药物分析--旋光度测定法

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2、在同样条件下测出供试液 的旋光度,即可在标准曲线上 0 查出供试液的浓度。
C'
C
(三)杂质检查
某些药物本身无旋光性,而所含杂质具有旋光性, 所以可通过控制供试液的旋光性大小来控制杂质 的限量。
例如:硫酸阿托品中莨菪碱的检查:硫酸阿托品 为外消旋体,无旋光性,而所含杂质莨菪碱具有 左旋性,药典规定5%的硫酸阿托品溶液的旋光度 不得超过-0.40°。
构造原理
晶轴
晶轴
目镜
光源 起偏镜 偏振光 盛液管
旋转后的 偏振光
检偏镜 通过检偏镜 的偏振光
a. 偏振镜 (一)产生的 偏振光在00 平面内震 动
b. 通过磁 c. 通过样品后 旋线圈后 的偏振光振动 的偏振光 面旋转a1˚ 振动面以β 角摆动
OO偏振镜(一)的偏振轴 PP偏振镜(二)的偏振轴
d. 仪器示数 平衡后偏 振镜(一)反 向转过a1˚ 补偿了样 品的旋光 度
旋光度测定法
轻化工程系
概述
有机化合物的结构中含有手性碳原子,具有旋光 现象。利用测定药物的旋光度进行定性、杂质检 查和定量的分析方法,称为旋光度测定法。
手性碳原子,是指和四个不同的原子或基团连接
的碳原子,常用“*”号予以标注
CH3CHCH2CH3 Cl
6CH2OH
H 5C* OH
O1
4*
O
3
2
三分视场
光线从光源起经过起偏镜, 再经过盛有旋光性物 质的旋光管时, 因物质的旋光性使光线不能通过 第二个棱镜, 必须旋转检偏镜, 才能通过。故要 调节检偏镜进行配光, 由标尺盘上移动的角度, 可指示出棱镜2 的转动角度, 即为该物质在此浓 度时的旋光度。
旋光仪示意图
钠光 灯源
焦距调 节旋钮
三分视场 观察窗口
示数刻 度窗
样品管:
样品管 放置处
调节旋光度 数值旋钮
旋光仪的读数
旋光仪的读数
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操作方法:
测定注意事项:
1、测定前以溶剂作空白校正,测定后,再校正一次, 以确定测定时零点有无变动;如第二次校正时发现 零点有变动,应重新测定旋光度。 2、配制溶液及测定时,应调节温度为20±0.5℃ (或各药品项下规定的温度) 3、供试的液体或固体药物的溶液应不显浑浊或含有 混悬的小颗粒,如有上述现象,应预先过滤,并弃 去初滤液。
作业
1、名词解释:比旋度 2、旋光度测定时应注意哪些事项? 3、影响旋光度测定的因素有哪些?
C% =
α
α
t D
×L
×100%
例如:葡萄糖注射液的含量测定
精密量取本品适量(约相当于葡萄糖10g),置
100ml量瓶中,加氨试液0.2ml(促使葡萄糖溶液
的变旋现象达到平衡),用水稀释到刻度,摇匀,
静置10分钟,照(药典附录)测定该注射液的旋
光度为+4.9°,空白试验为0。求此葡萄糖液射液
中葡萄糖(C6H12O6·H2O)的含量。
中国药典(2005年版)规定:无水葡萄糖25℃时
的比旋度为+52.5°~ +53.0°
即:
= = a 25 D
52.5。+ 53.0。 2
52.75。
按公式:
= = C %
a
a
t
D

L

100%
=
4.9 52.75。╳ 1
╳ 100%
9.29%
计算所得是无水葡萄糖的含量,如按C6H12O6·H2O计算,则:
=
α
t D
×L
×C
除另有规定外,中国药典(2005年版)采用 1dm长的测定管
(五)光的波长
波长越短,旋光度越大。 中国药典(2005年版)采用钠光谱的D线
(589.3nm)测定旋光度。
(六)温度
一般情况下,温度的影响不是很大,对于大多数的 物质,在黄色钠光的情况下,温度每升高1℃,比 旋度约减少千分之一。
OH
OH
主要内容:
基本概念 影响旋光度测定的因素 仪器与测定方法 旋光法的应用 作业
一、基本概念
旋光度:平面偏振光通过含有某些光学活性的 化合物液体或溶液时,能引起旋光现象,使偏
振光的平面向左或向右旋转,旋转的度数,称
为旋光度(用α表示)。
比旋度:平面偏振光透过长1dm并每1ml中含有
C为每100ml溶液中含被测物质的重量(g,按干燥 品或无水物计算)
(一)物质的化学结构
物质的化学结构不同,旋光性也不同: 相同条件下 有的旋转的角度大,有的旋转角度小; 有的呈左旋(“-”表示),有的呈右旋(“+”表示); 有些物质无手性碳原子,无旋光性。
(二)溶液的浓度
溶液的浓度越大,其旋光度也越大。 在一定的浓度范围内,药物溶液的浓度和旋光度
呈线性关系。 测比旋度时,要求在一定浓度的溶液中进行。
(三)溶剂
溶剂对旋光度的影响比较复杂,随溶剂与药物而 有所不同:有些溶剂对药物无影响,有的溶剂影 响旋光的方向及旋光度的大小。
测定药物的旋光度和比旋度时,应注明溶剂的名 称。
(四)光线通过液层的厚度
光线通过液层的厚度越厚,旋光度越大
ຫໍສະໝຸດ Baidu
α
三、仪器与测定方法
中国药典(2005年版)规定用读数至0.01°并经 检定的旋光计。
常用的旋光仪:
WZZ-1型 旋光仪
圆盘旋光仪
WZZ-2型 旋光仪
构造原理
旋光仪的基本部件:单色光源、起偏镜、测定管、 检偏镜、检测器等五个部分。
原理:在起偏镜与检偏镜之间未放入旋光物质之 间,如起偏镜与检偏镜允许通过的偏振光方向相 同,则在检偏镜后面观察的视野是明亮的;如在 起偏镜与检偏镜之间放入旋光物质,则由于物质 旋光作用,使原来由起偏镜出来的偏振光方向旋 转了一个角度α,结果在检偏镜后面观察时,视 野就变得暗一些。若把检偏镜旋转某个角度,使 恢复原来的亮度,这时检偏镜旋转的解度及方向 即是被测供试品的旋光度。
四、旋光法的应用
(一)比旋度的测定
测定时应严格按照文献记载的条件(温度、溶 剂、波长、溶剂、浓度等)进行测定,按下式 计算:
α
t D
=
100 α L ×C
(二)溶液的含量测定
1、比旋度法 比旋度已知时使用 2、标准曲线法
1、比旋度法
测定方法:精密称取一定量供试品,配成一定浓 度的溶液,装入测定管中,测定其旋光度,然后 计算其含量:
= = C % 9.29% ╳ 198.17 180.16
10.22%
由以上可得: C=α×2.0852 2.0852为每1º旋光度相当于待测溶液每100ml中
C6H12O6·H2O的克数
2、标准曲线法
1、先测出一系列标准溶液的 旋光度,以旋光度作为纵坐标,α 以标准溶液的浓度为横坐标, α ' 绘制旋光度-浓度(α-C)曲线。
旋光性物质1g的溶液,在一定波长与温度下测
得的旋光度称为比旋度(用
α
t 表示)。
D
二、影响旋光度测定的因素
旋光度不仅与化学结构有关,还和测定时溶液的 浓度、液层的厚度、温度、光的波长以及溶剂有
关。
α
t D
=
100 α L ×C
D为钠光谱的D线 t为测定时的温度
α为测得的旋光度 L为测定管的长度(dm)
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