东南大学出版社仪器分析第二版第八章平面色谱法.

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3. 薄层板一定,Rf只与组分性质有关,对于极性组分, 展开剂极性↑大,Rf↑大 展开剂极性↓小,Rf↓小
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Analytical Chemistry 第8章 平面色谱法
(三)板效参数
1、理论塔板数—色谱分离性能指标
n=16(L/W)2
L:原点到斑点中心的距离
W:组分斑点的纵向宽度
斑点移动距离相等时,斑点越集中即W越小,n越大。
范围可以大于或小于1
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Analytical Chemistry 第8章 平面色谱法
(二)相平衡参数
1. 分配系数K和容量因子k 分配系数K
K

组分在固定相中的浓度 组分在流动相中的浓度
cs cM
K与温度有关
容量因子k—质量分配系数、分配比
k

组分在固定相中的质量 组分在流动相中的质量

距离, W1、W2斑点的宽度。
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Analytical Chemistry 第8章 平面色谱法
2.分离数(separation number; SN)
相邻斑点分离度为1.177时,在Rf=0(原点)到Rf=1(溶剂 前沿)之间能容纳的色谱斑点数。
SN=L0/(b0+b1)-1 b0:Rf=0组分的半峰宽;b1: Rf=1组分的半峰宽 SN 越 大 , 平 面 的 容 量 越 大 。 一 般 薄 层 板 的 分 离 数 为 7~10,高效薄层板可达10~20。SN是衡量分离容量的重要 参数。
植物叶片石油醚浸取液
碳酸钙柱 石油醚冲洗
固定相 流动相
色谱
色带
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Analytical Chemistry 第8章 平面色谱法
§1 概述
一. 色谱法 (层析法) 利用各组分物理化学性质的
不同,在流动相流经固定相时, 由于各组分在两相间的吸附、 分配或其它亲和力的差异而产 生不同速度的移动,最终达到 分离的目的。
分离基础:差速迁移 (例:赛跑)
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Analytical Chemistry 第8章 平面色谱法
二、分类:
1.按两相分子的聚集状态分:
流动相 固定相 类型
液体 液体 气体 气体
固体 液体 固体 液体
液-固色谱 液-液色谱 气-固色谱 气-液色谱
2.按操作形式分:
柱色谱
平面色谱
液相色谱 (LC)
R' 1 1 k
Rf=L/L0=ut/u0t
定时展开时 R’= Rf
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Analytical Chemistry 第8章 平面色谱法
1 Rf
1 k
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Rf
R'
1
1 K VS
Vm
讨论:
1. Rf=1 K或k=0 组分在前沿 Rf=0 K或k=∞ 组分在原点
2. Rf与K有关,即与组分性质(溶解度)以及薄层板和展开 剂的性质有关,K↑大,Rf↓小
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Analytical Chemistry 第8章 平面色谱法
二、平面色谱法参数
(一)定性参数-保留值(组分与固定相作用力大小)
1. 比移值Rf(retardation factor;Rf) 溶质移动的距离与流动 相移动距离之比 图示
Rf

原点到组分斑点质量中心的距离 原点到溶剂前沿的距离
分配系数与保留体积之间的关系;薄板种类显色 方法; 3. 平面色谱中比移值与分子结构关系; 4. 理解各色谱类型中组分的流出顺序,薄层色谱操 作、定性、定量方法;正相色谱与反相色谱。
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色谱由来
§1 概述
1906年植物学家Tswett M.
气相色谱 (GC)
纸色谱 薄层色谱
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3.按分离机制分:
四大基本类型
分配色谱:利用分配系数的不同 吸附色谱:利用物理吸附性能的差异 离子交换色谱:利用离子交换原理 分子排阻色谱:利用排阻作用力的不同
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2、塔板高度
H=L0/n
L0:原点到展开剂前沿的距离 n越大,H越小。
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(四)分离参数
1、分离度(resolution; R) :两相邻斑点中心的 距离与两斑点平均宽度的比值
R=2(L2-L1)/(W1+W2)=2d/(W1+W2) • L1 、L2 :分别为原点至两半斑点中心的
Analytical Chemistry 第8章 平面色谱法
第八章 平面色谱法
概述 平面色谱法的分类与原理 薄层色谱法 纸色谱法 应用与示例
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Analytical Chemistry 第8章 平面色谱法
重点掌握: 1.薄层色谱法和纸色谱法原理; 2. 薄层色谱法常用的固定相和流动相以及选择方法;
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L L0
Rf范围:
0< Rf <1
Rf = 0.2~0.8(最佳)
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L0
Rf
1

L1 L0
L2
L1
Rf
2

L2 L0
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2. 相对比移值Rr
§2平面色谱法的分类与原理
平面色谱法(plane chromatography)是在平面上进行分 离的一种色谱方法;主要包括薄层色谱法、纸色谱法和 薄层电泳法。
一、平面色谱法的分类
薄层色谱法:固定相铺在玻璃板、铝箔或塑料板上成薄层 纸色谱法:以纸为载体,固定相为纸上吸附的水分,流动
相为有机溶剂
薄层电泳法
Rr

R f(i) R f(s)
原点到组分斑点质量中心的距离 原 点 到 参 考 物 斑 点 质 量中 心 的 距 离
Li Ls
• 参考物与被测组分在完全相同条件下展开,可以消除系 统误差,大大提高重现性和可靠性;
• 参考物可以是后加入纯物质,也可是样品中已知组分; • 相对比移值Rs与组分、参考物性质及色谱条件有关,
ms mM

K VS VM
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Analytical Chemistry 第8章 平面色谱法
2. K、k、Rf的关系
设R’表示单位时间内一个分子在流动相中出现的几率,也 可以表示组分分子在平面上移动的速度
1 R' CSVS K VS
R' CmVm
Vm
K VS Vm k
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