植物呼吸强度的测定(小篮子法).
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植物呼吸强度的测定(小篮子法)
一、实验目的:掌握小篮子法测定呼吸强度的方法及其原理。
二、实验原理:
测定呼吸作用,一般测定呼吸过程消耗的O2量,或放出的CO2量。本实验用小篮子法测定呼吸过程中释放的CO2。植物进行呼吸时放出CO2,计算一定的植物样品在单位时间内放出CO2的数量,即为该样品的呼吸速率。
利用Ba(OH)2溶液吸收呼吸过程中释放的CO2,试验结束后,用草酸溶液滴定残留的Ba(OH)2,从空白和样品两者消耗草酸溶液之差,即可计算出呼吸过程中释放的CO2量。
三、仪器药品
广口瓶
酸式滴定管
尼龙网制小篮
0.05mol/L Ba(OH)2
指示剂:0.1%麝香草酚酞酒精溶液
1/44mol/L 草酸溶液
四、操作步骤
取500ml广口瓶一个, 瓶塞下面挂一网状小篮,用以盛实验材料。
称取萌发的小麦种子15g装于小篮内,将小篮挂在广口瓶内,同时加入
0.05mol/LBa(OH)2溶液15ml于广口瓶内,立即塞紧瓶塞,防止漏气。每十分钟
左右,轻轻摇动广口瓶,破坏溶液表面BaCO3薄膜,以利对CO2的吸收。
1小时后,小心打开瓶塞,迅速取出小篮,加入2滴指示剂,立即重新塞紧瓶塞。然后拔出小橡皮塞,将滴定管插入小孔中,用1/44mol/L草酸滴定,直到紫红色转变成无色为止。记录滴定所耗用草酸溶液的ml数。
另取用沸水煮死的种子为材料,做同样测定,以此作为对照。
取500ml广口瓶一个, 瓶塞下面挂一网状小篮,用以盛实验材料。
称取萌发的小麦种子15g装于小篮内,将小篮挂在广口瓶内,同时加入
0.05mol/LBa(OH)2溶液15ml于广口瓶内,立即塞紧瓶塞,防止漏气。每十分钟
左右,轻轻摇动广口瓶,破坏溶液表面BaCO3薄膜,以利对CO2的吸收。
1小时后,小心打开瓶塞,迅速取出小篮,加入2滴指示剂,立即重新塞紧瓶塞。然后拔出小橡皮塞,将滴定管插入小孔中,用1/44mol/L草酸滴定,直到紫红色转变成无色为止。记录滴定所耗用草酸溶液的ml数。
另取用沸水煮死的种子为材料,做同样测定,以此作为对照。
计算公式:
呼吸强度:
(CO2) mg/(g·h)=V0-V1/种子鲜重(g)×时间(h)
V0为煮死的种子,所耗用草酸的ml数,
V1为发芽的种子,所耗用草酸的ml数。
五、注意事项
防止口中呼出的气体进入瓶中
滴定前、后记下滴定管中溶液的刻度,计算所用溶液的体积。
注意操作中速度要快,防止空气中CO2与瓶中Ba(OH)2反应。
六、实验结果:
所以,呼吸强度:
(CO2) mg/(g·h)=(14.81ml-12.6ml)/15g*1h
=0.1473mg/(g.h)
(注:1/44mol/l草酸溶液1ml相当于1mg CO2)
七、结果分析:
由结果可以看出,实验组(活种子)消耗的草酸少,说明呼吸过程产生了CO2,而对照组使用的是煮熟的种子,没有呼吸作用。
根据所测得呼吸强度:CO2 ——0.1473mg/(g.h),可以看出所得呼吸强度偏小,分析原因,可能是随着实验地进行,广口瓶中O2 的浓度逐渐减少,使后期种子呼吸强度减弱。另外,温度和CO2浓度也会影响种子呼吸速率。