细菌培养基PPT讲稿

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细菌培养基的制备、灭菌及接种、培养技术ppt课件

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目的要求
掌握从环境中分离培养细菌的方法，从而获得若干种细菌纯培养技能。掌握几种接种技术。
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实验材料
无菌培养皿(直径90mm)10套、无菌移液管1mL2
支、10mL1支。
营养琼脂培养基1瓶，活性污泥或土壤或湖水1瓶，无菌稀释水90mL1瓶、9mL5管。其它：接种环、酒精灯、恒温箱。
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c. 第三次蒸煮之后基本无菌，但为了确保无菌仍要放在37℃恒温条件下培养24h，确定无菌才能使用。
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实验程序4
（培养基和玻璃器材的灭菌方法）
过滤除菌法：不能用加热灭菌的液体物质（如维生素、血清），一般可用细菌过滤器进行除菌。
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第二部分细菌纯种分离、培养和接
种技术
目的要求实验材料实验程序
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实验程序2
（培养基的配制方法和步骤） 3. 调pH值：用10％ NaOH调pH至7.6，用精密pH试纸对照。 4. 分装：将培养基分装于5支试管，其余全部倒入250mL锥形瓶中，分别塞上棉塞。注意不要污染棉塞和瓶口。 5. 包扎成捆，挂上标签，注明何种培养基。 6. 灭菌备用：培养基灭菌后必须在37℃下恒温培养24h，确定无菌生长，方可使用。
实验二
细菌培养基的配制、灭菌及接种、培养技术
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第一部分细菌培养基的制备、灭菌
目的要求实验材料实验程序
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目的要求
熟悉玻璃器皿的洗涤和灭菌前的准备。掌握培养基和无菌水的制备方法。掌握高压蒸气灭菌技术。
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实验材料
药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、蒸馏水等。
高压蒸气灭菌锅、烘箱、细菌过滤器、酒精灯。其它：培养皿、试管、移液管、锥形瓶、烧杯、玻璃珠等。

《细菌的培养方法》课件

《细菌的培养方法》PPT 课件
细菌的培养是一项重要的实验技术，本课件将介绍细菌培养的各种方法和技巧，以及培养过程中需要注意的条件和控制。
培养基的选择
培养基的种类和配方
了解不同种类和配方的培养基，选择适合特定细菌的培养基。
不同细菌所需的基本营养成分
掌握不同细菌所需的营养成分，为其提供合适的生长环境。
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接种
学习不同接种方法，将细菌转移到培养基上进行生长。
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培养箱的使用
了解培养箱的操作和使用技巧，提供稳定的培养环境。
常见细菌的培养方法
普通细菌的培养
介绍培养常见细菌的方法和技巧，如大肠杆菌等。
必需营养物细菌的培养
了解必需营养物细菌的培养方法，满足其特殊的营养需求。
厌氧菌的培养
掌握培养厌氧菌的技术，为其提供合适的生长环境。
培养技术
1 纯培养
学习如何进行细菌的纯培养，以获得纯净的细菌培养物进行研究。
2 混合培养
了解混合培养技术，用于培养多种细菌共存的环境。
3 原代培养
学习如何进行原代培养，从样品中分离出单个细菌菌落进行培养。
4 经过子代培养
掌握细菌的连续培养方法，保持菌株的稳定性和可用性。
培养条件的控制
温度
难以培养细菌的培养
解决难以培养细菌的挑战，探索新的培养方法和技术。
语
细菌培养的实际应用
探索细菌培养在科学研究、医学和工业中的实际应用。
细菌培养的限制和进展
讨论细菌培养所面临的限制，并展望未来的发展和创新。
了解细菌对温度的适应性，并控制培养环境的温度以促进生长。
pH值
掌握细菌生长所需的最适pH范围，并调节培养基的酸碱度。

《微生物的培养基》PPT课件

收获何物？收获菌体？收获产物？产物成分含氮如何？
例如枯草芽孢杆菌：
一般培养：肉汤培养基或LB培养基；自然转化：基础培养基；观察芽孢：生孢子培养基；产蛋白酶：以玉米粉、黄豆饼粉为主的产酶培养基；
根据不同的工作目的，微生物不同的营养需要，运用自己丰富的生物化学和微生物学知识来配制最佳的培养基。
凝固剂必须具有的特点：
a. 不被微生物液化、分解和利用 b. 在微生物生长的范围内保持固体状态 c. 凝固点的温度对微生物无害 d. 不因消毒灭菌的高温处理而破坏 e. 配制方便、价格低廉
常用的凝固剂
琼脂（agar）、明胶（gelatin）、海藻酸钠（alginate）、
琼脂是最优良的凝固剂，自1880年代开始用于配制微生物培养基以来，至今经久不衰。
5.鉴别培养基：
用于鉴别某种或某一类微生物的培养基。一般通过加入某些试剂，使某种或某类微生物的菌落发生颜色变化，便于区别。
EMB培养基伊红美蓝------苯胺染料，抑制G+菌低酸下----两种染料结合大肠杆菌分解乳糖产酸
-----菌落深紫色、菌落表面有绿色金属光泽
鉴别培养基也具有选择革兰氏阴性菌的作用。
发酵生产谷氨酸时：碳氮比为4/1时，菌体大量繁殖，谷氨酸积累少；碳氮比为3/1时，菌体繁殖受到抑制，谷氨酸产量则大量增加。
培养基的配制4个原则
3、理化适宜（1）pH （2）渗透压与水活度（3）氧化还原电位
（1） pH
通常培养条件：细菌： pH 7.0~8.0
放线菌：pH 7.5~8.5 酵母菌： pH 3.8~6.0 霉菌：pH 4.0~5.8 藻类： pH 6.0~7.0 原生动物： pH 6.0~8.0
实验室一般培养：普通常用培养基；遗传研究：成分清楚的合成培养基；

细菌的繁殖、代谢、培养、消毒ppt课件

细胞壁、膜有半透性 G+菌 20~25大气压 G-菌 5~6大气压
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渗透压
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第二节细菌的营养与生长繁殖
一、细菌的营养物质

水：营养的吸收与代谢均需水碳源：合成菌体成分，提供能量病原菌主要来源于糖类氮源：合成菌体成分病原菌主要来源于氨基酸、蛋白胨等无机盐：常用元素（K\Na\Ca\Mg\P\S\Fe) 微量元素（Co\Mn|Mo\Zn) 生长因子：生长必需但自身不能合成的物质，如维生素、氨基酸等。

有助于细菌鉴别
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抗生素(Antibiotics)：多粘菌素、杆菌肽
细菌素(Bacteriocins)

抗菌蛋白，只能杀伤有亲缘关系的细菌，无治疗意义，用于细菌分型、流行病学调查。
大肠杆菌产生大肠菌素(Colicin)

维生素

某些肠道菌合成，如B族维生素、VK。
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第一节细菌的理化性状
一、细菌的化学组成
水占细胞总重量75%-90%
有机物碳、氢、氮、氧、磷、硫等
无机离子钾、钠、铁、镁、钙、氯等特有成分
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肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸等
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二、细菌的物理性状
光学性质表面积带电现象半透性半透明体积小、表面积大 G+菌 pI 2~3 G-菌 pI 4~5 中性环境带负电荷
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四、影响细菌生长的因素

营养物质充足氢离子浓度(pH)
多数病原菌最适pH为7.2～7.6

温度
多数病原菌最适37℃

生物菌种培养ppt课件

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培养基的选择
细菌一般用营养琼脂培养基，特别指
出的是生孢梭菌用硫乙醇酸盐流体培养基加琼脂制成的培养基进行传代。真菌一般用改良马丁培养基。
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菌种的传代
菌种的复苏
菌种的确认菌种的接种
菌种的保藏
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菌种的复苏
《中国药典》2005版规定，所用标准菌种的传代次数不得超过5代。从菌种保藏中心获得的冷冻干燥的菌种为第0代，冷冻干燥的原始菌种开启后转种后为第1代，直至到第3代为工作菌种。
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二. 穿刺接种法：用接种针取细菌少许，从培养基的中央垂直刺入，接近管底但不接触管底，然后接种针沿穿刺线原路退出。主要用于生孢梭菌的传代。三.液体接种法：用接种针取菌少许，在试管内壁与液面交界处的管壁上轻轻研磨，使菌混合于培养液中。
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黑曲霉接种方法：
黑曲霉孢子悬液，可以保存在4℃环境，并应在一个月内尽快完成转种操作。转种操作应在超净工作台（或相当此环境）中进行，关闭风机，靠近酒精灯，拧开瓶盖，用无菌吸管吹吸管内液体，取1～2滴滴在改良马丁琼脂斜面，用吸管涂布均匀，置23～28℃培养5～7日，培养斜面形态可参照下图。
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铜绿假单胞菌
形态特征：G-杆菌、直或微弯、较细长、散在排列、无芽胞、有荚膜、单端有1～3根鞭毛。培养特性：专性需氧，最适温度为35℃，但在42 ℃生长是铜绿假单胞菌的一个特点。营养无特殊要求，普通培养基上均能生长，菌落大小不一，扁平湿润，边缘不齐，可产生各种水溶性色素，故使培养基变为蓝绿色。在营养肉汤培养基中呈均匀混浊生长，常在其表面形成菌膜。分离培养：十六烷三甲基溴化铵培养基生化反应：氧化酶试验（＋）（培养物呈粉红色渐变为紫红色）绿脓菌素试验（＋）（盐酸溶液呈粉红色）

培养基的制备及消毒与灭菌ppt实用资料

《基础生物学实验》精品课程
• 在使用高压蒸气灭菌锅灭菌时，灭菌锅内冷空气的排除是否完全极为重要，因为空气的膨胀压大于水蒸气的膨胀压，所以，当水蒸气中含有空气时，在同一压力下，含空气蒸气的温度低于饱和蒸气的温度。
《基础生物学实验》精品课程
不能灭菌的物质：
• 硝化丙烷、硝化甘油、硝化纤维，含氮硅酯。 • 三硝基苯、三硝基甲苯、苦味酸、和其它爆炸性
《基础生物学实验》精品课程
牛肉膏蛋白胨培养基的制备
❖ 牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基；
❖ 牛肉膏为微生物提供碳源、能源、磷酸盐和维生素；
❖ 蛋白胨主要提供氮源和维生素； ❖ NaCl提供无机盐； ❖ 在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝
固剂； ❖ 用稀酸稀碱将其pH调至中性或微碱性。
• 要检查压力表上的指数为“0Mpa”后才能打开锅盖。
• 外来物质（金属、液体）不能堵塞通风孔，否则会引起装置故障、起火、短路。
《基础生物学实验》精品课程
一般培养基用0.1Mpa，121.5℃,15～ 30min可达到彻底灭菌的目的。灭菌的温度及维持的时间随灭菌物品的性质和容量等具体情况而有所改变。例如含糖培养基用 0.06Mpa,112.6℃灭菌，然后以无菌操作手续加入灭菌的糖溶液。又如盛于试管内的培养基以0.1Mpa,121.5℃灭菌20min即可，而盛于大瓶内的培养基最好以0.1Mpa， 122℃灭菌30min。
《基础生物学实验》精品课程
半合成培养基
❖ 在以天然有机物作为微生物营养来源的同时，适当补充一些成分已知的化学药品所配制的培养基叫半合成培养基。大多数微生物都能在此种培养基上生长，应用广泛。
《基础生物学实验》精品课程

培养基灭菌的目的和要求课件

PART 02
培养基灭菌的方法
高压பைடு நூலகம்汽灭菌法
高效、广泛应用注意事项
高压蒸汽灭菌法是一种常用的培养基灭菌方法，利用高温高压蒸汽杀灭培养基中的微生物。由于其高效、操作简便且灭菌效果可靠，被广泛应用于实验室和工业生产中。
使用高压蒸汽灭菌法时，需注意温度和压力的控制，以确保达到最佳的灭菌效果。同时，要确保培养基的密封性，以防蒸汽进入培养基中影响其成分。
过滤除菌法
01
适用于液体培养基
02
03
过滤除菌法是通过过滤介质去除培养基中的微生物，适用于液体培养基的灭菌。过滤介质能够阻挡微生物通过，从而达到除菌目的。
注意事项
04
过滤除菌法的关键在于选择合适的过滤介质和确保过滤前的培养基充分混匀，以保证过滤效果。此外，对于一些较大颗粒的物质，可能需要预处理以避免堵塞过滤器。
灭菌压力的要求
压力控制
灭菌压力必须达到规定的要求，以确保微生物的完全杀灭。不同的灭菌方法所需的压力不同，常见的灭菌压力范围在1-2个大气
压之间。
压力均匀性
在灭菌过程中，培养基内的压力必须均匀，以避免部分微生物逃
脱灭菌过程。
压力稳定性
灭菌压力应保持稳定，以避免因压力波动而影响灭菌效果。
PART 04
应定期更换灭菌设备的配件，如密封圈、过滤器等，以确保其正常运转和灭菌效果。
THANKS
感谢观看
避免过度加热
过度加热会导致培养基成分发生变化，影响其质量和实验效果。
避免干燥
在灭菌过程中，应保持培养基湿润，避免干燥，以免影响其质量和实验效果。
注意对灭菌设备的维护和保养
定期检查

《细菌分离培养》课件

在工业领域的应用
食品工业
在食品工业中，细菌分离培养用于检测食品中的病原菌，保障食
品安全。
生物能源
利用细菌发酵产生生物燃料，如乙醇、生物柴油等，替代化石燃料。
生物降解
某些细菌能够降解污染物，对环境保护和治理具有重要意义。
06
展与未来发展方向
新技术的开发与应用
基因编辑技术
人工智能与机器学习
《细菌分离培养》 PPT课件
• 细菌分离培养概述 • 细菌分离技术 • 细菌培养技术 • 细菌的鉴定与分类 • 细菌分离培养的应用 • 展望与未来发展方向
目录
01
细菌分离培养概述
细菌分离培养的定义
细菌分离培养是指从混合菌群中分离出单一菌种的过程，通过选择性培养基和特定的培养条件，使目的菌种得以繁殖并从其他微生物中分离出来。
高了分离效率。
03
细菌培养技术
培养基的种类与制备
固体培养基
用于细菌分离和纯化，制备时需添加琼脂作为
凝固剂。
液体培养基
用于大量繁殖细菌，制备相对简单。
选择性培养基
加入特定成分抑制某些细菌生长，突出所需分
离的细菌。
鉴别培养基
根据细菌代谢产物不同，通过指示剂变化鉴别
不同细菌。
培养方法
01
02
05
04
菌种分离
将样品中的微生物接种到选择好的培养基上，通过培养得到单一菌落。
02
细菌分离技术
划线分离法
总结词
通过在固体培养基上划线，使细菌分散生长的方法。
详细描述
划线分离法是最早的细菌分离技术之一，通过在固体培养基表面划线，使细菌在划线区域内生长繁殖，形成单个菌落。该方法适用于细菌的纯培养分离。

实验5细菌培养基的制作ppt课件

3、培养基的其它成分：凝固剂、抑制剂、指示剂
4、培养基的种类和用途
（1）按用途分类：
基础培养基：培养营养要求不高的细菌，如普通平板营养培养基：能满足营养需求较高细菌的生长，如血平板鉴别培养基：含有某些特定的底物，用于鉴别细菌，如克
氏双糖培养基（KIA）选择培养基：具有选择性抑制作用，用于选择性的培养目
细菌污染的器材：消毒灭菌后再洗刷 ★盛培养基试管和平皿：高压灭菌→趁热倒出→洗涤剂洗刷→清水冲洗； ★吸管：3％来苏浸泡→清水冲洗； ★玻片和盖玻片：3％来苏和清洁液浸泡→清水冲洗；染色后的玻片，应肥皂水煮沸10min再洗涤； ★含油脂的器皿：单独灭菌。
玻璃器皿灭菌前的准备
玻璃器皿在清洗、干燥后必须经正确的包裹和加塞后才能进行灭菌处理。
用途：
1、适用于玻璃器皿、粉剂等的灭
菌；温度160~170℃，时间2h。 2、用作烘干。高压蒸汽灭菌后的某些物品如平
板的烘干温度 60 ℃
超净工作台
（四）实验方法
1、常用玻璃器材的准备
玻璃器材的清洗 ★新购置的玻璃器材：1％～2％盐酸浸泡→清水清洗 ★用过的无污染器皿：洗涤剂洗刷→清水清洗
实验五培养基的制作
（一）实验目的要求
1、掌握培养基的制作程序； 2、熟悉常用培养基的种类及用途； 3、掌握培养基的消毒灭菌技术。
（二）培养基的成分、种类和用途
1、培养基的概念：是指人工配制的适合细菌生长繁殖的综合营养基质。
2、培养基的营养物质：蛋白胨、肉浸液、牛肉膏、糖醇类、血液、鸡蛋和动物血清、生长因子、无机盐类、水
程序：
称量;熔化;分装(试管);灭菌;保存
2.半固体培养基：在肉汤中加入0.2%～ 0.5%的琼脂即成。25ml肉汤中0.1g琼脂粉。