邻菲罗啉测定铁
邻菲罗啉法测定铁的原理
邻菲罗啉法测定铁的原理引言邻菲罗啉法是一种常用于测定金属离子的分析方法，其中包括测定铁离子的方法。
铁在生物体中起着重要的作用，因此准确测定铁的含量对于生物学和医学等领域的研究具有重要意义。
本文将详细介绍邻菲罗啉法测定铁的原理及其应用。
一、邻菲罗啉法概述邻菲罗啉法是一种基于化学反应的分析方法，常用于测定金属离子的含量。
它的原理是通过金属离子和邻菲罗啉（o-phenanthroline）发生络合反应，形成可见光吸收的络合物，进而测定金属离子的浓度。
二、邻菲罗啉法测定铁的原理邻菲罗啉法测定铁的原理是基于铁离子与邻菲罗啉的络合反应。
邻菲罗啉与二价铁离子（Fe2+）反应生成红色的络合物，该络合物在可见光区域有特征性的吸收峰。
具体的反应方程式如下： Fe2+ + 3 o-phenanthroline → [Fe(phen)3]2+ 其中，“phen”表示邻菲罗啉。
三、实验步骤进行邻菲罗啉法测定铁的实验，可以按照以下步骤进行：1.准备待测样品，并将其溶解在适当的溶剂中。
2.准备邻菲罗啉试剂溶液，通常需要称取一定质量的邻菲罗啉并溶解在适量的溶剂中，得到一定浓度的邻菲罗啉试剂溶液。
3.将待测样品溶液与邻菲罗啉试剂溶液混合，反应一定时间。
4.使用分光光度计测定反应溶液的吸光度，记录在特定波长下的吸光度值。
5.根据所用的标准曲线，计算出待测样品中铁离子的浓度。
四、应用领域邻菲罗啉法测定铁的方法在生物学和医学等领域有广泛的应用。
下面列举了一些应用领域的例子：1.铁代谢研究：通过测定生物体内铁的含量，可以了解铁的代谢情况，并为相关疾病的诊断和治疗提供依据。
2.食品分析：铁是食品中的重要营养物质，通过测定食品中铁的含量，可以评估食品的营养价值。
3.环境监测：铁在水体和土壤中具有重要的影响，通过测定环境样品中铁的含量，可以评估环境的质量和污染程度。
4.药物研究：某些药物中含有铁元素，通过测定药物中铁的含量，可以控制药物的质量和疗效。
仪器分析实验邻菲罗啉分光光度法测定铁
仪器分析实验邻菲罗啉分光光度法测定铁邻菲罗啉分光光度法是常用的测定铁含量的方法，该方法利用邻菲罗啉与Fe3+形成复合物时的吸收光谱特性进行定量分析。
本实验旨在通过邻菲罗啉分光光度法准确测定未知样品中铁的含量。
仪器及试剂:1.紫外可见分光光度计:用于测量样品在特定波长下的吸光度。
2.1,10-菲罗啉:作为萃取剂与Fe3+形成有色络合物。
3.盐酸:用于调节溶液的酸碱度。
4.硫酸:用于制备酸性条件下的邻菲罗啉试剂。
实验步骤:1.根据实验室提供的样品，称取适量未知样品，加入锥形烧瓶中。
2.加入10mL盐酸，调节溶液酸碱度，使溶液呈现酸性。
3.加入适量的邻菲罗啉试剂，溶解后进行稀释，拌匀。
4.将样品溶液转移到紫外可见分光光度计的比色皿中，以空白溶液为对照。
5.在特定波长下测量样品的吸光度，并记录下数值。
6.制备一系列已知浓度的铁标准溶液，重复步骤4和5，以绘制铁的标准曲线。
7.根据样品的吸光度和标准曲线，计算出样品中铁的含量。
实验注意事项:1.样品溶液的酸碱度对实验结果有较大影响，应确保样品处于酸性条件下，一般pH为1-2之间。
2.实验过程中尽量避免邻菲罗啉试剂的吸湿，以免影响准确性。
3.各步骤中，尽量保持操作环境清洁，以避免外界因素干扰。
4.标准曲线的绘制应涵盖目标测定范围内的各个浓度点，以保证测定结果的准确度。
分析结果及讨论:分析样品后，根据样品的吸光度和标准曲线，可以计算出样品中铁的含量。
分光光度法测定铁的优点是准确度高，灵敏度较好，样品处理简便。
然而，该方法需要严格控制反应条件，如酸碱度、反应时间等，以保证测定结果的准确性。
另外，样品中其他金属离子的存在也会对测定结果产生干扰。
因此，在分析过程中要注意样品的预处理，并对干扰进行合理处理，以提高分析结果的准确性。
总之，邻菲罗啉分光光度法是一种常用的测定铁含量的方法。
通过实验，可以熟悉该方法的操作步骤，了解标准曲线的绘制和分析结果的计算。
实验结果可用于质量控制、食品安全监测等领域的铁含量测定。
邻菲罗啉分光光度法测定铁
邻菲罗啉分光光度法测定铁邻菲罗啉分光光度法是一种常用的测定铁的方法。
邻菲罗啉，也称为邻二氮菲，是一种常用的螯合剂，可以与铁离子形成稳定的络合物。
下面将对这种方法进行详细的介绍。
一、实验原理邻菲罗啉分光光度法是一种基于络合反应的分光光度法，用于测定铁离子。
邻菲罗啉与铁离子形成稳定的络合物，该络合物的最大吸收波长位于530nm左右，因此可以通过测量该波长下的吸光度来测定铁离子的浓度。
二、实验步骤1.准备试剂和样品：邻菲罗啉溶液、铁标准溶液、缓冲溶液（PH=7）、去离子水、待测样品。
2.校准仪器：使用空白试剂校准仪器，确保仪器处于正常状态。
3.绘制标准曲线：分别取不同浓度的铁标准溶液于比色皿中，加入等体积的邻菲罗啉溶液和缓冲溶液，摇匀后静置片刻，记录各浓度下的吸光度。
以吸光度为纵坐标，铁离子浓度为横坐标绘制标准曲线。
4.测定样品：取适量待测样品于比色皿中，加入等体积的邻菲罗啉溶液和缓冲溶液，摇匀后静置片刻，测量吸光度。
5.计算结果：根据标准曲线计算待测样品中铁离子的浓度。
三、实验结果与分析1.结果记录：记录实验过程中各浓度下的吸光度和待测样品中铁离子的浓度。
2.结果分析：通过对比标准曲线和样品的吸光度值，可以得出待测样品中铁离子的浓度。
如果需要进一步分析，可以对实验数据进行处理和分析，例如计算相对误差、变异系数等指标，以评估实验结果的准确性和可靠性。
四、实验注意事项1.实验过程中要注意安全，避免直接接触皮肤或吸入粉尘。
2.试剂和样品应当存放在棕色瓶中，避免阳光直射和长时间暴露在空气中。
3.在绘制标准曲线时，要使用相同浓度的缓冲溶液和邻菲罗啉溶液，以确保实验条件的一致性。
4.在测定样品时，要保证样品的均匀性和稳定性，避免出现误差。
5.在计算结果时，要根据标准曲线进行线性回归分析，以得出准确的浓度值。
五、实验结论通过邻菲罗啉分光光度法测定铁离子的实验，可以得出待测样品中铁离子的浓度。
该方法具有操作简便、灵敏度高、准确度高等优点，适用于测定水中、土壤中或生物样品中的铁离子浓度。
邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁常用文档
四、实验步骤
1．邻菲罗啉-亚铁吸收曲线的绘制
准确吸取铁标准溶液（含铁 10μg/mL，用含铁 100μg/mL 配 制）4mL于50mL容量瓶中，依次加入5mL HAc-NaAc缓冲液、 2mL盐酸羟胺溶液、5mL邻菲罗啉溶液，用水稀释至刻度，摇匀， 放置10分钟。以水作参比溶液，用1cm比色皿和722型分光光度计 在=440-600nm分别测定吸光度A。
为使测定稳定，将电源开关打开，使仪器预热
六、思考题
1．参比溶液的作用是什么？
2．溶液酸度对测定有何影响？ 3．制作标准曲线和进行其他条件实验时，加入试剂的
顺序能否任意改变？为什么？
七、注意事项
1．为了防止光电管疲劳。不测定时必须将比色皿暗箱盖打开，使
光路切断，以延长光电管使用寿命。
2．比色皿使用注意事项：
如果铁以Fe3+的形式存在，应预先加入盐酸羟胺将 Fe3+还原成Fe2+。
三、主要仪器与试剂
1．仪器 722型分光光度计、 10mL吸量管，50mL容量瓶。
2．试剂 (1) 铁标准溶液（含铁 100μg/mL）； (2) 0.1%邻菲罗啉溶液 ； (3) 5%盐酸羟胺溶液 ； (4) HAc-NaAc缓冲液（pH=4.6）。
1．吸收曲线绘制和测量波长选择
由吸收曲线可得，λmax=
nm。
2．标准曲线的绘制和铁含量的测定
若由标准曲线上查出对应的铁含量为cxห้องสมุดไป่ตู้，
以所得吸光度A为纵坐标，相应波长λ为横坐标，在坐标纸上绘制A与λ的吸收曲线。
则原试样中铁含量的浓度c 计算： 以显色后的50mL溶液中的含铁量(µg)为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制测定铁的标准曲线。
以所得吸光度A为纵坐标，相应波长λ为横坐标，在坐标纸上 绘制A与λ的吸收曲线。从吸收曲线上选择测定铁的适宜波长，一 般选用最大吸收波长λmax为测定波长。
铁(ⅲ)—邻菲罗啉光化还原分光光度法测定铁
邻菲罗啉光化还原分光光度法测定铁
一、试验原理及方法
首先，将样品加入菲罗啉光化还原剂，然后加热，使样品中的铁被还原成铁离子，并且形成一种可以吸收光的物质。
接着，将样品放入分光光度仪中，仪器会测量样品中铁离子的吸收光谱，从而计算出样品中铁的含量。
二、试验步骤
1. 将样品溶液加入到分析管中，添加足量的邻菲罗啉（1,10-二苯基膦），搅拌均匀；
2. 将分析管放入分光光度仪中，调节波长为510nm，记录原始吸光度；
3. 将分析管中的样品溶液加入还原剂（硫酸铜），搅拌均匀；
4. 再次将分析管放入分光光度仪中，调节波长为510nm，记录还原后的吸光度；
5. 计算吸光度差值，用标准曲线法计算出样品中铁的含量。
三、注意事项
1. 实验前，应先将试剂称量准确，并将试剂放入实验瓶中；
2. 将实验瓶中的试剂搅拌均匀，使其完全溶解；
3. 将实验瓶中的溶液放入分光光度仪中，调节好参数；
4. 将菲罗啉溶液加入实验瓶中，搅拌均匀；
5. 将实验瓶中的溶液放入分光光度仪中，测定光度值；
6. 根据光度值计算出铁的浓度；
7. 将实验瓶中的溶液放入烧杯中，加入还原剂，加热搅拌，使铁完全还原；
8. 将实验瓶中的溶液放入分光光度仪中，测定光度值；
9. 根据光度值计算出铁的浓度；
10. 将实验结果记录在实验报告中。
四、结果计算
计算铁的含量，需要用到以下公式：
含量（mg/L）=A/B×1000
其中，A为样品中铁的浓度，B为样品体积（单位为升）。
邻菲罗啉分光光度法测定铁
邻菲罗啉分光光度法测定铁一、实验目的1、掌握邻菲罗啉分光光度法测定铁的原理和方法；2、学习分光光度法实验条件的选择方法，应用确定的条件测出待测试样中铁的含量；3、熟悉分光光度计的结构原理和使用方法（参阅附录1、2）二、实验原理分光光度法测定铁的理论依据是朗伯－比耳定律：当一束平行单色光通过单一均匀的、非散射的吸光物质溶液时，溶液的吸光度与溶液浓度和液层厚度的乘积成正比。
如果固定比色皿厚度测定有色溶液的吸光度，则溶液的吸光度与浓度之间有简单的线性关系，可根据相对测量的原理，用标准曲线法进行定量分析。
分光光度法的显色反应条件（酸度、显色剂用量、显色时间、显色温度等）和测量条件（测定波长、参比液的选择等）都是通过实验确定的。
用分光光度法测定铁的显色剂，常用的有邻菲罗啉（邻二氮菲）、磺基水杨酸、硫氰酸盐等。
其中邻菲罗啉法灵敏度高，选择性好，络合物十分稳定，故应用甚为广泛。
在pH＝3～9的溶液中，邻菲罗啉与Fe2+生成稳定的橙红色络合物：Fe2++3NN [(NN)3Fe]2+该络合物lgβ3＝21.3（20˚C），在510nm附近有最大吸收，摩尔吸光系数ε510＝1.1×104L · mol-1 · cm-1。
邻菲罗啉与Fe3+也生成3 : 1的淡蓝色络合物，lgβ3＝14.1。
因此，在显色前需用盐酸羟胺将Fe3+还原为Fe2+：2Fe3+ + 2NH2OH = 2Fe2+ + N2↑+ 2H2O + 2H+测定时，控制溶液酸度在pH＝3～9较适宜，酸度高时，反应速度慢；酸度太低，则Fe2+部分水解，影响测定。
通常在微酸性（pH＝5）溶液中显色。
本法选择性很高，相当于含铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32－，20倍的Cr3+、Mn2+、V(v)、PO43－，5倍的Co2+、Cu2+等均不干扰测定。
三、试剂与仪器1、铁标准溶液（100μg/mL）：称取0.8634gNH4Fe(SO4)2· 12H2O（或0.7022g (NH4)2Fe(SO4)2· 6H2O）于洁净的烧杯中，加入100ml 2mol/L的盐酸，溶解后定量转移至1L容量瓶中，加水至刻线，摇匀；2、盐酸羟胺溶液：10％水溶液，两周内有效；3、邻菲罗啉溶液：0.1％水溶液。
邻菲罗啉分光光度法测定铁
Fe 2+ +3邻菲罗啉分光光度法测定铁中文名称：1,10-菲罗啉[1]中文别名：邻菲罗啉又叫邻二氮菲英文名称：1,10-Phe nan throli ne mo nohydrate 英文别名：1,10-Phe nan throli ne hydrate CAS 号：5144-89-8 分子式： C12H8N2.H2O 分子量：180.21I, I O-piienanthrohne1,10-phenanthroline危险品标志：T N 说明 风险术语：R25; R50/53; 说明 安全术语：S45; S60; S61 主要用途：邻菲罗啉与亚铁离子在PH2~9的条件下生成桔红色络合物，然后用分光光度法测定铁含量。
物理化学性质：一水合物为白色结晶性粉末。
熔点 93-94 C,无水物熔点为117C,溶于300份水，70份苯，溶于醇和丙酮。
能与多种过渡金属形成配合物，由于形成的配合物为螯合物，所以较为稳定。
与铜形成的配合物及其衍 生物因为对DNA 有 一定的切割活性，可以用作非氧化性核酸切割酶，进而有一定的抗癌活性。
实验原理邻二氮菲(phen)和Fe 2+在pH3〜9的溶液中，生成一种稳定的橙红色络合物 Fe(phen) 32+,其lgK=21.3 , £ 508=1.1x 104L ・ mol -1 • cm 1，铁含量在0.1〜6卩g • mL 1范围内遵守比尔定律。
其吸收曲线如图所示。
显色前需用盐 酸羟胺或抗坏血酸将 Fe 3+全部还原为Fe 2+,然后再加入邻二氮菲， 并调节溶液酸度至适宜的显色酸度范围。
有关反应如下：2Fe 3+ + 2NH 2OHHC1= 2Fe 2+ +N> f +2H2O+4H+2C 「测定时，控制溶液酸度在 pH=2〜9较适宜，酸度过高，反应速度慢，酸度太低，则 Fe 2+*解，影响显色。
Bi 3+、C 『、、Ag +、Zn 2+离子与显色剂生成沉淀， Cu 2+、Co 2+、Ni 2+离子则形成有色络合物，因此当这些离子共存时应注意它们的干扰作用。
邻菲罗啉分光光度法测铁离子
邻菲罗啉分光光度法测铁离子一、主要仪器及试剂1．邻菲罗啉溶液：0.12%水溶液；2．盐酸羟胺溶液：10%水溶液；3．1+1氨水4．1+1盐酸5．铁标准溶液：准确称取0.216g 硫酸铁胺(NH4Fe(SO4)2·12H2O)置于烧杯中，加少量水溶解，加0.625 mL 硫酸，定量转移到250ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
此溶液为1ml含0.1mg铁标准溶液。
吸取上述溶液10ml，移入100ml 容量瓶中用水稀释至刻度，此溶液为1ml含0.01mg铁标准溶液。
6．分光光度计带有厚度为3cm的比色皿。
7．1+1盐酸8．刚果红试纸二、测定步骤1．绘制标准曲线：分别吸取浓度为0.01mg/mL铁标准溶液为0.0、1.0、2.0、3.0、4 .0 、5.0mL 于6只50mL容量瓶中，加水至约25ml，各加1毫米长的刚果红试纸，在试纸呈蓝色时，各瓶加10%盐酸羟胺1mL，0.12%邻菲罗啉2ml,混匀后用1+1氨水调节使刚果红试纸呈紫色，再加一滴1+1氨水，使试纸呈红色，用水稀释至刻度，混匀。
10min后于510nm处，以空白溶液为参比，测定各溶液的吸光度。
以吸光度为纵坐标、铁的毫克数为横坐标绘制标准曲线。
2．总铁离子的测定：吸取50mL水样于150mL锥形瓶中，放入1毫米长的刚果红试纸，用1+1盐酸调节使水呈酸性，P H＜3，刚果红试纸呈蓝色。
加热煮沸10分钟，冷却后移入50ml容量瓶中，加10%盐酸羟胺溶液1mL，摇匀，1分钟后再加0.12%邻菲罗啉2ml，用1+1氨水调节PH，使刚果红试纸呈紫色，再加一滴氨水，使试纸呈红色后用水稀释至刻度，混匀。
10min 后于510nm 处，用3cm 比色皿，以试剂空白溶液为参比，测定溶液的吸光度。
三、计算水样中总铁离子的含量X 为 X=1000 V mmg/L式中：m ——从标准曲线上查得的试样中含铁的毫克数，mg ；V ——所取水样的体积，mL 。
实验6 铁的测定——邻菲罗啉法
实验铁的测定——邻菲罗啉法一、目的掌握分光光度计的测定原理、方法及其结构。
掌握吸收曲线的绘制及样品的测定原理。
二、原理亚铁离子（Fe2+）与邻菲罗啉生成稳定的橙红色络合物，应用此反应可用比色法测定铁。
橙红色络合物的吸光度与浓度的关系符合朗伯-比耳定律。
三、仪器721型分光光度计、容量瓶（50ml）等。
四、试剂1、铁盐标准溶液：准确称取0.0730克分析纯硫酸亚铁铵于100毫升烧怀中[（NH4）2Fe（SO4）2·6H2O]，加50毫升1mol/LHCl，完全溶解后，移入1升容量瓶中，再加50毫升1mol/LHCl，并用水稀释到刻度，摇匀，所得溶液每毫升含铁0.01毫克；2、0.1%邻菲罗啉水溶液；3、1%盐酸羟胺水溶液；4、醋酸-醋酸钠缓冲溶液（PH4.6）：称取136克分析纯醋酸钠，加120毫升冰醋酸，加水溶解后稀释至500毫升。
五、测定步骤1、邻菲罗啉铁吸收曲线的绘制吸取上述标准铁盐溶液2.0ml于50ml容量瓶中，加入5ml醋酸-醋酸钠缓冲溶液，2.5ml盐酸羟胺溶液，5ml邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，用3厘米比色皿，以蒸馏水作参比溶液，在分光光度计上，从波长440～600nm分别测定其吸光度A。
以波长为横坐标，吸光度A纵坐标，绘制邻菲罗啉铁的吸收曲线，求出最大A值时的波长入m。
2、标准曲线的绘制：分别吸取铁的标准溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0ml于八只50ml容量瓶中，依次分别加入5ml醋酸－醋酸钠缓冲溶液，2.5ml盐酸羟胺溶液，5ml邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，然后用分光度计在其最大吸收的波长下测得吸光度，以不加铁的试剂溶液作参比。
以吸光度为纵坐标，铁含量（mg，50ml）为横坐标，绘制出标准曲线。
3、试样中铁含量的测定吸取试样溶液10ml（其中含铁0.02～0.06mg）于50ml容量瓶中，按绘制标准曲线的操作，加入各种试剂使之显色，用水稀释至刻度，摇匀。
邻菲罗啉测铁实验报告
一、实验目的1. 掌握邻菲罗啉分光光度法测定微量铁的原理和方法；2. 学会标准曲线的绘制方法及其使用；3. 了解分光光度计的操作及维护。
二、实验原理亚铁离子（Fe2+）在pH3~9时与邻菲罗啉生成稳定的橙红色络合物，其最大吸收波长为510nm。
利用朗伯-比耳定律，可以通过测定溶液的吸光度来计算铁的含量。
在本实验中，首先将样品中的铁离子还原为亚铁离子，然后加入邻菲罗啉显色剂，形成橙红色络合物。
通过比较样品溶液与标准溶液的吸光度，绘制标准曲线，从而计算出样品中铁的含量。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：分光光度计、721型比色皿、移液管、容量瓶、移液器、酸度计、电子天平等。
2. 试剂：铁标准溶液、邻菲罗啉溶液、盐酸羟胺溶液、醋酸-醋酸钠缓冲溶液、10%盐酸、无水乙醇、蒸馏水等。
四、实验步骤1. 标准曲线的绘制：（1）取6个50ml容量瓶，分别加入0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0ml的铁标准溶液，用水定容至刻度；（2）向每个容量瓶中加入2.5ml盐酸羟胺溶液、5ml醋酸-醋酸钠缓冲溶液、5ml邻菲罗啉溶液，混匀；（3）以蒸馏水为空白，用分光光度计在510nm波长处测定吸光度；（4）以铁标准溶液的浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品测定：（1）准确量取待测样品溶液2ml于50ml容量瓶中；（2）按照标准曲线的绘制步骤，加入试剂并混匀；（3）以蒸馏水为空白，用分光光度计在510nm波长处测定吸光度；（4）根据标准曲线，计算样品中铁的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线：绘制标准曲线，得到线性方程为y=0.0034x+0.0068，相关系数R²=0.9976。
2. 样品测定：根据标准曲线，计算样品中铁的含量为1.23mg/L。
六、实验讨论1. 在实验过程中，要注意控制溶液的酸度，避免pH值过高或过低影响邻菲罗啉与铁离子的络合反应；2. 盐酸羟胺作为还原剂，应确保其过量，以确保样品中的铁离子全部还原为亚铁离子；3. 邻菲罗啉显色剂与铁离子形成的橙红色络合物在光照下易分解，实验过程中应尽量避免光照；4. 实验过程中，要注意仪器和试剂的清洁，避免污染影响实验结果。
邻菲罗啉紫外可见分光光度法测定铁含量（详细）
邻菲罗啉紫外可见分光光度法测定铁含量一、仪器1．紫外可见分光光度计(UV-1800PC-DS)；配1cm石英比色皿2个（比色皿可以自带）；2．容量瓶：100mL1个；50mL11个；3．吸量管：5mL2支；10mL3支；二、试剂1．标准储备溶液：200μg·mL-1铁标准储备溶液。
2．未知液：未知浓度的铁标准溶液。
20μg·mL-13．其他：100g·L-1盐酸羟胺溶液、1g·L-1邻菲罗啉溶液、pH=4.5的醋酸-醋酸钠缓冲溶液。
三、实验操作1．吸收池配套性检查玻璃吸收池在600nm装蒸馏水，以一个吸收池为参比，调节τ为100%，测定其余吸收池的透射比，其偏差应小于0.5%，可配成一套使用，记录其余比色皿的吸光度值作为校正值。
2．标准使用溶液的制备用10mL吸量管移取200 ug/mL 铁的标准储备溶液10.00 mL 于100 mL 容量瓶中，配制成20 ug/mL浓度的标准使用溶液。
3．绘制吸收曲线选择测量波长⑴用10mL吸量管移取20 ug/mL 铁的标准溶液5.00 mL 于50 mL 容量瓶中，⑵用5mL吸量管依次加入然后加入5mL100g·L-1盐酸羟胺溶液，摇匀。
放置2min后，⑶用5mL吸量管加入5mL1g·L-1邻菲罗啉溶液，⑷用10mL吸量管加入10mLpH=4.5的醋酸-醋酸钠缓冲溶液，⑸用蒸馏水稀释至刻度线摇匀。
⑹用1cm吸收池，以试剂空白为参比，在400~600nm间扫描其吸收曲线，并根据吸收曲线的吸光度确定最大吸收波长。
4．标准工作曲线的绘制⑴取50 mL容量瓶6只，分别移取（务必准确移取）20 ug/mL铁标准溶液2.0 mL，4.0 mL，6. 0mL ，8.0 mL ，10.0 mL于5只容量瓶中，不加铁标准溶液醅空白液作参比，⑵各加5ml盐酸羟胺溶液，摇匀经二分钟后，再各加10ml NaAc溶液及5ml 邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度线,充分摇匀,待测定。
邻菲罗啉分光光度法测定铁的原理
邻菲罗啉分光光度法（也称为邻菲啰啉分光光度法）是一种常用的测定溶液中铁离子浓度的方法。
其原理基于邻菲啰啉（1,10-邻菲罗啉）与两价铁离子（Fe^2+）在酸性介质中形成深紫色络合物，这种络合物具有较大的摩尔吸光系数，在特定波长下可以进行光度测定。
以下是该方法的基本原理和步骤：
1. 络合反应原理：在pH为1.5至
2.5的盐酸介质中，邻菲啰啉（o-Phenanthroline）与Fe^2+形成深紫色的络合物，化学方程式如下：
\[ 3Fe^{2+} + 2C_{12}H_8N_2 \rightarrow Fe(C_{12}H_8N_2)_3^{2+} \]
这种络合物在510 nm左右有较大的摩尔吸光系数，适合用于光度测定。
2. 测定步骤：
-取待测铁离子溶液，加入盐酸和适量的邻菲啰啉试剂，形成深紫色络合物。
-使用分光光度计在510 nm左右测定络合物的吸光度。
-利用标准曲线或已知浓度的铁离子溶液做对照，根据吸光度值计算待测溶液中铁离子的浓度。
3. 注意事项：
-实验中盐酸的浓度和pH值需要严格控制，以保证络合物的形成和稳定。
-选择合适的波长进行光度测定，通常选择络合物的最大吸光度波长。
通过邻菲罗啉分光光度法，可以对水样或者其他溶液中的铁离子进行敏感、快速的测定，具有操作简便、结果稳定可靠的优点。
邻菲罗啉分光光度法测定铁含量原理
邻菲罗啉分光光度法测定铁含量原理邻菲罗啉分光光度法测定铁含量原理本文将从浅入深，逐步解释邻菲罗啉分光光度法测定铁含量的原理。
概述邻菲罗啉分光光度法是一种常用的测定溶液中铁含量的方法。
它基于邻菲罗啉与铁离子之间的络合反应，通过测量吸光度来间接测定铁含量。
原理1.络合反应邻菲罗啉和Fe(III)之间会发生络合反应，生成稳定的络合物。
2.光吸收现象邻菲罗啉-Fe(III)络合物具有特定的吸收光谱，可在可见光区域内吸收特定波长的光线。
3.光度计测量通过使用可见光区域内特定波长的滤光片，选择适当的波长进行测量，可以实现测定溶液中铁含量的目的。
1.样品处理将待测样品溶解在适当的溶剂中，使铁离子与邻菲罗啉发生络合反应。
2.光度计设置使用滤光片选择合适的波长，并对光度计进行预热和调零。
3.基线校准使用不含铁离子的溶液进行基线校准。
4.颜色形成加入邻菲罗啉试剂，使铁离子与邻菲罗啉发生络合反应，溶液由无色变为红色，该红色与铁含量成正比。
5.测定吸光度将反应溶液取出，用光度计在适当波长下测量吸光度。
6.铁含量计算根据已知标准曲线或计算公式，将吸光度值转化为溶液中的铁含量。
邻菲罗啉分光光度法在环境监测、食品检测、药品分析等领域得到广泛应用。
它具有操作简便、灵敏度高、重现性好等优点，能够准确测定铁含量。
结论邻菲罗啉分光光度法通过测量邻菲罗啉-Fe(III)络合物的吸光度，间接测定溶液中的铁含量。
这种方法基于络合反应和光吸收现象，操作简便且精确可靠。
在实际应用中，它被广泛应用于各个领域中对铁含量的测定。
微观机理如果进一步深入研究，可以了解邻菲罗啉与Fe(III)之间的络合反应的微观机理。
邻菲罗啉是一种有机化合物，它的结构中含有5个含氮杂环的芳香环，并具有多个氮原子与金属离子形成络合物的能力。
而Fe(III)是铁的氧化态离子，具有较强的电荷，在水溶液中很容易形成络合物。
当邻菲罗啉与Fe(III)离子接触时，它们之间会发生化学反应，形成邻菲罗啉-Fe(III)络合物。
邻菲罗啉分光光度法测定铁的含量
邻菲罗啉分光光度法测定铁的含量邻菲罗啉分光光度法测定⽔样中的铁⼀、实验⽬的：1、掌握邻菲罗啉分光光度法测定微量铁的原理和⽅法；2、学会标准曲线的绘制⽅法及其使⽤。
⼆、原理：亚铁离⼦（Fe2+）在pH=3~9时与邻菲罗啉⽣成稳定的橙红⾊络合物，应⽤此反应可⽤⽐⾊法测定铁。
橙红⾊络合物的吸光度与浓度的关系符合朗伯-⽐⽿定律。
若⽤还原剂（如盐酸羟胺）把⾼铁离⼦还原为亚铁离⼦，则此法还可测定⽔中的⾼价铁和总铁的含量。
三、仪器：721型分光光度计、1cm⽐⾊⽫、具赛⽐⾊管（50ml）、移液管、吸量管、容量瓶等。
四、试剂：1、铁贮备液（100µg/mL）：准确称取0.7020克分析纯硫酸亚铁铵[（NH4）2Fe（SO4）2·6H2O]于100毫升烧怀中（或0.8640g分析纯的NH4Fe(SO4)2·12H2O，其摩尔质量为482.18g/mol），加50毫升1+1 H2SO4，完全溶解后，移⼊1000ml 的容量瓶中，并⽤⽔稀释到刻度，摇匀，此溶液中Fe的质量浓度为100.0µg/mL。
（实验室准备好）2、铁标准使⽤液（20µg/mL）：准确移取铁贮备液20.00ml于100ml容量瓶中，⽤⽔稀释⾄刻度，摇匀。
此溶液中Fe2+的质量浓度为20.0µg/mL。
（学⽣配制）3、0.5%邻菲罗啉⽔溶液：配制时加数滴盐酸能助溶液或先⽤少许酒精溶解，再⽤⽔稀释⾄所需体积。
（临⽤时配制）4、10%盐酸羟胺⽔溶液：5、醋酸-醋酸钠缓冲溶液（pH=4.6）：称取40克纯醋酸铵加到50毫升冰醋酸中，加⽔溶解后稀释⾄100毫升。
五、测定步骤：1、标准曲线的绘制：（1）分别吸取铁的标准溶液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00ml于7⽀50ml⽐⾊管中，加⽔⾄刻度；（2）依次分别加⼊10%盐酸羟胺溶液1ml，混匀，加⼊5ml醋酸－醋酸铵缓冲溶液，摇匀，加⼊0.5%邻菲罗啉溶液2ml，摇匀，（3）放置15分钟后，在510nm波长处，⽤1cm⽐⾊⽫，以空⽩作为参⽐，测定各溶液的吸光度。
邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁的含量
邻菲罗啉分光光度法测定水样中微量的铁一、实验目的：1、掌握邻菲罗啉分光光度法测定微量铁的原理和方法；2、学会标准曲线的绘制方法及其使用。
二、原理：亚铁离子（Fe2+）在pH=3~9时与邻菲罗啉生成稳定的橙红色络合物，应用此反应可用比色法测定铁。
橙红色络合物的吸光度与浓度的关系符合朗伯-比耳定律。
若用还原剂（如盐酸羟胺）把高铁离子还原为亚铁离子，则此法还可测定水中的高价铁和总铁的含量。
三、仪器：721型分光光度计、1cm比色皿、具赛比色管（50ml）、移液管、吸量管、容量瓶等。
四、试剂：1、铁贮备液（100µg/mL）：准确称取0.7020克分析纯硫酸亚铁铵[（NH4）2Fe（SO4）2·6H2O]于100毫升烧怀中（或0.8640g分析纯的NH4Fe(SO4)2·12H2O，其摩尔质量为482.18g/mol），加50毫升1+1 H2SO4，完全溶解后，移入1000ml的容量瓶中，并用水稀释到刻度，摇匀，此溶液中Fe的质量浓度为100.0µg/mL。
（实验室准备好）2、铁标准使用液（20µg/mL）：准确移取铁贮备液20.00ml于100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
此溶液中Fe2+的质量浓度为20.0µg/mL。
（学生配制）3、0.5%邻菲罗啉水溶液：配制时加数滴盐酸能助溶液或先用少许酒精溶解，再用水稀释至所需体积。
（临用时配制）4、10%盐酸羟胺水溶液：5、醋酸-醋酸钠缓冲溶液（pH=4.6）：称取40克纯醋酸铵加到50毫升冰醋酸中，加水溶解后稀释至100毫升。
五、测定步骤：1、标准曲线的绘制：（1）分别吸取铁的标准溶液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00ml于7支50ml比色管中，加水至刻度；（2）依次分别加入10%盐酸羟胺溶液1ml，混匀，加入5ml醋酸－醋酸铵缓冲溶液，摇匀，加入0.5%邻菲罗啉溶液2ml，摇匀，（3）放置15分钟后，在510nm波长处，用1cm比色皿，以空白作为参比，测定各溶液的吸光度。
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邻菲罗啉测定铁
（1）掌握研究显色反应的一般方法。
（2）掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理和方法。
（3）熟悉绘制吸收曲线的方法，正确选择测定波长。
（4）学会制作标准曲线的方法。
（5）通过邻二氮菲分光光度法测定微量铁在未知式样中的含量，掌握721型，723型分光光度计的正确使用方法，并了解此仪器的主要构造。
二、原理：
可见分光光度法测定无机离子，通常要经过两个过程，一是显色过程，二是测量过程。
为了使测定结果有较高灵敏度和准确度，必须选择合适的显色条件和测量条件，这些条件主要包括入射波长，显色剂用量，有色溶液稳定性，溶液酸度干扰的排除。
（1）入射光波长：一般情况下，应选择被测物质的最大吸收波长的光为入射光。
（2）显色剂用量：显色剂的合适用量可通过实验确定。
（3）溶液酸度：选择适合的酸度，可以在不同PH缓冲溶液中加入等量的被测离子和显色剂，测其吸光度，作DA-PH曲线，由曲线上选择合适的PH范围。
（4）有色配合物的稳定性：有色配合物的颜色应当稳定足够的时间。
（5）干扰的排除：当被测试液中有其他干扰组分共存时，必须争取一定的措施排除干扰。
邻二氮菲与Fe2+ 在PH2.0-9.0溶液中形成稳定橙红色配合物。
配合无的ε =1.1 ×104 L• mol •cm-1 。
配合物配合比为3：1，PH在2-9（一般维持在PH5-6）之间。
在还原剂存在下，颜色可保持几个月不变。
Fe3+ 与邻二氮菲作用形成淡蓝色配合物稳定性教差，因此在实际应用中加入还原剂使Fe 3+还原为Fe2+ 与显色剂邻二菲作用，在加入显色剂之前，用的还原剂是盐酸羟胺。
此方法选择性高Br3+ 、Ca2+ 、Hg 2+、Zn2+ 及Ag+ 等离子与邻二氮菲作用生成沉淀，干扰测定，相当于铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+ 、Zn2+ 、Sio32-，20倍的Cr3+、Mn2+、VPO3-45倍的Co2+、Ni2+、Cu2+等离子不干扰测定。
三、仪器与试剂：
1、仪器：721型723型分光光度计
500ml容量瓶1个，50 ml 容量瓶7个，10 ml 移液管1支
5ml移液管支，1 ml 移液管1支，滴定管1 支，玻璃棒1 支，烧杯2 个，吸尔球1个，天平一台。
2、试剂：（1）铁标准溶液100ug•ml-1,准确称取0.43107g铁盐
NH4Fe(SO4)2•12H2O置于烧杯中，加入0.5ml盐酸羟胺溶液，定量转依入500ml 容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度充分摇匀。
（2）铁标准溶液10ug•ml-1.用移液管移取上述铁标准溶液10ml，置于100ml容量瓶中，并用蒸馏水稀释至刻度，充分摇匀。
（3）盐酸羟胺溶液100g•L-1(用时配制)
（4）邻二氮菲溶液1.5g•L-1 先用少量乙醇溶液，再加蒸馏水稀释至所需浓度。
（5）醋酸钠溶液1.0mol•L-1μ
四、实验内容与操作步骤：
1.准备工作
(1) 清洗容量瓶，移液官及需用的玻璃器皿。
(2) 配制铁标溶液和其他辅助试剂。
(3) 开机并试至工作状态，操作步骤见附录。
(4) 检查仪器波长的正确性和吸收他的配套性。
2. 铁标溶液的配制
准确称取0.3417g铁盐NH4Fe(SO4)•12H2O置于烧杯中，加入10mlHCL加少量水。
溶解入500ml容量瓶中加水稀释到容量瓶刻度。
3 .绘制吸收曲线选择测量波长
取两支50ml干净容量瓶，移取100µ g m l-1铁标准溶液2.50ml容量瓶中，然后在两个容量瓶中各加入0.5ml盐酸羟胺溶液，摇匀，放置2min后各加入1.0ml邻二氮菲溶液，2.5ml醋酸钠溶液，用蒸馏水稀释至刻度线摇匀，用2cm 吸收池，试剂空白为参比，在440——540nm间，每隔10nm测量一次吸光度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，确定最大吸收波长
（1）
∧nm 440 450 460 470 480 490
A 0．29 0．38 0．44 0．485 0．50 0．52
∧nm 500 510 520 530 540
A 0．54 0．57 0．502 0．369 0．257
4.工作曲线的绘制
取50ml的容量瓶7个,各加入100.00µɡml-1铁标准
0.00,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00,1.20ml，然后分别加入0.5ml邻二氮菲溶液，2.5ml 醋酸钠溶液，用蒸馏水稀释至刻度线摇匀，用2cm吸收池，以试剂空白为参比溶液，在选定波长下测定并记录各溶液光度，记当格式参考下表：
编号1# 2# 3# 4# 5# 6# 7#
V（铁溶液）ml 0．00 0．20 0．40 0．60 0．80 1．00 1．20
A -0.000 0.083 0.169 0.227 0.314 0.395 0.436
5.铁含量的测定
取1支洁净的50ml容量瓶,加人2.5ml含铁未知试液,按步骤(6 )显色,测量吸光度
并记录.
编号1# 2# 3#
V(未知液)ml 2.5 2.5 2.5
A 0.425 0.425 0.421
K=268.1 B= -2.205 R*R=0.9945
CONC. =K *ABS+B
C = 44.55mol ml-1
6.结束工作
测量完毕,关闭电源插头,取出吸收池, 清洗晾干后人盆保存.清理工作台,罩
上一
仪器防尘罩,填写仪器使用记录.清洗容量瓶和其他所用的玻璃仪器并放回原处.
五、讨论：
（1）在选择波长时，在440nm——450nm间每隔10nm 测量一次吸光度，最后得出的λmix=510nm,可能出在试剂未摇匀，提供的λmix=508nm，如果再缩减一点进程，试齐充分摇匀，静置时间充分，结果会更理想一些。
（2）在测定溶液吸光度时，测出了两个9，实验结果不太理想，可能是在配制溶液过程中的原因：a、配制好的溶液静置的未达到15min；b、药剂方面的问题是否在期限内使用（未知）因从溶液显色的效果看，颜色有点淡,要求在试剂的使用期限内使用；c、移取试剂时操作的标准度是否符合要求，要求一个人移取试剂。
（张丽辉）
在配制试样时不是一双手自始至终，因而所观察到的结果因人而异，导致最终结果偏差较大，另外还有实验时的温度，也是造成结果偏差的原因。
（崔凤琼）本次实验阶段由于多人操作，因而致使最终结果不精确。
（普杰飞）
（1）在操作中，我觉得应该一人操作这样才能减少误差。
（2）在使用分光计时，使用同一标样，测同一溶液但就会得出不同的值。
这可能有几个原因：a、温度，b、长时间使用机器，使得性能降低，所以商量得不同值。
（李国跃）
在实验的进行当中，因为加试样的量都有精确的规定，但是在操作中由于是手动操作所以会有微小的误码率差量，但综合了所有误差量将成为一个大的误差，这将导致整个实验的结果会产生较大的误码率差。
（赵宇）
在配制溶液时，加入拭目以待试剂顺序不能颠倒，特别加显色剂时，以防产生反应后影响操作结果。
（刘金旖）
六、结论：
（1）溶液显色，是由于溶液对不同波长的光的选择的结果，为了使测定的结果有较好的灵敏度和准确度，必须选择合适的测量条件，如：入射波长，溶液酸度，度剂使用期限。
（2）吸收波长与溶液浓度无关，不同浓度的溶液吸收都很强烈，吸收程度随浓度的增加而增加，成正比关系，从而可以根据该部分波长的光的吸收的程度来测定溶液的浓度。
（3）此次试验结果虽不太理想，但让我深有感触，从中找到自己的不足，并且懂得不少试验操作方面的知识。
从无知到有知，从不熟练到熟练使用使自己得到了很大的提高。