艾滋病梅毒丙肝的检测及解释
艾滋丙肝梅毒检测
梅毒——流行状况
中国先天性梅毒发病率增高
后天梅毒
先天梅毒
早
一期 硬下疳
二期 早发梅毒
期
复发梅毒
早期潜伏期梅毒
特点 病期≤2年，传染性强
无一期梅毒疹 直接发生相当于二期梅毒的损害 早期潜伏期梅毒
特点 年龄≤2岁， 传染性强
晚
三期 ①晚期皮肤、粘膜、骨、 眼梅
• 主要存活于HIV感染者及病人的血液，精液，阴道分 泌物，乳汁，伤口渗出液中
• 变异能力特强
• HIV对外界环境的抵抗力较弱，离开人体常温可存活 数小时到天。100°C 20分钟可完全灭活，干燥以及 常温消毒药品均可杀灭。
男同性恋增长速度最快
感染HIV后的血清学变化
浓度
HIV RNA
Anti-gp41,120,160
丙型肝炎病毒感染的自然史
易感人群分布
受血者
供血 人群
同性恋
肝病患者
HIV感染者 静脉药瘾
发病情况：世界各地
基本呈散发流行 。在特 殊人群如供血员、接受 血制品人群、可出现爆 发流行。供血员、受血 者、HIV感染者、透析 人群、各种肝病患者、 静脉药瘾者、同性恋者 等为HCV感染的高危人。
免疫缺陷——人体的免疫系统严重受损
综合征——患者多个系统受到侵害
“窗口期”：是指人体感染艾滋病病毒后，需要经过一段时间后血液中才会产生艾滋病病毒 抗体，在此期间HIV抗体检测呈阴性，这段时间即为窗口期。通俗地讲，“窗口期”就是感 染病毒后到能被检测出来之间的时间窗。
HIV结构图
• 艾滋病复制速度快，主要破坏具有免疫功能的CD+4 T细胞
传染病四项检查专业解读
传染病四项检蛰专业解读传染病四项就是对乙肝、丙肝、艾滋病和梅毒的筛查，这些医院为了方便医生开具化验单而统称为"传染病四项".需要接受手术、血液净化、介入治疗、侵入性检查（如各种内镜检查）和输注某些血制品的患者必须接受上述传染病四项筛查。
结果提示参考范围单位阴性阴性----- - —I康蛾BJ渡戌原I必雁斛阳性阴性阴性阴性阴性阴性I"耐心抗体阴性阴性］加做体阴性阴性体特异性抗体阴性阴性8HIY抗体阴性阴性这四种传染病的一个共同特点是，都可经血液传确口性生活传播，上述各种诊疗行为都可导致感染的发生。
筛查的目的是了解患者的感染状况，以便医护人员在诊疗过程中做好防护，这也是对其他患者的负责，同时可避免一些医疗纠纷。
一.乙肝筛查乙肝筛查的检查项目是乙肝五项指标，其包括乙肝表面抗原、表面抗体，e抗原、e抗体和核心'抗体的定性检查。
如果表面抗原阴性基本可排除乙肝病毒感染，如果表面抗原阳性则可确定患者存在乙肝病毒感染。
进一步可进行乙肝五项的定量检查，以动态观察各指标的变化。
如果表面抗原在半年内逐渐下降直至消失，考虑为急性感染；如果表面抗原水平无变化并持续半年以上，考虑为慢性感染。
对于慢性乙肝病毒感染且符合抗病毒条件者应积极抗病毒治疗，同时应进行HBVDNA检测，以评价疗效。
抗病毒药物主要有聚乙二醇干扰素和核甘（酸）类药物，核甘（酸）类药物主要有恩替卡韦、替诺福韦和丙酚替诺福韦。
二、丙肝筛查丙肝筛查的检查项目是血清丙肝抗体，如果丙肝抗体阴性可以排除丙肝病毒感染，如果丙肝抗体阳性尚需进一步进行丙肝病毒RNA的定量检测，只有检测到丙肝病毒RNA方可确认为患者存在丙肝病毒感染。
初次感染丙肝病毒的患者，有85%~90%可完全康复，只有5%~10%的患者转为慢性。
完全康复后的患者体内已经没有丙肝病毒，但血清中会长期存在丙肝抗体，所以不能单凭丙肝抗体来确定现症感染。
慢性丙型肝炎目前是可以治愈的,通过直接抗病毒药物8-12周的治疗,95%以上的患者可完全清除病毒，达到根治。
实验室艾滋、梅毒和乙肝相应项目的标准化操作程序
实验室艾滋、梅毒和乙肝相应项目的标准化操作程序实验室是进行各类病原微生物检测的重要场所，包括艾滋病、梅毒和乙肝等项目的标准化操作程序也是实验室工作的核心。
标准化操作程序的制定，旨在确保实验室工作的准确性、可靠性和连续性，最大程度地减少误差和风险。
下面将详细介绍实验室艾滋病、梅毒和乙肝项目的标准化操作程序。
一、艾滋病检测项目的标准化操作程序：1.标本采集：按照规定的采样方法采集血液标本，包括静脉血和采血盒采集的血液。
2.样本处理：收到标本后，首先检查样本标签和申请单上的信息是否一致，然后进行样本分装和保存，确保样本的完整性和稳定性。
3.样本检测：使用艾滋病抗体检测试剂盒进行检测。
按照检测试剂的说明书，将样本和试剂按照比例混合并孵育一定时间，然后进行洗涤和显色。
4.结果判断：根据试剂盒的说明书，根据显色反应的强度和比色卡提供的判断标准，判断样本阴阳性。
5.结果记录和报告：将检测结果记录在检验记录中，并生成相应的实验报告，确保结果能够及时准确地传达给临床医生。
二、梅毒检测项目的标准化操作程序：1.标本采集：按照规定的采样方法采集血液标本，包括静脉血和采血盒采集的血液。
2.样本处理：收到标本后，首先检查样本标签和申请单上的信息是否一致，然后进行样本分装和保存，确保样本的完整性和稳定性。
3.样本检测：使用梅毒抗体检测试剂盒进行检测。
按照检测试剂的说明书，将样本和试剂按照比例混合并孵育一定时间，然后进行洗涤和显色。
4.结果判断：根据试剂盒的说明书，根据显色反应的强度和比色卡提供的判断标准，判断样本阴阳性。
5.结果记录和报告：将检测结果记录在检验记录中，并生成相应的实验报告，确保结果能够及时准确地传达给临床医生。
三、乙肝检测项目的标准化操作程序：1.标本采集：按照规定的采样方法采集血液标本，包括静脉血和采血盒采集的血液。
2.样本处理：收到标本后，首先检查样本标签和申请单上的信息是否一致，然后进行样本分装和保存，确保样本的完整性和稳定性。
艾滋病梅毒丙肝的检测及解释专业课件PPT
问题： 临床上非梅毒螺旋体抗原血清学试验为什么
.
需要做定性和定量两种检测方法？
非梅毒螺旋体抗原血清学原理
• 方法包括： （1）快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR) （2）甲苯胺红不加热血清试验（TRUST） （3）性病研究实验室试验 (VDRL)等。
• 核酸检测：血浆4天内进行检测的可存放于4℃， 3个月以内应存放于-20℃以下，3个月以上应置 于-70℃以下。
• CD4：室温（18～25℃）保存和运输。要求48 小时内染色，染色后6小时内分析；如采血后24 小时内染色，可在染色后24小时内分析。
.
HIV抗体检测
• 筛查试验 酶联免疫吸附试验（ELISA） 化学发光或免疫荧光试验 快速检测（RT）
• 致病性：自然条件下TP只感染人，尚未证明梅毒 螺旋体能产生内毒素和外毒素，致病机理尚不清 楚。
• 传染性：感染早期传染性最强，随着病程的延长 传染性越来越小。临床上未经治疗的病人，在感 染后1～2年内最具有传染性，一般认为4年以上几 乎不通过性接触传染，但保持对胎儿的传染性。
• 抵抗力：TP在体外仅能存活数小时，40℃时失去 传染力，煮沸立即死亡；对干燥特别敏感，一般 的消毒剂均能容易将其杀. 灭。血库的血液和血浆
复发或再感染的指征。
.
98(9399)
非梅毒螺旋体抗原血清学试验特点
假阳性反应
• 技术性假阳性反应一般是由于操作错误引起的假阳 性反应，经过重复试验即可排除。
• 生物学假阳性反应(一般滴度小于1:8），应采用梅 毒螺旋体抗原血清学试验如TPPA等进行排除。
假阴性反应：前带现象、后带现象 血清固定：临床问题
艾滋丙肝梅毒的临床意义及实验室诊断
机体感染HIV：核酸
P24抗原
IgM、IgA
IgG
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迈克生物HIV检测试剂盒产品特点 1、检测原理
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HIV抗体的免疫学检测方法
➢ 化学发光或免疫荧光试验
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HCV在不同分类中的实验室诊断指标
Anti-HCV 做为筛查指标，结合肝功，若其阳性应高度怀疑为急/慢性丙型肝炎； HCV RNA 做为确诊指标。
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。
Adapted from Mohd Hanafiah et al., 2013
全球每年有35万人死于丙肝。
丙型肝炎疾病病程
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丙型肝炎疾病病程
痊愈 急性丙肝
痊愈 慢性丙肝
死亡 肝硬化
肝癌
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丙型肝炎感染的特点
➢ 丙肝起病隐匿，是容易被忽视的疾病
➢ 一旦感染丙肝，仅20-30%感染者自发清除病毒 ➢ 慢性丙型肝炎患者有70-80%无明显症状 ➢ 隐匿的丙肝患者会成为危险的传染源 ➢ 没有“病毒携带者”，有“毒”就要考虑治疗
➢ 疾病发展越后期，越难治愈
➢ 逐渐发展成肝硬化、肝癌等终末期肝病 ➢ 带来越来越沉重的疾病负担
艾滋丙肝梅毒的临床意义及实验室诊断
迈克生物
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传染性疾病检测
输血和手术前传染性疾病筛查 疑似病例筛查或确诊
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输血前传染性疾病感染国内现状—国内相关研究
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丙型肝炎的实验室分析路径 临床疑似HCV感染取样（多为血液） Anti-HCV筛选试验（CLIA法）
有反应性
无反应性
高S/CO
低S/CO
阴性
HCV确认试验（目前为条带免疫法） 阳性 HCV RNA检测或其基因型分型，以HCV基因型确定治疗方案
第二代
1989
间接法
4-5周
减少细胞蛋白质导致的假阳性，非特异性反应降 低，但只能检测IgG抗体。
第三代
1992
夹心法
13-25天
调整了反应体系，使灵敏度、特异性均在99%以 上，可检测IgG、IgM、IgA等。
第四代
1998
夹心法抗体捕获
6-14天
可检测抗体，同时能检测P24抗原。
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HIV检测结果解释 —— 临床案例 （二）
快筛阳性结果处理要点：
对临床孕妇为防止漏检，应首选高敏感性试剂检测，阴性反应报告HIV抗体阴 性，阳性则用高特异性试剂进行复检，同时继续母婴传播预防用药； 快筛阳性：说明不能排除HIV感染的可能； 要明确HIV感染需确诊，有待省市疾控中心的HIV确认报告，而这需要一个时 间过程； 应告知产时或产后可能存在母婴传播的风险并采取相应措施，如安全助产， 人工喂养等； 解释产后若确认结果排除HIV感染，产时ART对产妇和新生儿不会产生影响； ART：需书面知情同意书，征求产妇意见是否告知其家属； 排除HIV感染后立即停止干预措施，若确认感染，维持后续PMTCT（母婴传 播预防）措施。
艾梅乙检测结果解读PPT课件
艾梅乙检测结果解读PPT课件•引言•艾梅乙检测基础知识•检测结果解读方法•常见误区与注意事项•临床案例分析与讨论•总结与展望引言提高医务人员对艾梅乙检测的认识和重视程度促进艾梅乙检测的规范化和标准化加强艾梅乙检测结果的解读和临床应用目的和背景课件内容概述艾梅乙检测的基本概念和原理艾梅乙检测结果的解读和分析艾梅乙检测的临床意义和应用价值艾梅乙检测的方法和步骤艾梅乙检测基础知识艾梅乙病毒简介艾滋病病毒（HIV）一种攻击人体免疫系统的病毒，导致免疫系统逐渐崩溃，易感染各种疾病。
梅毒螺旋体（TP）引起梅毒的病原体，通过性接触传播，可导致全身性慢性疾病。
乙肝病毒（HBV）引起乙型肝炎的病原体，通过血液、性接触等途径传播，可导致肝炎、肝硬化、肝癌等严重后果。
艾梅乙检测方法及原理艾滋病病毒检测采用酶联免疫吸附试验（ELISA）、化学发光法（CLIA）等方法检测HIV抗体，原理是利用抗原抗体特异性结合的原理来检测样本中是否存在HIV 抗体。
梅毒螺旋体检测采用暗视野显微镜检查、梅毒血清学试验等方法检测TP抗体，原理是通过观察样本中是否存在TP抗体来判断是否感染梅毒。
乙肝病毒检测采用乙肝五项检测、HBV DNA定量检测等方法检测HBV标志物，原理是通过检测样本中是否存在HBV标志物来判断是否感染乙肝病毒。
03乙肝病毒检测样本采集静脉血液样本，使用无菌试管保存，避免溶血和污染。
同时，根据检测项目的要求选择合适的保存条件和时间。
01艾滋病病毒检测样本采集静脉血液样本，使用EDTA 抗凝管保存，避免溶血和污染。
02梅毒螺旋体检测样本采集静脉血液样本或皮损处分泌物，使用无菌容器保存，避免污染和干燥。
样本采集与保存检测结果解读方法检测结果类型及意义抗体检测通过检测血液中特定病原体的抗体来判断是否感染，抗体阳性表示曾经或正在感染。
核酸检测直接检测病原体核酸，确定病原体存在与否，核酸阳性表示正在感染。
不同检测方法的比较抗体检测和核酸检测各有优缺点，需根据具体情况选择合适的检测方法。
最新整理艾滋病、梅毒和丙肝防治知识宣传资料
艾滋病、梅毒和丙肝防治知识一、什么是艾滋病、梅毒和丙肝？艾滋病的医学名称为“获得性免疫缺陷综合征”（AIDS），是一种病死率很高的严重传染病。
是由于感染了“人类免疫缺陷病毒”简称“艾滋病病毒（HIV）”所引起的、具有一系列复杂症状的综合征。
梅毒是人体感染梅毒螺旋体引起的，可引起全身多器官病变。
丙型肝炎简称丙肝，是由丙型肝炎病毒(HCV)引起的一种传染病，该病毒主要在肝细胞中复制，损害肝细胞，引起肝细胞的炎症、变性、坏死。
二、艾滋病、梅毒和丙肝有哪些临床表现？由于艾滋病病毒破坏人体的免疫系统，造成机体免疫力下降，很容易发生各种感染，表现为复杂多样的综合症，常见症状有：长期低热，体重减轻、消瘦、慢性腹泻、全身淋巴结肿大、头晕、头痛等症状。
梅毒根据感染时间的长短和引起人体病变不同，可分为Ⅰ期梅毒、Ⅱ期梅毒和Ⅲ期梅毒，每期临床表现不一样。
丙肝是导致肝硬化、肝癌和肝衰竭的重要原因。
三、艾滋病、梅毒和丙肝传播途径有哪些？艾滋病、梅毒和丙肝的病人和携带者是传染源，传播的途径主要有以下三个：1、血液途径传播：血液传播是感染这三类疾病最主要的传播途径之一。
输入被这些病原体污染的血液，或被血液污染而又未经严格消毒的注射器、针灸针、拨牙等医疗器具，十分危险，感染的可能性很大。
2、性传播途径：无论是同性，还是异性之间的性接触都会导致这三类疾病的传播。
值得一提的是，由于直肠的肠壁较阴道更容易破损，所以有肛交行为的人比阴道性交的人更容易感染染这些疾病。
3、母婴途径传播：如果母亲是艾滋病、梅毒或丙肝的感染者，她在怀孕、分娩、哺乳过程中很有可能传染给他的孩子。
四、以下行为不会传播感染这三类疾病。
1、握手、拥抱、抚摸、礼节性亲吻。
2、一起吃饭、喝饮料以及共用碗筷、杯子。
3、一起使用公共设施，如共用厕所、马桶、游泳池、公共浴池、电话机及乘座公共汽车。
4、一起居住、劳动，共用劳动工具，上同一所学校。
5、咳嗽、打喷嚏、流泪、出汗、撒尿。
梅毒、 艾滋病、乙肝的实验室检测
三期梅毒
. 流行病学：多数有不安全性行为，或性伴感染史，或多性伴史；可有一期或二期梅毒史。病期在2年以上。
. 临床表现：晚期良性梅毒：结节性梅毒疹、马鞍鼻，梅毒性骨关节损坏，眼梅毒，神经梅毒及心血管梅毒。
. 实验室检查：
1、血清检查：
特异性抗体： 阳性
非特异性抗体： 阳性
.
有明确的不安全性行为史，而2年前无不安全性行为史。
.
有过符合一期或二期梅毒的临床表现，但当时未得到诊断和治疗者。
.
性伴有明确的早期梅毒感染史。
晚期隐性梅毒：感染时间在2年以上。无法判断感染时间者亦视为晚期隐性梅毒。既往无明确的梅毒诊
断和治疗史。
临床表现：无任何梅毒性的临床表现。 1、血清检查：
特异性抗体： 阳性 非特异性抗体： 阳性 2、脑脊液检查：一般无明显异常（用于排除无症状神经梅毒）
• 因治疗后血清滴度可下降并阴性，故可作为 疗效观察、判愈、复发或再感染的指征。
二、梅毒螺旋体抗原血清学试验----- 特异性梅毒抗体
. 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 (TPPA) . 梅毒螺旋体血球凝集试验 (TPHA) . 梅毒酶联免疫吸附试验（ELISA） . 化学发光免疫分析法（CLIA） . 梅免疫层析法-梅毒快速检测 (RT) . 荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS） . 梅毒螺旋体蛋白印迹试验（WB）
• 所有HIV感染母亲所生儿童，在出生后6周或3个月未接受EID检测者，应进行 HIV抗体检测。检测时间： • 满12月龄 和 • 满18月龄（必要时，见HIV抗体检测流程）
• 出生后3个月EID检测结果为阴性的儿童也应接受HIV抗体检测
满18月龄HIV抗体检测阳性，可确认儿童HIV感染。
铜梁县门诊男性患者丙肝-艾滋病梅毒检测分析
铜梁县门诊男性患者丙肝\艾滋病及梅毒检测分析【摘要】目的：分析男性患者中丙型肝炎（hcv）、艾滋病病毒（hiv）、梅毒等疾病的感染状况。
为临床治疗及诊断提供数据及相应方法。
方法：对396例患者进行酶联免疫法及胶体金法等临床检测方法进行检测，并对所得结果进行分析。
结果：所收治患者中，丙肝（抗-hcv）共确诊感染2例，阳性率为0.5%。
艾滋病（抗-hiv）共确诊0例，阳性率为0。
梅毒螺旋体感染患者共确诊15例，阳性率为3.8%。
结论：本院皮肤科、泌尿外科门诊收治的男性患者中，主要的流行性疾病为梅毒螺旋体及丙型肝炎。
两者之间并无交叉感染。
【关键词】门诊患者；流行病检测；丙型肝炎；获得性免疫缺陷综合征；梅毒【中图分类号】r521.91【文献标识码】b【文章编号】1008-6455（2011）08-0453-01testing of tongliang male out patients with hepatitis c, hiv and syphilisgao shangxiu【abstract】objective: to analysis the male patients with hepatitis c （hcv）, aids virus （hiv）, syphilis and other diseases of the infection. treatment and diagnosis for clinical data and the corresponding methods. methods: 396patients were elisa and colloidal gold method to detect the clinical detection methods, and results analysis. results: the treated patients, hepatitis c （anti-hcv） infection were diagnosed in 2 cases, the positive rate was 0.5%. aids （anti-hiv） 0 cases were confirmed positive rate of 0. patients with syphilis were diagnosed in 15 cases, the positive rate was 3.8%. conclusion: the hospital dermatology, urology clinic in male patients admitted to the major epidemic diseases of syphilis and hepatitis. no cross-infection between the two.【key words】outpatient; epidemic detection; hepatitis c; acquired immunodeficiency syndrome; syphilis乙肝丙肝及艾滋病梅毒等临床上常见的传染病，易于通过血液等方式传播。
传染病4项报告解读
传染病4项报告解读
传染病四项检查通常是指乙型肝炎病毒表面抗原、丙型肝炎病毒抗体、梅毒螺旋体抗体、艾滋病抗体的结果，一般用R表示。
1、乙型肝炎病毒表面抗原
乙型肝炎病毒表面抗原是乙型肝炎病毒的外壳蛋白，本身不具有传染性，但具有抗原性，可以刺激机体免疫系统产生特异性抗体，也就是乙型肝炎病毒表面抗原。
如果患者乙型肝炎病毒表面抗原阳性，提示感染乙型肝炎病毒，需要进行乙型肝炎病毒DNA检测，如果乙型肝炎病毒DNA检测阳性，则需要进行抗病毒治疗。
2、丙型肝炎病毒抗体
丙型肝炎病毒抗体是感染丙型肝炎病毒的标志，如果丙型肝炎病毒抗体阳性，提示可能感染丙型肝炎病毒，需要进行丙型肝炎病毒RNA检测。
如果丙型肝炎病毒RNA检测阳性，则需要进行抗病毒治疗。
3、梅毒螺旋体抗体
梅毒螺旋体抗体是梅毒的特异性抗体，如果梅毒螺旋体抗体阳性，则提示感染过梅毒或者是正在感染梅毒螺旋体。
4、艾滋病抗体
艾滋病抗体是人类免疫缺陷病毒的刺激免疫产生的一种物质，属于一种保护性抗体，可以保护人体避免感染艾滋病。
如果艾滋病抗体阳性，则提示可能存在艾滋病病毒感染的情况。
5、乙肝五项
乙肝五项检查一般是指乙肝表面抗原、乙肝表面抗体、乙肝E抗原、乙肝E抗体。
如果患者乙肝五项检查中的任何一项出现阳性结果，都提示患者可能感染了乙型肝炎病毒。
患者在进行传染病四项检查时，需要注意保持空腹，避免影响检查结果。
另外，如果患者在检查后出现不适症状，建议及时就医治疗。
(四)艾滋病梅毒丙肝检测及结果意义PPT课件
最新课件
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血清学检测
• 非梅毒螺旋体抗原血清试验
性病研究实验室试验（VDRL）
不加热血清反应素试验（USR）
快速血浆反应素环状卡片试验（RPR、TRUST）
• 梅毒螺旋体抗原血清试验
荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）
梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA）
梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）
• 1 耐药监测
• 用于HIV-1感染人群和抗病毒治疗人群。用于新近感
染人群的耐药性监测，了解耐药毒株流行的情况；用
于治疗前人群的监测，指导制定一线抗病毒治疗方案；
用于抗病毒治疗人群的耐药性监测，进行HIV-1耐药
发生、发展趋势以及影响因素的分析，指导和完善大
规模公共卫生模式抗病毒治疗的程序，以及制定二线
梅毒螺旋体抗体酶联免疫试验（TP-ELISA）
梅毒螺旋体快速诊断试验（TP-RT）
最新课件
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非梅毒螺旋体抗原血清试验
• 以心磷脂、卵磷脂、胆固醇为抗原,检测抗类脂质抗体（反
应素），主要是IgM和IgG混合体。
• 方法简单、快速、价格低廉、敏感性和特异性较好，适用
于大量人群的筛查。
• 治疗后血清滴度可下降并转为阴性，可作为疗效观察、判
• 3 确证方法包括免疫印迹试验（WB）、条带免疫
试验、放射免疫沉淀试验（RIPA）及免疫荧光试
验（IFA）等。
最新课件
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HIV抗体不确定（±）
结合流行病学资料，可以在4周后随访检测，如带
型没有进展或呈阴性反应，则报告阴性；如随访期间
出现阳性反应，则报告阳性；如随访期间带型有进展，
但不满足阳性标准，应继续随访到8周。如带型没有进
艾滋梅毒丙肝检测
1.根据目的选择检测方法及检测策略。 2.可采用任何一类梅毒血清学检测方法作
为筛查试验 3.需具备非梅毒螺旋体血清试验和梅毒螺
旋体血清试验两类血清学检测方法才能 为临床梅毒诊断提供有参考意义的实验 室依据
策略一
采用任何一种非梅毒螺旋体抗原
血清试验对样品进行初筛
策略二
采用任何一种梅毒螺旋体抗原血
清试验对样品进行初筛
二、HIV实验检测存在的问题
1985年以来，HIV检测技术取得了长足的进 展
针对多种检测目标（HIV抗体、HIV-1P24抗 原、HIV-RNA、HIV前病毒DNA）
针对多种检测标本（血清/血浆，唾液、尿液、 干血斑）
使用多种检测模式（ELISA、WB、快速法、 各种核酸扩增方法）
多种检测用途（病原学诊断、检测病程和疗效、 监测病毒变异）
70681
0 2003年 2004年 2005年 2006年 2007年 2008年 2009年
卫生部2009年度全国法定传染病疫情
中国丙肝临床早期筛查亟待加强
丙肝是中国漏报率最高的法定传染病
60% 50% 40% 30% 20% 10%
0%
52%
185/358
丙肝
漏报率
数据源自国内30个省(自治区、直辖市)共250家 医疗机构，采样15501例，有效样本13714例
梅毒血清学检测 新方法、新技术的 应用性评估
梅毒实验室检测技术规范
《梅毒实验室检测技术规范》
起草单位： 中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心
使用范围： 全国所有的梅毒检测实验室
解释权： 中国疾病预防控制中心
实施： 卫生部授权，中国疾病预防控制中心发布实施
全国梅毒检测技术规范
浅谈艾滋病、梅毒及乙肝的检测
浅谈艾滋病、梅毒及乙肝的检测艾滋病、梅毒和乙肝是三种常见的性传播疾病。
艾滋病是一种由人类免疫缺陷病毒（HIV）引起的疾病。
HIV病毒会攻击人体免疫系统，导致免疫力下降，从而让人体无法抵御疾病和感染。
艾滋病可以通过血液、精液、阴道分泌物、乳汁等体液传播。
在性行为、母婴传播、注射毒品、输血等过程中，都有可能传播艾滋病。
目前艾滋病仍然是一种无法治愈的疾病，但是随着现代医学的进步，可以通过抗病毒药物控制病情，让患者维持相对健康的生活。
预防艾滋病的最好方法是使用安全套、避免分享注射器等物品，以及通过定期进行艾滋病检测，及时发现患病情况。
艾滋病病毒会攻击人体免疫系统，导致身体无法对抗其他疾病和感染。
因此，感染艾滋病病毒的人往往会经历各种健康问题，包括但不限于肺炎、结核病、淋巴瘤等。
为了尽早发现和治疗艾滋病，通常需要进行艾滋病的检测。
艾滋病的检测通常有两种方法：抗体检测和核酸检测。
抗体检测是通过检测血液中是否存在艾滋病病毒的抗体来确定是否感染了艾滋病病毒。
核酸检测是通过检测艾滋病病毒的DNA或RNA来确定感染情况。
需要注意的是，艾滋病病毒有一个潜伏期，在这个期间内，检测结果可能会是阴性，但实际上已经感染了病毒。
因此，如果你担心自己感染了艾滋病病毒，最好定期检测，并且采取预防措施，如使用安全套等。
此外，如果确诊患有艾滋病，可以通过药物治疗来控制病情。
现在有很多种药物可以有效地抑制病毒复制，使病情得到控制。
同时，也要注意生活方式的改变，如保持健康的饮食、规律的作息、避免过度劳累等，以提高身体免疫力，预防并发症的发生。
艾滋病检测通常是通过抽血血检来进行的。
目前艾滋病的主要检测手段有以下几种：RNA（核酸检测）：理论上2周可以查出抗体；化学发光：4周可以查出抗体；四代ELISA（酶联法）：基本4周可以查出抗体。
梅毒则是一种由梅毒螺旋体引起的性传播疾病。
其传播方式主要是通过性行为传播，也可通过接触患者的皮肤破损处、母婴传播和血液传播等方式传染。
艾滋病梅毒丙肝检测与解释PPT文档共89页
60、生活的道路一旦选定，就要勇敢地 走到底 ，决不 回头。 ——左
艾滋病梅毒丙肝检测与解释
36、如果我们国家的法律中只有某种 神灵， 而不是 殚精竭 虑将神 灵揉进 宪法， 总体上 来说， 法律就 会更好 。—— 马克·吐 温 37、纲纪废弃之日，便是暴政兴起之 时。— —威·皮 物特
38、若是没有公众舆论的支持，法律 是丝毫 没有力 量的。 ——菲 力普斯 39、一个判例造出另一个判例，它们 迅速累 聚，进 而变成 法律。 ——朱 尼厄斯
40、人类法律，事物有规律，这是不 容忽视 的。— —爱献 生
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 56、书不仅是生活，而且是现在、过 去和未 来文化 生活的 源泉。 ——库 法耶夫 57、生命不可能有两次，但许多人连一 次也不 善于度 过。— —吕凯 特 58、问渠哪得清如许，为有源头活水来 。—— 朱熹 59、我的努力求学没有得到别的好处， 只不过 是愈来 愈发觉 自己的 无知。 ——笛 卡儿
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加样：吸取0.05mL血清(浆)放在卡片圈中， 并均匀地涂布在整个圈内
加抗原：将抗原轻轻摇匀，用9号针头加1滴抗原
反应：水平旋转仪旋转8分钟(23 ℃ -29 ℃） ， 亮光下观察结果
60滴/mL，1滴=17ul
非梅Байду номын сангаас螺旋体抗原血清学试验操作要点
3、定量试验
稀释夜准备：在反应纸板圈内加入50uL生理盐水（根据需要确定圈数),勿将盐水涂开 加样：吸取50uL血清（浆）与各圈中盐水作系列稀释，并涂布整个圈内。 下同定性试验。
非梅毒螺旋体抗原血清学试验临床意义
早期梅毒（一期、二期）经足量规则抗梅毒治疗
后
• 一期梅毒1年后转为阴性
•
•
二期梅毒2年后转为阴性。
晚期梅毒 治疗后血清滴度下降缓慢，2年后
约50%病人血清反应仍为阳性。
非梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义
• 非梅毒螺旋体抗原血清试验方 法简单、快速、敏感性和特异
梅毒 病期 敏感性 (%)
（3）性病研究实验室试验 (VDRL)等。
• 基本成分是心磷脂 卵磷脂和胆固醇
• 抗原抗体结合形成复合物，凝集成网状沉淀颗粒 被肉眼所见 • 上述方法的敏感性和特异性都基本相似
非梅毒螺旋体抗原血清学试验原理示意图
非梅毒螺旋体抗原血清学试验操作要点
1、仪器：水平旋转仪，转速？转 幅？
2、定性试验
•
梅毒螺旋体蛋白印迹试验（WB）
TPPA
• TPPA试验用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒与人血清
中的抗梅毒螺旋体抗体结合，产生可见的凝集反
应，具有较高的敏感性和特异性。
•
TPPA是目前WHO公认的梅毒抗原血清学试验
问题：梅毒螺旋体抗原血清学试验的定量试 验在梅毒诊疗中有意义吗？
梅毒螺旋体抗原血清学试验方法
• • 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 (TPPA)
梅毒螺旋体血球凝集试验 (TPHA)
梅毒酶联免疫吸附试验（ELISA）
化学发光免疫分析法（CLIA）
•
•
•
•
梅毒免疫层析法-梅毒快速检测 (RT)
荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）
加样：吸取0.05mL血清(浆)放在卡片圈中，
并均匀地涂布在整个圈内
加抗原：将抗原轻轻摇匀，用9号针头加1滴抗原 反应：水平旋转仪旋转8分钟(23 ℃ -29 ℃） ， 亮光下观察结果 ？滴/mL，1滴=？ul
非梅毒螺旋体抗原血清学试验操作要点
1、仪器：水平旋转仪，转速、转 幅
100r/min 约18mm 2、定性试验
常用梅毒实验室检测方法
• 病原学检测 • 血清学检测
病原学检查
• 原理：一期、二期梅毒时，取硬下疳、扁
平湿疣、黏膜斑等皮损部位组织液或淋巴结穿
刺术得到的组织液，在暗视野显微镜下，光线 从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而
发出亮光，从而可根据其特殊形态和运动方式
进行检测。 • 方法：（1）暗视显微镜检查
HIV抗体检测
• 筛查试验 酶联免疫吸附试验（ELISA） 化学发光或免疫荧光试验 快速检测（RT） • 确证试验 免疫印迹试验（WB） 条带免疫试验 放射免疫沉淀试验（RIPA） 免疫荧光试验（IFA）
样品
筛查试剂
初筛试验
阳性反应
阴性反应
初筛和复检流程
均阳性反应
原有试剂+另一不同原理 （或厂家）试剂或另外两种 不同原理（或厂家）试剂
复检试验
一阴一阳
均阴性反应
确证试验
图 1 HIV 抗体筛查检测流程
报告阴性
确证流程
质量控制
• 试剂盒内部对照 ：按照试剂盒要求设臵 • 使用室内质控品：外购、阳性对照/样本稀释 • ELISA检测 20次内—即刻法质控 20次后， Levey-Jennings质控图 更换试剂厂家必须重新制作质控图， 同种试剂不同批号可继续使用（注明批号） 发现失控、位移及时查找原因，必要时重新开始质控 • 快速检测 更换批号进行质量验证 注意反应时间、温度、数量控制
实验室生物安全
• 实验室：Ⅱ级生物安全实验室（BSL-2） • 建立安全制度：S-SOP、意外事故处理预案、 信息安全及保密制度 • 培训和管理：全员培训、标准防护原则 • 个人防护：防护用品与设施、健康监护 • 安全操作：样品采集与管理、仪器设备使 用、利器使用 • 消费与污物处理
梅毒实验室检测技术
实验室记录
• 检测登记表 • 试验原始记录（ ELISA、快速、RPR/TURST ） • 报告单/化验单 复检化验单—筛查阳性填写，信息收集完整 • 仪器使用、维护保养记录 • 质控资料 • 消毒记录 • 废弃物处理登记 • 冰箱温度记录 • 人员健康档案（体检、疫苗接种记录，化验单、体检报告）
生物学特性-2
• 反应素：TP破坏机体组织，使组织释放一 种抗原性心磷脂,以及螺旋体自身的磷脂类 物质，可以激发机体产生反应素，能同从 动物如牛心肌中提取的心磷脂发生反应， 通过试验来检测。 反应素水平与梅毒感染过程相平行， 抗梅治疗后约半年转阴，但反应素并非感 染TP后所特有。
生物学特性-3
• 致病性：自然条件下TP只感染人，尚未证明梅毒 螺旋体能产生内毒素和外毒素，致病机理尚不清 楚。 • 传染性：感染早期传染性最强，随着病程的延长 传染性越来越小。临床上未经治疗的病人，在感 染后1～2年内最具有传染性，一般认为4年以上几 乎不通过性接触传染，但保持对胎儿的传染性。 • 抵抗力：TP在体外仅能存活数小时，40℃时失去 传染力，煮沸立即死亡；对干燥特别敏感，一般 的消毒剂均能容易将其杀灭。血库的血液和血浆
抗体）。 • 未经治疗的病人，其血清内的非特异性抗体可长期存 在。经正规治疗后，非特异性抗体可以逐渐减少滴度 至转为阴性。
问题： 临床上非梅毒螺旋体抗原血清学试验为什 么需要做定性和定量两种检测方法？
非梅毒螺旋体抗原血清学原理
• 方法包括： （1）快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR)
（2）甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）
86（77-99）
特异性 (%)
一期 二期 隐性
-
性较好。适用于大量人群的筛
查。
100
98(95-100)
（一般滴度>1:8， 但不排除<1:8）
• 因治疗后血清滴度可下降并阴
复发或再感染的指征。
晚期
73 98(9399)
性，故可作为疗效观察、判愈、 非梅
毒
非梅毒螺旋体抗原血清学试验特点
假阳性反应
问题：定量试验血清稀释需要使用试管吗？
1:4 1:8 1:16
？
1:2
定量试验结果判断 血清稀释度
结果 1:16 ？ 1:2 1:4 1:8
1:32
1:64
1:128
1:256
1:512
+ + +
+ +
+
+
-
？ ？ ？
问题：定量试验原倍血清滴度是多少？
非梅毒螺旋体抗原血清学试验操作要点
3、定量试验
生物学特性-1
• 免疫性：人对TP产生细胞免疫和体液免疫。 细胞免疫对感染过程的影响尚不清楚。 • 特异性抗体：TP可导致人体产生多种抗体。 其中 TP的脂质激发机体产生的特异性抗 体，在初次感染后产生，保持终生，但对 清除机体内的TP无作用。另一些种特异性 抗体可与很多种非致病性螺旋体发生交叉 反应。
• 技术性假阳性反应一般是由于操作错误引起的假阳 性反应，经过重复试验即可排除。 • 生物学假阳性反应(一般滴度小于1:8），应采用梅 毒螺旋体抗原血清学试验如TPPA等进行排除。
假阴性反应：前带现象、后带现象
血清固定：临床问题
梅毒螺旋体抗原血清学试验原理
• 抗原为梅毒螺旋体特异蛋白（包括螺旋 体重组特异抗原），检测梅毒患者血中 特异性抗梅毒螺旋体抗原的抗体。 • 感染梅毒螺旋体后，一旦梅毒螺旋体抗 体试验呈阳性，则患者终身阳性。
（2）镀银染色法
（3）核酸检测（血液标本？） 注：梅毒螺旋体目前体外人工培养还没有获得成功， 仅能通过接种兔睾丸等部位进行有限增殖。
病原学检查的临床意义
• 螺旋体检查是诊断早期梅 毒的最佳方法，对于患者 的早期诊断、及时治疗、 预后和尽早切断传染源都
有十分重要的意义。
• 如未见到梅毒螺旋体，并
不能排除患梅毒的可能性。
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非梅毒螺旋体抗原血清学试验结果判断
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RPR 1:256
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TRUST 1:16
梅毒血清学检测方法
(1) 非梅毒螺旋体抗原血清学试验
（非特异性梅毒抗体）
(2) 梅毒螺旋体抗原血清学试验
（特异性梅毒抗体）两类方法。
问题： 为什么梅毒诊断需要上述两类血清学检测方 法？
非梅毒螺旋体抗原血清学试验原理
• 梅毒螺旋体一旦感染人体，宿主可对螺旋体表面的脂
质作出免疫应答，产生抗类脂抗原的抗体（非特异性
宿
主
• 梅毒螺旋体只感染人类 • 人是梅毒的唯一传染源
传播途径
性接触是主要的传染途径 未经治疗的患者在感染后的1年内最具有传染 性 随着病期的延长，传染性越来越小 到感染后4年，通过性接触一般无传染性 母 婴 传 播 在妊娠7周时，梅毒螺旋体即可通过胎盘传 染（未经治疗者），病期>4年虽已无性传播， 但妊娠时仍可传染给胎儿,病期越长，传染性 越小;