说明1通过血型正反定型与血型复检，可以确定红细胞上的ABO抗原数量与质量，排除亚型的存在；2通过盐水自身对照、抗人球蛋白自身对照、和不规则抗体筛查，可以排除患者和献血员血清中针对自身和同种人群的不规则完全抗体和不完全抗体；3交叉配血用于检查血型鉴定和不规则抗体筛查是否正确，同时可以在紧急情况下进行不规则抗体阳性患者血样的盲配，节省患者抢救时间。
4.通过上述操作，从血库发出的血液绝对是安全可靠的。
实验三血型鉴定(交叉配血)
盐水介质法
原理及目的
交叉配血试验是指受血者血清加供血者红细胞悬液;供血 者血清加受血者红细胞悬液，同时进行凝集试验。前者称 主试验，后者称副试验。其目的是验证供者与受者ABO血 型鉴定是否正确，防范引起溶血性输血反应。此外，也可 检出ABO血型系统的不规则凝集素以及发现ABO系统以外 的其他血型抗体。
3.分别混匀，低速离心约2 分钟，轻轻摇匀，观察结果。 4.结果判定： 同型配血，主测、次测均不凝集，表示无配血禁忌，可以
输血； 异型配血时，主测无凝集，次测凝集，无溶血，可以输给 少量。输异型血时，如次测不凝集，不可以输血，应重新 复查血型或追查其原因。
患 者
献 血 者
交叉配血试验
主侧配血用患者血清与供试剂和器材生理盐水 小试管、尖嘴滴管、离心机、试管架、显微镜等
操作步骤
1.取受血者和供血者血液各2ml，注入一清洁干燥试管内， 按常规方法分离血清。同时留数滴滴加于含少量生理盐水 的小试管内，制成5％的红细胞生理盐水悬液。注意要分 别标明供血者与受血者的血液管、血清管、红细胞悬液管 的姓名。 2.另取清洁试管2支，标明主测和次测。主测：受血者血清 1 滴加供血者红细胞悬液1滴。次测：供血者血清1滴加受 血者红细胞悬液1滴。
主
者红细胞进行试验
侧
次
次测配血
侧
供血者血清与患
者红细胞进行试验
交叉配血的要求
主侧配血要求：
绝对不可以有凝集或溶血
凝
现象。
集
次测配血要求：
供血者血清加受血者红细
胞在允许范围内，可以有 凝集现象，但不可以有溶
不
血。
凝
集
交叉配血试验结果图例
无溶血 无凝集
疑难血型鉴定和疑难交叉配血
疑难血型鉴定与疑难交叉配血1、疑难血型鉴定疑难血型就是一种血型难以检定或判定（正反定型不一致）得现象,多由血型抗原减弱形成亚型、疾病原因引起抗体减弱或部分血型系统罕见表型等原因引起。
因此,疑难血型鉴定主要从弱抗原、弱抗体与特殊抗原或抗体检测角度出发，结合血型血清学与分子生物学研究方法对患者样本进行检测。
而对于不规则抗体筛查与鉴定，主要就是对抗体种类与特性进行研究，尤其就是利用吸收/放散试验对同时存在多种同种抗体或自身抗体进行分离鉴定，从而较为准确得分析患者血清抗体得特异性。
在工作中遇到此类情况时，应按照以下步骤进行分析与处理：(１)分析可能存在得原因先排除人为操作因素,再通过了解患者临床资料分析可能得原因，主要包括抗原类影响因素与抗体类影响因素，抗原类影响因素一般包括ABO亚型、血液病、骨髓移植等,抗体类影响因素一般包括不规则抗体、药物抗体、先天抗体缺失、丙种球蛋白过低、冷凝集素等。
（2）设计实验进行验证疑难血型鉴定流程见流程图1。
流程图1 疑难血型鉴定流程2014年１月，在工作中发现正反定型结果不符样本一例,经一系列血清学试验确证该患者为P１Pｋ血型系统得ｐ表型，经分子生物学基因测序,初步推断Ａ4GALT 基因第3外显子得９０3Ｃ＞G突变就是患者p表型形成得分子生物学基础,该研究成果从不同角度与深度撰写论文,先后发表《临床军医杂志》与《中国输血杂志》论文各一篇，并由此逐步展开疑难血型鉴定。
在此之后得工作中，通过阅读文献自修学习,鉴定出Am、Bm、B３等血型亚型，形成了一套相对完整得疑难血型鉴定思路与流程。
２014年2月与2015年10月，在工作中分别遇到一例反复进行输血治疗得患者,经一系列血清学试验，确证此两例患者均因多次输血治疗而产生多种不规则抗体，该研究成果先后以论文形式发表于《临床军医杂志》。
在后期工作中，通过对解放军174医院住院患者不规则抗体筛查与鉴定结果进行分析，对厦门地区住院患者不规则抗体得分布特征有了较为清晰得了解，该研究成果以论文形式发表于《国际医药卫生导报》,并形成了一套相对完整得不规则抗体筛查与鉴定流程。
输血前检测及核对制度
输血前检测及核对制度一、输血前检测1、血型鉴定患者在输血前，必须进行 ABO 血型和 RhD 血型的鉴定。
采用正反定型两种方法进行血型鉴定，以确保结果的准确性。
对于血型鉴定结果有疑问或不明确的，应进行进一步的检测和确认。
2、抗体筛查对患者进行不规则抗体筛查，以发现可能存在的意外抗体。
抗体筛查应使用能够检测出常见不规则抗体的试剂和方法。
若抗体筛查结果为阳性，应进行抗体鉴定，明确抗体的特异性。
3、交叉配血试验完成血型鉴定和抗体筛查后，进行交叉配血试验。
交叉配血包括主侧和次侧配血，主侧是患者血清与供血者红细胞反应，次侧是患者红细胞与供血者血清反应。
交叉配血试验应在规定的时间内完成，并记录结果。
4、传染病检测对患者进行输血相关传染病的检测，包括乙肝表面抗原（HBsAg）、丙肝抗体（抗HCV）、艾滋病抗体（抗HIV）、梅毒螺旋体抗体等。
检测方法应符合国家相关标准和规范，检测结果应准确可靠。
传染病检测结果应记录在患者的病历中，并按照相关规定进行报告和处理。
5、血常规和凝血功能检测输血前对患者进行血常规检查，了解血红蛋白、红细胞、白细胞、血小板等指标。
对于有凝血功能障碍或出血倾向的患者，进行凝血功能检测，如凝血酶原时间（PT）、部分活化凝血活酶时间（APTT）等。
二、输血前核对1、患者信息核对输血前，医护人员应仔细核对患者的姓名、性别、年龄、住院号、床号等基本信息，确保无误。
核对患者的血型鉴定结果、抗体筛查结果、交叉配血试验结果等输血相关检测报告。
2、血液制品核对输血科工作人员在发放血液制品时，应与取血人员共同核对血液制品的血型、血量、有效期、血袋完整性等信息。
核对无误后，双方在血液制品发放和领取记录上签字确认。
3、输血过程核对输血开始前，护士应再次核对患者信息和血液制品信息，确认无误后方可进行输血。
输血过程中，密切观察患者的反应，如有异常应立即停止输血，并进行相应的处理。
三、输血记录1、输血前的检测结果、核对情况以及输血的指征、血液制品的种类和数量等信息应详细记录在患者的病历中。
疑难血型检测及混合配血处理流程
疑难血型检测及混合配血处理流程血型检测是检测一个人的血液所属血型的过程。
在正常情况下，人类血液可分为ABO血型系统和Rh血型系统。
疑难血型检测是指那些不能明确确定血型的血样，或在一些特殊情况下，涉及到了其他血型系统的血样。
1.血样采集：采集患者的静脉全血样本，注意遵守无菌操作，防止外界污染。
2.ABO血型鉴定：使用特定的抗血清或抗血型抗体来检测血样中存在的A、B抗原和相应的抗体。
3.Rh血型鉴定：使用特定的抗血清来检测血样中的Rh抗原。
4. 常见血型抗原鉴定：除了ABO和Rh血型，还需进行其他常见血型抗原（如Kell抗原、Duffy抗原等）的鉴定。
5.血型交叉试验：将供体血样与受者血样进行交叉配血试验，通过观察混合后的凝集反应和溶解反应来判断血型的相容性。
6.疑惑血型抗原鉴定：对于无法确定血型的情况，需使用特殊试剂来检测特定的血型抗原。
在进行混合配血处理时1.确定血型相容性：根据受者的血型及抗体情况，与供者的血型进行配对，确保不会发生严重的血型不相容反应。
2.交叉配血试验：将受者的血样与供者的血样进行交叉配血试验，观察凝集和溶解反应，确认供者血样与受者血样的相容性。
3.没有完全相容性的情况处理：若受者有多种抗体，导致没有完全相容性的情况，需要根据抗体特异性和滴度来选择相对相容性较好的供者血样。
4.选择最佳供者：根据受者的血型与抗体情况，选择合适的供者血样。
在选择供者时，还需考虑与受者的血数量、组织相容性等因素。
5.监测治疗效果：完成配血后，需要监测受者的治疗效果，包括血红蛋白水平、血小板计数等指标，确保配血的有效性和安全性。
总结起来，疑难血型检测及混合配血处理流程包括血样采集、血型鉴定、交叉配血试验、选择最佳供者和监测治疗效果等步骤。
在进行这些步骤时，需严格遵守操作规范，防止交叉感染和误配等危险。
同时，根据不同的疑难血型情况，可能需要使用特殊试剂和技术来进行鉴定和处理。
血型检测和配血处理的准确性和安全性对于患者的生命和健康至关重要，因此必须由经验丰富的专业人员进行操作。
血型鉴定、不规则抗体筛查及交叉配血步骤
血型鉴定、不规则抗体筛查及交叉配血步骤一.血型鉴定1.排管并标记患者红细胞悬液管、患者血浆管、患者ABO正定型试管、患者ABO反定型试管、患者RhD定型试管。
2.标本准备分离患者的血浆，取一滴压积红细胞，三次洗涤，制备患者2%-5%红细胞悬液。
3.加样ABO正定型：1滴（50ul）抗A、抗B试剂加1滴（50ul）患者红细胞悬液。
ABO反定型：1滴（50ul）患者血清加1滴（50ul）反定型试剂红细胞。
RhD定型：1滴（50ul）抗D血清加1滴（50ul）患者红细胞悬液。
4. 结果判断离心（2档）：轻摇试管，肉眼观察有无凝集，记录ABO、RhD血型结果。
二.不规则抗体筛查（生理盐水法+凝聚胺法）1.排管标记01、02、03及自身对照管2.加样各试管分别加入相应的患者血清2滴（100ul）及筛选细胞1滴（50ul）。
3.结果观察离心（2档），观察结果先看上清液有无溶血，轻轻混匀，肉眼观察有无凝集，结果判断并记录。
各试管分别加入低离子介质0.65ml，轻轻混匀（参照试剂说明书）各试管再分别加凝聚胺溶液2滴（100ul）混匀，离心先观察上清液有无溶血弃去上清液，留约0.1ml，轻轻混匀肉眼观察有无凝集（凝者继续试验，否则查找原因并重复试验）各试管分别加入重悬液2滴（100ul），轻轻混匀肉眼观察凝集是否在1min内消失显微镜检查三.交叉配血试验（生理盐水法+凝聚胺法）1.标本准备分离供血者血浆与红细胞三次洗涤，制备供血者2%-5%红细胞悬液2.排管标记排管，主侧、次侧及自身对照管3.加样各试管分别加入相应的备检血清2滴（100ul）及2%-5%备检红细胞悬液1滴（50ul）4. 结果观察离心（2档），观察结果先看上清液有无溶血轻轻混匀，肉眼观察有无凝集结果判断并记录各试管分别加入低离子介质0.65ml，轻轻混匀（参照试剂说明书）各试管再分别加凝聚胺溶液2滴（100ul）混匀，离心先观察上清液有无溶血弃去上清液，留0.1ml，轻轻混匀.肉眼观察有无凝集（凝者继续试验，否则查找原因并重复试验）各试管分别加入重悬液2滴（100ul），轻轻混匀肉眼观察凝集是否在1min内消失肉眼观察阴性者，显微镜检查记录交叉配血结果A、B、O试验红细胞悬液的制备1. 分别采取已知A、B、O三种血型的红细胞，经盐水洗涤3次，以压紧红细胞配成不同浓度的红细胞悬液（见表格）红细胞悬液的配置悬液浓度（%）压实红细胞（滴）盐水（滴）2 1 2.0ml（40）5 1 0.8ml（16）10 1 0.4ml（8）20 1 0.2ml（4）2. 为了防止红细胞悬液敏感性不一致，可随机采取3个以上健康成人血液，按A、B、O型分别混合后，按上法制备。
医院交叉配血试验(凝聚胺法)标准操作程序
交叉配血试验（凝聚胺法）标准操作程序【项目名称】交叉配血试验【实验用途】辅助用于交叉配血【实验原理】红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引。
此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。
凝聚胺技术首先利用低离子介质溶液，降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。
其后，加入凝聚胺试剂，它是一种高价阳离子多聚物，是肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的聚集。
最后，加入重悬液，重悬液具有中和凝聚胺的作用，使正常的红细胞非特异性聚集散开，试验结果为阴性。
【标本种类】被检验者的血液，ABO正反血型Rh（D）血型抽3毫升不抗凝静脉血，交叉配血及不规则抗体抽5毫升不抗凝静脉全血。
血清标本：取静脉血沿管壁慢慢注入干燥试管内，待血液凝固后离心分离血清。
红细胞悬液的配制：用于一般实验，以血型鉴定，配血等的红细胞至少要用大量生理盐水洗一遍，通过洗涤可以去除红细胞表面的下述物质：1、少量血浆蛋白，如纤维蛋白原、抗球蛋白抗体，会干扰特异凝集和中和加入的抗体；2、已溶解红细胞的基质，有竞争抗体的作用；3、可容性的抑制物，如A、B、Chido、lewis等物质；4、抗凝剂，有抗非体作用，如第1次洗后有溶血现象，则要洗第2次，如第2次洗后上清液仍不完全清澈，这种红细胞不亦使用，应弃去。
红细胞悬液常用浓度有2％、5％和10％，配制时应将最后一次洗涤的红细胞水平离心机3000转/分离心，30分钟压积，在不除去上层盐水的情况下，吸取一定量的压积红细胞按体积百分比配成所需浓度的悬液。
实际工作中，可用一般洗涤压积的红细胞1滴加8滴生理盐水，配成的悬液约为10％，按此比例配成其他所需浓度的悬液2％的悬液一般用于滴定抗体效价，5％的悬液常用于血型鉴定或间接抗球蛋白试验，10%的悬液则用于测定抗体的亲合力。
疑难交叉配血试验标准操作规程
疑难交叉配血试验标准操作规程一、目的为规范疑难交叉配血试验操作，保证临床输血安全有效。
二、适用范围输血科负责疑难交叉配血试验的工作技术人员。
三、原理疑难交叉配血仅指ABO血型鉴定困难，红细胞不规则抗体筛选阳性或者受血者是自身免疫性溶血性贫血（AIHA)的患者等情况下的交叉配血试验。
配血前须确定受血者ABO血型或者不规则抗体的特异性，选择ABO血型相容的红细胞或者不规则抗体对应阴性抗原的红细胞进行试验。
四、步骤和方法（1）ABO血型鉴定不确定时，按照《ABO疑难血型鉴定操作规程》确定血型后再选择与ABO血型相同或相容性的血液进行交叉配血。
（2）冷型自身抗体1、按照《吸收试验操作规程》，对受检者血清进行冷自身抗体的吸收和去除冷自身抗体红细胞的制备。
2、对去除冷自身抗体的血清进行不规则抗体的筛选，结果若为阴性则用该血清和去除冷自身抗体红细胞分别和血型相容的献血者血液进行交叉配血试验。
（3）温型AIHA患者配血1、采用单特异性抗-IgG和抗-C3d试剂做DAT，鉴别溶血原因是IgG还是补体引起的。
2、若为抗-C3d阳性、抗-IgG阴性，则选择ABO及RhD血型相容的献血者血液进行配血，或者用单特异性抗-IgG试剂进行抗球蛋白法交叉配血，输注主侧相合的洗涤红细胞。
3、若为抗-IgG阳性、抗-C3d阳性或者阴性，则与多名献血者血液分别进行主侧交叉试验，选择主侧相合或者凝集最弱献血者的洗涤红细胞。
也可对抗凝标本的红细胞进行充分放散试验，对不抗凝标本血清进行完全吸收试验后分别与血型相容的血液进行交叉配血。
（4）不规则抗体筛选阳性，已确定为特异性同种抗体的患者，采用与其相同特异性的单克隆抗体试剂进行对应的抗原阴性的红细胞进行交叉配血。
不规则抗体筛选阳性，但不确定特异性的同种抗体的患者，随机和多名献血者血液进行交叉配血，选择相容的血液进行输注。
（1）结果判断：主、次侧均无溶血、无凝集表示配血相合；对于AIHA已经排除同种抗体的存在，而所有交叉配血又不相合时，可选择凝集强度弱于自身凝集的血液。
输血科配血流程
输血科配血流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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血型鉴定、不规则抗体筛查及交叉配血步骤
一.血型鉴定
1.排管并标记患者红细胞悬液管、患者血浆管、患者ABO正定型试管、患者ABO反定型
试管、患者RhD定型试管。
2.标本准备分离患者的血浆，取一滴压积红细胞，三次洗涤，制备患者2%-5%红细胞悬
液。
3.加样
ABO正定型：1滴（50ul）抗A、抗B试剂加1滴（50ul）患者红细胞悬液。
ABO反定型：1滴（50ul）患者血清加1滴（50ul）反定型试剂红细胞。
RhD定型：1滴（50ul）抗D血清加1滴（50ul）患者红细胞悬液。
4. 结果判断
离心（2档）：轻摇试管，肉眼观察有无凝集，记录ABO、RhD血型结果。
二.不规则抗体筛查（生理盐水法+凝聚胺法）
1.排管标记01、02、03及自身对照管
2.加样各试管分别加入相应的患者血清2滴（100ul）及筛选细胞1滴（50ul）。
3.结果观察
离心（2档），观察结果
先看上清液有无溶血，轻轻混匀，肉眼观察有无凝集，结果判断并记录。
各试管分别加入低离子介质0.65ml，轻轻混匀（参照试剂说明书）
各试管再分别加凝聚胺溶液2滴（100ul）混匀，离心
先观察上清液有无溶血
弃去上清液，留约0.1ml，轻轻混匀
肉眼观察有无凝集（凝者继续试验，否则查找原因并重复试验）
各试管分别加入重悬液2滴（100ul），轻轻混匀
肉眼观察凝集是否在1min内消失
显微镜检查
三.交叉配血试验（生理盐水法+凝聚胺法）
1.标本准备
分离供血者血浆与红细胞
三次洗涤，制备供血者2%-5%红细胞悬液
2.排管标记
排管，主侧、次侧及自身对照管
3.加样
各试管分别加入相应的备检血清2滴（100ul）及2%-5%备检红细胞悬液1滴（50ul）4. 结果观察
离心（2档），观察结果
先看上清液有无溶血
轻轻混匀，肉眼观察有无凝集
结果判断并记录
各试管分别加入低离子介质0.65ml，轻轻混匀（参照试剂说明书）
各试管再分别加凝聚胺溶液2滴（100ul）混匀，离心
先观察上清液有无溶血
弃去上清液，留0.1ml，轻轻混匀
肉眼观察有无凝集（凝者继续试验，否则查找原因并重复试验）
各试管分别加入重悬液2滴（100ul），轻轻混匀
肉眼观察凝集是否在1min内消失
肉眼观察阴性者，显微镜检查
记录交叉配血结果
A、B、O试验红细胞悬液的制备
1. 分别采取已知A、B、O三种血型的红细胞，经盐水洗涤3次，以压紧红细胞配成不同浓度的红细胞悬液（见表格）
红细胞悬液的配置
悬液浓度（%）压实红细胞（滴）盐水（滴）
2 1 2.0ml（40）
5 1 0.8ml（16）
10 1 0.4ml（8）
20 1 0.2ml（4）
2. 为了防止红细胞悬液敏感性不一致，可随机采取3个以上健康成人血液，按A、B、O型分别混合后，按上法制备。